Glyukolipidlar almashinuvi buzilishlarini davolash uchun sistanxga asoslangan formulaga mexanik tushunchalar: ko'p omik va eksperimental tadqiqot

4. Natijalar

4.1 Bir-biriga mos keladigan maqsadlarni aniqlashCistanche formulasiva glyukolipid almashinuvining buzilishi

Barmoq izi profiliga asoslanganCistanche asosidagi formula, biz uning asosiy faol komponentlarining maqsadlarini bashorat qildik-mangiferin, koptisin, jatrorizin, salvianolik kislota B, aloin, berberin, palmatin va lovastatin- so'rov orqaliCTDvaSwissTarget Predictionma'lumotlar bazalari. Dublikatlarni olib tashlaganingizdan so'ng, jami958 ta maqsadaniqlandi. Ayni paytda,1962 genlariglyukolipidlar almashinuvining buzilishi bilan bog'liq bo'lganlar olindiGenekartalarma'lumotlar bazasi. FoydalanishVenn diagrammasidasturiy ta'minot, biz aniqladik341 ta bir-biriga mos keladigan maqsado'simlik formulasi va kasallik bilan bog'liq genlar o'rtasida (2A-rasm). Keyinchalik ushbu maqsadlar va ularning tegishli faol komponentlari import qilindiCytoscapekomponent-maqsadli o'zaro ta'sir tarmog'ini qurish (2B-rasm), bu faol birikmalar va maqsadlar o'rtasidagi kuchli o'zaro ta'sirlarni aniqladi.

Glyukolipidlar almashinuvining buzilishi uchun akteozid

 

cistanche foydalari haqida ko'proq bilib oling

 

 

Shakl. 2 JTTZF tomonidan glikolipidlar almashinuvi buzilishini yaxshilash uchun potentsial maqsadlarni skrining

JTTZF va glikolipidlar almashinuvi buzilishining bir-biriga mos keladigan maqsadlari . 3 PPI tarmoq tahlili

 

4.2 Bir-biriga o'xshash maqsadlarning PPI tarmoq tahlili

341 ta bir-biriga o'xshash maqsadlar import qilindiSTRINGqurish uchun ma'lumotlar bazasi aoqsil-oqsil o'zaro ta'siri (PPI) tarmog'iCytoscape yordamida (3-rasm). Eng yuqori darajadagi qiymatlarga ega bo'lgan 10 ta asosiy genlar aniqlandi:TNF (43), AKT1 (39), TP53 (44), IL-6 (42), NF-kB1 (30), ESR1 (31), EGFR (31), FN1 (29), CTNNB1 (28) va IL-1 (28). Bular Cistanche formulasi glyukolipidlar almashinuvining buzilishiga terapevtik ta'sir ko'rsatishi mumkin bo'lgan asosiy maqsadlar hisoblanadi.

Shakl. 4 GO va KEGG yoʻllarini boyitish tahlili

 

4.3 GO va KEGG yo'lini boyitish tahlili

Potentsial maqsadlarning biologik rollarini tushuntirish uchun biz bajardikBOSHvaKEGGboyitish tahlillari. GO natijalari biologik jarayonlar asosan boyitilganligini ko'rsatdisignal uzatishvatranskripsiyani tartibga solish(masalan, "RNK polimeraza II promotoridan transkripsiyaning ijobiy regulyatsiyasi", "gen ekspressiyasining ijobiy regulyatsiyasi"). Asosiy uyali komponentlar o'z ichiga oladiplazma membranasi, hujayradan tashqari ekzosoma, vaendoplazmatik retikulum. Molekulyar funktsiyalarni o'z ichiga oladioqsillarni bog'lash, bir xil protein bog'lanishi, vaATP bilan bog'lanish(4A-rasm).

KEGG tahlili shuni ko'rsatdiki, nomzodning maqsadlari, shu jumladan, yo'llar bilan boyitilgansaraton yo'llari, lipidlar va ateroskleroz, PI3K-AKT, vaMAPK signalizatsiya yo'llari(4B-rasm), bu yo'llar glyukolipid metabolizmini yaxshilashda formula mexanizmining asosini tashkil qilishi mumkin.

Glyukolipidlar almashinuvining buzilishi uchun akteozid

 

4.4 Dori-komponent-Hub maqsad-yo'l tarmog'ini qurish

xaritasini tuzdikfaol moddalar, asosiy maqsadlar, vaKEGG bilan boyitilgan eng yaxshi 20 ta yo'lkeng qamrovli yaratish uchun Cytoscape ichiga "dori – komponent – ​​maqsad – yo‘l" tarmoq (5-rasm). Tarmoq turli komponentlar turli maqsadlarda harakat qilishini va individual maqsadlarga bir nechta birikmalar ta'sirini ko'rsatishi mumkinligini ko'rsatdi. Bu maqsadlar turli biologik jarayonlarda va signalizatsiya yo'llarida ishtirok etadi, bu esa ularni aks ettiradi.ko'p komponentli, ko'p maqsadli va ko'p yo'lCistanche kabi an'anaviy xitoy tibbiyotining xususiyatlari.

 

Shakl. 5 JTTZF-faol ingredientlar-hub maqsadlari-yoʻllarining tarmoq diagrammasi

Glyukolipidlar almashinuvining buzilishi uchun akteozid

 

2-jadval. Asosiy komponentlar va asosiy maqsadlar AKT1, FN1 va IL-6 molekulyar o'rnatish ma'lumotlari

4.5 Molekulyar ulanishni tekshirish

Molekulyar docking faol komponentlar va asosiy maqsadlar o'rtasidagi bog'lanish yaqinligini baholash uchun ishlatilgan. Odatda, bir bog'lanish energiyasi kamroq−4,25 kkal/molpotentsial shovqinni ko'rsatadi; dan kichik; .. dan kamroq−5,0 kkal/molyaxshi bog'lashni taklif qiladi; va kamroq−7,0 kkal/molkuchli bog'lanish yaqinligini ko'rsatadi.

Docking natijalari shuni ko'rsatdiAKT1, FN1 va IL-6barcha 8 ta faol birikmalar bilan kuchli bog'lanishga ega edi (2-jadval). Ayniqsa,salvianolik kislota B-AKT1 (-9,328 kkal/mol), salvianolik kislota B-FN1 (-8,626), mangiferin-AKT1 (-8,366), aloin-AKT1 (-8,317), koptizin-AKT1 (-8,117), valovastatin-AKT1 (-8,113)barqaror bog'lanishni nazarda tutuvchi eng kuchli o'zaro ta'sirlarni ko'rsatdi (6-rasm).

 

Shakl. 6 Yadro smolalari orasidagi molekulyar bog'lanish natijalari

oladi va asosiy ingredientlar [eng past yaqinlikdagi oltita natija (-8 dan kam)]

Shakl. 7 Molekulyar dinamikani simulyatsiya qilish natijalari

4.6 Molekulyar dinamikani simulyatsiya qilish

Eng kuchli bog'lanishga ega bo'lgan oltita ligand-retseptor komplekslari ta'sir ko'rsatdimolekulyar dinamikani simulyatsiya qilish. TheRMSDning egri chiziqlarilovastatin-AKT1, koptizin - AKT1, vasalvianolik kislota B-AKT1komplekslar 0-10 ns davomida nisbatan barqaror bo'lib qoldi va ularningRMSFqiymatlar past edi, bu docking komplekslarining yaxshi tizimli barqarorligini ko'rsatadi (7-rasm).

4.7 In Vivo Eksperimental Validatsiya

A glyukolipid metabolik buzilishining sichqoncha modelitashkil etildi. Cistanche formulasi bilan davolangandan so'ng, ochlikdagi glyukoza darajasi model guruhiga nisbatan sezilarli darajada kamaydi (P <0,01). 14 haftalik davolanishdan so'ngOg'iz orqali glyukoza bardoshlik testi (OGTT)shuningdek, yaxshilangan glyukoza bardoshliligini ko'rsatdi (P <0,01). Bundan tashqari,tana vaznivatriglitseridlar darajasisezilarli darajada kamaydi (P <0,01) (8-rasm).

Shakl. 8 JTTZF glikolipidlar almashinuvi buzilgan sichqonlarda qon glyukoza va qon lipidlarini yaxshilaydi. Ma'lumotlar 6 haftalik modelni yaratishning boshida va oxirida va 8 haftalik aralashuv davomida to'plangan.

 

Shakl. 9 JTTZF ning lipid va aterosklerotik yoʻlga taʼsiri

 

Shakl. 10 JTTZF ning glikolipid metabolizmi buzilgan sichqonlarning jigarlarida CTNNB1, ESR1, FN1 va EGFR darajalariga ta'siri

Shakl. 11 JTTZF ning glikolipidlar almashinuvi buzilishini yaxshilashda ta'sir qilish mexanizmi

 

Tartibga solish mexanizmlarini o'rganish uchun biz asosiy genlarning ifodasini ko'rib chiqdiklipid va ateroskleroz yo'li. mRNK darajalariNF-kB1, IL-1 , IL-6, TNF, TP53, vaAKT1sezilarli darajada pasaytirildi (P <0,05). Akt va NF-kB p65 fosforillanishijigarda oqsil darajasi bilan birga ham kamaydiIL-1 , IL-6, TNF-, vap53 (P <0,05) (9-rasm).

Keyinchalik,qRT-PCRvaG'arbiy dog'tahlil shuni ko‘rsatdikiFN1vaEGFRsezilarli darajada pastga tartibga solindi, esaCTNNB1vaESR1davolash qilingan sichqonlarning jigar to'qimalarida sezilarli darajada ko'tarilgan (P <0,05) (10-rasm).

5. Munozara

Turmush tarzi o'zgarishi va aholining qarishi tufayli glyukolipidlar almashinuvining buzilishi juda keng tarqalgan, ammo yomon boshqariladi. Patogenez o'z ichiga oladineyroendokrin nomutanosiblik, insulin qarshiligi, oksidlovchi stress, yallig'lanish, vaichak mikroflorasining disbiyozi. Hozirgi davolash usullari ko'pincha bitta mexanizm yoki kasallikka qaratilgan bo'lib, suboptimal natijalarga olib keladi.

Vaholankimetforminbirinchi darajali diabetga qarshi dori bo'lib qolmoqda, uning oshqozon-ichak traktining yon ta'siridan foydalanishni cheklaydi. TheCistanche asosidagi formula, dislipidemiya va oshqozon-ichak issiqlik sindromi bo'lgan T2DM bemorlar uchun mo'ljallangan,ko'p komponentli, ko'p maqsadli va ko'p funktsiyalian'anaviy tibbiyotning afzalliklari. Oldingi tadqiqotlar shuni ko'rsatadiki, u og'irlik, BMI, bel atrofi va lipid darajasini yaxshilagan holda metformin bilan solishtiradigan glyukemik nazoratga erishadi.

Ushbu afzalliklarga qaramay, uning ta'sir qilish mexanizmi noaniq bo'lib qolmoqda. Bizning tadqiqotimiz ishlatilgantarmoq farmakologiyasi, molekulyar docking, molekulyar dinamika va hayvonlarni tekshirishuning terapevtik imkoniyatlarini o'rganish.

Biz aniqladikTNF, CTNNB1, AKT1, NF-kB1, ESR1, FN1, TP53, IL-1 , IL-6, vaEGFRmarkaz maqsadlari sifatida. Ular yallig'lanish, insulin qarshiligi, adipogenez, ateroskleroz va glyukoza gomeostazi bilan kuchli bog'liqdir.

NF-kB1yallig'lanishdan kelib chiqqan insulin qarshiligiga vositachilik qiladi.

IL-1 , IL-6, TNF-blyashka shakllanishi va qon tomirlarining asoratlarini rag'batlantirish.

CTNNB1 (-katenin)Wnt signalizatsiyasida ishtirok etadi va adipogenezni inhibe qiladi.

AKT1energiya almashinuvini tartibga soladi va dietadan kelib chiqqan semirishdan himoya qiladi.

ESR1glyukoza gomeostazini yaxshilaydi; uning etishmovchiligi semizlikka va IRga olib keladi.

FN1erta ateroskleroz va qon tomirlarining kalsifikatsiyasiga hissa qo'shadi.

TP53lipidlar almashinuvida ishtirok etadi va yallig'lanish va IRni qo'zg'atishi mumkin.

EGFRfaollashtirish insulin va adiponektin sekretsiyasini buzadi.

GO va KEGG boyitishlari asosiy maqsadlar ishtirok etishini tasdiqladisignal uzatish, transkripsiyani tartibga solish, PI3K-AKT, MAPK, valipid va ateroskleroz yo'llari- barcha markaziy glyukolipidlar almashinuvining buzilishi.

Qizig'i shundaki,saraton bilan bog'liq yo'llartufayli ham paydo bo'lganko'p maqsadli tabiatan'anaviy birikmalar yoki mavjudligisaratonga qarshi komponentlarkabimangiferin.

Docking va simulyatsiya o'rtasidagi kuchli o'zaro ta'sirlarni tasdiqladisalvianolik kislota B, koptisin, vaAKT1, uning asosiy rolini taklif qiladi. Hayvonlarda o'tkazilgan tajribalar formulaning asosiy yo'llar va maqsadlarni modulyatsiya qilish orqali qon glyukozasini, lipid darajasini va yallig'lanish belgilarini yaxshilash qobiliyatini tasdiqladi.

 

6. Xulosa

Integratsiyalashgan yondashuvdan foydalanishtarmoq farmakologiyasi, molekulyar docking, molekulyar dinamika va in vivo tajribalar, bu tadqiqot mexanizmlarini aniqlab berdiCistanche asosidagi formulayaxshilaydiglyukolipidlar almashinuvining buzilishi. Formula orqali harakat qiladiko'p komponentli, ko'p maqsadli va ko'p yo'lbirinchi navbatda o'z ichiga olgan strategiyalarAKT1, FN1, EGFR, CTNNB1, vaESR1.

Uning modulyatsiyasilipidlar va ateroskleroz, PI3K-AKT, vaMAPKyo'llar glisemik nazoratga, lipidlarni tartibga solishga va qon tomirlarini himoya qilishga yordam beradi. Ushbu topilmalar uning klinik qo'llanilishi va glyukolipid almashinuvining buzilishi va ular bilan bog'liq asoratlarni boshqarishda kelajakdagi rivojlanishi uchun nazariy asos bo'lib xizmat qiladi.