Cistanche Deserticolaning umumiy glikozidlarini birlamchi madaniy sichqon jigar hujayralarida alkogolli shikastlanishdan himoya qilish mexanizmini o'rganish
Jun 04, 2025
Maqsad:
Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlarining birlamchi ekilgan gepatotsitlarga himoya ta'sirini o'rganish. Usullari: Birlamchi gepatotsitlar in situ perfuziya usuli bilan to'plangan va Cistanche deserticola umumiy glikozidlarining alkogol bilan shikastlangan birlamchi kulturali gepatotsitlarning omon qolish darajasiga ta'siri MTT usuli bilan baholangan; Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlarining alkogol bilan shikastlangan birlamchi madaniy gepatotsitlar va yadrolarning morfologiyasiga ta'siri floresan mikroskopiya bilan baholandi; Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlarining alkogol bilan shikastlangan birlamchi kulturali gepatotsitlar apoptoziga ta'siri oqim sitometriyasi orqali aniqlandi; Immunotsitokimyoviy binoni Cistanche deserticola umumiy glikozidlarining bcl-2 va c-fos ifodasiga ta'sirini aniqlash uchun ishlatilgan. Natijalar: Spirtli ichimliklar shikastlanishidan so'ng, birlamchi gepatotsitlarning omon qolish darajasi pasayib, apoptoz va nekrozda aniq o'zgarishlar bo'ldi. Apoptozni inhibe qiluvchi bcl-2 genining ifodasi kamaydi va apoptozni rag'batlantiruvchi gen c-fosning ifodasi oshdi. Cistanche deserticola ning umumiy glikozidlari hujayraning omon qolish darajasini sezilarli darajada yaxshilashi, apoptoz va nekrozni yaxshilashi, bcl-2 ifodasini kuchaytirishi va c-fos ifodasini inhibe qilishi mumkin. Ta'sir dozaga bog'liq edi. Xulosa: Cistanche deserticola glikozidlari apoptozni inhibe qiluvchi gen bcl-2 ekspressiyasini oshirish, apoptozni rag'batlantiruvchi c-fos genini ifodalashni kamaytirish, apoptoz va nekrozni kamaytirish va hujayra omon qolish darajasini oshirish orqali birlamchi madaniy gepatotsitlarni himoya qilishi mumkin.
Kalit so'zlar: Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlari; Birlamchi madaniyat; Gepatotsit; Alkogolli jigar shikastlanishi; Apoptoz
Cistanche ekstrakti kukuni
So'nggi yillarda odamlarning turmush darajasining yaxshilanishi bilan spirtli ichimliklarni iste'mol qilish tez sur'atlar bilan o'sib bormoqda, spirtli ichimliklar bilan bog'liq turli kasalliklarning ko'payishi va alkogolli jigar shikastlanishi muhim muammolardan biridir. Tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, Cistanche deserticola immunitet funktsiyasini kuchaytirish, qarishga qarshi, radiatsiyaga qarshi, oksidlanishga qarshi, lipid peroksidatsiyasiga qarshi va alkogolli jigar shikastlanishiga qarshi himoya ta'siriga ega [1]. Glikozidlar Cistanche deserticolaning asosiy faol moddalaridir.Oldingi tajribalarda Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlari erkin radikallar ishlab chiqarishni kamaytirishi, erkin radikallar va ularning metabolitlarini tozalash qobiliyatini oshirishi, shu bilan lipid peroksidlanishini inhibe qilishi va alkogolli jigar shikastlanishida himoya rolini o'ynashi hayvonlar tajribalari bilan tasdiqlangan.[2]. Ushbu tajriba gepatotsitlarning birlamchi madaniyati orqali hujayra darajasida Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlarining alkogolli jigar shikastlanishiga himoya ta'sirini o'rganadi.
1. Materiallar va usullar
1.1 Reaktiv va asbob Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlari, Lanzhou universiteti farmatsiya fakulteti tomonidan taqdim etilgan to'q jigarrang kukun, fenil etanolning umumiy glikozidlarining 88,6% ni o'z ichiga oladi. Ikki marta distillangan suvda eritiladi va kultura eritmasini kerakli konsentratsiyaga suyultiriladi. Ferment marker (Bekman Koulter AD340), floresan mikroskop (Olympus, BX51), teskari fazali kontrast mikroskop (Leica DMI3000B), oqim sitometriyasi (Bekman kolter hujayrasi, CellLabQuanta SC) va boshqalar.
Cistanche kukuni
Cistanche deserticola jigarni himoya qiluvchi mahsulotlarni ko'rish uchun shu yerni bosing
【Batafsil ma'lumot so'rang】 Elektron pochta: xue122522@foxmail.com / WhatsApp: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
1.2 Birlamchi gepatotsitlar ajratib olingan va in situ perfuziya usuli bilan ekilgan [3].
Bitta Kunming sichqonchasi 0,5% pentobarbital 0,5 ml intraperitoneal in'ektsiya bilan behushlik qildi. Terini muntazam ravishda dezinfeksiya qilgandan so'ng, qorinni oching, oshqozon-ichak traktini chapga siljiting, darvoza venasini oching, infuzion qurilmaning infuzion ignasini darvoza venasining uzoq chetidan ehtiyotkorlik bilan teshing va uni bog'lang va mahkamlang. Infuzion oqimini maksimal darajaga (taxminan 4 ml/min) aylantiring va 37 daraja oldindan qizdirilgan kaltsiysiz preperfuziya eritmasini tushiring. Jigar shishib ketganda, pastki kavak venaning distal uchini tezda kesib oling va pastki kavak venaning proksimal uchini vaqti-vaqti bilan siqib qo'ying, shunda jigar navbatma-navbat orqaga tortiladi va kengayadi. Qonning qoldiqlari yuvilganda va jigar bir xilda sariq va oq rangga ega bo'lsa, ovqat hazm qilish perfuziyasi uchun 0,05% kollagenaza (Sigma) perfuzion eritmasi ishlatiladi. Jigar yumshoq va elastik bo'lmaganda ovqat hazm qilish to'xtaydi, jigar kapsulasi ostida kichik vakuolalar paydo bo'ladi yoki hatto jigar to'qimalarida yoriqlar paydo bo'ladi. Jigarni ehtiyotkorlik bilan ajratib oling, uni kerakli miqdorda DMEM yuqori shakarli madaniyat muhiti (Sigma) o'z ichiga olgan steril plastinkaga o'tkazing, jigar konvertini tozalang va muloyimlik bilan silkiting, so'ngra gepatotsitlarni madaniy muhitga tarqating, ularni konus shaklidagi naychaga to'plang, silkiting va 10 daqiqa davomida (tebranish chastotasi / min 130, min.) 1000r/min) va supernatantni to'kib tashlang. Hujayralar madaniy muhit bilan to'xtatildi, 200 ko'zli neylon to'r bilan filtrlandi va filtrat jigar parenximasi hujayralarini olish uchun 3 marta (4 daraja, 1000 r / min) qayta santrifüj qilindi. Hujayra konsentratsiyasini 5 × 106 hujayra/ml ga sozlang, ularni kalamush dumi kollagen bilan oldindan ishlangan 25 ml kulturaga seping va keyin ularni 37 daraja, 5% CO2 inkubatorida inkubatsiya qiling. 24 soatdan keyin eritmani o'zgartiring, yopishmaydigan hujayralarni tashlang va keyingi tajribalarda foydalanish uchun madaniyatni davom ettiring.
1.3 Birlamchi yetishtirilgan sichqon gepatotsitlarining o'sish egri chizig'ini aniqlash
Tozalangan gepatotsitlarni 5 × 106 hujayra / ml ga sozlang, ularni 24 quduqli plastinkada emlang va har bir quduqda 1 ml hujayra suspenziyasi emildi. Jami 21 ta quduq emlandi va 7 kun davomida 10% xomilalik sigir zardobini (Sigma) o'z ichiga olgan yuqori shakarli DMEM madaniyat muhiti ekildi. Har kuni tasodifiy 3 ta teshik oling, 0,25% tripsinni hazm qiling va teng ravishda puflang, hisoblash taxtasida hisoblang va o'sish egri chizig'ini chizing.
1.4 Alkogolli gepatotsitlar shikastlanishi modelini yaratish.
Yuqoridagi usul bilan olingan logarifmik gepatotsitlar kalamush dumi kollagen bilan oldindan ishlangan 96-quduqli plastinkaga emlandi va har bir quduqqa 50 mkL dan 100 ta hujayra emlandi. 10% homila sigir zardobiga ega DMEM madaniyat muhiti 24 soat davomida ekilgan va keyin yana 24 soatga almashtirilgan. Bo'sh guruh tashkil etildi va beshta spirtli aralashuv guruhi (50, 75, 100, 125, 150 mmol / L) tashkil etildi va har bir guruh beshta takroriy o'rnatildi. Gepatotsitlar 24 soat davomida turli konsentratsiyali alkogol bilan o'stirilgandan so'ng, har bir quduqqa m 50 mL 0,5% MTT (Sigma) 20 qo'shildi. 4 soat davomida madaniyatni davom ettiring, supernatantni tashlang va har bir quduqqa DMSO 150 qo'shing m 50. Uni chayqaladigan stolga qo'ying va 15 daqiqa davomida aralashtiring, 570 nm da absorbans qiymatini o'lchang va hujayraning omon qolish tezligini hisoblang. Boshqaruv guruhi/nazorat guruhining hujayra omon qolish darajasi qiymati × 100%
1.5 Cistanche deserticola umumiy glikozidlarining birlamchi madaniy gepatotsitlarning yashash darajasiga ta'siri
Spirtli ichimliklar bilan jarohatlangan. Yuqoridagi usullar bilan olingan gepatotsitlarni kalamush dumi kollagen bilan oldindan ishlangan 96-quduqli plastinkaga seping va har bir quduqqa 100 mkl yoki 50 mkl bilan emlang. 10% homila sigir zardobiga ega DMEM madaniyat muhiti 24 soat davomida ekilgan va keyin o'zgartirilgan. Yana 24 soatdan so'ng, qabul qilish guruhiga yakuniy konsentratsiyasi mos ravishda 0,2, 0,4 va 0,8 g / L bo'lgan GC qo'shildi. Etanol modeli guruhi va bo'sh guruh dori qo'shmasdan madaniyatni davom ettirdi va har bir guruh beshta ko'p quduq bilan o'rnatildi. 24 soatdan so'ng, model guruhi va GCs aralashuv guruhi mos ravishda 100 mmol / L yakuniy konsentratsiyasi bilan spirtli ichimliklar bilan qo'shildi. 12 soatlik madaniyatdan so'ng hujayraning omon qolish darajasi MTT usuli bilan o'lchandi.
1.6 Cistanche deserticola umumiy glikozidlarining alkogol bilan shikastlangan birlamchi madaniy gepatotsitlar va yadrolarning morfologiyasiga ta'siri.
Oldindan sterillangan qopqoq oynasini 5 × 106 hujayra/ml hujayra suspenziyasi, model guruhi, Cistanche deserticola guruhi (0,2, 0,4, 0,8 g/L) va bo'sh guruhning emlash konsentratsiyasi bilan 6-quduqli plastinkaga joylashtiring. 24 soatlik kulturadan so'ng yakuniy konsentratsiyaga 100 mmol/l spirt qo'shing. 24 soatlik kulturadan so'ng, shisha slayddan 95% etanolni oling va uni 15 daqiqa davomida mahkamlang. PBS ikki marta yuviladi va keyin PBSda qayta tarqatiladi. Hujayra konsentratsiyasini 5 × 104 hujayra/ml ga sozlang, 10 mL akridin apelsin-etiliden bromid aralashmasini (Sigma) qo'shing (0,01 mk G/ml akridin apelsin eritmasi, 0,02 mk G/ml prometazin eritmasi, aralash hajm nisbati: 1/1 ), inkubatsiya va 30 daqiqa davomida suratga olinadi. mikroskop.
1.7 Cistanche deserticola umumiy glikozidlarining alkogol bilan shikastlangan birlamchi kulturali gepatotsitlar apoptoziga ta'siri.
Hazm qilingan hujayra suspenziyasining zichligini 5 × 106 hujayra / ml ga sozlang, oltita quduqli plastinkada emlash va 24 soat davomida madaniyat. Model guruhini, cistanche deserticola guruhini (0,2, 0,4, 0,8 g/L) va bo'sh guruhni o'rnating. 24 soatlik kulturadan so'ng yakuniy konsentratsiyasi 100 mmol/L bo'lgan spirt qo'shing, 24 soat davomida inkubatsiya qiling, hujayralarni hazm qiling va to'plang, ularni ikki marta PBS bilan yuving, ularni kechada 4 daraja 70% oldindan sovutilgan etanol bilan mahkamlang, PBS eritmasi bilan ikki marta yuving, RNK fermenti (Sigma), PI (100 mk / L) qo'shing va vannaga (100 mkL) qo'shing. 30 min. Apoptoz tezligi oqim sitometriyasi bilan o'lchandi.
1.8 Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlari alkogol, bcl-2 va proapoptotik gen c-fos tomonidan shikastlangan birlamchi kulturali gepatotsitlarning apoptozini inhibe qilishi mumkin.
Fos ifodasining ta'siri uchta oltita quduqli madaniyat plitalaridan olingan, ularning har biri uchta quduqdan iborat guruh edi. Model guruhi, Cistanche deserticola guruhi (0,2, 0,4, 0,8 g/L) va bo'sh guruh tashkil etildi. Har bir teshikka bitta steril slayd qo'yildi. Logarifmik o'sish fazasi hujayralari olindi va tripsin hazm qilishdan bitta hujayra suspenziyasini tayyorlash uchun foydalanildi va hujayra zichligi 5 × 106 / ml ga o'rnatildi va 6 quduqli plastinkada, 2 ml / quduqda emlandi. 24 soatlik kulturadan keyin oxirgi konsentratsiyasi 100 mmol/l bo'lgan spirt qo'shing va 24 soat davomida kulturani davom ettiring. Hujayralar bilan to'la slaydlarni oling, ularni ikki marta PBS bilan yuving va ularni muntazam immunohistokimyoviy ABC usuli bilan bo'yash. Qisqacha bosqichlar quyidagicha: ularni 40% paraformaldegid bilan 10 daqiqa davomida mahkamlang, ularni 30 daqiqa davomida oddiy qo'y zardobi bilan yopishtiring, tushiring va bcl-2 poliklonal antikor (Invitrogen) (1:75) yoki c-fos poliklonal antikor (Invitrogen) (1:50) qo'shing, xona haroratida 5 soat davomida kompleks rang qo'shing. DAB, va ularni jelatin bilan yoping. Bcl-2 va c-fos oqsilining ifodasi yorug'lik mikroskopi va fotografiya bilan taqqoslandi.
1.9 Statistik ishlov berish Eksperimental ma'lumotlar SPSS 13.5 dasturida qayta ishlandi. U o'rtacha ± standart og'ish (x ± s) sifatida ifodalanadi va guruhlar o'rtasida taqqoslash uchun t-testi qo'llaniladi. P<0.05 indicates that the difference is statistically significant.
2 Natijalar
2.1 The growth curve of primary cultured mouse hepatocytes is shown in Figure 1. It can be seen that the number of hepatocytes increased with the incubation time, and entered the logarithmic growth phase on the 4th day.
2.2 The effect of different concentrations of alcohol on the survival rate of primary cultured mouse hepatocytes
1-jadvaldan ko'rinib turibdiki, alkogol birlamchi ekilgan gepatotsitlarga kuchli zarar ta'sir qiladi va ta'sir dozaga bog'liq. Sinov ehtiyojlariga ko'ra, keyingi testda ish kontsentratsiyasi sifatida 100 mmol / L ishlatiladi va hujayraning omon qolish darajasi 43,40% ni tashkil qiladi.
2.3 Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlarining alkogol bilan shikastlangan birlamchi madaniy gepatotsitlarning yashash darajasiga ta'siri
2-jadvalda ko'rish mumkin. Spirtli ichimliklar shikastlanishidan keyin gepatotsitlarning omon qolish darajasi sezilarli darajada kamayadi. Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlari gepatotsitlarning omon qolish darajasini sezilarli darajada oshirishi mumkin (P).<0.05), and the effect is dose-dependent (P<0.05).
cho'l jenshen
2.4 Cistanche deserticola umumiy glikozidlarining alkogol bilan zararlangan birlamchi madaniy gepatotsitlar va yadrolarning morfologiyasiga ta'siri..
Azidin apelsin hujayralarga kirgandan so'ng yashil floresansni ko'rsatadi, prometazin esa nekrotik hujayralarni faqat to'liq bo'lmagan hujayra membranasi bilan bo'yash mumkin. Kuzatish natijasida aniqlandi (. 2-rasm) bo'sh guruhdagi gepatotsitlar bir xilda yashil rangda bo'lib, nekrotik hujayralarning brom-qizil bo'yalishi yo'q (A); Spirtli ichimliklar bilan davolashdan so'ng, gepatotsitlar kichrayib, brom qizil bilan bo'yalgan ko'p sonli nekrotik hujayralar va yadroda xromatin konsentratsiyasi (yadro yorqin yashil rangda) bo'lgan apoptotik hujayralar paydo bo'ldi (B). Shuning uchun, alkogol ham gepatotsitlar apoptozini qo'zg'atib, hujayra nekroziga olib kelishi mumkin, deb ishoniladi. GKlar nekroz va apoptozni sezilarli darajada kamaytirishi mumkin va ta'sir doza bilan ijobiy bog'liqdir (C, D, E).
Shakl. 2 Cistanche deserticola umumiy glikozidlarining floresan mikroskop ostida birlamchi ekilgan jigar yadrolari morfologiyasiga ta'sirini kuzatish (akridin apelsin rangi, 400)
A: bo'sh guruh; B: Model guruhi; C:0.2g/L-GK; D:0.4g/L-GK; E:0,8 g/L-GK
2.5 Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlarining alkogol bilan shikastlangan birlamchi madaniy gepatotsitlar apoptoziga ta'siri.
Cistanche ekstrakti kukuni
Shakl 3-Bda ko'rinib turibdiki, spirtli ichimliklarni shikastlangandan keyin gepatotsitlarning apoptoz tezligi sezilarli darajada oshadi (34,7%) va Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlari gepatotsitlarning omon qolish darajasini dozaga bog'liq holda sezilarli darajada oshirishi mumkin, bu floresan mikroskop ostida kuzatilgan natijalarga mos keladi.
Shakl. 3 Cistanche deserticola umumiy glikozidlarining alkogol bilan shikastlangan birlamchi kulturali gepatotsitlar apoptoziga ta'siri
A: bo'sh guruh; B: Model guruhi; C:0.2g/L-GK; D:0.4g/L-GK; E:0,8 g/L-GK
Immunotsitokimyoga ko'ra, jigar hujayralari alkogol bilan shikastlangandan so'ng, apoptozni inhibe qiluvchi omil bcl-2 ning ifodasi kamayganligi (4-B) va c-fos ifodasi ortishi (5-B) aniqlandi. Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlari bcl-2 (4-C, D, E) ifodasini sezilarli darajada kuchaytirishi va c-fos (5-C, D, E) ifodasini inhibe qilishi mumkin. Natijalar rasmda ko'rsatilgan. 4-5.
Shakl. 4 Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlarining alkogol bilan shikastlangan birlamchi madaniy gepatotsitlarda bcl-2 ifodasiga ta'siri (400)
A: bo'sh guruh; B: Model guruhi; C:0.2g/L-GK; D:0.4g/L-GK; E:0,8 g/L-GK
Shakl. 5 Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlarining alkogol bilan shikastlangan birlamchi kulturali gepatotsitlarda c-fos ifodasiga ta'siri (400)
A: bo'sh guruh; B: Model guruhi; C:0.2g/L-GK; D:0.4g/L-GK; E:0,8 g/L-GK
3 Munozara
Xitoy o'ti cistanche
Berry va boshqalar. birinchi bo'lib fiziologik sharoitda gepatotsitlarni olish uchun jigarni perfuziya qilish uchun kollagenazni qo'llashning in-situ perfuzion usulini yaratdi va keyinchalik Seglen va boshqalar tomonidan ishlab chiqilgan. [4] ushbu kollagenaz perfuzion texnologiyasini yanada mukammal qilish. Bu usul yuqori hujayra hosildorligi va yuqori omon qolish darajasiga ega. Ushbu tajribada birlamchi gepatotsitlar sichqon gepatotsitlarining in situ perfuziyasi orqali olingan va ekilgan. Usul barqaror, hujayra faolligi kuchli edi. O'sish egri testi orqali, olingan asosiy gepatotsitlar 4 kundan keyin logarifmik o'sish bosqichiga kirganligi aniqlandi.
MTT kolorimetrik mikrotahlil hujayra o'sishi va yaxshi takrorlanishi bilan omon qolishni aniqlashning sezgir usuli hisoblanadi. Tirik hujayralar mitoxondriyalaridagi suksinat dehidrogenaza sariq MTTni ko'k-binafsha kristalllarga kamaytirishi mumkin, o'lik hujayralar esa bunday funktsiyaga ega emas [5]. Hujayra faolligini optik zichlikni o'lchash orqali aks ettirish mumkin. Ushbu tajribada MTT usuli spirtli ichimliklarni shikastlangandan keyin gepatotsitlarning omon qolish darajasi sezilarli darajada kamayganligini aniqlash uchun ishlatilgan va Cistanche deserticola umumiy glikozidlari gepatotsitlarning omon qolish darajasini sezilarli darajada oshirishi mumkin (P).<0.05), and the effect was dose-dependent (P<0.05).
Apoptoz hujayra o'limining maxsus shaklidir. Hujayralar apoptozdan o'tganda maxsus morfologik va biokimyoviy o'zgarishlar ro'y beradi [6-8]. Tajriba shuni tasdiqladiki, alkogol bilan davolashdan keyin gepatotsitlarning ko'pchiligi apoptotik bo'lib, hujayralar aniq morfologik o'zgarishlarni ko'rsatdi, ular quyidagicha bo'ldi: hujayralar kichikroq bo'ldi, hujayra yuzasida mikrovilluslar yo'qoldi, hujayra yuzasi qisqaradi, vakuolalar paydo bo'ldi, yadro kondensatsiyasi va apoptotik tanachalarning shakllanishi; Bu nekroz bilan birga keladi. Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlari bilan davolashdan so'ng apoptoz darajasi sezilarli darajada kamaydi va nekroz holati ham engillashdi.
Bcl-2 geni proto-onkogendir. Hozirgi vaqtda beshta bcl-2 gen oilasi (bcl-2, bcl-2 x, bax, mcl-1 va A1) topilgan, ularda bcl-2 dasturlashtirilgan hujayra o'limini (PCD) inhibe qilishi mumkin. Mexanizm ishi quyidagilarni o'z ichiga olishi mumkin: (1) Ca2+. Bcl-2 transmembran oqsili bo'lib, asosan yadro membranasida joylashgan. Ichki va tashqi yadro membranalari endoplazmatik retikulumning lümeni bilan bog'langan. Ikkinchisi hujayra ichidagi Ca2+ ning asosiy saqlash joyi bo'lib, hujayra apoptozi jarayonida muhim rol o'ynaydi. Transgenik usullardan foydalangan holda, bcl-2 ning yuqori ifodasi endoplazmatik retikulumdan Ca2+ ajralishini inhibe qilishi mumkinligi aniqlandi, shuning uchun bcl-2 ning apoptozga inhibitiv ta'siri endoplazmatik retikulumdagi Ca2+ bilan bog'liq bo'lishi mumkinligi taxmin qilingan [9]. (2) Bcl-2 proapoptotik genlarning signal uzatilishini blokirovka qilish yoki ushbu induksiyalangan gen mahsulotlarini blokirovka qilish orqali anti-apoptotik rol o'ynaydi. Tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, bcl-2 oqsili P53 va c-fos [10] tomonidan qo'zg'atilgan apoptozni inhibe qilishi mumkin. (3) Bcl-2 erkin radikallarni inhibe qilish orqali anti-apoptotik rol o'ynashi mumkin. Bcl-2 antioksidant rolini o'ynaydi, bu superoksid ishlab chiqarish va ta'sirini inhibe qilishi mumkin, shuning uchun apoptozning paydo bo'lishini inhibe qiladi [11].
Erta to'g'ridan-to'g'ri genlar (IEG) - erta paydo bo'ladigan va turli xil zararli stimullar ostida qisqa muddatga ega bo'lgan genlar. c-fos proto-onkogenlardan biri bo'lib, 14q21-q31 xromosomasida joylashgan. Bu 9kb DNK bo'lib, to'rtta ekzon va uchta introndan tashkil topgan [12]. Asosiy transkripsiya past, lekin uni tez va vaqtinchalik ifodalash uchun turli ikkinchi messenjer molekulalari ishga tushirishi mumkin. c-fosning oqsil mahsuloti FOS, proto-onkogen c-Jun tomonidan kodlangan oqsil esa JUN hisoblanadi. FOS tarkibida leytsinli fermuar (LZ) mavjud [13]. FOS va JUN LZ strukturasi orqali yadroda geterodimer hosil qiladi, transkripsiya omili AP-1, u maqsadli genning AP-1 joyi bilan birlashadi va yadroning uchinchi xabarchisi vazifasini bajaradi va maqsadli genni uzoq vaqt davomida ifodalash imkonini beradi [14]. Morganning fikricha, c-fosning turli xil ifodalari uning funktsiyalarining xilma-xilligi va murakkabligini ko'rsatadi. Vaqtinchalik ifoda hujayralarni himoya qilish, ta'mirlash, qayta qurish va regeneratsiyada ishtirok etishi mumkin, doimiy haddan tashqari ekspressiya esa ikkilamchi zarar bilan bog'liq. Ikkalasining ifoda mexanizmi boshqacha. Shuning uchun, c-fos kabi IEGlar ikki tomonlama rol o'ynaydi deb hisoblash mumkin. Ta'mirlash mudofaa tizimi to'liq inhibe qilinganida, ular apoptozda ishtirok etadilar; Agar u inhibe qilinmasa, u lezyon atrofidagi hujayralarga himoya ta'siriga ega va hujayralarni tiklash va qayta tiklash jarayonida ishtirok etadi [15]. WebsterKR c-fos transkripsiyasini kamaytirish va apoptozning paydo bo'lishining oldini olish uchun antisens nukleotidlardan foydalanadi, bu c-fosning haddan tashqari ko'payishi turli kasalliklarning paydo bo'lishi va rivojlanishi bilan uzviy bog'liqligini ko'rsatadi [16].
Ushbu tajribada, jigar hujayralari alkogol bilan shikastlangandan so'ng, apoptozni inhibe qiluvchi bcl-2 omilining ifodasi sezilarli darajada kamaydi va c-fos ifodasi ko'paydi, bu Cistanche deserticolaning umumiy glikozidlari bcl-2 ifodasini kuchaytirish, c-fos ifodasini inhibe qilish, jonli hujayralar shikastlanishini kamaytirish va jigar hujayralarini himoya qilishi mumkinligini ko'rsatadi.
