Ikki valentli jonli zaiflashtirilgan gripp virusi vaktsinasi cho'chqadagi H1N2 va H3N2 klinik izolatlaridan himoya qiladi 2-qism

2.5. Ferment bilan bog'langan immunosorbent tahlili (ELISA)

Qoplama antijenlarini yaratish uchun SD435 va SD467 MDCK hujayralarida ko'paytirildi va sukroz gradienti ultratsentrifugalash yordamida tozalandi. Viruslarning inaktivatsiyasi virusga 1:1000 (v/v) konsentratsiyasida 97 foiz propiolakton qo'shish orqali sodir bo'ldi (Thermo Fisher Scientific, AAB2319703). Bu aralashma bir kechada 4 ◦C da silkitildi, -propiolakton gidrolizlanishini osonlashtirish uchun 37 ◦C da ikki soat davomida inkubatsiya qilindi, so'ngra ishlatilgunga qadar -80 ◦C da saqlanadi.

Antigenlar va immunitet ajralmasdir. Antigen immunitet tizimi tomonidan tan olinishi mumkin bo'lgan va immunitet reaktsiyasini keltirib chiqaradigan har qanday moddaga ishora qiladi, shu jumladan bakteriyalar, viruslar, o'simta hujayralari va boshqalar, immunitet esa tananing ushbu antigenlarga javob berish qobiliyatini anglatadi.

Antigenlar va immunitet o'rtasidagi munosabatni oddiy metafora bilan tasvirlash mumkin: jismoniy mashqlar etarli darajada mashg'ulot va ozuqaviy qo'shimchalarni talab qilganidek, immunitetni yaxshilash ham antijenler va tegishli immun hujayralari va immun molekulalari bilan takroriy aloqaga bog'liq. mahsulot. Immunitet tizimi antigenga duch kelganida, u bizni qayta infektsiyadan himoya qilish uchun xotira hujayralari bilan birga o'ziga xos antikorlar yoki immunitet hujayralarini ishlab chiqarish orqali hujum qiladi.

Ilm-fan, yaxshi yashash va ovqatlanish odatlarini rivojlantirish immunitetni yaxshilashga yordam berishini tasdiqladi. Masalan, tozalikni saqlash, chekmaslik, o'rtacha jismoniy mashqlar va uxlash odatlari bakteriyalar va viruslar kabi antijenlarning ishg'ol qilinishini kamaytirishga yordam beradi. Shu bilan birga, sabzavot va mevalar, to'liq donalar va baliq kabi antioksidantlar, vitaminlar va minerallarga boy ba'zi oziq-ovqatlarni iste'mol qilish ham immunitetni yaxshilashga yordam beradi.

Muxtasar qilib aytganda, antigen va immunitet o'rtasidagi munosabatlar juda yaqin. Faqat antijenler bilan qayta-qayta aloqa qilish va to'g'ri yashash odatlari orqali immunitetni doimiy ravishda yaxshilash, turli kasalliklarning oldini olish va davolash mumkin. Shuning uchun o'zimizni kasalliklardan himoya qilish uchun ijobiy munosabatda bo'lishimiz va yaxshi turmush tarzini rivojlantirishimiz kerak. Immunitetimizni yaxshilashimiz kerakligini ko'rish mumkin. Cistanche immunitetimizni yaxshilashga yordam beradi, chunki Cistanche turli xil antioksidant moddalarga boy, masalan, vitamin C, karotinoidlar va boshqalar. Bu ingredientlar erkin radikallarni tozalashi va oksidlovchi stressni kamaytirishi, immunitet tizimining qarshiligini oshirishi mumkin.

Cistanche deserticola qo'shimchasini bosing

Emlash va chaqiruv natijasida kelib chiqqan swIAVga xos IgG darajasini o'lchash uchun cho'chqa zardobi birinchi (20-kun) va ikkinchi (30-kun) emlashdan keyin va o'lim oldidan (36-kun) olingan.

Tozalangan propiolakton bilan inaktivatsiyalangan viruslar SD435 (1 mkg/ml) va SD467 (2 mkg/ml), karbonat/bikarbonat qoplamali tamponda suyultiriladi (pH 9,6) Immulon-2 96-quduq plitalariga 1{{-2 96-da qo'llanildi. 12}}0 µL/quduq (Thermo Labsystems, Ottava, ON, Kanada, 3655) va kechasi 4 ◦C da inkubatsiya qilindi. Bir kechada inkubatsiyadan so'ng, qoplangan plitalar TBST (0,1 M Tris, 0,17 M NaCl va 0,05 foiz Tween 20) bilan to'rt marta yuvildi, unga sarum yoki BALF ning to'rt marta ketma-ket suyultirilishi qo'shildi. plastinka ikki nusxada, so'ngra xona haroratida ikki soatlik inkubatsiya. Sarum 1:10 boshlang'ich suyultirilganda qo'shildi va BALF suyultirilmagan holda qo'shildi. Oldindan aniqlangan musbat nazorat zardobi va tegishli salbiy nazorat, sarum va oldingi tadqiqotda emlanmagan cho'chqalardan olingan BALF namunalari har bir plastinkada o'tkazildi [14].

Plitalar TBST bilan to'rt marta yuvildi, shundan so'ng echki cho'chqaga qarshi IgG (H plus L) fosfataza bilan belgilangan yaqinlik bilan tozalangan antikor (1: 5000) (Sigma Aldrich, SAB3700435) yoki sichqonchani cho'chqaga qarshi IgA (Serotec, MCA658) () 1:300) TBSTda suyultirilgan eritma qo'shildi va xona haroratida bir soat davomida inkubatsiya qilish uchun qoldirildi. IgA ELISA'lari biotinlangan echkiga qarshi sichqonchaga qarshi IgG (H plus L) antikorlari (CALTAG, Burlingame, CA, AQSh, M30015) va streptavidin ishqoriy fosfataza eritmasi (Jekson ImmunoResearch, West Grove, PA) bir soat davomida qo'shilishi bilan ishlab chiqilgan. xona haroratida.

Inkubatsiyadan so'ng IgG va IgA plitalari to'rt marta TBST bilan yuvildi, unga p-nitrofenilfosfat substrati (PNPP) [10 mg/ml p-nitrofenilfosfat di(tris) kristalli tuz (Sigma-Aldrich) , 1 foiz dietanolamin (Sigma-Aldrich), 0,5 mg / ml MgCl2 va pH 9,8] (1 mg / ml) qo'shildi va xona haroratida ikki soat davomida inkübe qilindi.

Reaksiya 0.3 M etilendiamintetraasetik kislota (EDTA) qoʻshilishi orqali toʻxtatildi va plitalar spektrofotometrda 405 nm da 490 nm mos yozuvlar bilan oʻqildi. Namuna titri eng yuqori suyultirish sifatida aniqlandi, bunda namunaning ODsi belgilangan chegaradan (ma'lum manfiy namunaning o'rtacha ODsi va standart og'ishning ikki barobari) yuqori bo'ladi.

2.6. Virusni zararsizlantirish (VN) tahlili

MDCK xujayralari (3,5 × 104 ) 96-quduq plitalariga qo'yildi. Sarum va BALF 56 ◦C da 30 daqiqa davomida issiqlik bilan faollashtirildi. Sarum va BALFning ikki marta suyultirilishi to'rt marta plastinkaga qo'shildi va 60 mkL suyultirilgan sarum yoki BALF teng hajmdagi SD435 yoki SD456 100 TCID50 ni o'z ichiga olgan 37 ◦C da 1 soat davomida inkubatsiya qilindi. Keyin MDCK hujayralariga 100 mkl aralashma qo'shildi va sitopatogen ta'sir (CPE) infektsiyadan keyin 48 soat va 72 soatdan keyin hujjatlashtirilgan (pi). Neytrallash antikor titri har bir zardob namunasining eng yuqori suyultirilishi bo'lib, hujayralarni 4 quduqdan kamida 2 tasida CPE dan to'liq himoya qildi.

2.7. Virusni aniqlash

Yig'ilgandan so'ng, o'pka namunalari darhol muzga joylashtirildi va ishlov berilgunga qadar -80 ◦C da muzlatildi. Qayta ishlash uchun har bir o'pka to'qimasi tortildi va 1x antibiotik-antimikotik (Thermo Fisher Scientific, 15240-062) bilan to'ldirilgan MEMning 10 foiz (w/v) konsentratsiyasi qo'shildi. O'pka to'qimalari TissueLyser II (Qiagen, Hilden, Germaniya) da 5 daqiqa davomida 30 Gts chastotada homogenlashtirildi, so'ngra 4 ◦C da 10 daqiqa davomida 5000 × g santrifüj qilindi. Gomogenlashtirilgan supernatant yig'ildi va keyingi tahlilga qadar -80 ◦C da saqlanadi. Burun tamponlari 15 soniya davomida vortekslangan va 4 ◦C da 25 daqiqa davomida 1600 × g da santrifüj qilingan. Supernatantlar to'plangan va keyingi tahlillargacha -80 ◦C da saqlanadi. Virus titrlari o'pka uchun TCID50 tahlili va burun tamponlari uchun miqdoriy RT-PCR bilan aniqlandi.

2.8. RNK ekstraktsiyasi va miqdoriy RT-PCR (qRT-PCR)

Burun tamponlarida SD467 va SD435 virusli RNK darajasini aniqlash uchun qRT-PCR o'tkazildi. Ma'lum titrdagi SD435 va SD467 dan olingan RNK yordamida standart egri chizilgan. Qisqacha aytganda, RNeasy Plus Mini Kit (Qiagen, Toronto, ON, Kanada, 74136) 200 mkL burun yuvish vositasidan vRNK olish uchun ishlatilgan. RNK universal gripp primeri Uni12 va SuperScript III Transkriptaza (Invitrogen, Burlington, ON, Kanada) yordamida cDNK ga aylantirildi [19]. qPCR uch nusxada StepOnePlusTM Real-Time PCR tizimida (Applied Biosystems, CA, USA) Power SYBR Green PCR Master Mix (Applied Biosystems), 5 µL cDNA va 1 µL 10µM oldinga va teskari primerlar bilan amalga oshirildi. PCR reaktsiyalari 40 tsikl uchun 58 ◦C tavlanish haroratida o'tkazildi. qPCR primerlarining barcha ketma-ketliklari so'rov bo'yicha mavjud.

2.9. Statistik tahlil

Statistik tahlil GraphPad Prism 8 dasturi yordamida amalga oshirildi. Mann-Whitney va Kruskal-Wallis parametrik bo'lmagan testlardan foydalanilgan. Muhim farqlar * (p < 0.05), ** (p < 0.01), *** (p < 0,001) bilan belgilanadi. , yoki **** (p <0,0001). ns=muhim emas.

3. Natija

3.1. Bivalent vaktsina bilan emlash yangi klinik izolatlardan himoya qilishni ta'minladi

Biz ushbu yangi klinik izolatlarga qarshi bivalent vaktsina tomonidan taqdim etilgan himoyani baholash uchun viruslarga qarshi jismoniy javobni, shuningdek, nafas yo'llarida virus replikatsiyasini o'lchadik. Harorat har kuni virusga qarshi kurashdan keyin besh kun davomida barcha guruhlarda qayd etilgan. Soxta emlangan va SD435 (H3N2) (MEM/SD435) yoki SD467 (H1N2) (MEM/SD467) bilan sinovdan o'tgan cho'chqalar virusdan keyingi 1-kuni odatdagi haroratning keskin ko'tarilishini ko'rsatdi, o'rtacha harorat 40,6 ◦C va 41,1 ni tashkil etdi. C, mos ravishda. SD435 (Bivalent/SD435) yoki SD467 (Bivalent/SD467) ga qarshi emlangan guruhlarda o'rtacha harorat mos ravishda 39,4 ◦C va 39.6 ◦C bo'lgan emlangan guruhlarda bu o'sish kuzatilmadi. Sinovdan keyingi 2-5 kunlarda emlangan va emlanmagan guruhlarda harorat 39 ◦C atrofida bo'lgan (2A-rasm).

Sinovdan besh kun o'tgach, barcha cho'chqalar o'ldirildi, o'pkalari olib tashlandi va mavjud lezyonlar miqdorini aniqlash uchun tahlil qilindi. Bivalent/SD435 guruhida oʻpkaning umumiy lezyonlari oʻrtacha 0.65 foizni tashkil etgan holda minimal yoki umuman zarar koʻrmagan. MEM/SD435 guruhi emlangan hamkasbiga qaraganda sezilarli darajada yuqori jarohatlarga ega bo'lib, o'rtacha 5,1 foizni tashkil etdi (p=0.0025) (2B-rasm). Bivalent / SD467 guruhida ettita cho'chqadan beshtasi kam miqdorda jarohatlarga ega edi (<2%), one had minor lesions (3.75%), and one outlier had high lesions (31%), with a group median of 1.9%. Compared with the vaccinated group, the MEM/SD467 group had a higher degree of lesions with a median of 4.55% (p = 0.0417) (Figure 1C).

O'pkada Bivalent/SD435 va Bivalent/SD467 guruhlari virusning past titrlariga ega bo'lib, o'rtacha 8,6 PFU/ml/gr va 3,{5}} PFU/ml/gr. Aksincha, MEM/SD435 va MEM/SD467 guruhlarida virus yuqoriroq bo‘lgan, o‘rtacha ko‘rsatkichlar mos ravishda 656,1 va 9118,2 PFU/ml/gr (ikkalasi uchun p=0.0025) (3A-rasm, B). Shunga o'xshash tendentsiyalar burundagi tamponlarda ham kuzatilgan. Bivalent / SD435 guruhida burun titrlari 1, 3 va 5-chaqiriqdan keyingi kunlarda past bo'lgan (dpc), MEM/SD435 guruhida esa kunlar o'tishi bilan titrlar biroz ko'tarilgan (ns) (3C-rasm). Bivalent/SD467 guruhida burun titrlari ham past bo'lib, 1 va 5-kunlarda o'rtacha 5 PFU/ml dan, 3-kuni esa 10,0 PFU/ml dan past bo'lgan. Titrlar har kuni MEM/SD467 guruhida yuqoriroq bo‘lib, o‘rtacha 4123,6 PFU/ml/gr ni 1 dpc (p=0.0278), 77233,1 PFU/ml/gr (p=0.0009) da tashkil etdi. 3dpc va 5dpc (ns) da 65,2 PFU/mL/gr (3D-rasm).

Umuman olganda, bu natijalar shuni ko'rsatadiki, bivalent vaktsina o'pka va burun yo'llarida bu ikki swIAV izolatlari bilan infektsiya bilan bog'liq bo'lgan o'pka shikastlanishini va virusli replikatsiyani kamaytiruvchi shtammlardan sezilarli darajada himoyalangan.

3.2. Bivalent vaktsina muammoli shtammlarga qarshi immunitetni kuchaytiradi

Biz bivalent vaktsina bilan prime-boost emlashdan so'ng, biz zardobdagi va o'pkaga xos bo'lgan har ikkala shtammga antikor reaktsiyasini o'lchadik. Sarum cho'chqalardan birinchi emlashdan keyin (20) va ikkinchi emlashdan keyin (30-kun) yig'ildi. Challenge viruslari SD435 (H3N2) va SD467 (H1N2) zardobdagi virusga xos IgG antikor javobini o'lchash uchun tutib olish antijeni sifatida ishlatilgan. SD435 bilan birinchi emlashdan keyin (20-kun) MEM va bivalent emlangan guruhlardagi antikor titrlari o'rtasida sezilarli farq yo'q edi. Biroq, SD467 ga qarshi antikor titrlari 20-kuni emlangan guruhda sezilarli darajada yuqori bo'lgan (p=0.0321). Ikkinchi emlashdan so'ng (31-kun) antikor titrlari SD435 va SD467 ga qarshi emlangan guruhda MEM soxta vaktsina guruhlariga qaraganda sezilarli darajada yuqori bo'lgan (p <0,0001) (4A, B-rasm). Xususan, tutilish antijeni SD435ga qarshi, MEM soxta emlangan guruhda sarum IgG titrlari 20 va 30-kunlarda oʻrtacha 52 ni tashkil etgan boʻlsa, bivalent vaktsina guruhida ular 311 (20-kun) va 4852 (30-kun) ni tashkil etgan (3A-rasm). SD467 ga qarshi, soxta emlangan MEM guruhidagi sarum IgG titrlari 39 (20-kun) va 38 (30-kun), bivalent vaktsina guruhida esa ular 219 (20-kun) va 3509 (30-kun) edi (3B-rasm).

Shunga o'xshash tendentsiyalar neytrallashtiruvchi antikor titrlarini ikki sinov shtamiga qarshi sarumda o'lchaganida ham kuzatilgan. Shunga qaramay, MEMdagi neytrallashtiruvchi antikor titrlari va SD435 ga qarshi bivalent emlangan guruhlar o'rtasida vaktsinaning bir dozasidan so'ng (20) ​​sezilarli farq yo'q (5A, B-rasm). SD467 ga qarshi, bitta emlashdan keyin 20 kuni antikor darajalari sezilarli darajada yuqori bo'lgan (p=0.0069). Ikkala virusga qarshi, ikkinchi dozadan keyin ikki valentli vaktsina guruhlarida antikor titrlarida o'sish kuzatildi 30) (p <0,0001). MEM soxta emlangan guruhdagi titrlar SD435 o'rtacha 1 (20 kun) va 3 (30 kun) bilan sinovdan o'tkazildi, bivalent guruhdagi titrlar o'rtacha 10 (da20) va 77 (30 kun) da (5A-rasm). SD467 bilan sinovdan o'tgan MEM soxta emlangan guruhdagi titrlar o'rtacha 0 (20 kun) va 2 (30 kun) ni tashkil etdi, bivalent vaktsina guruhidagi titrlar esa o'rtacha 10 (20 kun) va 54 (30 kun) ni tashkil etdi (5B-rasm).

Nekropsiyadan so'ng (36-kun), o'pkada antikor darajasini o'lchash uchun cho'chqalarning har biridan BALF olindi. Challenge viruslari SD435 va SD467 virusga xos IgA va IgG javobini o'lchash uchun tutib olish antijeni sifatida ishlatilgan. SD435 ga nisbatan MEM soxta vaktsina guruhlarida IgA darajalari oʻrtacha 17 ni tashkil etdi, ikki vaktsina guruhidagi titrlar esa sezilarli darajada yuqori boʻlib, oʻrtacha 95 ni tashkil etdi (p=0.0014) (6A-rasm). SD467 uchun IgA darajalari soxta vaktsina guruhida o'rtacha 18 ni tashkil etdi va ikki valentli vaktsina guruhida 158 da sezilarli darajada yuqori edi (p=0.0185) (6B-rasm). IgG nuqtai nazaridan, MEM soxta vaktsina guruhida SD435 ga qarshi titrlar o'rtacha 3 ga teng bo'lsa, bivalent guruhda ular o'rtacha 138 ga (p <0,0001) sezilarli darajada yuqori edi (6C-rasm). SD467 ga qarshi IgG antikorlari MEM soxta vaktsina guruhlarida o'rtacha 16 ni tashkil etdi, bivalent vaktsina guruhida esa ular sezilarli darajada yuqori bo'lib, o'rtacha 259 (p <0,0001) (6D-rasm).

BALFda neytrallashtiruvchi antikorlarga kelsak, tendentsiyalar IgA va IgG ELISA'larda kuzatilganlarga o'xshash edi. SD435 ga qarshi neytrallashtiruvchi antikor titrlari MEM soxta vaktsina guruhlarida aniqlanmadi va ular ikki valentli vaktsina guruhida 13,2 da sezilarli darajada yuqori edi (p < 0. 0001) (7A-rasm). Xuddi shunday, SD467 ga xos antikor titrlari MEM soxta vaktsina guruhlarida o'rtacha 0,7 ni tashkil etdi va o'rtacha titri 10,9 (p=0.0002) bo'lgan bivalent vaktsina guruhida sezilarli darajada yuqori edi (7B-rasm). Umuman olganda, bu ma'lumotlar shuni ko'rsatadiki, bivalent vaktsinaning ikki dozasi kuchli tizimli gumoral javobni, shuningdek, ushbu ikkita gomologik bo'lmagan klinik izolyatsiyaga qarshi o'pkada mahalliy immun javobni keltirib chiqaradi.

4. Munozara

Biz avvalroq SD{1}}R342V va SD69.K345V elastazaga bog‘liq viruslar cho‘chqalarda to‘liq zaiflashgan va virusli bo‘lmaganligini va bu ikki valentli LAlV bilan ikkita emlash kuchli immun javobini keltirib chiqarganini va gomologik SD191 bilan infektsiyadan himoyalanganligini ko‘rsatgan edik. H1N2) va SD69 (H3N2) shtammlari [14). Ushbu tadqiqotda biz bivalent vaktsina antijenik driftga uchragan so'nggi klinik izolatlarga qarshi in vivo saqlanishini sinab ko'rmoqchi edik. SD467, xuddi SD191 kabi, Kanadada paydo bo'lgan Ho{15}} antijenik guruhining a'zosi, ammo u asosiy antigenik joylarda ko'plab mutatsiyalarni olgan (12,15). Xuddi shunday, SD435 H3N2 IV-E klasterini ifodalaydi. Kanadaning g'arbiy qismida mavjud bo'lib, SD69da mavjud bo'lgan H3 antijenik joylarida bir nechta aminokislotalarni almashtirishga ega (17).

Bivalent LAlV SD435 (H3N2) yoki SD467 (H1N2) bilan sinovdan o'tkazilganda emlangan cho'chqalardagi lezyonlarni sezilarli darajada kamaytirdi va MEM (soxta) emlangan guruhlarda sinovdan bir kun o'tgach kuzatilgan haroratning ko'tarilishini oldini oldi. Bu, shuningdek, o'pkada ikkala shtammning virusli replikatsiyasining kamayishiga va burun tamponlarida SD467 (H1N2) ning kamayishiga olib keldi. Qizig'i shundaki, SD435 (H3N2) ning burun titrlari bir xil namuna olish usullariga qaramay, emlangan va emlanmagan guruhlarda past bo'lgan, bu shtammning burun yo'llari uchun unchalik tropizmga ega emasligini ko'rsatadi. Guruhdagi o'pka lezyonining yuqori balli 31 bo'lgan yuqori cho'chqaga kelsak, harorat o'lchovlari qiyinchilikda keskin o'sishni ko'rsatmadi va o'pkada virus titrlari 10 PFU / g / ml dan past edi. Qon zardobidagi antikor darajasi va o'pkaning mahalliy reaktsiyasi boshqa barcha emlangan cho'chqalar bilan bir xil edi. Bu bizni lezyonlar gripp bilan bog'liq emasligini taxmin qilishga olib keladi. Seroanaliz shuni ko'rsatdiki, vaktsinaning ikki dozasidan so'ng ikkala shtammga qarshi kuchli immunitet reaktsiyasi o'rnatilgan va o'pkada mahalliy tahlillarga nisbatan ham xuddi shunday. Antikorlarga yo'naltirilgan sirt glikoproteinlari IAV infektsiyasidan himoya qilishda muhim ahamiyatga ega, shuning uchun emlangan cho'chqalarda topilgan neytrallashtiruvchi antikorlarning yuqori darajasi, shuningdek, lgG va lgA in vivo jonli himoyani qo'llab-quvvatlaydi [20].

To'liq inaktivatsiyalangan virusli (WIV) vaktsinalar cho'chqalar uchun eng ko'p mavjud bo'lib, radiatsion ravishda yordamchi moddalar bilan tuzilgan, ular xavfsiz yondashuv hisoblanadi, chunki aylanma shtammlar bilan qayta assortimentga kirish xavfi yo'q. Biroq, ular mos kelmaydigan shtammlarga qarshi cheklangan samaradorlikni ta'minlaydi va mos kelmaydigan shtammlarga qarshi ishlatilganda vaktsina bilan bog'liq rivojlangan nafas olish buzilishiga (VAERD) olib kelishi ko'rsatilgan. Ularning samaradorligi onadan olingan antikorlar (MDA) mavjudligida ham kamayadi [4]. Shimoliy Amerikada sotiladigan FluSure XP® ni o'z ichiga oladi, u AQShda H1N1, H1N2 va H3N2 klasterlari IV-A va IV-B bilan tetravalent formulada mavjud [21]. Flusure XP® ning eski formulasi Kanadada 2000 va 2005 yillar orasida ajratilgan ikkita H1N1 shtammi va bitta H1N2 shtammi bilan mavjud [22]. Shimoliy Amerikaning ikkala mamlakatida ham H1N1pdm09 shtammidan tashkil topgan FluSure® Pandemic monovalent vaktsina, shuningdek, H1N1, H1N2 va H3N2 o'z ichiga olgan Pneumostar SIV Complete (Elanco, Greensboro, Shimoliy Karolina, US Inc.) mavjud. Pneumostar SIV, H1N1 va H3N2 kichik shtammlari bilan (GOC, USDA) [23,24]. Ushbu tijoratda mavjud bo'lgan vaktsinalar Shimoliy Amerikadagi cho'chqa grippiga qarshi vaktsinalarning taxminan 50 foizini tashkil qiladi, qolgan 50 foizi esa avtogen vaktsinalardir [4].

Muqobil vaktsina platformalari nuqtai nazaridan, rekombinant alfavirusdan olingan replikon zarracha vaktsinasi AQShda litsenziyalangan [4]. Ushbu vaktsina platformasi o'zgartirilgan genomga ega alfavirusni qo'llaydi, bu erda virusning strukturaviy genlari tanlangan gen bilan almashtiriladi va alfavirus replikatsiyasini nuqsonli qiladi. Ushbu RNK o'z-o'zidan ko'payadi, shuning uchun vaktsina platformasi qiziqish genining yuqori ifodalanishiga olib keladi va gripp uchun ham HA, ham nukleoprotein (NP) antijen sifatida sinovdan o'tkazildi [25]. Tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, ushbu platformadan foydalanish antigenik jihatdan HA-mos keladigan va mos kelmaydigan muammolardan, shuningdek, NP-mos kelmaydigan shtammlardan himoya qiladi, garchi platforma MDAlarning mavjudligidan himoya qila olmagan.

Cho‘chqa grippiga qarshi birinchi LAIV 2017-yilda AQSh Qishloq xo‘jaligi departamenti (USDA) tomonidan tasdiqlangan. Ingelvac Provenza™ ikki valentli H3N2 va H1N1 vaktsinasi bo‘lib, AQShda ajratilgan ikkita shtammdan olingan HA va NA TX98 magistralida ifodalangan. strukturaviy bo'lmagan oqsilning (NS1) [14,26] kesilishi orqali zaiflashadi. LAIVlar tabiiy infektsiyani taqlid qiladi va intranazal yuborilganda yuqori nafas yo'llarida shilliq qavatning immunitetini oshiradi. Faol bo'lmagan vaktsinalar asosan tizimli IgG antikorlarini ishlab chiqarishga olib keladigan bo'lsa, jonli zaiflashtirilgan vaktsinalar nafas yo'llarida shilliq qavat IgA ni qo'zg'atishi mumkin, shuningdek immunitet tizimining ichki gripp oqsillariga ta'siri tufayli hujayra vositachiligidagi reaktsiyaning kuchayishi, ko'proq T ni o'z ichiga oladi. hujayra epitoplari [27]. Bu mos kelmaydigan shtammlardan yaxshiroq himoya qilishga olib keladi.

Ular MDAlar mavjudligida qisman himoya ko'rsatdilar. To'liq IgG antikorlari pastki nafas yo'llarida ko'proq tarqalgan, polimerik IgA antikorlari esa cho'chqalarning yuqori nafas yo'llarida, ko'pincha dimerlar sifatida [28]. Ushbu antikorlar mahalliy darajada ishlab chiqariladi va epitelial hujayra qatlami bo'ylab tashiladi, ular shilliq qavatda qoladi va proteazlar tomonidan degradatsiyaga qarshi turadigan sekretor komponent tomonidan yordam beradi [28,29]. IgA antikorlari adaptiv immunitet tizimining kiruvchi patogenlarga qarshi birinchi himoya chizig'i bo'lib, virusning sialik kislota retseptorlari bilan bog'lanishini blokirovka qilish uchun ishlaydi [30]. Polimerik IgA antikorlari monomerik IgG antikorlariga qaraganda kengroq o'zaro reaktivdir, bu potentsial ko'p valentli bog'lanish tufayli [31]. Tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, bu antikorlar cho'chqa zardobida mavjud bo'lgan IgG yoki monomerik IgA ga qaraganda infektsiyalangan hujayralardan yangi hosil bo'lgan IAV ning chiqishini ancha samaraliroq oldini oladi, bu IgA ning polimerik tuzilishi virus naslini o'zaro bog'lash uchun foydali ekanligini ko'rsatadi. infektsiyalangan hujayra yuzasida ifodalangan HA ga [31-33]. Shunday qilib, mahalliy IgA antikorlari javobi IAV infektsiyasidan himoya qilishning ajralmas qismidir va odamlarda himoyalanishning o'zaro bog'liqligi taklif qilingan [34].

Biroq, LAIV bilan bog'liq xavf, aylanma shtammlar bilan qayta assortiment uchun potentsialdir. AQShda o'tkazilgan filogenetik tadqiqot Ingelvac Provenza™ [26] tarkibiga kirgan vaktsina shtammlari bilan qayta bog'langan yangi shtammlarni aylanmada topdi. Elastazaga bog'liq bo'lgan LAIV platformasi bu xavfni kamaytiradi, chunki elastaz oqsili cho'chqaning nafas olish yo'llarida juda kam, shuning uchun vaktsina viruslarining replikatsiyasi juda cheklangan, shuningdek, qayta assortimentning paydo bo'lishi uchun vaqt oralig'i. Kelgusi tadqiqotlar ushbu bivalent vaktsinaning qayta assortiment xavfini baholashni, shuningdek, ushbu vaktsina MDAlar mavjudligida qanday turishini o'z ichiga oladi. Ushbu vaksinaning hujayra vositachiligidagi javobini sinab ko'rish ham qiziqarli bo'lar edi, chunki bu LAIVning asosiy afzalliklaridan biridir. Xulosa qilib aytganda, bivalent elastazaga bog'liq LAIV Kanadaning g'arbiy qismida topilgan yangi klinik izolatlarga himoyani kengaytirdi va cho'chqa grippiga qarshi vaktsina bozoridagi ba'zi bo'shliqlarni to'ldiradi.

Muallif hissalari:

Konseptualizatsiya, YZ; metodologiya, YZ va LA; rasmiy tahlil, LA; tergov, LA va UB-C.; resurslar, SD; yozish - asl qoralama tayyorlash, LA; yozish— ko‘rib chiqish va tahrirlash, YZ, UB-C. va SD; nazorat, YZ; moliyalashtirish sotib olish, YZ Barcha mualliflar qo'lyozmaning nashr etilgan versiyasini o'qib chiqdi va rozi bo'ldi.

Moliyalashtirish:

Ushbu tadqiqot Qishloq xo'jaligini rivojlantirish jamg'armasi (ADF), Saskachevan qishloq xo'jaligi vazirligi tomonidan moliyalashtirildi. LA qisman Vaktsinologiya va Immunoterapevtika (V&I) stipendiyasi tomonidan Saskatchevan universiteti jamoat salomatligi maktabi tomonidan qo'llab-quvvatlanadi. VIDO Saskachevan hukumatidan Innovatsiyalar Saskachevan va Qishloq xo'jaligi vazirligi va Kanada Innovatsiya Jamg'armasidan CL3 ob'ekti (InterVac) uchun asosiy ilmiy tashabbuslar orqali operatsion moliyalashtiradi.

Institutsional nazorat kengashi bayonoti:

Qo'llanilmaydigan, qo'llab bo'lmaydigan.

Ma'lumotlar mavjudligi to'g'risidagi bayonot:

Ushbu tadqiqotning barcha ma'lumotlari va tahlillari ushbu maqolada keltirilgan.

Minnatdorchilik:

VIDO veterinariya shifokorlari va hayvonlar bo'yicha texnik xodimlarga bizning hayvonlarni sinovdan o'tkazish uchun barcha hayvonlar ishlarini bajarganliklari uchun minnatdorchilik bildiramiz. Ushbu asar VIDO direktorining ruxsati bilan №1005 qo'lyozma seriyasi sifatida nashr etilgan.

Manfaatlar to'qnashuvi:

Mualliflar manfaatlar to'qnashuvi yo'qligini e'lon qilmaydi.

Ma'lumotnomalar

Webster, RG Gripp virusi: Turlar o'rtasida yuqish va keyingi inson pandemiyasining paydo bo'lishi bilan bog'liqligi. Ark. Virol. Suppl. 1997, 13, 105–113. [PubMed]

2. Li, Y.; Robertson, I. Cho'chqa grippining epidemiologiyasi. Anim. Dis. 2021, 1, 21. [CrossRef] [PubMed]

3. Donovan, T. Grippning cho'chqa yetishtirishdagi roli; Minnesota universiteti: Minneapolis, MN, AQSh, 2005 yil.

4. Gracia, JCM; Pirs, DS; Masic, A.; Balash, M. Cho'chqada gripp A virusi: epidemiologiya, muammolar va emlash strategiyalari. Old. Veterinar - fan. 2020, 7, 647. [CrossRef] [PubMed]

5. Ma, W. Cho'chqa grippi virusi: hozirgi holat va muammo. Virus Res. 2020, 288, 198118. [CrossRef]

6. Suzuki, Y.; Ito, T.; Suzuki, T.; Gollandiya, RE; Chambers, TM; Kiso, M.; Ishida, X.; Kawaoka, Y. Sial kislotasi turlari gripp A viruslarining xost diapazonini belgilovchi sifatida. J. Virol. 2000, 74, 11825–11831. [CrossRef]

7. Quyosh, H.; Syao, Y.; Liu, J.; Vang, D.; Li, F.; Vang, C.; Li, C.; Chju, J.; Song, J.; Quyosh, H.; va boshqalar. Keng tarqalgan Evrosiyo parrandalarga o'xshash H1N1 cho'chqa grippi virusi, 2009 yildagi pandemik virusli genlar bilan inson infektsiyasini osonlashtiradi. Proc. Natl. akad. Sci. AQSh 2020, 117, 17204–17210. [CrossRef]

8. Genritsi, D.; Petrik, PP; Lyuis, NS; Graaf, A.; Pessiya, A.; Starik, E.; Breithaupt, A.; Strebelov, G.; Luttermann, C.; Parker, LMK; va boshqalar. Evropadagi cho'chqalar populyatsiyasini kuzatish potentsial zoonoz cho'chqa grippi A viruslarining paydo bo'layotgan rezervuarini aniqlaydi. Cell Host Microbe 2020, 28, 614–627.e6. [CrossRef]

9. Vinsent, AL; Ma, V.; Lager, KM; Janke, BH; Richt, JA cho'chqa grippi viruslari: Shimoliy Amerika nuqtai nazari. Adv. Virus Res. 2008, 72, 127–154.

10. Rajao, DS; Anderson, TK; Kitikoon, P.; Stratton, J.; Lyuis, NS; Vinsent, AL Qo'shma Shtatlardagi zamonaviy cho'chqa H1 grippi viruslarining antigenik va genetik evolyutsiyasi. Virusologiya 2018, 518, 45–54. [CrossRef]

11. Mena, I.; I Nelson, M.; Kezada-Monroy, F.; Dutta, J.; Kortes-Fernandes, R.; Lara-Puente, JH; Kastro-Peralta, F.; Kunha, LF; Trovão, NS; Lozano-Dyubernard, B.; va boshqalar. 2009 yilda Meksikada cho'chqalarda H1N1 grippi pandemiyasining kelib chiqishi. Elife 2016, 5, e16777. [CrossRef]

12. Nelson, MI; Kulhane, MR; Trovão, NS; Patnayak, DP; Halpin, RA; Lin, X.; Shilts, MH; Das, SR; Detmer, SE. Kanada va Qo'shma Shtatlardagi cho'chqalarda gripp A (H1) viruslarining paydo bo'lishi va evolyutsiyasi. J. General Virol. 2017, 98, 2663–2675. [CrossRef] [PubMed]

13. Chauxan, RP; Gordon, ML Dunyo bo'ylab cho'chqa populyatsiyasida gripp viruslarining tarqalishi va aylanishini tahlil qiluvchi tizimli tahlil. Patogenlar 2020, 9, 355. [CrossRef]

14. Landret, S.; Detmer, S.; Gerdts, V.; Zhou, Y. Ikki valentli jonli zaiflashtirilgan gripp virusi vaktsinasi cho'chqalarda H1N2 va H3N2 virusli infektsiyasidan himoya qiladi. veterinar. Mikrobiol. 2020, 253, 108968. [CrossRef] [PubMed]

15. Makkormik, K.; Jiang, Z.; Chju, L.; Lawson, SR; Langenhorst, R.; Ransburg, R.; Brunik, C.; Treysi, MC; Hurtig, HR; Mabee, LM; va boshqalar. Genetik jihatdan divergent gripp A H1N1 kichik viruslaridan olingan ximerik gemagglutinin genlarini o'z ichiga olgan rekombinant gripp A viruslarining tuzilishi va immunogenligini baholash. PLoS ONE 2015, 10, e0127649. [CrossRef] [PubMed]

For more information:1950477648nn@gmail.com