-Mangostinni yoshga qarshi zardob sifatida teriga yaxshi yetkazib berish uchun istiqbolli ultra-kichik bir qatlamli tashuvchi tizim 1-qism.

Abstrakt: Agar u o'z ta'sir joyiga samarali etkazib berilsa, -mangosten o'zining melanogenezni blokirovka qiluvchi faolligi tufayli yangi kosmetika ishlab chiqarish imkoniyatiga ega. Ushbu tadqiqot -mangostin uchun ultra-kichik bir qatlamli tashuvchi tizimni ishlab chiqish va uning in vivo jonli ravishda odamlarda yosh dog'iga qarshi sarum sifatida samaradorligini baholashga qaratilgan. Ultra-kichik bir qatlamli tashuvchi bazalar 25-faktorial dizayn yordamida optimallashtirilgan bo‘lib, besh omil (bokira kokos moyi, soya lesitini, Tween 80 va aralashtirish davomiyligi va tezligi) va ikki darajali (past va past) yuqori); tomchi hajmining javobi Design Expert 12® yordamida tahlil qilindi. Anti-spot tekshiruvi ketma-ket ikki hafta davomida tunda -mangosteen yuklangan ultra-kichik bir qatlamli tashuvchini topikal qo'llashdan keyin inson terisining raqamli tasvirlarini olish orqali o'tkazildi. Uning natijalari Motic Live Imaging 3.0 va standart qizil, yashil va ko‘k ball yordamida tahlil qilindi. Optimallashtirilgan sarum formulasi 2,3 foiz bokira kokos moyi, 1 foiz lesitin va 28,3 foiz Tween 80 (polisorbat 80) tarkibi bilan 15 daqiqa davomida daqiqada 1500 aylanish tezligida tasdiqlangan. Optimallashtirilgan bazaviy formulaga 3 foizli mangostin qo'shilishi 16,5 nm bo'lgan, zeta potentsiali -25,8 mV va polidispersiya indeksi 0,445 bo'lgan juda kichik bir qatlamli tashuvchi globulani hosil qildi. Mangostin yuklangan juda kichik bir qatlamli tashuvchining fizik tavsifi 90,94 foiz o'tkazuvchanlik, pH qiymati 6,5, yopishqoqligi 38 cP, solishtirma og'irligi 1,042 g/ml va 72,46 foiz tutilish samaradorligini o'z ichiga oladi. Transmissiya elektron mikroskopi tizimdagi sferik nanometrli tomchilarni tasdiqladi. Kechasi 2 hafta davomida ketma-ket mangosten yuklangan ultra-kichik bir qatlamli tashuvchini topikal qo'llash inson ko'ngillilarida dog'lar intensivligi va maydonini sezilarli darajada kamaytirish orqali ko'rsatilgan yoshga qarshi faollikni ko'rsatdi (p <0,05).

Sistanx glikozidi, shuningdek, yurak va jigar to'qimalarida SOD faolligini oshirishi va har bir to'qimalarda lipofusin va MDA tarkibini sezilarli darajada kamaytirishi, turli xil reaktiv kislorod radikallarini (OH-, H₂O₂ va boshqalar) samarali tozalash va DNKning shikastlanishidan himoya qilishi mumkin. OH-radikallar tomonidan. Cistanche feniletanoid glikozidlari erkin radikallarni mustahkam tozalash qobiliyatiga ega, S vitaminiga qaraganda yuqoriroq kamaytirish qobiliyatiga ega, sperma suspenziyasida SOD faolligini yaxshilaydi, MDA tarkibini kamaytiradi va sperma membranasi funktsiyasiga ma'lum bir himoya ta'siriga ega. Cistanche polisaxaridlari D-galaktoza sabab bo'lgan eksperimental qarigan sichqonlarning eritrotsitlari va o'pka to'qimalarida SOD va GSH-Px faolligini oshirishi, shuningdek o'pka va plazmadagi MDA va kollagen miqdorini kamaytirishi va elastin miqdorini oshirishi mumkin. DPPHga yaxshi tozalash ta'siri, qarigan sichqonlarda gipoksiya vaqtini uzaytirish, sarumdagi SOD faolligini yaxshilash va eksperimental qarigan sichqonlarda o'pkaning fiziologik degeneratsiyasini kechiktirish Hujayra morfologik degeneratsiyasi bilan tajribalar Cistanche yaxshi antioksidant qobiliyatiga ega ekanligini ko'rsatdi. va terining qarish kasalliklarini oldini olish va davolash uchun dori bo'lish potentsialiga ega. Shu bilan birga, Cistanchedagi echinacoside DPPH erkin radikallarini tozalashning muhim qobiliyatiga ega va reaktiv kislorod turlarini tozalashi va erkin radikallar keltirib chiqaradigan kollagen degradatsiyasini oldini olishi mumkin, shuningdek, timin erkin radikal anionining shikastlanishiga yaxshi ta'sir ko'rsatadi.

Cistanche Tubulosa qo'shimchasini bosing

【Batafsil ma'lumot uchun:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Kalit so'zlar: -mangustin; nanotashuvchi; o'ta kichik bir qatlamli tashuvchi; kosmetik sarum; nanoemulsiya

1.Kirish

Yosh dog'lari (jigar dog'lari) teri giperpigmentatsiyasining eng keng tarqalgan shaklidir [1]. Ular ko'p yillar davomida quyosh ta'sirida bo'lgan terida keng tarqalgan bo'lib, masalan, qo'llarning orqa qismi, oyoqlarning tepasi, yuz, yelka va orqa yuqori qismida va ko'pincha qarishning istalmagan belgisidir. Shunday qilib, turli xil samaradorlik va yon ta'sirga ega terini oqartiruvchi mahsulotlarning keng assortimenti mavjud. An'anaviy mahsulotlardan ko'ra kamroq vaqt ichida yuqori konsentratsiyali terini porlash effektini ta'minlaydigan optimallashtirilgan kosmetika mahsulotlarini ishlab chiqish doimiy e'tibordan iborat [2]. Yana bir e'tibor tabiiy kosmetika mahsulotlarini ishlab chiqishga qaratilgan, chunki ular ko'pincha jamoatchilik tomonidan ijobiy qabul qilinadi va shuning uchun marketing afzalliklarini ta'minlaydi. Fitokompunlar asosidagi formulani ishlab chiqishdagi qiyinchilik - bu faol moddani stratum corneum to'siq qatlami orqali uning maqsadli joylariga samarali etkazib berishdir [3]. Nanokosmetsevtikalar nisbatan oddiy qo'llash protseduralari va maqsadli etkazib berish potentsiali bilan terining yaxshi o'tkazuvchanligini ta'minlaydi. Fitokompunlar asosidagi nanokosmetik mahsulotlarga misollar [4-7] orasida E vitamini va D-pantenol Nanotopes™ [8,9] uchun preparatlar kiradi.

-mangostin (1,3,6, trihidroksi-7-metoksi-2,8-bis(3-metilbut-2-en-1-il){{ 10}}H-ksantan- 9-melanin hosil bo'lish jarayonini (qora dog'lar) inhibe qilish potentsialiga ega [10]. Murakkab tirozinaza faolligini bostirish orqali B16F1 melanoma hujayralariga qarshi kuchli anti-melanogen ta'sir ko'rsatdi. ferment, melanin sintezida muhim ferment va normal inson epidermal melanotsitlariga (NHEMs) pigmentatsiyani yo'qotish ta'sirini ko'rsatadi [11] Shuning uchun -mangostin kosmetika tarkibiy qismi yoki dog'lar, xloazmalarni davolash uchun dori sifatida ishlatilishi mumkin. , yoki melanoz.

Polifenolik birikma sifatida -mangostin oksidlanishga moyil bo'lib, teriga surtilganda samaradorlikni cheklashi mumkin. Shuning uchun samarali formulaga yondashuv teri o'tkazuvchanligini va faol birikmaning barqarorligini oshirishi kerak. Bir nechta yondashuvlar -mangostin [12], jumladan, lipozomalar [13], niosomalar [14] va proteazomalar [15] ning mustahkamligi va teriga yetkazib berilishini ko'rsatdi.

Bizning tadqiqotimiz ultra kichik bir qatlamli tashuvchi (USUC) matritsasiga qaratilgan: nanotashuvchi tizim NanotopeTM deb ham ataladi. Ushbu tizim boshqa bir qatlamli yoki ko'p qatlamli lipozomalarga (100-300 nm) nisbatan ancha kichikroq tomchi hajmi bilan tavsiflanadi ( 40 nm dan kam yoki unga teng). Kichikroq tomchilar yog'li faza, sirt faol moddasi, kosurfaktant va suvli fazaning qat'iy nisbati bilan ishlab chiqariladi; nisbatlar optimallashtirish protsedurasidan olinadi. USUCda dispers faza bir qatlamli fosfatidilxolin (sirt faol modda) bilan o'ralgan bo'lib, dispers muhitda kosurfaktan bilan barqarorlashadi [16]. Kichikroq tomchi kattaligi shox pardaga chuqur kirib borish uchun foydalidir [8].

Biz bu erda mangosten uchun USUC nanotashuvchi tizimini ishlab chiqish, jismoniy tavsiflash va inson ko'ngillilarida in vivo sinovini tasvirlaymiz. Formulani optimallashtirish 25-faktorli dizayn [6,17] yordamida amalga oshirildi va optimal tomchi hajmi va barqarorligi bilan sifatli USUCni ta'minlash uchun muhim edi.

2. Materiallar va usullar

2.1. Materiallar

-mangostin (tozaligi 90 foizdan katta yoki teng) Institut Technology Bandung (Mark Herb, Bandung, Indoneziya) dan sotib olingan. Boshqa tarkibiy qismlarga soya lesitini (oziq-ovqat mahsuloti; Shankar Soya Products, Indore, Hindiston), bokira kokos moyi (VCO; Wahana, Padang, Indoneziya) va Tween 80 (Bratachem, Jakarta, Indoneziya) kiradi. Boshqa barcha kimyoviy moddalar pro-tahlil darajasida edi.

2.2. Eksperimental dizayn

Optimallashtirish uchta tarkibiy oʻzgaruvchidan (Tween 80 (X1), soya lesitini (X2) va VCO (X3) kontsentratsiyasi) va ikkita jarayon oʻzgaruvchisidan iborat {0}} faktoriy dizayn yordamida amalga oshirildi: aralashtirish davomiyligi ( X4) va tezlik (X5) (ikki darajali - yuqori va past) [18]. 1-jadvalda tasvirlangan omillar va darajalardan foydalangan holda o'ttiz ikkita USUC bazaviy formulalari tayyorlandi. Bog'liq o'zgaruvchi USUC tomchilarining hajmi edi. Hajmi 0-40 nm oralig'ida talab qilingan [19]. Har bir o'zgaruvchining ta'siri va uning o'zaro ta'siri quyidagi ko'rinishdagi faktoriy tenglama yordamida aniqlandi:

2.3. USUC bazasi formulasini optimallashtirish

USUC asosiy formulalari o'z-o'zidan suvli fazali titrlash bilan tayyorlangan. Soya lesitini va Tween 80 magnit aralashtirgich bilan (IKA® C-MAG HS 7, Staufen, Germaniya) 75 ◦C haroratda aralashtiriladi, aralashtirish paytida VCO qo'shiladi. Shaffof eritma hosil bo'lguncha suv aralashga asta-sekin titrlanadi [8]. 32 ta asos zarrachalar o'lchami analizatori (Shimadzu SALD 2300, Tokio, Yaponiya) yordamida zarrachalar (tomchi) o'lchamlari bo'yicha tavsiflangan.

Ma'lumotlar Design Expert® 12-versiya kompyuter dasturidan (StatEase®, Minneapolis, MN, AQSh) foydalanib, faktoriy tenglamani qo'shilgan o'zaro ta'sirlarga moslashtirish va javobni tekshirilgan o'zgaruvchilar bilan bog'lash uchun tahlil qilindi [17]. Mustaqil o'zgaruvchilar orasidagi ta'sir va o'zaro ta'sir 3D sirt va kontur chizmalari bilan tasvirlangan [19].

-Mangostin USUCni tayyorlash

-mangostin (3% w/v) yuqorida aytib o'tilganidek, USUC tayyorlashdan oldin VCO da eritildi. VCO, soya lesitini va Tween 80 ning tarkibi va aralashtirish jarayonining shartlari optimallashtirilgan USUC bazasi [8,20,23] bilan bir xil edi.

2.4. Mangostin yuklangan USUC ning xarakteristikasi

2.4.1. Fizik-kimyoviy xossalari

USUCning tavsifi organoleptik tekshiruv, pH qiymati, foiz o'tkazuvchanligi, muzlatish va eritish davrlari orqali jismoniy barqarorlik, yopishqoqlik, o'ziga xos tortishish, tomchilar hajmi, polidisperslik indeksi (PDI) va zeta potentsialini o'z ichiga oladi [21,24,25]. USUC formulalarining pH qiymati avval kalibrlangan pH o'lchagich (Hanna Instrument, Woonsocket, RI, AQSh) yordamida o'lchandi. Bu oʻlchov haftada bir marta xona haroratida 8-hafta saqlash vaqtida amalga oshirildi [26]. O'tkazuvchanlik ultrabinafsha nurda ko'rinadigan spektrofotometr (SHIMADZU UV-1601, Tokio, Yaponiya) bilan 650 nm to'lqin uzunligida o'lchandi. 100 foizga yaqin o'tkazuvchanlik suyuqlik namunalarining shaffofligini ko'rsatadi [27,28].

USUC asoslarining jismoniy barqarorligi muzlash va eritish tsikli sinovi yordamida baholandi: USUClar 24 soat davomida -5 ◦C haroratda, keyin esa 25 ◦C da yana 24 soat davomida saqlanadi. Ushbu sinov uch tsikl uchun takrorlandi. PH, yopishqoqlik, o'ziga xos tortishish va o'tkazuvchanlik kabi USUC ning fizik-kimyoviy xususiyatlari uch tsikldan so'ng baholandi [29].

USUC asoslarining viskozitesi chashka va bob viskozimetri (Brookfield DV2T, Middleboro, MA, AQSh) bilan uch nusxada 100 rpm tezlikda 3-sonli mil yordamida o'lchandi. USUC asoslarining solishtirma og'irligi piknometr yordamida 25 ◦C [20,30] da aniqlandi.

Tomchi hajmi, polidisperslik indeksi (PDI) va -mangostin USUClarning zeta potentsiali zarracha o'lchami analizatori (HORIBA Scientific SZ-100, Kioto, Yaponiya) yordamida 25 ◦C [31] da aniqlandi.

2.4.2. Kapsülleme samaradorligini aniqlash (EE)

USUC formulasida saqlangan -mangostin miqdori -mangostin bilan to'ldirilgan USUCni etil asetat (1:2) bilan ekstraktsiyalash, so'ngra uni 10 daqiqa davomida sonikatsiya qilish orqali chiqariladi (Elmasonic S 80 (H), Singen, Germaniya) . Etil asetat eritmasidagi -mangostin kontsentratsiyasi tasdiqlangan spektrofotometrik analitik usul yordamida l max 314 nm [24] da o'lchandi.

Tuzilish samaradorligi (EE) quyidagi tenglama yordamida hisoblangan:

2.4.3. Transmissiya elektron mikroskopi (TEM) orqali mikroskopiy tahlil

Mangostin yuklangan USUC morfologiyasi TEM (JEOL JEM 1010, Tokio, Yaponiya) yordamida 80,0 KV va 30,{6}}x kattalashtirishda kuzatilgan. 10 mkl namuna panjara ustiga tushirildi, uranil asetat bilan bo'yaldi va quritildi. Kuzatish xona haroratida o'tkazildi [8,24,32].

2.4.4. Inson ko'ngillilarida Mangostin yuklangan USUCni vizual baholash

Yamoq sinovi 10 ko‘ngillining bilakning ichki terisida o‘tkazildi va teridagi qizil, qichishadigan toshmalar kabi potentsial tirnash xususiyati reaktsiyalarini tekshirish uchun 24 soatga qoldirildi. -mangostin USUC ning dog'larga qarshi ta'sirini tahlil qilish mos ravishda 57 va 40 yoshli 2 ayol ko'ngillida o'tkazildi. Tajriba Andalas universiteti Tibbiyot fakulteti tomonidan berilgan axloqiy ruxsatnoma (hujjat № 181/UN.16.2/KEP-FK/2020, 23-dekabr 2020) tomonidan amalga oshirildi. Mangosteen yuklangan USUC 2 hafta ketma-ket kechasi dog'lar va butun yuzga nozik tarzda surtilgan. Ikkala ko'ngilli ham ushbu tadqiqotda ishtirok etish uchun xabardor qilingan rozilikni to'ldirdi va sinov paytida yuzni oqartiruvchi kremni ishlatmaslikka rozi bo'ldi. Suratga olishdan oldin ko'ngillilar yuzlarini yog'siz bo'yanish tozalagich bilan tozalashdi. Ko'ngillilarning yuzlari davolanishdan oldin va keyin bitta linzali refleksli raqamli kamera (Nikon D 810, Melvill, NY, AQSh) yordamida suratga olingan. Har bir yuz tasviri 36 megapikselli va 7360 × 4912 o'lchamlari bilan jihozlangan kamera yordamida 30–40 sm masofadan olingan. Qora dog'larning intensivligi qizil, yashil va ko'k (RGB rang modeli) qiymatlarini o'lchash orqali tasdiqlangan. ) Windows va OS X uchun Adobe® Photoshop bilan (Microsoft Corp, Redmond, WA, AQSh). Qorong'u dog'larning o'lchami Motic Live Imaging 3.0 bilan jihozlangan mikroskop (Olympus, Ningbo, Xitoy) yordamida aniqlandi. [33–35].

2.5. Statistik tahlil

Ma'lumotlar o'rtacha ± standart og'ish sifatida ko'rsatilgan. Prognoz qilingan javobga nisbatan optimallashtirilgan formulani tasdiqlash uchun oddiy t-testi qo'llanildi; teri sharoitlari parametrlarida sezilarli yaxshilanishlarni aniqlash uchun juftlashtirilgan t-testi o'tkazildi. Ikki tomonlama ANOVA (=0.05) vosita o'rtasidagi sezilarli farqni aniqlash uchun ishlatilgan, so'ngra 5 foizlik muhimlik darajasida Dunkan ko'p diapazonli testi o'tkazildi [18].

3. Natijalar

3.1. Asosiy formulani optimallashtirish

32 ta USUC asosiy formulalari 2-jadvalda tasvirlanganidek, turli omillar bilan tayyorlangan. Javob o'zgaruvchisini o'lchash 11,3 nm–184,5 mkm gacha bo'lgan keng tomchi o'lchamini ko'rsatdi. Faqat oltita formulalar (F1, F3, F9, F12, F25 va F28) tomchilar hajmi 40 nm dan kam yoki unga teng bo'lgan USUC tizimining mezonlariga javob berdi [8]. 2-jadvaldagi ma'lumotlar Design Expert® dasturiy ta'minoti bilan qo'shimcha tahlil qilindi va optimallashtirilgan formulani aniqlash orqali regressiya modelini olish uchun.

3.2. Javob (Y): Mustaqil o'zgaruvchilarning zarrachalar hajmiga ta'siri

Javob (Y) sifatida tomchilar hajmini baholash amalga oshirildi. Eksperimental dizayn bosqichida beshta omil yoki mustaqil o'zgaruvchilar modellashtirildi, so'ngra tomchilar hajmi uchun javob yuzasi yaratildi. 1-rasmda mustaqil o'zgaruvchilarning zarrachalar hajmiga ta'sirining 3D javob-yuzali chizmalari tasvirlangan. Olingan faktoriy tenglama (3) tenglamada keltirilgan:

Tween 80 va soya lesitinining tarkibi yuqoriroq bo'lganida, tomchi o'lchamidagi javob oshdi (1a-rasm). VCO darajasini pasaytirish va Tween 80 darajasini oshirish 20-70 nm gacha bo'lgan tomchi o'lchamidagi javobga olib keldi (1b-rasm). Tween 80 va aralashtirish vaqti o'rtasidagi munosabatning tomchilar o'lchamiga ta'siri shuni ko'rsatdiki, uzoqroq aralashtirish vaqti 20-100 nm gacha bo'lgan tomchi o'lchamidagi javobga olib keldi (1c-rasm). 20,{15}} nm tomchi o'lchamiga javob 1200–1350 aylanish tezligi va 20 foiz Tween 80 tarkibi bilan erishildi. Tween 80 darajasining pastroq aralashtirish tezligi bilan oshishi tomchilar o'lchamidagi javobni ko'kdan yashilgacha bo'lgan hudud bilan ko'rsatilgan 80,000 nm gacha oshirdi (1d-rasm). Soya lesitini va VCO ning ko'payishi ko'kdan yashilgacha (50, 000-100, 000 nm) bilan belgilangan tomchi hajmining kattaroq qiymatlariga olib keldi (1e-rasm). Lesitin miqdorini ko'paytirish va aralashtirish vaqtini ko'paytirish ko'kdan yashil ranggacha (50,000–100,000 nm) bilan ko'rsatilgandek, kattaroq tomchi hajmiga olib keldi (1f-rasm). Yuqori aralashtirish tezligi bilan soya lesitini miqdorini oshirish, yashildan sariq ranggacha (50,000–150,000 nm) bilan belgilangan tomchi hajmini oshirdi (1g-rasm). VCO tarkibini va tomchilar o'lchamiga qarab aralashtirish vaqtini baholash shuni ko'rsatdiki, aralashtirish vaqti 15 minut va VCO darajasi<1.5% resulted in a droplet size of 40 nm (Figure 1h). The droplet-size profiles were varied,  with different levels of combination for both VCO versus stirring speed and stirring speed versus stirring time (Figure 1i,j).

3.3. Software Design Expert® tomonidan optimal formulani aniqlash

Tahlil kontur chizmalarini yaratish uchun Design Expert® yordamida amalga oshirildi. 2-rasmda sariq maydon optimal tayanch formulani bashorat qilish maydonini ifodalaydi, bunda tomchilar o'lchami javob beradi. Taxminiy optimal tayanch formula 28,2 Tween 80 foiz va 1 foiz soya lesitini konsentratsiyasida topildi, maqsadga muvofiqlik qiymati 1.00. 1 ga yaqin bo'lgan istalgan qiymat modelning optimallashtirilgan formulani ishlab chiqarish qobiliyatini ko'rsatadi. USUC bazasini ishlab chiqarish uchun optimallashtirilgan sharoitlar 15 daqiqa davomida 1500 rpm bo'lgan aralashtirish tezligi edi. Ushbu kompozitsiya va ushbu shartlar 34,04 nm prognoz qilingan javobni oldi. Tasdiqlash uchun optimallashtirilgan formulani tayyorlash (3-jadval) 36 nm bo'lgan tomchi hajmiga olib keldi, bu taxmin qilingan javobdan sezilarli darajada farq qilmaydi (p 0,05 dan katta yoki teng).

【Batafsil ma'lumot uchun:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】