Cistanche Tubulosa ning antigiperglisemik va gipolipidemik ta'siri

Aloqa: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Cistanche tubulosain turi 2 diabetik db / db sichqonlarining antihiperglisemik va hipolipidemik ta'siri

Wen-Ting Xiong va boshqalar

Abstrakt

Etnofarmakologik ahamiyatga ega:ning quritilgan suvli poyasiCistanchetubulosa (Schenk) R. Uayt qandli diabet uchun an'anaviy xitoy tabobati retseptlarining bir tarkibiy qismidir. Biroq, hozirgi kunga qadar Cistanche turlariga nisbatan bu an'anaviy da'voni tasdiqlash uchun nomodern ilmiy hisobotlar mavjud. Shunday qilib, ta'sirini o'rganib chiqdikCistanchetubulosaerkak BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J (db/db) sichqonlarida glyukoza gomeostazasi va sarum lipidlari bo'yicha, 2-toifa diabet modeli.

Materiallar va uslublar:Verbaskozid va echinacoside tarkibiCistanchetubulosakukun HPLC yordamida baholandi. Jami fenolik tarkibi, polisakkarid miqdori va antioksidant faolligiCistanchetubulosakukun ham baholandi. Keyin turli dozalardaCistanche tubulosa(120,9, 72,6 yoki 24,2 mg verbaskozid/kg ga ekvivalent) 45 kun davomida har kuni bir marta og'iz orqali erkaklar DB/dbmice uchun yuborilgan. Oddiy nazorat sifatida yoshga mos keladigan db/þ sichqonlari ishlatilgan. Tajriba davomida tana vazni, ochlikdagi glyukoza, ovqatdan keyingi qon glyukoza va insulin bardoshlik testlari o'lchandi. Qurbonlik paytida qon insulin darajasini o'lchash, insulin qarshiligining gomeostatik modelini baholash (HOMA-IR) va umumiy xolesterin, triglitseridlar, HDL-c, LDL-c va VLDL-c darajalarini o'lchash uchun to'plangan; jigar va mushak glikogen darajasini o'lchash uchun yig'ib olindi.

Natijalar: Cistanchetubulosaochlikdagi qondagi glyukoza va ovqatdan keyin qon glyukoza darajasini sezilarli darajada bostirdi, insulin qarshiligini va dislipidemiyani yaxshiladi va tana vaznining yo'qolishi indb / db sichqonchani bostirdi. Biroq,Cistanchetubulosaqon zardobidagi insulin darajasiga yoki jigar va mushak glikogen darajasiga sezilarli ta'sir ko'rsatmadi.

Xulosa:Ushbu tadqiqot an'anaviy foydalanish uchun ilmiy dalillarni taqdim etadiCistanchetubulosaqandli diabetni davolash uchun, buni taklif qiladiCistanchetubulosagiperglikemiyaning oldini olish va giperlipidemiyani davolash uchun funktsional oziq-ovqat tarkibiy qismi yoki preparatiga aylanish potentsialiga ega.

Kalit so‘zlar:Cistanchetubulosa, 2-toifa diabet,Anti-giperglisemik ta'sir, Gipolipidemik ta'sir

1.Kirish

Qandli diabet (DM) progressiv va murakkab metabolik kasallik bo'lib, u asosan g'ayritabiiy darajada yuqori qon glyukoza darajasi (giperglikemiya) bilan tavsiflanadi (Tiwari va Rao, 2002; Stumvollet boshq., 2005; Natan va boshq., 2009). Dunyo bo'ylab diabetga chalingan 347 million bemorning taxminan 90 foizi 2-toifa (insulinga bog'liq bo'lmagan) DMga ega (Danaei va boshq., 2011). 2-toifa DM bilan og'rigan bemorlarda uchta asosiy metabolik nuqson doimiy ravishda giperglikemiyaga yordam beradi: insulin etishmovchiligi, jigarda yuqori glyukoza chiqishi va insulin qarshiligi (Bavenholm va boshq., 2001). 2-toifa DM umr ko'rish davomiyligini qisqartirishi mumkin va muhim tibbiy va iqtisodiy yukni anglatadi (Gakidou va boshq., 2011)

2-toifa DM patogenezi ko'p faktorli bo'lib, genetik va turmush tarzi omillari bilan bog'liq (Stumvoll va boshq., 2005). Hayot tarziga aralashuvlar og'iz orqaliqarshigiperglikemikdorilar 2-toifa DMni davolashning odatiy usuli hisoblanadi. Og'iz orqali yuboriladigan dorilar ta'sir qiladiqarshi-giperglikemikGiperglikemiyani keltirib chiqaradigan uchta asosiy metabolik nuqsonni yaxshilash yoki ichakda uglevodlarning hazm bo'lishi va so'rilishiga to'sqinlik qilish orqali glikemiya darajasining postprandial o'sishini kamaytirish orqali ta'sir qiladi.

2-toifa diabet bilan og'rigan bemorlarning ko'pchiligida samarali dori-darmonlarning bir nechta sinflari tibbiy terapiya uchun tan olingan tanlovga aylangan bo'lsa-da, bu sintetik dorilarning bir nechtasi jiddiy yon ta'sirga ega. Masalan, rosiglitazon va pioglitazon miokard infarkti, konjestif yurak etishmovchiligi va periferik shishlar bilan kasallanish darajasini oshiradi va uzoq muddatli foydalanishdan keyin kanserogenez va hatto o'lim xavfi ortishi bilan bog'liq (Nissen va Wolski, 2007; Zhang va boshq., 2007; Home va boshqalar, 2009). Shuning uchun antihiperglisemik ta'sir ko'rsatadigan, ammo kamroq nojo'ya ta'sir ko'rsatadigan muqobil vositalarni topish juda muhim. Tabiiy kelib chiqadigan sintetik kimyoviy moddalar bilan taqqoslagandaantihiperglisemiko'tlar va an'anaviy dori vositalari kabi vositalar uzoq vaqtdan beri foydalanish tarixiga ega va umuman xavfsiz potentsial yangi manbalar bo'lishi mumkin.antihiperglisemikdorilar (Yeh va boshq., 2003).

Cistanche, Orobanchaceae oilasiga mansub parazit o'simliklarning jinsi, Xitoy Farmakopiyasi (Xitoy Farmakopeyasi Komissiyasi, 2010) ma'lumotlariga ko'ra, odatda davolovchi kasalliklar va bepushtlik uchun an'anaviy dori sifatida ishlatiladi. BenCao TuJing va Nature of Drug kabi Xitoy tibbiyoti kitoblarida qayd etilganidek, Cistanche jinsi ham yuzlab yillar davomida haddan tashqari kuchlanishdan kelib chiqqan zaiflikni davolash uchun tonik oziq-ovqat ishlab chiqarish uchun qo'y go'shti, kartoshka yoki guruch bilan qaynatilgan, bu Cistanche jinsi uchun xavfsiz ekanligini ko'rsatadi. og'zaki qabul qiling.

An'anaviy xitoy tabobatida DM "Xiao Ke" alomati deb ataladi va asrlar davomida xitoy o'tlari yordamida davolangan. Cistanche turining quritilgan shirali poyasi an'anaviy xitoy tibbiyoti kitobida "Sengji Zonglu"da qandli diabetga qarshi to'qqizta retseptning ("Xiao Ke Fang") tarkibiy qismi sifatida ishlatilgan. Biroq, hozirgi kunga qadar Cistanchespecies uchun bu an'anaviy da'voni tasdiqlovchi zamonaviy ilmiy hisobotlar mavjud emas.

Cistanchetubulosa(Schenk) R. Wight, asosan Taklamakan cho'lida yetishtiriladigan Tamarix o'simligining ildizlarida parazitlik qiluvchi Cistanche turi yaqinda funktsional oziq-ovqat sifatida foydalanish uchun eriydigan choy ishlab chiqarish uchun ishlatilgan (DaZhongWeiShengBao, 2010; Baidu Pedia, 2011) .

Cistanchetubulosatarkibida sezilarli miqdorda feniletanoid glikozidlar (PhG), iridoidlar, lignanlar, alditollar, oligosakkaridlar, polisakkaridlar va palmitatsid va linoleik kislota kabi uchuvchi birikmalar mavjud (Song va boshq., 2000; Jiang va Tu, 2009). Cistanche turlarining asosiy faol komponentlari PhGs hisoblanadi (Xie va boshq., 2006; Jiang va Tu, 2009).Cistanchetubulosava uning PhGs, polisakkaridlar va polifenollar kabi komponentlari yaxshi anti-oksidlanish xususiyatiga ega ekanligi xabar qilingan (Denget boshq., 2004; Pellati va boshq., 2004; Frum va boshq., 2007; Sui va boshq., 2011; Vang va boshq., 2011), anti-gipertenziya (Ahmad va boshq., 1995) va gipo xolesterin (Shimoda va boshq., 2009) ta'siri. Ko'pgina hisobotlar PhGs, polisaxaridlar va polifenollarning ta'sir qilishini ko'rsatdiantihiperglisemikErkin radikallarni tozalash va glyukoza sabab bo'lgan oksidlovchi stressni modulyatsiya qilish orqali 2 DM turiga ta'sir qiladi yoki foydali ta'sir ko'rsatadi (Pinto va boshq., 2010; Saltiel, 2001; Gulati va boshq., 2012). Ushbu komponentlar va bioaktivlikCistanchetubulosaU 2-toifa DMni davolash uchun ishlatilishi mumkinligini ko'rsatmoqda. ning ta'sirini tavsiflovchi hisobotlar yo'qligi sababliCistanchetubulosaDM ni davolashda diabetga qarshi faolligini o'rganishga arziydi.Cistanchetubulosa. Shunday qilib, biz ta'sirini ko'rib chiqdikCistanchetubulosaBKSdb/db sichqonlarda giperglikemiya va dislipidemiya bo'yicha (BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J, Jekson Laboratoriyasining stok raqami 00642), inson DM ning ko'plab xususiyatlarini aks ettiruvchi 2-toifa DM modeli, shu jumladan progressiv giperglikemiya va insulinga chidamlilik (insulin H) va boshqalar, 1966; Nishina va boshqalar, 1994; Uchida va boshqalar, 2005; Srinivasan va Ramarao, 2007).

2. Materiallar va usullar

2.1. Kimyoviy moddalar

Verbaskozid (tozaligi 493 foiz) va echinakozid (tozaligi 493 foiz) oziq-ovqat va giyohvand moddalarni nazorat qilish milliy institutidan (Pekin, Xitoy) xarid qilingan. HPLC sinfidagi metanol Sigma-Aldrichdan (Sent-Luis, MO, AQSh) sotib olindi. Akarboza Bayerdan (Vest Xeyven, CT, AQSh) sotib olingan. Tozalangan suv aMillipore Milli-Q Integral 3 System va Q-POD Milli-Q System (Bedford, MA, AQSh) yordamida ishlab chiqarilgan.

2.2. Cistanche tubulosa kukunini tayyorlash

ning quritilgan suvli poyalariCistanchetubulosa(Namuna kodi 109092, Xetian, Shinjon, Xitoy) Xinjiang Guru Biology Co. Ltd. (Xetian, Shinjon, Xitoy) dan sotib olindi. kukunni yorug'lik va namlikdan ajratib turadigan kichik paketlarda yaxshilab muhrlangan va 4 1C da saqlanadi.

2.3. Cistanche tubulosa ni aniqlash

109092 namunasining quritilgan shirali poyasi ularning morfologik xususiyatlaridan Cistanche turlari bo'yicha mutaxassislar bo'lgan professor DeXiang Gu va Prof.Sin Liu tomonidan aniqlangan. Namunalar keyinchalik DNK ketma-ketligi bilan aniqlandi. AxyPrep™ MultisourceGenomic DNK Kit (Axygen, CA, AQSH) yordamida 109 092 namunadan jami genomik DNK ajratildi. 5,8S rDNK fragmentini o'z ichiga olgan ITS hududi ITS1/ITS2 5′ CGT AAC AAG GTT TCC GTA GAA 3′ va 5′ TTA TTG ATA TGCTTA AAC TCA GCG GG 3′ (BGI Genomics,) ning primer ketma-ketligi yordamida kuchaytirildi. Shenzhen, Xitoy), Schneeweiss va boshqalar tomonidan tasvirlangan usul bilan. (Schneeweiss va boshqalar, 2004). Amplifikatsiya qilingan DNK BGI (BGI Genomics, Shenzhen, Xitoy) tomonidan ketma-ketlashtirildi va natija bilan solishtirildi.CistanchetubulosaGenBankdagi 5.8s rDNK ketma-ketligi.

2.4. HPLC tahlili

Ikkita PhG, echinacoside va verbascoside, sifat standartlari sifatida ishlatilganCistanchetubulosa, Xitoy farmakopiyasiga ko'ra (Xitoy farmakopeyasi komissiyasi, 2010). HPLC PhG ni sifat va miqdoriy aniqlashda eng ko'p qo'llaniladigan hisoblanadi. Shunday qilib, ning verbaskozid va echinacoside tarkibiCistanchetubulosaBizning ilgari nashr etilgan HPLC usulimiz asosida aniqlangan (Zhao va boshq., 2011). Qisqacha aytganda, 0,1 gCistanchetubulosakukun 1{{10}} ml tozalangan suvga qo‘shildi va orbital shakerda (Vortex-Genie 2, Scientific Industries, Bohemia, Nyu-York, AQSH) 10 intensiv vorteks bilan aralashtirildi. xona haroratida min. Qattiq modda ikki marta bir xil sharoitda qayta ekstraksiya qilingan. Ekstraktlar birlashtirildi, 50 ml ga o'rnatildi va 12,{8}}g 5 daqiqa davomida santrifüj qilindi. Supernatant 0,45 mikron gözenekli politetrafloroetilen (PTFE) shprits filtri (Pall, Enn Arbor, MI, AQSh) orqali filtrlandi. Keyin, 20 ul supernatant HPLC tizimiga yuborildi (Binary HPLC Pump 1525, Refractive Index Detector 2414, Photodiode Array Detector 2996; Waters, Milford, MA, AQSH), unda Symmetry C18 ustuni (4,6 mm 250 mm; Suvlar) va gvardiya ustuni (3,9 mm 20 mm, 5 mm; Suvlar); tizim EmpowerPros dasturi yordamida (Waters, Milford, MA, AQSh) 30 1C da 1 ml/min oqim tezligi bilan boshqarildi. Mobil faza hal qiluvchi A (0,5 foiz (V/V) sirka kislotasi suvli eritmasi) va erituvchi B (metanol) ni aralashtirish orqali 0-10 daqiqada 25-40 foiz B chiziqli gradient hosil qilish orqali amalga oshirildi. Ekinakozid va verbaskozidni ushlab turish vaqti 330 nm maksimal ultrabinafsha nurlanishida 10,4 daqiqa va 13,6 minutni tashkil etdi.

2.5. Cistanche tubulosa ning umumiy fenolik tarkibi, polisakkarid tarkibi va antioksidant faolligini tahlil qilish.

2.5.1. Namuna tayyorlash

Cistanchetubulosaekstrakt tozalangan suv bilan oldindan chop etilgan usulimiz yordamida (Zhao va boshq., 2011) kichik o'zgarishlar bilan, umumiy fenolik tarkibni, polisakkarid miqdorini va antioksidant faollikni aniqlash uchun tayyorlangan (1-rasm). Qisqacha aytganda, 1 gCistanchetubulosakukun xona haroratida 15 ml tozalangan suvga qo'shildi, 5 daqiqa davomida orbital chayqatish vositasi yordamida intensiv vorteks bilan aralashtirildi va supernatant 15 daqiqa davomida 3{7}}00 g tsentrifugalash orqali qaytarildi. Xuddi shu sharoitda yog'ingarchilik ikki marta qayta olindi. Birlashtirilgan supernatant tozalangan suv bilan 50 ml ga o'rnatildi va tahlil qilishdan oldin 0,45 mkm teshikli PTFE shprits filtridan (Pall) o'tkazildi.

2.5.2. Jami fenolik tarkibini tahlil qilish

Umumiy fenolik tarkib Singleton va Rossi (Dubois va boshq., 1956; Singleton va Rossi, 1965) tomonidan ta'riflanganidek, mos yozuvlar birikmasi sifatida Folin-Ciocalteureagent va gallik kislota yordamida kichik o'zgarishlar bilan aniqlangan. Qisqacha aytganda, 0.1 mlCistanchetubulosaekstrakt {0}},9 ml tozalangan suv va 5 ml Folin-Ciocalteu reagenti (ilgari distillangan suv bilan 10- barobar suyultirilgan) bilan aralashtirilib, 25 1C haroratda turishga ruxsat berildi. 3,5 daqiqa, so'ngra aralashmaga 4 ml natriybikarbonat (7,5 foiz og'irlik/v) eritmasi qo'shildi va {{10}}C da 60 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi. Absorbsiya spektrofotometr yordamida 765 nm da o'lchandi (Perkin Elmer l 25 UV – ko'rinadigan, Waltham, MA, AQSh). Umumiy fenolik tarkib gallik kislota (0-0,6 mg/ml) bilan yaratilgan standart egri chiziq yordamida aniqlandi. Natijalar milligramm gallik kislota ekvivalenti (GAE)/1 g sifatida hisoblanganCistanchetubulosaxom kukun. Barcha testlar to'rt marta takrorlandi.

2.5.3. Polisaxaridlar tarkibini tahlil qilish

Polisaxarid tarkibiCistanchetubulosafenol-sulfat kislota usuli bilan o'lchangan (Dubois va boshq., 1951; Duboiset boshq., 1956). Qisqacha aytganda, 1 ml mos ravishda suyultirilgan Cistanchetubulosa ekstrakti va 0,5 ml fenol eritmasi vintli qopqoqli naychalarga solingan, ular yopilgan va vorteks bilan aralashtiriladi. Keyin 5 soniya ichida suyuqlik yuzasiga 2,5 ml konsentrlangan sulfat kislota qo'shildi. Keyin naychalar yopildi, vorteks 5 soniya davomida aralashtirildi, 2 daqiqa davomida 100 1C da inkubatsiya qilindi va tahlil qilishdan oldin xona haroratiga qadar sovushiga ruxsat berildi. Absorbsiya spektrofotometr (Perkin Elmer l25 UV – ko‘rinadigan) yordamida 490 nm da 70 foizli metanol blankasiga nisbatan o‘lchandi. Polisaxarid tarkibi standart sifatida glyukoza (0-100 mg/ml) bilan yaratilgan standart egri chiziq yordamida aniqlandi. Natijalar polisakkarid foiz sifatida hisoblandi/Cistanchetubulosaxom kukun. Barcha testlar uch marta takrorlandi.

2.5.4. Umumiy antioksidant faolligini tahlil qilish

ning antioksidant faolligiCistanchetubulosaekstrakti, akarboza va rosiglitazon 2,2′-amino-di(2-etilbenzotiyazolin sulfonik kislota-6)ammoniy tuzi (ABTS) va temir ionini (Fe3+) kamaytiruvchi antioksidant kuch tahlili bilan aniqlandi. FRAP) tijorat to'plamlari yordamida (Beyotime, Haimen, Xitoy). Tegishli oksidlovchilar bilan ABTS yashil ABTS ga oksidlanishi mumkin; antioksidantlar bu jarayonni inhibe qilishi mumkin. Antioksidantlarning umumiy antioksidant faolligi 734 nm da ABTS y ning absorbsiyasi bilan aks ettirilishi mumkin. Absorbsiya Trolox (ABTS) bilan mikroplatereader (Epoch, Bio-Tek, Richmond, VT, AQSh) yordamida 734 nm (ABTS) da o‘lchandi. antioksidant standarti. ABTS tahlili natijalari mM Trolox ekvivalent antioksidant sig'imi (TEAC)/1 g kukun sifatida hisoblangan.

Kislotali sharoitda antioksidantlar ferriktripiridiltriazinni (Fe3+-TPTZ) ko‘k Fe2+-TPTZ ga qaytarishi mumkin. Antioksidantlarning umumiy antioksidant faolligi Fe2+-TPTZ ning 593 nm da absorbansi bilan aks ettirilishi mumkin. Absorbsiya 593 nm (FRAP) da antioksidant standart sifatida FeSO4 (FRAP) bilan mikroplata o'quvchi (Epoch) yordamida o'lchandi. FRAP tahlili natijalari mM FeSO4 ekvivalent antioksidant sig'imi (FEAC)/1 g kukun sifatida hisoblangan. Barcha testlar to'rt marta takrorlandi.

2.6. Cistanche tubulosa ning db / db sichqonlarida giperglikemiyaga ta'siri

2.6.1. Hayvonlar va davolash guruhlari

Erkak BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J (db/db) sichqonlari va ularning yoshiga mos diabetga chalingan bo'lmagan geterozigota bolalari (db/þ) mutant sichqonlar modeli bo'yicha Milliy Resurs Markazi tomonidan 5-6 haftalik yoshda taqdim etilgan. Nankin universiteti hayvonlar tadqiqot markazi (Nankin, Xitoy). Hayvonlarni parvarish qilish va eksperimental protseduralar Sun Yat-sen universiteti Hayot fanlari fakultetining Laboratoriya hayvonlar etikasi qo'mitasi tomonidan tasdiqlangan (tasdiqlash kodi 0046500) va Xitoyning Hayvonlar ustida tajriba o'tkazish qoidalariga muvofiq amalga oshirilgan. Hayvonlar 6075 foiz namlikda, 12 soat yorug‘lik-qorong‘u tsiklda 2272 1S o‘ziga xos patogensiz (SPF) xonaga joylashtirildi va tozalangan AIN-93G dietasi (trofik hayvonlar ozuqasi yuqori) bilan oziqlandi. tech Co., Ltd., Nantong, Xitoy) va tozalangan suvni ad libitum bilan ta'minladi.

Yetti kun o'tgach, diabetga chalingan bo'lmagan db / t sichqonlarga qandli diabet guruhlari (n=7) uchun normal nazorat guruhi sifatida tozalangan suv (avtomobil) berildi, diabetik db / db sichqonlari esa o'lchandi va tekshirish uchun tasodifiy 6 guruhga (n=8) bo'lingan. ning ta'siriCistanchetubulosa2-toifa diabetik db / db sichqonlarida (1-jadval). Thedb/þ sichqonlarga og'iz orqali vosita, db/db sichqonlari esa vosita, rosiglitazon (0.52 mg/kg/kun), akarboza (19,5 mg/kg/kun) yoki uch dozada og'iz orqali yuborilgan.Cistanchetubulosa(120,9, 72,6 yoki 24,2 mg verbaskozid/kg/kunga ekvivalent va mos ravishda CT120,9, CT72,6 yoki CT24,2 deb ataladi) 45 kunlik muddat uchun. ning dozalariCistanchetubulosaXitoy Xalq Respublikasi Farmakopiyasi (PPRC) tomonidan tavsiya etilgan xom kukun dozasiga muvofiq o'rnatildi;Cistanchetubulosa120,9, 72,6 va 24,2 mg verbaskozid/kg/kun dozalari PPRC tomonidan tavsiya etilgan xom kukun dozasining 5-katta, 3- va 1- barobar suyultirishlariga mos keladi. Bir xil tana vazniga ega bo'lgan sichqonlarga o'xshash hajmdagi sinov namunalarini yuborish uchun oral qabul qilish uchun barcha sinov namunalari mos konsentratsiyalarda tozalangan suvda eritildi. Qo'llaniladigan umumiy hajm o1 ml ni tashkil etdi va sinov namunalari sichqonlarning har bir guruhiga har kuni 16:30 dan 17:30 gacha 45 kun davomida og'iz orqali yuborildi. Tajriba davomida tana vazni va qondagi glyukoza darajasi nazorat qilindi. Tajriba oxirida (50-kun) sichqonlar 14 soat ro‘za tutishdi va qon namunalari oftalmik venadan olindi, xona haroratida 30 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi, santrifuga qilindi va sarum namunalari 70 1C haroratda saqlanadi. qo'shimcha tahlil. Keyinchalik sichqonlar evtanizatsiya qilindi. Jigar va skelet mushaklari yig'ib olindi, qonni olib tashlash uchun muzli tuzli eritmada yuvildi, suyuq azotda muzlatib qo'yildi va keyingi tahlil uchun 70 1C da saqlanadi.

2.6.2. Ro'za qon glyukoza darajasini (FBG), interperitonealinsulin bardoshlik testini (ITT) va ochlik zardobidagi insulin darajasini (FINS) tahlil qilish

Hayvonlar tajribasi boshlanishidan 14 soat oldin (0 kun), 1{{10}} kuni va tajribaning 20-45-kunlari davomida har 5 kunda ochlikdagi qondagi glyukoza darajasi o‘lchandi. qon glyukoza monitoringi tizimidan foydalanish (ACCU-CHEK Active, Roche DiagnosticsGmbH, Mannheim, Germaniya). X (20-45-kun) kunlarda FBG qiymatlaridagi foiz o'sishi (FBG foiz o'sishi qiymatlari: FBG-o'sish foizi) har bir kun uchun FBG qiymatlarining o'sishini ifodalash uchun (BGday x BGday 0)/BG0 100-kun yordamida hisoblangan. guruhning dastlabki FBG qiymatlari bilan solishtirganda. Ovqatdan keyin qondagi glyukoza darajasi 40-kuni glyukoza og'iz orqali qabul qilinganidan keyin (2 g / kg BW) 120 daqiqadan so'ng aniqlandi.

ITT eksperimentning 45-kuni, bir kecha-kunduz ro'za tutishdan keyin (14 soat) o'tkazildi. Quyruq venasining qondagi glyukoza darajasi insulinni yuborishdan oldin (0 min) va qorin bo'shlig'iga insulin yuborilgandan keyin 3{6}} min,60 daqiqada (0,1 IU/kg BW) o'lchandi. ITT trapezoid qoida yordamida hisoblangan insulin (AUCinsulin) uchun egri chiziqlar ostida birlashtirilgan maydonlar sifatida ifodalangan (Vishwakarma va boshq., 2003). Tajriba oxirida qon zardobidagi insulin darajasi Millipore (Bedford, MA, AQSh) kompaniyasining kalamush/sichqoncha insulin Elishay to'plami yordamida tahlil qilindi; sarum namunalari to'plamdagi ko'rsatmalarga muvofiq tayyorlangan. Insulin qarshiligining gomeostatik modeli (HOMA-IR) indeksi quyidagi formula bo'yicha hisoblab chiqilgan: HOMA-IR¼ ochlik insulini (ng/ml) och qoringa glyukoza (mmol/L)/22,5 (Metyus va boshq., 1985).

2.6.3. Sarum lipid darajasini tahlil qilish

Sarumdagi umumiy xolesterin (TC), yuqori zichlikdagi lipoprotein xolesterin (HDL-c) va triglitseridlar (TG) kontsentratsiyasi tijorat enzimatik to'plamlar (Biosino Biotechnology & Science Inc., Pekin, Xitoy) yordamida aniqlandi. Past zichlikdagi lipoprotein xolesterin (LDL-c) darajalari TC-TG/5 – HDL-c sifatida, juda past zichlikdagi lipoprotein xolesterin (VLDL-c) esa Fridevald tenglamasiga (Fridevald) muvofiq TG/5 sifatida hisoblangan. va boshq., 1972).Aterogen indeks (TC HDL-c)/HDL-c sifatida hisoblangan.

2.6.4. Jigar va skelet mushaklari glikogen darajasini tahlil qilish

Muzlatilgan jigar va skelet mushaklari 70 1C muzlatgichlaridan chiqarilgandan so'ng darhol glikogenanaliz uchun qayta ishlandi. Jigar va skelet mushaklaridagi glikogen miqdori Keppler va Deker usuliga asoslangan tijorat glikogen to'plamini (Jiancheng, Nankin, Xitoy) o'lchadi (Keppler va Decker, 1974). Namunalarning 505 nm da so'rilishi quvurlarni xona haroratiga sovutgandan so'ng o'lchandi. Har bir to'qima namunasidagi glikogen miqdori har bir g to'qima uchun mg glyukoza sifatida ifodalangan.

2.7. Statistik tahlil

Barcha natijalar o'rtacha 7SEM sifatida ifodalangan va Social Science Software (SPSS 16.0, Chicago, IL, USA) yoki GraphPad Prism 5 (La Jolla, CA, AQSH) statistik paketlarining ANOVA bilan tahlil qilingan. HOMA-IR indekslari, shuningdek, logarifmik transformatsiyadan so'ng ikkita namunali mustaqil t-testi yordamida baholandi. AUC qiymatlari GraphPad Prism 5 yordamida hisoblangan. 0.05 dan kam bo'lgan P qiymatlari statistik jihatdan ahamiyatli farqlarni ko'rsatish uchun qabul qilingan.

3. Natijalar

3.1. Cistanche namunasini aniqlash

Ketma-ketlikni moslashtirish natijalari kuchaytirilgan ketma-ketlikning bir xil ekanligini ko'rsatadiCistanche tubulosa5,8S rDNKning qisman va to'liq ketma-ketligi uchun genlar (614 nukleotid; Gen-Bank kirish raqamiAB217871). Uning morfologik xususiyatlari va 5.8S rDNK gen ketma-ketligi asosida 109,092 namunasi aniqlangan.Cistanchetubulosa.

3.2. Cistanche tubulosa ning verbaskozid va exinakozid tarkibini miqdoriy aniqlash.

Verbaskozid va echinacoside tarkibiCistanchetubulosategishli standartlardan foydalangan holda miqdoriy aniqlangan. Theverbascoside va echinacoside tarkibiCistanchetubulosamos ravishda 2,66 va 11,59 foizni tashkil etdi. HPLC xromatogrammasiCistanchetubulosaekstrakti 2-rasmda ko'rsatilgan.

3.3. Cistanche tubulosa ning umumiy fenolik tarkibi, polisakkarid miqdori va antioksidant faolligi

Jami fenolik tarkibiCistanchetubulosa66,2970,44 mg GA/g ni tashkil etdi. Polisaxarid tarkibiCistanche tubulalari edi10,1570,26 foiz. ABTS va FRAP tahlillari antioksidant faolligi 1,3970,06 mM TEAC/g va 1,6170,04 mM FEAC/g ekanligini ko'rsatdi.Cistanchetubulosa, {0}},1570.01 mM TEAC/gand 0,1270,01 mM FEAC/g akarboza uchun va 0,1670,01 mMTEAC/g va 0,1370,01 mM Rosiglitazon uchun FEAC/g mos ravishda.

3.4. Db/db sichqonlarda Cistanche tubulosa ning anti-giperglisemik ta'siri

Bizning natijalar shuni ko'rsatdiCistanche tubulosaQandli diabetga chalingan sichqonlarning ochlikdagi glyukoza darajasini va ovqatdan so'ng qondagi glyukoza darajasini bostirishi, insulin sezgirligini oshirishi va tana vaznining (BW) yo'qolishini susaytirishi mumkin. Umuman,CistanchetubulosaTajriba davomida giperglisemiatan akarboza darajasini pasaytirishda samaraliroq bo'ldi, bundan tashqari, Cistanche tubulosa insulin qarshiligini yaxshilash uchun akarbozadan ustun edi (p qiymatlari quyida ko'rsatilgan).

3.4.1. Cistanche tubulosa ning tana va jigar vazniga ta'siri

Qandli diabetni nazorat qilish guruhida qon bosimi birinchi 25 kun ichida doimiy ravishda oshadi. Biroq, qandli diabetning rivojlanishi bilan diabetni nazorat qiluvchi sichqonlarning BW darajasi 30-kunga qadar bir oz kamaydi (1-jadval). InCistanchetubulosaguruhlar, barcha uch dozaCistanchetubulosadiabetik nazorat sichqonlari bilan solishtirganda vazn yo'qotish tezligini kamaytirdi (ahamiyatsiz, qo'shimcha 1-jadval). Ijobiy nazorat guruhida rosiglitazon diabetik nazorat guruhiga nisbatan 20 kundan boshlab tana vaznining sezilarli darajada oshishiga olib keldi (po0.05). Aksincha, akarboza diabetik nazorat guruhiga qaraganda vazn yo'qotish tezligini sekinlashtirdi. Oddiy nazorat guruhida tana vazni tajriba davomida doimiy ravishda oshib bordi va diabetik nazorat guruhidan (po0.001) sezilarli darajada past edi.

Tajriba oxirida jigar vazni va jigar/tana vazni nisbati diabetik nazorat guruhiga nisbatan rosiglitazon guruhida (po0.001) faqat sezilarli darajada oshdi.

3.4.2. Cistanche tubulosa ning qon glyukoza darajasiga ta'siri

Cistanchetubulosako'rsatilganantihiperglisemikindb/db sichqonlarga 20 kunlik og'iz orqali yuborishdan so'ng ta'sir qiladi va FBG darajasini va FBG darajasini nazorat qilishi mumkin - dozaga bog'liq holda, uzoq vaqt davomida db/db sichqonchada foiz qiymatini oshirish, ochlik va ovqatdan keyin sezilarli darajada pasayganidan dalolat beradi. qon glyukoza darajasi (3-rasm, 2-jadval). Diabetik nazorat guruhida FBG darajasi eksperiment davomida doimiy ravishda oshib bordi va 45-kuni odatdagi nazorat guruhidan taxminan 6 baravar yuqori bo'ldi (28,3071,027 mmol / L va 4,6670,350 mmol / L; po0,001). Barcha uch dozaCistanchetubulosaCT120.9 kuchli gipoglisemik ta'sirni ko'rsatdi (20, 35 va 45-kun: po{{1{{) bilan butun tajriba davomida FBG ning db/db sichqonchani oshirish tendentsiyasini sezilarli darajada inhibe qildi. 16}}}}.001; 4-kun0: po0.05 qandli diabetga qarshi nazorat). Ijobiy nazorat guruhlarida rosiglitazon (0,52 mg/kg) va akarboza (19,5 mg/kg) butun tajriba davomida (2-kun{{41}) sichqonlarda JB/DB ning ko'payishi tendentsiyasini sezilarli darajada inhibe qildi. } dan 45 gacha: po0.001, 10-kun: po0.05, rosiglitazonevlar. diabetik nazorat; 35-kun: po0.001, 40-kun: po0.01, 20 va 45-kun: po0. 05, akarboza va diabetik nazorat). Biroq, akarboza (19,5 mg/kg) rosiglitazon (20-kun: po0.05; 30-kun: po0.01; 35-45-kun: po0.001) va CT120.9 (45-kun: po0.001) dan kam samaraliroq edi. . Oddiy nazorat guruhida FBG darajasi butun tajriba davomida doimiy bo'lib qoldi va diabetik nazorat guruhidan (po0,001) sezilarli darajada past edi.

20 kun davomida qabul qilingandan so'ng,Cistanche tubulosadb / db sichqonlarda qon glyukoza darajasining oshishini sezilarli darajada inhibe qildi (3-rasm). Tajriba davomida diabetik nazorat guruhi va akarboza (19,5 mg/kg BW) guruhidagi FBG ortishi foiz qiymatlari oshdi. FBG-uchlikning foiz qiymatlarini oshiradiCistanchetubulosaguruhlar faqat 30-kunda bir oz oshdi. CT120.9 guruhining FBG ortish foiz koʻrsatkichlari 30-kun va 45-kun oraligʻida oʻzgarmas boʻlib qoldi, CT72.6 va CT24.2 esa 45-kunga qadar (p40.05) sezilarli darajada oshmadi. tajriba, ning uchta dozasiCistanchetubulosa(CT120.9, CT72.6 va CT24.2) diabetik nazorat guruhiga (PO{{) nisbatan FBG o'sish foiz qiymatlarining 181,5 foiz, 151,72 va 123,58 foizga o'sishini sezilarli darajada bostirdi. 24}}.001), mos ravishda. 20 kundan 40 kungacha uchta Cistanche tubulosa guruhining FBG o'sish foizi akarboza guruhidan past yoki shunga o'xshash edi (p40.05). 45-kuni, CT120.9 guruhidagi FBG o'sish foizi akarboza guruhidan (po0.01) sezilarli darajada past edi.

Cistanchetubulosadozaga bog'liq bo'lgan gipoglikemik ta'sirlar (2-jadval). Tajriba oxirida CT120.9 guruhidagi FBG darajalari diabetik nazorat, akarboza va boshqa ikkitadan sezilarli darajada past edi.Cistanchetubulosaguruhlar (CT12{6}}.9 va akarboza, CT72.6 va CT24.2, po0.01; CT120.9 va diabetik nazorat, po0.001; 2-jadval). Tajriba oxiriga kelib, uchta FBG darajasiCistanchetubulosaguruhlari (CT120.9, CT72.6 va CT24.2) dastlabki FBG darajalariga nisbatan mos ravishda 53,41 foizga, 83,19 foizga va 111,33 foizga oshdi, diabetik nazorat guruhi va akarboza guruhidagi FBG darajalari esa 234,91 ga oshdi. foiz va 150,76 foiz. Sinov qilingan uchta Cistanche tubulosa dozasidan faqat CT120.9 butun tajriba davomida FBG darajasini doimiy ravishda pasaytirishga olib keldi. CT72.6 va CT24.2 CT120.9 ga qaraganda FBG darajasini pasaytirishda unchalik samarali emas edi (2-jadval, qo'shimcha 1-rasm). CT120.9 guruhidagi FBG darajalari faqat 30-kundan boshlab oshdi, qolgan ikkitasida FBG darajasiCistanchetubulosaguruhlari va akarboza guruhi tezroq ko'paydi. 10 kundan 40 kungacha FBG darajasi uchinchi darajaga etadiCistanchetubulosaguruhlar karboza guruhidan pastroq yoki o'xshash edi (19,5 mg / kg BW); bu farqlar statistik ahamiyatga ega emas edi (p40.05).

40 kuni CT120.9 ovqatdan keyin qon glyukoza darajasining oshishini sezilarli darajada bostirdi (po0,05, 2-jadval) glyukozaning bir martalik og'iz dozasi (2 g/kg) keyin 2 soat. CT120.9 ning DB/DB sichqonlarda ovqatdan keyin qon glyukoza darajasiga ta'siri 19,5 mg/kg akarboza bilan solishtirish mumkin edi (p40,05). CT72.9 va CT24.2 ning ta'siri rosiglitazondan (po0.001) kam samarali edi.

3.4.3. Cistanche tubulosa ning ro'za zardobidagi insulin darajasiga va qorin bo'shlig'idagi insulin tolerantligiga ta'siri

FINS natijalari shuni ko'rsatdiki, 45 kun davomida og'iz orqali qabul qilinganidan so'ng, CT12{9}}.9 sichqonlarda db/db sichqonlarda qon zardobidagi insulin darajasini (p40,05) 40,73 foizga, rosiglitazon esa sarum insulin darajasini 58,90 foizga sezilarli darajada oshirgan. foiz (po0,05 va diabetik nazorat; 3-jadval).

HOMA-IR indeksi insulin qarshiligi va etishmovchilik hujayra funktsiyasining ochlik giperglikemiyasiga qo'shgan hissasini miqdoriy baholash uchun hisoblab chiqilgan. Qandli diabetni nazorat qilish guruhi bilan taqqoslaganda, CT12{12}}.9 HOMA-IR tizimlisinsulin sezuvchanlik indeksini 15,30 foizga (p40,05), rosiglitazon esa HOMA-IR indeksini 35,30 foizga (PO0.0) sezilarli darajada yaxshilagan. diabetik nazorat; 3-jadval). ning ta'sirini baholash uchun ITT ishlatilganCistanchetubulosaekzogen insulin in'ektsiyasidan keyin insulinga sezgirlik bo'yicha. Natijalar shuni ko'rsatdiki, CT12{6}}.9 diabetga chalingan DB/db sichqonlarda insulin javobini yaxshilagan. CT120.9 ning ta'siri rosiglitazon bilan solishtirish mumkin edi va akarbozadan ustun edi. inyeksiya,po0.001 va diabetik nazorat) va 30 min (po0,01 CT120,9, po0,001 uchun rosiglitazon) insulin in'ektsiyasidan keyin (4-rasm). CT120.9 va rosiglitazon diabetik nazorat bilan solishtirganda AUCinsulinni 27,92 foizga va 43,89 foizga kamaytirdi. ITT davomida istalgan vaqtda CT120.9 va rosiglitazon guruhlarida qondagi glyukoza darajasi o'rtasida sezilarli farq yo'q edi. CT120.9 guruhidagi qon glyukoza darajasi akarbozadan 0 daqiqada (insulinni yuborishdan oldin, po0.01: CT120.9 va akarboza), 30 daqiqada (po0.01: CT120.9 va akarbozaga qarshi) va 60 dan sezilarli darajada past edi. daqiqa (po0,05: CT120,9 va akarboza) insulin kiritilgandan keyin (4-rasm). CT120.9 akarboza bilan solishtirganda AUCinsulinni 28,79 foizga kamaytirdi. Acarbose, CT72.6 va CT24.2 ITTning istalgan vaqtida AUCinsulin yoki qon glyukoza darajasiga sezilarli ta'sir ko'rsatmadi. Oddiy nazorat guruhining FIN va ITT natijalari diabetik nazorat guruhiga qaraganda ancha past edi (po0.05: FIN; po0.001: ITT).

3.4.4. Cistanche tubulosa ning jigar va skelet mushaklari glikogen darajasiga ta'siri

Turli to'qimalarda glikogen darajasi insulin sezgirligini to'g'ridan-to'g'ri aks ettiradi, chunki insulin hujayra ichidagi glikogenning to'planishiga yordam beradi. Rosiglitazon jigar glikogen darajasini 59,61 foizga (po0.001) sezilarli darajada pasaytirdi va mushaklardagi glikogen darajasini 33,93 foizga oshirdi (po0,05 diabetga qarshi nazorat). CT24.2 jigar glikogen darajasini 30,41 foizga pasaytirdi (po0,05 va diabetik nazorat). Cistanche tubulosa ning past dozalari jigar yoki skelet mushaklari glikogen darajasiga sezilarli ta'sir ko'rsatmadi.

3.5. Db/db sichqonlarda Cistanche tubulosa ning gipolipidemik ta'siri

ning ta'sirini baholash uchunCistanchetubulosadislipidemiya bo'yicha biz JB/DB sichqonlarida umumiy xolesterin, TG, HDL-c, LDL-c va VLDL-c darajasini aniqladik. Bizning natijalar shuni ko'rsatadiCistanchetubulosaHDL-c darajasini oshirish, TG, LDL-c va VLDL-c darajasini pasaytirish, db/db sichqonlarda xolesterin miqdorini kamaytirish orqali dislipidemiyani yaxshilashi mumkin. CT120.9 (po0.05) va CT24.2(po0.001) diabetik KB/db sichqonchada TC darajasini sezilarli darajada pasaytirdi (3-jadval). ) diabetik nazorat bilan solishtirganda. Barcha eksperimental guruhlardan faqat CT24.2 diabetik nazorat bilan solishtirganda TG (po0.05) va VLDL-c (po0.05) darajasini sezilarli darajada kamaytirdi. Barcha uch dozaCistanchetubulosaLDL darajasini sezilarli darajada pasaytirdi (po0.0 CT12 uchun 0.9, po0.05, CT72.6 uchun po0.001, CT24.2 uchun po0.001, diabetik nazoratga nisbatan) . Barcha uch dozaCistanchetubulosa(CT120.9, CT72.6 va CT24.2) HDL darajasini arzimas darajada 9,78 foiz, 7,32 va 7,78 foizga oshirdi (p40,05 diabetik nazoratga nisbatan).

Ushbu lipid parametrlaridan past HDL-c/TC darajasi koronar arteriya kasalligi uchun eng muhim mustaqil xavf omilidir.CT120.9 (po0.05) va CT24.2 (po0.001) qandli diabetga qarshi nazorat) HDL-c/TC darajasini sezilarli darajada oshirdi. Koronar arteriya kasalligi uchun xavf omili bo'lgan aterogen indeks har uch dozada kamaydi.Cistanchetubulosa(CT120.9 va CT24.2 uchun po{0}.001, CT72.6 va diabetik nazorat uchun po0.01).

Ijobiy nazorat guruhida rosiglitazon TC (po{0}}.001) va LDL-c (po0,01) darajasini diabetik nazoratga nisbatan sezilarli darajada oshirdi. Rosiglitazon shuningdek, HDL c darajasini 57,32 foizga (po0,001) sezilarli darajada oshirdi, ammo HDL-c / TC darajasiga yoki aterogen indeksga foydali ta'sir ko'rsatmadi. Akarboza db/db sichqonlarda sarum lipid indekslariga sezilarli ta'sir ko'rsatmadi.

4. Munozara

Ushbu tadqiqot potentsial antihiperglisemik va hipolipidemik faollikni o'rganish uchun mo'ljallanganCistanchetubulosa.

In vitro tahlil natijalari shuni ko'rsatdiCistanchetubulosaFenolik va polisakkaridlarning yuqori miqdorini o'z ichiga oladi va yaxshi antioksidant faollikni namoyish etadi. Jami fenolik tarkibCistanche tubulosachoy (Ankolekar va boshq., 2011) va qahvaning (Chu va boshq., 2011) umumiy fenolik tarkibidan past va boshqa ko'plab fenolik moddalardan yuqori.giperglikemiko'tlar, masalan, qoraqo'tir (Pinto va boshq., 2010), dengiz o'tlari (Nwosu va boshq., 2011), no'xat (Sreerama va boshq., 2012) va 2-toifa DMni davolashda ishlatiladigan ba'zi an'anaviy dorivor o'simliklar (Gulatiet boshq., 2012). Cistanche tubulosa tarkibidagi polisakkarid miqdori Panax ginseng (Wanget boshq., 2011) va choy (Chu va boshq., 2011) polisaxaridlari tarkibidan past va boshqa ko'plab polisaxaridlardan yuqori.antihiperglisemikAloe vera L. (Hu va boshq., 2003), jujuba (Sun va boshq., 2011), Polyporus umbellatus (Tian va boshq., 2007), Rheum palmatum (Ni va boshq., 2007) va ba'zi o'tlar kabi o'tlar. 2-toifa DMni davolashda ishlatiladigan an'anaviy dorivor o'simliklar (Gulatiet boshq., 2012). Antioksidantlar, masalan, aspolifenollar va feniletanoid glikozidlar (PhGs) ko'p bo'lgan o'simliklar diabetga qarshi faollikka ega ekanligi ko'pincha aniqlanadi, bu ularning oksidlovchi stressni qisman kamaytirish qobiliyatiga bog'liq (Pinto va boshq., 2010; Saltiel, 2001; Gulati va boshqalar, 2012). Bizning antioksidlovchi tahlilimiz oldingi hisobotlarga mos keladi (Artur va boshq., 2011;qarshiBaoet boshq., 2010; Funes va boshq., 2009) shuni ko'rsatdiCistanchetubulosamuhim antioksidant xususiyatlarga ega. Cistanche tubulosa ning TEAC qiymati va FRAP qiymati yashil karam, sabzi, bodring, yashil salat, selderey (Pellegrini va boshq., 2003) va diabetni davolashda ishlatiladigan yaxshi antioksidant ta'sirga ega bo'lgan boshqa o'simliklardan yuqori edi (Rahimi va boshq. , 2005) va akarboza va rosiglitazondan ancha yuqori edi. Oldingi klinik tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, lipoik kislota (Konrad va boshq., 1999) yoki boshqa antioksidantlar (Paolisso va boshq., 1992) insulinga chidamli va / yoki diabetga chalingan bemorlarda insulin sezgirligini oshirishi mumkin. Shunday qilib, Cistanchetubulosa diabet va uzoq muddatli diabet asoratlariga qarshi himoya ta'sirini ko'rsatishi mumkin bo'lgan antioksidantlar manbai hisoblanadi.

Cistanche turlari yuzlab yillar davomida tonik oziq-ovqat yoki dori sifatida ishlatilgan, bu ularni og'iz orqali qabul qilish uchun xavfsiz ekanligini ko'rsatadi. 14 kunlik o'tkir zaharlilik testining oldingi hisoboti shuni ko'rsatdikiCistanchetubulosaEkstrakt haqiqiy toksik bo'lmaganlarga tegishli: Maksimal bardoshli doza (MTD).Cistanchetubulosaekstrakti sichqonlarda 410 g/kg ekanligi aniqlandi. 14 kunlik kuzatuv davomida hech qanday o'lim qayd etilmadi va har bir guruhning sinovdan o'tgan sichqonlari 24 soat va 14 kunlik kuzatuv davomida hech qanday haddan tashqari zaharlanish belgilarini ko'rsatmadi (Chjan va boshq., 2012). Bizning tajribamizdagi eng yuqori doz, 5,084 g CTAE / kg BW / kun, bu sichqonlarda 9,10 g xom kukun / kg ga teng, MTD dan ancha past. Shunday qilib, bizning tajribamizda doz xavfsizdir.

2-toifa DM dunyodagi eng keng tarqalgan va jiddiy metabolik kasalliklardan biri bo'lib, asosan giperglikemiya bilan tavsiflanadi. Ushbu tadqiqotda biz BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J(db/db) sichqonlarini 2-toifa DM modeli sifatida qabul qildik.Cistanchetubulosain vivo glyukoza va lipid metabolizmi bo'yicha. db/dbmice hayot tarzi bilan bog'liq metabolik kasalliklarning yaxshi qabul qilingan genetik kemiruvchi modeli bo'lib, bu diabetga qarshi va semizlikka qarshi vositalarni baholash uchun ayniqsa foydalidir. Sichqonlarning bu shtammi leptin retseptorlari genida amutatsiyani amalga oshiradi, 6-7 haftalik yoshida giperglikemiya, giperlipidemiya, insulin qarshiligi va semirishni ko'rsatadi (Hummel va boshq., 1966; Nishina va boshq., 1994; Uchida va boshq., 2005; Srinivasan va Ramarao, 2007).

Qandli diabetning rivojlanishi bilan diabetik nazorat guruhining tana vaznining biroz pasayishi (1-jadval) 10-12 xaftalik diabetik KB / db sichqonlarida yuzaga keladigan plazma insulin darajasining pasayishiga bog'liq bo'lishi mumkin (Hummel va boshq., 1966) va diabetik db / db sichqonlarida metabolik samaradorlikni oshirdi (Trayhurn, 1979). Har uch dozada vazn yo'qotish tezligi pasayganCistanche tubulalaribo'lishi mumkinCistanchetubulosaShuningdek, DM uchun foydali bo'lgan bu qondagi insulin miqdorini oshirdi (3-jadval). Rosiglitazon tana vaznining sezilarli darajada oshishiga olib keldi, bu rosiglitazonning ma'lum yon ta'siri. Rosiglitazon guruhidagi jigar vaznining sezilarli darajada oshishi va jigar/tana vaznining nisbati (po{1}}.001) rosiglitazon jigarda lipidlar to‘planishi va funksional o‘zgarishlarga olib kelishi mumkinligini ko‘rsatdi.

In vivo tahlil natijalari shuni ko'rsatdiCistanche tubulalari mumkinochlikdagi qon glyukoza darajasini va ovqatdan keyin qon glyukoza darajasini oshirishni va db / db sichqonlarining insulinga sezgirligini oshiradi. Umuman,CistanchetubulosaEksperiment davomida akarbozaga qaraganda giperglikemiya va dislipidemiyani kamaytirish va insulin qarshiligini yaxshilashda samaraliroq bo'ldi.

20 kundan keyin og'iz orqali yuborishCistanchetubulosaFBG darajasining ortib borayotgan tendentsiyalarini sezilarli darajada inhibe qildi va FBG - JB/DB sichqonlarida doimiy ravishda foiz qiymatini oshirish. Tajriba oxirida,Cistanchetubulosako'rsatdiantihiperglisemikta'siri dozaga bog'liq. Bu natijalar shundan dalolat beradiCistanchetubulosategishli dozada qo'llanganda potentsial qon glyukozasini pasaytiruvchi vosita sifatida harakat qilishi mumkin. Glyukozaning ko'p chiqishi ovqatdan keyin skelet mushaklarida sodir bo'ladi, FBG darajasi esa, birinchi navbatda, jigarda glyukoza chiqishi bilan belgilanadi. FBG natijalari shuni ko'rsatdiCistanchetubulosadb / db sichqonlarining jigar glyukoza chiqishi sezilarli darajada yaxshilandi; yomon jigar glyukoza chiqishi giperglikemiyaga hissa qo'shadigan 2-toifa DMning uchta asosiy metabolik nuqsonlaridan biridir (Bavenholm va boshq.,2001). 30-kuni qandli diabetni nazorat qilish guruhining FBG o'sish foizi kutilgan darajadan past bo'ldi, bu faqat CT72,6 (po0,01), akarboza (po0,05), androsiglitazon (po0,01) ekanligini tushuntirishi mumkin. po0.001) diabetik nazorat guruhiga nisbatan FBG o'sishini sezilarli darajada kamaytirdi.

Umuman olganda, 2-jadvaldagi natijalar shuni ko'rsatadiCistanchetubulosaglyukoza yuklanganidan keyin ovqatdan keyin qondagi glyukoza darajasini samarali nazorat qildi, bu Cistanche tubulosa ovqatdan keyin giperglikemiyani yumshatish uchun nomzod agent ekanligini ko'rsatdi. Ovqatdan keyin yuqori qon glyukoza darajasi 2-toifa DM bilan bog'liq yurak-qon tomir asoratlari uchun mustaqil xavf omilidir (Ceriello, 2005; Blaak va boshq., 2012). CT120.9 ovqatdan so'ng qon glyukoza darajasining oshishini sezilarli darajada bostirdi, bu CT120.9 diabetik KB / KB sichqonlarining buzilgan glyukoza bardoshliligini yaxshilaganligini va ta'siri 19,5 mg / kg akarboza bilan solishtirish mumkin edi. Biroq, CT120. ning antigiperglisemik ta'siri. 9 rosiglitazonga qaraganda kamroq intensiv edi.

Insulin sekretsiyasi etishmovchiligi va insulin qarshiligi 2-toifa DMdagi uchta asosiy metabolik nuqsonlardan ikkitasi bo'lib, ular giperglikemiyaga yordam beradi (Bavenholm va boshq., 2001). Bizning FINS tahlilimiz natijasi shuni ko'rsatdiki, yuqori dozCistanchetubulosadb/db sichqonlarda defitsientinsulin sekretsiyasini ma'lum darajada tikladi. Shuning uchun Cistanchetubulosa insulin sekretsiyasini rag'batlantirish orqali qisman ochlik va ovqatdan keyin qondagi glyukoza darajasini samarali ravishda bostirdi (2-jadval). Giperglikemiya va giperlipidemiya birlamchi diabet patogenezi bilan bir qatorda beta-hujayralar va mitoxondriyalarga qo'shimcha oksidlovchi stressni keltirib chiqaradi. In vitro va in vivo dalillar mavjud yuqori darajadagi qon glyukoza va lipidlarga surunkali ta'sir qilish zararli tobeta-hujayralar bo'lib, insulin etishmovchiligi, insulin genekspressiyasining buzilishi va apoptoz bilan hujayra o'limiga olib keladi (Pitocco va boshq., 2010). Antioksidantlar beta-hujayralar va izolyatsiyalangan orolchalarni yuqori glyukoza kontsentratsiyasi ta'siridan salbiy ta'sirlardan himoya qilishi mumkinligi sababli (Kaneto va boshq., 1996, Tajiri va boshq., 1997), Cistanche tubulosa o'zining antioksidlovchi ta'siri orqali insulin sekretsiyasini yaxshilashi mumkin.

Qandli diabet nazorati guruhining jiddiy buzilgan insulin tolerantligi db/db sichqonlarining insulinga chidamli holatini tasdiqladi. TheITT natijalari shuni ko'rsatdiki, yuqori dozadaCistanchetubulosadb/db sichqonlarda insulin qarshiligi yaxshilangan, bu rosiglitazon bilan solishtirish mumkin va akarbozadan ustundir, bu shuni ko'rsatadiki,Cistanchetubulosakuchli insulinni sezgirlashtiruvchi xususiyatlarga ega.

Glyukoza gomeostazi asosan jigar va skelet mushaklari tomonidan tartibga solinadi. Glyukozaning katta qismi jigar va skelet mushaklarida sodir bo'ladi, glikogen saqlanadigan glyukozaning asosiy hujayra ichidagi shaklidir (Saltiel, 2001). Turli to'qimalarda glikogen darajasi insulin sezgirligini to'g'ridan-to'g'ri aks ettiradi, chunki insulin hujayra ichidagi glikogenning to'planishiga yordam beradi. Insulin bilan stimulyatsiya qilingan glikogen tarkibi insulinga chidamliligi bo'lgan hayvonlarda insulin etishmovchiligi darajasiga mutanosib ravishda sezilarli darajada kamayadi (Chandramohan va boshq., 2008). Biroq,Cistanchetubulosajigar yoki skelet mushaklarida glikogenni saqlashga foydali ta'sir ko'rsatmadi.

2-toifa DMning metabolik profili buzilgan glyukoza metabolizmi va insulin qarshiligi bilan tavsiflanadi, ko'pincha dislipidemiya bilan birlashadi (Cha va boshq., 2005). Dislipidemiya DMda yurak-qon tomir kasalliklarining asosiy xavf omillaridan biridir. Diabetik dislipidemiyaning o'ziga xos xususiyati yuqori plazma triglitseridlari (TG) kontsentratsiyasi, past yuqori zichlikdagi lipoprotein xolesterin (HDL-c) kontsentratsiyasi, past zichlikdagi lipoprotein xolesterin (LDL-c) kontsentratsiyasining oshishi va juda past zichlikdagi lipoproteinlarning ortishi. xolesterin (VLDL-c) kontsentratsiyasi (Mooradian, 2009). bilan davolangandan keyinCistanchetubulosa45 kun davomida sichqonlarda umumiy xolesterin, TG, LDL-c va VLDL-c darajalari kamaygan, HDL-c esa ko'tarilgan, bu shuni ko'rsatadiki,Cistanchetubulosadislipidemiyaga foydali ta'sir ko'rsatdi va ateroskleroz, yurak-qon tomir kasalliklari va diabetik asoratlar xavfini sezilarli darajada kamaytirishi mumkin (3-jadval). Cistanche tubulosa TC darajasini sezilarli darajada pasaytirdi, bu avvalgi hisobotga mos keladi (Shimoda va boshqalar, 2009). ., 2009). Giperxolesterinemiya tarqalishi inDM oshmagan bo'lsa-da, xolesterin darajasini pasaytirish DM bilan og'rigan bemorlarda yurak-qon tomir kasalliklarining nisbiy xavfini kamaytirishi mumkin (Mooradian, 2009). Cistanche tubulosa HDL-c / TC darajasini sezilarli darajada oshirdi va aterojenikni kamaytirdi. koronar arteriya kasalliklari uchun xavf omillari bo'lgan indeks, bu Cistanche tubulosa diabet va yurak-qon tomir kasalliklarini boshqarish uchun foydali ekanligini ko'rsatadi. Ijobiy nazorat qiluvchi rosiglitazon preparati TC darajasini sezilarli darajada oshirdi, bu diabet va yurak-qon tomir kasalliklarining rivojlanish xavfini oshiradi.

5. Xulosa

Xulosa qilib aytganda, biz antihiperglisemik va birinchi namoyishni taqdim etamizhipolipidemikeffektlarningCistanchetubulosaIntype 2 diabetik db/db sichqonlari.Cistanchetubulosanormallashgan giperglikemiya insulin sezgirligini tikladi va dislipidemiyani kamaytiradi.Cistanchetubulosa2-toifa DMda giperglikemiyaga olib keladigan uchta asosiy metabolik nuqsonlarning barchasi yaxshilandi.Cistanchetubulosa2-toifa DM rivojlanishining oldini olish va ateroskleroz, yurak-qon tomir kasalliklari va diabetik asoratlar xavfini kamaytirish uchun yuqori potentsialni ko'rsatdi. An'anaviy xitoy tibbiyoti va tonik oziq-ovqat sifatida, Cistanchetubulosa keyinchalik dori-darmonlar, farmatsevtik oziq-ovqatlar yoki parhez qo'shimchalarida ishlab chiqarilishi mumkin. kelajak. Biroq, bioaktiv komponentni aniqlash va antihiperglisemik va antihiperglisemik ta'sirga javob beradigan mexanizmlarni aniqlash uchun qo'shimcha tadqiqotlar talab qilinadi.hipolipidemikeffektlarningCistanchetubulosa.

Minnatdorchilik

Ushbu ish Xitoyning 11-Besh yillik rejasida (2007BAI32B06) Milliy KeyTechnology R&D dasturining grantlari va Davlat Kengashining Qashshoqlikni kamaytirish va rivojlantirish bo'yicha yetakchi guruhi (2008-3A) tomonidan qo'llab-quvvatlandi.

Ilova A. Qo'shimcha material

Ushbu maqola bilan bogʻliq qoʻshimcha maʼlumotlarni http://dx.doi.org/10.1016/j.jep.2013.09.027 manzilidagi onlayn versiyada topishingiz mumkin.

Kimdan: "Cistanche tubulosa ning antigiperglisemik va hipolipidemik ta'siri" tomonidanWen-Ting Xiong va boshqalar

---W.-T. Xiong va boshqalar. / Etnofarmakologiya jurnali 150 (2013) 935–945