Hibiscus Cannabinus L. (kenaf) barglari ekstraktini tabiiy kosmetik prototipda terini oqartiruvchi va qarishga qarshi vosita sifatida qo'llash

Aloqa: Audrey Xu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Yan Yi Sim va Kar Lin Nyam

ANTRACT

Malayziyada sanoat chiqindilariHibiskus kannabinusL. (kenaf) sanoati, ayniqsa tark etish, barqarorlikda qiyinchiliklarga olib keladi. Kenaf barglarining biologik faolligi bir necha oldingi tadqiqotlarda qayd etilgan, shuning uchun kenaf barglari ekstrakti (KLE) kosmetik formulalarda funktsional tarkibiy qism sifatida ishlatilishi mumkinligiga ishonish mumkin. Shunday qilib, ushbu tadqiqotning maqsadi KLE o'z ichiga olgan tabiiy kosmetik formulani ishlab chiqish va uning fizik-kimyoviy xususiyatlarini, mikrobiologik xususiyatlarini, saqlash barqarorligini, biologik faolligini (antioksidant, antitirozinaza va boshqalar) baholash edi.qarishga qarshi), in vitro sitotoksiklik (oddiy inson dermal fibroblast va B16F10 melanoma hujayralarida) va melanogenez tahlili (hujayra ichidagi tirozinaza faolligi va melanin ishlab chiqarishning kamayishi). Natijalar shuni ko'rsatdiki, 15% kenaf urug'i yog'i (KSO) (F2) bilan 0,1% w/w KLE bilan tayyorlangan KLE loson (KLEL) inson hujayralariga toksik ta'sir ko'rsatmasdan, eng yaxshi jismoniy va mikrobiologik barqarorlikni beradi. KLEL shuningdek antioksidant tarkibini 1,84 ± 0.07 mg kofein kislotasi ekvivalenti (CAE)/g va umumiy fenolik tarkib (TPC) uchun 21,62 ± 0,76 mg katexingidrat ekvivalenti (CHE)/g gacha ko'rsatdi. ) va umumiy flavonoid miqdori (TFC). Bundan tashqari, KLEL mikofenolat (30,28 ± 3,90 foiz) va difenollar (11,40 ± 0,29 foiz) hosil bo'lishini inhibe qilish bo'yicha antitirozinaz qobiliyatini taqdim etdi va birinchi marta,qarishga qarshikollagenaz (36,41 ± 0,54 foiz) va elastaz (23,13 ± 1,56 foiz) faoliyatini inhibe qilish orqali xossalari. Melanogenezni inhibe qiluvchi faollikka kelsak, KLEL B16F10 hujayralarida hujayrali tirozinaz faolligini va melanin tarkibini bostirishda yuqori samaradorlikni taqdim etdi. Umuman olganda, ushbu tadqiqot natijalari kenaf barglaridan foydalangan holda tabiiy kosmetik prototiplarni ishlab chiqishda juda istiqbolli.

cho'l cistanche ajdaho o'tlar: qarishga qarshi

1.Kirish

So'nggi paytlarda chiqindilarni ishlab chiqarishni minimallashtirish va uzoq muddatli qiymatni saqlab qolish, shuningdek, resurslar tanqisligi va atrof-muhit degradatsiyasining salbiy oqibatlarini kamaytirish orqali chiqindilarni boshqarish barqarorligini oshirishi mumkin bo'lgan aylanma iqtisodiy model jamoatchilik e'tiborini qozondi (Morseletto, 2020). Umuman olganda, har yili sanoat ekinlari tarmoqlarida iqtisodiy ahamiyati past bo'lgan sezilarli miqdorda qo'shimcha mahsulotlar ishlab chiqariladi.Hibiskus kannabinusL. KR9 (kenaf) sanoati Malayziya yalpi ichki mahsulotiga (yalpi ichki mahsulot) hissa qo‘shadigan qishloq xo‘jaligi tarmoqlaridan biri bo‘lib, kenaf quruq poyasining ishlab chiqarish og‘irligi 2013 yildagi 7,1 (000 tonna) dan 7,6 ({{7}) ga oshdi. } tonna) 2014 yilda va jahon kenaf bozori 2025 yilga kelib 854 million AQSh dollaridan oshib ketishi prognoz qilinmoqda (Abdelrhman va boshq., 2016). Biroq, barqarorlik muammolariga hissa qo'shadigan kenaf urug'lari va barglari kabi ko'p miqdorda qo'shimcha mahsulotlar ishlab chiqariladi.

Kenaf barglari umumiy qo'shimcha mahsulotlarning katta miqdorini tashkil qiladi, hosil bo'lgan barcha qo'shimcha mahsulotlar orasida eng kam xarakterlanadi va baholanadi. Dumaloq yondashuv tufayli kenaf barglarini qayta ishlatish yoki qo'shimcha qiymatga ega mahsulotlarga qaytarish juda muhim, chunki u iqtisodiy, ekologik va ijtimoiy sohalarda ko'plab afzalliklarni beradi (Coderoni va Perito, 2019). Kenaf barglari Xlorogen kislotasi, kofein yordami, kaempferol va katexingidrat kabi bioaktiv birikmalarning boy manbalaridan iborat bo'lib, Xo va boshqalar tomonidan o'tkazilgan tadqiqotlar tomonidan tasdiqlangan. (2019); Sim and Nyam (2019) va Haw va boshqalar. (2020). Biroq, u odatda past iqtisodiy ahamiyatga ega mahsulotlarni ishlab chiqarish uchun mo'ljallangan: xun tolasi va hayvonlar uchun ozuqa (Lim va boshq., 2020).

"Tabiatga qaytish" atamasi kosmetika sanoatining tadqiqotlari va ishlanmalarida keng qo'llanilgan, chunki botanikadan olingan ekstraktlardan foydalanish iste'molchilar tomonidan yaxshi qabul qilingan. Sim va boshqalar tomonidan o'tkazilgan tadqiqotga ko'ra. (2019) kenaf barglari ekstrakti (KLE) istiqbolli antioksidant va antitirozinaz xususiyatlarini namoyish etdi, kosmetika mahsulotlarini ishlab chiqishda qo'shimcha qiymatli ingredientlar sifatida foydalanish potentsialiga ega edi. KLE ni o'z ichiga olgan barqaror va xavfsiz formulalarni ishlab chiqish muhim, chunki u terini ko'rsatadigan ko'plab polifenol birikmalarini o'z ichiga oladi.oqlashvaqarishga qarshixususiyatlari. Yangi kosmetik formulalarni ishlab chiqishda bir nechta talablarni hisobga olish kerak, masalan, formulalar turi, foydalanish maqsadi va formulalarda qo'llaniladigan ingredientlar o'rtasidagi potentsial o'zaro ta'sir, umuman olganda, barqarorlik va xavfsizlikni o'rganish zarurligiga hissa qo'shadi. (Garbossa va Mayya Kampos, 2016).

Fizik, kimyoviy va mikrobial xususiyatlarni o'rganishni o'z ichiga olgan barqarorlik tadqiqotlari rivojlanish jarayonidan keyin kosmetik formulalar uchun zarurdir. Bundan tashqari, har qanday nojo'ya ta'sir yoki allergik reaktsiyaning oldini olish uchun, kosmetik mahsulotlar ham oddiy inson teri hujayralari chizig'ida in vitro sitotoksisite tahlilini qo'llash orqali sinovdan o'tkazilishi kerak. Shunday qilib, ushbu ishning maqsadi KLE (KLE lotion-KLEL) o'z ichiga olgan tabiiy kosmetik formulani ishlab chiqishdir. Keyin KLEL uning fizik-kimyoviy xususiyatlari, mikrobiologik xususiyatlari, saqlash barqarorligi, in vitro sitotoksikligi (oddiy inson dermal fibroblast va B16F10 melanoma hujayralarida) va melanogenez tahlili (hujayra ichidagi tirozinaza faolligi va melanin ishlab chiqarishni kamaytirish) uchun baholandi. Ushbu tadqiqot bizga birinchi marta KLEL ning nafaqat antioksidant va tirozinazaga qarshi faolligini, balki ularning kollagenaza va elastazaga inhibitiv faolligini ham aniqlash imkonini berdi.

cistanche foydasi: qarishga qarshi

2. Materiallar va usullar

2.1. O'simlik materiallari va kimyoviy moddalar

YangiHibiskus kannabinusL. KR9 (kenaf) ekishdan 90 kun o'tgach barglari va urug'lari Lembaga Kenaf & Tembakau Negara (LKTN, Malayziya) dan olingan. Span 20 va Tween 80 Sigma Aldrich (Myunxen, Germaniya), Cosmedia® ACE, Iscaguard® PEG va Emulgade® SE-PF BASF (Malayziya) dan, glitserin esa Croda International Plc dan sotib olindi. (Birlashgan Qirollik). Oddiy inson dermal fibroblast (NHDF) hujayra liniyasi Lonza (Bazel, Shveytsariya) dan olingan va sichqoncha melanomasi (B16F10) ATCC (Manassas, VA, AQSh) dan sotib olingan. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) Nacalai Tesque (Yaponiya) dan sotib olindi. Boshqa barcha kimyoviy moddalar analitik reagent darajasida ishlatilgan (Belgiya, Germaniya, Malayziya). Tahlil davomida o'ta toza suv (Millipor, AQSh) ishlatilgan.

2.2. Usullari

2.2.1. Kenaf barglarini quritish

Kenaf barglari o'ta toza suv bilan tozalangan, quritilgan va keyin bir kechada - 8 0 ◦C da saqlanadi. Keyin namuna muzlatilgan quritgichda (Masih, Germaniya) 0,0004 bar ostida 48 soat davomida quritilgan, maydalangan, vakuum bilan o'ralgan va -20 daraja haroratda saqlangan.

2.2.2. Qisman tozalangan kenaf barglari ekstrakti (KLE) tayyorlash

KLE ning impulsli ultratovushli ekstraktsiyasi (PUAE) Sim va boshqalarga ko'ra amalga oshirildi. (2019). Namunalar ekstraksiya erituvchilari (etanol) bilan 1:10 nisbatda tortildi. Keyin aralashma 50 foiz sonikatsiya amplitudasida, 1 daqiqa puls davomiyligida va 18-22 ± 3 daraja haroratda (uch tsikl) 1 daqiqa puls oralig'ida impulsli ultratovush yordamida ekstraktsiyaga (Sartorius, Germaniya) duchor bo'ldi. ). Keyin ekstrakt filtrlanadi va vakuumli aylanadigan bug'lanish moslamasida (Buchi, Shveytsariya) konsentratsiyalanadi. KLEni qisman tozalash Seabra va boshqalarga ko'ra amalga oshirildi. (2010) engil o'zgartirishlar bilan. Xom ekstrakt silikagel bilan to'ldirilgan ustunga surildi va n-geksan-etil asetatning gradiyent erituvchisi (100:00, 90:10, 80:20, 50:50) bilan elutildi. , 20:80, 10:90, 00:100) va etil asetat metanol (100:00, 90:10, 80:20, 50:50, 20:80, 10:90) , 00:100). Qisman tozalangan KLE aylanadigan evaporatator yordamida quruq holga keltirildi va kelajakda foydalanish uchun -20 daraja haroratda saqlangan.

2.2.3. Kenaf urug'i yog'ini erituvchi ekstraktsiyasi (KSO)

KSO Chew va boshqalarga ko'ra ajratilgan. (2015). Kenaf urug'lari maydalagich (Panasonic, Yaponiya) yordamida mayda kukunga aylantirildi va 1: 5 nisbatda geksan qo'shildi. Yog'lar Soxhlet ekstraktori yordamida 60 ◦C da 3 soat davomida olingan va geksan aylanuvchi evaporatator yordamida chiqarilgan. Azot bilan yuvilgandan so'ng, KSO kelajakda foydalanish uchun - 20 darajada saqlanadi (Chew va boshq., 2015).

2.2.4. KLE ni o'z ichiga olgan loson formulasini eksperimental ishlab chiqish

Dastlab, loson asosli formulasi (KLEsiz) 4 xil konsentratsiyali kenaf urug'i yog'i (KSO) yordamida optimallashtirildi (10 foiz, 15 foiz, 2{23}} foiz va 25 foiz). Keyin loson bazasi turli parametrlar bo'yicha qiyosiy baholandi: jismoniy ko'rinish, hid, bir hillik, pH, yopishqoqlik, santrifüj va muzlatish-eritishni baholash, keyingi o'rganish uchun eng yaxshi loson bazasi formulasini tanlash. Yuqoridagi parametrlardan olingan natijalarga kelsak, KLE (0.1 foiz w/w) (KLEL) bilan birlashtirish uchun eng mos keladigan loson asosli formulasi (15 foiz KSO) tanlandi. Qisqacha aytganda, qutbsiz faza (Emulgade® SE PF, Span 20 va KSO) va qutbli faza (suv, Tween 80 va glitserin) ingredientlari 75 ± 2 darajagacha qizdirilgan. Keyin qutbsiz faza birlamchi emulsiya hosil qilish uchun magnit aralashtirgich (Thermo Fisher Scientific, AQSh) 350 aylanish tezligida tez aralashtirish orqali qutbli fazaga tomchilab qo‘shildi, so‘ngra IKA T25 raqamli ULTRA yordamida yuqori qirqishli gomogenlash amalga oshirildi. -TURRAX® (IKA Laboratory Equipment, Germaniya) 3200 rpm da 3 minut va ultratovushli gomogenizatsiya 40 foiz amplituda 3 minut. Cosmedia® ACE, Iscaguard® PEG va KLE qo'shildi va xona haroratida O/W emulsiyasida aralashtirildi. KLEsiz KSO loson bazasi nazorat (KSOL) vazifasini bajaradi. Kojik kislota (0,1 foiz og'irlik) (KAL) bilan qo'shilgan loson bazasi anti-tirozinaz faolligi va melanogenez tahlili uchun ijobiy nazorat bo'lib xizmat qildi. Katexin gidrat (0,1% w/w) (CHL) bilan qo'shilgan loson bazasi anti kollagenaz va antielastaz faolligi uchun ijobiy nazorat bo'lib xizmat qildi.

2.2.5. Fizik-kimyoviy tahlil

2.2.5.1. Tashqi ko'rinish, hid va bir xillik.

Hanifah va Jufri (2018) ma'lumotlariga ko'ra, loson formulalari rangi, hidi va bir xilligi va fazalarni ajratish uchun tekshirildi.

2.2.5.2. pH. Standart eritmalar o'lchashdan oldin pH o'lchagich elektrodini kalibrlash uchun ishlatilgan.

Namunalarning pH darajasi xona haroratida pH o'lchagich (Mettler Toledo, Shveytsariya) bilan aniqlandi.

2.2.5.3. Rang.

Rang kolorimetr yordamida baholanadi (Hunter Lab, Amerika Qo'shma Shtatlari). Natijalar rang maydoni L* (yorug'lik), a* (yashil), b* (sariq) va umumiy rang farqi (DE) bo'yicha ifodalanadi. Barcha namunalar uchun umumiy rang differentsial (DE) quyidagicha hisoblangan: dhe = ↓ (l * - l * 0) 2 plyus (a * - B * 0) 2√

2.2.5.4. Yopishqoqlik.

Namunalarning yopishqoqligi Gyawali va boshqalarga ko'ra, LV-64 shpindel yordamida Bruk dala viskozimetrida baholandi. (2016) engil o'zgartirishlar bilan. Namuna 100 rpm aylanish tezligi bilan to'g'ridan-to'g'ri shpindelga botirildi va yopishqoqlik (cP) o'lchandi.

2.2.5.5. Tarqalishi.

Namunalarning tarqalishi parallel plastinka usuli bilan aniqlandi (Gyawali va boshq., 2016). Namuna aniq tortildi (1 g) va shisha slaydlardan biriga (20 × 20 sm2) qo'yildi. Keyin, namunaning bir tekis bosilishini ta'minlash uchun boshqa slayd namunaning yuqori qismiga qo'yildi va yuqori slaydga 100 g vazn qo'yildi. 1 daqiqadan so'ng, og'irlik olib tashlandi va tarqalish diametri (sm) o'lchandi.

2.2.5.6. Santrifüjni baholash.

Namuna santrifüj trubkasiga solingan va keyin 30 daqiqa davomida 3750 rpm tezlikda santrifüj qilingan (Eppendorf 5417R, AQSh). Ushbu santrifüj testi (1-yillik tortishish kuchiga teng) namunaning barqarorligini aniqlaydi (Hiola va boshq., 2018).

2.2.5.7. Muzlatish-eritishni baholash.

Muzlatish-eritish bo'yicha tadqiqotlar avvalgi usullar bo'yicha bir nechta o'zgartirishlar bilan amalga oshirildi (Krongrawa va boshq., 2018). Har bir namuna navbatma-navbat sovuq haroratda, 4 ± 1 ◦C (24 soat) va issiq haroratda, 45 ± 1 ◦C (24 soat) 75 foiz ± 2 foiz RH (nisbiy namlik) bilan 6 tsikl davomida havo o'tkazmaydigan shisha idishlarda saqlangan. Namunalarning viskozitesi harorat kuchlanish siklidan keyin aniqlandi.

2.2.6. Antioksidant tarkibini aniqlovchi

2.2.6.1. Jami fenolik tarkib (TPC).

Jami fenolik tarkib Lim va boshqalarga ko'ra aniqlandi. (2007). Namuna (10 mg/ml) 10 foizli Folin-Ciocalteu reaktivi va 7,5 foiz (a/a) Na2CO3 bilan aralashtiriladi, keyin qorong'ida 30 daqiqa inkubatsiya qilinadi. Absorbans ultrabinafsha nurlanish spektrofotometri (Secoman, Frantsiya) yordamida 765 nm da olingan. Kofein kislotasi uchun kalibrlash tenglamasi y=0.0269 plyus 9.69x (r2=0.999) edi (Sim va boshq., 2019). Natijalar mg kofe kislotasi ekvivalenti (CAE) / g namunasi sifatida ifodalangan.

2.2.6.2. Umumiy flavonoid tarkibi (TFC).

Umumiy flavonoid tarkibi Ogbunugafo va boshqalarga ko'ra baholandi. (2011). Umuman olganda, namuna (1{11}} mg/ml) 15 foiz NaNO2, 10 foiz AlCl3 eritmasi, o‘ta toza suv va 1 M NaOH bilan aralashtiriladi. Absorbans katexingidrat (0,02− 0,1 mg/ml) yordamida tayyorlangan standartga nisbatan darhol 510 nm da o‘lchandi. Katexin gidrat uchun kalibrlash tenglamasi y=0.004 plyus 3.1x (r2=0.999) edi (Sim va boshq., 2019). Umumiy flavonoid tarkibi (TFC) milligramm katexin gidrat ekvivalenti (CHE)/g namunasi sifatida ifodalangan.

Cistanche ekstrakti foydalari: qarishga qarshi

2.2.7. Antikollagenaza faolligi

Kollagenazaga qarshi faollik kollagenaza va sintetik substrat (FALGPA-N-(3-[2-Furil]-akriloil)-Leu-Gly-Pro-Ala) oʻrtasida 345 nm da proteolitik degradatsiyaga asoslangan. kollagenaz ingibitorlarining mavjudligi Barrantes va Gvineya (2003) ga muvofiq ba'zi o'zgartirishlar bilan amalga oshirildi. Clostridium histolyticumdan olingan 0,25 birlik/ml kollagenaza (40 mkl) 10 mkL sinov namunalari va 20 mL 50 mM trisin buferi (pH 7,5, 100 mM CaCl2 va 5 mM NaCl uchun qorong'uda) bilan reaksiyaga kirishishi mumkin edi. Oldindan inkubatsiyadan so'ng har bir quduqqa 40 mkL miqdorida 2 mM FALGPA eritmasi qo'shildi. Har bir namunaga FALGPAdan tashqari barcha komponentlarga ega bo'lgan blank qo'shilgan va absorbans 20 daqiqa davomida inkubatsiya qilinganidan keyin aniqlangan.

2.2.8. KLELning bakteriologik yaroqlilik muddati tahlili

KLEL ning umumiy aerob mikroblar soni (TAMC) va umumiy xamirturushlar va mog'orlar soni (TYMC) uchun ishlatiladigan usullar FDA bakteriologik analitik qo'llanmasidan (BAM) o'zgartirilgan (Huang va boshq., 2017). Namuna (1 g) 1 ml steril Tween 80 bilan aralashtirildi va 10−1 dan 10−3 gacha boʻlgan toʻliq suyultirish seriyasini olish uchun hajmi steril peptonli suv bilan oʻrnatildi. TAMC uchun namunalar ozuqaviy agarda emlangan. yoyilgan plastinka usuli, so'ngra plitalar 30 ± 2 ◦C da 48 soat davomida inkubatsiya qilindi. TYMC holatida namunalar yoyilgan plastinka usuli yordamida kartoshka dekstrozi agar plastinkalariga emlangan va keyinchalik plitalar 7 kun davomida 30 ± 2 ◦C da inkubatsiya qilingan. Plitalar inkubatsiya davridan keyin mikroblarning o'sishi uchun tekshirildi.

2.3. Statistik tahlil

Barcha natijalar Minitab 16.2.1 statistik paketi (Minitab Inc., Pensilvaniya, AQSh) yordamida tahlil qilindi, bir tomonlama dispersiya tahlili (ANOVA) amalga oshirildi, so'ngra muhim farqni aniqlash uchun Tukey testi o'tkazildi (p < 0="" .05).="" o'rtacha="" ±="" standart="" og'ish="" (sd)="" (n="3)" ma'lumotlarni="" tahlil="" qilish="" uchun="" taqdim="">

3. Natijalar va muhokamalar

3.1. Loson bazasi formulasini optimallashtirish

Hiola va boshqalarga ko'ra. (2018), loson bazasini optimallashtirish (oldindan shakllantirish) yaxshi va barqaror formulani olish uchun muhim rol o'ynaydi. Shuning uchun loson bazasi 1-jadvalda ko'rsatilganidek, KSO ning 4 xil foizidan foydalangan holda optimallashtirildi. Ular tashqi ko'rinish, hid, bir xillik, jismoniy barqarorlik, pH, tarqalish qobiliyati, yopishqoqlik va muzlash-erish tahlillari bilan baholandi (qo'shimcha materiallar - S1 va S2). KSO yordamida tayyorlangan barcha loson asosli formulalari och sutli sariqdan sutli sariq rangga, yaxshi hidga ega (Chu va Nyam, 2020). Olingan natijalarga ko'ra, barcha loson asos formulalarining pH qiymatlari terining pH (4-6) oralig'ida edi va bu allergik reaktsiyani minimallashtirish va saqlash muddati davomida kosmetik formulaning barqarorligini ta'minlash uchun muhimdir (Chu va Nyam). , 2020). Barcha loson asosli formulalari muzlatish-eritish tahlilidan keyin yopishqoqlikning pasayishini ko'rsatdi, ammo baribir yaxshi loson (500-5000 cP) oralig'ida (Kusuma va boshq., 2017). Tarqalishi uchun KSO ning konsentratsiyasi qanchalik yuqori bo'lsa, yuqori yopishqoqlik tufayli tarqalish diametri shunchalik kichik bo'ladi. Tarqalishi qanchalik katta bo'lsa, kosmetik formulani teri yuzasiga qo'llash osonroq bo'ladi. Santrifüjga qarshilik bo'yicha barqarorlik sinovi uchun F2 va F3 fazalarni ajratishni ko'rsatmadi, bu ikkala formulaning 1 yil davomida barqarorligini ko'rsatdi. Biroq, F3 ni osonlik bilan quyib bo'lmaydi va u F2 ga qaraganda yuqori yopishqoqlikka ega bo'lganligi sababli krem ​​tayyorlashga o'xshash ko'rinish berdi. Shuning uchun, F2 KLE bilan birlashtirish uchun optimallashtirilgan loson bazasi sifatida tanlangan.

cistanche nima uchun ishlatiladi: qarishga qarshi

3.2. KLE loson (KLEL) formulasini baholash

3.2.1. Fizik-kimyoviy tahlil

2-jadvaldagi natijalarga asoslanib, KLE bilan qo'shilgan loson bazasi yoqimli hidga ega bo'lgan och sutli rangni ko'rsatdi va fazalarni ajratish kuzatilmadi. KLEL nazoratga qaraganda yuqori pH qiymatini ko'rsatdi, bu kosmetik formulaga KLE qo'shilishi pH qiymatining oshishiga olib kelishi mumkinligini ko'rsatadi. Namunalarning pH qiymatlari terining pH diapazoniga mos va teri uchun xavfsiz edi. KLEL va nazorat o'rtasida yopishqoqlik va tarqalishda sezilarli farqlar yo'q edi, bu emulsiyaga KLE qo'shilishi yopishqoqlik va tarqalish qobiliyatiga ta'sir qilmasligini ko'rsatdi. Nazorat bilan solishtirganda KLEL ning L*, a* va b* qiymatlarida sezilarli oʻzgarishlar kuzatildi, bu loson rangiga kenaf barglarining tabiiy yashil rangi taʼsir qilishini isbotladi. KLEL a* qiymati uchun eng yashil (-2.24 ± 0.03) va b* qiymati uchun eng sariq rangga ega (15,54 ± 0.{{13} }1). Nazorat bilan solishtirganda KLELning umumiy rang farqi (DE) statistik ahamiyatga ega p＜0,05, KLEL uchun 6,82 ± 0,04 qiymati bilan. Oldingi tadqiqotlar DE=2 ni vizual kamsitish uchun chegara sifatida ko'rib chiqdi (Chjou va boshq., 2009). Shunday qilib, DE natijalari KLE qo'shilishi kosmetik formulaning rangiga ta'sir qilishi mumkinligini isbotladi.

3.2.2. Antioksidant tarkibini tahlil qilish

3-jadvalda umumiy fenolik (TPC) va flavonoid tarkibi (TFC) miqdori keltirilgan. Olingan natijalar shuni ko'rsatdiki, KLE bilan tuzilgan loson bazasi nazoratga (1,64 ± 0) qaraganda ancha yuqori TPC (1,84 ± 0.07 mgCAE/g) ni o'z ichiga oladi.0 6 mgCAE/g). TFC uchun KLEL ham nazorat bilan solishtirganda (19,42 ± 0,27 mgCHE/g) TFCda (21,62 ± 0,76 mgCHE/g) sezilarli darajada yuqori ekanligini ko'rsatdi. Ayrim o'simlik qo'shimcha mahsulotlarning bir xil assortimentida dermatologik asosda KLE qo'shilishi hali ham yuqori antioksidant tarkibni taqdim etadi, bu uning kosmetika sanoatida polifenol birikmalarining potentsial manbasini ta'kidlaydi (Adhikari va boshq., 2019; Rodrigues va boshq., 2014). ). Haw va boshqalar tomonidan o'tkazilgan tadqiqotga ko'ra. (2020), kenaf barglari kofein kislotasi, tanin kislotasi, katexin va xlorogen kislota kabi turli xil polifenol birikmalariga boy.

3.2.3. Antioksidant faolligini tahlil qilish

Losonlarning erkin radikallarni tozalash qobiliyati DPPH va ABTS tahlillari yordamida o'rganildi. 3-jadval KLEL yuqori DPPH (1,16 ± 0,18 mgTEAC/g) va ABTS (0,50 ± 0.0 yuqori ekanligini ko'rsatadi. 4 mgTEAC/g) nazorat bilan solishtirganda radikallarni tozalash faolligi. DPPH va ABTS tahlillari natijalari TPC va TFCda bo'lgani kabi o'xshash naqshlarni ko'rsatdi, bu erda KLE ni loson bazasiga qo'shish orqali antioksidant faollikni sezilarli darajada yaxshilaydi, bu topilmalar KLE kosmetik formulalarga qo'llanganda erkin radikallarni tozalash vositalarini o'z ichiga olishini ko'rsatdi. terining qarishiga olib keladigan erkin radikalni bostirishda asosiy antioksidant sifatida muhim rol o'ynaydi. Bundan tashqari, KLEL (0,69 ± 0,20 mgTEAC/g) nazoratga (0,46 ± 0,09 mgTEAC/g) nisbatan temir ionini kamaytirish qobiliyatining sezilarli darajada yuqori ekanligini ko‘rsatdi. DPPH va ABTS. Terining qarishini keltirib chiqaradigan ROSga qarshi individual terining antioksidant himoya tizimini tiklash uchun kosmetika kabi tashqi manbalardan antioksidant birikmalarni doimiy ravishda etkazib berishga ehtiyoj bor (Działo va boshq., 2016). Bundan tashqari, teri sifatida radikal tozalash faolligi va kamaytiruvchi kuchga ega bo'lgan loson formulalaridan foydalanish mumkinoqlashpast tartibga solinadigan ultrabinafsha nurlari ta'sirida melanin ishlab chiqarish vositasi (Działo va boshq., 2016).

3.2.4. Fermentlarni inhibe qiluvchi faollik

Losyonlar in vitro antitirozinaz faolligini baholash uchun melanin biosintezida ishtirok etadigan mis o'z ichiga olgan metalloprotein fermenti bo'lgan tirozinazaga qarshi sinovdan o'tkazildi. 5-jadval shuni ko'rsatadiki, L-tirozinni substrat sifatida ishlatganda KLEL (30,28 ± 3,90 foiz) ijobiy nazorat bilan (34,05 ± 4,60 foiz) anti-tirozinaz faolligida sezilarli farqlar ko'rsatmadi. . Biroq, ALL (11,40 ± 0,29 foiz) L-DOPAni substrat sifatida ishlatganda, ijobiy nazoratga (15,01 ± 0,84 foiz) nisbatan pastroq antitirozinaz faolligini ko'rsatdi. Bu shuni ko'rsatdiki, KLEL asosan difenollarni emas, balki mikofenolatni inhibe qiladi. In vitroqarishga qarshixususiyatlari kollagenaz va elastaz inhibitiv faolligi orqali baholandi. Kollagenaza va elastaz kabi ferment terining yaxlitligi va elastikligi uchun mas'ul bo'lgan kollagen va elastinni buzishi mumkin (Jesumani va boshq., 2019). Shunday qilib, elastaz va kollagenaz faolligini inhibe qilish elastin va kollagen degradatsiyasini kamaytiradi va bu qarishning asosiy belgilaridan biri bo'lgan ajinlar paydo bo'lishining oldini oladi. 5-jadvalda ko'rsatilganidek, KLEL ijobiy nazorat (CHL) bilan solishtirganda ajoyib anti-kollagenaz (36,41 ± 0, 54 foiz) va antielastaz (23,13 ± 1,56 foiz) faolligini ko'rsatdi. KSOL shuningdek, antitirozinaza (18,82 ± 0,17 foiz (substrat sifatida L-tirozin); 8,48 ± 0, 29 foiz (substrat sifatida L-DOPA), kollagenazaga qarshi (18,84 ± {{26) }}},63 foiz ) va antielastaz (5,78 ± 0,59 foiz ) faolligi, lekin HAMMAsidan past. Bu KLE va KSO kombinatsiyasi yaxshi ferment inhibitiv faolligi bilan sinergik ta'sir ko'rsatganligini ko'rsatishi mumkin. Buni quyidagi tadqiqotlar tasdiqlaydi: Pascoal va boshqalar (2015) va Chew va boshqalar (2016), bunda KSO tokoferollarga, KLE esa kuersetin va kempferol hosilalariga boy.oqlashvaqarishga qarshixususiyatlari, terining giperpigmentatsiyasi va ajinlar ishlab chiqarishni kamaytirishga qiziqish bilan (Lin va boshq., 2007; Keen va Hassan, 2016).

3.2.5. In vitro melanogenez tahlili

Terini batafsil o'rganish uchunoqlashKLEL xususiyatlari, B16F10 melanoma hujayra modeli melanogenezga inhibitiv ta'sirni o'rganish uchun ishlatilgan. 5a-rasmda ko'rsatilganidek, hujayrali tirozinaza faolligi uchun KLEL (32,35 foiz) 500 ug/ml da a-MSH bilan solishtirganda KAL (14,85 foiz) va KSOL (13,64 foiz) ga qaraganda hujayrali tirozinaza faolligini sezilarli darajada kuchliroq inhibe qilgan. davolash qilingan nazorat hujayrasi. Hujayradan tashqari va hujayra ichidagi melanin tarkibi uchun KLEL dozaga bog'liq ravishda B16F10 hujayralarining melanin tarkibini kamaytiradi (5b va c-rasm). ALL (500 ug/ml) hujayradan tashqari melanin tarkibiga (56,13 foiz) KAL (54,53 foiz) bilan (MSH bilan ishlangan nazorat hujayrasi bilan solishtirganda) o'xshash inhibitiv ta'sirga ega ekanligi aniqlandi. Bundan tashqari, KLEL (36,52 foiz) hujayra ichidagi melanin tarkibiga KAL (7,98 foiz) ga qaraganda kuchliroq inhibitiv ta'sir ko'rsatdi. Shu bilan birga, KSOL hujayradan tashqari melanin tarkibiga inhibitiv ta'sir ko'rsatdi (17,73 foiz), ammo hujayra ichidagi melanin tarkibiga ta'sir qilmaydi. KAL bilan solishtirganda, KLEL ning melanogenezni inhibe qilishga kuchliroq inhibitiv ta'siri KSO va KLE o'rtasidagi sinergik faollik bilan aniqlanishi mumkin, bu esa loson bazasida KLE terisini oqartirish xususiyatlarini oshirishi mumkin. Ushbu natijalar KLE dan tabiiy kosmetik prototipda terini oqartiruvchi samarali vosita sifatida foydalanish mumkinligini yana bir bor isbotladi.

3.2.6. In vitro sitotoksiklik tahlili

KLEL ning biomosligini baholash (MTT tahlili) orqali turli KLEL konsentrasiyalari (0.125− 2 mg/mL) mavjud boʻlganda yetishtirilgan NHEF hujayralarining hayotiyligi (24, 48, 72 soatdan keyin) yuqorida saqlangan. 95 foiz (4a-rasm). Bu shuni ko'rsatdiki, KLEL odamlarga toksik ta'sir ko'rsatmaydi. B1610 melanoma hujayralari teri uchun tadqiqotlarda keng qo'llaniladioqlashagentlar (Chatatikun va boshq., 2019; Li va boshq., 2019). KLEL ning B16F10 melanoma hujayralarida melanogenezni bostirish qobiliyatini o'lchashdan oldin KLEL ning sitotoksikligi baholandi. 4b-rasmda ko'rsatilganidek, 500 ug / ml dan past konsentratsiyada KLEL B16F10 melanoma hujayralari uchun toksik emasligi tasdiqlandi. Shunday qilib, quyidagi tajribalar uchun 32,5− 500 ug/ml KLEL ishlatilgan.

4. Xulosa

Ushbu tadqiqot amalga oshirilgan aylanma iqtisodiy modelda katta ahamiyatga ega bo'ldi, chunki u kenaf barglari uchun kosmetik sanoat uchun terini parvarish qilish xususiyatlariga ega yuqori qo'shimcha qiymatli ingredientlar, xususan antioksidant,qarishga qarshiva melanogenga qarshi faollik. Tadqiqotda taqdim etilgan topilmalar shuni ko'rsatdiki, 15 foiz KSO (F2) bilan 0,1 foiz KLE bilan tayyorlangan loson formulasi inson hujayralariga toksik ta'sir ko'rsatmasdan, eng yaxshi jismoniy va mikrobiologik barqarorlikni beradi. Davom etishda, keyingi tadqiqotlar KLEL mikrobial sinov testi va klinik samaradorlikka qaratilgan bo'lishi kerak.

cistanche qo'shimchasi