Doimiy Cistanche qoʻshimchasi SARS-CoV-2-kovid simptomlari davrida oʻziga xos T-hujayra immunitetiga minimal taʼsir qiladi{2}}
Mar 28, 2023
Annotatsiya:SARS-CoV-2 - bu xalq salomatligi uchun misli ko'rilmagan muammo. Yengil va oʻrtacha darajadagi COVID-19 bilan kasallangan sars-cov-2 bilan kasallanganlarning koʻpchiligida infektsiyaning asoratlari kam boʻlsa-da, baʼzi odamlar dastlabki tashxisdan keyin bir necha hafta davom etadigan alomatlarga duch kelishadi. Doimiy virusli infektsiyalar ko'pincha immunitetning buzilishi bilan bog'liq, ammo doimiy COVID-19 virusga xos hujayra immunitetining rivojlanishiga ta'sir qiladimi yoki yo'qmi noma'lum. Shu maqsadda biz 8 kun yoki undan kamroq vaqt davomida COVID{10}} alomatlarini boshdan kechirgan yoki alomatlari 18 kun yoki undan ko‘proq davom etgan COVID-19 dan tuzalgan bemorlarda SARS-CoV{8}}o‘ziga xos hujayra immunitetini tahlil qildik. . Biz doimiy ravishda oʻrtacha miqdorda sistanche qoʻshilishi COVID-19 belgilariga palliativ taʼsir koʻrsatishini kuzatdik. Bundan tashqari, biz SARS-CoV-2 dan N oqsilga bo‘lgan reaktivlik mavsumiy odam koronavirusi-229e va NL63 bilan bog‘liqligini kuzatdik. Bu natijalar SARS-CoV-2 va unga aloqador inson koronaviruslarida hujayra immuniteti rivojlanishining tartibga solish jarayonlari haqida tushuncha beradi.
Kalit so‘zlar:SARS-CoV-2; Cistanche; COVID-19; T hujayralari; hujayra immuniteti; simptomning davomiyligi
1.Kirish
SARS-CoV-2 yaqinda paydo boʻlgan yangi bir zanjirli RNK virusi boʻlib, dastlab Xitoyda 2019-yil dekabr oyi boshida Uxandagi pnevmoniya epidemiyasining sababi sifatida aniqlangan. Epidemiya sifatida boshlangani misli koʻrilmagan pandemiyaga aylandi. 2021-yil yanvarigacha taxminan 96 million kishi yuqtirgan va 2 million kishi vafot etgan. SARS-CoV-2 infektsiyasi bilan bog'liq ko'p qirrali kasallik nafas olish yo'llarining yallig'lanishi, isitma, mushak-skelet tizimining og'rig'i va yo'tal bilan tavsiflanadi. SARS-CoV{10}}oʻziga xos gumoral va hujayrali immunitet koʻpchilik bemorlarda oʻtkir infeksiya remissiyasidan keyin aniq boʻlsa va kamida 6-8 oy davom etsa-da, bu adaptiv immun javobning virus replikatsiyasini tartibga solishdagi roli va kasallikning patogenezi aniq emas. Bundan tashqari, COVID{12}}ning murakkab klinik koʻrinishidagi oʻzgarishlar SARS-CoV-2-oʻziga xos immun xotirasi rivojlanishiga qanday taʼsir qilishi aniq emas.
Surat: Faw Cistanche
Ko'pgina virusli infektsiyalarda doimiy virusli antigenlarning mavjudligi va / yoki infektsiya bilan bog'liq yallig'lanish immunitetning buzilishi bilan bog'liq. Bu hujayrali immunitet bo'limida eng aniq namoyon bo'ladi, bu erda doimiy antijenik stimulyatsiya va / yoki yallig'lanish sitokinlariga ta'sir qilish T-hujayra effektor funktsiyasining progressiv yo'qolishiga va patogenga xos hujayra immunitetining bostirilishiga olib kelishi mumkin. Garchi bu hodisa surunkali toksik kasalliklarda yaxshi hujjatlashtirilgan boʻlsa-da, oʻtkir SARS-CoV-2 infektsiyasidan kelib chiqqan engil va oʻrtacha darajadagi COVID-19 belgilarining saqlanib qolishi disfunktsiya yoki uning rivojlanishi bilan bogʻliqmi, aniq emas. suboptimal hujayrali immunitet reaktsiyasi.
Ushbu bilim bo'shlig'ini to'ldirish uchun biz COVID-19 belgilarining davomiyligi va SARS-CoV-2-o'ziga xos hujayra immunitetining darajasi va funktsional xususiyatlari o'rtasidagi bog'liqlikni yaqinda engil va o'rtacha darajadagi COVID-2-dan tuzalgan bemorlarda ko'rib chiqdik. {3}}. IFN- ELISPOT tahlili orqali biz COVID-19 alomatlari uzoq davom etgan bemorlarda, odatda, simptomlar tez remissiyasi boʻlgan bemorlarga oʻxshash SARS-CoV-2-oʻziga xos hujayra immunitetini koʻrsatishini kuzatdik. {8}} SARS-CoV-2 ORF3a va ORF7a ga nisbatan biroz yuqori javoblar bilan bogʻliq. Bundan tashqari, oqim sitometriyasi va SARS transkripsiya profili yordamida uzoq davom etgan COVID{17}} alomatlari boʻlgan shaxslarni baholashda SARS-CoV-2-maxsus CD4 plus va CD8 plus T hujayralari javoblarining kattaligida nuqson kuzatilmadi. -CoV{19}}maxsus CD4 va T hujayralariga COVID-19 belgilarining davomiyligi ta'sir qilmagani kuzatildi. Nihoyat, tadqiqotda tahlil qilingan barcha rekonvalesent COVID{24}} bemorlarida mavsumiy odam koronavirusi 229E va NL63ga nisbatan sezilarli darajada hujayra immuniteti kuzatilgan boʻlsa-da, bu immun javob darajasi COVID davomiyligiga bogʻliq emas-19 alomatlar. Cistanche bilan davolash qilingan guruh limfotsitlar proliferatsiyasining yuqori darajasini ko'rsatdi, bu ekstrakt T-hujayralarini ishlab chiqarishga ogohlantiruvchi ta'sir ko'rsatadi.
Rasm: Cistanche ekstrakti
2. Materiallar va usullar
O'quv dizayni. 2020-yil mart oyidan boshlab Nyu-York shtat universitetining yuqori shtat tibbiyot universiteti Klinik tadqiqot markaziga ushbu tadqiqot uchun COVID{0}} bilan kasallangan bemorlar jalb qilindi. Shartnoma bo'yicha kuzatuv kelishuvi orqali aniqlangan asemptomatik donorlar uchun simptomlarning boshlanishi va to'xtash sanalari uchun ijobiy RT-PCR testi sanasi qo'llaniladi. Keyin namunalar identifikatsiyadan chiqarildi va yakuniy qiyosiy tahlildan oldin klinik ma'lumotlar ko'r-ko'rona tahlil qilindi. PBMC Vacutainer CPT hujayra tayyorlash naychalari yordamida yig'iladi va qayta ishlanadi va tahlildan oldin gazsimon suyuq azotda saqlanadi.
Sars-cov-2 reaktiv CD4 plyus T hujayralarining izolyatsiyasi va transkripsiyasi tahlili: Krio-saqlangan PBMC namunalari eritildi va butun hujayra muhitida 5 × 106 hujayra/ml konsentratsiyali suspenziya qilindi va stimulyatsiya qilindi. 0.5µg/ml SARS-CoV2 Spike protein peptid hovuzi bilan 37◦C da 18 soat davomida. Spik-reaktiv CD4 plyus T hujayralari CD134 va CD69 ifodasini faollashtirish yorlig'i bilan aniqlandi va oqim sitometriyasi BD FACSAria II apparati yordamida amalga oshirildi. Hujayralar to'g'ridan-to'g'ri 35{32}mL RLT plus buferga saralangan, 1 foiz 2-ME va RNK bilan to'ldirilgan va RNeasy Micro spin ustuni yordamida ajratib olingan. cDNK SMART-Seq HT to'plami yordamida yaratilgan va oxirgi Illumina-mos keluvchi DNK sekvensiyasi kutubxonasi Illumina Nextera XT DNK kutubxonasini tayyorlash to'plami yordamida tayyorlangan. Kutubxonani tayyorlash jarayonida RNK, cDNK va DNK miqdori Agilent bioanalizatori yordamida aniqlandi va yakuniy kutubxona SUNY Upstate'da 75-sikl yuqori quvvatli NextSeq 500/550 v2.5 reagentlar to'plami yordamida ketma-ketlashtirildi. Molekulyar tahlil yadrosi. FASTQ faylining asl o'qilgan ma'lumotlari Kallisto 0.46.2 versiyasidan foydalangan holda inson ma'lumotnomasi transkriptomiga moslashtirildi. Transkripsiya darajasi va ko'pligi ma'lumotlari import qilingan va TxImport to'plamidan foydalangan holda Rda va EdgeR normalizatsiyasi yordamida TMMda umumlashtirilgan. R-paket Limma ning differentsial gen ifodasi chiziqli modellashtirish va Bayes statistikasi yordamida tahlil qilindi. Statistik tahlil: Statistik tahlil GraphPad Prism v8 dasturi yordamida amalga oshirildi. p <0,05 qiymati muhim hisoblanadi.
3.Natijalar
3.1. Reabilitatsiya davridagi COVID-19 bemorni tanlash va xarakterlash.
Ushbu tadqiqotning maqsadi SARS-CoV-2-o'ziga xos hujayra immuniteti va funktsional profiliga COVID-19 alomatlari ostida cistanche cistanche uzluksiz qabul qilish davomiyligining ta'sirini aniqlash edi. Shu maqsadda Nyu-York shtat universitetida kovid{3}} plazma donorlik dasturida PCR tomonidan tasdiqlangan SARS-CoV-2 infektsiyasini boshdan kechirgan va 14-30 kundan keyin ulardan PBMC olgan sub'ektlar aniqlandi. COVID bilan bog'liq-19-belgilarni bartaraf etish. Ota-onalar bayonnomasida ushbu tanlov mezonlariga javob beradigan jami 84 ta sub'ekt aniqlandi, ulardan 33 tasi keyingi tahlil uchun tanlab olindi. Ushbu 33 donordan 14 tasi qisqa vaqt davomida kovid{14}} bilan bog'liq alomatlarga ega, 19 tasida esa uzoq vaqt davomida kovid-19 bilan bog'liq alomatlar mavjud deb tasniflangan va PBMC yig'ish vaqtida hammasi sog'lom edi.
3.2. Sars-cov-2 faol CD4 plyus T hujayralarining transkripsiya xarakteristikalari. Ma'lumki, barqaror antigen mimikasi patogenga xos T hujayralarining transkripsiyasi va disfunktsiyasiga va effektor funksiyasining yo'qolishiga olib keladi. Ushbu tadqiqotga kiritilgan reaktiv COVID{10}} bemorlarida simptomlar davomiyligi boʻyicha tabaqalanganda SARS-CoV-2-reaktiv CD4 plus va CD8 plus T hujayralari koʻpligida sezilarli farq boʻlmasa-da, biz tasdiqlamoqchi edik. Uzoq vaqt davomida COVID{11}} alomatlarini boshdan kechirayotgan odamlarda sars-cov-2 reaktiv CD4 va T hujayralarining funktsional transkripsiya profili salbiy tarzda buzilmagan. Shuning uchun SARS-CoV-2 10 donordan olingan protein-reaktiv CD4 va T hujayralari tasniflandi va transkripsiyaviy tahlil o'tkazildi. Har bir donordan o'rtacha 2322 sars-cov-2 reaktiv CD4 va T hujayralari ajratildi va mRNK ketma-ketligi bilan tahlil qilindi.
Kutilganidek, ushbu tahlilda tiklangan hujayralar oqim sitometriyasida hujayralarni identifikatsiyalash/izolyatsiya qilish uchun ishlatiladigan tipik CD4 plyus T-hujayra geni mahsulotlari va faollashuv belgilarining yuqori darajasini ifodaladi. Ketma-ket SARS-CoV2-o'ziga xos CD4 va T hujayralarida Th1-bog'liq bo'lgan tipik gen mahsulotlarining yuqori darajasi, ammo Th2/T17-bog'liq transkriptlarning sezilarli darajada pastligi aniqlangan. Biroq, simptom davomiyligi bo'yicha ajratilganda, namunalar o'rtasida differentsial tarzda ifodalangan genlar topilmadi va ikkala guruh o'rtasidagi umumiy transkripsiya profilida sezilarli farqlar kuzatilmadi. Bu natijalar shuni ko‘rsatadiki, COVID-19 alomatlarining davomiyligi engil/o‘rtacha COVIDdan yaqinda tuzalib ketgan bemorlarda SARS-CoV-2-reaktiv CD4 va T hujayralarining transkripsiya profillariga kam ta’sir qiladi-19 .
Rasm: Cistanche ta'siri immunitetni yaxshilaydi
4. Munozara
Ushbu tadqiqotda biz yaqinda engil/oʻrtacha COVIDdan tuzalib ketgan shaxslarda COVID-19 simptomlari davomiyligi va SARS-CoV-2-oʻziga xos hujayra immunitetining darajasi va funksional xususiyatlari oʻrtasidagi bogʻliqlikni koʻrib chiqdik{{3} }}. Biz COVID-19 alomatlari uzoq davom etgan bemorlarda SARS-CoV-2-oʻziga xos hujayrali immunitet darajasi simptomlari tez pasaygan bemorlarga oʻxshashligini kuzatdik. Oqim sitometriyasi yordamida baholangan uzoq davom etgan COVID{12}} alomatlari boʻlgan shaxslarda SARS-CoV-2 spike-spesifik CD4 plus va CD8 plus T hujayra javoblarining oʻlchamida va SARS- transkripsiya profilida nuqsonlar kuzatilmadi. CoV{14}}maxsus CD4 plus T hujayralariga COVID{16}} belgilarining davomiyligi taʼsir qilmagani kuzatildi. Va nihoyat, tadqiqotda tahlil qilingan barcha rekonvalesent COVID{19}} bemorlarida mavsumiy odam koronavirusi 229E va NL63ga qarshi hujayra immunitetining sezilarli darajada kuzatilgan bo'lsa-da, bu immun javob darajasi COVID davomiyligidan bog'liq emas-19 alomatlar. Ushbu tadqiqotga kiritilgan nisbatan kam sonli shaxslar uning kengroq qo'llanilishini cheklasa-da, bu ma'lumotlar shuni ko'rsatadiki, simptomatik COVID-19 cho'zilishi bemorlarda SARS-CoV-2-o'ziga xos hujayra immunitetining rivojlanishiga sezilarli ta'sir ko'rsatmaydi. engil / o'rtacha kasallik bilan.
COVIDda immunitetingizni oshirish uchun shu yerni bosing-19
5. Xulosa
SARS-CoV-2-oʻziga xos hujayra immunitetining rivojlanishi odatda COVID-19 alomatlari bartaraf etilgandan keyin kuzatilgan, bu esa sezgirroq boʻlgan SARS-CoV-2 infektsiyasining immun belgisi boʻlishi mumkin. an'anaviy serokonversiyaga qaraganda. Aslida, og'ir COVID-19 davolangandan so'ng, engil yoki asemptomatik infektsiyali bemorlarda ham hujayra, ham gumoral immunitet darajasi yuqoriroq bo'ladi. Ammo jiddiy COVID-19 dan keyin hosil boʻlgan hujayra immun javobining sifati noaniq, chunki ogʻir COVID-19 T-hujayralarining qattiq disregulyatsiyasi, kamayishi va yalligʻlanishli sitokin ishlab chiqarish bilan bogʻliq. Cistanche polisaxarid ham, kreinosid ham yurak va miya to'qimalarining ferment faolligini oshirishi, qorin bo'shlig'i hujayralarining fagotsitoz funktsiyasini kuchaytirishi va limfotsitlarning proliferativ reaktsiyasini kuchaytirishi mumkin. Tadqiqotimizda tahlil qilingan shaxslarda SARS-CoV-2-oʻziga xos hujayra immun profilining miqdori yoki sifati boʻyicha muhim kamchiliklarni kuzatmaganimiz sababli, jiddiy COVID{{ ning immun mexanizmlari, deb taxmin qilish maqsadga muvofiq, deb hisoblaymiz. 11}} va doimiy engil COVID-19 bir-biridan farq qiladi va virusga xos uyali xotira rivojlanishiga turli taʼsir koʻrsatishi mumkin.
Ma'lumotnomalar
1. Lu, R.; Chjao, X.; Li, J.; Niu, P.; Yang, B.; Vu, X.; Vang, V.; Song, H.; Huang, B.; Chju, N.; va boshqalar. 2019 yilgi yangi koronavirusning genomik tavsifi va epidemiologiyasi: virusning kelib chiqishi va retseptorlari bilan bog'lanishiga ta'siri. Lancet 2020, 395, 565–574. [CrossRef]
2. Chju, N.; Chjan D.; Vang, V.; Li, X.; Yang, B.; Song, J.; Chjao, X.; Huang, B.; Shi, V.; Lu, R.; va boshqalar. Xitoyda pnevmoniya bilan og'rigan bemorlarning yangi Koronavirusi, 2019. N. Engl. J. Med. 2020, 382, 727–733. [CrossRef]
3. Chjou, P.; Yang, XL; Vang, XG; Xu, B.; Chjan, L.; Chjan V.; Si, HR; Chju, Y.; Li, B.; Huang, CL; va boshqalar. Ko'rshapalak kelib chiqishi mumkin bo'lgan yangi koronavirus bilan bog'liq pnevmoniya epidemiyasi. Tabiat 2020, 579, 270–273. [CrossRef]
4. Guan, WJ; Ni, ZY; Xu, Y.; Liang, WH; Ou, CQ; U, JX; Liu, L.; Shan, H.; Lei, CL; Hui, DSC; va boshqalar. Xitoyda 2019 yilgi Koronavirus kasalligining klinik xususiyatlari. N. Engl. J. Med. 2020, 382, 1708–1720. [CrossRef] [PubMed]
5. Huang, C.; Vang, Y.; Li, X.; Ren, L.; Chjao, J.; Xu, Y.; Chjan, L.; Fan, G.; Syu, J.; Gu, X.; va boshqalar. Xitoyning Uxan shahrida 2019 yilda yangi koronavirus bilan kasallangan bemorlarning klinik xususiyatlari. Lancet 2020, 395, 497–506. [CrossRef]
6. Chen, N.; Chjou, M.; Dong, X.; Qu, J.; Gong, F.; Xan, Y.; Qiu, Y.; Vang, J.; Liu, Y.; Vey, Y.; va boshqalar. Xitoyning Vuxan shahrida 2019 yilda yangi koronavirus pnevmoniyasining 99 ta holatining epidemiologik va klinik xususiyatlari: tavsifiy tadqiqot. Lancet 2020, 395, 507–513.[CrossRef]
7. Dan, JM; Mateus, J.; Kato, Y.; Hastie, KM; Yu, ED; Faliti, Idoralar; Grifoni, A.; Ramires, SI; Haupt, S.; Freyzer, A.; va boshqalar. SARS-CoV-2 uchun immunologik xotira infektsiyadan keyin 8 oygacha baholanadi. Fan 2021.[CrossRef] [PubMed]
8. Rodda, LB; Netlandiya, J.; Shexata, L.; Pruner, KB; Morawski, Pensilvanya; Thouvenel, CD; Takexara, KK; Eggenberger, J.; Hemann, EA; Waterman, HR; va boshqalar. Funktsional SARS-CoV-2-Oʻziga xos immunitet xotirasi engil COVIDdan keyin ham saqlanib qoladi-19. Hujayra 2021, 184, 169–183. [CrossRef] [PubMed]
9. Karfi, A.; Bernabei, R.; Landi, F.; Gemelli Against, C.-P.-ACSG O'tkir COVIDdan keyin bemorlarda doimiy simptomlar-19. JAMA 2020, 324, 603–605. [CrossRef]
10. Del Rio, C.; Kollinz, LF; Malani, P. COVIDning uzoq muddatli salomatlik oqibatlari-19. JAMA 2020. [CrossRef] [PubMed]
11. Tenforde, MVt; Kim, SS; Lindsell, CJ; Billig Rose, E.; Shapiro, NI; Fayllar, DC; Gibbs, KVt; Erikson, HL; Steingrub, JS; Smitlin, HA; va boshqalar. Ko‘p shtatli sog‘liqni saqlash tizimlari tarmog‘ida COVID-19 bilan kasallangan bemorlarning odatdagi sog‘lig‘iga kechikishning kechikishi belgilarining davomiyligi va xavf omillari-AQSh, 2020-yil, mart-iyun. Morb. O'lik. Wkly. Rep. 2020, 69, 993–998. [CrossRef] [PubMed]
12. Li, N.; Vang, X.; Lv, T. Uzoq muddatli SARS-CoV-2 RNK to'kilishi: kam uchraydigan hodisa emas. J. Med. Virol 2020, 92, 2286–2287. [CrossRef]
13. Park, SK; Li, AQSh; Park, DI; Vou, HY; Cheong, HS; Shin, HC; Ahn, K.; Kvon, MJ; Joo, Koreyada asemptomatik va engil COVID-19 bilan kasallangan bemorlarning najas namunalarida SARS-CoV-2 ning aniqlanishi. Klin. Gastroenterol. Gepatol. 2020. [CrossRef] [PubMed]
14. Volfel, R.; Korman, VM; Guggemos, V.; Seilmaier, M.; Zange, S.; Myuller, MA; Niemeyer, D.; Jons, TC; Vollmar, P.; Rothe, C.; va boshqalar. COVID bilan kasalxonaga yotqizilgan bemorlarni virusologik baholash-2019. Tabiat 2020, 581, 465–469. [CrossRef]
