Diamin oksidaz nokautli sichqonlar og'iz orqali yoki teri ostiga yuborilgan gistaminga yuqori sezuvchan emas

Abstrakt

1. Maqsad

Endogen diamin oksidazaning (DAO) ekzogen gistaminni inaktivatsiyasidagi hissasini baholash, gistaminga sezgirligi yuqori bo'lgan sichqoncha shtammini topish va gistamin sinov modelida rhDAO samaradorligini sinab ko'rish.

2. Usullar

Diamin oksidaza nokauti (KO) sichqonlari og'iz orqali va teri ostiga yuborilgan gistaminni -adrenergik bloker propranolol bilan, ikkita gistamin-N-metiltransferaza (HNMT) inhibitörleri metopren va takrin bilan, o'tkir buyrak shikastlanishini taqlid qilish uchun foliy kislotasi bilan va davolangan. rekombinant inson DAO bilan. Asosiy tana harorati teri ostiga o'rnatilgan mikrochip yordamida o'lchandi va plazmadagi gistamin darajalari bir hil vaqtli floresan tahlili yordamida aniqlandi.

3. Natijalar

O'tkir buyrak shikastlanishi yoki HNMT ingibitorlarini qabul qilmasdan og'iz va teri osti gistamin sinovidan so'ng, asosiy tana harorati va plazma gistamin darajasi yovvoyi turdagi (WT) va DAO KO sichqonlari o'rtasida sezilarli darajada farq qilmadi. Rekombinant inson DAO bilan davolash asosiy tana haroratini yo'qotish uchun egri chiziq ostidagi o'rtacha maydonni (AUC) 63 foizga (p=0.002) va klinik ko'rsatkichni 88 foizga (p) qisqartirdi.<0.001). The AUC of the histamine concentration was reduced by 81%.

4. Xulosalar

Ekzogen gistaminning inaktivatsiyasi fermentativ degradatsiya va buyrak filtratsiyasi bilan bog'liq emas. Rekombinant inson DAO bilan davolash gistamin bilan bog'liq asosiy tana haroratining yo'qolishini va gistamin kontsentratsiyasini sezilarli darajada kamaytirdi va og'ir klinik belgilar rivojlanishining oldini oldi.

Kalit so'zlar

Amin oksidaza (tarkibida mis) · Gistamin N-metiltransferaza · O‘tkir buyrak shikastlanishi · Metabolizm · Takrin · Metoprin · Tana harorati

Cistanche qo'shimchasini sotib olish uchun shu yerni bosing

Kirish

Odamlardagi barcha gistaminning 95 foizdan ortig'i mast hujayralari va bazofillarda saqlanadi. Ko'pgina sutemizuvchilar uchun ham xuddi shunday bo'lishi mumkin. Odamlarda mast hujayralarining zichligi oshqozon-ichak traktida, terida va o'pkada eng yuqori bo'ladi [1] va shuning uchun bu organlar mast hujayralari faollashuvining aniq ishtiroki bo'lgan kasalliklarda gistamin bilan bog'liq alomatlarni ko'rsatadi. O'tkir degranulyatsiyadan keyin gistaminning mahalliy interstitsial kontsentratsiyasi 10-1000 mkM ga yetishi mumkin [2, 3, Onlayn manbalarga qarang]. Odamlarda, xuddi itlar va cho'chqalarda bo'lgani kabi, normal plazma gistamin kontsentratsiyasi 1 ng / ml (9 nM) dan past bo'ladi va simptomlar bir millilitr uchun bir necha nanogrammada rivojlana boshlaydi [4-7]. Yurak urishi tezligining oshishi bilan sezilarli gipotenziya 5 ng / ml dan o'lchanishi mumkin va darajalar 10 ng / ml dan oshganda bronxospazm, yurak aritmi, og'ir gipotenziya va koronar spazm rivojlanishi hayot uchun xavfli ko'p tizimli disfunktsiyaga olib kelishi mumkin [8, 9]. Gistamin nafaqat tomirlarning kengayishida, qon tomir o'tkazuvchanligining oshishida, gipoksiyada va tomirlar shishining rivojlanishida ishtirok etadi, balki immun effektor hujayralarini jalb qilish, kamolotga etish va faollashtirish orqali adaptiv immunitet tizimiga ta'sir qiluvchi yallig'lanishga qarshi ishtirokni ko'rsatadi. Bundan tashqari, u dendritik hujayralar, tabiiy qotil hujayralar va granulotsitlar bilan o'zaro ta'sir qilish orqali tug'ma immunitet tizimida rol o'ynaydi [10, 11].

Sichqon va kalamushlarda gistaminning asosiy kontsentratsiyasi ishonchli usullar yordamida o'lchanganda 20 dan 100 ng/ml gacha bo'ladi va shuning uchun odamlarda topilganidan bir necha baravar yuqoridir [6, 7]. Ushbu yuqori gistamin darajalari fiziologik rol o'ynaydimi yoki yo'qmi aniq emas. Kemiruvchilar og'iz orqali va tomir ichiga yuborilganidan keyin mos ravishda 3000-4000 va 400-500 mg / kg sichqonchaning turli shtammlarida 50 foiz (LD50) o'ldiradigan dozalari bilan gistaminga juda chidamli [12, 13]. 20 g sichqonchada 400 mg/kg bolus yuborilgandan so‘ng plazmadagi gistaminning maksimal kontsentratsiyasi plazma hajmi 1 ml bo‘lsa, taxminan 8 mg/ml ni tashkil qiladi. Boshqariladigan ari chaqishi orqali odamlarda anafilaksi qo'zg'atilganda, 140 ng / ml gistamin kontsentratsiyasi hayot uchun xavfli bo'lgan og'ir gipotenziya bilan bog'liq edi [14]. Gistamin qanday metabollanadi va inaktivlanadi?

Gistamin o'rtacha 13 foiz plazma oqsillari bilan bog'lanadi va buyraklarda erkin filtrlanadi [15]. Glomerulyar filtratsiya tezligi (GFR) nazariy jihatdan sog'lom ko'ngillilarda topilgan 3-4 minutlik yarim yemirilish davrining 15-20 foizini tashkil qilishi mumkin [5, Onlayn manbalarga qarang]. Oddiy GFR 100 ml / min va plazma hajmi 3000 ml bo'lsa, gistaminning yarimparchalanish davri 20 minutni tashkil qiladi. Sichqonlarda normal GFR 10 µl/min/g gistaminning yarim yemirilish davri 3 minutga olib keladi [16, Onlayn manbalarga qarang]. Shunga qaramay, gistamin buyrakda yuqori ekstraktsiya tezligini ko'rsatadi, bu GFRga asoslangan stavkalardan yuqoridir va bu ekstraktsiya organik kation tashuvchisi 2 (OCT2) orqali proksimal quvurli hujayralarga so'rilish va reabsorbtsiya bilan bog'liq, so'ngra fermentativ inaktivatsiya [17, qarang. quyida]. Odamlarda in'ektsiya qilingan radioaktiv gistaminning 1 foizdan kamrog'i birinchi 6 soat ichida siydikda topilgan [18]. Itlar va mushuklarda ham kuzatiladigan odamlarda gistaminning past darajasi boshqalar tomonidan tasdiqlangan [19]. Sichqonlar va kalamushlar to'qimalarida yuborilgan radioaktivlikning 50 foizdan ko'prog'i buyraklarda, 2 foizdan kamrog'i esa vena ichiga yuborilganidan keyin 30 minutdan keyin gistamin shaklida bo'ladi [20]. Buyraklar, shuningdek, kalamushlarda gistaminning yuqori dozasini qo'llashdan keyin eng yuqori radioaktivlikka ega organ edi [21]. OCT2 tashuvchisi inson va kemiruvchilarning buyraklarida yuqori darajada ifodalanadi va plazma bo'linmasidan gistaminning ekstraktsiyasi va birlamchi siydik filtratidagi gistaminning proksimal naycha hujayralariga reabsorbsiyasi uchun javobgar bo'lishi mumkin [22, pastga qarang].

Mast hujayralari yoki plazmadan chiqarilgandan so'ng hujayradan tashqari gistaminning interstitsial suyuqlikdan endotelial hujayralardan uzoqda joylashgan boshqa bo'limlarga tez o'tkazilishi gistaminni inaktivatsiya qilishning yana bir imkoniyati bo'ladi. Bu endotelial nitrat oksidi sintaza (NOS) signalizatsiyasi va gistamin retseptorlari bilan bog'lanishi orqali kuchli gipotenziya va qon tomirlarining oqishi induktsiyasini inhibe qilishi mumkin [23-25]. Biroq, gistaminning tizimli qon aylanishidan endotelial yoki parenxima hujayralariga tashish tezligini o'rganadigan in vivo hayvonlar ma'lumotlari mavjud emas. Bir nechta in vitro tadqiqotlarida gistamin past afinitetli, yuqori sig'imli OCT2 va OCT3 [22, 26, 27] yordamida ikki tomonlama tashiladi. Gistamin kalamush OCT2 va OCT3 tashuvchisi uchun ajoyib substrat bo'lib, insonning ekvivalent OCT oqsillariga nisbatan yuqori transport samaradorligini ko'rsatadi [26].

Herba Cistanche

Sichqonlarda radioaktiv gistaminning past konsentratsiyasidan foydalanilganda, gistamin-N-metiltransferaza (HNMT) orqali metillanish inaktivatsiyaning asosiy yo'li bo'lib tuyuladi. Gistaminning yuqori dozalari bo'lgan qiyin sichqonlar metabolizmni imidazol sirka kislotasi (IMAA) va ribozid konjugatlariga o'tkazadi, faqat oz miqdorda metillangan hosilalar aniqlangan [28-30]. HNMT nokaut sichqonlarida qon zardobidagi gistamin kontsentratsiyasining besh baravar ortishi bu ma'lumotlarni tasdiqlaydi [31]. Imidazolasetik kislota diamin oksidaza (DAO) tomonidan gistamin oksidlanishi orqali hosil bo'ladi va imidazol atsetaldegidni chiqaradi, u asosan jigarda IMAA va ribozid hosilalariga aylanadi. Gistaminning DAO orqali oksidlanishi sichqonlarda og'iz orqali qabul qilinganidan keyin gistamin katabolizmida ko'proq rol o'ynaydi, bu ajablanarli emas, chunki sichqonlarda DAO ifodasi faqat oshqozon-ichak traktida yuqori bo'ladi [30]. Odamlarda gistamin og'iz orqali yuborilganda, DAO orqali oksidlovchi dezaminlanish asosiy siydik metaboliti sifatida IMAA bilan dominant katabolik yo'ldir [18].

Diamin oksidaza mis o'z ichiga olgan amin oksidaza va gistaminni faolsizlantirishga qodir bo'lgan ikkita fermentdan biridir [32]. Tanlangan to'qimalarda, asosan ingichka ichak va buyrak proksimal naycha hujayralarida DAO noto'g'ri aniqlangan hujayra ichidagi donador tuzilmalarda joylashgan va geparan sulfat proteoglikanlari bilan hujayradan tashqari bog'langan, HNMT esa faqat sitoplazmada mavjud [33, 34]. HNMT ifodasi butun tanada keng tarqalgan bo'lib, yuqori darajalari markaziy asab tizimida, siydik pufagida, yurakda, buyraklarda, jigarda, o'pkada va yog 'to'qimalarida mavjud.

Aminoguanidin yordamida DAO inhibisyonidan so'ng, qo'ylar gistaminni og'iz orqali yuborishdan so'ng, aminoguanidin bilan oldindan davolanmagan nazorat bilan solishtirganda gistamin toksikligining keng klinik belgilarini ko'rsatdi [35]. Cho'chqalarda o'tkazilgan shunga o'xshash tajriba aminoguanidin bilan oldindan davolangan va keyinchalik og'iz gistamin bilan sinovdan o'tgan hayvonlarda og'ir kasallik va o'limga olib keldi [36]. DAO inhibisyonu bilan cho'chqalarda gistaminning o'rtacha plazma kontsentratsiyasi 20- barobar oshdi. Sichqonlarni aminoguanidin bilan davolash, so'ngra og'iz orqali gistamin bilan davolash siydikdagi IMAAni oshirdi va gistamin kontsentratsiyasini taxminan besh baravar kamaytirdi [37]. Ushbu ma'lumotlar DAO ekzogen og'iz orqali yuboriladigan gistaminning parchalanishida hal qiluvchi rol o'ynashini ko'rsatdi.

Sichqonlarda aminoguanidin bilan davolash gistaminni tomir ichiga yuborishdan keyin ichakdagi gistamin kontsentratsiyasini kuchli oshirdi [30]. Biroq, aminoguanidin o'ziga xos DAO inhibitori emas, balki barcha uchta NOS fermentini bloklaydi va qon gistaminini to'qimalarga tashishni bloklaydi [38, 39]. Gistamin 2 retseptorlari antagonisti bo'lgan burimamidni qo'llash kalamushlarda qon aylanishi zarbasi modelida o'limning oshishi bilan zararli ta'sir ko'rsatdi. Shu bilan birga, burimamid kuchli DAO inhibitori ekanligi e'lon qilindi [40, 41]. Itlarda burimamid o'rtacha plazma gistamin kontsentratsiyasining 17- barobar oshishiga va o'rtacha arterial bosimning kuchli pasayishiga olib keldi [42]. Ta'sir mast hujayralarining mumkin bo'lgan faollashishi bilan bog'liq deb ishonilgan.

Xuddi shunday, HNMT ning roli HNMT inhibitori sifatida metilgistamin yordamida o'rganilgan, ammo metil-gistamin ham DAO uchun ajoyib substratdir [43]. Amodiakin va xinakrin kuchli HNMT inhibitörleridir [44-46], lekin taxminan 500 nM ning 50% (IC50) inhibitiv konsentratsiyasi bilan DAO ni inhibe qiladi [47, nashr etilmagan ma'lumotlar]. Shuning uchun, ko'pincha yuqori konsentratsiyalarda qo'llaniladigan inhibitorlar yordamida olingan ma'lumotlar ehtiyotkorlik bilan talqin qilinishi kerak, chunki ma'lum va noma'lum maqsaddan tashqari ta'sirlar ehtimoli bor va in vivo tadqiqotlarning fiziologik ahamiyatini sezilarli darajada buzishi mumkin.

Metabolik tadqiqotlar gistamin degradatsiyasida ikkita fermentning ahamiyatini ko'rsatishi mumkin, ammo gistaminning katabolizmini fiziologik yoki patofiziologik ta'sirlardan ajratish mumkin. Gistaminning bo'linma kontsentratsiyasi muhim bo'lishi mumkin va metabolizm quyi oqimda bo'lishi mumkin.

Shuning uchun biz DAO ning ekzogen gistamin degradatsiyasidagi rolini o'rganish uchun DAO nokaut (KO) sichqonchasidan foydalanishga qaror qildik. Ikkinchi asosiy maqsad gistaminga sezgirligi yuqori bo'lgan sichqoncha modelini ishlab chiqish edi, bu bizga gistaminning turli genetik mutant shtammlarida rolini yaxshiroq o'rganish va gistamin sinovi modelida rekombinant inson DAO samaradorligini sinab ko'rish edi.

Cistanche kapsulalari

Materiallar va usullar

Hayvon modellari

Tajribalar 10–18-haftalik C57BL6/J Aoc1tm1b(EUCOMM)Hmgu (DAO) KO sichqonlari va yovvoyi turdagi (WT) tug'ruqxonalar yordamida o'tkazildi. Geterozigotali embrionlar Yevropa sichqoncha mutant arxivi, Myunxen, Germaniya tomonidan taqdim etilgan va soxta homilador C57BL6/N sichqonlariga implantatsiya qilingan. Geterozigotali C57BL6/J nasl sichqonlari PCR yordamida tasdiqlangan (Onlayn manbalarga qarang) va keyinchalik GZ 66 hayvonlar protokoli boʻyicha Vena Tibbiyot Universitetining Biotibbiyot tadqiqotlari boʻlimida DAO KO sichqonlarini koʻpaytirish uchun foydalanilgan.009/{ {14}}WF/V/3b/2016. Hayvonlar ustidagi barcha tajribalar GZ 66 protokoliga muvofiq oʻtkazildi.009/0258- V/3b/2019. Eksperimental protokollar Avstriya Ta'lim, fan va tadqiqot vazirligi tomonidan tasdiqlangan. Hayvonlar 12:12 soat kunduzi-kecha tsiklida 22 daraja haroratda suv va oziq-ovqat ad libitum bilan saqlangan. Invaziv bo'lmagan haroratni o'lchash uchun transponder (IPTT-300, BioMedic Data Systems Inc., AQSh) eksperimentdan 2 hafta oldin qisqa izofluranli behushlik yordamida teri ostiga implantatsiya qilingan. Transponder bir soniya ichida uch marta haroratni o'lchaydi va bu o'lchovlarning o'rtacha qiymati o'quvchi yordamida qafasning tashqarisidan yozib olinadi. Keyinchalik bu o'rtacha qiymat keyingi hisob-kitoblar uchun ishlatiladi. Ushbu teri osti transponderlari hayvonlarning ortiqcha manipulyatsiyasini oldini olish va rektal harorat problarini qayta-qayta kiritish natijasida shikastlanishning oldini olish uchun ishlatiladi [48]. Bir qancha hayvonlar turlarida, shu jumladan kemiruvchilarda gistaminni qabul qilish tana haroratini pasaytirishi ko'rsatilgan va gistamin ta'sirining eng zamonaviy ko'rsatkichi hisoblanadi [49, 50]. Kuzatuv davrida klinik simptomlar tajribali veterinar tomonidan e'lon qilingan yuqori sezuvchanlik reytingiga ko'ra baholandi [51]. Ballar 0 (alomatlar yo'q) dan 1 gacha (bosh va burunni ishqalash va tirnash), 2 (nafas olish tezligining oshishi va/yoki faollikning kamayishi, og'iz va ko'z atrofida shishishi), 3 (nafas olishning qisqarishi, quyruq atrofidagi siyanoz) gacha bo'lgan. va og'iz, xirillash) va 4 (prodding yoki tremor va konvulsiyadan keyin hech qanday faoliyat yo'q). 5 ball o'limni bildiradi. Barcha sinov tajribalari kunning vaqtiga bog'liq o'zgarishlarni oldini olish uchun soat 9:00 dan 11:00 gacha boshlandi [52].

Umumiy eksperimental o'rnatish

Barcha moddalar 5 ml / kg hajmda qo'llanilgan. Propranolol (P0884, Sigma-Aldrich, Avstriya) sho'r suvda eritildi va gistaminga sezgirlikni oshirish uchun gistaminga qarshi kurashdan 20 daqiqa oldin 2 mg / kg konsentratsiyada qorin bo'shlig'iga (ip) qo'llandi [53]. Gistamin dihidroxlorid (H7250, Sigma-Aldrich, Avstriya) ikki marta distillangan (dd) H2O da eritildi va keyin sho'r suvda suyultirildi. Barcha ko'rsatilgan gistamin kontsentratsiyasi gistamin bazasiga tegishli (111,15 Dalton).

1. Gistaminni og'iz orqali va teri ostiga yuborish

Sichqonlar jami 60 daqiqa ro'za tutdilar. 40 daqiqalik ochlikdan so'ng propranolol yuborildi va 20 daqiqadan so'ng gistamin og'iz orqali 30 mg / kg konsentratsiyada (po) og'iz orqali yuborildi. Teri osti (sc) sinov modeli uchun sichqonlar gistaminni propranololsiz 50 mg/kg yoki propranolol bilan 5 mg/kg konsentratsiyada qabul qildilar. Plazmadagi gistamin kontsentratsiyasini aniqlash uchun sichqonlarning bir qismi 10 mg/kg ksilazin va 100 mg/kg ketamin yordamida gistamin sinovidan keyin turli vaqtlarda behushlik qilindi. Kardiyak ponksiyon yordamida anesteziya qilingan sichqonlardan sitrat plazmasi to'plangan. Vaqt nuqtasi va genotip uchun birdan beshgacha sichqon ishlatilgan.

2. Bir vaqtda gistamin-N-metiltransferaza (HNMT) inhibisyonu

Metoprin (M338835, Toronto Research Chemicals, Kanada) 10 foizli sut kislotasida (L1875, Sigma-Aldrich, Avstriya) eritildi, keyinchalik sho'r suvda suyultirildi va 5 mg/kg gistamin bilan qo'llashdan 1 soat oldin 3 mg/kg dozada ip yuborildi. Tacrine (A79922, Sigma-Aldrich, Avstriya) ddH2O da eritildi, keyinchalik sho'r suvda suyultirildi va keyinchalik 10 mg / kg 25 mg / kg gistamin sc va 2 mg / kg propranololdan 1 soat oldin ip qo'llaniladi. 2 mg / kg takrin konsentratsiyasi 30 mg / kg gistamin po bilan 2 mg / kg propranolol bilan birgalikda ishlatilgan.

Standartlashtirilgan Cistanche

3. Gistamin chaqirilishidan oldin o'tkir buyrak shikastlanishining (AKI) induktsiyasi

Folic acid (F7876, Sigma-Aldrich, Austria) was reconstituted in ddH2O, further diluted in saline, and applied i.p. at a concentration of 100 mg/kg 48 h before challenge with 5 mg/kg s.c. histamine and 2 mg/kg propranolol. The degree of acute kidney injury was estimated using plasma creatinine values. As a cut-off for inclusion, a creatinine value of at least threefold above the mean baseline value was used as described [54]. Baseline plasma creatinine concentrations of 0.11 and 0.17 mg/dl were measured in two mice and therefore an inclusion cut-off of>42 mg/dl tanlandi. Kardiyak ponksiyon orqali olingan sitrat plazmasi Cobas analizatori (Cobas C311 analizatori, Roche, Shveytsariya) yordamida kreatininni o'lchash uchun ishlatilgan. O'tkir buyrak shikastlanishida propranolol bilan sc gistamin sinovi paytida turli vaqt nuqtalarida plazma gistamin kontsentratsiyasini aniqlash uchun bir vaqtning o'zida ikki-to'rtta sichqonchani behushlik qilishdi va sitrat plazmasi yurak ponksiyoni bilan to'plandi.

4. Gistamin ma'muriyatidan keyin DAO qutqarish

Mutatsiyaga uchragan geparin bog'lovchi motivli rekombinant inson (rh) DAO (Gludovacz va boshq. [55] da tasvirlangan) vena ichiga (iv) 4 mg / kg konsentratsiyada 2 mg / kg propranolol va 60 dan 40 minut oldin qo'llangan. daqiqa oldin 5 mg/kg sc gistamin bilan.

Plazmadagi gistamin va DAO kontsentratsiyasini aniqlash uchun sichqonlar 4 mg/kg DAO yoki bufer iv bilan 2 mg/kg propranolol bilan birlashtirilgan 5 mg/kg sc gistamin bilan sinovdan 60 daqiqa oldin davolandi. Sichqonlar turli vaqt nuqtalarida behushlik qilishdi. Sitrat plazmasi bir vaqtning o'zida ikki-uch sichqonchadan yurak ponksiyoni yordamida to'plangan. Qon 3,8% natriy sitratida to'plangan va uning bir qismi darhol diminazen-aseturat (D7770, Sigma-Aldrich, Avstriya) bilan aralashtiriladi, natijada rhDAO tomonidan gistamin degradatsiyasini inhibe qilish uchun yakuniy konsentratsiya 10 mkM bo'ladi.

Gen ifodasini tahlil qilish

To'qimalar namunalari suyuq azotda shok bilan muzlatilgan va umumiy RNK lizing naychalari (Lysing Matrix E, MP Biomedicals, Germaniya) yordamida to'qimalarni homogenlashtirgandan so'ng FavorPrep Tissue Total RNK Kit (FATRK001, Favorgen, Tayvan) yordamida olingan. Precellys 24 da (Bertin Instruments, Fransiya). Teskari transkripsiya OneScript Plus cDNA sintezi to'plami (G236, ABM Good, Kanada) yordamida amalga oshirildi. Miqdoriy PCR uchun BrightGreen Express 2 × Mastermix (MasterMix-EL, ABM Good, Kanada) ishlatilgan. DAO, HNMT va histidin dekarboksilaza (HDC) uchun eksonli primerlar Primer3 dasturi yordamida ishlab chiqilgan (Onlayn manbalar jadvali 1). Normallashtirish uchun RPLP0 uy xo'jaligi geni ishlatilgan [56].

G'arbiy dog'

Western blot tahlili uchun muzlatilgan to‘qimalar namunalari Precellys 24 (Bertin Instruments, Fransiya) qurilmasida lizing naychalari (Lysing Matrix E tubes, MP Biomedicals, Germaniya) yordamida 20 mM K-fosfat tamponida (pH 7,2) lizing qilindi. . Umumiy oqsil kontsentratsiyasi QuantiPro BCA tahlil to'plami (QPBCA-1KT, Sigma, Avstriya) yordamida aniqlandi. Poliakrilamid gel elektroforezi uchun 40 mkg umumiy oqsil va 40 ng rekombinant sichqon DAO (EG, Tabiiy resurslar va hayot fanlari universiteti, Vena, Avstriya, [57] da tasvirlangan usullardan foydalangan holda taqdim etilgan) 12 foizli Tris-glisin jeli yordamida ajratilgan. 4561043, Bio-Rad, AQSh). Monoklonal ABP1 antikori (sc-515908, Santa Cruz, AQSH) DAO ni 0,4 mkg/ml konsentratsiyada aniqlash uchun, yuklash sifatida esa monoklonal GAPDH antikori (2118, Cell Signal Technology, AQSH) ishlatilgan. 1:2000 suyultirishda nazorat qiling. Sichqonchaga qarshi monoklonal IgG-HRP antikori (A2554, Sigma Aldrich, Avstriya) va quyonlarga qarshi IgG-HRP antikori (A0545, Sigma Aldrich, Avstriya) 1:40 000 suyultirishda aniqlash antikorlari sifatida ishlatilgan. Rasmlar ChemiDoc Imaging tizimida (17001401, Bio-Rad, AQSh) Clarity Max Western ECL Substrate (1705062, BioRad, AQSh) yordamida olingan.

Cistanche tubulosa

DAO faolligini o'lchash

Turli to'qimalar homogenatlarining diamin oksidaza faolligi va metopren va takrin tomonidan inhibisyonu ta'riflanganidek o'lchandi [58]. Muzlatilgan to'qimalar namunalari 20 mM K-fosfat tamponida (pH 7,2) Precellys 24 da lizis naychalari yordamida lizing qilindi. Umumiy oqsil kontsentratsiyasi QuantiPro BCA tahlil to'plami yordamida aniqlandi va turli to'qimalarning 500 mkg umumiy oqsil ekstraktlari 120 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi. orto-aminobenzaldegid (oABA) va ddH2O yoki 200 mkM kadaverin (SAPR). Delta{11}}piperidin, DAO tomonidan dezaminlangandan so'ng SAPRning avtotsiklizatsiya mahsuloti, oABA bilan kondensatsiyalanadi va ftorfor hosil qiladi, uni EX440/30 va EM620/40 nm da o'lchash mumkin. DAO inhibisyonini aniqlash uchun rhDAO 30 daqiqa davomida turli konsentratsiyalarda metopren va takrin bilan oldindan inkubatsiya qilindi va yuqorida aytib o'tilganidek o'lchandi.

DAO faolligini aniqlash uchun oqsil kontsentratsiyasi 200 mkg/ml bo‘lgan to‘qima gomogenatlari HRP (yakuniy konsentratsiya 1,2 mkg/ml, P6782, Sigma-Aldrich, Avstriya) va aminoguanidin (yakuniy konsentratsiya 10 mkM, 396494, Sigma-Ald) bilan aralashtiriladi. , Avstriya) yoki K-fosfat buferi (pH 7,2) qo'shildi va 37 darajada 15 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi. Amplex red™ (yakuniy kontsentratsiyasi 100 mkM, A12222, Thermo Scientific, AQSh) qo'shildi va 200 mkM yakuniy putresin kontsentratsiyasini qo'shish orqali reaktsiyalar boshlandi (51799, Sigma-Aldrich, Avstriya). Salbiy nazorat sifatida kaliy fosfat tamponi (pH 7,2) ishlatilgan. Namunalar 37 darajada inkubatsiya qilindi va har 10 daqiqada EX550 va EM590 nm yordamida 120 daqiqa davomida o'lchandi. DAOga xos signal K-fosfat tamponli namunalardan kuchli va qaytarilmas DAO inhibitori bo'lgan aminoguanidinli namunalarni ayirish yo'li bilan hisoblangan.

Rhoda iv qabul qilgan sichqonlarda plazmadagi DAO faolligini o'lchash uchun Prof. Quaroni (Kornel universiteti, Itaka, Nyu-York) va Amplex red™ tomonidan taqdim etilgan gibridoma hujayra liniyasi kloniga qarshi anti-DAO 8/119 monoklonal antikor yordamida gibrid tahlil ishlatilgan. Protein bilan yuqori darajada bog‘langan qora floresan plitalar (475,515, Thermo Scientific Nunc, Daniya) 50 mM karbonat-bikarbonat tamponida 1{29}}0 µl 5 µg/ml anti-DAO 8/119 bilan qoplangan ( C3041, Sigma-Aldrich, Avstriya), kechasi 4 darajada inkubatsiya qilindi va keyin xona haroratida 50 daqiqa davomida 120 µl 1% BSA (A4503, Sigma-Aldrich, Avstriya) bilan bloklandi. 100 µl plazma namunalari va standartlar bloklangandan so‘ng, avval PBSda 1:10 nisbatda suyultirilgan qo‘shildi va xona haroratida 1 soat davomida inkubatsiya qilindi. Keyin 0,1% BSA bilan PBS tarkibiga 90 µl horseradish peroksidaza (yakuniy konsentratsiya 1,2 µg/ml) va Amplex red™ (yakuniy konsentratsiya 100 µM) qo‘shildi va 10 µl putressin (yakuniy konsentratsiya 200 µM) yoki PBS qo‘shilishi bilan reaksiyalar boshlandi. Floresans EX550 va EM590 nm yordamida 37 daraja har 5 daqiqada 120 daqiqa davomida o'lchandi. Yuvish eritmasi PBS da 0,1 foiz Tween{40}} (P1379, Sigma-Aldrich, Avstriya) edi. Sichqoncha plazmasida 3-30 ng / ml rhDAO standart egri tayyorlandi. Barcha o'lchovlar ikki nusxada amalga oshirildi.

Gistamin o'lchovlari

10 mkM diminazen-aseturat (D7770, Sigma-Aldrich, Avstriya) o'z ichiga olgan sitrat plazmasi gistamin kontsentratsiyasini o'lchash uchun gistaminning bir hil vaqt bilan ajraladigan floresan (HTRF) dinamik to'plami (62HTMDPET, Cisbio, Frantsiya) yordamida ishlatilgan. To'plam ishlab chiqaruvchi tomonidan taqdim etilgan ko'rsatmalarga muvofiq ishlatilgan. Miqdorni aniqlash uchun C57Bl/6J sichqonlarining birlashtirilgan plazmasidagi gistamin standart egri chizig'i ishlatilgan. Barcha gistamin kontsentratsiyasi gistamin bazasiga tegishli va barcha o'lchovlar ikki nusxada amalga oshirildi.

Statistik tahlil

Statistik tahlillar GraphPad Prism Version 8.4.0 yordamida amalga oshirildi. (GraphPad Software Inc. San-Diego). To'qimalarning homogenatlaridagi DAO faolligidagi farqlarning statistik ahamiyati Geisser-Greenhouse tuzatish bilan takroriy o'lchovli ANOVA yordamida hisoblab chiqilgan. Egri chiziq ostidagi maydon (AUC) individual asosiy tana harorati o'lchovlari va eksperiment davomida klinik ballar Welch tuzatishisiz ikki tomonlama, juftlashtirilmagan t-testlari yordamida taqqoslandi. Guruhlar orasidagi plazmadagi gistamin kontsentratsiyasi ikki tomonlama ANOVA bilan solishtirildi. Turli genotipli, o'tkir buyrak shikastlanishi bo'lgan va bo'lmagan, DAO yoki buferni olgan sichqonlar o'rtasidagi sinovdan so'ng plazma gistamin kontsentratsiyasini solishtirish uchun ma'lumotlar alohida kichik guruhlardagi etishmayotgan qiymatlarni hisobga olish uchun intervallarga guruhlangan (genotip: 5, 1{{). 14}}, 2{22}}, 30, 40, 45, 60 min; o'tkir buyrak shikastlanishi: 0, 10-15, 20-30, 40-45 va 60 min; DAO: 0, 10, 30 va 45 min). Ikki tomonlama, juftlashtirilmagan t-testi 100 mg / kg foliy kislotasi bilan davolash qilingan va bo'lmagan sichqonlarning plazma kreatinin kontsentratsiyasidagi farqlarni tekshirish uchun ishlatilgan. Statistik ahamiyatlilik p sifatida belgilangan<0.05 in all tests.

Cistanche ekstrakti

Xulosa

DAO KO sichqonlari ekzogen og'iz va teri osti gistamin sinovlaridan foydalangan holda WT sichqonlaridan deyarli farq qilardi. Gistaminning inaktivatsiyasida HNMT ning ishtiroki topologiyaning pasayishiga olib keladi, eng yaxshi holatda o'rtacha, ammo farmakologik inhibisyon natijalari dastlabki deb hisoblanishi mumkin. HNMT ning metopren bilan inhibisyonidan foydalangan holda ma'lumotlar gistamin inaktivatsiyasida endogen DAO ishtirok etish tendentsiyasini ko'rsatdi. Buyraklar qon aylanish tizimidan gistaminni tezda ajratib olishda ishtirok etadi, ammo yetti marta ko'tarilgan 509 Diamin oksidaz nokaut sichqonlari og'iz orqali yoki teri ostiga yuborilganiga o'ta sezgir emas ... 1 3 gistamin kontsentratsiyasi markaziy harorat yordamida o'lchanadigan bo'rttirilgan fenotipga aylanmadi. fenotipik o'qish sifatida yo'qotish. Inson yoki sichqonchaning rekombinant DAO dan foydalanish gistaminning tez va massiv ajralib chiqishi bilan birga gistamin degranulyatsiyasi shubhali hayvonlarning turli modellarida gistamin ishtirokini qo'llab-quvvatlashi yoki yo'q qilishga yordam berishi yoki gistamin dekarboksilaza fermentining kuchayishi, so'ngra yangi sintez qilingan moddaning chiqishi bilan birga bo'lishi mumkin. soat davomida gistamin. DAO va HNMT genining faol bo'lmagan nusxalari bilan haqiqiy qo'shaloq KO sichqonchasini etishtirish, agar hayotga mos bo'lsa, o'rganishga arziydi. DAO yoki HNMT ning bitta KO sichqonlari aniq fenotiplarni ko'rsatmaydi. [nashr qilinmagan ma'lumotlar, 31] Xuddi shunday, ikkita asosiy gistamin tashuvchisi - OCT2 va OCT3 ning gistamin tomonidan qo'zg'atilgan fenotipik o'zgarishlarda ishtirokini sinab ko'rish bizga kemiruvchilarda gistamin vositachiligidagi simptomlarning rivojlanish mexanizmlarini yaxshiroq tushunishga imkon beradi. shuning uchun odamlarda ham potentsial. Uning kashf etilganidan beri 100 yildan ortiq vaqt davomida olib borilgan muhim tadqiqotlarga qaramay, bizda gistamin katabolizmini to'g'ri tushunish uchun hali ham bir qancha yo'llar bor.

Ma'lumotnomalar

1. Boehm T, Ristl R, Jozef S va boshqalar. Tizimli mastositoz bilan og'rigan bemorda mast hujayralarining faol faollashuvi paytida metabolom va lipidom buzilishlari. J Allergiya Clin Immunol. 2021. https://doi.org/10.1016/j.jaci.2021.03.043. 2. Packard KA, Xan MM. Gistaminning Th1/Th ga ta'siri

2 sitokin balansi. Int Immunopharmakol. 2003;3:909–20. https://doi.org/ 10.1016/S1567-5769(02)00235-7.

3. Xesterberg R, Sattler J, Lorenz V va boshqalar. Inson to'qimalarida gistamin tarkibi, diamin oksidaza faolligi va gistamin metiltransferaza faolligi: haqiqat yoki uydirma? Agentlarning harakatlari. 1984;14:325– 34. https://doi.org/10.1007/BF01973821.

4. Dyer J, Uorren K, Merlin S va boshqalar. Plazma gistaminini o'lchash: takomillashtirilgan usul va normal qiymatlarning tavsifi. J Allergiya Clin Immunol. 1982;70:82–7. https://doi.org/10.1016/ 0091-6749(82)90233-0.

5. Pollock I, Murdoch RD, Lessof MH. Plazma gistamin va normal, atopik va ürtiker kasalliklarida infuzion gistaminga klinik tolerantlik. Agentlarning harakatlari. 1991;32:359–65. https://doi.org/10. 1007/BF01980899.

6. Liu J, Vang L, Xu V va boshqalar. Sutemizuvchilarning turli turlarida plazma gistaminini aniqlash uchun UHPLC-MS/MS usulini ishlab chiqish. J Chromatogr B. 2014;971:35–42. https:// doi.org/10.1016/j.jchromb.2014.08.043.

7. Xu Y, Kang T, Dou D va boshqalar. In'ektsiya natijasida kelib chiqqan anafilaktoid reaktsiyasi uchun hayvonlar modelini baholash va optimallashtirish. Asian Pac J Allergiya Immunol. 2015;33:330–8. https://doi.org/ 10.12932/AP0619.33.4.2015.

8. Maintz L, Novak N. Histamin va gistamin intoleransi. Am J Clin Nutr. 2007;85:1185–96. https://doi.org/10.1093/ajcn/85.5. 1185.

9. Ginsburg R, Bristow MR, Kantrowitz N va boshqalar. Klinik koronar arteriya spazmining gistamin provokatsiyasi: angina pektoris variantining patogeneziga ta'siri. Am Heart J. 1981;102:819–22. https://doi.org/10.1016/0002-8703(81) 90030-2.

10. O'Mahony L, Akdis M, Akdis CA. Gistamin va gistamin retseptorlari tomonidan immun javob va yallig'lanishni tartibga solish. J Allergiya Clin Immunol. 2011;128:1153–62. https://doi. org/10.1016/j.jaci.2011.06.051.

11. Thurmond RL, Gelfand EW, Dunford PJ. Gistamin H1 va H4 retseptorlarining allergik yallig'lanishdagi roli: yangi antigistaminlarni izlash. Nat Rev Drug Discov. 2008;7:41–53. https://doi.org/10.1038/nrd2465.

12. Peritsin C, Thomann P. Sichqonlarning turli shtammlarida kliokinol, gistamin va xloroformning o'tkir toksikligini taqqoslash. In: Chambers PL, Günzel P, muharrirlar. Ayrim maqsadli organlarga toksik ta'sir qilish mexanizmi. Berlin: Springer; 1979. bet. 371–3.

13. Lamanna C, Ross HE. Sichqonchaning tana vazniga o'ldiradigan toksik dozaning aloqasi. Toxicol Appl Pharmacol. 1968;13:307–15. https://doi.org/10.1016/0041-008X(68)90104-X.

14. Van der Linden P, Hack C, Poortman J va boshqalar. 138 bemorda hasharot chaqishi muammosi: anafilaksiyaning klinik zo'ravonligi va mast hujayralari faollashuvi o'rtasidagi bog'liqlik. J Allergiya Clin Immunol. 1992;90:110–8. https://doi.org/10.1016/S0091-6749(06) 80017-5.

15. Williams WR, Shale DJ. Vazoaktiv vositachilarni plazma oqsillaridan in vitro siqib chiqarish: nerv-mushak blokirovka qiluvchi dorilarga psevdoallergik reaktsiyalarning mumkin bo'lgan mexanizmi. Br J Anaesth. 1992;69:508–10. https://doi.org/10.1093/bja/69.5.508.

16. Sasaki Y, Iwama R, Sato T va boshqalar. Soddalashtirilgan tenglama yordamida ongli sichqonlarda glomerulyar filtratsiya tezligini baholash. Physiol Rep. 2014;2:e12135. https://doi.org/10.14814/phy2.12135.

17. Helander CG, Lindell SE, Westling H. Inson qonidan C14-belgilangan gistaminni buyrak orqali olib tashlash. Scand J Clin Lab Investig. 1965. https://doi.org/10.1080/00365516509083360.

18. Sjaastad O, Sjaastad ÖV. Odamda og'iz orqali yuboriladigan l4C-gistaminning katabolizmi. Acta Pharmacol Toxicol. 1974;34:33–45. https://doi.org/10.1111/j.1600-0773.1974.tb02011.x.

19. Schayer RW. Turli turlarda gistaminning metabolizmi. Br J Pharm Chemoth. 1956;11:472–3. https://doi.org/10.1111/j. 1476-5381.1956.tb00020.x.

20. Snayder SH, Axelord J, Bauer H. Hayvon to'qimalarida C14-gistaminning taqdiri. J Pharmacol Exp Ther. 1964;144:373–9.

21. Rose B, Browne JSL. Sichqonda tomir ichiga yuborilgan gistaminning tarqalishi va yo'qolishi tezligi. Men J Physiol. 1938;124:412–20. https://doi.org/10.1152/ajplegacy.1938.124.2. 412.

22. Koepsell H, Lips K, Volk C. Polyspecifc organik kation tashuvchilar: tuzilishi, funktsiyasi, fiziologik rollari va biofarmatsevtik ta'siri. Pharm Res. 2007;24:1227–51. https://doi.org/ 10.1007/s11095-007-9254-z.

23. Lantoine F, Iouzalen L, Devynck MA va boshqalar. Gistamin tomonidan qo'zg'atilgan inson endotelial hujayralarida nitrat oksidi ishlab chiqarilishi Ca2 plyus oqimini talab qiladi. Biokimyo. 1998;330:695–9. https://doi.org/10.1042/ bj3300695.

24. Mikelis CM, Simaan M, Ando K va boshqalar. RhoA va ROCK gistamin ta'sirida qon tomir oqishi va anafilaktik shokga vositachilik qiladi. Nat Commun. 2015;6:6725. https://doi.org/10.1038/ncomms7725.

25. Ashina K, Tsubosaka Y, Nakamura T va boshqalar. Gistamin qon oqimini oshirish va in vivo endotelial to'siqni buzish orqali tomirlarning gipero'tkazuvchanligini keltirib chiqaradi. PLoS ONE. 2015;10:e0132367. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0132367.

26. Schömig E, Lazar A, Gründemann D. Ekstraneronal monoamin tashuvchi va organik kation tashuvchilar 1 va 2: transport samaradorligini ko'rib chiqish. In: Sitte HH, Freissmuth M, muharrirlar. Neyrotransmitter tashuvchilar. Berlin: Springer; 2006. b. 151–80.

27. Ohtsu H. Mast hujayralarida allergiya signalini tadqiq qilishda progress: gistaminning immunologik va yurak-qon tomir kasalliklaridagi roli va hujayradagi gistaminni tashish tizimi. J Pharmacol Sci. 2008;106:347–53. https://doi.org/10.1254/jphs.FM0070294.

28. Karjala SA, Turnquest B, Schayer RW. Radioaktiv gistaminning siydikdagi metabolitlari. J Biol Chem. 1956;219:9–12. https://doi. org/10.1016/S0021-9258(18)65762-X.

29. Schayer RW. In vivo gistaminning fiziologik miqdorlarining katabolizmi. Physiol Rev. 1959;39:116–26. https://doi.org/10.1152/ physrev.1959.39.1.116.

30. Reilly MA, Schayer RW. Gistamin katabolizmi va uning inhibisyonu bo'yicha in vivo tadqiqotlar. Br J Pharmacol. 1970;38:478–89. https://doi. org/10.1111/j.1476-5381.1970.tb10590.x.

31. Naganuma F, Nakamura T, Yoshikawa T va boshqalar. Gistamin N-metiltransferaza tajovuzkorlikni va uyqu-uyg'onish davrini tartibga soladi. Sci Rep. 2017;7:15899. https://doi.org/10.1038/s41598-017-16019-8.

32. McGrath AP, Hilmer KM, Collyer CA va boshqalar. Inson diamin oksidazasining tuzilishi va inhibisyonu. Biokimyo. 2009;48:9810–22. https://doi.org/10.1021/bi9014192.

33. Shvelberger HG. Konfokal lazerli skanerlash floresan mikroskopi orqali sutemizuvchilar diamin oksidazining to'qimalari va subhujayrali lokalizatsiyasini tahlil qilish. Infamm Res. 1998;47:60–1. https://doi.org/ 10.1007/s000110050273.

34. Nishibori M, Tahara A, Sawada K va boshqalar. Sigir markaziy asab tizimida gistamin N-metiltransferazasining neyron va qon tomir lokalizatsiyasi. Eur J Neurosci. 2000;12:415–24. https://doi.org/ 10.1046/j.1460-9568.2000.00914.x.

35. Sjaastad ÖV. Og'iz orqali yuboriladigan gistaminga qo'ylarning sezgirligini aminoguanidin bilan kuchaytirish. Amino-guanidinning endogen gistaminning siydik bilan chiqarilishiga ta'siri. Exp Physiol. 1967;52:319–30. https://doi.org/10.1113/expphysiol.1967.sp001 918.

36. Sattler J, Häfner D, Klotter HJ va boshqalar. Oziq-ovqat bilan bog'liq gistaminlar epidemiologik muammo sifatida: gistaminni og'iz orqali yuborishdan keyin plazma gistaminining ko'tarilishi va gemodinamik o'zgarishlar va diamin oksidaz (DAO) blokadasi. Agentlarning harakatlari. 1988;23:361–5. https://doi.org/10.1007/BF02142588.

37. Bowman MA, Simell OG, Peck AB va boshqalar. Aminoguanidinni qo'llashning farmakokinetikasi va obez bo'lmagan diabetik sichqonlarda diabet chastotasiga ta'siri. J Pharmacol Exp Ther. 1996;279:790–4.

38. Matejovich M, Krouzecky A, Martinkova V va boshqalar. Uzoq muddatli giperdinamik cho'chqa bakteriemiyasi paytida selektiv induksiyalangan azot oksidi sintazasini inhibe qilish. Shok. 2004;21:458–65. https://doi. org/10.1097/00024382-200405000-00010.

39. Alderton WK, Cooper CE, Knowles RG. Azot oksidi sintazalari: tuzilishi, funktsiyasi va inhibisyonu. Biochem J. 2001;357:593-615. https://doi.org/10.1042/bj3570593.

40. Altura BM, Halevy S. Qon aylanish shokidagi gistamin H1- va H2- retseptorlari antagonistlarining foydali va zararli harakatlari. PNAS. 1978;75:2941–4. https://doi.org/10.1073/pnas.75.6.2941.

41. Tomas LL, Bochner BS, Lixtenshteyn LM. H-2 antagonistlari tomonidan insonning polimorfonukulyar leykotsitlardan kelib chiqqan gistaminaza faolligini inhibe qilish. Biochem Pharmacol. 1978;27:2562–5. https:// doi.org/10.1016/0006-2952(78)90327-1.

42. Thermann M, Lorenz V, Schmal A va boshqalar. H1-va H2-retseptor antagonistlarining qon aylanish tizimiga ta'siri va itlardagi endogen plazma gistamin kontsentratsiyasi. Agentlarning harakatlari. 1977;7:97–101. https://doi.org/10.1007/BF01964888.

43. Elmore BO, Bollinjer J.A., Duli DM. Inson buyragi diamin oksidazasi: heterologik ifoda, tozalash va tavsif. J Biol Inorg Chem. 2002;7:565–79. https://doi.org/10. 1007/s00775-001-0331-1.

44. Duch DS, Bowers SW, Nichol CA. Gistamin N-metil transferazaning diaminopirimidin inhibitörleri tomonidan miya gistamin darajasini oshirish. Biochem Pharmacol. 1978;27:1507–9. https://doi. org/10.1016/0006-2952(78)90109-0.

45. Horton JR, Sawada K, Nishibori M va boshqalar. Turli xil dorilar tomonidan gistamin N-metiltransferazasini inhibe qilishning tarkibiy asoslari. J Mol Biol. 2005;353:334–44. https://doi.org/10.1016/j.jmb.2005. 08.040.

46. ​​Horton JR, Sawada K, Nishibori M va boshqalar. Inson gistamin metiltransferazasining ikkita polimorfik shakli: strukturaviy, termal va kinetik taqqoslash. Tuzilishi. 2001;9:837–49. https:// doi.org/10.1016/S0969-2126(01)00643-8.

47. Duch DS, Bacchi CJ, Edelstein MP va boshqalar. In vitro va in vivo gistamin metabolizmining ingibitorlari: antitripanosomal faollik bilan bog'liqlik. Biochem Pharmacol. 1984;33:1547–53. https:// doi.org/10.1016/0006-2952(84)90426-X.

48. Xox V, Desai A, Bandara G va boshqalar. Estrogen endotelial azot oksidi sintazasini kuchaytirish va azot oksidi ishlab chiqarish orqali urg'ochi sichqonlarda anafilaksi zo'ravonligini oshiradi. J Allergiya Clin Immunol. 2015;135:729-736.e5. https://doi.org/ 10.1016/j.jaci.2014.11.003.

49. Packman EW, Rossi GV, Harrisson JWE. Gistamin va antigistaminlarning tana haroratiga ta'siri. J Pharm Pharmacol. 1953;5:301–10. https://doi.org/10.1111/j.2042-7158.1953.tb139 90.x.

50. Morris SC, Perkins C, Potter C va boshqalar. Sichqonlarda IgE vositachiligidagi anafilaksi dori inhibisyonunu optimallashtirish. J Allergiya Clin Immunol. 2021;149:671–84. https://doi.org/10.1016/j.jaci.2021.06.022.

51. Li XM, Serebrisky D, Li SY va boshqalar. Yong'oq anafilaksisining sichqoncha modeli: asosiy yeryong'oq allergeniga T- va B-hujayra javoblari inson reaktsiyalariga taqlid qiladi. J Allergiya Clin Immunol. 2000;106:150–8. https://doi.org/10.1067/mai.2000.107395.

52. Hasegawa A, Vatanabe M, Osada H va boshqalar. Turli xil sichqoncha shtammlarida IgE-, gistamin va trombotsitlarni faollashtiruvchi omil vositachiligidagi tizimli anafilaksidagi kunning vaqtiga bog'liq o'zgarishlarga glyukokortikoidlarning ta'siri. Biochem Biophys Res Commun. 2018;495:2184–8. https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2017.12.099.

53. Fishel CW, Szentivanyi A, Talmage DW. Sichqonlarning neyrohumorlar tomonidan gistamin va serotoninga sezgirligi va desensitizatsiyasi. J Immunol. 1962;89:8–18.

54. Stallons LJ, Whitaker RM, Schnellmann RG. Folik kislota ta'siri ostida o'tkir buyrak shikastlanishi va erta fibrozda bostirilgan mitoxondrial biogenez. Toxicol Lett. 2014;224:326–32. https://doi. org/10.1016/j.toxlet.2013.11.014.

55. Gludovacz E, Schuetzenberger K, Resch M va boshqalar. Odam diamin oksidazasining geparinni bog'laydigan motivli mutatsiyalari gistaminni parchalovchi birinchi toifadagi biofarmatsevtikani ishlab chiqishga imkon beradi. Elife. 2021;10:e68542. https://doi.org/10.7554/eLife. 68542.

56. Eissa N, Kermarrec L, Hussein H va boshqalar. Sichqoncha 2,4-dinitrobenzol sulfonik kislota (DNBS) qo'zg'atuvchi kolitda messenjer RNKni miqdoriy real vaqtda PCR yordamida normallashtirish uchun mos yozuvlar genlarining mosligi. Sci Rep. 2017;7:42427. https://doi.org/10. 1038/srep42427.

57. Gludovacz E, Maresch D, Bonta M va boshqalar. Xitoy hamster tuxumdonida (CHO) ishlab chiqarilgan rekombinant inson diamin oksidazasi (rhDAO) ning xarakteristikasi. J Biotexnol. 2016;227:120–30. https://doi.org/10.1016/j.jbiotec.2016.04.002.

58. Boehm T, Karer M, Gludovacz E va boshqalar. Tabiiy substratlardan olingan yangi kashf etilgan floroforlar yordamida murakkab matritsalarda diamin oksidaza faolligini oddiy, sezgir va o'ziga xos miqdoriy aniqlash. Infamm Res. 2020;69:937–50. https://doi.org/10. 1007/s00011-020-01359-5.

59. Matsumura Y, Tan EM, Vaughan JH. Farmakologik beta-adrenerjik blokada bo'lgan sichqonlarda gistaminga va tizimli anafilaksiyaga yuqori sezuvchanlik: nukleotidlar bilan himoya. J Allergiya Clin Immunol. 1976;58:387–94. https://doi.org/10.1016/0091- 6749(76)90119-6.

60. Hunter AJ, Murray TK, Jones JA va boshqalar. In vivo va in vitro tetrahidroaminoakridinning xolinergik farmakologiyasi. Br J Pharmacol. 1989;98:79–86. https://doi.org/10.1111/j.1476-5381. 1989.tb16865.x.

61. Rabe M, Schaefer F. Buyrak kasalliklarining transgen bo'lmagan sichqoncha modellari. Nefron. 2016;133:53–61. https://doi.org/10.1159/00044 5171.

62. Miyamoto Y, Nakano S, Kaneko M va boshqalar. Ochiq yurak jarrohligida yangi sintetik proteaz inhibitorini klinik baholash. Plazma serotonin va gistamin chiqarilishiga va qonni saqlashga ta'siri. ASAIO. 1992;38:M395-8. https://doi.org/10.1097/00002480- 199207000-00063.

63. Poyga onkologiyasi - aniq onkologiya. https://www.raceoncology. com/. 2021-yil 23-noyabrda ko‘rilgan

64. Myers JW, Von Hof DD, Kuhn JG va boshqalar. Bisantrene infuziyalari bilan bog'liq anafilaktoid reaktsiyalar. Tadqiqot uchun yangi dorilar. 1983;1:85–8. https://doi.org/10.1007/BF00180195.

65. Reilly MA, Schayer RW. In vivo gistamin katabolizmi bo'yicha keyingi tadqiqotlar. Br J Pharmacol. 1971;43:349–58.

66. Malinski T, Taha Z, Grunfeld S va boshqalar. Aorta devoridagi azot oksidining tarqalishi porfirinli mikrosensorlar tomonidan in situ nazorat qilinadi. Biochem Biophys Res Commun. 1993;193:1076–82. https://doi. org/10.1006/bbrc.1993.1735.

67. Ginsburg M, Wajda I, Waelsch H. Transglutaminaz va gistaminning in vivo jonli qo'shilishi. Biochem Pharmacol. 1963;12:251–64. https://doi.org/10.1016/0006-2952(63)90148-5.

68. Vowinckel J, Stahlberg S, Paulmann N va boshqalar. Glutamin qoldiqlarining gistaminillanishi G-protein signalizatsiyasi bilan bog'liq bo'lgan yangi posttranslatsion modifikatsiyadir. FEBS Lett. 2012;586:3819–24. https://doi.org/10.1016/j.febslet.2012.09.027.

69. McNally W, Roth M, Young R va boshqalar. Vena ichiga yoki og'iz orqali yuborishdan keyin kalamushlarda takrin to'qimalarining tarqalishini butun tanadagi avtoradiografik miqdoriy aniqlash. Pharm Res. 1989;6:924– 32. https://doi.org/10.1023/A:1015933210803.

70. Kamming P, Reiner PB, Vinsent SR. Sichqoncha miya gistamin-N-metiltransferazasini 9-amino-1,2,3,4-tetrahidroakridin (THA) bilan inhibe qilish. Biochem Pharmacol. 1990;40:1345–50. https://doi.org/10. 1016/0006-2952(90)90402-7.

71. Cavallito JC, Nichol CA, Brenckman WD va boshqalar. Dihidrofolat reduktazaning lipidda eriydigan inhibitörleri. I. Sichqon, it va odamda pirimetamin, metopren va etorfinning kinetikasi, to‘qimalarda taqsimlanishi va metabolizm darajasi. Drug Metab Dispos. 1978;6:329–37.

72. Nishibori M, Oishi R, Itoh Y va boshqalar. 9-Amino{2}}, 2, 3, 4-Tetrahidroakridin gistamin N-metiltransferazaning kuchli inhibitoridir. Jpn J Pharmacol. 1991;55:539–46. https://doi.org/10.1254/jjp.55. 539.

73. Hough LB, Khandelwal JK, Green JP. Metopren bilan miya gistamin metabolizmini inhibe qilish. Biochem Pharmacol. 1986;35:307–10. https://doi.org/10.1016/0006-2952(86)90530-7.

74. Kaneko H, Koshi S, Hiraoka T va boshqalar. Buyrakning ishemik reperfuziyadan keyingi shikastlanishini diamin oksidaza bilan inhibe qilish. Biochim Biophys Acta. 1998;1407:193–9. https://doi.org/10.1016/S0925- 4439(98)00039-8.

75. Koshi S, Inoue M, Obayashi H va boshqalar. Diamin oksidaza ta'sirida ingichka ichakning ishemik reperfuziondan keyingi shikastlanishini inhibe qilish. Biochim Biophys Acta. 1991;1075:231–6. https://doi.org/10.1016/ 0304-4165(91)90271-H.

Matias Karer1 · Marlen Rager-Resch1 · Tereza Xayder2 · Karin Petroczi1 · Elizabet Gludovacz3 · Nikol Bort3 · Bernd Jilma1 · Tomas Boem1

1 Klinik farmakologiya kafedrasi, Vena tibbiyot universiteti, Waehringer Guertel 18-20, 1090 Vena, Avstriya

2 Neyrofiziologiya bo'limi, Miya tadqiqotlari markazi, Vena tibbiyot universiteti, Vena, Avstriya

3 Biotexnologiya kafedrasi, Tabiiy resurslar va hayot fanlari universiteti, Vena, Avstriya