Osmotik stress bilan Cistanche Deserticola hujayra madaniyatida feniletanoid glikozidlar biosintezini kuchaytirish

Aloqa:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Chun-Chjao Liu. Xi-Yu Cheng

AbstraktOsmotik stressning hujayra o'sishi va feniletanoid glikozidlari (PeGs) biosinteziga ta'siri hujayra suspenziyasi madaniyatida o'rganildi.Cistanche deserticolaYC Ma, Xitoyning g'arbiy mintaqasida o'stiriladigan cho'l dorivor o'simlik. Turli xil dastlabki saxaroza kontsentratsiyasi suspenziya kulturalarida hujayra o'sishi va PeGs biosinteziga sezilarli ta'sir ko'rsatdi va eng yuqori quruq vazn va PeGs to'planishi dastlabki osmotikda mos ravishda 15,9 gl-1-DW va 20,7 mg g-1-DW ga etdi. saxaroza konsentratsiyasi 175,3 mM bo'lgan 300 mOsm kg-1 kuchlanish. Saxaroza va metabolik bo'lmagan shakar (mannitol) yoki shakar bo'lmagan osmotik vositalar (PEG va NaCl) ning turli kombinatsiyalari bilan stoxiometrik tahlil osmotik stressning o'zi hujayra suspenziyasi madaniyatida PeGs biosintezini kuchaytirish uchun muhim omil ekanligini aniqladi.Cistanche deserticola. 26,9 va 23,8 mg g-1-DW maksimal PeG kontsentratsiyasi 21 kundan keyin 87,6 mM saxaroza va mos ravishda 164,7 mM mannitol (303 mOsm kg-1) yoki 20 mM PEG kombinatsiyasida olingan, bu esa mos ravishda yuqori bo'lgan. 30 kundan keyin 175,3 mM boshlang'ich saxaroza konsentratsiyasi ostida o'stirilgan C. deserticola hujayra madaniyati. Hujayra suspenziyasi madaniyatlarida rag'batlantirilgan PeGs to'planishi osmotik stress tufayli kelib chiqqan fenilalanin ammoniy liyaza (PAL) faolligining oshishi bilan bog'liq edi.

Kalit so'zlar Cistanche deserticola, Cho'lda dorivor o'simlik, Feniletanoid glikozidlar, Osmotik stress, Fenilalanin ammiak-liaz

Cistanchetubulosako'p effektlarga ega, ko'proq bilish uchun shu yerni bosing

Kirish

Cistanche deserticolaYC Ma, qimmatbaho xitoy o'ti, haloxylon ammodendrun ildizlarida parazitlik qiladi va G'arbiy Xitoyning cho'l hududlarida o'sadi. Feniletanoid glikozidlar (PeGs), C. deserticola dan ajratilgan asosiy bioaktiv komponentlar erkin radikallarni tozalash, immunitetni oshirish, jinsiy funktsiyani yaxshilash va hokazolarda sezilarli faollikka ega (Zong va boshq. 1996; Lu 1998; Vang va boshq. 2001). ning nazoratsiz ekspluatatsiyasi va ishlatilishi tufayliCistanche deserticolaning tabiiy resursiCistanche deserticola charchoq yoqasida edi. Ushbu muammolarni hisobga olgan holda, C. deserticola ning hujayra suspenziyasi madaniyati orqali PeG ishlab chiqarish taqchillikni hal qilishning istiqbolli alternativi sifatida ko'rib chiqildi.Cistanche deserticolao'simlik materiallari (Lu va Mei 2003; Ouyang va boshq. 2003; Cheng va boshq. 2005a).

Osmotik stress o'simliklarning o'sishi, rivojlanishi, morfogenezi va ikkilamchi metabolitlarning shakllanishiga ta'sir qiluvchi muhim omil hisoblanadi. Optimal osmotik stress ostida in vitro to'qimalar kulturalaridan ikkilamchi metabolitlarni ishlab chiqarishning kuchayishi bir nechta dorivor o'simlik turlarida qayd etilgan (Kim va boshq. 2001; Wang va boshq. 1999; Wu va boshq. 2005). Saxaroza bu holatlarda ishlatiladigan odatiy osmotik stress agenti bo'lib, hayotiy uglerod va energiya manbai bo'lib xizmat qiladi. Shuning uchun osmotik stressning ta'sirini va uglerod manbalari sifatida shakarning ozuqaviy rolini ajratish juda qiyin. Metabolik bo'lmagan mannitol, sorbitol va PEG bilan boshlang'ich osmotik stressning ortishi Taxus Chinensis hujayra madaniyatida paklitaksel to'planishini, Panax notoginseng hujayra madaniyatida saponin va polisaxaridlar to'planishini va Eleutherococcusbr sessilific 195. va boshqalar 2001; Shohael va boshqalar 2006). Ularning natijalari shuni ko'rsatdiki, uglevod konsentratsiyasi va osmotik stressning ta'siri o'simlik turlari va ikkilamchi metabolitlarga qarab farq qiladi.

Ushbu tadqiqotning maqsadi saxaroza, mannitol, PEG va NaCl ning hujayra o'sishi va PeGs biosinteziga osmotik ta'siriga qaratilgan.Cistanche deserticolahujayra suspenziyasi madaniyati. Suspenziya kulturalaridagi PAL faolligi boshlang'ich osmotik agentlarning turli kombinatsiyalari ostida o'rganildi va osmotik stressni oshirish orqali PeG to'planishini yaxshilashning mumkin bo'lgan mexanizmi muhokama qilindi.

Materiallar va uslublar

O'simlik materiallari va kallus induksiyasi

ning urug'lariCistanche deserticolaYC Ma Xitoyning Shinjon provinsiyasidagi cho‘l hududlaridan to‘plangan va ishlatishdan oldin 4C da saqlangan. Botanikaning o'ziga xosligi Xitoy Fanlar Akademiyasi, Xitoy Xalq Respublikasi Botanika institutida mos yozuvlar standartlari bilan taqqoslangan holda tasdiqlangan. Urug'lar 30 soniya davomida 70 foizli etanolga botirish orqali sirt sterilizatsiya qilindi, so'ngra 20 foizli suvli 5,4 foizli natriy gipoxlorit eritmasiga 20 daqiqa davomida botiriladi, so'ngra steril distillangan suv bilan uch marta chayiladi. Calli ning sirt sterilizatsiya qilingan urug'laridan kelib chiqqanCistanche deserticolaMS (Murashige va Skoog 1962) muhitida 1.0 mg l–1 naftalin sirka kislotasi (NAA), 2.0 mg l–1 6-benzil adenin ({{7}) bilan toʻldirilgan. }BA), 0,25 mg l–1 2, 4-diklorfenoksiatsetik kislota (2, 4-D), 6 gl–1 agar (PhytoTechnology LaboratoriesTM, Mahsulot ID: A181) va 30 gl-1 saxaroza 60 kun davomida 25C qorong'ilikdagi o'sish shkafida. Eksplant urug'laridan hosil bo'lgan kallus kulturalari keyinchalik 30 kunlik oraliqda yuqoridagi qattiq muhitga subkultura qilindi (Cheng va boshq. 2005a).

Hujayra suspenziyasi madaniyatini yaratish va saqlash

1,000 lm toʻrli ekran orqali filtrlangan va 200 lm toʻrli ekranda saqlangan suspenziya kallus kulturalari (3.0 g yangi ogʻirlik) 500-ml Erlenmeyerga quyilgan. 100 ml yuqoridagi suyuq muhitni o'z ichiga olgan kolba, 18 kunlik subkultura oralig'ida zulmatda 25 ° C da 110 aylanish tezligida aylanadigan shakerda. Avtoklavlashdan oldin o'rta pH 1 M NaOH yoki 1 M HCl bilan 5,8 ga o'rnatildi. O'n martadan keyin subkultura qilingan suspenziya kallus kulturalari quyidagi tajriba kolba kulturasi uchun emlash sifatida ishlatilgan. Barcha kolba tajribalari 30 gl-1 saxaroza bilan 50 ml suyuq muhitni o'z ichiga olgan 250 ml Erlenmeyer kolbalarida o'tkazildi va 1,5 g yangi og'irlikdagi 18- kunlik hujayra suspenziyasi madaniyati bilan emlandi. Bu Erlenmeyer kolbalari aylanadigan chaykagichda (110 rpm) qorong'ilikda 25 ° C da inkubatsiya qilingan.

Osmotik stress tajribasi

Dastlabki saxaroza konsentratsiyasining ta'sirini o'rganishhujayra o'sishi va PeGs to'planishi,Cistanche deserticolasuspenziya kulturalari MS muhitida 87,6,175,3 va 262,9 mM saxaroza. Osmotik stress sharoitlari uchun,Cistanche deserticolasuspenziya kulturalari MSda inkubatsiya qilinganbilan birlashtirilgan 87,6 mM saxaroza o'z ichiga olgan muhit164,7 mM mannitol. Boshqa osmotik moddalar (PEG 4,000 vaNaCl) ning osmolyarligi ekvivalentida qo'shildi87,6 mM saxaroza. Osmotik ekvivalent konsentratsiyalarosmotik moddalarning soni eksperimental ravishda PEG sifatida aniqlandi4,000 mos ravishda 20 mM va NaCl 50 mM. Barcha tajribalarda va barcha qiymatlarda uch nusxali kolbalar ishlatilganuch nusxali kolbalar ± SD vositalari edi.

Tahlil

Cistanche deserticolaturli osmotik stress ostida ekilgan hujayralar Nikon AFX-DX yorug'lik mikroskopi (Nikon, Yaponiya) tomonidan 400 · kattalashtirish ostida kuzatilgan. Madaniyat muhitining osmolyarligi bug 'bosimi osmometri (Fiske One-Ten Osmometer, MA, AQSh) bilan o'lchandi. Yangi vaznni (FW) aniqlash uchunCistanche deserticolahujayralar ortiqcha suvni olib tashlash uchun filtr qog'oziga yumshoq bosildi va tortildi. Keyinchalik, hujayralar pechda 60 ° C da 24 soat davomida quritilgan va quruq vazn (DW) qayd etilgan. Qoldiq shakar konsentratsiyasi standart sifatida glyukozadan foydalangan holda fenol va konsentrlangan sulfat kislota yordamida aniqlandi (Dubois va boshq. 1956).

PeGs quritilgan hujayralardan metanol bilan 15 daqiqa davomida 60C da ultratovushli suv hammomida (KQ2200, Shanghai Cany Precision Instrument Co., Ltd, Xitoy) chastotasi 40 kHz va quvvati 100 Vt. filtrat konsentratsiyalangan. va qoldiq distillangan suvda eriydi va keyin makro retikulyar qatronlar ustunidan (AB-8, Nankay universitetining kimyoviy mahsuloti, Tyanjin, Xitoy) o'tadi. Metanol eluati yig'ildi va umumiy PeGs tarkibi standart sifatida echinacoside yordamida 333 nm da tahlil qilindi (Du va Liu 1993a; Du va boshq. 1993b).

Hujayra hayotiyligi 2, 3, 5-trifenil tetrazolium xlorid (TTC) ni kamaytirish orqali baholandi (Steponkus va Lanphear 1967). Hayotiylik indeksi yangi to'qimalarning grammiga o'lchanadigan absorbans sifatida aniqlanadi. PAL faolligini aniqlash Koukol va Konn (1961) usuliga asoslangan. PAL faolligining bir birligi (U) 0.01 ning absorbsiya o'zgarishi miqdori sifatida aniqlanadi.

Natijalar va muhokama

Dastlabki saxaroza kontsentratsiyasining hujayra o'sishiga va hujayra suspenziyasi madaniyatida PeGs biosinteziga ta'siriCistanche deserticola.ning javobiCistanche deserticola87,6 dan 262,9 mM gacha bo'lgan dastlabki saxaroza konsentratsiyasiga hujayra suspenziyasi madaniyati sinovdan o'tkazildi. 1-rasmda ko'rsatilganidek, hujayralar 87,6 mm past boshlang'ich sukroz konsentratsiyasida PeGs tez o'sib, to'plangan va hujayra o'sishi va PeGs to'planishi 262,9 mM yuqori boshlang'ich saxaroza konsentratsiyasida aniq bostirilgan. Dastlabki saxaroza konsentratsiyasi 262,9 mM dan 87,6 dan oshganda yangi vaznning quruq vaznga nisbati pasaydi (ma'lumotlar ko'rsatilmagan). Maksimal quruq og'irligi 15,9 gl-1 va PeGs miqdori 20,7 mg g-1-DW 30-kunda 175,3 mM boshlang'ich saxaroza konsentratsiyasida olingan, uning osmolyarligi taxminan 300 mOsm kg-1 edi. Mikroskopik kuzatuv ostida hujayra devorlari sitoplazmasidan 388 mOsm kg-1 eng yuqori osmotik stressda ajratilgan, bu erda dastlabki saxaroza konsentratsiyasi 262,9 mM (2-rasm) bo'lgan va eng yuqori osmotik stress hujayralar metabolizmini buzishi va natijada kuchli o'sishni bostirish va PeGs biosintezining pasayishi. Shunga o'xshash hodisa T. Chinensis suspenziya hujayra madaniyatining suspenziya kulturalarida ham kuzatilgan va paklitaksel ishlab chiqarish uchun optimal saxaroza konsentratsiyasi 175,3 mM (Kim va boshq. 2001) edi. Biroq, 204,5 mM boshlang'ich sukroz konsentratsiyasi E. sessiliflorus hujayra madaniyatining o'sishi uchun foydali bo'ldi. 262,9 mM yuqori saxaroza konsentratsiyasi Eleutherococcus kulturalarida eleuterozidlar, fenol va flavonoidlarning biosintezini kuchaytirdi (Shohael va boshq. 2006). Saxarozaning dastlabki kontsentratsiyasi o'simlik hujayralari madaniyatining o'sishi va ikkilamchi metabolitlarining to'planishi uchun muhim ekanligi aniq va uning ta'siri ma'lum bir hujayra chizig'iga bog'liq.

C. desertikolaning hujayra suspenziyasi madaniyatida turli osmotik agentlarning hujayra o'sishiga va PeGs biosinteziga ta'siri.

Metabolik saxaroza va boshqa metabolik bo'lmagan kimyoviy substratlarning hujayra suspenziyasi madaniyatlarida PeGs biosintezidagi osmotik rolini tushunish.Cistanche deserticola, Metabolik bo'lmagan osmotik vositalar (mannitol, PEG va NaCl) bilan birlashtirilgan sukroz yordamida bir qator tajribalar o'tkazildi. Ushbu tajribalarda 87,6 mM saxaroza o'z ichiga olgan muhitga 164,7 mM mannitol, 20 mM PEG va 50 mM NaCl qo'shildi va boshlang'ich osmolyarlikni 300 mOsm kg-1 ga etdi, bu muhit bilan solishtirish mumkin bo'lgan ekvivalent osmotik holat edi 13 m. saxaroza.

3a, b-rasmda ko'rsatilganidek, mannitol (metabolik bo'lmagan shakar osmotik agenti) va PEG (o'tkazmaydigan osmotik agent) qo'shilishi hujayra o'sish tezligini biroz inhibe qilgan, ammo PeGs biosintezini sezilarli darajada kuchaytirgan.Cistanche deserticolahujayra suspenziyasi madaniyati. Maksimal PeGs tarkibi 26,9 va 23,8 mg g-1-DW, mos ravishda, 21-kuni, hujayralar 164,7 mM mannitol (303 mOsm kg-1) yoki 87,6 mM saxaroza birikmalarida o'stirilganda olingan. 20 mM PEG (299 mOsm kg–1). PeGs miqdori avvalgisidan yuqori ediCistanche deserticolaMS suyuq muhitida o'stirilgan hujayra madaniyati 175,3 mM boshlang'ich saxaroza konsentratsiyasi 30-kuni. Shakar asta-sekin iste'mol qilingan vaqt davomida.Cistanche deserticolahujayra madaniyati, so'ngra shakar bilan qo'zg'atilgan osmotik stress mos ravishda tushib ketdi (3c, d-rasm). Dastlabki saxaroza konsentratsiyasi 175,3 mM bo'lgan suyuq muhitning osmotik stressi hujayra kulturalarida PeGlar 9-kuni to'plana boshlaganda 280 dan 110 mOsm kg-1 ga tushib ketdi va 30-kuni maksimal darajaga etdi (ma'lumotlar ko'rsatilmagan). Metabolik bo'lmagan osmotik moddalar (mannitol va PEG) hujayra madaniyati jarayonida iste'mol qilinmadi, bu esa suyuq muhitning osmotik stressini 200 dan 280 mOsm kg-1 gacha ushlab turishga imkon beradi, bu osmotik bosim PeGs biosintezi uchun qulaydir. Ushbu natijalar osmotik stressning o'zi ham PeGs biosintezini kuchaytirishda muhim rol o'ynaganligini ko'rsatdi.Cistanche deserticolahujayra madaniyati.

NaCl qo'shilishi Catharanthus roseus va Panax ginseng (Smith va boshq. 1987; Wu va boshq. 2005) hujayra madaniyatlarida mos ravishda indol alkaloidlari va saponin biosintezini yaxshilash uchun xabar qilingan, ammo NaCl bilan davolash T. Chinensisning hujayra o'sishini bostirgan. palitaksel biosintezida hech qanday farq ko'rsatilmaganda (Kim va boshq. 2001). Shuning uchun har bir holat uchun batafsil tekshiruv zarur. 50 mM NaCl osmotik ekvivalentining qo'shilishi hujayra o'sishini va PeGs biosintezini bostiradi. Ushbu natija qurg'oqchilik stressiga juda yaxshi bardosh bera oladigan bu cho'l o'simlik turining hujayra madaniyati uchun foydali bo'lmagan NaCl ning o'tkazuvchanligi bilan bog'liq bo'lishi mumkin.

3-rasm Saxaroza va boshqa metabolik bo'lmagan osmotik moddalar birikmalarining hujayra o'sishiga ta'siri (a), PeGs to'planishi (b), shakar iste'moli (c) va osmotik stressning o'zgarishi (d) C. deserticola hujayrasi jarayonida madaniyat. Qiymatlar uch nusxali flakonlarning vositalaridir ± SD

Cistanche deserticolaning hujayra suspenziyasi madaniyatida turli osmotik agentlarning hujayra hayotiyligi va PAL faolligiga ta'siri.

Oldingi tadqiqotlarimizda (Cheng va boshq. 2005b, 2006), elisitor qo'shilishi PeGs biosintezini keskin rag'batlantirdi.Cistanche deserticolahujayra madaniyati va stimulyatsiya PeGs biosintezidagi birinchi asosiy ferment bo'lgan PAL faolligi oshishi bilan bog'liq edi (Hahlbrock va Grisebach 1979). 4-rasmda ko'rsatilganidek, 87,6 mM saxaroza o'z ichiga olgan MS suyuq muhitiga metabolik bo'lmagan 164,7 mM mannitol yoki 20 mM PEG qo'shilishi hujayra hayotiyligini biroz pasaytirdi, lekin PAL faolligini sezilarli darajada oshirdi, bu dastlabki saxaroza konsentratsiyasidan yuqori bo'lgan PAL faolligini oshirdi. 175,3 mm. PeGlarning to'planishi kuchayganCistanche deserticolahujayra suspenziyasi madaniyati osmotik stressning o'zi tomonidan qo'zg'atilgan PAL faolligini oshirish bilan bog'liq edi. MS suyuq muhitida 175,3 mM boshlang'ich sukroz konsentratsiyasi 15 kun ichida hujayra hayotiyligini pasayishiga olib keldi va 21 kun ichida PAL faolligini inhibe qildi. O'sib borayotgan tomonidan shakar iste'moli davridan keyinCistanche deserticolaHujayra kulturalarida, ham hujayra hayotiyligi, ham madaniyatli hujayralarning PAL faolligi oshib, mos ravishda 24 va 30-kunlarda maksimal darajaga yetdi. Osmotik stress tufayli PAL faolligining kuchayishi P. ginseng hujayra madaniyatida saponin biosintezini va C. roseus madaniyatli hujayralarda alkaloid to'planishini yaxshilash uchun ham kuzatildi (Godoy-Hernandez va boshq. 2000; Wu va boshq. 2005). Biroq, 87,6 mM saxaroza o'z ichiga olgan MS suyuq muhitiga o'tkazuvchan NaCl qo'shilishi hujayra hayotiyligini pasaytirdi va butun madaniyat davrida PAL faolligini inhibe qildi. Natijada, hujayra o'sishi va PeGs biosintezi aniq bostirilgan.

4-rasm C. deserticola hujayra kulturalarida turli osmotik stressda hujayra hayotiyligi (a) va PAL faolligi (b) o'zgarishi.Cistanche deserticolahujayra madaniyati. Qiymatlar uch nusxali flakonlarning vositalaridir ± SD

Cistanche deserticolacho'l turi va cho'l turlarini in vitro hujayra madaniyati o'rganish o'simliklar fiziologiyasi va ekologik moslashuvini tushunish uchun yangi muammolar va imkoniyatlarni taqdim etdi. Ushbu tadqiqotda biz osmotik stress vositachiligida signal o'tkazish biosintezi yo'lini o'rganish uchun potentsialga ega tizimni ishlab chiqdik va tizim PEG ni keng miqyosda ishlab chiqarish uchun asos bo'ldi.Cistanche deserticolayangi osmotik stress bilan boshqariladigan strategiya orqali hujayra madaniyati.

Minnatdorchilik

Mualliflar Xitoy Fanlar akademiyasining Innovatsion tadqiqotlar dasturining moliyaviy yordamini tan olishadi.

Muallif: Chun-Chjao Liu tomonidan "Cistanche deserticola" hujayra madaniyatlarida feniletanoid glikozidlar biosintezini osmotik stress bilan kuchaytirish. Xi-Yu Cheng

---O'simlik hujayralari vakili (2008) 27:357–362 DOI 10.1007/s00299-007-0443-3

Ma'lumotnomalar

Cheng XY, Vey T, Guo B, Ni V, Liu CZ (2005a)Cistanche deserticolaHujayra suspenziyasi madaniyati: feniletanoid glikozidlarning biosintezi va antioksidant faolligi. Biyokimya jarayoni 40: 3119–3124
Cheng XY, Guo B, Zhou HY, Ni V, Liu CZ (2005b) Takroriy ajralish hujayra suspenziyasi madaniyatlarida feniletanoid glikozidlarning to'planishini kuchaytiradi.Cistanche deserticola. Biochem Eng J 24:203–207
Cheng XY, Chjou HY, Cui X, Ni V, Liu CZ (2006) Cistanche deserticola hujayra suspenziyasi madaniyatida feniletanoid glikozidlar biosintezini xitozan elisitori bilan takomillashtirish. J Biotech 121:253–260
Du NS, Liu JL (1993a) feniletanoid glikozidlarni aniqlashCistanche deserticolaso'l retikulyar qatronlar spektrofotometriyasi orqali. Nat Prod Res Dev 5:30–33
Du NS, Vang H, Yi YH (1993b) Feniletanoid glikozidlarni ajratish va identifikatsiya qilish.Cistanche deserticola. Nat Prod Res Dev 5:5–8
Dubois M, Gilles KA, Hamilton JK (1956) Shakar va tegishli moddalarni aniqlashning kolorimetrik usullari. Anal Chem 28: 350–357

Godoy-Hernandez GC, Vazquez-Flota FA, Loyola-Vargas VM (2000) 14-l bioreaktorda yetishtirilgan osmotik stressga uchragan Catharanthus roseus hujayralarining trans-sinnamik kislotasiga ta'sir qilish alkaloid to'planishini oshiradi. Biotechnol Lett 22: 921–925
Hahlbrock K, Grisebach H (1979) Ligin va flavonoidlarning biosintezidagi fermentlarni boshqarish. Ann Rev Plant Physiol 30: 105–130
Kim SI, Choi HK, Kim JH (2001) Taxus Chinensis suspenziya hujayra madaniyatlarida osmotik bosimning paklitaksel ishlab chiqarishga ta'siri. Enzyme Microb Tech 28:202–209
Koukol J, Conn EE (1961) Aromatik metabolizm va Hordeum vulgare fenilalanin deaminazasi xususiyatlari. J Biol Chem 236: 2692–2698
Lu MC (1998) ning sedativ ta'siri bo'yicha tadqiqotlarCistanche deserticola.J Etnofarmakol 59:161–165

Lu CT, Mei XG (2003) Hujayra suspenziyasi madaniyatida qo'ziqorin elisitori tomonidan feniletanoid glikozidlar ishlab chiqarishni yaxshilash.Cistanche deserticola. Biotechnol Lett 25: 1437–1439
Murashige T, Skoog F (1962) Tez o'sish va tamaki to'qimalari madaniyati bilan bioassaylar uchun qayta ko'rib chiqilgan vosita. O'simlik Physiol 15: 473–497
Ouyang J, Vang XD, Zhao B, Yuan XF, Vang YC (2003) Nodir yer elementlarining o'sishiga ta'siri.Cistanche deserticolahujayralar va feniletanoid glikozidlarni ishlab chiqarish. J Biotechnol 102:129–134
Shohael AM, Hakrabarty D, Ali MB, Yu KW, Hahn EJ, Li HL, Paek KY (2006) Eleutherococcus sessiliflorus embriogenik madaniyatlarida saxarozadan kelib chiqqan osmotik stressga javoban eleutherosidlar ishlab chiqarishni kuchaytirish. Biokimyoviy jarayon 41:512–518
Smith JL, Smart NJ, Kurd WGW, Misawa M (1987) Catharanthus roseus (L.) Don hujayra suspenziyasi madaniyatlarida indol alkaloidlarining to'planishini oshirish uchun organik va noorganik birikmalardan foydalanish. J Exp Bot 38: 1507–1511
Steponkus PL, Lanphear FO (1967) Sovuq shikastlanishni aniqlashning trifenil tetrazolium xlorid usulini takomillashtirish. O'simlik Physiol 42: 1423-1426Wang HQ, Wu JT, Zhong JJ (1999) Sukrozni oziqlantirish strategiyasi orqali Taxus Chinensis suspenziya madaniyatlarida taksan ishlab chiqarishni sezilarli darajada yaxshilash. Biokimyoviy jarayon 35:479–483
Vang XW, Jiang XY, Vu LY, Vang XF (2001) glikozidlarni tozalash ta'siriCistanche deserticolaerkin radikallar va uni in vitro OH-induktsiyali DNK shikastlanishidan himoya qilish. Chin Pharm J 36:29–31
Vu JY, Vong K, Xo KP, Chjou LG (2005) Osmotik stress va ozuqaviy oziqlantirish orqali Panax ginseng hujayra madaniyatida saponin ishlab chiqarishni kuchaytirish. Enzyme Microb Technol 36:133–138
Zhang YH, Zhong JJ, Yu JT (1995) Panax Notoginseng suspenziya madaniyatlarida osmotik bosimning hujayra o'sishi va Ginseng saponin va polisakkarid ishlab chiqarishga ta'siri. Biotechnol Lett 17: 1347–1350
Zong GZ, He V, Vu GL, Chen LH (1996) o'rtasidagi taqqoslashlarCistanche deserticolaYC Ma va Cistanche tubulosa (Scheak) Ba'zi farmakologik faoliyatga ega. Tradit Chin Med J 21:436–438