Cistanche Desertikolaning ekstraktsiya parametrlari va quritish usullari

Cistanche - Cistanche deserticola YC Ma yokiCistanche tubulosa (Schenk) WightOrobanchiaceae o'simligining qichitqi barglari bilan quruq go'shtli poyasiCistanche deserticola YC Ma[1]. Cistanche deserticola ning asosiy faol moddasi feniletanol glikozidlaridir [2-4]. Farmakologik tadqiqotlar uning funktsiyalariga ega ekanligini ko'rsatdiafrodizyak, immunitetni yaxshilash, vaxotirani kuchaytirish[4-9].

So'nggi yillarda an'anaviy xitoy tibbiyotining [{{0}}] ekstraktsiyasida javob yuzasi metodologiyasi keng qo'llanildi. Javob yuzasi usuli yuqori aniqlik aniqligi, talab qilinadigan tajribalar sonining kamroqligi, funksiya modellarini aniq bashorat qilish va omillar va bashorat qilingan qiymatlar [15-17] oʻrtasidagi munosabatni aks ettirish kabi oʻziga xos afzalliklarga ega. Shuning uchun, bu tajriba javob qiymati sifatida beshta feniletanol glikozidlari tarkibining keng qamrovli ballidan foydalanadi va eksperimentni loyihalash, Cistanche deserticola ekstraksiya jarayonini optimallashtirish va identifikatsiya qilish va aniqlash uchun ma'lumot berish uchun Design-Expert 8.0.6.1 dasturidan foydalanadi. sifat standartlarini yaratishCistanche deserticola.

Hozirda indekskomponentlar echinaceaside va verbascosideqazib olish va qayta ishlash texnologiyasi bo'yicha dolzarb tadqiqot mavzulari hisoblanadiCistanche deserticola. Xitoy farmakopeyasining 2015 yilgi nashrida Cistanche deserticola ni qayta ishlash usuli "ifloslarni olib tashlash, yuvish, namlash, qalin bo'laklarga kesib olish va quritish" ni nazarda tutadi. [1], quritish usuli bo'yicha aniq qoidalar yo'q. Shuning uchun bu tajribada Cistanche deserticola [18] ni qayta ishlash uchun quyoshda quritish, soyada quritish, duxovkada quritish (40, 60, 80, 100, 120 daraja) va muzlatilgan quritish kabi sakkiz xil quritish usuli qoʻllanildi. Cistanche deserticolaning quritish jarayoni.

Yo'l-yo'riq bo'yicha.

30% EXINKAOSID BILAN CISTANCHE EKSTRATI

1 Materiallar va asboblar

Fresh Cistanche deserticola 2018-yil oktabr oyida yig‘ib olindi. Kelib chiqishi Gansu provinsiyasi, Baiyin, Minqin okrugi, Mitan shaharchasi. Gansu qishloq xo‘jaligi universiteti dotsenti Guo Yehong uni Cistanche deserticola YC Ma, yaproqli barglari bo‘lgan go‘shtli poya deb aniqladi. Yo'naltiruvchi moddalar echinaceaside (partiya raqami 82854-37-3, massa ulushi 98% dan katta yoki unga teng), sistanxezid A (partiya raqami 93236-42-1, massa ulushi 95% dan katta yoki unga teng), verbaskozid (partiya raqami { {5}}, massa ulushi 98% dan katta yoki unga teng, izomurabasin (partiya raqami 61303-13-7, massa ulushi 98% dan katta yoki teng), 2′-asetil verbaskozid (partiya raqami 94492-24-7 , massa ulushi 95% dan katta yoki unga teng Chengdu Pu shahridan sotib olingan. Feide Biotechnology Co., Ltd.; chumoli kislotasi va metanol xromatografiya darajasiga ega, Germaniyaning Merck kompaniyasi; suv tozalangan suv, boshqa reagentlar esa analitik darajaga ega.

Waters Acquity suyuqlik xromatografi, PDA detektori, Empower xromatografiya ish stantsiyasi va to'rtlamchi erituvchini boshqarish tizimi; KQ-100E ultrasonik tozalagich, Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.

Kompaniya; AL104 analitik balansi, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd.; LyoQuest-85 muzlatilgan quritgich, Telstar, Ispaniya.

2 Usullar va natijalar

2.1 Etalon eritma tayyorlash

Tegishli miqdorlarni aniq tortingechinaseasid, sistanxeozid A, verbaskozid, izorbaskozid, va 2'-asetil verbaskozid mos yozuvlar standartlari va 70% metanol qo'shib, massa konsentratsiyasi 1.04, 0.61, 0.63, 0,39 va 0,48 mg/ml aralash mos yozuvlar eritmasi.

2.2 Cistanche deserticolaning xromatografik sharoitlari

Suv simmetriyasi C18 (250 mm×4,6 mm, 5 mkm); ustun harorati 30 daraja, hajmli oqim 1,0 ml/min; harakatlanuvchi faza metanol-0.1% chumoli kislotaning suvli eritmasi, elutsiya gradienti: 0~12 min, 29%~34% metanol; 12-40 min, 34%-40% metanol; 30-35 min, 40%-35% metanol; 35-40 min, 30% metanol;

1-echinacoside 2-cistanche A 3-verbascoside 4-izoakteosid 5-2′-asetillakteosid

1-rasm. Aralash mos yozuvlar (A) va C. deserticola namunasining (B) HPLC

2.3 Tekshiriluvchi eritma tayyorlash

1 g quritilgan Cistanche deserticola kukunini aniq torting, Erlenmeyer kolbasiga ({1}}to‘rli elakdan o‘tkazing), 50 ml 50% metanol qo‘shing, massani torting, 40 kHz ultratovushli 150 Vt, xona haroratiga qadar sovutib oling. , va uni olish uchun massa hosil qiling.

2.4 Chiziqli munosabatni tekshirish

{0}}.1, {{20}}.5, 1, 2, 4 va 8 ml yuqoridagi aralash referans eritmasidan 10 ml ga oling. o'lchov kolbasiga soling va belgiga 70% metanol qo'shing. 10 mL ni aniq tortib oling va "2.2" xromatografik sharoitga muvofiq o'lchang. Massa konsentratsiyasi abscissa (X) va eng yuqori maydoni ordinata (Y) dir. Chiziqli regressiyani bajaring va regressiya tenglamalari: Ekinezya Y=128 049 X -830 189, r=0.999 5, chiziqli diapazon 10,4~832,0 ug/mL; Cistancheside AY=87 980 -447 963, r＝0.999 8, chiziqli diapazon 6.3-504,0 ug/ml; Isomurabasin Y＝92 831 glikozid Y=79 207 X{29}}, r{30}}.999 4, chiziqli diapazon 4,8~384,0 ug/ml.

2.5 Uslubiy tahlil

2.5.1 Aniq tekshirish

“2.1” bandidagi aralash mos yozuvlar eritmasidan 20 mL oling va echinatseasid, sistanxezid A, verbaskozid, izorebaskozid va 2’-asetilverbaskozidning eng yuqori nuqtalarini o‘lchash uchun doimiy ravishda 6 marta yuboring. RSDlar mos ravishda 0.23%. , {{10}}.71%, 0.59%, 0.41%, 0.29%, bu asbob yaxshi aniqlikka ega ekanligini koʻrsatadi.

2.5.2 Takroriylik testi

Xuddi shu Cistanche deserticola namunasidan 6 ta porsiya olib, “2.3” bandiga muvofiq tekshiriluvchi eritma tayyorlang, “2.2” banddagi xromatografik sharoitda namunani AOK qiling va tepalik maydonini o‘lchang. Natijalar Echinaceaside, cistancheoside A, verbascoside, isorebascoside va 2'-asetil verbascoside ning o'rtacha massa ulushlari 1,83%, 0.21%, 2.34%, 0.13% va {{15} edi. }}.68% mos ravishda va RSDs mos ravishda 1,32 edi. %, 0.83%, 1.24%, 2.19%,

0.78%, bu usul yaxshi takrorlanuvchanlikka ega ekanligini ko‘rsatadi.

2.5.3 Barqarorlik testi

Echinaceaside, sistanxeozid A, verbaskozid va izolebaskozid olish uchun 0, 2, 4, 8, 12, 24 va 48 soatlarda bir xil sinov eritmasining ("2.3" bo'yicha tayyorlangan) barqarorligini aniqlang. , 2′-asetil verbaskozid tepalik maydoni, RSD mos ravishda 0.58%, 0.21%, 1.58%, 1.46%, 2.19% boʻlib, sinov eritmasining 48 soat ichida barqarorligini koʻrsatadi.

2.5.4 Namunani tiklash testi

Tarkibi ma'lum bo'lgan 6 ta Cistanche deserticolaning 1 g namunasini oling va ma'lum miqdorda aralash moslama eritmasini aniq qo'shing (Echinaceaside 1.06 mg/ml, Cistancheoside A 0.86 mg /ml, Verbascoside 2,17 mg/ml, Isolebascoside 0,79 mg /ml, 2′-asetil verbascoside 0.91 mg/ml), 70% metanol qo'shib, 50 ml gacha va "2.2" ning xromatografik shartlariga muvofiq namunalarni AOK qiling. O'lchangan o'rtacha tiklanishlar mos ravishda 101,52%, 99,21% va 102,62%. , 98,62%, 97,36%, RSD mos ravishda 1,64%, 1,95%, 0,87%, 1,59%, 1,13% va namunani qayta tiklash darajasi yaxshi.

Cistanche - buyraklarni oziqlantirib, himoya qiladigan taniqli tonik o't. An'anaviy xitoy tibbiyoti nazariyasiga ko'ra, Cistanche buyraklar uchun eng yaxshi o't hisoblanadi. Cistanche echinacoside, acteosid va flavonoidlarga boy. Cistanche tarkibidagi ushbu samarali ingredientlar buyrak hujayralari apoptozini kamaytirishi va buyrak hujayralari proliferatsiyasini oshirishi mumkin. Shuning uchun, Cistanche tabiiy buyrak qo'shimchasidir.