Sanoat kanopi qoldiqlaridan polisaxaridlarning ekstraktsiyasi, fizik-kimyoviy xususiyatlari, qarishga qarshi va antioksidant faolligi 2-qism

2.8. Qarishga qarshi faoliyatni o'rganish

2.8.1. Hujayra hayotiyligi

In vitro, sitotoksiklik tajribalari ko'pincha sinovdan o'tgan namunalarning toksikligini baholash uchun qo'llaniladi [37]. IHRPlarning HDF va HEK hujayra hayotiyligiga ta'siri, odatda epidermal hujayralar qatori bo'lgan, 5-rasmda ko'rsatilgan. IHRPlarda HDF va HEK uchun sitotoksiklik deyarli yo'q edi. Bundan tashqari, IHRPlar hujayra proliferatsiyasini 100 dan 800 mkg / ml gacha oshirishi mumkin. Namuna kontsentratsiyasi hujayra hayotiyligiga ta'sir qilmasligini ta'minlash uchun biz quyidagi tajribalar uchun 400 µg/ml dan past IHRP konsentratsiyasini tanladik.

Sistanx glikozidi, shuningdek, yurak va jigar to'qimalarida SOD faolligini oshirishi va har bir to'qimalarda lipofusin va MDA tarkibini sezilarli darajada kamaytirishi, turli xil reaktiv kislorod radikallarini (OH-, H₂O₂ va boshqalar) samarali tozalash va DNKning shikastlanishidan himoya qilishi mumkin. OH-radikallar tomonidan. Cistanche feniletanoid glikozidlari erkin radikallarni kuchli tozalash qobiliyatiga ega, S vitaminiga qaraganda yuqori darajada kamaytirish qobiliyatiga ega, sperma suspenziyasida SOD faolligini yaxshilaydi, MDA tarkibini kamaytiradi va sperma membranasi funktsiyasiga ma'lum bir himoya ta'siriga ega. Cistanche polisaxaridlari D-galaktoza sabab bo'lgan eksperimental qarigan sichqonlarning eritrotsitlari va o'pka to'qimalarida SOD va GSH-Px faolligini oshirishi, shuningdek o'pka va plazmadagi MDA va kollagen miqdorini kamaytirishi va elastin miqdorini oshirishi mumkin. DPPHga yaxshi tozalash ta'siri, qarigan sichqonlarda gipoksiya vaqtini uzaytirish, sarumdagi SOD faolligini yaxshilash va eksperimental qarigan sichqonlarda o'pkaning fiziologik degeneratsiyasini kechiktirish Hujayra morfologik degeneratsiyasi bilan tajribalar Cistanche yaxshi antioksidant qobiliyatiga ega ekanligini ko'rsatdi. va terining qarish kasalliklarini oldini olish va davolash uchun dori bo'lish potentsialiga ega. Shu bilan birga, Cistanchedagi echinacoside DPPH erkin radikallarini tozalashning muhim qobiliyatiga ega va reaktiv kislorod turlarini tozalashi, erkin radikallar keltirib chiqaradigan kollagen degradatsiyasini oldini olishi mumkin, shuningdek, timin erkin radikal anionining shikastlanishiga yaxshi ta'sir ko'rsatadi.

Antioksidantlar uchun Cistanches Herba-ni bosing

【Batafsil ma'lumot uchun:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

2.8.2. HDF hujayralarining skretch tahlili

Skretch tahlili in vitro usuli bo'lib, hujayra va molekulyar mexanizmlarning hujayra proliferatsiyasi va migratsiyasiga qo'shgan hissasini baholash uchun keng qo'llaniladi [38]. HDF tirnalganlarning shifo holati tasvirlari 6-rasmda ko'rsatilgan. Turli konsentratsiyali IHRPlarning barchasi nazorat bilan solishtirganda hujayra tirnalganini davolash uchun foydali bo'lgan. Bundan tashqari, IHRP kontsentratsiyasi 50 va 200 mkg/ml orasida bo'lganida, IHRPs hujayra tirnalganini davolashni sezilarli darajada rag'batlantirishi mumkin. HDF tirnalganidan keyin 24 soatdan keyin shifo darajasi mos ravishda 64,51 ± 3,69 foizni (p < 0.01), 58,03 ± 3,90 foizni (p < 0,05) va IHRP bo'lganda 66,21 ± 6,60 foizni (p < 0,01) tashkil etdi. 6-jadvalda ko'rsatilganidek, konsentratsiya 50, 100 va 200 mkg/ml ni tashkil etdi. Bundan tashqari, IHRPlarning shifobaxsh ta'siri ijobiy nazorat TGF-ga juda yaqin edi (62,29 ± 4,69 foiz, p < 0,01). Skretch tahlili natijalari shuni ko'rsatdiki, IHRPs hujayra tirnalganini davolashni tezlashtirishi va hujayra proliferatsiyasini rag'batlantirishi mumkin.

2.8.3. HDF gen ifodasining qRT-PCR tahlili

Turli o'simliklarning qarishga qarshi salohiyatini baholash uchun bir nechta tadqiqotlar o'tkazildi [39,40]. HDF ning qarishga qarshi genlarining nisbiy miqdoriy ko'rsatkichi 7-rasmda ko'rsatilgan. Rasmda ko'rsatilganidek, TGF-, Vc va HA ijobiy nazorat sifatida ishlatilgan. AQP-3 nisbiy miqdoriy aniqlash tartibi HA > TGF- > IHRPs > Vc edi. COL1A1 nisbiy miqdoriy aniqlash tartibi TGF- > Vc > HA > IHRPs edi. COL3A1 nisbiy miqdoriy aniqlash tartibi Vc > TGF- > HA > IHRPs edi. ELASTIN nisbiy miqdoriy aniqlash tartibi TGF- > Vc > HA > IHRPs edi. MMP{15}} nisbiy miqdorlashtirish tartibi IHRPs > HA > Vc > TGF- edi. Shuning uchun, ijobiy nazorat bilan solishtirganda, IHRPs AQP-3, COL1A1, COL3A1 va ELASTIN ifodasiga deyarli hech qanday ijobiy ta'sir ko'rsatmadi. Biroq, IHRPlar MMP-1 ifodasini sezilarli darajada ilgari surdi. MMP-1 asosan keratinotsitlar tomonidan ishlab chiqariladi va asosan teri kollagen tolalarining parchalanishi va parchalanishi uchun ishlatiladi [41]. Xulosa qilib aytganda, IHRPlar HDF proliferatsiyasini va qarishga qarshi genlarning ifodalanishini rag'batlantirishi mumkin, bu IHRPlarning qarishga qarshi va terini tiklash potentsialini ko'rsatadi.

3. Materiallar va usullar

3.1. Materiallar va reaktivlar

IHR Yunnan Hempmon Pharmaceuticals Co., Ltd. (Kunming, Xitoy) tomonidan taqdim etilgan. Fenol, -naftol, sulfat kislota, karbazol, Coomassie ko'k G-250, fosfor kislotasi, etanol, xloroform va monosaxarid nazorati Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd. (Shanxay, Xitoy) tomonidan etkazib berildi. Galakturon kislotasi, glyukuron kislotasi, guluron kislotasi va arbutin Sigma-Aldrich Co., Ltd. (Sent-Luis, MO, AQSh) dan sotib olingan. Inson dermal fibroblasti (HDF), inson epidermal keratinotsitlari (HEK) va to'liq hujayra muhiti Sciencell Co., Ltd. (Carlsbad, CA, AQSH) dan sotib olindi. 12-quduq plitalari va 96-quduq plitalari Corning Co., Ltd. (Corning, NY, AQSH) tomonidan taklif qilingan. CCK-8 hujayra hayotiyligini tahlil qilish to'plami DOJINDO Biology Co., Ltd. (Tokio, Yaponiya) dan sotib olingan va boshqa aniqlash to'plamlari Takara Co., Ltd. (Takara, Yaponiya) tomonidan taklif qilingan.

3.2. IHRP ekstraktsiyasini optimallashtirish

3.2.1. Turli ekstraksiya usullarini solishtirish

Perkolatsiya ekstraktsiyasi: 2000 ml deionlangan suvga 100 g IHR qo'shildi. Ekstraktsiya 2 soatdan keyin 150 ± 50 ml / soat oqim tezligi bilan amalga oshirildi. Isitish ekstrakti: 100 g IHR 2000 ml deionlangan suvga qo'shildi. Ekstraksiya 98 ◦C da 1 soat davomida amalga oshirildi va jarayon ikki marta takrorlandi. Ultratovush yordamida ekstraksiya: 100 g IHR 2000 ml deionlangan suvda eritildi. Ekstraktsiya 0,5 soat davomida 60 ° C da o'tkazildi va jarayon ikki marta takrorlandi.

Filtrlar vakuumli aylanadigan evaporatator yordamida konsentratsiya qilindi. Keyin eritma vakuumli quritgichda quritiladi. Tegishli usulni tanlash uchun polisakkarid miqdori aniqlandi.

3.2.2. Bir faktorli tajribalar

IHRPlarni olish uchun ma'lum miqdorda deionizatsiyalangan suvga 100 g IHR qo'shildi. Ekstraksiya harorati (40, 60, 80 va 98 ± 2 ◦C), qattiq-suyuqlik nisbati (1:6, 1:8, 1:10 va 1:15), ekstraksiya vaqti (0,5, 1,0, 1,5 va 2 h), pH (3, 5, 7, 9 va 11) va bir nechta ketma-ket ekstraktsiyalar (1, 2, 3, 4) alohida omillarning IHRP ekstraktsiyasiga ta'sirini baholash uchun alohida o'rganildi.

3.2.3. Ortogonal eksperimental dizayn

Ekstraksiya shartlari ortogonal eksperimental dizayn orqali yanada optimallashtirildi. 7-jadvalda ko'rsatilganidek, to'rtta tanlangan o'zgaruvchilar ekstraksiya harorati (60, 80 va 98 ± 2 ◦C), RS/L (1:6, 1:8 va 1:10), ketma-ket ekstraktsiyalar soni (1) , 2 va 3) va pH (4, 7 va 10). Ortogonal tajribalar 9 ta guruhga bo'lingan. Polisaxaridlarning og'irligi ekstraktsiya sharoitlarini baholash uchun maqsad sifatida qabul qilindi.

3.3. IHRPs Spirtli ichimliklar yog'ingarchilik sharoitlari ekrani

Ekstraksiya eritmasi 3,2 ga muvofiq optimal holatda olingan va 400 ml etanol qo'shilgan. Tajribalar 8-jadvalda spirt qo'shishning turli tezligi, aralashtirish usuli va sovutish tezligi asosida o'tkazildi. Cho'kma santrifüjlash va quritishdan keyin olingan. So'ngra, tegishli spirtni cho'ktirish sharoitlarini aniqlash uchun og'irlik va polisakkarid miqdori olindi.

3.4. IHRPlarning polisaxaridlar unumini va kimyoviy tarkibini aniqlash

Protein tarkibi Bredford usuli asosida hisoblab chiqilgan va sigir zardobidagi albumin (BSA) standart sifatida ishlatilgan [42]. IHRPlarning umumiy shakar miqdori fenol-sulfat usuli bo'yicha olingan va glyukoza standart sifatida ishlatilgan [43]. Uron kislotasi tarkibi karbazol-sulfat kislota usuli bilan olingan [44]. Polisaxarid unumi (1) tenglama bo'yicha olingan.

Bu erda YP polisaxaridning hosildorligini bildiradi, mA IHRPlarning og'irligini anglatadi va mB polisaxaridlarni ekstraktsiya qilish uchun ishlatiladigan IHR og'irligini bildiradi.

3.5. IHRPlarni tozalash

Birinchidan, 100 g xom IHRP 3.2 va 3.3-bo'limlarda aniqlangan optimal holat bo'yicha tayyorlangan. Xom IHRPlar turli usullar bilan yanada tozalandi.

Faollashtirilgan uglerod adsorbsiyasi: 200 ml deionlangan suvga 10 g xom IHRP qo'shildi. Eritma bilan mos ravishda 1 foiz, 2 foiz, 4 foiz va 8 foiz IHRP og'irlikdagi faollashtirilgan uglerod aralashtirildi. Keyin eritma 60 ° C da 1 soat davomida aralashtiriladi va filtrlanadi. Deionizatsiyalangan suv bilan yuvilgandan so'ng, filtrat konsentrlangan va quritilgan.

Membran filtratsiyasi: 500 ml deionlangan suvga 10 g xom IHRP qo'shildi. Keyinchalik, eritma turli molekulyar og'irlikdagi (30, 000 Da, 10, 000 Da, 1000 Da va 500 Da) membranalar orqali doimiy ravishda filtrlanadi. Filtr va retentat to'plangan va quritilgan. Nihoyat, turli molekulyar og'irlikdagi IHRPlar olindi.

Savage usuli: 1 g xom IHRP 100 ml deionizatsiyalangan suvga qo'shildi. Keyin eritma Sevage reaktivi bilan aralashtiriladi (n-butanol: xloroform=1: 5 (h/v)). Aralash 15 daqiqa davomida aralashtiriladi va qatlamlanish uchun ajratuvchi voronkaga o'tkazildi. Yuqoridagi jarayon 5 marta takrorlandi. Keyinchalik, organik faza va suvli faza ham quritilgan.

Ustun xromatografiyasi: 10 g zaif asosli anion almashinadigan qatron 2 soat davomida deionlangan suvga botirildi, so'ngra shisha ustunga (2 × 30 sm) yuklandi. 200 ml deionlangan suvga 10 g xom IHRP qo'shildi. Keyinchalik, eritma asta-sekin qatron qatlamidan o'tkazildi. Ustun 100 ml 30% etanol bilan yuvilgan. Eluent konsentratsiyalangan va quritilgan.

3.6. Monosaxaridlar tarkibini tahlil qilish

Monosaxaridlar tarkibi testi avvalgi usul bo'yicha engil o'zgartirishlar bilan amalga oshirildi [45]; 5 mg IHRP 1 ml trifluoroasetik kislota (TFA, 2 M) bilan 105 ◦C da 6 soat davomida gidrolizlandi. Keyinchalik, eritma azotli atmosferada quritilgan. Quritilgan gidrolizat TFA metanol bilan chiqarilgandan so'ng 5 ml deionlangan suvga qo'shildi. Keyin, 0,5 ml 0,3 M NaOH eritmasi va 1 ml 0,5 M 1-fenil-3-metil-5- gidrolizatga pirazolon (PMP) metanol eritmasi qo'shildi. Olingan eritma derivatizatsiya qilish uchun suv hammomida 2 soat davomida 70 ◦C da saqlanadi. Keyin neytrallash uchun 0,5 ml HCl eritmasi (0,3 M) qo'shildi. Eritma HPLC tahlili uchun 1 ml xloroform bilan aralashtiriladi. Malumot sifatida bir nechta monosaxaridlar ishlatilgan. Xromatografik sharoitlar: Mobil faza A (82 foiz): 0,1 M KH2PO4 eritmasi. Mobil faza B (18 foiz): asetonitril. Ustun: C18 (5 mkm, 4,6 × 250 mm). In'ektsiya hajmi: 10 µL. Oqim tezligi: 1,0 ml/min. Aniqlash to'lqin uzunligi: 245 nm. Ustun harorati: 30 ◦C.

3.7. Furye transformatsion infraqizil spektroskopiya (FT-IR)

FT-IR tahlili uchun namunalar 5 mg IHRPni 125 mg KBr bilan aralashtirish orqali tayyorlangan. Namunalarning FT-IR spektrlari 4000 va 500 sm-1 oralig'ida olingan.

3.8. Antioksidant faolligini o'rganish

3.8.1. DPPH radikallarini tozalash faoliyati

IHRPlarning DPPH erkin radikallarini tozalash faolligi bir nechta modifikatsiyalar bilan xabar qilingan usul asosida baholandi [46]. Qisqasi, 2 ml namunali eritma (0.2, 0.4, 0.6, 0.8 va 1.0 mg/ ml) 2 ml DPPH eritmasi (0,1 mM) bilan aralashtiriladi. Aralash qorong'uda 30 daqiqa ushlab turildi, so'ngra absorbans (Abs) 517 nm da olindi. DPPH ni tozalash tezligi quyidagi tenglama bilan baholandi (tenglama (2)) va 50 foiz samarali kontsentratsiya (EC50) hisoblandi.

Bu erda RSD erkin radikallarni tozalash tezligini ifodalaydi, Ai - reaktsiya tizimining Abs (namuna bilan DPPH), Aj - namuna fonining Abs (namuna bilan erituvchi) va A0 Abs. salbiy nazoratning (eritma bilan DPPH).

3.8.2. ABTS Radikallarni tozalash faoliyati

IHRPlarning ABTSni tozalash faoliyati avvalgi usul [47] asosida baholandi. Qisqacha aytganda, kaliy persulfat eritmasi (2,45 mM) 12 soat davomida qorong'ida ABTS eritmasi (7 mM) bilan aralashtiriladi. Olingan ABTS eritmasi 5{6}} marta abs 0.70 ± 0.0 734 nm da 2 ga suyultirildi. Keyinchalik, 4 ml ABTS eritmasiga 1 ml namuna eritmasi (0,2, 0,4, 0,6, 0,8 va 1,0 mg/mL) qo'shildi. Aralash 1 daqiqa davomida tez chayqatiladi va qorong'i joyda 6 daqiqaga joylashtiriladi. Keyin Abs 734 nm da o'lchandi va Vc ijobiy nazorat sifatida ishlatilgan. ABTSni tozalash tezligi (2) tenglama bilan hisoblab chiqilgan.

3.9. Qarishga qarshi faoliyatni o'rganish

3.9.1. Hujayra madaniyati

Inson dermal fibroblasti (HDF) va inson epidermal keratinotsitlari (HEK) ScienCell Co., Ltd kompaniyasidan sotib olindi. Hujayralar 10 foiz FBS o'z ichiga olgan DMEM muhiti bilan o'stirildi. Madaniyat holati 5 foiz CO2 bilan 37 ◦C edi.

3.9.2. Hujayra hayotiyligi

IHRP larning HDF va HEK hujayralariga qarshi sitotoksikligini aniqlash uchun Hujayralarni hisoblash to'plami-8 (CCK-8) tahlili o'tkazildi. Hujayralar 48 soat davomida 2 × 104 hujayra/quduq konsentratsiyasi bilan 96-quduq plastinkalarida yetishtirildi. Shundan so'ng, namunalarni o'z ichiga olgan 100 µL yangi muhit qo'shildi va quduqlar 24 soat davomida inkubatsiya qilindi. Keyin CCK{8}} eritmasi sinov to'plamlari ko'rsatmalariga muvofiq quduqlarga qo'shildi va plastinka 2 soat davomida inkubatsiya qilindi. Hujayra hayotiyligini hisoblash uchun 450 nm da Abs olindi.

3.9.3. Scratch Assay

HDF 5 foiz CO2 bilan 37 ◦C da yetishtirildi. Keyin hujayralar 1 × 105 hujayra/quduq konsentratsiyasida 12-quduq plastinkasiga ekildi. 48 soat davomida inkubatsiyadan so'ng, shprits ignasi yordamida HDF hujayra qatlamida tirnalgan joy hosil bo'ldi. Hujayra bo'laklari PBS bilan tozalandi va turli konsentratsiyali namunalar qo'shildi. Keyinchalik, IHRPlarning HDF tarqalishiga ta'sirini baholash uchun 24 soatdan keyin hujayra qatlami tirnalgan shifo kuzatildi. Olingan tasvirlar Image J dasturi [48] yordamida miqdoran aniqlandi. Ijobiy nazorat sifatida transformatsion o'sish omili- (TGF-) ishlatilgan. Sog'ayish tezligi tenglama (3) bo'yicha hisoblab chiqilgan.

bu erda A1 boshlang'ich chizish maydonini va A2 yakuniy chizish maydonini bildiradi.

3.9.4. Miqdoriy RT-PCR (qRT-PCR) tahlili

Keyin hujayralar 1 × 105 hujayra/quduq konsentratsiyasi bilan 12-quduq plastinkalariga ekildi. 48 soat davomida inkubatsiyadan so'ng, namunalar aralashtiriladi va yana 24 soat davomida kultura qilinadi. Jami RNK olindi va cDNK sintez qilindi. Aquaporin geni (AQP-3), kollagen geni (COL1A1 va COL3A1), elastin geni (ELASTIN) va matritsa metalloproteinazasi (MMP-1) uchun qRT-PCR tahlillari real vaqt rejimida amalga oshirildi. PCR tizimi (Applied Biosystems Life Technologies, Inc., ABI StepOnePlus). Nisbiy miqdoriy aniqlash qiyosiy KT usuli (2-∆∆Ct usuli) bilan o'tkazildi. Ijobiy nazorat sifatida gialuron kislotasi (HA), Vc va TGF- ishlatilgan.

3.10. Statistik tahlil

Natijalar o'rtacha ± SD (n {0}}) sifatida ko'rsatildi. Statistik ahamiyat ANOVA tomonidan amalga oshirildi. P <0,05 qiymatlari statistik ahamiyatga ega deb hisoblandi.

4. Xulosalar

Ushbu ishda IHR dan polisaxarid ekstraktsiyasi bir faktorli tajribalar va ortogonal eksperimental dizayn bilan optimallashtirildi. Ekstraksiya harorati 98 ◦C, qattiq-suyuqlik nisbati 1:10, ekstraksiya vaqti 1 soat, ketma-ket ekstraksiya soni 2 va pH 4 boʻlgan. Ekstraksiya nisbati va polisaxarid miqdori shartlarda mos ravishda 2{{40}},12 va 12,35 foizni tashkil etdi. Bundan tashqari, mos keladigan spirtli yog'ingarchilik sharoitlari 2 L / soat pompalanadi, doimiy ravishda aralashtiriladi va 4 soat davomida muzli suvli hammom. Xom IHRPlar ustun xromatografiyasi orqali yanada tozalandi va tozalangan IHRPlarning polisakkarid/oqsil tarkibi 34,44 foiz va 1,61 foizni tashkil etdi. IHRP ning monosaxarid tarkibi: fukoza (1,33 foiz), arabinoza (19,60 foiz), ramnoz (10,41 foiz), galaktoza (20,87 foiz), glyukoza (27,42 foiz), ksiloza (4,23 foiz), riboza (3,12 foiz), galaktoz (3,12 foiz) edi. kislota (6,22 foiz), guluron kislotasi (0,28 foiz) va glyukuron kislotasi (2,37 foiz). FT-IR IHRPlarning polisakkarid skeletini ko'rsatdi. Bundan tashqari, ABTS va DPPH radikallarining EC50 qiymatlari 0,34 va 0,47 mg / ml ni tashkil etdi, bu IHRPlarning katta antioksidant faolligini ko'rsatdi. IHRPs shuningdek, HDF va HEK hujayralarining ko'payishiga va hujayra tirnalganligini davolashga yordam berishi mumkin. Bundan tashqari, IHRPlar MMP-1 ifodasini sezilarli darajada oshirishi mumkin. Shu sababli, sanoat kanop qoldiqlaridan polisakkaridlar kosmetika yoki funktsional oziq-ovqat uchun potentsial antioksidant va qarishga qarshi mahsulot sifatida ishlab chiqilishi mumkinligiga ishoniladi.

Muallif hissalari:TC, QZ va BZ tajribalarni ishlab chiqdi. TC va HL (Hang Li) tajribalarni o'tkazdilar va dastlabki loyihani yozdilar. TC, HL (Hang Li), HL (Hongning Lv), XL va ML ma'lumotlarni tahlil qildi. MT, SH, QZ va BZ qo'lyozmani qayta ko'rib chiqdilar. Barcha mualliflar qo'lyozmaning nashr etilgan versiyasini o'qib chiqdilar va rozi bo'ldilar.

Moliyalashtirish: Ushbu tadqiqot Yunnan Hempmon Pharmaceuticals Co., Ltd tomonidan moliyalashtirilgan.

Institutsional nazorat kengashi bayonoti:Qo'llanilmaydigan, qo'llab bo'lmaydigan.

Axborotlangan rozilik bayonoti:Qo'llanilmaydigan, qo'llab bo'lmaydigan.

Ma'lumotlar mavjudligi to'g'risidagi bayonot:Qo'llanilmaydigan, qo'llab bo'lmaydigan.

Manfaatlar to'qnashuvi:Mualliflar manfaatlar to'qnashuvi yo'qligini e'lon qilishmagan.

Namuna mavjudligi:IHR va IHRP birikmalarining namunalari mualliflardan mavjud.

Ma'lumotnomalar

1. Kumar, P.; Mahato, DK; Kamle, M.; Bora, R.; Sharma, B.; Pandhi, S.; Tripati, V.; Yadav, HS; Devi, S.; Patil, U. Cannabis sativa L ning farmakologik xususiyatlari, terapevtik potentsiali va huquqiy holati: Umumiy ko'rinish. Fitoter. Res. 2021, 35, 6010–6029. [CrossRef] [PubMed]

2. Shoyama, Y.; Yagi, M.; Nishioka, I.; Yamauchi, T. Kannabinoid kislotalarning biosintezi. Fitokimyo 1975, 14, 2189–2192. [CrossRef]

3. De Meijer, ED; Van der Kamp, X.; Van Eeuwijk, F. Boshqa o'simlik belgilar haqida kannabinoid tarkibi haqida nasha qo'shilishlari xarakteristikasi. Euphytica 1992, 62, 187–200. [CrossRef]

4. Luka, SV; Roerer, S.; Kleigrewe, K.; Minceva, M. Bir vaqtning o'zida kannabidiol izolyatsiyasi va kenevir ekstraktidan pestitsidlarni suyuqlik-suyuqlik xromatografiyasi bilan olib tashlash uchun yondashuv. Ind. Crop. Prod. 2020, 155, 112726. [CrossRef]

5. Bonini, SA; Premoli, M.; Tambaro, S.; Kumar, A.; Makkarinelli, G.; Memo, M.; Mastinu, A. Cannabis sativa: Uzoq tarixga ega bo'lgan dorivor o'simlikning keng qamrovli etnofarmakologik tekshiruvi. J. Etnofarmakol. 2018, 227, 300–315. [CrossRef] [PubMed]

6. Xartsel, J.A.; Eads, J.; Hikori, B.; Makriyannis, A. Cannabis sativa va kanop. Nutraceuticals sohasida; Gupta, RC, Ed.; Akademik matbuot: Boston, MA, AQSh, 2016; 53-bob; 735–754-betlar.

7. Palmieri, S.; Mascini, M.; Oliva, E.; Viteritti, E.; Evgelio, F.; Fanti, F.; Compagnone, D.; Sergi, M. Cannabis sativadagi kannabinoid profili L. LC-MRM/IDA/EPI tahlili yordamida namunalar: navlarni tasniflash uchun yangi yondashuv. J. Agrik. Oziq-ovqat kimyosi. 2022, 70, 3907–3916. [CrossRef]

8. Atalay, S.; Yarocka-Karpovich, I.; Skrzydlewska, E. Kannabidiolning antioksidant va yallig'lanishga qarshi xususiyatlari. Antioksidantlar 2020, 9, 21. [CrossRef]

9. Kichik, E. Evolyutsiyasi va inson foydalanish haqida nasha sativa (marixuana, kanop) tasnifi. Bot. Vahiy 2015, 81, 189–294. [CrossRef]

10. Mazzara, E.; Karletti, R.; Petrelli, R.; Mustafo, AM; Kaprioli, G.; Fiorini, D.; Scortichini, S.; Dall'Akqua, S.; Sut, S.; Nunes, S.; va boshqalar. Uchta qimmatli fraksiyalarni (efir moyi, fenolik birikmalar va kannabinoidlar) qayta tiklash uchun mikroto'lqinli usul yordamida kanopning yashil ekstraktsiyasi (Cannabis sativa L.): Markaziy kompozitsion dizaynni optimallashtirish bo'yicha tadqiqot. J. Sci. Oziq-ovqat qishloq xo'jaligi. 2022, matbuotda. [CrossRef]

11. Tan, MH; Chang, SL; Liu, JN; Li, H.; Xu, PW; Vang, PD; Vang, XD; Chjao, MX; Chjao, B.; Vang, LW; va boshqalar. Quinoa (Chenopodium quinoa Willd.) urug'idan olingan polisaxaridlarning fizik-kimyoviy xususiyatlari, antioksidant va antidiyabetik faolligi. Molekulalar 2020, 25, 3840. [CrossRef]

12. Chjay, FG; Liang, QC; Vu, YY; Liu, JQ; Liu, JW Red ginseng polisakkaridi GPX4 regulyatsiyasi bilan bog'liq bo'lgan ferroptoz orqali saratonga qarshi faollikni namoyish etadi. Farm. Biol. 2022, 60, 909–914. [CrossRef]

13. Chjou, X.; Afzal, S.; Volmut, X.; Munch, G.; Lich, D.; Past, M.; Li, CG Lipopolisakkarid va interferon-gamma-induktsiyali yallig'lanish mediatorlarini inhibe qilishda zanjabil va zerdeçal ekstraktlarining sinergik yallig'lanishga qarshi faolligi. Molekulalar 2022, 27, 3877. [CrossRef] [PubMed]

14. Zou, YF; Li, CY; Fu, YP; Jiang, QX; Peng, X.; Li, LX; Song, X.; Chjao, XH; Li, YP; Chen, XF; va boshqalar. Angelica sinensis (Oliv.) Dielsning turli ildiz qismlaridan polisaxaridlarning dastlabki tuzilishi va ichakdagi yallig'lanishga qarshi va oksidlanishga qarshi faolligini taqqoslash. J. Etnofarmakol. 2022, 295, 115446. [CrossRef] [PubMed]

15. Xuan, Z.; Zong, MH; Lou, WY Millettia speciosa Champ'dan polisaxaridni tayyorlash, strukturaviy tushuntirish va immunomodulyatsion faollik. Ind. Crop. Prod. 2022, 182, 114889. [CrossRef]

16. Cao, WY; Vang, CX; Mayxesumu, X.; Pan, L.; Dang, Y.; Yili, A.; Abuduvayli, A.; Mansur, S. Izolyatsiya, Strukturaviy tushuntirish, Brassica rapa L. Molecules polisaxaridlarining antioksidant va gipoglikemik faolligi 2022, 27, 3002. [CrossRef] [PubMed]

17. Panggabean, JA; Adiguna, SP; Rahmavati, SI; Ahmadiy, P.; Zaynuddin, EN; Bayu, A.; Putra, Yosunga asoslangan sulfatlangan polisaxaridlarning virusga qarshi faoliyati. Molekulalar 2022, 27, 1178. [CrossRef]

18. Baeva, E.; Blaha, R.; Lavrova, E.; Sushitskiy, L.; Kopikova, J.; Yablonskiy, I.; Kloucek, P.; Synytsya, A. Qo'ziqorin Pleurotus ostreatus yetishtiriladigan basidiokarplardan polisaxaridlar: izolyatsiya va strukturaviy xarakteristikalar. Molekulalar 2019, 24, 2740. [CrossRef]

19. Xu, JQ; Chjan, JL; Sang, YM; Vey, YN; Chen, XY; Vang, YX; Xue, Tibbiyot va oziq-ovqat gomologiyasi materiallaridan HK polisaxaridlari: ularning ekstraktsiyasi, tozalanishi, tuzilishi va biologik faolligi bo'yicha sharh. Molekulalar 2022, 27, 3215. [CrossRef]

20. Xaustveyt, G.; Wold, JK Cannabis sativa L. Karbohidratda mavjud past molekulyar og'irlikdagi ba'zi uglevodlar. Res. 1973, 29, 325–329. [CrossRef]

21. Hillestad, A.; Wold, JK; Paulsen, BS Cannabis sativa L. Carbohydr dan suvda eruvchan glikoproteinlarning strukturaviy tadqiqotlari. Res. 1977, 57, 135–144. [CrossRef]

22. Groce, JW; Jons, LA Kannabisning karbongidrat va siklitol tarkibi. J. Agrik. Oziq-ovqat kimyosi. 1973, 21, 211–214. [PubMed]

23. Ven, Z.-S.; Syue, R.; Du, M.; Tang, Z.; Xiang, X.-V.; Chjen B.; Qu, Y.-L. Kenevir urug'i polisakkaridlari ichak epiteliya hujayralarini vodorod peroksid tomonidan qo'zg'atilgan oksidlovchi stressdan himoya qiladi. Int. J. Biol. Makromol. 2019, 135, 203–211. [PubMed]

24. Bao-yao, BY-gW; Jie, TJ-wL Kanop urug'idan suvda eruvchan polisaxaridlarni ekstraksiya qilish va tozalash. Oziq-ovqat fanlari. Technol. 2004, 6, 157–161.

25. Guo, L.; Kong, N.; Chjan X.; Ma, H. Makadan polisakkaridlarning multimode ultratovushli ekstraktsiyasi (Lepidium meyenii): Optimallashtirish, tozalash va in vitro immunoregulyatsion faoliyat. Ultratovush. Sonochem. 2022, 88, 106062. [CrossRef]

26. Chi, YZ; Li, YP; Chjan, GL; Gao, YQ; Ya, H.; Gao, J.; Vang, P. Enteromorpha prolifera dan polisaxaridlarning xossalariga ekstraksiya texnikasining ta'siri va ularning temir xelatlanishida qo'llanilishi. Uglevod. Polim. 2018, 181, 616–623. [CrossRef] [PubMed]

27. Shi, MJ; Vey, X.; Syu, J.; Chen, BJ; Chjao, DY; Cui, S.; Zhou, T. Enteromorpha prolifera dan karboksimetillangan degradatsiyalangan polisakkaridlar: tayyorlash va in vitro antioksidant faolligi. Oziq-ovqat kimyosi. 2017, 215, 76–83.

28. Ren, CJ; Chjan, Y.; Cui, WZ; Lu, GB; Vang, YW; Gao, HJ; Huang, L.; Mu, ZM tut bargining polisakkarid ekstrakti yuqori yog'li dieta va streptozototsin tufayli kelib chiqqan 2-toifa diabetli kalamushlarda jigarda glyukoza almashinuvini va insulin signalizatsiyasini yaxshilaydi. Int. J. Biol. Makromol. 2015, 72, 951–959.

29. Vu, JW; Lab.; Tao, DB; Chjao, XT; Quyosh, RY; Ma, FM; Zhang, BQ vodorod periks bilan eritma plazma jarayonining Auricularia auricula dan polisakkaridning parchalanishi va antioksidant faolligiga ta'siri. Int. J. Biol. Makromol. 2018, 117, 1299–1304.

30. Fan, SH; Li, JN; Bai, BQ tozalash, tizimli tushuntirish va quinoa (Chenopodium quinoa Willd.) urug'laridan polisaxaridlarning in vivo immunitetni kuchaytiruvchi faoliyati. Biosci. Biotexnologiya. Biokimyo. 2019, 83, 2334–2344.

31. Quyosh, YJ; Xou, ST; Song, S.; Chjan, B.; Ai, CQ; Chen, XF; Liu, N. Kislotali, suvli va gidroksidi ekstraktsiyaning strukturaviy xususiyatlarga ta'siri, Laminaria japonica polisakkaridlarining antioksidant faolligi. Int. J. Biol. Makromol. 2018, 112, 985–995.

32. Patel, MK; Tanna, B.; Mishra, A.; Jha, B. Psillium (P. ovata) barglaridan olingan polisakkaridning fizik-kimyoviy tavsifi, antioksidant va proliferativ faolligi. Int. J. Biol. Makromol. 2018, 118, 976–987. [PubMed]

33. Palmieri, S.; Fanti, F.; Oliva, E.; Viteritti, E.; Sergi, M.; Pepe, A.; Compagnone, D. Kimyoviy tavsif va Abruzzo mintaqasidagi Cannabis sativa L. ning turli navlaridan antioksidant faollikni baholash. Nat. Prod. Res. 2022, 1–5. [CrossRef] [PubMed]

34. Li, X.; Chjao, Q.-S.; Chang, S.-L.; Chang, T.-R.; Tan, M.-H.; Zhao, B. Kengaytirilgan suvda eruvchanligi, biologik faolligi va termal barqarorligi bilan kannabidiol to'liq spektrli moy/2, 6-di-Ometil- -siklodekstrin inklyuziya kompleksini ishlab chiqish. J. Mol. Suyuq. 2022, 347, 118318.

35. Chen, L.; Yang, V.; Gao, C.; Liao, X.; Yang, J.; Yang, B. Ko'prikli siklodekstrinlar dimerlari vositachiligida kannabidiol komplekslari yuqori eruvchanligi, in vitro antioksidant faolligi va sitotoksikligi. J. Mol. Suyuq. 2022, 345, 117017.

36. Russo, C.; Lavorgna, M.; Nugnes, R.; Orlo, E.; Isidori, M. Kannabidiol va uning propil analogi kannabidivarinning antimikrobiyal, antiradikal va sitotoksik faolligini qiyosiy baholash. Sci. Rep. 2021, 11, 22494.

37. Xotun, B.; Baishya, P.; Ramteke, A.; Maji, TK. Strukturaviy ravishda o'zgartirilgan kurkuminning gidroksipropil beta-siklodekstrin bilan kompleksi va uning saratonga qarshi faolligiga ta'sirini o'rganish. Yangi J. Chem. 2020, 44, 4887–4897.

38. Bobadilla, AVP; Arevalo, J.; Sarro, E.; Byrne, HM; Mayni, PK; Karraro, T.; Balokko, S.; Meseguer, A.; Alarcon, T. Scratch tahlillari uchun in vitro hujayra migratsiyasi miqdorini aniqlash usuli. JR Soc. Interfeys 2019, 16, 20180709. [CrossRef]

39. Salem, MA; Radvan, RA; Mostafa, ES; Alseekh, S.; Ferni, AR; Ezzat, SM Tanlangan o'tlarning antioksidant qobiliyatini va qarishga qarshi potentsialini baholash uchun UPLC/MSga asoslangan maqsadsiz metabolomik yondashuvdan foydalanish. RSC Adv. 2020, 10, 31511–31524.

40. Kampa, M.; Baron, E. Tanlangan botanikalarning qarishga qarshi ta'siri: ilmiy dalillar va hozirgi tendentsiyalar. Kosmetika 2018, 5, 54.

41. Freitas-Rodriges, S.; Folgueras, AR; Lopez-Otin, C. Qarishda matritsali metalloproteinazalarning roli: to'qimalarni qayta qurish va undan tashqari. Biochim. Biofizika. Acta Mol. Hujayra Res. 2017, 1864, 2015–2025 yillar.

42. Bredford, MM Protein bo'yog'ini bog'lash printsipidan foydalanadigan oqsilning mikrogram miqdorini aniqlash uchun tezkor va sezgir usul. Analiz. Biokimyo. 1976, 72, 248–254. [PubMed]

43. Dyubois, M.; Gilles, KA; Hamilton, JK; Rebers, Pensilvanya; Smit, F. Shakar va tegishli moddalarni aniqlashning kolorimetrik usuli. Analiz. Kimyo. 1956, 28, 350–356. [CrossRef]

44. Achchiq, T.; Muir, HM A modifikatsiyalangan uronik kislota karbazol reaktsiyasi. Analiz. Biokimyo. 1962, 4, 330–334. [CrossRef]

45. Dai, J.; Vu, Y.; Chen, SW; Chju, S.; Yin, HP; Vang, M.; Tang, JA 1-fenil-3-metil-5-pirazolon bilan ustundan oldingi derivatlashning modifikatsiyalangan RP-HPLC usuli bilan Dunaliella salina dan polisaxaridlarning shakar tarkibini aniqlash. Uglevod. Polim. 2010, 82, 629–635.

46. ​​Gao, J.; Chjan, T.; Jin, ZY; Xu, XM; Vang, JH; Zha, XQ; Chen, HQ Lilium lancifolium Thunb dan polisakkaridning strukturaviy tavsifi, fizik-kimyoviy xususiyatlari va antioksidant faolligi. Oziq-ovqat kimyosi. 2015, 169, 430–438.

47. Syao, X.; Fu, X.; Cao, C.; Li, C.; Chen, C.; Huang, Q. Sargassum pallidumdan polisaxaridlarning sulfatlangan modifikatsiyasi, tavsifi, antioksidant va gipoglikemik faolligi. Int. J. Biol. Makromol. 2018, 121, 407–414.

48. Allov, M.; Mankoni, M.; Aroffu, M.; Marongiu, F.; Porceddu, M.; Bacchetta, G.; Usach, I.; Rached, RA; Raja, HN; Maroun, RG; va boshqalar. Oksidlanish stressi bilan bog'liq teri kasalliklarini davolash uchun mo'ljallangan, maxsus tuzilgan fosfolipid pufakchalariga Hypericum Scruglii ekstraktining olinishi, tavsifi va kiritilishi. Farmatsevtika 2020, 12, 1010.

【Batafsil ma'lumot uchun:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】