Sog'lom kattalarda SARS-CoV-2 va uning yechimiga qarshi B hujayrali immuniteti ko'p emas.

Xulosa qiling

SARS-CoV-2 ga nisbatan oldingi immunitet COVID-19 ning sezgirligi va jiddiyligini tushunishimizga muhim taʼsir koʻrsatishi mumkin. Oldindan mavjud bo'lgan B hujayra immunitetining mavjudligi va klinik ahamiyati to'liq aniqlanishi kerak. Bu yerda biz SARS-CoV-2 bilan kasallanmagan shaxslarning B-hujayra immunitetining batafsil tahlilini taqdim etamiz. Shu maqsadda biz pandemiyadan oldin namuna olingan 150 nafar kattalardagi SARS-CoV-2 gumoral immunitetini har tomonlama oʻrganib chiqdik. Turli funktsional tahlillarda birlashtirilgan va neytrallangan donor plazmasi va tozalangan IgG namunalarining kompleks skriningi SARS-CoV-2 ga qarshi sezilarli faollikni ko‘rsatmadi, lekin endemik -koronavirusga qarshi keng reaktivlikni ko‘rsatdi. Bundan tashqari, 8174 sars-cov-2 reaktiv B hujayralaridan olingan antikorlar ketma-ketligi bitta hujayrada tahlil qilindi.

darajasida va 158 ta monoklonal antikorlar yaratildi va sinovdan o'tkazildi. Ushbu antikorlarning hech biri SARS-CoV-2 bilan bog'liq yoki neytrallashtiruvchi faollikni ko'rsatmadi. Birgalikda olib borilgan natijalar SARS-CoV-2 ga duchor bo'lmagan kattalardagi oldingi samarali antikor va B-hujayra immunitetiga oid dalillarni ko'rsatmaydi.

Kalit so'zlar

T-hujayrasi; B-hujayra; Cistanche; Verbaskozid; Ijamiyat

Kirish

Hozirgi SARS Coronavirus 2 pandemiyasi butun dunyo bo'ylab sog'liqni saqlash tizimlariga tahdid soladigan global favqulodda holatdir. SARS-CoV-2 infektsiyasi asemptomatik infektsiyadan hayot uchun xavfli o'tkir respirator distress sindromi, ko'p a'zolar etishmovchiligi, septik shok va o'limgacha bo'lgan keng klinik ko'rinishga ega. Turli omillar ta'sirida bo'lsa-da, kasallikning og'irligi asosan tug'ma va adaptiv immunitet reaktsiyalari bilan belgilanadi. SARS-CoV-2 ga qarshi oldingi immunitet kasallikning og'irligi va klinik natijasini belgilovchi asosiy omil bo'lishi mumkin. Biroq, ilgari mavjud bo'lgan immunitet boshqa virusli patogenlar uchun ilgari tasvirlangan antibo-qaram kuchayish (ADE) yoki OAS mexanizmlari orqali klinik kursga salbiy ta'sir ko'rsatishi mumkin.

SARS-CoV-2 ga duchor boʻlmagan shaxslarda SARS-CoV-2 ga qarshi T-hujayralarining oldindan mavjud immun javobi kuzatildi. Ushbu tadqiqotlarda T hujayralarining spike (S) va nukleokapsid (N) oqsillari va tuzilmaviy bo'lmagan NSP7 va NSP13 oqsillariga reaktivligi antigenik peptid hovuzlari yordamida o'lchandi. Muhimi, T-hujayralarining S protein polipeptidlariga sezilarli darajada reaktivligi aniqlandi, bu mahalliy "umumiy sovuq" odam koronavirusi (HCoV), jumladan HCOV-OC43, HCOV-HK-1, HCOV-NL63 va HCOV bilan yuqori o'xshashlikni ko'rsatdi. -229e. Shu sababli, SARS-CoV-2 ga qarshi T hujayralarining oldingi immuniteti endemik hcov bilan oldindan ta'sir qilishdan kelib chiqadi, deb taxmin qilinadi.

Oldindan mavjud bo'lgan SARS-CoV-2 B hujayra immuniteti mavjudligini aniqlash uchun biz SARS-CoV-2 bilan duchor bo'lmagan 150 kishidan ajratilgan plazma namunalari, bitta B hujayralari va monoklonal antikorlarni o'rgandik. Biz SARS-CoV-2 infektsiyasining keng klinik spektrini tushuntirib beradigan oldingi samarali B-hujayra immunitetiga oid hech qanday dalil topmadik. Bu, shuningdek, yangi echimlarni izlashga turtki beradi. Tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, litenosid limfotsitlar proliferatsiyasini kuchaytiradi va shuning uchun B hujayralari sonini ko'paytirishda ma'lum ta'sir ko'rsatadi. Bu odamlarning immunitetini oshirishning yangi usulini taqdim etadi.

Surat: Faw Cistanche

Natijalar

Biz avval pandemiyadan oldingi sodda B hujayralarida NGS tahlili orqali sog'lom odamlarda ajratilmagan og'ir zanjirli va engil zanjirli o'zgaruvchan hududlarni aniqladik, ular yaqin avlodning sars-cov{2}} reaktiv antikoriga juda o'xshardi. Birlamchi B hujayralaridan olingan bu og'ir va engil zanjirlarning ba'zilari sars-cov-2 reaktiv antikorlarining asl zanjirlarini funksiyasini o'zgartirmasdan almashtirishi mumkin. Bu topilmalar avvalgi kuzatuvlarga qo'shimcha qilib, ba'zi sars-cov-2 reaktiv antikorlari o'z faolligini turlarni kodlash ketma-ketligi imzolari orqali ko'rsatadi. Bu topilmalar plazmadagi javoblarga qanday aylanishi va sars-cov{10}} reaktiv antikorlari ta’sirlanmagan odamlar plazmasida allaqachon mavjudligini o‘rganish uchun 150 donordan pandemiya oldidan olingan qon namunalarini tekshirdik. Namunalar 2019-yilning avgust-noyabr oylari orasida SARS-CoV-2 ga qarshi bog‘lash va zararsizlantirish faolligini o‘rganish uchun to‘plangan. Donorlar 18-66 yoshda. Donorlarning 49,3 foizi erkaklar va 50,7 foizi ayollardir. Ilgari e'lon qilingan qarama-qarshi natijalarni hisobga olgan holda, biz bir vaqtning o'zida turli xil testlardan foydalangan holda oldindan mavjud bo'lgan sars-cov-2 reaktiv antikorlarini sinchkovlik bilan izlashga qaror qildik. Plazma namunalarida IgG, IgM va IgA ning eriydigan SARS-CoV-2 S oqsiliga bog‘lanishi juda kam yoki umuman yo‘qligini ko‘rsatdi. Kichik miqdordagi namunalarda sezilarli reaktivlik aniqlandi. Biroq, tekshirilgan plazma namunalarida tijorat yoki ichki immunoassay orqali bog'lanish aniqlanmadi. Ushbu natijani tasdiqlash uchun biz oqim sitometriyasini o'tkazdik. Ushbu tadqiqotda plazma IgG faolligini zaif ko'rsatgan bitta donordan tashqari namunalarning hech biri bog'lanish faolligini ko'rsatmadi. Bog'lanish faolligining tasodifiy aniqlanishini tozalanmagan plazma namunalaridan foydalanish bilan bog'laymiz, bu esa o'ziga xos bo'lmagan reaktivlikni keltirib chiqaradi.

Rasm: Cistanche ekstrakti

Xulosa qilib aytganda, 150 nafar kattadan olingan pandemiyadan oldingi namunalarning hech biri qo'llaniladigan turli tahlillarda SARS-CoV-2 ga reaktivligini ko'rsatmadi. Shuning uchun, turli xil sinov usullarini parallel ravishda qo'llash asosida biz pandemiyadan oldin sinovdan o'tgan qon namunalarida sars-cov{5}} reaktiv antikorlarining ishonchli dalillarini topmadik. Kalamushlarda o'tkazilgan tajribalar shuni ko'rsatdiki, sistanche ekstrakti bilan ishlov berilgan kalamushlarda B va T hujayralariga farqlanishi mumkin bo'lgan limfotsitlar darajasi yuqori bo'lmaganlarga qaraganda yuqori. Shu sababli, tsistanche ekstrakti inson immunitetini oshirish funktsiyasiga ega ekanligini isbotlash mumkin.

Rasm: Cistanche ta'siri immunitetni yaxshilaydi

Munozara

Patogenga adaptiv immun javob asl immun havzasi tomonidan shakllanadi va bir xil patogen yoki tegishli variantlar bilan oldingi uchrashuvlarda o'z izini qoldiradi. SARS-CoV-2 ga qarshi mavjud immunitetni o‘rganish himoya immuniteti, infektsiyaga moyillik, kasallikning og‘irligi haqidagi tushunchamizni oshirishi va emlash strategiyasini ishlab chiqishga yordam beradi. Garchi turli tadqiqotlar SARS-CoV-2 ga qarshi T hujayra immunitetining mavjudligini isbotlagan bo'lsa-da, ilgari mavjud bo'lgan B hujayra immuniteti hali ham aniqlanishi kerak.

Biz yaqinda reaktiv reaktiv antikorlarni reabilitatsiya davridagi odamlardan ajratib oldik va pandemiyadan oldingi namunalardagi sodda B hujayra retseptorlari kutubxonasida juda o'xshash og'ir va/yoki engil zanjirli ketma-ketliklarni aniqladik. Bu erda biz ushbu zanjirlarning ba'zilari afinitenin kamolotiga muhtoj bo'lmasdan sars-cov{4}} reaktiv antikorlarining tarkibiy qismiga aylanishi mumkinligini ko'rsatamiz. Ushbu topilma ba'zi odamlarda osongina aniqlanadigan antikor javoblari turli CDR3 rekombinatsiya naqshlari yoki mikrob chizig'ini kodlash ketma-ketligiga xos bo'lgan mavjud og'ir yoki engil antikorlardan foydalanishi mumkinligi haqidagi oldingi kuzatuvlarni qo'llab-quvvatlaydi. Shunga muvofiq, SARSCoV-2 neytrallashtiruvchi antikorlari antigenga xos yagona B hujayra tasnifi yoki fag displey yordamida sodda B hujayra kompartallaridan muvaffaqiyatli ajratildi. Feldman va boshqalar. Izolyatsiya qilingan bitta SARS-CoV-2 va Sarbekovire-reaktiv sodda B hujayralari antigen zondlari sifatida turli SARS-CoV-2 spike protein subdomenlarini ketma-ket ishlatib. Ushbu yondashuvdan foydalanib, ular o'rtacha chastotani 0 bildirishdi.0rbm reaktiv sodda B hujayralari uchun 025 foiz. BCR ketma-ketligi tahlili shuni ko'rsatdiki, og'ir va engil zanjirlar turli xil poliklonal genlardan foydalangan, ammo og'ir zanjir v geni IGHV3-9 o'rtacha ushlab turish chastotasini 20 foizga oshirgan. Nihoyat, monoklonal antikorlar mashhur SARS-CoV-2 varianti va ko‘rshapalakdan olingan koronavirus-virusga qarshi bog‘lovchi va neytrallashtiruvchi faollikni ko‘rsatadigan ibtidoiy B hujayra prekursorlaridan ajratildi. Bertoglio va boshqalar. asl B hujayra bankidan nomzod STE73-2E9 antikorini ajratib olish uchun fag displey texnologiyasidan foydalangan. Antikor ACE2-RBD interfeysini nishonga oldi, boshqa koronavirus bilan o‘zaro reaksiyaga kirishmadi va IC50 0,43 nM bo‘lgan haqiqiy SARS-CoV-2 yovvoyi virusini zararsizlantirdi. Cistanche polisaxarid ham, kreinosid ham yurak va miya to'qimalarining ferment faolligini oshirishi, qorin bo'shlig'i hujayralarining fagotsitoz funktsiyasini kuchaytirishi va limfotsitlarning proliferativ reaktsiyasini kuchaytirishi mumkin.

Immunitetingizni oshirish uchun shu yerni bosing

Xulosa

Molekulyar darajadagi potentsial immunitetni tekshirish uchun biz 40 donorga antigenga xos bir hujayrali tasnifni qo'lladik va sars-cov{6}} reaktiv deb hisoblangan jami 8174 B hujayralarini ajratib oldik. Plazma namunalari va poliklonal IgGni bog‘lovchi va neytrallovchi skriningimizga muvofiq, pandemiyadan oldingi namunalarda SARS-CoV{8}}reaktiv B hujayralarining chastotasi, ayniqsa, COVID{10}} tiklanish namunalari bilan solishtirganda juda past bo‘lgan. Yagona hujayralarni saralash uchun mos keladigan oqsillarni tanlash antigenga xos B hujayralarini izolyatsiya qilish uchun juda muhimdir. Tanlangan tuzoq oqsili immunogen tuzilishga ega emas va izolyatsiyadan chiqariladi. Shuning uchun antigenga xos B hujayralarining toʻliq izolyatsiyasini taʼminlash uchun biz mahalliy toʻliq trimer SARS-CoV-2 S proteinini qoʻllashni va saralash eshigini sozlashni tanladik. Bizning tadqiqotimizda sars-cov{16}} reaktiv B hujayralarining past chastotasiga kelsak, S2 subunit kabi muqobil tuzatuvchi oqsillarni qo'llash foydali bo'ladi, deb bahslashish mumkin. Izolyatsiya qilingan sars-cov-2 reaktiv B hujayralarining antikorlar ketma-ketligi tahlili shuni ko'rsatdiki, og'ir zanjir V geni boshqacha ishlatilgan, CDRH3 uzunligi normal taqsimlangan va VH genining filogenetik identifikatsiyasi sodda BCR retseptoriga o'xshash edi. pandemiyadan oldin namuna olingan sog'lom odamlar kutubxonasi. Xulosa qilib aytadigan bo'lsak, sog'lom kattalarda SARS-CoV-2 ga qarshi ko'p miqdordagi B hujayra immuniteti mavjud emas, ammo ma'lum muddat sistanche ekstrakti qo'llanilishi inson immunitetini yaxshilashi va B hujayralari va T hujayralari tarkibini oshirishi mumkin. Bu maʼlum darajada COVIDni davolash va oldini olishning yangi yoʻlini taqdim etdi-19.

Ma'lumotnomalar

1.Anderson, EM, Goodwin, EC, Verma, A., Arevalo, CP, Bolton, MJ, Weirick, ME, Gouma, S., McAllister, CM, Christensen, SR, Weaver, J., va boshqalar. (2021). Mavsumiy odam koronavirus antikorlari SARS-CoV-2 infektsiyasida ko'payadi, ammo himoya bilan bog'liq emas. 184-uya, 1858–1864.e10.

2.Arevalo, CP, Le Sage, V., Bolton, MJ, Eilola, T., Jones, JE, Kormut, KA, Nturibi, E., Balmaseda, A., Gordon, A., Lakdawala, SS va boshqalar. . (2020). Gripp virusi gemagglutinin sopi antikorlarining asl antijenik sin primingi. Proc. Natl. akad. Sci. 117, 17221–17227.

3.Arvin, AM, Fink, K., Shmid, MA, Cathcart, A., Spreafico, R., Havenar-Daughton, C., Lanzavecchia, A., Corti, D. va Virjiniya, HW (2020). SARS-CoV ning potentsial antikorga bog'liq kuchayishi bo'yicha istiqbol-2. Tabiat 584, 353–363.

4.Bacher, P., Rosati, E., Esser, D., Martini, GR, Saggau, C., Schiminskiy, E., Dargvainiene, J., Shro der, I., Wieters, I., Xodamoradi, Y. va boshqalar. (2020). Og'ir COVID-19 bilan kasallangan odamlar va odamlarda SARS-CoV-2 ga past aviditeli CD4 va T hujayralari javoblari. Immunitet 53, 1258–1271.e5.

5.Barnes, CO, West, AP, Huey-Tubman, KE, Hoffmann, MAG, Sharaf, NG, Hoffman, PR, Koranda, N., Gristick, HB, Gaebler, C., Muecksch, F., va boshqalar. (2020a). SARS-CoV-2 spike bilan bog'langan inson antikorlarining tuzilishi antikorlarning umumiy epitoplari va takroriy xususiyatlarini ochib beradi. 182-uya, 828–842.e16.

6.Barnes, CO, Jette, CA, Abernathy, ME, Dam, K.-MA, Esswein, SR, Gristick, HB, Malyutin, AG, Sharaf, NG, Huey-Tubman, KE, Lee, YE va boshqalar. (2020b). SARS-CoV-2 neytrallashtiruvchi antikor

tuzilmalar terapevtik strategiyalar haqida ma'lumot beradi. Tabiat 588, 682–687.

7.Barnes, CO, Jette, CA, Abernathy, ME, Dam, K.-MA, Esswein, SR, Gristick, HB, Malyutin, AG, Sharaf, NG, Huey-Tubman, KE, Li, YE va boshqalar. (2020b). SARS-CoV-2 neytrallashtiruvchi antikor tuzilmalari terapevtik strategiyalar haqida ma'lumot beradi. Tabiat 588, 682–687.

8.Braun, J., Loyal, L., Frentsch, M., Wendisch, D., Georg, P., Kurt, F., Hippenstiel, S., Dingeldey, M., Kruse, B., Fauchere, F. ., va boshqalar. (2020). SARSCoV-2-sog'lom donorlarda va COVID bilan kasallangan bemorlarda reaktiv T hujayralari-19. Tabiat 587, 270–274.

9.Brouwer, PJM, Caniels, TG, van der Straten, K., Snitselaar, JL, Aldon, Y., Bangaru, S., Torres, JL, Okba, NMA, Claireaux, M., Kerster, G. va boshqalar. al. (2020). COVID-19 bemorlarining kuchli neytrallashtiruvchi antikorlari zaiflikning bir nechta maqsadlarini belgilaydi. Fan 369, 643–650

10.Cao, Y., Su, B., Guo, X., Sun, V., Deng, Y., Bao, L., Chju, Q., Chjan, X., Zheng, Y., Geng, C. ., va boshqalar. (2020). SARS-CoV-2 ga qarshi kuchli zararsizlantiruvchi antikorlar rekonvalesent bemorlarning B hujayralarining yuqori o‘tkazuvchanlikdagi bir hujayrali sekvensiyasi orqali aniqlangan. 182-uya, 73–84.e16.

11.Chau, NVV, Nhan, LNT, Nguyet, LA, Tu, NTK, Hong, NTT, Man, DNH, Ty, DTB, Nhu, LNT, Yen, LM, Khanh, TH va boshqalar. (2021). Vetnamdagi bolalar va kattalarning pandemiyadan oldingi plazmasida SARS-CoV-2 antikorlarining yo'qligi. Int. J. Yuqtirish. Dis. 111, 127–129.

12.Chau, NVV, Nhan, LNT, Nguyet, LA, Tu, NTK, Hong, NTT, Man, DNH, Ty, DTB, Nhu, LNT, Yen, LM, Khanh, TH va boshqalar. (2021). Vetnamdagi bolalar va kattalarning pandemiyadan oldingi plazmasida SARS-CoV-2 antikorlarining yo'qligi. Int. J. Yuqtirish. Dis. 111, 127–129.

13.Chau, NVV, Nhan, LNT, Nguyet, LA, Tu, NTK, Hong, NTT, Man, DNH, Ty, DTB, Nhu, LNT, Yen, LM, Khanh, TH va boshqalar. (2021). Vetnamdagi bolalar va kattalarning pandemiyadan oldingi plazmasida SARS-CoV-2 antikorlarining yo'qligi. Int. J. Yuqtirish. Dis. 111, 127–129.

14.Krouford, KHD, Eguia, R., Dingens, AS, Loes, AN, Malone, KD, Wolf, CR, Chu, HY, Tortorici, MA, Veesler, D., Merfi, M. va boshq. (2020). Neytralizatsiya tahlillari uchun SARS-CoV-2 spike oqsili bilan lentivirus zarralarini psevdotiplash uchun protokol va reagentlar. Viruslar 12, 513.

15.de Alwis, R., Williams, KL, Shmid, MA, Lai, C.-Y., Patel, B., Smith, SA, Crowe, JE, Wang, W.-K., Harris, E., va de Silva, AM (2014). Dang viruslari inson immun zardobidagi serotip o'zaro reaktiv antikorlarning alohida populyatsiyalari bilan kuchayadi. Plos Patog. 10, e1004386.

16.Echeverri´a, G., Gevara, A´., Koloma, J., Ruiz, AM, Vaskes, MM, Tejera, E. va de Vaard, JH (2021). COVID-19 Interferon-Gamma-ajralish tahlili bilan aniqlanganidek, Ekvadorda taʼsirlanmagan sogʻlom odamlarda SARSCoV-2 ga oldindan mavjud T-hujayra immuniteti. Int. J. Yuqtirish. Dis. 105, 21–25.

17.Ehrhardt, SA, Zehner, M., Kra¨hling, V., CohenDvashi, H., Kreer, C., Elad, N., Gruell, H., Ercanoglu, MS, Schommers, P., Gieselmann, L. ., va boshqalar. (2019). Ebola virusi vaktsinasiga poliklonal va konvergent antikor javobi rVSV-ZEBOV. Nat. Med. 25, 1589–1600.

18.Esper, F., Weibel, C., Ferguson, D., Landry, ML va Kahn, JS (2005). Nafas olish bilan bog'liq bo'lgan yangi inson koronavirusining dalillari

chaqaloqlar va yosh bolalarda trakti kasalliklari. J. Yuqtirish. Dis. 191, 492–498.

19.Katzelnick, LC, Gresh, L., Halloran, ME, Mercado, JC, Kuan, G., Gordon, A., Balmaseda, A., and Harris, E. (2017). Odamlarda og'ir dang kasalligining antikorga bog'liq kuchayishi. Fan 358, 929–932.

20.Hurlburt, NK, Seydoux, E., Wan, Y.-H., Edara, VV, Stuart, AB, Feng, J., Suthar, MS, McGuire, AT, Stamatatos, L. va Pancera, M. (2020). SARSCoV-2 ni kuchli neytrallashning strukturaviy asoslari va antikor yaqinligining kamolotining roli.Nat. Kommun. 11, 5413.