HydroZitLa nefrolitik kalamushlarda kaltsiy oksalat toshining shakllanishiga to'sqinlik qiladi va nematoda Caenorhabditis Elegans 2-qismida uzoq umr ko'radi.

Sistanx glikozidi, shuningdek, yurak va jigar to'qimalarida SOD faolligini oshirishi va har bir to'qimalarda lipofusin va MDA tarkibini sezilarli darajada kamaytirishi, turli xil reaktiv kislorod radikallarini (OH-, H₂O₂ va boshqalar) samarali tozalash va DNKning shikastlanishidan himoya qilishi mumkin. OH-radikallar tomonidan. Cistanche feniletanoid glikozidlari erkin radikallarni kuchli tozalash qobiliyatiga ega, S vitaminiga qaraganda yuqori darajada kamaytirish qobiliyatiga ega, sperma suspenziyasida SOD faolligini yaxshilaydi, MDA tarkibini kamaytiradi va sperma membranasi funktsiyasiga ma'lum bir himoya ta'siriga ega. Cistanche polisaxaridlari D-galaktoza sabab bo'lgan eksperimental qarigan sichqonlarning eritrotsitlari va o'pka to'qimalarida SOD va GSH-Px faolligini oshirishi, shuningdek o'pka va plazmadagi MDA va kollagen miqdorini kamaytirishi va elastin miqdorini oshirishi mumkin. DPPHga yaxshi tozalash ta'siri, qarigan sichqonlarda gipoksiya vaqtini uzaytirish, sarumdagi SOD faolligini yaxshilash va eksperimental qarigan sichqonlarda o'pkaning fiziologik degeneratsiyasini kechiktirish Hujayra morfologik degeneratsiyasi bilan tajribalar Cistanche yaxshi antioksidant qobiliyatiga ega ekanligini ko'rsatdi. va terining qarish kasalliklarini oldini olish va davolash uchun dori bo'lish potentsialiga ega. Shu bilan birga, Cistanchedagi echinacoside DPPH erkin radikallarini tozalashning muhim qobiliyatiga ega va reaktiv kislorod turlarini tozalash va erkin radikallar keltirib chiqaradigan kollagen degradatsiyasini oldini olish qobiliyatiga ega, shuningdek, timin erkin radikal anionining shikastlanishiga yaxshi ta'sir ko'rsatadi.

Cistanche Norge-ni bosing

【Batafsil ma'lumot uchun:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】

Bizning topilmalarimiz asosida HydroZitLa antipatogen funktsiyani kamida ikkita yo'l orqali amalga oshirdi. Birinchidan, u siydik bilan oksalat chiqarilishini kamaytirdi, siydikda CaOx kristallanish qobiliyatini pasaytirdi va sitrat bilan ta'minlandi. Ikkinchidan, u oksidlovchi stressni va yallig'lanishni susaytirishi mumkin bo'lgan o'simlik polifenollarini o'z ichiga oladi, shuning uchun CaOx litogenezini inhibe qiladi. Asosan, oksalat jigarda glyoksilatdan asosiy prekursor sifatida foydalangan holda endogen tarzda sintezlanadi41. Glioksilat glikolat oksidaza (GO) fermenti tomonidan glikolatdan sintezlanadi va keyinchalik laktat dehidrogenaza (LDH) tomonidan oksalatga aylanadi. Biz HydroZitLa EG bilan davolash qilingan kalamushlarda siydik bilan oksalat chiqarilishini sezilarli darajada kamaytirganini aniqladik. Biz HydroZitLa glyoksilat metabolizmida ishtirok etadigan jigar fermentlarini, xususan, LDH va GO ni pastga regulyatsiya qilish orqali jigardagi oksalat sintetik yo'lini inhibe qilgan deb taxmin qildik. Kailash va Varalakshmi tomonidan o'tkazilgan avvalgi tadqiqot shuni ko'rsatdiki, banan poyasi ekstrakti natriy glikolat bilan qo'zg'atilgan giperoksalurik kalamushlarda jigar GO va LDH darajasini pasaytiradi27. Poonguzhali va Chegu, shuningdek, banan poyasidan olingan xom ekstrakti glikolat bilan qo'zg'atilgan giperoksalurik kalamushlarda siydik oksalati, glikolik kislota va glikoksilik kislotani kamaytirganini xabar qildi30. Yaqinda Patankar va boshqalar. Ularning Herbmed Plus (tarkibida banan poyasi bor) deb nomlangan o'simlik formulasi jigar va buyrak to'qimalarida LDH faolligini pasaytirganini ko'rsatdi42. Bizning taxminlarimizni tasdiqlash uchun HydroZitLa bilan davolash qilingan EG kalamushlarida oksalat sintezida ishtirok etadigan jigar va buyrak fermentlarining ekspressiyasini yanada chuqurroq o'rganish kerak.

Bir nechta dalillar oksidlovchi stress, yallig'lanish va buyrak naychalarining shikastlanishi CaOx litogenezida muhim rol o'ynashini qat'iy tasdiqlaydi3,4,15,43-45. Oksalat va / yoki CaOx kristallari tomonidan qo'zg'atilgan oksidlovchi stress buyrak naychalarining shikastlanishiga olib keladi, bu kristallarning yadrolari, yopishishi, tutilishi, agregatsiyasi va nihoyat nidus shakllanishi uchun joylarni yaratadi43,46,47. Bundan tashqari, oksidlovchi stress yallig'lanish reaktsiyasini faollashtiradi, bu o'z navbatida litogen jarayonni tezlashtiradi4,47,48. Shunday qilib, antioksidant va yallig'lanishga qarshi xususiyatlarga ega bo'lgan fitomeditsina buyrak toshlari shakllanishining oldini olish uchun istiqbolli chora hisoblanadi24. Aggarval va boshqalar. EG tomonidan qo'zg'atilgan nefrolitik kalamush modelida bergenin (Bergenia ligulatadan ajratilgan bioaktiv fenolik birikma) oksidlovchi stressni yumshatish, mitoxondriyal disfunktsiyani yaxshilash va naycha shikastlanishi va yallig'lanishni kamaytirish uchun kuchli antipatogen ta'sirga ega ekanligini ko'rsatdi49. Rutin va curcumin (antioksidant va yallig'lanishga qarshi xususiyatlarga ega bo'lgan taniqli mahalliy fitokimyoviy moddalar) EG tomonidan qo'zg'atilgan nefrolitik kalamushlarda tubulointerstitial shikastlanish va kristall cho'kmalarni inhibe qilishi ko'rsatildi50. Uzum urug'idan olingan polifenollar, shuningdek, antioksidant faolligi tufayli EG tomonidan qo'zg'atilgan litiazis kalamushlarida intrarenal CaOx kristalli konlarini inhibe qilishi ko'rsatildi51. Ayurveda o'simlik formulasi Herbmed EG tomonidan qo'zg'atilgan nefrolitik kalamushlarning buyraklarida yallig'lanish shikastlanishi va kristall birikmalarini kamaytirish uchun ko'rsatildi42. Ushbu tadqiqotda biz HydroZitLa intrarenal oksidlovchi stressni, yallig'lanishni va CaOx kristalli birikmalarini kamaytirganini ko'rsatdik, bu HydroZitLa CaOx buyrak toshlarining shakllanishiga yo'l qo'ymaslik uchun antioksidant va yallig'lanishga qarshi ta'sir ko'rsatadi.

Bir nechta o'simlik polifenollari umrini uzaytirish va qarishni kechiktirish uchun foydali ekanligi eksperimental ravishda isbotlangan52. Resveratrol eng yaxshi tavsiflangan umrni uzaytiruvchi polifenolik birikmadir. U birinchi navbatda sirtuin faollashuvi va oksidlovchi stressni pasaytirish orqali harakat qiladi53. C. elegans modelida sinovdan o'tgan resveratrolning uzoq umr ko'rish ta'siri o'rtacha umr ko'rish davomiyligi 10 dan 65 foizgacha oshgan tadqiqotlar orasida farq qiladi 54,55. HydroZitLa yovvoyi turdagi C. eleganslarning umrini sezilarli darajada 34 foizgacha uzaytirdi, bu esa HydroZitLa ning umrini uzaytiruvchi ta'siri resveratrol bilan solishtirish mumkinligini ko'rsatdi. Oziqlanishni cheklash uzoq umr ko'rishning asosiy mexanizmi hisoblanadi56. HydroZitLa qurtlari va nazorat qurtlari o'rtasida solishtirganda faringeal nasos tezligi solishtirish mumkin edi, bu HydroZitLa tomonidan umr ko'rish muddatini uzaytirish dietani cheklash natijasi emasligini ko'rsatadi.

HydroZitLa C. elegansda avtoflüoresan yoshdagi pigment lipofusinning to'planishini sezilarli darajada kamaytirdi, bu qarishga qarshi ta'sir ko'rsatadi. ROS va oksidlovchi stress SIPS ning taniqli induktorlari bo'lib, oksidlovchi stress telomerlarning qisqarishini tezlashtiradi57. Biz yaqinda CaOx toshlari bo'lgan bemorlardan olingan oksalat, COM va siydik oksidlanish stressi orqali buyrak naycha hujayralarida erta qarishni, p16 ko'tarilishini va telomerni yo'q qilishini ko'rsatdik 58. Ushbu tadqiqotda biz HydroZitLa telomerning yo'qolishini, p16 ko'tarilishi va H2O2, oksalat va COM ta'siriga uchragan HK-2 hujayralarida erta qarish. Ushbu qarishga qarshi ta'sirning molekulyar mexanizmi ishlab chiqilmagan bo'lsa-da, HydroZitLa telomerning qisqarishini inhibe qilish va p16 ifodasini kamaytirish orqali erta qarishni mexanik ravishda oldini olish uchun taklif qilingan.

Garchi o'simlik preparatlari va fitomeditsinalar tobora ommalashib, jahon miqyosida tan olingan bo'lsa-da, samaradorlik va xavfsizlikning ilmiy dalillari taqdim etilishi kerak va buzilmasligi kerak. O't va dori vositalarining o'zaro ta'sirini bashorat qilish qiyin, chunki u sitoxrom P450 fermenti va dori tashuvchilarining polimorfizmlari va mavjud tibbiy sharoitlar kabi bir qancha omillarga bog'liq holda odamlar orasida juda xilma-xildir59. O't va dorivor o'simliklarning potentsial o'zaro ta'sirini aniqlash uchun dorivor o'tlar va dori vositalarining nojo'ya ta'sirini diqqat bilan kuzatib borish kerak. Giyohvand moddalar bilan jiddiy ta'sir ko'rsatadigan eng mashhur o'tlarga sarimsoq, Bayji, Danggui, jenshen, ginkgo, qizilmiya, Avliyo Ioann sharbati, Kava, qora va uzun qalampir, Danshen, Huangqin va sut qushqo'nmasi kiradi59. Bizning ma'lumotlarimizga ko'ra, banan poyasi, ko'k no'xat guli va sappan daraxti uchun jiddiy nojo'ya ta'sirlar yoki dorilar bilan o'zaro ta'sirlar qayd etilmagan. Tailandda banan poyasi oziq-ovqat moddasi sifatida iste'mol qilinadi. Banan sharbatini haddan tashqari ko'p ichish (ortiqcha iste'mol qilish) allergiya, qorin og'rig'i va qusishni keltirib chiqarishi mumkin, shuning uchun o'rtacha iste'mol qilish tavsiya etiladi. Ko'k no'xat guli odatda oziq-ovqatda tabiiy rang beruvchi sifatida ishlatiladi va u choy tayyorlash uchun ham ishlatiladi. Kelebek ko'k no'xat gul choyini ortiqcha iste'mol qilishning salbiy ta'siri, masalan, oshqozon buzilishi, ko'ngil aynishi va allergik reaktsiyalar kamdan-kam hollarda qayd etiladi. Sappan yog'ochi tabiiy oziq-ovqat bo'yoqlari sifatida ham tez-tez ishlatiladi va jamoalarda (shu jumladan Tailanddagi jamoalarda) odatda sog'lom ichimlik sifatida iste'mol qilinadi. Biroq, sappan yog'och ekstraktining kontratseptiv funktsiyasi (erkaklarda tug'ilishga qarshi) kalamush modelida ko'rsatilgan, chunki u spermatogenezga xalaqit beradi60. Boshqa tomondan, Caesalpinia sappan L. oʻt oʻti ginekologik simptomlarni, jumladan, oligomenoreya va amenoreyani davolashda dorivor vosita sifatida ishlatiladi61. Shu sababli, HydroZitLa ning odamlarda uzoq muddatli iste'mol qilinishining xavfsizligi klinik sinovlarda aniqlanishi kerak.

Ushbu tadqiqot ba'zi cheklovlarga ega. CaOx toshini inhibe qilish funktsiyasi uchun mas'ul bo'lgan aniq faol birikmalar aniqlanmagan va tavsiflanmagan. HydroZitLa ning kalamushlarda CaOx tosh shakllanishini inhibe qilishning aniq mexanizmlari to'liq o'rganilmagan. HydroZitLa ning dozaga bog'liq antipatogen ta'siri o'rganilmagan. Nefrolitik kalamushlarda siydik sitrat darajasini sezilarli darajada oshirishi mumkin bo'lgan HydroZitLa dozasi o'rganilmagan. HydroZitLa ning fenolik profilini qo'shimcha tekshirish kerak. HydroZitLa tomonidan C. elegansda uzoq umr ko'rish mexanizmi intensiv ravishda o'rganilmagan. Nihoyat, HydroZitLa tarkibidagi uzoq umr ko'rish va qarishga qarshi mas'ul bo'lgan maxsus birikmalar aniqlanmagan va tavsiflanmagan.

Xulosa qilib aytganda, HydroZitLa suyuqlik, sitrat va tabiiy antioksidantlar bilan ta'minlash orqali CaOx tosh shakllanishining xavf omillarini bir vaqtning o'zida normallashtirish uchun ishlab chiqilgan. Eksperimental ravishda, HydroZitLa nefrolitik kalamushlarda intrarenal CaOx birikmasini inhibe qildi. HydroZitLa ning CaOx toshini inhibe qilish samaradorligi hozirda qo'llanilayotgan kaliy sitratiga (Uralyt-U) teng edi. HydroZitLa in vitro va in vivo oksidlovchi stressni samarali ravishda susaytirdi. E'tiborlisi, HydroZitLa C. elegansning umrini uzaytirdi va qarish boshlanishini kechiktirdi. Bundan tashqari, HydroZitLa inson buyrak hujayralarida telomer qisqarishini, p16 ifodasini va erta qarishni sezilarli darajada inhibe qildi. Ushbu klinikadan oldingi topilmalar HydroZitLa uzoq umr ko'rish va qarishga qarshi imtiyozlar bilan birga CaOx nefrolitiazini davolash uchun klinik jihatdan istiqbolli alternativ ekanligini ko'rsatdi. HydroZitLa ning odamlarda terapevtik samaradorligini kafolatlash uchun klinik sinovlar zarur.

Materiallar va usullar

HydroZitLa ishlab chiqarish, antioksidant tarkibi va ovqatlanish fakti. HydroZitLa - bu Tailandda mavjud bo'lgan dorivor o'simliklardan olingan ichimliklar konsentrati32. Ichimlik HydroZitLa konsentratini (yopiq qopda 55 ml) ichimlik suvi bilan (oxirgi 500 ml hajmgacha) suyultirish orqali tayyorlanadi. U mazali nordon va shirin ta'mga ega pushti-binafsha rangga ega. HydroZitLa ning asosiy tarkibiy qismlari banan poyasi (Musa sapientum L.) suv ekstrakti va limon kislotasi (16 mEq / qop) edi. Tabiiy rang beruvchi sifatida an'anaviy Tai dorivor o'simliklari, jumladan Clitoria ternatea L. (ko'k no'xat gulining kukuni) va Caesalpinia sappan L. (Sappan yog'och kukuni) ishlatilgan. Stevia va sukraloza tatlandırıcılar edi. Mahsulot Tai FDA tomonidan 2019-yil 10-aprelda yopiq idishdagi ichimliklar toifasida tasdiqlangan (Oziq-ovqat seriyasi № 10–1-02,244–5-0005).

HydroZitLa ning umumiy antioksidant sig'imi (TAC) har bir sumka uchun 21,87 ± 7,96 mg vitamin C ekvivalenti antioksidant hajmini tashkil etdi (Qo'shimcha 8-rasm). Jami fenolik miqdori (TPC) 19,99 ±{7}},83 mg gallik kislota ekvivalenti/100 g. Umumiy favonoid tarkibi (TFC) 4,59± 0,31 mg katexin ekvivalenti/100 g ni tashkil etdi. Sifat nazorati uchun TAC, TPC va TFC sifat nazorati parametrlari sifatida ishlatilgan. Banan poyasi, kapalak ko‘k no‘xat guli va sappan daraxti ekstraktidagi TAC, TPC va TFC darajalari lotlar va saqlash vaqtlari o‘rtasida sezilarli darajada farq qilmadi. HydroZitLa ishlab chiqarishda partiyalar orasidagi muvofiqlikni saqlash uchun sifat nazorati parametrlari sifatida TAC, TPC, TFC va briks qiymati (17±2) ishlatilgan.

HydroZitLa ning umumiy energiyasi har bir qop (xizmat) uchun 25 kkal edi. Protein, yog' va xolesterin miqdori aniqlanmadi. Umumiy uglevod 6 g, shakar edi<1 g, and sodium was 10 mg. The potassium content was 240 mg/100 g. Soluble and insoluble dietary fibers were 0.74 and 0.43 g/100 g, respectively. Te pH of  HydroZitLa was 3.4.

Toksiklikni baholash.HydroZitLada Escherichia coli, Clostridium spp., Salmonella spp. va Staphylococcus aureus mavjudligi Tailand Sog'liqni saqlash vazirligi, Oziq-ovqat sifati va xavfsizligi byurosi tomonidan tahlil qilingan. HydroZitLa ning metall profili ICP-OES tomonidan tahlil qilindi.

HydroZitLa ning sichqonlarda in vivo o'tkir toksikligi Tailand Sog'liqni saqlash vazirligi, Dorivor o'simliklar tadqiqot instituti tomonidan sinovdan o'tkazildi. HydroZitLa yoki suv (nazorat) sichqonlarga 20 ml/kg (har bir guruh uchun n=10 dozada og'iz orqali yuborildi. Sichqonchalar o'limdan 14 kun oldin kuzatilgan. Visseral organlardagi yalpi shikastlanishlar tekshirildi va HydroZitLa va nazorat guruhlari o'rtasida taqqoslandi.

CaOx agregatsiyasi tahlili.Urugʻ COM kristallari tayyorlandi62 va 50 mg/ml 0.05 M Tris/0.15 NaCl, pH 6.5 gacha suyultirildi. HydroZitLa yoki BSA yoki distillangan suv (bo'sh) (200 µL) yangi tayyorlangan ishlaydigan urug 'COM suspenziyasiga (2 ml) qo'shildi. Aralashtirgandan so'ng, 620 nm da absorbans asosiy (AT0) sifatida o'lchandi. 10 daqiqa davomida 37 daraja inkubatsiyadan so'ng, 620 nm da absorbans qayta o'lchandi (AT10). Agregatsiya koeffitsienti (AC) quyidagicha hisoblandi: AC=((AT0− AT10)/10)×1000. Yuqori AC qiymati MAQOMOTI yig'ilishining yuqoriligini ko'rsatadi.

Hujayra chizig'i, sitotoksiklik va hujayra ichidagi ROSni aniqlash.HK{0}} hujayralari (ATCC, VA, AQSH) DMEMda 10 foiz homila sigir zardobi va 1 foiz Pen-Strep 37 darajadan past, 5 foiz CO2 va 95 foiz namlik bilan to‘ldirildi. HydroZitLa ning HK-2 hujayralarida sitotoksikligi MTT tahlili63 bilan baholandi. HK-2 xujayralari ekildi (200 hujayra/quduq), bir kechada 96-quduq plastinkasida yetishtirildi va HydroZitLa ning turli konsentratsiyalari bilan ishlov berildi (nazorat sifatida 0, 1,25 foiz, 2,5 foiz, 5 foiz, 10). foiz , 20 foiz , 40 foiz , 50 foiz , 80 foiz va 100 foiz v/v) 24 soat davomida. Yuvib bo'lgandan keyin MTT eritmasi qo'shildi, 1 soat davomida inkubatsiya qilindi va keyin tashlanadi. Formazan kristallarini eritish uchun dimetil sulfoksid qo'shildi. 570 nm da yutilish o'lchandi. Hujayra hayotiyligi (foiz) nazorat sifatida ishlov berilmagan hujayralar yordamida hisoblangan (100 foiz hayotiylik).

HydroZitLa tomonidan hujayra ichidagi ROS ishlab chiqarishni inhibe qilish 96-quduq plastinkasi 64,65 da dikloro-dihidro-fluoresein diasetat (DCFH-DA) tahlili bilan aniqlandi. HK-2 hujayralar 0.1 M DCFH-DA eritmasi bilan birlashtirildi va 30 daqiqa davomida 37 daraja inkubatsiya qilindi. Yuvishdan keyin hujayralar H2O2 yoki COM bilan sinovdan o'tkazildi (v/v 10 foiz HydroZitLa bilan va bo'lmasdan). Floresan intensivligi (485 nm da qo'zg'atilgan va 535 nm da chiqarilgan) boshida (T0) va 60 daqiqada (T60) o'lchangan. ROS hosil bo'lish darajasini ko'rsatadigan o'zboshimchalik bilan floresan birligi (AFU) quyidagicha hisoblangan: AFU= T60/T0.

Protein karbonillanishini o'lchash.Protein karbonil tarkibi oqsil oksidlanishining ko'rsatkichi sifatida bizning oldingi hisobotlarimiz bo'yicha o'lchangan64-66. Davolangan HK-2 hujayralari (100-mm idishda) proteaz inhibitori kokteylini o'z ichiga olgan radioimmunopresipitatsiya tahlili buferi bilan lizing qilindi. Umumiy oqsil kontsentratsiyasi Bredford tahlili bilan o'lchandi. Hujayra lizatasi 10 mM dinitrofenilhidrazin (DNPH) eritmasi yoki 2 N HCl bilan 1 soat qorong'ilikda inkubatsiya qilindi. Sovuq 20 foizli trikloroatsetik kislota qo'shildi va muz ustida 10 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi. Pelletlar santrifüj orqali yig'ildi, etil asetat: etanol (1: 1) bilan yuvildi va 6 M guanidin HCl bilan qayta eritildi. 375 nm da yutilish (A) o'lchandi. Umumiy oqsil kontsentratsiyasi bilan normallashtirilgan protein karbonil miqdori quyidagicha hisoblangan: ((ADNPH - AHCl) × 45,45) / oqsil kontsentratsiyasi.

CaOx nefrolitiazi uchun kalamush modeli.Sichqonlarda CaOx nefrolitiazini qo'zg'atish uchun ichimlik suvi bilan to'ldirilgan EG (v/v 1 foiz) (35 kun davomida bepul kirish) ishlatilgan. Erkak Wistar kalamushlari (6-8 haftalik, 180-300 g) to'rtta guruhga bo'lingan: EG (n=6), EG plyus HydroZitLa (n=6), EG va Uralyt-U (n=6) va oddiy nazorat (n=2) guruhlari. Barcha kalamushlar zanglamaydigan po'latdan yasalgan qafaslarda 25 daraja haroratda 12:12 soat yorug'lik-qorong'i tsiklda joylashtirilgan. Ikki nazorat kalamush faqat siydik kimyosi uchun emas, balki kalamush buyragi va immunohistokimyosida CaOx konlarini solishtirish uchun ataylab ishlatilgan. HydroZitLa va Uralyt-U kuniga ikki marta (ertalab va kechqurun) kuniga 2 mEq umumiy sitrat dozasida majburiy oziqlantirishdi. Reygan-Show va boshq.67 tomonidan tavsiya etilgan dozani konvertatsiya qilish asosida hisoblangan sitratning ushbu qo'llaniladigan dozasi odamlarda 60,8 mEq sitratga teng edi. 24-soat siydik namunalari konservant sifatida timoldan foydalangan holda aralashuv oxirida (35-kun) yig'ildi. Kalamushlar izofluran bilan behushlik qilindi va qurbonlik qilindi. Ikkala buyrak ham olib tashlandi, kesildi va gistologiyani o'rganish uchun 10 foizli neytral formalin tamponida mahkamlandi.

Barcha kalamushlar Milliy laboratoriya hayvonlar markazidan, Salaya Campus Mahidol universiteti, Nakhonpatom, Tailanddan sotib olingan. Eksperimental muolajalar Tailand Milliy tadqiqot kengashi tomonidan eksperimental hayvonlar uchun yo‘riqnomada o‘tkazildi va Chulalongkorn universiteti Tibbiyot fakultetining Hayvonlarni parvarish qilish va ulardan foydalanish institutsional qo‘mitasi tomonidan tasdiqlangan (№ 022/2560). Tadqiqotimiz ARRIVE ko'rsatmalariga muvofiq amalga oshirildi.

Polarizatsiyalangan mikroskop yordamida buyrak bo'limlarida CaOx cho'kishi.Formalin bilan fiksatsiyalangan kerosin o'rnatilgan kalamush buyragi bo'limlari avtomatlashtirilgan to'qima protsessori tomonidan tayyorlangan. H&E binoni standart protseduraga muvofiq amalga oshirildi. H&E bilan bo'yalgan bo'laklardagi bir-bir nurli CaOx kristalli konlari polarizatsiyalangan yorug'lik mikroskopi (OLYMPUS BX50, Yaponiya) yordamida vizualizatsiya qilindi.

CaOx gistokimyosi uchun Yasue binoni.Buyrak to'qimalarining bo'limlari deparafinizatsiya qilindi, regidratatsiya qilindi, kaltsiy fosfat va kaltsiy karbonatni olib tashlash uchun 30 daqiqa davomida 5 foizli sirka kislotasiga botirildi va distillangan suv bilan yuvildi 68. Bo'limlar 5 foiz AgNO3 bilan 12 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi, yuvildi va satur bilan inkubatsiya qilindi. kislota 10% ammoniyda 1 min. Bo'yalgan qismlar 50 foizli etanol bilan yuvilgan, distillangan suv bilan yuvilgan, suvsizlangan, tozalangan va o'rnatilgan. Qora CaOx cho'kmalari yorug'lik mikroskopi ostida ko'rildi69.

Immunogistokimyoviy bo'yash.Deparafinizatsiya va regidratsiyadan so'ng antigenni olish mikroto'lqinli pech yordamida natriy sitrat tamponida qaynatish orqali amalga oshirildi. Endogen H2O2 30 daqiqa davomida 0,3 foiz H2O2 bilan inkubatsiya qilish orqali faolsizlantirildi. Oddiy ot zardobi bilan 20 daqiqa davomida inkubatsiya qilish orqali nonspesifik bog'lanish bloklandi. Keyin bo‘limlar 1:1,000 4-HNE (ab46545, Abcam, Kembrij, Buyuk Britaniya) yoki kesilgan kaspaz-3 (5A1E, Cell Signaling Technology, MA, AQSH) birlamchi antikor bilan kechasi 4 darajada inkubatsiya qilindi, keyin ikkilamchi antikor bilan 37 daraja 30 daqiqa davomida inkubatsiya. Yuvishdan so'ng, bo'laklar ABC reaktivi (VECTASTAIN® ABC to'plami) bilan 30 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi, 1 foiz diaminobenzidin bo'yash reagentida 5 daqiqa davomida namlandi va 5 daqiqa davomida gematoksilin bilan bo'yaldi. Nihoyat, bo'limlar suvsizlandi, tozalandi, o'rnatildi va yorug'lik mikroskopi ostida ko'rildi.

Siydikdagi sitrat, oksalat, siydik kislotasi va iCOCI o'lchovlari. Siydikdagi sitrat darajasi yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi (Varian Medical Systems, CA, AQSH) yordamida ROAorganik kislota H plyus ustuni (300×7,8 mm) (Phenomenex, CA, AQSH) yordamida aniqlangan va elutsiya qilingan. 5 mM H2SO4 tomonidan 0,5 ml / min oqim tezligida. Siydikdagi oksalat va siydik kislotasi darajasi -20 kV kuchlanish bilan 25 gradusda ajratilgan kapillyar elektroforez (Beckman Coulter, CA, AQSh) bilan o'lchandi. Siydik iCOCI testi oldingi hisobotimizga ko'ra o'tkazildi 38.

C. elegans shtamm va parvarishlash.C. elegans yovvoyi turdagi Bristol N2 shtammi va uning laboratoriya oziq-ovqat manbai E. coli OP50 AQSH Minnesota universiteti, Caenorhabditis Genetika markazidan olingan. Ular o'stirildi va 20 daraja 70 da E. coli OP50 bir maysa bilan nematod o'sish o'rta agar plitalari saqlab qilindi. Barcha tajribalar yoshi sinxron yosh kattalar qurtlari o'tkazildi.

Hayot davomiyligi tahlili.Yaroqlilik muddati tahlili suyuq muhitda amalga oshirildi71. Qisqacha aytganda, 10 yoshga moslashtirilgan yosh kattalar nematodlari nasl ishlab chiqarishning oldini olish uchun E. coli OP50 va 5-fuoro-2'- deoksiuridin bilan birga M9 buferli 24-quduq plastinkasiga o'tkazildi. Avtomobil nazorati sifatida distillangan suv yordamida HydroZitLa ning turli konsentratsiyalari qo'shildi. Tirik nematodalar har 24 soatda hisoblab chiqiladi. Nematodlar platina halqasi yordamida yumshoq qo'zg'atishga javob bermasa, o'lik deb hisoblangan.

Faringeal nasos tahlili.Faringeal nasos (oziq-ovqat iste'mol qilish qobiliyatining ko'rsatkichi) yosh kattalardagi nematodalarda (~10) nazorat va HydroZitLa qo'shimchasi o'rtasida, stereomikroskop (SMZ{) ostida har 24 soatda 30 soniya davomida faringeal qisqarishni kuzatish orqali o'lchandi. {3}}, Motic, Xitoy) 0-kun (qoʻshimchadan oldin), 5, 10 va 1572.

Lipofussin tahlili.5 kun davomida HydroZitLa ning turli konsentrasiyalari (20 foiz, 30 foiz, 40 foiz v/v) bilan to'ldirilganidan keyin yovvoyi tipdagi nematodalarda lipofussinning to'planishi kuzatildi. Nazorat sifatida E. coli OP{5}}oziqlangan qurtlardan foydalanilgan. Aralashuvdan so'ng qurtlar M9 buferi yordamida bir necha marta yuvildi va bir tomchi natriy azid ichiga shisha slaydga joylashtirildi. Floresan tasvirlash ZEISS LSM 700 konfokal mikroskop yordamida amalga oshirildi. Tasvirlar yana Image J dasturi yordamida tahlil qilindi va floresans intensivligi ixtiyoriy birliklar (AU)72 sifatida taqdim etildi.

Nisbiy telomer uzunligini o'lchash. Nisbiy telomer uzunligi (RTL) H2O2 (25 µM), natriy oksalat (NaOx, 900 µM) va COM (25 µg/sm2) bilan yoki HydroZitLa (10 foiz v) bilan ishlov berilgan HK{0}} hujayralarida o‘lchandi. /v). RTL real vaqtda miqdoriy polimeraza zanjiri reaktsiyasi (qPCR)73 bilan aniqlandi. U telomerik takroriy nusxalar sonining o'rtacha telomer uzunligiga mutanosib bo'lgan bir nusxali gen (36B4 geni) nusxasi soniga nisbati asosida hisoblanadi. Ishlatilgan primerlar quyidagilar edi: Telomere (oldinga) 5′-CGGTTTGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTT-3′, Telomere (teskari) 5′-GGC TTGCCTTACCCTTACCCTTACCCTTACCCTTACCCCT-3}GTCACCCT-3}GTCAGAG (ward5GTCAGAG)for CC{{23 }}′ va 36B4 (teskari) 5′-CCCATTCTATCATCAACGGGTACAA-3′. PCR 95 gradusda 10 daqiqa davomida kuchaytirildi, keyin 15 soniya davomida 95 graduslik 40 tsikl va 1 daqiqa davomida 54 daraja.

SA‑ ‑gal va p16 ni ikki marta bo'yash.Qopqoqlarda o'stirilgan HK{0}} hujayralari H2O2, NaOx va COM bilan SIPS induktsiyasi uchun 72 soat davomida 10% v/v HydroZitLa bilan va holda ishlov berildi. Davolanishdan so'ng hujayralar mahkamlangan va yangi tayyorlangan X-gal eritmasi (Vivantis, Malayziya) bilan 12-16 soat davomida bo'yalgan, yuvilgan, 3 daqiqa davomida 0,1% Triton X-100 (Amresco, TX, AQSh) bilan o'tkazuvchan bo'lgan. , va 1% normal ot zardobi (Gibco, MA, AQSH) bilan 1 soat davomida 37 darajadan o'ziga xos bo'lmagan bog'lanish uchun bloklangan. Keyin hujayralar 1:10,000 p16 birlamchi antikor (ab108349, Abcam) bilan kechasi 4 daraja, keyin 1:10,000 Alexa Fluor® 488-konjugatsiyalangan ikkilamchi antikor bilan inkubatsiya qilindi ( Hujayra signalizatsiya texnologiyasi) 30 daqiqa davomida 37 daraja. Bo'yalgan qoplama 4',6-diamidino-2-fenilindol (Abcam) bo'lgan Fluoroshield o'rnatish vositasi bilan o'rnatildi. SA{30}}gal-musbat keksa hujayralar (koʻk) va p{32}}ekspressiv hujayralar (yashil) EVOS FL Auto 2 tasvirlash tizimi (Thermo Fisher Scientific, MA, AQSH) yordamida tasvirlangan va tasvirlangan.

Statistik tahlil.Barcha ma'lumotlar mos ravishda o'rtacha ± standart og'ish yoki median (kvartallar oralig'i) sifatida taqdim etildi. Ikki guruh o'rtasidagi farqni tekshirish uchun ikkita namunali t-testi yoki Mann-Whitney testi o'tkazildi. Uch yoki undan ortiq guruhlar orasidagi farqni tekshirish uchun bir tomonlama dispersiya yoki Kruskal-Uollis testi, so'ngra bir nechta taqqoslash testi ishlatilgan. Hisoblash va grafiklar uchun GraphPad Prism Sofware 9-versiyasi (GraphPad Sofware Inc., CA, AQSH) ishlatilgan. P<0.05 was considered significant.

Ma'lumotnomalar

1. Mishel, AR Urolitiyoz - tarixiy, qiyosiy va patofizyologik jihatlar: sharh. JR Soc. Med. 82, 669–672 (1989).

2. Shah, J. & Whitfield, HN asrlar davomida urolitiyoz. BJU Int. 89, 801–810 (2002).

3. Boonla, C. va boshqalar. O'z ichiga olgan toshli buyraklardagi monotsit kimyoatrakant oqsili-1 va interleykin-6ning messenjer RNK ifodasi. BJU Int. 101, 1170–1177 (2008).

4. Boonla, C. va boshqalar. Staghorn toshlari bo'lgan bemorlarning buyraklarida fibroz va epiteliya-mezenximal o'tishning dalillari. BJU Int. 108, 1336–1345 (2011).

5. Chuang, TF va boshqalar. Buyrak toshlari bilan og'rigan bemorlarda surunkali buyrak kasalligi xavfi - umummilliy kohort tadqiqoti. BMC Nephrol. 21, 292 (2020).

6. Dhondup, T. va boshqalar. Buyrak va siydik pufagida tosh hosil bo'lganlarda ESRD va o'lim xavfi. Am. J. Buyrak dis. 72, 790–797 (2018).

7. Kum, F. va boshqalar. Toshlar hali ham o'ldiradimi? 1999-2013 yillarda Angliya va Uelsda tosh kasalligidan o'lim tahlili. BJU Int. 118, 140–144 (2016).

8. Geragty, RM, Cook, P., Walker, V. & Somani, BK. Buyuk Britaniyada buyrak tosh kasalligining iqtisodiy yukini baholash: 19 yillik o'rtacha kuzatuv bilan retrospektiv kohort tadqiqoti. BJU Int. 125, 586–594 (2020).

9. C. Turk (rais), AN, A. Petrik, C. Seitz, A. Skolarikos (rais oʻrinbosari), K. Tomas & Guidelines Associates: NF Davis, JFD, R. Lombardo, N. Grivas, Y. Ruhayel. Evropa urologiya assotsiatsiyasi (EAU) urolitiyoz bo'yicha qo'llanma.

10. Jendle-Bengten, C. & Tiselius, HG. Natriy kaliy sitratining past dozasi bilan davolangan tosh hosil qiluvchilarning uzoq muddatli kuzatuvi. Skandalash. J. O‘rol. Nefrol. 34, 36–41 (2000).

11. Schwille, PO, Herrmann, U., Wolf, C., Berger, I. & Meister, R. Sitrat va takroriy idyopatik kaltsiy urolitiyoz. Erkak toshli bemorlarning qisqa, o'rta va uzoq muddatli dori-darmonlarida og'iz orqali yuboriladigan kaliy sitratining metabolik ta'siri bo'yicha uzunlamasına uchuvchi tadqiqot. Urol. Res. 20, 145–155 (1992).

12. Tracy, CR & Pearle, MS Tosh kasalligini tibbiy boshqarish bo'yicha yangilanish. Curr. Fikr. Urol. 19, 200–204 (2009).

13. Mechlin, C., Kalorin, C., Asplin, J. & White, M. Splenda (R) tosh shakllanishining oldini olish uchun og'iz orqali kaliy sitrat qo'shimchasining bardoshliligini yaxshilaydi: Randomize ikki marta ko'r-ko'rona sinov natijalari. J. Endourol. 25, 1541–1545 (2011).

14. Boonla, C. Urolitiyozda oksidlovchi stress, tirik hujayralardagi reaktiv kislorod turlari (ROS), Cristiana Filip va Elena Albu, IntechOpen.

15. Boonla, C., Wunsuwan, R., Tungsanga, K. & Tosukhowong, P. Nefrolitiazli bemorlarda siydikda 8-gidroksideoksiguanozin ko'tariladi. Urol. Res. 35, 185–191 (2007).

16. Xon, SR Giperoksaluriyadan kelib chiqqan oksidlovchi stress va buyrakni himoya qilish uchun antioksidantlar. Urol. Res. 33, 349–357 (2005).

17. Khan, SR Reaktiv kislorod turlari buyrak toshini kaltsiy oksalat shakllanishining molekulyar modulyatorlari sifatida: Klinik va eksperimental tekshiruvlardan olingan dalillar. J. O‘rol. 189, 803–811 (2013).

18. Kittikowit, W. va boshqalar. Nefrolitiazli bemorlarda buyrak biopsiyalarida qo'shni toshlarda ko'rilgan oksidlovchi DNK shikastlanishining kuchayishi. Urolitiyoz 42, 387-394 (2014).

19. Yasui, T. va boshqalar. Urolitiyozni patofiziologiyaga asoslangan davolash. Int. J. O‘rol. 24, 32–38 (2017).

20. Huang, HS, Ma, MC & Chen, J. Kam vitamin E dietasi kalamush giperoksalurik buyragida oksidlovchi stressni kuchaytirish orqali kaltsiy oksalat kristallarining shakllanishini kuchaytiradi. Am. J. Fiziol. Buyrak. Fiziol. 296, F34-45 (2009).

21. Huang, HS, Chen, J., Chen, CF & Ma, MC E vitamini kalamush buyraklarida kristal hosil bo'lishini susaytiradi: Buyrak naycha hujayralarining o'limi va kristallanish inhibitörlerinin roli. Buyrak Int. 70, 699–710 (2006).

22. Tamilselvan, S. & Menon, M. Vitamin E terapiyasi buyrak to'qimalarining antioksidant holatini yaxshilash orqali buyrakda giperoksaluriya keltirib chiqaradigan kaltsiy oksalat kristalining cho'kishining oldini oladi. BJU Int. 96, 117–126 (2005).

23. Tamilselvan, S. & Selvam, R. E vitamini va mannitolning eksperimental nefrolitiyazda buyrak kaltsiy oksalatini ushlab turishga ta'siri. Hindiston J. Biochem. Biofizika. 34, 319–323 (1997).

24. Butterweck, V. & Khan, SR Urolitiyozni davolashda o'simlik preparatlari: muqobil yoki qo'shimchami? Planta Med. 75, 1095–1103 (2009).

25. Kasote, DM, Jagtap, SD, Tapa, D., Khyade, MS & Russell, WR. Hindiston va Xitoyda qo'llaniladigan siydik toshlari uchun o'simlik preparatlari: sharh. J. Etnofarmakol. 203, 55–68 (2017).

26. Abu Zarin, M., Tan, JS, Murugan, P. & Ahmad, R. Kaltsiy oksalat kristallanishini inhibe qilishda Musa psevdo-poyasi ekstraktining har xil turlaridan potentsial urolitiyozga qarshi faollikni o'rganish. BMC Complement Med. Ter. 20, 317 (2020).

27. Kailash, P. & Varalakshmi, P. Oddiy va hiperoksalurik kalamushlarning jigaridagi biokimyoviy o'zgarishlarga banan ildiz sharbatining ta'siri. Hindistonlik J. Exp. Biol. 30, 440–442 (1992).

28. Prasad, KV, Bharathi, K. & Srinivasan, KK Musoning bahosi (paradisiacal Linn. cultivar) - "Puttubale" ildiz sharbati albinos kalamushlarda antilitiatik faollik uchun. Hind J. Fiziol. Farmakol. 37, 337–341 (1993).

29. Panigrahi, PN, Dey, S., Sahoo, M. & Dan, A. Muso paradisiaca pseudostemning antiurolitiatik va antioksidant ta'siri kalamushdagi etilen glikol bilan qo'zg'atilgan nefrolitiyozda. Hindiston J. Pharmacol. 49, 77–83 (2017).

30. Poonguzhali, PK & Chegu, H. Te banan ildizi ekstraktining normal va giperoksalurik kalamushlarda toshlar uchun siydik xavf omillariga ta'siri. Br. J. O‘rol. 74, 23–25 (1994).

31. Pillai, RG Siydik toshlarini davolashda Musoning psevdostemasining yadrosi. Anc Sci Life. 15, 2–6 (1995).

32. Lordumrongkiat, N., Chotechuang, N., Madared, N., Jindatip, D. & Boonla, C. Umumiy fenolik moddalar, umumiy flavonoid va dorivor o'simlikdan olingan ichimlikning umumiy antioksidant qobiliyati: HydroZitLa. Chula Med. J. 64, 381–388 (2020).

33. Sakhaee, K. Tosh kasalligi farmakologiyasi. Adv. Surunkali buyrak kasalligi. 16, 30–38 (2009).

34. Baumann, JM & Afolter, B. Te kaltsiy oksalat agregatsiyasida siydik makromolekulalarining paradoksal roli: tosh metafilaksisida diurezni kuchaytirish uchun yana bir iltimos. Urolitiyoz 44, 311-317 (2016).

35. Reddy, AJ va boshqalar. Musa sapientum ildiz ekstraktining epilepsiyaning o'tkir va surunkali eksperimental modellariga antikonvulsant va antioksidant ta'siri. Farmakologiya. Res. 10, 49–54 (2018).

36. Jaafar, NF, Ramli, ME & Mohd Salleh, R. Clitorea ternatea fowerning antioksidant faolligi, jami fenolik, umumiy flavonoid va umumiy antosiyanin tarkibidagi optimal ekstraktsiya holati. Trop. Hayot fanlari. Res. 31, 1–17 (2020).

37. Nirmal, NP, Rajput, MS, Prasad, RG & Ahmad, M. Brazilin dan Caesalpinia sappan heartwood va uning farmakologik faoliyati: sharh. Osiyo Pak. J. Trop. Med. 8, 421–430 (2015).

38. More-Krong, P. va boshqalar. Kaltsiy oksalat urolitiyozini tashxislash uchun siydikda indol bilan reaksiyaga kirishadigan kaltsiy oksalat kristallanish indeksini (iCOCI) klinik tekshirish. Sci. Rep. 10, 8334 (2020).

39. Yasui, T. va boshqalar. Sitratning buyrak toshlari shakllanishiga ta'siri va kalamush urolitiyoz modelida osteopontin ifodasi. Urol. Res. 29, 50–56 (2001).

40. Ghaeni, FA, Amin, B., Hariri, AT, Meybodi, NT & Hosseinzadeh, H. Krosinning kalamushlarda etilen glikol bilan qo'zg'atilgan litiyozga qarshi antilitiatik ta'siri. Urolitiyoz 42, 549-558 (2014).

41. Xolms, RP & Assimos, DG Glyoxylate sintezi va uning modulyatsiyasi va oksalat sinteziga ta'siri. J. O‘rol. 160, 1617–1624 (1998).

42. Patankar, S., Fanthome, B. & Bhalerao, SS Urolitik kalamushlarda o't o'simliklarining samaradorligi: Eksperimental tadqiqot. J. Ayurveda Integr. Med. 11, 250–255 (2020).

43. Chaiyarit, S. & Tongboonkerd, V. Mitoxondriyal disfunktsiya va buyrak tosh kasalligi. Old fiziol. 11, 566506 (2020).

44. Holoch, PA & Tracy, CR Antioksidantlar va buyrak toshlarining o'z-o'zidan xabar qilingan tarixi: Milliy salomatlik va ovqatlanish ekspertizasi tadqiqoti. J. Endourol. 25, 1903–1908 (2011).

45. Xon, SR Oksidlanish stressi, nefrolitiaz va semizlik, gipertoniya, diabet, surunkali buyrak kasalligi, metabolik sindrom o'rtasidagi bog'liqlikmi? Urol. Res. 40, 95–112 (2012).

46. ​​Hirose, M. va boshqalar. Buyrak tubulali epiteliya hujayralarining shikastlanishi va oksidlovchi stress sichqon buyraklarida kaltsiy oksalat kristalining shakllanishiga olib keladi. Int. J. O‘rol. 17, 83–92 (2010).

47. Xan, SR Reaktiv kislorod turlari, yallig'lanish va kaltsiy oksalat nefrolitiazi. Tarjima. Androl. Urol. 3, 256–276 (2014).

48. Boonla, C. va boshqalar. Yallig'lanish va fibrotik oqsillar proteomik ittifoqdoshi buyrak toshlari bo'lgan bemorlarning siydik va tosh matritsasidagi asosiy protein tarkibiy qismlari sifatida aniqlangan. Klin. Chim. Acta 429, 81–89 (2014).

49. Aggarval, D., Gautam, D., Sharma, M. & Singla, SK Bergenin, etilen glikol bilan induktsiya qilingan giperoksalurik kalamush modelida mitoxondriyal disfunktsiyani bartaraf etish orqali buyrak shikastlanishini susaytiradi. Yevro. J. Farmakol. 791, 611–621 (2016).

50. Ghodasara, J., Pawar, A., Deshmukh, C. & Kuchekar, B. Rutin va curcuminning kalamushlarda eksperimental ravishda qo'zg'atilgan kaltsiy oksalat urolitiyoziga inhibitiv ta'siri. Farmakologiya. Res. 2, 388–392 (2010).

51. Grases, F. va boshqalar. Uzum urug'idan olingan polifenollarning buyrak tosh kasalligiga ta'siri. Oksid. Med. Hujayra. Longev. 2015 yil, 813737 (2015 yil).

52. Cherniack, EP. O'simlik polifenollarining qarish jarayoniga potentsial ta'siri. Forsch Komplemented. 17, 181–187 (2010).

53. Vud, JG va boshqalar. Sirtuin faollashtiruvchilari kaloriya cheklanishini taqlid qiladi va metazoanlarda qarishni kechiktiradi. Tabiat 430, 686–689 (2004).

54. Bonkowski, MS & Sinclair, DA Dizayn bo'yicha qarishni sekinlashtirish: NAD (plyus) va sirtuinni faollashtiruvchi birikmalarning ko'tarilishi. Nat. Ruhoniy Mol. Hujayra. Biol. 17, 679–690 (2016).

55. Bhullar, KS & Hubbard, BP umri va sog'lig'ini resveratrol bilan uzaytirish. Biochim. Biofizika. Acta. 1852, 1209–1218 (2015).

56. von Frieling, J. & Roeder, T. Oziqlanishni cheklashni uzoqroq hayotga aylantirishga ta'sir qiluvchi omillar. IUBMB Life 72, 814–824 (2020).

57. von Zglinicki, T. Oksidlanish stressi telomerlarni qisqartiradi. Trends Biochem Sci. 27, 339–344 (2002).

58. Chuenwisad, K. va boshqalar. Oksalat, kaltsiy oksalat monohidrat va kaltsiy oksalat nefrolitiazi bilan og'rigan bemorlarning siydikida oksidlovchi stress tufayli erta qarish va telomerning qisqarishi. Old. Immunol. 12, 696486 (2021 yil).

59. Xu, Z. va boshqalar. O'tlar va dori vositalarining o'zaro ta'siri: adabiyotlarni ko'rib chiqish. Giyohvand moddalar 65, 1239-1282 (2005).

60. Susanti, S. & Imannura, P. Secang Wood (Ceasalpinia Sappan L.) ekstraktining spermatozoidlarning morfologiyasiga va erkak kalamushlarda qayta tiklanish jarayoniga ta'siri. 2-Qo'shma xalqaro konferentsiyalarda. ISBN: 978-602-5842-03-0 (2018).

61. Kim, BS va boshqalar. Caesalpinia sappan piruvat dehidrogenaza kinaz 1 ifodasini bostirish orqali ektopik endometriyal 12Z hujayralarida apoptotik hujayra o'limini keltirib chiqaradi. Exp. Ter. Med. 21, 357 (2021 yil).

62. Boonla, C., Youngjermchan, P., Pumpaisanchai, S., Tungsanga, K. & Tosukhowong, P. Nefrolitiazli bemorlarning siydiklari va toshlaridan olingan lipidlarning litogenik faolligi va klinik ahamiyati. Urol. Res. 39, 9–19 (2011).

63. Kloypan, C., Srisa-art, M., Mutirangura, A. va Boonla, C. Reaktiv kislorod turlari tomonidan qo'zg'atilgan LINE-1 gipometilatsiyasi S-adenosilmetioninning kamayishi orqali amalga oshiriladi. Hujayra biokimyosi. Funktsiya. 33, 375–385 (2015).

64. Whongsiri, P., Phoyen, S. & Boonla, C. Urotelial karsinogenezda oksidlovchi stress: oqsil karbonillanishi va reaktiv kislorod turlarining hujayra ichidagi ishlab chiqarilishini o'lchash. Usullari Mol. Biol. 1655, 109–117 (2018).

65. Whongsiri, P. va boshqalar. Quviq saratonida oksidlovchi stress va LINE{1}} reaktivatsiyasi faol xromatin hosil bo'lishi orqali epigenetik bog'liqdir. Erkin Radik. Biol. Med. 134, 419–428 (2019).

66. Whongsiri, P. va boshqalar. LINE-1 ORF1 oqsili reaktiv kislorod turlari tomonidan yuqori tartibga solinadi va siydik pufagi urotelial karsinomasining rivojlanishi bilan bog'liq. Saraton genom. Proteom. 15, 143–151 (2018).

67. Reygan-Show, S., Nihal, M. & Ahmad, N. Doza tarjimasi hayvonlardan insonga o'tkazilgan tadqiqotlar qayta ko'rib chiqildi. FASEB J. 22, 659–661 (2008).

68. Yasue, T. Kaltsiy oksalatning gistokimyoviy identifikatsiyasi. Acta Histochem. Sitokimya. 2, 83–95 (1969).

69. Evan, AP va boshqalar. Nefrolitiyoz bilan og'rigan bemorlarning Randall plastinkasi Henle yupqa ilmoqlarining bazal membranalarida boshlanadi. J. Klin. Invest. 111, 607–616 (2003).

70. Prasanth, MI, Santoshram, GS, Bhaskar, JP & Balamurugan, K. Ultraviolet-A modeli nematoda Caenorhabditis elegansda DAF-16ga bog'liq yo'lda fotoagingni keltirib chiqaradi. Yoshi (Dordr) 38, 27 (2016).

71. Brimson, JM, Prasanth, MI, Plaingam, W. & Tencomnao, T. Bacopa monnieri (L.) wettst. Ekstrakt glutamat toksikligidan himoya qiladi va Caenorhabditis elegansning uzoq umr ko'rishini oshiradi. J. Tradit. Kompleks. Med. 10, 460–470 (2020).

72. Prasanth, MI, Brimson, JM, Chuchawankul, S., Sukprasansap, M. & Tencomnao, T. Antiaging, stress qarshilik va Cleistocalyx nervosumning neyroprotektiv samaradorligi. Caenorhabditis elegans modelidan foydalangan holda panacea meva ekstraktlari. Oksid. Med. Hujayra. Longev. 2019, 7024785 (2019).

73. Cawthon, RM Telomerni miqdoriy PCR orqali o'lchash. Nuklein kislotalari Res. 30, e47 (2002).

Minnatdorchilik

Tadqiqot Fan va texnologiyalar vazirligi, Fan va texnologiyalarni rivojlantirish milliy agentligi (NSTDA) va Chulalongkorn universiteti (GB-rgf_60_2905_0003 to CB) va Tailand ilmiy tadqiqot va Innovatsiyalar, sanoat bo'limi (RDG6150088 to CB) va Chulalongkorn universiteti tibbiyot fakulteti (Muvofiqlik fondi). NL Chulalongkorn universiteti fondining 90 yilligini oldi (Ratchadaphiseksomphot Endowment Fund). Mualliflar Chulalongkorn universiteti texnologiya markazi va Tailand ilmiy tadqiqot va innovatsiyalar fondi (TSRI) (CU_FRB640001_01_2) tomonidan taqdim etilgan tadqiqot va innovatsion yordam uchun minnatdorchilik bildiradilar. Miss Natcha Madaredga ajoyib yordami uchun rahmat. Chulalongkorn universiteti Tibbiyot fakultetining hayvonot muassasasi xodimlariga minnatdorchilik bildiring. Assistant professor doktor Sitthichai Ukritchon va prof. doktor Manathip Osiriga qutblangan mikroskopdan foydalanishni qo'llab-quvvatlaganlari uchun minnatdorchilik bildiramiz.

Muallif hissalari

NL: Hujayra va kalamush tajribalarini o'tkazdi va ma'lumotlarni to'pladi. NC: Ma'lumotlarni to'pladi va tadqiqot g'oyasini va ma'lumotlarni tahlil qilishni tasavvur qilishga yordam berdi. MP: C. elegans tajribasini o'ylab topdi va amalga oshirdi va C. elegans ma'lumotlarini tahlil qildi. DJ: Immunohistokimyo tajribalari va tasvirlashda yordam berdi. CM: To'qimalarni kesishda yordam berdi. KC: Telomerni qisqartirish va qarish tajribalarini o'tkazdi. AL: Kalamushlar bilan tajriba o'tkazish uchun hayvonlar ob'ektiga kirishga muvaffaq bo'ldi. TT: C. elegans tajribasini tasavvur qilish va loyihalashtirishga yordam berdi. CB: Tadqiqotni o'ylab topdi va loyihalashtirdi, statistik tahlillarni o'tkazdi va qo'lyozmani yozdi. Barcha mualliflar qo'lyozmani ko'rib chiqdilar.

Raqobatdosh manfaatlar

CB, NC va NL HydroZitLa ixtirochilaridir. Chulalongkorn universiteti va ixtirochilar HydroZitLa uchun intellektual mulkka ega. Boshqa mualliflarning hech birida ushbu ish haqida e'lon qilish uchun manfaatlar to'qnashuvi yo'q.

Qo'shimcha ma'lumot

Qo'shimcha ma'lumotOnlayn versiyada veb-saytda mavjud bo'lgan qo'shimcha materiallar mavjud.

Xat yozishva materiallar uchun so'rovlar CBga yuborilishi kerak

Qayta chop etish va ruxsatnomalar haqida ma'lumotveb-saytida mavjud.

Nashriyotning eslatmasiSpringer Nature nashr etilgan xaritalar va institutsional bog‘lanishlar bo‘yicha yurisdiksiyaviy da’volarga nisbatan betaraf bo‘lib qoladi.

【Batafsil ma'lumot uchun:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】