Cistanche Salsa hujayra madaniyatida feniletanoid glikozid biosintezida ishtirok etuvchi vodorod peroksidga javob beruvchi ESTlarni aniqlash

Aloqa: Audrey Xu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

J. CHEN va boshqalar

Abstrakt
Vodorod periks o'simliklarda ikkilamchi metabolit biosintezini qo'zg'atishi mumkin bo'lgan samarali abiotik elisitatordir. Biz tuzga chidamli dorivor o'simlikning hujayra suspenziyasi madaniyatida ekanligini ko'rsatamizCistanchesalsa, bioaktiv komponentlarni ishlab chiqarishfeniletanoidglikozidlar(PeGs) H2O2 bilan davolashdan so'ng ortdi. PeGs bilan bog'liq genlarni aniqlash(feniletanoidglikozidlar)H2O2 ta'sir qiladigan biosintezdan foydalanib, biz H2O2 ta'sir qiluvchi genlarning bostiruvchi subtractiv gibridizatsiya kutubxonasini yaratdik.Cistanchesalsahujayra chizig'i va 105 ifodalangan ketma-ketlik teglari (EST) va 85 genni aniqladi. EST kutubxonasining funktsional izohlari va gen ontologiyasi tahlillari turli xil stress reaktsiyalari, ikkilamchi metabolitlarning biosintezi va transkripsiyani tartibga solish bilan bog'liq genlarni ko'rsatdi. Ular orasida biz PeGs bilan bog'liq ikkita genni aniqladik(feniletanoidglikozidlar)biosintez yo'li (4-kumarat koenzim A ligaza va sinnamat 4-gidroksilaza) va ikkita WRKY tipidagi transkripsiya omillari. H2O2 davolashdan keyin tanlangan genlarning ifodalari RT-qPCR tomonidan tahlil qilindi. PeG transkripsiyasining erta ortishi(feniletanoidglikozidlar)Davolanishdan so'ng biosintez yo'li genlari H2O2 ning PeGlarni keltirib chiqarishini aniqladi(feniletanoidglikozidlar)uning asosiy genlarini yuqori tartibga solish orqali biosintez.
Qo'shimcha kalit so'zlar: sinnamat{0}}gidroksilaza, 4-kumarat koenzim A ligaza, supressiv gibridlanish.Cistanchesalsa. feniletanoidglikozidlar.

Kirish

CistanchesalsaHaloxylos ammodendrun ildizida ko'p yillik o'simlik paraziti bo'lib, u Xitoyning g'arbiy qismidagi cho'l hududida o'sadi. Asrlar davomida,Cistancheturlari an'anaviy o'simlik dori sifatida ishlatilgan (Vang va boshq. 2012). Biologik faol komponentlarfeniletanoidglikozidlar(PeGs) reaktiv kislorod turlarini (ROS) tozalash, radiatsiyadan himoya qilish, immunitetni oshirish va qarishga qarshi ajoyib ta'sir ko'rsatadi (Nan va boshq. 2013). PeGs(feniletanoidglikozidlar)dagi biosintezCistanchefenilalanindan boshlanadi (1-rasm Suppl.) va sintez qilingan kofein kislotasi turli xil PeGlarni hosil qilish uchun qo'shimcha ravishda glikosillanadi.(feniletanoidglikozidlar)(Vang va boshq. 2012). Uchta asosiy PEG(feniletanoidglikozidlar), echinacoside, acteosid va 2'-acetylakteosid, eng faol komponentlar hisoblanadi.Cistanche(Kobayashi va boshq. 1984). Ularning tarkibini yaxshilash uchunCistanchehujayra madaniyati, turli xil elimitatorlar sinovdan o'tkazildi, shu jumladan xitosan, putresin, Ag plyus va osmotik stress (Ouyang va boshq. 2005a, b, Cheng va boshq. 2005, 2006, Liu va boshq. 2007, Liu va Cheng 2008). Biroq, PeGlarda ishtirok etadigan genlar(feniletanoidglikozidlar)dagi biosintezCistanche, asosan fenilalanin almashinuvi yo'llari genlari kamdan-kam hollarda aniqlangan. Yaqinda Cistanche deserticolada faqat fenilalanin ammiak-liyazni (PAL) kodlovchi gen aniqlangan (Hu va boshq. 2011). Sinnamatning kumar kislotasiga aylanishini katalizlashi mumkin boʻlgan sinnamat{2}}gidroksilaza (C4H) va lignin va flavanoidlar uchun zarur boʻlgan 4-kumarat koenzim A ligazasini (4CL) kodlovchi boshqa genlar. biosintezlari topilmaganCistanche.
ning hujayra madaniyatidan foydalandikCistanchesalsaPEGlarni o'rganish(feniletanoidglikozidlar)biosintez va tegishli genlar ifodasi. Shuningdek, biz samarali H2O2 elimitatorining PeGlarga ta'sirini tekshirdik(feniletanoidglikozidlar)biosintez. Bundan tashqari, PeGlarda ishtirok etadigan erta sezgir genlarni topish(feniletanoidglikozidlar)biosintez, biz H2O2-reaktiv genlarning cDNK kutubxonasini yaratish uchun supressiv gibridizatsiyani (SSH) amalga oshirdik.

1-rasm. H2O2 bilan davolashdan keyin RT-qPCR tomonidan aniqlangan nisbiy gen ifodasi. CsWRKY1 - WRKY transkripsiya faktori (Contig07), CsC4H1 - sinnamat 4-gidroksilaza (Contig09), Cs4CL1 - 4-kumarat: ligaza (Contig03), CsHSP{13}} issiqlik zarbasi oqsili 70 kDa (Contig 01) va CsSOD1 - superoksid dismutaza (Contig16). Hujayralar suyuq muhitda 2 soat davomida 80 ug dm-3 H2O2 bilan ishlov berildi va ifodalar suv bilan ishlangan nazorat bilan solishtirildi. Plyus vositalari - uchta biologik takrorlanishning SD; * - P <0,05, **="" -="" p=""><>

Materiallar va uslublar

CS2001 hujayra liniyasi gulbarglaridan tashkil topganCistanchesalsa(CA Mey.) Bek Neimenggu provinsiyasida to'plangan va subkulturatsiya qilingan. Madaniyat usuli ilgari nashr etilgan protokolga o'xshash edi (Liu va boshq. 2007). Odatda, subkultura uchun qattiq Murashige va Skoog (1962; MS) muhiti va PeGs uchun suyuq muhit ishlatilgan.(feniletanoidglikozidlar)biosintez (bu 3{3}} g dm-3 glyukoza va 2.0 mg dm-3 indol-3- sirka kislotasi bilan toʻldirilgan modifikatsiyalangan MS muhiti edi). H2O2 bilan ishlov berish uchun 5.0 ± 0,2 g hujayralar tez o'sish davrida, odatda qattiq muhitda subkultura qilingandan keyin 20-30 kun o'tgach, 250 sm3 Erlenmeyer kolbasidagi 50 sm3 suyuqlik muhitiga ekilgan. va har xil H2O2 kontsentratsiyasi bilan yoki ularsiz qorong'uda o'stiriladi. PeGlar(feniletanoidglikozidlar)H2O2 tomonidan 10 kunlik induktsiyadan keyingi tarkib metanol gradientli elyusiya bilan teskari fazali yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasiga asoslangan ilgari nashr etilgan (Liu va boshq. 2007) usul bo'yicha tahlil qilindi.

Hujayralar H2O2 bilan ishlov berishdan 2 soat o'tgach, Büchner voronkasi yordamida filtr qog'ozi bilan muhitdan to'plangan, so'ngra ular suyuq azotda muzlatilgan va kukunga aylantirilgan. Har 2 g hujayra kukuni 1 sm3 2-merkaptoetanol, 1 sm3 200 g dm{{10}} sarkosil, va 8 sm3 GTC buferi (5 M guanidinium izotiosiyanat, 62,5 mM Tris-HCl, pH 8,0, 6,25 mM EDTA, pH 8,0, 5 mM tiokarbamid va 10 mM ditiotreitol). Keyin hujayralar muz ustida 15 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi, so'ngra 1/3 hajmdagi 8,5 M CH3COOK, pH 6,0 qo'shildi va hujayralar muzda 15 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi va keyin 15 000 g haroratda 15 daqiqa davomida santrifüj qilindi. . Supernatant umumiy RNKni cho'ktirish uchun teng hajmdagi izopropanolga qo'shildi. Umumiy RNK ishlab chiqaruvchining ko'rsatmalariga muvofiq RNeasy mini to'plami (Qiagen, Hilden, AQSh) tomonidan yanada tozalandi. Messenger RNK Oligotex mRNA midi to'plami (Qiagen) yordamida umumiy RNKdan ajratilgan.

feniletanoidglikozidlarichidaCistancheSalsa

SSH kutubxonasi nazorat va 30% H2O2-organ hujayra namunalaridan 2 soat oʻtgach, PCR-tanlangan cDNK ajratib olish toʻplami (Clontech, Mountain View, AQSH) yordamida yaratildi. Kutubxonani qurish uchun mahsulotlar jelni tozalash to'plami (Qiagen) yordamida alohida tozalandi va TA klonlash to'plami (Tyangen, Pekin, Xitoy) yordamida pGEM vektoriga klonlandi. Mustaqil klonlardan olingan plazmidlar ajratildi va T7 primeri yordamida ketma-ketlashtirildi. Kutubxonadagi barcha ifodalangan ketma-ketlik yorlig'i (EST) ketma-ketliklari (vektor ketma-ketliklari olib tashlangan holda) CAP3 (http://doua.prabi.fr/software/cap3) bilan kontig yig'ish uchun ishlatilgan. ESTlar kontig va singletonlarga guruhlangan; ular NCBI (http://blast.ncbi. nlm.nih.gov) da BLASTx dasturi yordamida homologiyani qidirish uchun ishlatilgan. Keyinchalik ketma-ketliklar izohlangan, tahlil qilingan va Blast2GO (http://www. blast2go.com) yordamida gen ontologiyasi (GO) atamalariga ko'ra tasniflangan.
Haqiqiy vaqtda miqdoriy polimeraza zanjiri reaktsiyasi (RT-qPCR) Bustin va boshqalarga ko'ra amalga oshirildi. (2009). cDNK namunalari umumiy RNKning 0,5 ug dan PrimeScript RT reaktiv to'plami (Takara, Dalian, Xitoy) yordamida sintez qilindi. RT-qPCR SYBR Premix Ex Taq II va ROX plus to'plamlari (Takara) yordamida ABI 7300 real vaqtda PCR tizimida (Applied Biosystems, Foster City, AQSH) uchta texnik takrorlash bilan amalga oshirildi. Primerlar Takara tomonidan taqdim etilgan ko'rsatmalarga muvofiq onlayn Primer3 dasturidan foydalangan holda ishlab chiqilgan; Ushbu tadqiqotda ishlatiladigan primerlar 1-jadvalda keltirilgan. Gen ifodalari 18S RNK ga normallashtirildi, uning ifodasi barcha namunalarda barqaror edi.

Natijalar R versiyasi 3.1.1 yordamida tahlil qilindi, farqlarning ahamiyati Student t-testi bilan tasdiqlandi.

Natijalar

Vodorod periks barcha uchta asosiy PeG ning biosintezini keltirib chiqardi(feniletanoidglikozidlar)ichidaCistanchesalsasuspenziya hujayralari (1-jadval), lekin hujayra o'sishiga aniq ta'sir ko'rsatmaydi (S2-rasm). Ekinakozid miqdori 1{6}} ug dm-3 H2O2 bilan ishlov berishdan keyin allaqachon ortdi (P < 0.05),="" yuqoriroq="" o'sish="" 20="" ug="" dm="" dan="" keyin="" qayd="" etildi.="" -3="" h2o2="" bilan="" ishlov="" berish="" (p="">< 0,01)="" va="" eng="" yuqori="" oʻsish="" 40,="" 80="" va="" 160="" ug="" dm-3="" h2o2="" bilan="" davolashdan="" keyin="" sodir="" boʻldi.="" shunga="" o'xshash="" natijalar="" akteozid="" uchun="" ham="" ko'rsatilgan,="" ammo="" uning="" tarkibi="" 80="" ug="" dm-3="" h2o2="" bilan="" ishlov="" berishdan="" keyin="" eng="" yuqori="" darajaga="" yetdi.="" 2'-asetilakteozidning="" biosintezi="" h2o2="" bilan="" davolashga="" nisbatan="" kam="" sezgir="" edi;="" uning="" tarkibidagi="" sezilarli="" o'sish="" (p="">< 0,05)="" 40="" ug="" dm="" dan="" ortiq="" h2o2="" konsentratsiyasida="" edi-3.="" 80="" ug="" dm-3="" h2o2="" bilan="" ishlov="" berishdan="" so'ng,="" barcha="" uchta="" asosiy="" peg="">(feniletanoidglikozidlar)nazorat ustidan sezilarli darajada oshdi (P < 0.01).="" shuning="" uchun="" bu="" konsentratsiya="" keyingi="" tajribalarda="">
H2O2 tomonidan yuqori tartibga solinadigan erta sezgir genlar uchun boyitilgan kutubxona yaratish uchun biz cDNK dan foydalandik.Cistanchesalsasuspenziya hujayralari 2 soat davomida 80 ug dm-3 H2O2 bilan ishlov beriladi. SSH kutubxonasidagi 129 ta rekombinant klonlarning bir martali ketma-ketligi vektor ketma-ketligini istisno qilgandan keyin 105 ta toza ESTni berdi. Ushbu aniq ESTlar CAP3 tomonidan yig'ish uchun ishlatilgan va 18 ta kontig va 67 ta singleton yaratilgan (2-jadval). Shunday qilib, ushbu kutubxonada 85 ta gen ajratilgan. Toza 105 ESTning o'rtacha uzunligi 527 bp edi, bu ketma-ketlik o'xshashligiga asoslangan funktsional tasniflash uchun etarli.

feniletanoidglikozidlarichidaCistancheSalsa

Kutubxonada olingan barcha 85 genlar ketma-ketlik o'xshashligi uchun BLASTx tomonidan GenBank ortiqcha bo'lmagan oqsil ma'lumotlar bazasiga qarshi olingan (E-qiymat 0.001 dan kichik yoki teng). Yigirma bitta gen ma'lumotlar bazasida xitlarni ko'rsatmadi, ular o'ziga xos bo'lishi mumkinCistanchesalsa. BLASThits bilan olingan natijalar GO va KEGG yo'llarini boyitish bo'yicha keyingi tahlillar uchun Blast2GO dasturiga import qilindi. BLAST xitlari bo'lgan 64 ta gendan 50 tasi boshqa turlardan homolog genlarning tavsifiga ko'ra izohlangan. Izohlangan genlar BLAST xitlarining tavsifiga ko'ra nomlandi. GO tahlili (3-rasm Suppl.) shuni ko'rsatadiki, ushbu 50 ta gen orasida stimulga javob beradigan 14 ta gen va metabolik jarayonlar bilan bog'liq 30 dan ortiq gen mavjud (1 va 2-jadvallar). Ushbu genlar orasida ikkita PeG biosintez yo'li gen homologlari kutilganidek ajratildi: 4-kumarat koenzim A ligaza (Cs4CL1: Contig03 nomi bilan atalgan) va sinnamat 4-gidroksilaza (CsC4H1: Contig14 nomi). Bundan tashqari, H2O2 bilan davolashdan so'ng kutubxonadan genlarning induktsiyalangan ifodalarini tasdiqlash uchun RT-qPCR amalga oshirildi.

SSH kutubxonasidan aniqlangan muhim genlar H2O2 davolashga javob berishini tasdiqlash uchun ikkita PeG ifodasi.(feniletanoidglikozidlar)Biosintez yo'li bilan bog'liq genlar (Cs4CL1, CsC4H1), ikkita ROS induktsiyalangan genlar (CsSOD1: Contig 16, CsHSP1: CISTH099) va bitta WRKY oilasi transkripsiya omiliga o'xshash gen (CsWRKY1: Contig 07) RTq bilan davolashdan keyin o'lchandi. H2O2 bilan (1-rasm). CsC4H1, Cs4CL1, CsSOD1 va CsWRKY1 ifodalari H2O2 dan 2 soat oʻtgach mos ravishda 15-katta, 3-katlama, 45-katlama va 4-katlamadan koʻproq yuqori tartibga solingan. davolash. CsHSP1 ifodasi H2O2 bilan davolashdan keyin atigi 1,8 marta o'zgartirildi.
H2O2 davolashdan keyin CsWRKY1, CsC4H1 va Cs4CL1 ifodalarining vaqt kursi RT-qPCR tomonidan qo'shimcha tahlil qilindi (2-rasm). CsC4H1 va Cs4CL1 ifodalari 16-soatlik ishlov berishdan so‘ng ancha ortdi (mos ravishda 80-katta va 50-kattadan ko‘proq), so‘ngra 32 soatdan keyin pastga tartibga solindi. CsWRKY1 ifodasi 4 soatda 20- martadan ko'proq tartibga solingan va keyin 8 soatdan keyin kamaydi (2-rasm).

2-rasm. 8{12}} ug dm-3 H2O2 bilan ishlov berilgandan keyin turli vaqtlarda CsWRKY1 (A), CsC4H1 (B) va Cs4CL1 (C) ning nisbiy ifodasi. Ifodalar nazoratga normallashtirildi; (suv bilan ishlov beriladi). Plyus vositalari - uchta biologik takrorlanishning SD; * - P < 0.05,="" **="" -="" p=""><>

Munozara

Vodorod periks - o'simliklarga turli xil ta'sir ko'rsatadigan taniqli o'simlik elimitori. ROS singari, u superoksid dismutaza, katalaza, peroksidaza va boshqalardan tashkil topgan ROS tozalash tizimini qo'zg'atishi mumkin va u tuz, osmotik va suvsizlanishning quyi oqimi signali bo'lib xizmat qiladi.

stresslar (Wi va boshq. 2006, Kar 2011, Furlan va boshq. 2013, Sathiyaraj va boshq. 2014). O'simliklarda H2O2 hosil bo'lishi organizmda induktsiyalangan ikkilamchi metabolit biosintezi bilan birga keladi, deb taxmin qilingan.Cistanchesalsahujayra madaniyati. Kutilganidek, bizning natijalarimiz PeGs ekanligini ko'rsatadi(feniletanoidglikozidlar)dagi biosintezCistanche salsaH2O2 bilan davolashdan so'ng hujayra madaniyati paydo bo'ldi (1-jadval). Uchta asosiy PG tarkibi(feniletanoidglikozidlar)H2O2 bilan davolashdan keyin ortdi, bu uning PeGs biosintezidagi asosiy rolini ko'rsatadi. SSH kutubxonasida boyitilgan genlar uning PeGlarga ta'sirini ko'rsatdi(feniletanoidglikozidlar)biosintez induksiyasiCistanche salsa.

Askorbat peroksidaza (CISTH069, Karyotou va Donaldson 2005), h-xinon oksidoreduktaza (CISTH125, Bello, va boshq. 2001), CsSOD1, CsHSP1 (Baruah va boshq.), 201 kabi ko'plab ma'lum H2O{1}}reaktiv genlar. va kasalliklarga chidamlilik javob genlari (Contig10, Nanda, va boshq. 2010) SSH kutubxonasida boyitilgan (3-jadval, 2-jadval Suppl.). H2O2 bilan davolashdan so'ng induksiyalangan ekspressiyaga ega bu tipik ROS javob beruvchi genlarning ba'zilari RT-qPCR tomonidan qo'shimcha tasdiqlandi (1 va 2-rasmlar) bu erda malakali SSH kutubxonasi qurilganligini ko'rsatadi. Ushbu kutubxonada ikkita PeG biosintez yo'li genlari, CsC4H1 va Cs4CL1 ham topilgan va bu ikki gen ifodasi vaqtga bog'liq holda H2O2 bilan ishlov berish orqali qo'zg'atilgan (2-rasm). Bu H2O2 bilan davolash PeGlarni keltirib chiqarganligini ko'rsatadi(feniletanoidglikozidlar)PAL yo'l genlarini tartibga solish orqali genetik darajadagi biosintez. Biroq, PAL va boshqa quyi oqimdagi PeGs biosintezi genlari (Wang va boshq. 2012) SSH kutubxonasida aniqlanmagan; Buning sababi kutubxonaning etarli darajada ketma-ketligi bo'lishi mumkin. CsC4H1 va Cs4CL1 induktsiyalari va H2O2 bilan davolashdan keyin ortib borayotgan PeGs biosintezi o'rtasidagi bog'liqlik keyingi tahlil orqali aniqlanishi kerak.

H2O2 bilan davolash natijasida paydo bo'lgan PAL yo'li genlariga qo'shimcha ravishda, SSH kutubxonasida ikkita WRKY oilasi transkripsiya omillari (CsWRKY1, CsWRKY2) topilgan (3-jadval va 2-jadval.) va CsWRKY1 tomonidan induktsiya qilingan ifoda RT-qPCR tomonidan tasdiqlangan. . Uning ifodasi ikkita PAL yo'li genlari, Cs4CL1 va CsC4H1 ifodasidan oldin H2O2 davolashga javob berdi (2-rasm). Oldingi tadqiqotlardan ba'zi WRKY transkripsiya omillari va PAL yo'l genlarining birgalikda ifodalanishi guruchda kuzatilgan (Gupta va boshq. 2012). Bundan tashqari, OsWRKY03 haddan tashqari ekspression mutantida PAL genining ifodasi yuqori tartibga solinadi (Liu va boshq. 2005). Yuqorida aytib o'tilgan ikkita WRKY oilaviy transkripsiya omillari ham PeGlarda ishtirok etishi mumkin(feniletanoidglikozidlar)dagi biosintezCistanchesalsa. Qizig'i shundaki, SSH kutubxonasida suvsizlanish bilan bog'liq ESTlar (CISTH067, CISTH064) topilgan, bu H2O2 bilan davolash suvsizlanishga javob beradigan genlarni ifodalash bilan bog'liqligini ko'rsatishi mumkin.Cistanchesalsaboshqa o'simliklarda kuzatilganidek (Schmidt va boshq. 2013, Zhou va boshq. 2013). SSH kutubxonasida gibberellin (GA) signalizatsiyasi bilan bog'liq bo'lgan bitta gen, gibberellin retseptorlari gid1b-ga o'xshash (CISTH092) aniqlandi, bu SSH kutubxonasida GA signalizatsiyasi va H2O2 bilan davolashning ulanishini nazarda tutadi.Cistanchesalsa, bu arpada ham qayd etilgan (Bahin va boshq. 2011). Biroq, bu genlarning PeGs bilan bog'liqligini tasdiqlash uchun ko'proq tadqiqotlar talab qilinadi(feniletanoidglikozidlar)biosintez. Yuqorida aytib o'tilgan genlardan tashqari, bu erda qurilgan SSH kutubxonasi BLAST xitlari bo'lgan yoki bo'lmagan genlarni ham taqdim etadi. Bu H2O2 ning C. salsaga ta'siri haqidagi tushunchamizni yaxshilaydi va birinchi navbatda uning PeG biosintezida ishtirok etadigan genlari haqida ma'lumot beradi.

Xulosa qilib, biz H2O2 ning PeGlarga ta'sirini baholadik(feniletanoidglikozidlar)ichida induksiyaCistanchesalsahujayra madaniyati. SSH kutubxonasi H2O2 davolashdan so'ng qurilgan va tanlangan genlarning ifodasi RT-qPCR tomonidan tasdiqlangan. PeG biosintezi yo'li bilan bog'liq ikkita gen va boshqa H2O{5}}reaktiv genlar aniqlandi. Ushbu topilmalar bizning H2O2-induktsiyali PEG haqidagi tushunchamizni kengaytiradi(feniletanoidglikozidlar)dagi biosintezCistanchesalsamolekulyar darajaga ko'tarilib, genlarni manipulyatsiya qilish uchun ma'lumot beradiCistanchesalsaPeGlarni yaxshilash uchun hujayra madaniyati(feniletanoidglikozidlar)ishlab chiqarish.

Kimdan: "Cistanche salsa hujayra madaniyatida feniletanoid glikozid biosintezida ishtirok etadigan vodorod peroksidga javob beruvchi ESTlarni aniqlash"J. CHEN va boshqalar.

--- BIOLOGIA PLANTARUM 59 (4): 695-700, 2015 J. CHEN va boshqalar. DOI: 10.1007/s10535-015-0541-y

Ma'lumotnomalar

Bahin, E., Bailly, C., Sotta, B., Kranner, I., Corbineau, F., Leymarie, J.: Reaktiv kislorod turlari va gormonal signalizatsiya yo'llari o'rtasidagi o'zaro bog'lanish arpadagi donning uyqu holatini tartibga soladi. - O'simlik hujayralari muhiti. 34: 980-993, 2011 yil.
Baruah, K., Norouzitallab, P., Linayati, L., Sorgeloos, P., Bossie, r P.: Issiqlik zarbasi oqsili (Hsp) qo'zg'atuvchi mahsulot tomonidan hosil bo'lgan reaktiv kislorod turlari Hsp70 va Hsp ishlab chiqarishga hissa qo'shadi{{1} Artemia franciscana da patogen vibrionlarga qarshi vositachi himoya immuniteti. - Dev. Comp. Immunol. 46: 470-479, 2014 yil.
Bello, RI, Gomez-Diaz, C., Navarro, F., Alcain, FJ, Villalba, JM: NAD (P) H ifodasi: HeLa hujayralarida xinon oksidoreduktaza 1  vodorod peroksid va o'sish fazasining roli. - J. biol. Kimyo. 276: 44379-44384, 2001 yil.
Bustin, SA, Vandesompele, J., Pfaffl, MW: qPCR va RT-qPCR standartlashtirish. - Genet. Eng. Biotexnologiya. Yangiliklar 29: 40-43, 2009 yil.
Cheng, XY, Vey, T., Guo, B., N, I V., Liu, CZ:Cistanchedeserticola hujayra suspenziyasi madaniyati:feniletanoidglikozidlarbiosintez va antioksidant faollik. - Biokimyoviy jarayon. 40: 3119-3124, 2005 yil.
Cheng, XY, Chjou, HY, Cui, X., Ni, V., Liu, CZ takomillashtirishfeniletanoidglikozidlardagi biosintezCistanchedeserticola xujayralari suspenziyasi madaniyati xitozan elimitatori yordamida. - J. Biotexnologiya. 121: 253-260, 2006 yil.
Furlan, A., Llanes, A., Luna, V., Kastro, S.: Abscisic kislotasi suv ta'siridan kelib chiqqan yeryong'oqda vodorod peroksid ishlab chiqarishga vositachilik qiladi. - Biol. O'simlik. 57: 555-558, 2013 yil.
Gupta, SK, Ra, i AK, Kanvar, SS, Chand, D., Singh, NK, Sharma, TR: Yagona funktsional portlash qarshilik geni Pi54 guruchda murakkab mudofaa mexanizmini faollashtiradi. - J. exp. Bot. 63: 757-772, 2012 yil.
Xu, GS, Jia, JM, Xur, YJ, Chung, YS, Li, JH, Yun, DJ, Chung, WS, Yi, GH, Kim, TH, Kim, DH: Fenilalanin ammiak-liyaza genining molekulyar tavsifiCistanchedesertikola. - Mol. Biol. 38-vakil: 3741-3750, 2011 yil.
Kar, RK: O'simliklarning suv stressiga javoblari: reaktiv kislorod turlarining roli. - O'simlik signalining xatti-harakati 6: 1741-1745, 2011 yil.
Karyotou, K., Donaldson, RP: Askorbat peroksidaza, glyoksisomal membranalarda vodorod periksni tozalash vositasi. - Ark h. Biokimyo. Biofizika. 434: 248-257, 2005 yil.
Kobayashi, H., Karasawa, X., Miyase, T., Fukusima, S.: tarkibiy qismlar bo'yicha tadqiqotlar.cistancheo'simlik hisoblanadi. 4. 2 ta yangi fenilpropanoid glikozid, sistanozid-C va sistanozid-D ning izolyatsiyasi va tuzilishi. - Kimyo. Farm. Buqa. 32: 3880-3885, 1984 yil.

Liu, CZ, Cheng, XY: oshirishfeniletanoidglikozidlarhujayra madaniyatida biosintezCistanchedeserticola osmotik stress bilan. - O'simlik hujayrasi vakili 27: 357-362, 2008 yil.
Liu, JY, Guo, ZG, Zeng, ZL: ning to'planishi yaxshilandifeniletanoidglikozidlarning suspenziya madaniyatiga kashshof oziqlantirish orqaliCistanchesalsa. - Biokimyo. Eng. J. 33: 88-93, 2007 yil.
Liu, XQ, Bai, XQ, Qian, Q., Vang, XJ, Chen, MS, Chu, CC: OsWRKY03, OsNPR1 ning yuqori oqimidagi mudofaa signalizatsiya yo'lida ishlaydigan guruch transkripsiya faollashtiruvchisi. - Hujayra Res. 15: 593-603, 2005 yil.
Murashige, T., Skoog, F.: Tez o'sish va tamaki to'qimalari madaniyati bilan bioassaylar uchun qayta ko'rib chiqilgan vosita. - Fiziol. O'simlik. 15: 473-497, 1962 yil.
Nan, ZD, Zeng, KW, Shi, SP, Chjao, MB, Jiang, Y., Tu, PF:Feniletanoidglikozidlarning poyasidan yallig'lanishga qarshi faoliyat bilanCistanchedeserticola Tarim cho'lida o'stirilgan. - Fitoterapiya 89: 167-174, 2013.
Nanda, AK, Andrio, E., Marino, D., Pauly, N., Dunand, C.: o'simlik-mikroorganizmning erta o'zaro ta'sirida reaktiv kislorod turlari. - J. Integr. Biol o'simlik. 52: 195-204, 2010 yil.
Ouyang, J., Vang, XD, Zhao, B., Vang, YC: Kengaytirilgan ishlab chiqarishfeniletanoid glikozidlarhujayra madaniyatiga kashshof oziqlanish orqaliCistanchedesertikola. - Biokimyoviy jarayon. 40: 3480-3484, 2005a.
Ouyang, J., Vang, XD, Zhao, B., Vang, YC: ishlab chiqarishni yaxshilash.feniletanoidglikozidlartomonidanCistanchedeserticola xujayralari elak ko'targichli ichki halqali havo ko'taruvchi bioreaktorda yetishtiriladi. - Mikrobiol fermenti. Tech. 36: 982-988, 2005b.
Salcedo-Morales, G., Ximenez-Aparicio, AR, Cruz-Sosa, F., Trejo-Tapia, G.: Castilleja tenuiflora ildizlaridan in vitro haustoriumning anatomik va gistokimyoviy tavsifi. - Biol. O'simlik. 58: 164-168, 2014 yil.
Sathiyaraj, G., Srinivasan, S., Kim, YJ, Li, OR, Parvin, S., Balusamy, SR, Khorolragchaa, A., Yang, DC: Vodorod periksning moslashishi mudofaa bilan bog'liq oqsillarni faollashtirish orqali tuzga chidamlilikni oshiradi. Panax ginseng CA Meyer. - Mol. Biol. 41 vakil: 3761-3771, 2014 yil.
Shmidt, R., Mieulet, D., Hubberten, HM, Obata, T., Hoefgen, R., Fernie, AR, Fisahn, J., Segundo, BS, Guiderdoni, E., Schippers, JHM, Myuller-Roeber, B .: SALTRESPONSIVE ERF1 tuz stressiga dastlabki javob paytida reaktiv kislorod turlariga bog'liq signalizatsiyani tartibga soladi
guruchda. - 25-o'simlik hujayrasi: 2115-2131, 2013 yil.
Vang, T., Chjan, XY, Xie, WY:Cistanchedeserticola YC Ma, "Cho'l Ginseng": sharh. - Amer. J. chin. Med. 40: 1123-1141, 2012 yil.
Wi, SG, Chung, BY, Kim, JH, Li, KS, Kim, JS Tuzli stress ostida guruchning barg qobig'ida vodorod peroksidning cho'kishi. - Biol. O'simlik. 50: 469-472, 2006 yil.
Chjou, XF, Jin, YH, Yoo, CY, Lin, XL, Kim, WY, Yun, DJ, Bressan, RA, Xasegava, PM, Jin, JB: CYCLIN H1 qurg'oqchilik stressini va ko'k nur ta'sirida stomaning ochilishini tartibga soladi. Arabidopsisda reaktiv kislorod turlarining to'planishini inhibe qilish. - o'simlik fizioli. 162: 1030-1041, 2013 yil.