Mahanimbine kengaytirilgan xolinergik uzatish va bostirilgan oksidlovchi stress, amiloid darajalari va neyroyallig'lanish orqali sichqonlarda qarish bilan bog'liq xotira etishmovchiligini yaxshilaydi.

Xulosa: Murraya koenigii barglari tarkibida mahanimbin, karbazol alkaloidi mavjud bo'lib, u xolinergik neyronlarning uzatilishini yaxshilaydi va markaziy asab tizimidagi neyroyallig'lanishni kamaytiradi.

Karbazol alkaloidlari va xotira o'rtasidagi munosabatlar tadqiqotchilar va oddiy odamlarning e'tiborini tortdi. Karbazol alkaloidlari tabiatda uchraydigan alkaloid birikmalar bo'lib, ular turli o'simlik turlarida uchraydi. Ular nafaqat o'simliklarning o'sishi va rivojlanishiga yordam beradi, balki inson salomatligi uchun ham foydalidir. Xususan, karbazol alkaloidlari miya salomatligini mustahkamlash va xotirani yaxshilashga o'chmas hissa qo'shgan.

Karbazol alkaloidlari juda muhim neyrotransmitterdir. Neyrotransmitterlar miya hujayralari o'rtasida ma'lumot uzatuvchi kimyoviy moddalarga ishora qiladi. Karbazol alkaloidlarining asosiy vazifasi neyronlar orasidagi normal aloqani targ'ib qilish, shu bilan uyqu, xotira va o'rganish kabi turli intellektual faoliyatni tartibga solishdir. Bu miyadagi neyrotransmitterlarning ishlashiga yordam beradi, miyani yanada uyg'oq va chaqqon qiladi va odamlarni eslab qolish va o'rganishni osonlashtiradi.

Ko'pgina tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, karbazol alkaloidlari xotira va o'rganish qobiliyatini oshirishi mumkin. Tajribada ma’lum bo‘lishicha, sichqonlarga karbazol alkaloidlari qo‘shilgandan so‘ng ularning yangi muhit va yangi ob’yektlarga nisbatan kognitiv qobiliyati sezilarli darajada yaxshilangan, hayvonlarning koinotda joylashish qobiliyati ham oshgan. Xuddi shunday, odamlarda o'tkazilgan ko'plab tajribalar ham shunga o'xshash xulosalarga keldi. Tegishli miqdorda karbazol alkaloidlari bilan to'ldirish odamlarning narsalarni xotirasini sezilarli darajada yaxshilaydi, shuningdek, aqlni yaxshilash, murakkab vazifalarni hal qilish va miya sog'lig'ini himoya qilishda sezilarli ta'sir ko'rsatadi.

Umuman olganda, karbazol alkaloidlari xotira bilan chambarchas bog'liq. Karbazol alkaloidlari bilan to'ldirilganda, odamlar nafaqat xotira va o'rganish qobiliyatini yaxshilaydi, balki miya sog'lig'ini ham yaxshilaydi. Bundan tashqari, karbazol alkaloidlari organizmga salbiy ta'sir ko'rsatmaydigan tabiiy moddadir, shuning uchun ular ishonch bilan to'ldirilishi mumkin. Ko'rinib turibdiki, biz xotirani yaxshilashimiz kerak va Cistanche xotirani sezilarli darajada yaxshilashi mumkin, chunki Cistanche antioksidant, yallig'lanishga qarshi va qarishga qarshi ta'sirga ega, bu miyadagi oksidlanish va yallig'lanish reaktsiyalarini kamaytirishga yordam beradi va shu bilan inson salomatligini himoya qiladi. asab tizimi. Bundan tashqari, Cistanche nerv hujayralarining o'sishi va tiklanishiga yordam beradi va shu bilan neyron tarmoqlarning ulanishi va funktsiyasini oshiradi. Ushbu effektlar xotirani, o'rganish qobiliyatini va fikrlash tezligini yaxshilashga yordam beradi, shuningdek, kognitiv disfunktsiya va neyrodegenerativ kasalliklarning paydo bo'lishining oldini oladi.

Qisqa muddatli xotirani qanday yaxshilashni bilish tugmasini bosing

Hozirgi tadqiqot mahanimbinning yoshga bog'liq xotira etishmovchiligi, oksidlovchi stress, xolinergik disfunktsiya, amiloid shakllanishi va neyroinflamasyonga ta'sirini o'rganib chiqdi (16 oylik). Mahanimbin har kuni guruhlarga (1 va 2 mg / kg, po) yuborildi. 30 kun davomida qarigan sichqonlar.

Morris suv labirintasi (MWM) vazifasi fazoviy o'rganish (qochish kechikishi (EL) va suzish masofasi (SD)) va xotirani (zond testi) o'rganish uchun bajarildi. Malondialdegid (MDA), glutation (GSH), atsetilxolin (ACh), atsetilxolinesteraza (AChE), -amiloid (A 1-40 va A 1-42), -sekretaz (BACE-1 darajalari ), shuningdek, neyro-yallig'lanish belgilari (umumiy siklooksigenaza (COX) va COX{5}}ekspressiyasi) izolyatsiya qilingan miyadan o'lchandi.

Mahanimbin MWM testida EL vaqtini va SDni qisqartirdi. Tekshiruv sinovidan mahanimbin bilan davolangan guruh yoshga moslashtirilgan nazorat bilan bog'liq bo'lgan maqsadli kvadrantda ko'proq vaqt o'tkazdi, bu xotirani saqlashning yaxshilanganligini ko'rsatdi. Biokimyoviy testlardan davolash MDA, AChE, A 1-40 kamaydi. , 1-42, BACE-1, umumiy COX faolligi va COX-2 ifodasi.

Bundan tashqari, keksa sichqonlarda miya GSH va ACh darajasini yoshga mos keladigan nazorat bilan solishtirganda ko'tardi. Ushbu natijalar keksa sichqonlarda mahanimbin tomonidan xotira disfunktsiyalarini bekor qilishni qo'llab-quvvatladi va bu yoshga bog'liq neyrodegenerativ kasalliklarni davolash uchun potentsial maqsad bo'lishi mumkinligi haqida faraz qildi.

Kalit so'zlar: mahanimbin; qarish; xotira; atsetilxolin; neyro-yallig'lanish; - amiloid; antioksidantlar.

1. Kirish

Birlashgan Millatlar Tashkilotining 2015 yildagi hisobotiga ko'ra, 60 yoshdan oshgan dunyo aholisi soni 1980 yildagi 8,5 foizdan 2015 yilda 12,3 foizga o'sdi, 2050 yilda bu ko'rsatkich 21,5 foizni tashkil etadi [1].

Qarish hayotning normal tarkibiy qismi bo'lib, vaqt o'tishi bilan organizmning fiziologik funktsiyasi asta-sekin yomonlashishini anglatadi [1]. Qarish bilan bog'liq xotira buzilishi qarigan miyaning umumiy xususiyati bo'lib, u o'rganish va xotiraning pasayishi, sinaptik plastisiya va kattalardagi neyrogenez bilan bog'liq [2]. Reaktiv kislorod turlari (ROS) tomonidan oksidlovchi stress qarish jarayonining zaif sababi sifatida xabar qilingan.

Dastlabki tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, kognitiv pasayish sichqonlarning miya to'qimalarida ROSning haddan tashqari rivojlanishi bilan bog'liq [3]. Shu bilan birga, malondialdegid (MDA), ko'p to'yinmagan yog'li kislotalarning peroksidlanishi natijasida hosil bo'lgan yakuniy mahsulot oksidlovchi stress uchun odatiy belgi sifatida mo'ljallangan. Miya bu holatga juda sezgir bo'lganligi sababli, u kognitiv buzilishlarga yordam berdi.

Shuning uchun antioksidant tizimlar oksidlovchi stress sharoitlariga qarshi himoya tizimida rol o'ynaydi [4,5]. Bundan tashqari, xolinergik tizimdagi nuqsonlar sinaptik uzatishga ta'sir qilishi mumkin va eski sichqonlarda sinapslarning yo'qolishi bilan tavsiflanadi.

Asetilkolin (ACh) muhim neyrotransmitter bo'lib, xolinergik neyronlarda uzatish vositasi bo'lib, turli kognitiv funktsiyalarni muvofiqlashtiradi. Natijada, miyaning ma'lum joylarida hujayradan tashqari neyrotransmitterlar darajasidagi o'zgarishlarni kuzatish ma'lum xotira jarayonlari bilan shug'ullanadigan neyronal tizimlarni aniqlashning foydali usuli hisoblanadi [6].

Bundan tashqari, Altsgeymer kasalligida (AD) qarish jarayoni kasallikning patogen xususiyatlaridan biri bo'lgan amiloid plitalarining rivojlanishi bilan bog'liq. Miya A peptid darajasining to'planishi kognitiv disfunktsiyaga, shu jumladan xotira buzilishiga olib keldi [7].

Peptid proteolitik parchalanishning amiloidogen yo'li orqali -sekretaz (BACE-1) va undan keyin -sekretaz fermentlari orqali arbitraj qilingan amiloid prekursor oqsili (APP) joyida hosil bo'ldi [8].

Bundan tashqari, yallig'lanish keksa yoshdagi asosiy degenerativ kasalliklar bilan chambarchas bog'liq bo'lgan yana bir omilga aylandi [9]. Neyroinflamatuar reaktsiyalar kontekstli va fazoviy xotiraga vositachilik qiluvchi miya mintaqasida eng aniq ko'rinadi, bu esa qariyalarda xotirani yo'qotishiga olib kelishi mumkin [10]. Araxidonatning sikloksigenaza (COX) tomonidan katalizlangan prostaglandinga aylanishi yallig'lanish jarayonini boshlash uchun muhim qadamdir.

COX-1 va COX-2 COX dan ikkita alohida izoformdir. Asosan, COX-2 izoformasi yalligʻlanish oʻchogʻida yalligʻlanishga qarshi sitokinlar [11] taʼsirida qoʻzgʻatiladi.Murraya koenigii Linn (M) .koenigii) (Family Rutaceae) ko'pincha karri barglari sifatida tanilgan. M. koenigii o'simligi ko'plab karbazol alkaloidlaridan iborat bo'lib, ular orasida mahanimbin, koenimbine, mahanine, bismurrayafoline, murrayanol, isomahanine, bismahanine, euchranimbine, bis12, ].

Bu birikmalar orasida mahanimbineis asosan M. koenigii barglaridan ajratilgan [13]. Bu diabetga chalingan hayvonlarda gipoglikemik ta'siri tufayli umumiy xolesterinni kamaytirishi va HDL darajasini oshirishi haqida xabar berilgan [14].

Bir guruh karbazol alkaloidlari ham antioksidant, yallig'lanishga qarshi, o'smaga qarshi va virusga qarshi ta'sir ko'rsatadi [15,16]. Buni qo'llab-quvvatlash uchun bizning natijalarimiz M. barglari mavjudligini tasdiqladi.

Koenig sichqonlar guruhlariga o'ttiz kun davomida doimiy ravishda qo'llanilsa, anti-amnezik potentsialga ega [17]. Bundan tashqari, M. koenigii barglarining umumiy alkaloid fraktsiyasi oksidlovchi stressni kamaytirdi va keksa sichqon miyasida xolinergik faollikni oshirdi [18].

Yaqinda bizning ma'lumotlarimiz shuni ko'rsatdiki, mahanimbinni og'iz orqali yuborish sichqonlarda lipopolisakkaridlar (LPS) tomonidan qo'zg'atilgan xotira buzilishini bekor qildi. Xuddi shu davolash xolinergik uzatishni yaxshilashga va neyro-yallig'lanishning susayishiga, shuningdek, LPS tomonidan qo'zg'atilgan sichqon miyasida amiloid darajalariga olib keldi [19].

Biroq, mahanimbinning qarish bilan bog'liq xotiraga ta'siri yaxshi hujjatlashtirilmagan. Shu sababli, hozirgi maqsadlar keksa sichqonlarda oksidlovchi stressni bostirish va -amiloid va neyroinflamatsiyaning cho'kishini kamaytirish orqali uning fazoviy o'rganish va xotirani kuchaytirish potentsialini baholashga qaratilgan.

2. Materiallar va usullar

2.1. Mahanimbinning ekstraktsiyasi va izolyatsiyasi

M. koenigii yangi barglari Malayziyaning Puncak Alam shahridagi mahalliy bozorda sotib olindi. Yigʻilgan barglar Malayziyadagi Oʻrmon tadqiqot instituti taksonomisti tomonidan tasdiqlandi va vaucher namunasi (PID 24101011) gerbariyga topshirildi.

M. koenigii barglaridan mahanimbinni izolyatsiya qilish usuli bizning oldingi hisobotlarimizdan keyin [19,20]. Izolyatsiya qilingan mahanimbin keyinchalik NMR, HPLC va massa spektrlaridan olingan spektral ma'lumotlar bilan tasdiqlangan.

2.2. Eksperimental hayvonlar

Bir guruh (n=6) yosh (4 oylik) va uchta guruh (n=6) yoshi (16 oylik) C57BL/6N erkak sichqonlar Laboratoriya hayvonlari va boshqaruvi (LAFAM) universitetidan olingan. Ushbu tadqiqotda Technology MARA (UiTM), Malayziyadan foydalanilgan.

Sichqonlar poliakril qafaslarda va atrof-muhit haroratida (21-25 ◦C) saqlanadi. Barcha hayvonlarga oddiy ovqatlanish (oltin tanga granulasi) va suvdan bepul foydalanish imkoniyati berildi. To'plamdan so'ng, tajribadan oldin bir kunlik iqlimlashtirish jarayoni amalga oshirildi.

Xulq-atvor eksperimentlari vaqti 08:00 va 18:00 soat oralig'ida belgilandi. Bundan tashqari, ushbu eksperiment jarayoni tadqiqotda axloqiy foydalanish bo'yicha tadqiqot qo'mitasi (tasdiqlash raqami: UiTM Care-372014), UiTM, Malayziya tomonidan qabul qilingan.

2.3. Mahanimbin ma'muriyati

Jami 18 yoshli sichqonlar uchta guruhga bo'lingan (n=6). Ular orasida keksa sichqonlarning ikkita tanlangan guruhi 30 kun davomida (1-kun 30-kun) mos ravishda 1 va 2 mg / kg mahanimbineat dozalarini kunlik og'iz orqali yubordi.

Mahanimbin dozalarini (1 yoki 2 mg/kg) tayyorlash uchun vosita sifatida {0}},5% w/v karboksimetilselüloza (CMC) ishlatilgan. Qolgan keksa sichqonlar va yosh sichqonlar guruhi (n=6) navbati bilan yosh va keksa nazoratchilar bo'lib xizmat qildi va yuqoridagi kabi vosita bilan (0,5% w/v CMC) qo'llanildi.

Xulq-atvor testi 24 kundan 30 kungacha o'tkazildi (1-rasm). Barcha hayvonlar zond sinovi tugaganidan keyin 30-kuni qurbon qilindi va miya namunasi keyingi biokimyoviy baholash uchun ajratildi.

Shakl 1. Dori-darmonlarni qabul qilish muddati, xatti-harakatlarni baholash va miya namunalarini izolyatsiya qilish. Yosh va keksa sichqonlar guruhlariga 30 kun davomida mahanimbin (1 yoki 2 mg / kg, po) yoki transport vositasi berildi.

MWM tahlili uchun o'quv mashg'ulotlari 24 dan 26 kungacha o'tkazildi. Mavzuning xotira tahlili 29 dan 30 kungacha baholandi. 30 kuni zond testidan so'ng barcha hayvonlar qurbon qilindi va keyingi biokimyoviy baholash uchun miya to'qimalari ajratildi.

2.4. Morris Water Maze (MWM) tomonidan xotiraning xulq-atvorini baholash

MWM protokoli MohdAzahan va boshqalar tomonidan belgilangan tartibni bajarish uchun amalga oshirildi. (2020) [19]. Yashirin platformali (diametri 4,5 sm × 14,5 sm balandlikda) qora dumaloq hovuz (diametri 100 sm × 35 sm balandlikda) ishlatilgan.

Butun hovuz to'rtta kvadrantga (SHM, SE, NW va SW) bo'lingan va platforma maqsadli kvadrantning (SW) o'rta nuqtasida joylashgan edi. Davolanish davomida MWMni baholash (24-30 kunlar) ketma-ket etti kun (3 kunlik mashg'ulot, 3 kunlik haqiqiy vazifa va 1 kunlik zond testi) davomida doimiy ravishda o'tkazildi.

O'quv mashg'uloti (24-26 kunlar) uchun hayvonlar maqsadli kvadrantda (SW) yashirin platformani topish uchun kuniga ikki marta turli kvadrantlardan ko'rinadigan platforma bilan uchta sinovdan o'tkazildi.

Platformani topishda 60 soniya ichida biron bir muvaffaqiyatsizlikka uchragan taqdirda, hayvon platformani topish uchun qo'lda boshqarildi. Haqiqiy tajribalar keyingi uch kun ichida (27-29 kunlar) o'tkazildi, har bir hayvon boshlang'ich nuqtadan (NE) suzdi.

Qochish kechikishi (EL), suzish tezligi va qochish masofasi kuzatuv tizimi (SMART-LD dasturi, Stafford Sent-La Puente, CA, AQSh) yordamida hujjatlashtirilgan.

30-kuni zond sinovi o'tkazildi va har bir sichqonchaga 60 soniya davomida platformasiz erkin suzishga ruxsat berildi. Har bir hayvonning maqsadli kvadrantda (SW) o'tkazgan vaqt nisbatini xotirani saqlash sifatida qayd etish uchun kuzatuv tizimi ishlatilgan.

2.5. Miya namunalari to'plami

30-kuni miya to'qimalari sichqonlardan ajratilgan. Biokimyoviy baholash uchun miyaning yarmi sovuq PBSda saqlangan; qolgan yarmi keyinchalik gen ekspressiyasini tahlil qilish uchun RNKda saqlangan.

Shisha WiseStir Gomogenizatori (INCO asboblari, Ambala, Hindiston) PBS da saqlanayotgan miyani gomogenlashtirish uchun ishlatilgan. Supernatant gomogenlashtirilgan miya 10 daqiqa davomida 4000 rpm va 4 ◦C da santrifüj qilingandan so'ng yig'ildi. Biokimyoviy tekshirish uchun supernatant -80 ◦C da saqlanadi.

For more information:195477648nn@gmail.com