Kuchaytirilgan alkil radikallarini yaratish va kuchli antitumor terapiyasi uchun nanozim gidrogel†

Alkil radikallari (Rc), sabab kislorod hosil bo'lishiga tayanmaydihujayra stressi, yilda qo'llanilganshishni davolash, lekin o'simta hujayralarida ko'p miqdorda glutation (GSH) alkil radikallari bilan reaksiyaga kirishadi va shu bilanularning antitumor ta'sirini kamaytirish. Ushbu tadqiqotda, takomillashtirilgan alkil radikal ishlab chiqarish tizimi javob beradiyaqin infraqizil nurishlab chiqilgan edi. Alkil radikali trigger 2,20 -azobis[2-(2-imidazolin-2-il) propan]-dihidroxlorid (AIPH) va ferment piriti (FeS2) AIPHni tayyorlash uchun agaroz gidrogelga o'ralgan.–FeS2–gidrogel (AFH) tizimi. FeS2 yaqin infraqizil yorug'lik energiyasini issiqlik energiyasiga aylantirish uchun fototermik vosita sifatida ishlatilishi mumkin, bu gidrogelning erishiga olib keladi. AIPH bir vaqtning o'zida alkil radikallarini ishlab chiqarish uchun induktsiya qilinadi. FeS2 dan ham foydalanish mumkinoksidlovchi stress kuchaytirgichihujayra ichidagi GSH tarkibini kamaytirish, shu bilan alkil radikallarining terapevtik ta'sirini kuchaytirish. Oxir-oqibat, yaqin infraqizil lazer nurlanishi va fototermik davolash ostida AFH tizimi tomonidan hosil bo'lgan kislorodga bog'liq bo'lmagan erkin radikallarsaraton hujayralarini o'ldiradisinergetika orqalioksidlanish/fototermik effekt. Bu erda ishlab chiqilgan AFH tizimi alkil radikallarining terapevtik ta'sirini kuchaytirish bo'yicha yangi tushunchalarni beradi.

SARAKAGA QARSHI CISTANCHE QANDAY MUMKIN BILISH UCHUN SHU YERGA BOSING

Kirish

So'nggi yillarda fotodinamik terapiya, dinamik bo'lmagan terapiya va elektrodinamik terapiya kabi erkin radikallarga asoslangan davolash usullari ko'krak bezi saratonini davolash uchun mashhur tanlovga aylandi.1-3 Tashqi stimullar (lazer, ultratovush, elektr maydonlari) ishlab chiqarishni rag'batlantiradi. kuchli oksidlanish shikastlanishi yoki hujayra metabolizmi disfunktsiyasini keltirib chiqaradigan hujayralar o'limiga olib keladigan reaktiv kislorod turlari (ROS). qattiq o'smalarni davolash.7-10 Alkil radikallari hujayralarni o'ldirish uchun kislorod hosil bo'lishiga bog'liq bo'lmagan erkin radikallarning yangi turi bo'lib, normoksik va gipoksik muhitda o'smalarni davolashda samarali ekanligi isbotlangan.11 Chiqarilgan alkil radikallar oksidlovchi stressni kuchaytirib, hujayra lipidlari va DNKning shikastlanishiga olib keladigan saraton hujayralarining apoptozini qo'zg'atishi mumkin. Odatda erkin radikal tashabbuskori sifatida 2,20 -azobis[2-(2-imidazolin-2-il)propan]-dihidroxlorid (AIPH) yuqori haroratlarda alkil radikallarini hosil qilishi mumkin. 12 Kislorod yo'qligida ham shunday qiladi. Hosil bo'lgan erkin radikallar hujayralar uchun zaharli bo'lib, hujayra elementlarini darhol oksidlaydi yoki kislorod bilan o'zaro ta'sirlanib, ikkilamchi zaharli moddalar hosil qiladi.13 Hatto gipoksik o'sma mikro muhitida ham AIPH hujayra ichidagi lipid gidroperoksidni ko'paytirish va o'simta hujayralari apoptozini yanada tetiklash uchun alkil radikallarini ishlab chiqarishi mumkin.14 Bularning barchasi Rc saraton kasalligini davolash uchun istiqbolli dori ekanligini ko'rsatadi.

Fototermal terapiyada yorug'lik yoki issiqlik tashqi stimulyator sifatida ishlatiladi.15-17 O'simta hujayralari to'planishining oldini olish uchun yaqin infraqizil (NIR) lazer nurlanishiga asoslangan fototermal terapiya (PTT) qo'llaniladi; u o'smalarni olib tashlash uchun mahalliy termal effektlarga tayanadi.18-20 Oltin nanokristallari va molibden disulfidi kabi bir qancha fototermal vositalar (PTA) infraqizil lazer nurlanishiga javoban alkil radikallarini chiqarish uchun AIPH bilan birgalikda qo'llaniladi.19,21-23 Biroq. , o'simta mikro muhiti (TME) odatda qattiq o'smalarda yuqori darajadagi glutation (GSH) ifodasiga ega, chunki GSH spontan reaktsiya yoki GSH S transferaza katalizlangan xenogenik reaktsiya orqali radioterapiyaga qarshilik ko'rsatishda muhim rol o'ynaydi.24,25 Bundan tashqari, kamaytiruvchi vosita sifatida GSH alkil radikallarini bevosita olib tashlashi mumkin.21,26 Bu alkil radikaliga asoslangan terapiya samaradorligini pasaytiradi. Pirit (FeS2) nano-fermenti yangi fototermal nanomaterial sifatida nafaqat NIR nuri ostida yaxshi fototermik ta'sirga ega, balki nano-ferment faolligiga ham ega.27 FeS2 nanazasi glutation oksidaza (GSH OXD) bilan o'xshash faollikni ko'rsatdi, oksidlovchi GSH oksidlangan glutationga (GSSG).28 TMEda GSHning kamayishi hujayralardagi REDOX muvozanatini buzishi va oksidlovchi stressni keltirib chiqarishi aniqlandi.29 Shuning uchun FeS2 AIPH bilan yaxshi sinergetik ta'sirga erishishi kutilmoqda.

Minimal invaziv fotoreektsiyali gidrogellar yaqinda nazorat ostida dori chiqarish platformasi sifatida mashhur bo'ldi.30–32 Gidrogellar o'simta to'qimalariga kiritilganda koagulyatsiyalanadi va uzoq muddatli ombor vazifasini bajaradi.33 Ushbu topikal qo'llash shakli bir marta takrorlanishi mumkin. in'ektsiya. Bundan tashqari, lazer quvvati va nurlanish vaqti kabi parametrlar dori chiqarish tezligini o'zgartirish uchun o'zgartirilishi mumkin, bu esa ushbu davolash usulining qo'llanilishini kengaytiradi.34,35 Ushbu afzalliklarni hisobga olgan holda, FeS2 etkazib berish uchun gidrogellardan foydalanish faraz qilindi. va TMEga AIPH erkin radikallarga asoslangan terapiya samaradorligini oshiradi.

Ushbu tadqiqotda FeS2 fermenti va erkin radikal qo'zg'atuvchisi AIPHni o'z ichiga olgan in'ektsion gidrogelni intratumoral yuborish usuli ishlab chiqilgan. Birinchidan, agaroz gidrogelga FeS2 nanozarrachalari va AIPH yuklash orqali AIPH-FeS2-gidrogelning (AFH) gibrid tizimi tayyorlandi. Gidrojel xona haroratida qattiq bo'lib, FeS2 va AIPH uning matritsasi ichida o'ralgan. Yaqin infraqizil (NIR) yorug'lik bilan nurlantirilgandan so'ng, FeS2 NIR yorug'lik energiyasini issiqlik energiyasiga aylantiradi, bu esa AFH tizimining isishiga olib keladi va keyin gidrogel erib FeS2 va AIPH ni chiqaradi. Yuqori haroratlarda AIPH parchalanib, alkil radikallarini hosil qiladi. Keyinchalik, GSH-OXD faolligini taqlid qiluvchi FeS2 fermenti hujayra ichidagi GSH tarkibini kamaytiradi. GSHni yo'q qilish alkil radikallarining o'ldirish ta'sirini kuchaytiradi. AFH o'simta joyida uzoq vaqt yashashi mumkinligi sababli, AFH tizimi lazer intensivligi va nurlanish vaqtini o'zgartirib, alkil radikallarining chiqarilishini aniq nazorat qilish imkonini beradi. Nihoyat, NIR nurlanishi va fo-totermik davolash ostida AFH tizimi tomonidan hosil bo'lgan kislorodga bog'liq bo'lmagan erkin radikallar sinergik oksidlanish / fototermik ta'sir orqali saraton hujayralarini sinergik tarzda o'ldirishi mumkin va davolash siklida o'simta o'sishi yaxshi yashaydi. Muxtasar qilib aytganda, bu erda ishlab chiqilgan AFH tizimi redoks gomeostazini o'zgartirish orqali AIPH ning terapevtik ta'sirini yanada kuchaytiradi (1-sxema).

Natijalar va muhokama

FeS2 va AIPH ni o'z ichiga olgan kompozit gidrogelni tayyorlash uchun past erish nuqtasi bo'lgan agaroz gidrogel ishlatilgan. FeS2 suvli agaroza eritmasi bilan 60 C haroratda aralashtirildi va keyin AIPH alkil radikal triggeri bilan yuklandi, so'ngra xona haroratiga tez sovutildi. Shunday qilib, AFH gidrogel matritsasi hosil bo'ldi. FeS2 morfologiyasini tavsiflash uchun transmissiya elektron mikroskopidan foydalanilgan (1A-rasm). FeS2 nanozimi o'rtacha zarracha hajmi taxminan 148 nm bo'lgan sharsimon morfologiyani ko'rsatdi (S1†-rasm). FeS2 ning ultrabinafsha nurlanishini yutish spektrlari (1B-rasm) FeS2 NIR diapazonida 808 nm da kuchli so‘rilganligini ko‘rsatdi. Bu xususiyat FeS2 ni yaxshi PTA qiladi. FeS2 fermentining turli konsentrasiyalarda (0, 25, 50 va 100 mg mL 1) fototermik ishlashi eritmani 0,5 Vt sm 2 808 nm lazer tizimi bilan nurlantirish orqali o'rganildi (1C-rasm). Eritmaning isitish effekti FeS2 kontsentratsiyasiga to'g'ridan-to'g'ri proportsional edi. 100 mg ml 1 FeS2 eritmasining harorati atigi 5 daqiqa lazer nurlanishida taxminan 17,5 C ga ko'tarilib, FeS2 ning yaxshi fototermik ishlashini ko'rsatdi. Elektron mikroskopni skanerlash, shuningdek, AFH gidrojelining g'ovak tuzilishi va gözenek hajmi taqsimotining murakkab tarmog'iga ega ekanligini ko'rsatdi (1D-rasm), bu gidrogelni etkazib berish uchun dori yuklash uchun mos qiladi. Fototermik barqarorlik ham PTA sifatini baholashning muhim mezoni hisoblanadi.36 200 mg ml 1 FeS2 eritmasi 808 nm NIR lazer bilan 5 daqiqa davomida isitiladi, so‘ngra lazer o‘chiriladi va FeS2 eritmasi sovishiga ruxsat berildi. tabiiy ravishda xona haroratiga. FeS2 ning fototermik barqarorligini baholash uchun bu jarayon bir necha marta takrorlandi (1E-rasm). Har bir fototermik tsiklning isitish egri chizig'ida aniq o'zgarish bo'lmadi va FeS2 ning fototermik barqarorligini tasdiqlovchi 5 minut nurlanishdan keyin erishilgan eng yuqori haroratda ozgina farq kuzatildi. Reologik tahlil shuningdek, xona haroratida qattiq holatda tayyorlangan gidrogelning yuqori saqlash modulini aniqladi (1F-rasm). Harorat ko'tarilgach, gidrogel asta-sekin eriydi va eriydi va saqlash moduli asta-sekin kamaydi. Keyinchalik, FeS2 gidrogelida fototermik erish tajribasi o'tkazildi. Qattiqlashtirilgan AFH (gidrojel tarkibidagi FeS2) deionizatsiyalangan suv solingan shisha idishga solingan. Xona haroratida tayyorlangan AFH gidrogel o'zining qattiq shaklini saqlab qoldi, lekin 808 nm lazer bilan 10 daqiqa nurlanishdan so'ng gidrogel deyarli butunlay eriydi va FeS2 nanomateriali ajralib chiqdi va shisha idishdagi suvda eritildi (1-rasm). 1G). Termal infraqizil tasvirlagich ham nurlanish paytida AFH haroratining sezilarli darajada oshishini tasdiqladi (1H-rasm). X-nurli fotoelektron spektroskopiyasi (XPS) FeS2 spektrining gidrogel bilan reaksiyaga kirishishi FeS2 ning Fe va S elementlarini o'z ichiga olganligini ko'rsatdi (S2†-rasm). S3-rasmda ko'rsatilganidek,† GSH tarkibi FeS2 va GSHning birgalikda inkubatsiyasidan keyin sezilarli darajada kamaydi, u vaqt va konsentratsiya bilan ijobiy korrelyatsiya egri chizig'iga ega. Bundan tashqari, FeS2 ning PODga o'xshash faolligi o'lchamga bog'liq edi. 150 nm o'lchamdagi nanozimlar 280 va 687 nm o'lchamdagilarga qaraganda yuqori faollik ko'rsatdi (S4†-rasm).

AFH ning yuqori samaradorlik xususiyatlariga asoslanib, uning antitumor ta'siri baholandi. Dastlab flüoresin diasetat/propidiy yodid jonli/o‘lik hujayralarni bo‘yash to‘plami NIR nurlanishi bilan birgalikda tayyorlangan AFH gidrogelining o‘ldirish ta’sirini o‘rganish uchun ishlatilgan. PBS plus NIR guruhi va faqat AFH guruhi kuchli yashil flüoresansni ko'rsatdi, AIPH esa deyarli hech qanday o'ldirish effektini ko'rsatmadi (2A-rasm). Nisbiy tajriba natijalarini tekshirish uchun faqat FeS2 (FH) o'z ichiga olgan gidrogel tayyorladik. NIR bilan birgalikda faqat FeS2 (FH) o'z ichiga olgan tayyorlangan gidrogel o'rtacha o'ldirish ta'siriga ega edi. Ta'kidlash joizki, AFH plus NIR bilan davolash eng yaxshi sitotoksik ta'sirga ega edi.

AIPH ning ROS ishlab chiqarish qobiliyatini aniqlash uchun diklorofloressein diasetat probi ishlatilgan. AIPH lazer nurlanishi bo'lmaganda ROSni induktsiya qilish qobiliyatini zaifroq ko'rsatdi, FeS2 bilan yuklangan FH esa NIR nurlanishidan keyin o'rtacha darajada ROS ishlab chiqarishni ko'rsatdi (2B-rasm). AFH plyus NIR davolash guruhida kuzatilgan yorqin yashil floresans lazer nurlanishidan keyin FeS2 va AIPH ning chiqishi bilan bog'liq bo'lishi mumkin (2C-rasm). Bundan tashqari, AIPH va AIPH plus NIR guruhlari juda kam yashil floresansni ko'rsatdi (S5†-rasm). CCK-8 tahlili ham xuddi shunday natijalarni ko'rsatdi. AFH plus NIR guruhining hujayra hayotiyligi taxminan 8,5 foizni tashkil etdi, bu boshqa guruhlarnikidan sezilarli darajada farq qildi (2D-rasm). Yuqori harorat alkil radikallarini hosil qilish uchun AIPH ning parchalanishiga yordam beradi. Shu bilan birga, FeS2 hujayra ichidagi GSHni kamaytirish uchun GSH-OXD faolligini amalga oshirishi mumkin. GSH, hamma joyda tiol o'z ichiga olgan tripeptid sifatida, ko'plab hujayralardagi uning tarkibiy aminokislotalaridan (glutamik kislota, sistein va glitsin) sintezlanadi. GSH har xil turdagi saraton hujayralarida ko'p ishlab chiqariladi. Hujayralarda GSH odatda reduksiyalangan shaklda mavjud bo'lib, alkil guruhlari kabi oksidlovchi moddalar bilan reaksiyaga kirishib, oksidlangan glutatyon disulfit (GSSG) ga oksidlanadi va shu bilan erkin radikallar asosida o'smaga qarshi ta'sirni kamaytiradi.37 GSHning kamayishi. hujayralarning oksidlanish-qaytarilish muvozanatini buzadi, oksidlovchi stressni keltirib chiqaradi va oxir-oqibat hujayra apoptoziga olib keladi.38 Ellman reaktivi har bir guruhning GSHni yo'qotish qobiliyatini tekshirish uchun ishlatilgan. AFH birlashtirilgan NIR guruhi eng yaxshi GSHni yo'q qilish qobiliyatini ko'rsatdi (2E-rasm).

1-sxema. Alkil radikalini kuchaytirish va kuchli antitumor terapiyasi uchun nanozim gidrogel

1-rasm (A) FeS2 ning TEM tasviri. (B) FeS2 eritmasining UV-Vis-NIR yutilish spektri. (C) 8{7}}8 nm (0.5 Vt sm 2) da 5 daqiqa davomida lazer nurlanishida FeS2 nanozarrachalari eritmalarining turli konsentrasiyalari uchun isitish egri chiziqlari. (D) gidrogelning SEM tasviri. (E) siklik lazer nurlanishida FeS2 eritmasining harorat o'zgarishi. (F) 0,5 Vt sm 2 808 nm lazer nurlanishiga javoban tayyorlangan AFH uchun reologik va harorat egri chiziqlari (mos ravishda qizil va qora). (G) 10 daqiqa davomida 0,5 Vt sm 2 808 nm lazer nurlanishidan oldin va keyin tayyorlangan AFH morfologiyasi va (H) nurlanishdan keyingi tayyorlangan AFHning infraqizil termal tasvirlari.

PTA va GSH OXDni taqlid qiluvchi ferment sifatida uning yaxshi in vitro ishlashini hisobga olgan holda, AFH ning NIR yorug'likdan issiqlikka aylanishiga ta'siri in vivo o'rganildi. BALB/c sichqonlariga shish hosil qilish uchun teri ostiga 4T1 hujayralari kiritildi. 3A-rasmda PBS guruhi va AFH guruhining 808 nm NIR lazer 0,5 Vt sm 2 nurlanishidan keyin 10 daqiqa davomida harorat o'zgarishi egri chizig'i ko'rsatilgan. AFH guruhining harorati nurlanishdan keyin taxminan 17,6 S ga oshdi, PBS guruhining harorati esa deyarli oshmadi. Yuqori harorat o'simta hujayralari membranasi namligini o'zgartirishi mumkin, shu bilan hujayra membranasining o'tkazuvchanligini oshiradi, bu esa o'z navbatida oqsillarga termal zarar etkazadi.39,40 Oxir-oqibat, saraton hujayralari ko'payish qobiliyatini yo'qotadi. Keyinchalik, AFH vositachiligida o'smaga qarshi faollik 4T1 o'simtali sichqonlarda baholandi. O'simtaga ega sichqonlar tasodifiy ravishda ikkita guruhga bo'lingan. PBS plus NIR guruhi va AIPH guruhidagi sichqonlarning o'simta hajmi ikki haftalik davolash davrida tez o'sdi va AFH guruhi engil o'simta bostiruvchi ta'sir ko'rsatdi (3C-rasm). Buning sababi agarozning asta-sekin metabolizatsiya qilinishi va ba'zi dorilarning asta-sekin chiqarilishi edi. AFH plus NIR guruhi o'simta o'sishiga eng kuchli ta'sir ko'rsatdi. Davolash paytida sichqonlarning o'simta hajmi sezilarli darajada bostirildi. Davolash davridan keyin sichqonlar qurbonlik qilindi va o'smalar ajratildi va tortildi. O'simta og'irligi uchun natijalar o'simta hajmi uchun natijalarga mos keldi (3D-rasm).

Muhimi shundaki, butun tadqiqot davomida davolash guruhida tana vaznida hech qanday o'zgarishlar kuzatilmadi, bu davolash sichqonlarga sezilarli tizimli zaharlanishni keltirib chiqarmaganligini ko'rsatadi (S6†-rasm). Bu natija juda quvonarli, chunki ko'plab materiallar yaxshi eksperimental natijalarni ko'rsatgan bo'lsa-da, ular jiddiy yon ta'sirlarni keltirib chiqardi, bu esa ularning klinik istiqbollariga jiddiy to'sqinlik qiladi.41,42 20 ,70 - Dichlorourescin diasetate intra o'lchash uchun ishlatilgan. - davolash qilingan sichqonlarda o'simta ROS avlodi. AFH plyus NIR kombinatsiyalangan terapiyasiga duchor bo'lgan o'smalarda binoni sezilarli darajada kuchaygan (3E-rasm). Kengaytirilgan erkin radikal ishlab chiqarish hayvon modelida yaxshilangan terapevtik ta'sirga olib keldi. TUNEL va Ki{6}} binoni tahlillari hujayra apoptozi va proliferatsiyasini tekshirish uchun ishlatilgan (3E-rasm). AFH plus NIR guruhidagi o'simta to'qimalari sezilarli proliferatsiyasiz ommaviy nekrotik edi.

3-rasm (A) Ko'rsatilgan davolash guruhlarida 10 daqiqa davomida 808 nm lazer (0,5 Vt sm 2) bilan nurlanishdan keyingi o'smalarning infraqizil termal tasvirlari. (B) Belgilangan davolash guruhlarida 10 daqiqa davomida 808 nm lazer nurlanishidan (0,5 Vt sm 2) so‘ng 4T1 o‘smalari implantatsiya qilingan sichqonlarda harorat ko‘tariladi. (C) Ko'rsatilgandek davolangan guruhlarda o'sma hajmi vaqt o'tishi bilan o'zgaradi. (D) Ko'rsatilgan muolajalar bilan bog'liq o'simtaning o'rtacha og'irligi. (E) ROS, Ki-67 va TUNEL bo'yalgan o'simta bo'limlari ko'rsatilgan davolash guruhlari. **P <0,01, ***P <0,005; Talabaning t-testi.

Davolanishdan so'ng hayotiy organlarda (yurak, jigar, taloq, o'pka va buyraklar) hech qanday yallig'lanish va shikastlanishlar yo'q. Jigar va buyrak indekslari normal edi (4A-D va S7†-rasm). Keng qamrovli in vivo eksperimental ma'lumotlar shuni ko'rsatadiki, sinergik AFH va PTT terapiyasi yaxshi terapevtik ta'sirga va biomoslashuvga ega. Kelajakda klinik tibbiy ilovalar uchun yaxshi istiqbolga ega.

4-rasm In vivo xavfsizlik tajribalarining natijasi. Qon biokimyosi ma'lumotlari, shu jumladan buyrak funktsiyasi belgilari: (A) jigar funktsiyasi belgilari: CRE, (B) BUN va (C) ALT, turli muolajalardan keyin. (D) In'ektsiyadan 16 kun o'tgach turli xil muolajalarga duchor bo'lgan sichqonlarning asosiy organlari, yurak, o'pka, jigar, buyrak va taloqning gistopatologik tahlil natijalari (H&E-bo'yalgan tasvirlar). O'lchov chiziqlari: 100 mm.

Xulosa

Biz FeS2 fermenti va alkil radikal manbai AIPH ni agaroz gidrogelga inkapsulatsiyalash orqali bir vaqtning o'zida erkin radikal terapiya va PTT ga erisha oladigan in'ektsion foto-reaktiv gidrogelni ishlab chiqdik. 808 nm lazer nurlanishi ostida PTA FeS2 AFH tizimining isishiga yordam beradi va AIPHning chiqarilishiga va alkil radikallarini hosil qilish uchun uning parchalanishiga olib keladi. Shu bilan birga, FeS2 hujayra ichidagi GSH tarkibini kamaytirishi mumkin va shu bilan redoks gomeostazini yanada yo'q qiladi. Gidrojelning erish tezligi lazer quvvati zichligi va nuqta o'lchami kabi parametrlar bilan o'zgarishi mumkin. Ham in vivo, ham in vitro tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, AFH ning NIR nurlanishi bilan kombinatsiyasi ahamiyatsiz salbiy ta'sirlar bilan kuchli o'simtani o'ldiradigan ta'sirga erishishi mumkin. Ushbu tadqiqotda ishlab chiqilgan gidrogel tizimi alkil radikallariga asoslangan terapevtik tizimlarni yaxshilash strategiyasini taqdim etadi.

Ma'lumotnomalar

1 D. Chju, J. Chjan, G. Luo, Y. Duo va BZ Tang,Adv. Sci., 2021, e2004769.

2 C. Huang, S. Ding, V. Jiang va F.-B. Vang,Nano o'lchov, 2021, 13, 4512–4518.

3 J. Vu, Y. Qu, K. Shi, B. Chu, Y. Jia, X. Xiao, Q. Xe va Z. Qian,Chin. Kimyo. Lett., 2018, 29, 1819–1823.

4 S. Ning, Y. Zheng, K. Qiao, G. Li, Q. Bay va S. Xu,J. Nanobiotexnol., 2021, 19, 344. 

5 D. Zhu, T. Chjan, Y. Li, C. Huang, M. Suo, L. Xia, Y. Xu, G. Li va BZ Tang,Biomateriallar, 2022, 283, 121462. 

6 D. Chju, R. Ling, X. Chen, M. Lyu, X. Qian, K. Vu, G. Li va X. Vang,Nano Res., 2022, DOI:10.1007/s12274-022-4359-6. 

7 D. Zhu, M. Lyu, V. Jiang, M. Suo, Q. Huang va K. Li,J. Mater. Kimyo. B, 2020, 

8, 5312–5319. 8 H. Ranji-Burachalou, PA Gurr, DE Dunstan va GG Qiao,ACS Nano, 2018, 12, 11819–11837. 

9 D. Zhu, Z. Liu, Y. Li, Q. Huang, L. Xia va K. Li,Biomateriallar, 2021, 274, 120894. 

10 X. Li, R. Luo, X. Liang, Q. Vu va C. Gong,Chin. Kimyo. Lett., 2021, DOI:10.1016/j.cclet.2021.11.048.