Diabetik nefropatiya uchun yangi terapevtik strategiya: CCR2 antagonisti

Aloqa:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Ⅱ QISM:Diabetik nefropatiyaning sichqoncha modelida CCR2 antagonistining makrofaglarga va Toll-o'xshash retseptorlari 9 ifodalariga ta'siri

Seigo Ito, Xiroyuki Nakashima, Takuya Ishikiriyama, Masahiro Nakashima, Akira Yamagata va boshqalar.

Abstrakt

ning patogenezidiabetik nefropatiya(DN) buyraklarga makrofaglarni (Mo) jalb qilish, o'simta nekrozi omil-u (TNF-o) ishlab chiqarish va oksidlovchi stress bilan bog'liq. Ma'lumotlarga ko'ra, to'lovga o'xshash retseptor 9 (TLR9) faollashuvi tizimli yallig'lanishda ishtirok etadi va bu metabolik sindromda bu holatni kuchaytiradi. Shuning uchun biz TLR9 DN patogenezida rol o'ynaydi, deb faraz qildik (diabetik nefropatiya). DN da buyrak Mosning ikkita kichik to'plamidiabetik nefropatiyamodel (db/db) sichqonlari ularning taqsimlanishi va TLR9 ifodasi va funksiyasini baholash uchun oqim sitometriyasi yordamida tahlil qilindi. Sichqonlarga preparat berildiCCR28 hafta davomida INCB3344 antagonisti; Mo taqsimoti va funktsiyasidagi o'zgarishlar va uning DNga terapevtik ta'siridiabetik nefropatiyapatologiyasi tekshirildi. Sichqoncha buyraklarida suyak iligidan olingan CD11bhigh (BM-Mo) va to'qimalarda yashovchi CD11blow Mos (Res-Mo) aniqlandi. DN sifatidadiabetik nefropatiyarivojlandi, BM-MUph soni, TLR9 ifodasi va TNF- ishlab chiqarish sezilarli darajada oshdi. Res-Mosda reaktiv kislorod turlari (ROS) ishlab chiqarish va fagotsitar faollik kuchaytirildi. INCB3344 albuminuriyani, sarum kreatinin darajasini, BM-Muph ko'pligini, TLR9 ifodasini va BM-Muphs tomonidan TNF-a ishlab chiqarishni va Res-Mos tomonidan ROS ishlab chiqarishni kamaytirdi. TLR9 va TNF- ishlab chiqarish orqali BM-Mo faollashuvining kuchayishi va Res-Mos tomonidan ROS ishlab chiqarishning ortishi DNda ishtirok etdi.(diabetik nefropatiya)taraqqiyot. Shunday qilib, Mos va ularning TLR9 ifodasini INCB3344 tomonidan inaktivatsiya qilish DN uchun potentsial terapevtik strategiyadir (diabetik nefropatiya).

YANGI VA E'tiborga molik Biz buyrak makrofaglarini (Mos) yuqori CD1lb ifodalovchi suyak iligidan olingan Mos (BM-Mos) va past CD11b ifodalovchi to'qimalarga xos rezident Mo (Res-Mos) ga tasnifladik. Indiabetik nefropatiya(DN) sichqonlar modeli. BM-Mosda TLR9 faollashuvi va Res-Mosda ROS ishlab chiqarish orqali to'lovga o'xshash retseptor 9 (TLR9) ifodasi va TNF ishlab chiqarish kuchaytirildi.CCR2antagonist BM-Mosning buyrak infiltratsiyasini va ularning funktsiyasini va Res-Mos tomonidan ROS ishlab chiqarishni, bir vaqtning o'zida TLR9 bostirishni bostirdi. Bizning tadqiqotimiz DN uchun yangi terapevtik strategiyani taqdim etadi (diabetik nefropatiya).

cistanche pharma maxsusuchunbuyrak

Ⅰ QISM UCHUN SHU YERGA BOSING

MUHOKAZA

Biz ushbu tadqiqotda uchta yangi topilmani taqdim etdik. Birinchidan, diabetik DB/DB sichqonlarida BM-Mos TLR9 ni ifodaladi va TNF-ni chiqardi. Diabetik bo'lmagan tumanli sichqonlarga qaraganda ko'proq, Res-Mos esa ko'proq ROS ishlab chiqardi va fagotsitar funktsiyani ko'rsatdi. Ikkinchidan, INCB3344, aCCR2antagonist, MPS ning ikkala turidan TLR9 ifodasi va TNF chiqishini kamaytirdi va Res-Mos tomonidan ROS ishlab chiqarishni kamaytirdi. Nihoyat, bu mexanizmlar diabetik DB / DB sichqonlarida albuminuriya va sarum Cr darajasining pasayishiga, shuningdek, mezangial proliferatsiya va podotsitlar ekspressiyasining yaxshilanishiga olib kelishi mumkin.

Bizning topilmalarimiz asosida, buyrak Mos ikki populyatsiyaga bo'lingan, ya'ni BM-Mos suyak iligidan olingan markerni yuqori darajada ifodalaydi va Res-Mos uni deyarli ifoda etmaydi. Qandli diabetning mavjudligiga bog'liq bo'lmaganligi sababli, bular ikki turdagi buyrak Mosning o'ziga xos xususiyatlari sifatida qaraldi. Bundan farqli o'laroq, diabetik sichqonlarda ularning turli funktsiyalari yaxshilandi. Bundan tashqari, asosan Mos tomonidan ishlab chiqariladigan yallig'lanishga qarshi sitokin bo'lgan TNF- va yallig'lanishga qarshi sitokin bo'lgan IL-10 ishlab chiqarilishi ham oshdi. Bu shuni ko'rsatadiki, buyrak Mos bir vaqtning o'zida DN kabi surunkali yallig'lanish sharoitida yallig'lanishning nafaqat indüksiyasi, balki konvergentsiyasida ham ishtirok etadi.Diabetik nefropatiya). Ikki turdagi buyrak makrofaglarining roli

Nefropatiyaning og'irligini aks ettiruvchi siydik bilan albumin ajralishi DB/DB sichqonlarida BM-Mos ulushi bilan ortganligi sababli, biz BM-Mos DNda asosiy rol o'ynashini taklif qilamiz (Diabetik nefropatiya) rivojlanish. Bundan tashqari, biz BM-Mosda TLR9 ifodasi va TNF- ishlab chiqarish kuchayganligini aniqladik, ROS ishlab chiqarish va fagotsitar faollik esa DN bilan Res-Mosda oshdi.(diabetik nefropatiya)taraqqiyot. Ushbu kuzatishlar yosh va kattaroq tumanli sichqonlarda amalga oshirilmagani uchun (ma'lumotlar ko'rsatilmagan), biz ular DN bilan bog'liq deb o'ylaymiz.(diabetik nefropatiya)rivojlanishi va yoshga bog'liq o'zgarishlarga bog'liq emas. TLRlar lipopolisakkaridlar, bakterial DNK va endogen xavf bilan bog'liq molekulyar naqshlar kabi patogen bilan bog'liq molekulyar naqshlarni taniydi, ularning darajalari diabetda ko'payadi (33,34). Xususan, TLR2 va TLR4 DNda yallig'lanishni davom ettirishda ishtirok etadi.(diabetik nefropatiya), ehtimol Mos (35-38) orqali. TLR9 shikastlangan/o'lik hujayralar yoki adipotsitlar tomonidan muomalaga chiqarilgan mitoxondriyal va hujayrasiz DNKni hamda umumiy bakterial DNK motivi CpG-ODNni taniydi va shu bilan tug'ma immunitetni faollashtiradi va uning buyrak shikastlanishiga aloqadorligini ko'rsatadi (11,14).

Res-Mos tomonidan ROS ishlab chiqarish va fagotsitoz DN bilan birga ortdi (Diabetik nefropatiya) progressiya. Xabarlarga ko'ra, buyrak Mos DN bilan bog'liq(diabetik nefropatiya)nikotinamid adenin dinukleotid fosfat (NADPH) oksidaza faolligi (39,40) orqali RO larni chiqarish orqali progressiya va bizning oldingi tadqiqotimiz Res-Mosdan olingan ROS jigar to'qimalarining shikastlanishida ishtirok etishini ko'rsatdi (20). Shuning uchun, buyrakda Res-Mos ham ROS-induktsiyalangan to'qimalarning shikastlanishida ishtirok etishi mumkin. Bundan tashqari, Res-Mosdagi TLR9 ifodasi diabetik holatda kuchaytirildi (1E-rasm). Res-Mos tomonidan ishlab chiqarilgan ROS ga TLR9 faollashuvi va mahalliy TNF-a darajalari (20,41, 42) ta'sir qilganligi sababli, Res-Mos tomonidan DN bilan ROS ishlab chiqarishning o'sishi (Diabetik nefropatiya) progressiya ularning TLR9 ifodasining ortishi yoki BM-Mosning TNF ishlab chiqarilishining kuchayishi bilan bog'liq edi. Shuning uchun biz BM-Mos tomonidan TNF-a ishlab chiqarish va Res-Mgps tomonidan ROS ishlab chiqarishning ko'payishi DNni kuchaytirdi deb taxmin qilamiz.(diabetik nefropatiya).

Res-Mos ROS ishlab chiqarishni kuchaytirish orqali zararli rol o'ynashi mumkin bo'lsa-da, ularning kuchli fagotsitoz qobiliyati DN ga himoya ta'sirini ko'rsatishi mumkin (Diabetik nefropatiya) sichqonlar. Res-Mos kasallikning rivojlanishi paytida shikastlangan buyrak hujayralarini fagotsitozlashi va buyrak to'qimalarini tiklashda ishtirok etishi mumkin. Bundan tashqari, Res-Mos tomonidan ROS ishlab chiqarishning ko'payishi fagotsitozlangan shikastlangan to'qimalarning hazm bo'lishi tufayli yuzaga kelishi mumkin. Biz ogohlantirilmagan muhitda buyrak Mos tomonidan ishlab chiqarilgan ROSni baholaganimizda, ROS zararlangan buyrak to'qimasini fagotsitozlash va hazm qilish bosqichida ishlab chiqarilgan. Shuning uchun Res-Mosda ROS ishlab chiqarishning ortishi DN ga salbiy ta'sir ko'rsatmasligi mumkin (diabetik nefropatiya).

ning ta'siriCCR2Diabetik nefropatiya bo'yicha INCB3344 antagonisti

CCL2 diabetik model sichqonlarining (43-46) buyragida haddan tashqari ko'p ifodalanadi va glomerulyar podotsitlarga ta'siri tufayli albuminuriyaning kuchayishiga olib keladi (47). Bundan tashqari, yallig'lanish joylarida monotsitlarning infiltratsiyasi asosan CCL2 tomonidan tartibga solinadi va CCL2 Ms ni buyrak to'qimalariga (orqali) jalb qiladi.CCR2-vositalangan signalizatsiya) va DNda muhim rol o'ynaydi(Diabetik nefropatiya) patogenezi (46,47). CCL2 glomerulyar podotsitlar, mezangial hujayralar va quvurli epiteliya hujayralari tomonidan ishlab chiqariladi va buyrakda interstitsial yallig'lanish, naycha atrofiyasi va fibrozni keltirib chiqaradi (44, 48,49). Bir nechta ma'muriyatCCR2Yaqinda diabetik modeldagi sichqonlardagi antagonistlar buyraklarga Mo infiltratsiyasini bostirishi va DN ning oldini olishi ko'rsatildi.(diabetik nefropatiya)progressiya (50-53). Biroq,CCR2Antagonistlar odamlarda klinik jihatdan qo'llanilmagan, ehtimol qisqa farmakologik yarimparchalanish davri va insonga past yaqinlik kabi muammolar tufayli.CCR2. Bundan farqli o'laroq, INCB3344 yuqori selektivlikka ega bo'lgan inson monositlari bilan bog'lanishi mumkinCCR2va inson yoki sichqon tanasida uzoq farmakokinetik yarimparchalanish davriga ega (8,9).

Ushbu tadqiqotda INCB3344 BM-Mosning DN da buyrakka migratsiyasini bostirishi mumkin (Diabetik nefropatiya); ammo, bu Res-Migosga aniq ta'sir ko'rsatmadi, bu BM- va Res-Muph populyatsiyalari turli xil xususiyatlarga ega ekanligini ko'rsatadi. Bundan tashqari, INCB3344 Mgsni M2 fenotipiga (M2 polarizatsiyasi) qutblashdi, bu yallig'lanishni yallig'lanishga qarshi fenotipga aylantirish ta'sirini ko'rsatadi.

Shunisi e'tiborga loyiqki, INCB3344 har ikkala turdagi Mosda TNF ishlab chiqarishni sezilarli darajada kamaytirdi, bu DN ning yaxshilanishiga eng katta hissa qo'shgan bo'lishi mumkin (Diabetik nefropatiya). TNF- buyrak gipertrofiyasida, albumin ajralishida va DNda buyrak funktsiyasining susayishida ishtirok etadi(Diabetik nefropatiya) (3, 54) va boshqa sitokinlarni avtokrin va parakrin (55-58) ishlab chiqarishni rag'batlantiradigan pleiotropik sitokindir. Shuning uchun, TNF-o ning inhibisyonu uning DNga foydali ta'sirini hisobga oladigan turli xil yallig'lanish vositachilarini blokirovka qilishga xizmat qilishi mumkin.(diabetik nefropatiya). SifatidaCCR2stimulyatsiya hujayra ichidagi glikogen sintaza kinaz 3 (GSK3) (59) faolligi orqali TNF-a ishlab chiqarishga olib keladi, biz INCB3344 buyrakdagi Mos bu yo'lni blokirovka qilish orqali TNF ishlab chiqarishni inhibe qilgan deb taxmin qildik. Biroq, biz ushbu modeldagi GSK3 darajalarini baholash kerak deb hisoblaymiz va bu taxminni tasdiqlash uchun keyingi tadqiqotlar o'tkazilishi kerak. Bundan tashqari, bizning natijalarimiz shuni ko'rsatdiki, glomerulyar Mosning aksariyati BM-Mos edi va glomerulyar BM-Mosda TNF ishlab chiqarilishi buyrakdagi boshqa BM-Mosga qaraganda yuqori edi. Ushbu natijalar shuni ko'rsatadiki, BM-MUph sonini (aniqrog'i) bostiruvchi INCB3344, asosan, mezangial proliferatsiyani kamaytirish va podotsitlarni himoya qilish (WTni oshirish-1) orqali glomerulyar lezyonlarning yaxshilanishiga hissa qo'shgan.

CCR2Inhibisyon TLR9 bostirish orqali TNF ishlab chiqarishni kamaytiradi (60,61) va TLR9 ifodasi buyrak parenximasida, shu jumladan kanalchalar, interstitsial va glomerulilarda kuzatilmadi, hozirgi vaqtda morfologik jihatdan Mos deb taxmin qilingan hujayralar bundan mustasno. o'rganish. Shuning uchun INCB3344 ma'muriyati Mosning ikkala turida ham TLR9 ifodasini kamaytirdi. Birgalikda olingan natijalar shuni ko'rsatdiki, INCB3344 nafaqat BM-Mg ning buyraklarga yallig'lanish infiltratsiyasini, balki ularning yallig'lanish bilan bog'liq zararli funktsiyalarini ham bostiradi va DN ning engillashishiga hissa qo'shishi mumkin.(diabetik nefropatiya).

Xulosa qilib aytganda, BM-Mos diabetik sichqonlarda diabetik bo'lmagan sichqonlarga qaraganda TLR9 ni ifodaladi va TNF-a ni ko'proq chiqardi, Res-Mos esa ko'proq ROS ishlab chiqardi va diabetik sichqonlarda fagotsitar faollikni oshirdi. INCB3344, aCCR2antagonist, har ikki turdagi Mosdan TLR9 ifodasi va TNF chiqishini kamaytirdi va Res-Mos tomonidan ROS ishlab chiqarishni kamaytirdi. Ushbu o'zgarishlar diabetik sichqonlarda albuminuriya va qon zardobidagi Cr darajasining pasayishini, shuningdek, patologik yaxshilanishni tushuntiradi. Biz INCB3344 DNni davolash uchun kuchli salohiyatga ega ekanligini taklif qilamiz(diabetik nefropatiya)klinikada.

Istiqbol va ahamiyati

Biz buni ko'rsatdikCCR2INCB3344 antagonisti albuminuriya va sarum Cr darajasini pasaytirishi va DN bilan sichqonlarda mezangial proliferatsiya va podotsitlar ifodasini yaxshilashi mumkin.(diabetik nefropatiya). Ushbu foydali ta'sirlar BM-Mosdan TNF- ishlab chiqarishni va Res-Muphlardan ROS chiqarishni kamaytirish orqali amalga oshirildi, ularning ikkalasi ham Mos va M2 polarizatsiyasining har ikkala turida TLR9 ifodasining pasayishiga asoslangan edi. Kelajakda ushbu retseptor antagonisti DN rivojlanishining oldini olish uchun bemorlarni davolash uchun angiotensin II retseptorlari blokatori va natriy-glyukoza kotransporteriga-2 mustahkam alternativ yoki sherik sifatida foydalanish mumkin.(diabetik nefropatiya).

ADABIYOTLAR

1. Qi C. MaoX, Zhang Z.Wu H, tasnifi va differentsial tashxisidiabetik nefropatiya. J Diabetes Res 2017:8637138,2017. doi: 10.1155/2017/8637138.

2. Siz H, Gao T, Kuper TK, Brayan Rivz V, Avad AS. Makrofaglar diabetik buyrak shikastlanishiga bevosita vositachilik qiladi. J Physiol Renal Physiol 305:F1719-F1727,2013. doi: 10.1152/ajprenal.00141.2013.

3. Awad AS, You H, Gao T, Cooper TK, Nedospasov SA, Vacher J, Wilkinson PF, Farrell FX, Brian Reeves W. Makrofagdan olingan o'sma nekrozi omil-alfa diabetik buyrak shikastlanishiga vositachilik qiladi. Buyrak Int 88:722-733,2015.doi:10.1038/ki.2015.162.

4. Lin M, Yiu WH, Vu HJ, Chan LY, Leung JC, Au WS, Chan KW, Lai KN, Tang SC. Tollga o'xshash retseptor 4 quvurli yallig'lanishni kuchaytiradidiabetik nefropatiya. J Am Soc Nephrol 23:86-102, 2012. doi:10.1681/asn.2010111210.

5. Hou Y, Shi Y, Xan B, Liu X, Qiao X, Qi Y, Vang L. SS31 antioksidant peptid oksidlovchi stressni oldini oladi, CD36 ni pasaytiradi va buyrak faoliyatini yaxshilaydi.diabetik nefropatiya. Nephrol Dial Transplant 33: 1908-1918, 2018.doi:10.1093/ndt/gfy021.

6. Seok SJ, Li ES, Kim GT, Xyun M, Li JH, Chen S, Choi R, Kim HM, Li EY, Chung CH. CCL2 blokadasi/CCR2signalizatsiya yaxshilanadidiabetik nefropatiyaDB/DB sichqonlarida. Nephrol Dial Transplantatsiyasi 28:1700-1710,2013. doi: 10.1093/ndt/gfs555.

7. Brodmerkel CM, Huber R, Covington M, Diamond S, Hall L, Collins R, Leffet L, Gallagher K, Feldman P, Collier P, Stow M, Gu X, Bariboud F, Shin N, Tomas B, Burn T, Hollis G , Yeleswaram S, Sulaymon K, Fridman S, Vang A, Xue CB, Nyuton RC. Scherle P, Vaddi K. Yangi kemiruvchi-faolning kashfiyoti va farmakologik tavsifiCCR2antagonist, INCB3344.J Immunol 175:5370-5378, 2005. doi:10.4049/jimmunol.175.8.5370.

8. Shin N, Baribaud F, Vang K, Yang G, Wynn R, Kovington MB, Feldman P, Gallagher KB, Leffet LM, Lo YY, Vang A, Xue CB, Nyuton RC, Scherle PA. Insonning kichik molekula antagonisti INCB3344 ning farmakologik tavsifiCCR2. Biochem Biophys Res Commun 387: 251-255, 2009. doi:10. 1016/j.bbrc.2009.06.135.