Abstrakt

Cistanche tubulosaan'anaviy xitoy tabobatida keng qo'llaniladigan qimmatbaho tonik o'tdir. Ekinakozid va akteozid bilan ifodalangan feniletanoid glikozidlar uning asosiy bioaktiv moddalaridir. Ushbu tadqiqot zamonaviy qayta ishlash parametrlarini optimallashtirishga qaratilganCistanche tubulosaechinacoside va acteosid hosildorligini yaxshilash uchun qaynatma bo'laklari va hujayra darajasida uning anti-oksidlovchi-stress va yallig'lanishga qarshi mexanizmini o'rganish.

Bir faktorli tajribalar o'tkazildi, so'ngra ta'sir etuvchi omillar sifatida bo'lak qalinligi, bug'lash vaqti va quritish harorati bilan Box-Behnken javob-sirtini optimallashtirish amalga oshirildi. Ikkita marker birikmasining tarkibini aniqlash uchun yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi (HPLC) qabul qilindi. LPS tomonidan induktsiya qilingan RAW264.7 makrofag shikastlanishi modeli farmakologik faoliyatni baholash uchun yaratilgan. Reaktiv kislorod turlari (ROS), azot oksidi (NO), malondialdegid (MDA), antioksidant fermentlarning faolligi, shu jumladan SOD, CAT, LDH va glutation (GSH) tarkibi aniqlandi. Elishay TNF‑, IL‑1 va IL‑6 yallig‘lanishga qarshi sitokinlarning sekretsiya darajasini tekshirish uchun ishlatilgan. Western blot tahlili p38/AKT/JNK/NF‑KB signalizatsiya yo'lidagi asosiy oqsillarning fosforillanish holatini tahlil qilish uchun o'tkazildi.

Optimal ishlov berish shartlari bo'lak qalinligi 0,6 sm, bug'lash vaqti 6 min va quritish harorati 57 daraja edi. Bunday holda, akteozid miqdori 7,25% ga, echinacoside 31,62% ga etdi. Optimallashtirilgan qaynatma bo'laklaridan olingan ekstraktlar LPS bilan stimulyatsiya qilingan RAW264.7 hujayralarida hujayra ichidagi ROS, NO va MDA ning ortiqcha ishlab chiqarilishini sezilarli darajada kamaytirishi mumkin. Bu SOD, CAT, LDH faoliyatini kuchaytirdi va hujayra ichidagi GSH darajasini oshirdi, shu bilan birga TNF-, IL-1 va IL-6 ning chiqarilishini sezilarli darajada inhibe qildi. Western-blot natijalari shuni ko'rsatdiki, ekstrakt p‑p38/p38, p‑AKT/AKT, p‑JNK/JNK va p‑NF‑kB/NF‑KB ning fosforlanish nisbatini pastga qarab boshqargan.

Optimallashtirilgan bug'lash-quritish texnologiyasi asosiy feniletanoid glikozidlarining tiklanish tezligini samarali oshirishi mumkin.Cistanche tubulosa. Qaynatma bo'laklari p38/AKT/JNK/NF‑kB signalizatsiya yo'lini inhibe qilish orqali LPS tomonidan qo'zg'atilgan hujayra shikastlanishiga qarshi anti-oksidlovchi va yallig'lanishga qarshi ta'sir ko'rsatadi. Ushbu tadqiqot standartlashtirilgan sanoat qayta ishlash uchun amaliy texnik parametrlarni taqdim etadiCistanche tubulosa, va ushbu o'simlik manbasidan olingan funktsional oziq-ovqat va ozuqaviy mahsulotlarni ishlab chiqish uchun eksperimental dalillarni taqdim etadi.

Kalit so'zlar: Cistanche tubulosa; qaynatma bo'laklarini qayta ishlash texnologiyasi; akteozid; echinacoside; antioksidlovchi stress; RAW264.7 makrofagi; p38/AKT/JNK/NF‑KB yo'li

1. Kirish

Cistanche tubulosa(Schenk) Wight Orobanchaceae oilasiga tegishli bo'lib, uning shifobaxsh qismi tarozi barglari bilan quritilgan go'shtli poyadir. Xitoyda bu o'simlik asosan shimoli-g'arbiy qurg'oqchil hududlarda, janubiy Shinjondagi eng katta ekish maydoniga ekilgan. Mashhur tonik o'simlik dori sifatida, u buyrak-yangni tonlash, mohiyati va qonni to'ldirish va ich qotishni bartaraf etish uchun ichaklarni namlash vazifasini bajaradi. Klinik jihatdan u buyrak-yang etishmovchiligi, qonning mohiyati etishmovchiligi, bepushtlik, bel va tizzalarning og'rig'i va zaifligi, shuningdek, ichak quruqligi qabziyatini davolashda qo'llaniladi.

Feniletanoid glikozidlar, asosan, echinacoside va acteosid, asosiy faol komponentlardir.Cistanche tubulosa. Xitoy farmakopeyasi talablariga muvofiq, malakali xom ashyo tarkibidagi echinakozid va akteozidning umumiy miqdori 1,50% dan kam bo'lmasligi kerak, bu sifatni baholashning muhim ko'rsatkichi bo'lib xizmat qiladi. uchun an'anaviy qayta ishlash yondashuvlarCistanche tubulosaasosan ho'llash - namlash, kesish - quritish yoki sharobni bug'lash usullarini qo'llaydi. Ko'pgina tadqiqotlar faol komponentlar hosildorligini oshirishga qaratilgan bo'lsa-da, qayta ishlash texnologiyasini optimallashtirish bilan biologik faollikni tekshirishni birlashtirgan tadqiqotlar etarli darajada emas.

Oksidlanish stressi ko'plab metabolik va yallig'lanish kasalliklari uchun umumiy patologik asos bo'lib xizmat qiladi. Mavjud tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, ulardan umumiy glikozidlar olinadiCistanche tubulosayallig'lanish reaktsiyasini bostirishi va sepsis hayvonlarida jigar shikastlanishini engillashtirish uchun Nrf2/HO‑1 yo'lini faollashtirishi mumkin. Ushbu o'simlikdan olingan lignan glikozid fraktsiyalari PI3K/AKT signalizatsiyasini tartibga solish orqali makrofaglarning yallig'lanishini yumshata oladi. Nevertheless, the pharmacological property of modern processed decoction pieces and its underlying molecular mechanism still require further exploration.

Ushbu tadqiqotda, ishlov berish jarayonini optimallashtirish uchun o'zgaruvchilar sifatida bo'lak qalinligi, bug'lash vaqti va quritish haroratini hisobga olgan holda, bitta faktorli testlar asosida Box-Behnken javob yuzasi dizayni qo'llanildi. Optimal texnik parametrlarni qo'lga kiritgandan so'ng, antioksidlovchi-stress va yallig'lanishga qarshi quvvatni baholash va tegishli signalizatsiya mexanizmini aniqlash uchun LPS tomonidan qo'zg'atilgan RAW264.7 oksidlovchi-zararli hujayra modeli yaratildi. Ushbu ish tajriba-miqyosda ishlab chiqarish uchun barqaror va ishlaydigan qayta ishlash parametrlarini ta'minlash va har tomonlama foydalanish uchun eksperimental asos yaratishni nazarda tutadi.Cistanche tubulosaresurslar.

2. Materiallar va usullar

2.1 O'simlik materiallari, reagentlar va asboblar

Yangi go'shtli poyalariCistanche tubulosakuzda Shinjonning Xo'tan shahridan yig'ib olingan. RAW264.7 sichqoncha monotsit-makrofagli leykemiya hujayralari Procell Life Science & Technology Co., Ltd (Uxan, Xitoy) dan sotib olindi.

HPLC sinfidagi asetonitril va metanol Merck kompaniyasidan olingan. Pekin Shimoliy Veyye metrologiya instituti tomonidan echinakozid (98% dan katta yoki unga teng) va akteozid (98% dan ortiq yoki unga teng) mos yozuvlar standartlari taqdim etilgan. Dimetil sulfoksid (DMSO) Sigma-Aldrichdan sotib olingan. DMEM yuqori glyukozali muhit, homila sigir zardobi (FBS), penitsillin-streptomitsin ikki antikor eritmasi, BCA oqsil miqdorini aniqlash to'plami, NO, MDA, SOD, CAT, GSH va LDH uchun tahlil to'plamlari, lipopolisakkarid (LPS), MTT reagentlari va ELITO tijoriy moddalari. mahsulotlar.

Tajriba asboblari orasida Shimadzu yuqori samarali suyuqlik xromatografi, aylanuvchi evaporatator, xitoy oʻtlarini maydalagich, termostatik quritish pechi, bugʻ pishirgich, toʻliq toʻlqin uzunlikdagi mikroplyonka oʻquvchi, elektron analitik tarozi, sovutgichli sentrifuga, bioxavfsizlik kabinetidagi mikrokoplar va mikroskoplar mavjud.

2.2 Bir faktorli ishlov berish tajribasi

YangiCistanche tubulosago'shtli poyalari 0,2 sm, 0,4 sm, 0,6 sm, 0,8 sm, 1,0 sm va 1,2 sm qalinlikdagi bo'laklarga kesilgan. Bo'laklar mos ravishda 3 min, 6 min, 9 min, 12 min, 15 min, 18 min va 21 daqiqa davomida bug'langan va xona harorati (25 daraja), 40 daraja, 50 daraja, 60 daraja, 70 daraja va 80 daraja turli harorat gradyanlarida quritilgan. Quritilgan qaynatma bo'lagi namunalari maydalangan va keyingi aniqlash uchun 40 meshli elakdan o'tkazilgan. Keng qamrovli baholash uchun kompozit reyting formulasi qabul qilindi: Kompozit ball=echinakozid tarkibi × 50 % + akteozid miqdori × 50 %.

2.3 Acteoside va Echinacoside HPLC aniqlash

Namuna eritmasini tayyorlash: 1,0 g kukun namunasini aniq torting, 100 ml 50% metanol eritmasini qo'shing. 30 daqiqa namlashdan so'ng, ultratovushli ekstraktsiya 40 daqiqa davomida amalga oshirildi. Sovutgandan keyin vazn yo'qotish 50% metanol bilan to'ldirildi. Supernatant HPLC in'ektsiyasidan oldin 0,22 mkm mikroporoz membrana bilan filtrlangan.

Akteozid va echinakozidning aralash namunaviy standart eritmasi 50% metanol bilan tayyorlandi va standart egri chizish uchun ketma-ket konsentratsiyalarda suyultirildi. Xromatografik sharoitlar: COSMOSIL C₁₈ xromatografik ustun; mobil fazali tizim 0,1% fosfor kislotasining suvli eritmasidan (A) va asetonitrildan (B) iborat; aniqlash to'lqin uzunligi 330 nm sifatida o'rnatildi; ustun harorati 35 daraja; oqim tezligi 1 ml/min. Maqsadli birikmalarni miqdoriy hisoblash uchun tashqi standart usul ishlatilgan.

2.4 Box-Behnken Response-surface eksperimental dizayn

Bir faktorli eksperimental natijalarga ko'ra, mustaqil o'zgaruvchilar sifatida tilim qalinligi (X₁), bug'lash vaqti (X₂) va quritish harorati (X₃) tanlangan. Akteozid tarkibi (Y₁, %) va echinacoside tarkibi (Y₂, %) javob qiymatlari sifatida xizmat qildi. Design-Expert 13.0 dasturidan jami 17 ta test guruhidan iborat uch faktorli uch darajali Box-Behnken eksperimental sxemasini yaratish uchun foydalanilgan. Modelni o'rnatish, dispersiya tahlili va parametrlarni bashorat qilish dasturiy ta'minot bilan yakunlandi. Amaliy tekshirish tajribalari nazariy optimal parametrlarni haqiqiy ishlab chiqarish jarayoniga moslashtirgandan so'ng uch nusxada o'tkazildi.

2.5 Hujayra madaniyati va namuna tayyorlash

Optimallashtirilgan ishlov berish sharoitida olingan qaynatma bo'lagi namunasi ekstrakt kukuniga tayyorlandi. Kukun DMSOda eritildi va hujayra tajribalari uchun 10% FBS va 1% penitsillin-streptomitsinni o'z ichiga olgan to'liq DMEM muhiti bilan suyultirildi. RAW264.7 xujayralari 5% CO₂ bilan 37 daraja namlangan inkubatorda yetishtirildi.

Hujayra hayotiyligi uchun 2.6 MTT tahlili

Hujayra suspenziyasi hujayra zichligi 8 × 10⁴ hujayra/mL bo'lgan 96-quduqli plitalarga sepildi. Guruhlar hal qiluvchi nazorat guruhi (0,1% DMSO), LPS model guruhi (1 ug/ml LPS) va bir nechta konsentratsiyali guruhlar sifatida o'rnatildi.Cistanche tubulosaekstrakti (3,125, 6,25, 12,5, 25, 50, 100, 200, 400 ug/ml). Namunalar 2 soatlik oldindan inkubatsiyadan so'ng, hal qiluvchi nazorat quduqlaridan tashqari yakuniy konsentratsiyasi 1 ug/ml bo'lgan LPS qo'shildi va yana 24 soat davomida inkubatsiya qilindi. 4 soatlik reaktsiya uchun MTT eritmasi (5 mg/ml) qo'shildi. Supernatantni olib tashlagach, formazan kristalini eritish uchun DMSO qo'shildi. Hujayra hayotiyligini hisoblash uchun mikroplastinka o'quvchi tomonidan 490 nm da yutilish qiymati aniqlandi. Keyingi funktsional testlar uchun xavfsiz konsentratsiya diapazoni tanlangan.

2.7 Hujayra ichidagi ROS o'lchovi

RAW264.7 hujayralar har bir quduq uchun 4 × 10⁵ hujayra zichligida 6-quduqli plitalarga ekilgan. Devorga yopishgandan so'ng, hujayralar gradient-kontsentratsiya bilan oldindan ishlov berildiCistanche tubulosaekstrakti (12,5, 25, 50, 100 ug/ml) 2 soat davomida, keyin 24 soat davomida 1 ug/ml LPS bilan stimulyatsiya qilinadi. Hujayra ichidagi ROS darajasi lyuminestsent prob reaktiv to'plami bilan aniqlandi. Floresan intensivligi qo'zg'alish to'lqin uzunligi 488 nm va emissiya to'lqin uzunligi 525 nm ostida qayd etilgan.

2.8 NO, MDA, SOD, CAT, LDH va GSH ni aniqlash

Griess usuli orqali NO tarkibini aniqlash uchun hujayra madaniyati supernatanti yig'ildi. Hujayralar oldindan sovutilgan PBS bilan yuvildi va muz ustida lizing qilindi. Hujayra lizatasi hujayra ichidagi supernatantni olish uchun 10 000 aylanish tezligida 5 daqiqa davomida 4 daraja ostida santrifüj qilindi. MDA tarkibi, SOD, CAT, LDH va GSH darajasining ferment faolligi to'plam spetsifikatsiyalariga muvofiq qat'iy ravishda o'lchandi. Umumiy proteinni normallashtirish uchun BCA usuli qo'llanildi.

2.9 Elishay yallig'lanishga qarshi sitokinlarni aniqlash

RAW264.7 hujayralari 16 soat davomida namuna va LPS bilan ishlov berildi. Madaniyat supernatanti yig'ildi va 10 daqiqa davomida 10 000 aylanish tezligida santrifüj qilindi. TNF‑, IL‑1 va IL‑6 ning sekretsiya kontsentratsiyasi Elishay to‘plamlari yordamida aniqlangan.

2.10 Western Blot tahlili

Namunalar va LPSning 45 daqiqalik aralashuvidan so'ng, RIPA lizis buferi yordamida umumiy hujayra oqsili ajratildi. Protein kontsentratsiyasi BCA to'plami bilan aniqlangan. Teng miqdordagi protein namunasi (har bir chiziq uchun 50 ug) denatüratsiya qilindi, SDS‑PAGE elektroforezi bilan ajratildi va PVDF membranasiga o'tkazildi. Membrana 1 soat davomida 5% yog'siz sutli TBST eritmasi bilan bloklandi, so'ngra birlamchi antikorlar bilan kechasi 4 darajada inkubatsiya qilindi. TBST bilan takroriy yuvishdan so'ng, ikkilamchi antikor xona haroratida 1 soat davomida inkubatsiya qilindi. Maqsadli oqsil guruhlari ECL kimilyuminesans reagenti tomonidan ingl. Fosforlanish-oqsil / umumiy-oqsil nisbatini hisoblash uchun tarmoqli kulrang shkala tahlili o'tkazildi.

2.11 Statistik tahlil

Grafik tuzish va statistik tahlil qilish uchun GraphPad Prism 8.0.2 dasturidan foydalanilgan. Ma'lumotlarni taqqoslash uchun bir tomonlama ANOVA va t-testi qabul qilindi.P < 0.05 represented statistically significant difference; P < 0.01 and P < 0.001 stood for higher significance. All experimental data were expressed as mean ± standard deviation (\(\bar{x}\pm s\)).

3. Natijalar

3.1 Bir faktorli eksperimental natijalar

Dilim qalinligi maqsadli glikozid tarkibiga sezilarli ta'sir ko'rsatdi. 0,2 sm qalinlikdagi bo'laklarni ortiqcha bug'lash oson edi, bu esa faol moddalarning termal parchalanishiga olib keldi. Haddan tashqari qalin bo'laklar ichki faol moddalarning chiqishiga to'sqinlik qildi. Bug'lash vaqti 10 minutga va quritish harorati 60 darajaga belgilangan bo'lsa, bitta faktorli skriningda 0,4 sm bo'lak qalinligining optimal parametri bo'ldi.

Bug'da pishirish vaqtining etarli emasligi o'simlik hujayra tuzilishini to'liq yo'q qila olmadi va glikozidlarning past hosil bo'lishiga olib keldi. Bug'lash vaqti 6 daqiqadan oshganda, to'qimalarning parchalanishi sodir bo'ldi va echinacoside, shuningdek, akteozid degradatsiyaga uchradi. Ruxsat etilgan bo'lak qalinligi 0,4 sm va quritish harorati 60 daraja bo'lganda, bug'lashning eng yaxshi vaqti 6 daqiqa edi.

Muayyan diapazonda feniletanoid glikozidlarning tarkibi quritish haroratining oshishi bilan birga ko'tarildi, ammo harorat 60 darajadan oshib ketganda parchalanish sodir bo'ldi. Dilim qalinligi 0,4 sm va bug'lash vaqti 6 minut bo'lgan 60 daraja bir faktorli skriningda eng yaxshi kompleks ko'rsatkichni ko'rsatdi.

3.2 Javob berish sirtini optimallashtirish va tekshirish testi

Variant tahlili akteozid va echinacoside tarkibi uchun regressiya modellari muhim ekanligini ko'rsatdi (P < 0.05, P < 0.01). The lack‑of‑fit term was non‑significant (P >0,05), modelning yaxshi moslashish darajasini ko'rsatadi. Aniqlash koeffitsienti R² 1 ga yaqin edi, bu taxmin qilingan qiymat va haqiqiy eksperimental ma'lumotlar o'rtasidagi yuqori korrelyatsiyani isbotladi.

Faktorlarning akteozid tarkibiga ta'sir qilish tartibi bo'lak qalinligi > quritish harorati > bug'lash vaqti edi. Echinacoside tarkibi uchun buyurtma bug'lash vaqti > quritish harorati > tilim qalinligi edi.

Dasturiy ta'minot tomonidan hisoblangan nazariy optimal parametrlar bo'lak qalinligi 0,600 sm, bug'lash vaqti 5,685 min va quritish harorati 57,009 daraja edi. Amaliy ishlab chiqarish holatini hisobga olgan holda parametrlar bo'lak qalinligi 0,6 sm, bug'lash vaqti 6 min va quritish harorati 57 darajaga o'rnatildi. Parallel tekshirish tajribalarining uchta guruhi akteozid miqdori 7,25% va ekinakozid miqdori 31,62% ni tashkil etdi. Amaliy qiymat va nazariy prognoz qilingan qiymat o'rtasidagi og'ish mos ravishda 3,89% va 4,92% ni tashkil etdi, bu esa ushbu javob-yuza modelining ishonchliligini ko'rsatdi.

3.3 Hujayra hayotiyligini skrining natijasi

0-100 ug/ml konsentratsiya oralig'ida,Cistanche tubulosaQaynatma parchasi ekstrakti RAW264.7 hujayralarida aniq sitotoksiklikka ega emas edi va ozgina proliferatsiyani rag'batlantiruvchi ta'sir ko'rsatdi. Konsentratsiya 200 ug/ml va undan yuqoriga yetganda, hujayra hayotiyligi sezilarli darajada kamaydi. Shuning uchun 12,5 ug / ml, 25 ug / ml, 50 ug / ml va 100 ug / ml keyingi hujayra tajribalari uchun ishchi konsentratsiyalar sifatida tanlangan.

3.4 Hujayra ichidagi ROS darajasiga ta'siri

Solventni nazorat qilish guruhi bilan solishtirganda, LPS model guruhi sezilarli darajada yuqori hujayra ichidagi ROS floresans intensivligini ko'rsatdi (P < 0.001), proving the successful establishment of oxidative‑stress injury model. Pretreatment of Cistanche tubulosaekstrakt dozaga bog'liq holda ortiqcha ROS to'planishini kamaytiradi (P < 0.001 versus model group).

3.5 NO, MDA va Antioksidant bilan bog'liq ko'rsatkichlar to'g'risidagi nizom

LPS stimulyatsiyasi RAW264.7 hujayralarida NO va MDA tarkibining keskin oshishiga olib keldi. LPS model guruhi bilan solishtirganda, ekstrakt aralashuvi dozaga bog'liq tendentsiya bilan NO darajasini sezilarli darajada pasaytirdi. 12.5 ug/ml ekstrakti MDA tarkibiga aniq ta'sir ko'rsatmadi, 25‑100 ug/ml ekstrakti esa MDA kontsentratsiyasini sezilarli darajada kamaytirdi (P < 0.001).

LPS bilan davolashdan so'ng, SOD, CAT, LDH va hujayra ichidagi GSH tarkibining faolligi sezilarli darajada kamaydi. 12.5 ug/ml ekstrakti CAT va LDH faoliyatini yaxshilamasdan SOD faolligini oshirishi mumkin. 25‑100 ug/ml konsentratsiyadagi ekstrakt SOD, CAT, LDH ferment faolligini va konsentratsiyaga bog'liq holda GSH tarkibini sezilarli darajada oshirdi.

3.6 Yallig'lanishga qarshi sitokin sekretsiyasiga inhibitiv ta'sir

LPS stimulyatsiyasi RAW264.7 makrofaglarida TNF‑ , IL‑1 va IL‑6 ning katta miqdorda chiqarilishiga sabab bo‘ldi.Cistanche tubulosaQaynatma bo'lagi ekstraktidan oldingi davolash yuqorida aytib o'tilgan uchta yallig'lanishga qarshi sitokinlarning sekretsiyasini sezilarli darajada bostirdi (P < 0.001), presenting prominent dose‑dependent anti‑inflammatory property.

3.7 p38/AKT/JNK/NF‑kB signalizatsiya yo‘lida modulyatsiya

Solvent-nazorat guruhi bilan solishtirganda, LPS aralashuvi p‑p38/p38, p‑AKT/AKT, p‑JNK/JNK va p‑NF‑kB/NF‑KB ning fosforlanish darajasini oshirdi. O'rta va yuqori dozali ekstrakt guruhlari p‑p38/p38 va p‑JNK/JNK nisbatlarini sezilarli darajada kamaytirdi. Barcha kontsentratsiya guruhlari p‑AKT/AKT va p‑NF‑kB/NF‑kB darajalarini pasaytiradi (P < 0.05 or P < 0.001). Results illustrated that optimized Cistanche tubulosaQaynatma parchasi ekstrakti protein fosforillanishini inhibe qilish orqali p38/AKT/JNK/NF‑kB signalizatsiya yo'lining faollashuvini chekladi.

4. Munozara

Hozirgi ishlov berish talablariCistanche tubulosaXitoy farmakopeyasida qayd etilgan, faqat aniq miqdoriy parametrlarsiz sifatli operatsiya bosqichlarini tavsiflaydi. Oldingi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, turli xil qayta ishlash usullari xom va qayta ishlangan o'rtasidagi kimyoviy tarkib va ​​farmakologik faollikda katta farqlarga olib keladi.Cistanche tubulosanamunalar. Qayta ishlangan mahsulotlar xom ashyolarga qaraganda yaxshiroq antioksidant va immunitetni tartibga soluvchi ko'rsatkichlarga ega.

Ushbu tadqiqotda javob-sirt metodologiyasi orqali optimallashtirilgan zamonaviy bug'lash-quritish jarayoni ko'plab an'anaviy qayta ishlash usullariga qaraganda echinacoside va acteosidning ancha yuqori hosilini oldi. Bu shuni ko'rsatadiki, tilim qalinligi, bug'lash davomiyligi va quritish harorati ustidan aniq nazorat feniletanoid-glikozid tarkibini samarali ushlab turishi va yaxshilashi mumkin.Cistanche tubulosa.

Oksidlanish stressi va yallig'lanish bir-biri bilan chambarchas bog'liq patologik jarayonlardir. Haddan tashqari ROS lipid peroksidatsiyasiga va MDA to'planishiga olib keladi; shu bilan birga, u quyi oqimdagi yallig'lanish kaskadlarini faollashtiradi va NO va bir nechta yallig'lanishga qarshi sitokinlarning paydo bo'lishiga yordam beradi. Yallig'lanish vositachilari ROS ishlab chiqarishni yanada tezlashtiradi va shafqatsiz patologik tsiklni hosil qiladi. Bizning uyali eksperimental natijalarimiz optimallashtirilganligini ko'rsatdiCistanche tubulosaQaynatma bo'lagi ekstrakti ortiqcha ROSni yo'q qilishi, NO va MDA oksidlovchi zarar belgilarini kamaytirishi, SOD, CAT, LDH bilan ifodalangan antioksidant ferment tizimining faolligini tiklashi va hujayra ichidagi GSHni to'ldirishi, shuningdek, aniq doza ta'siri bilan yallig'lanishga qarshi sitokinlarning chiqarilishini inhibe qilishi mumkin.

p38, MAPK oilasiga mansub JNK va AKT‑NF‑kB o'qi makrofaglarning oksidlovchi-yallig'lanish reaktsiyasiga vositachilik qiluvchi asosiy signal uzatish markazlaridir. LPS stimulyatsiyasi p38, JNK va AKT fosforillanishini rag'batlantiradi, NF‑kB ni yanada faollashtiradi va ko'plab yallig'lanishga qarshi genlarning transkripsiyasini qo'zg'atadi. Western-blot ma'lumotlari buni aniqladiCistanche tubulosaQaynatma bo'lagi ekstrakti p38, JNK, AKT va NF‑KB ning fosforillanish faollashuvini blokladi. Optimallashtirilgan qayta ishlash natijasida yuqori tarkibli echinakozid va akteozid birgalikda RAW264da LPS sabab bo'lgan oksidlovchi-stress va yallig'lanish shikastlanishini engillashtirish uchun p38/AKT/JNK/NF‑kB signalizatsiya kaskadini bostirishga yordam beradi.

Ushbu tadqiqotda hali ham cheklovlar mavjud. Barcha farmakologik baholashlar in-vitro hujayra modelida yakunlandi. Qayta ishlangan mahsulotning in-vivo samaradorligi va metabolik xususiyatlarini tekshirish uchun hayvonlar darajasida qo'shimcha tajribalar talab qilinadi.Cistanche tubulosaqaynatma bo'laklari.

Xulosa qilib aytganda, ushbu tadqiqot uchun miqdoriy va kengaytiriladigan zamonaviy qayta ishlash texnologiyasini o'rnatdiCistanche tubulosaqaynatma bo'laklari. Qayta ishlash parametrlari ostida bo'lak qalinligi 0,6 sm, bug'lash vaqti 6 min va quritish harorati 57 daraja, asosiy feniletanoid glikozidlarning tarkibi sezilarli darajada yaxshilanadi. Qayta ishlangan damlama bo'laklari p38/AKT/JNK/NF‑KB signalizatsiya yo'lini inhibe qilish orqali LPS bilan stimulyatsiya qilingan RAW264.7 makrofaglarida oksidlovchi-stress va yallig'lanish shikastlanishini engillashtirishi mumkin. Ushbu tadqiqot sanoatlashgan ishlab chiqarish uchun amaliy texnik ma'lumot beradi va Shinjondan ishlab chiqarilgan funktsional oziq-ovqat va parhez qo'shimchalarini ishlab chiqish uchun eksperimental asoslarni taklif qiladi.Cistanche tubulosa.

Minnatdorchilik

Bu ish Shinjon Qishloq xoʻjaligi fanlari akademiyasi (xjnkq‑2022022) va Shinjon “Tyanchi doktorlik dasturi” (2021) ning Yoshlar fan va texnologiyalari magistral innovatsion salohiyatini oshirish loyihasi tomonidan qoʻllab-quvvatlandi.

Ma'lumotnomalar

[1] Lin J, Yu H, Zhao Y va boshqalar. Ekinakozidni ekstraktsiya qilishCistanche tubulosava sepsis kalamushlarida jigar shikastlanishiga uning himoya ta'sirini o'rganish.Oziq-ovqat fani va texnologiyasi. 2023;43:e010523.

[2] Guo J, Tang S, Miao Y va boshqalar. Lignan glikozidlarining yallig'lanishga qarshi ta'siriCistanche tubulosaPI3K/AKT yoʻli orqali LPS/IFN‑-induktsiyalangan RAW264.7 makrofag hujayralariga tayanadi.Hozirgi farmatsevtika biotexnologiyasi. 2021;22(10):1380‑1391.

[3] Rani V, Deep G, Singx RK va boshqalar. Oksidativ stress va metabolik kasalliklar: patogenezi va terapevtik strategiyalar.Hayot fanlari. 2016;148:183‑193.

[4] Martinez-de-Toda I, Ceprian N, Diaz-de-Kastro E. Inson patofiziologiyasida oksi-yallig'lanish-qarishning roli.Hujayralar. 2021;10(11):2974.

[5] Chung YC, Song SJ, Li A va boshqalar. Isobavachin MAPK va NF-kB signalizatsiya yo'llarini bostirish orqali makrofaglar va zebrafishlarda lipopolisakkaridlar keltirib chiqaradigan yallig'lanish reaktsiyalarini engillashtiradi.Etnofarmakologiya jurnali. 2024;321:117501.