P2X retseptorlari va buyrak funktsiyasi

Aloqa: Audrey Xu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Metyu A. Beyli1∗, Robert J. Unvin2 va Devid G. Shirli2

To'plangan dalillar shuni ko'rsatadiki, ATP/P2 retseptorlari tizimi avtokrin yoki parakrin ta'sir ko'rsatib, keng doiradagi kasalliklarga ta'sir qilishi mumkin.buyrakfunktsiyalari. Ko'pchilikda P2X retseptorlari bo'linmalari aniqlanganbuyraktomirlar va har bir nefron segmentida; dan ATP chiqariladibuyrakepiteliya hujayralari va ATP degradatsiyasi uchun mas'ul bo'lgan fermentlar tomirlar va tubulalarda ifodalangan. dan chiqarilgan ATP tomonidan afferent arteriolalarda P2X1 retseptorlarini stimulyatsiya qilishbuyraknerv terminallari yoki qo'shni makula densa hujayralaridan vazokonstriksiyani keltirib chiqaradi va ularning tartibga solinishiga hissa qo'shadi.buyrakgemodinamika. Naychada turli xil P2X ta'sirlari haqida dalillar mavjud: proksimal quvurli reabsorbtsiyani inhibe qilish; Henle halqasining qalin ko'tarilish bo'lagida Na plus K plus 2Cl- kotransporter faolligini (azot oksidi sintezining kuchayishi orqali) inhibe qilish; distal tubulada magniyning reabsorbtsiyasini inhibe qilish; va yig'ish kanalida natriy va suvning reabsorbtsiyasini modulyatsiya qilish. Va nihoyat, P2X retseptorlari, xususan, P2X7 subbirliklari buyrak patologiyasida, xususan, kist shakllanishida muhim rol o'ynaydi.polikistikbuyrakkasallikva ichidabuyrakyallig'lanish. © 2012 WILEY-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, Weinheim.

cistanche sharhlari: buyrak faoliyatini yaxshilashbuyrakfunktsiyasi

KIRISH

Nukleotidlar va P2 retseptorlari butun tanada keng ko'lamli fiziologik rollarni bajaradilar. Garchi ushbu tizimning avtokrin/parakrin ta'sirini bilishbuyraklarboshqa organlar/to'qimalardan ortda qoldi, so'nggi o'n yillikda bo'shliqni yopishda katta yutuqlarga erishildi. Hozirgacha, ko'pchilikbuyraktadqiqotlar P2Y retseptorlariga qaratilgan1; buyrak P2X retseptorlari va ularning funktsiyasi haqida ma'lumot yanada cheklangan.

Buyraklarda ATP sekretsiyasi

Deyarli barcha hujayralar nukleotidlarni chiqarishi mumkin vabuyrakqon tomir va epiteliya hujayralari bundan mustasno emas. Vekaria va boshqalar 200-300 nmol/L in vivo jonli ravishda kalamush proksimal konvolyutsiyalangan kanalchalarida (PCT) intraluminal ATP kontsentratsiyasini xabar qilishdi, bu glomerulyar filtratdagi konsentratsiyadan sezilarli darajada yuqori, bu PCT hujayralari tomonidan ATP sekretsiyasini ko'rsatadi. Leyptsiger guruhi in vitro perfuziya qilingan sichqonchaning medulyar qalin ko‘taruvchi oyoq-qo‘llaridan (metallardan) foydalangan holda, luminal bosimning oshishi hujayra ichidagi Ca2 plyus ([Ca2 plyus ]i) ko‘tarilishiga olib kelishini ko‘rsatdi, bu esa o‘zlari nukleotidlar chiqishiga bog‘liq edi. , P2Y2 retseptorlarini ifodalovchi astrositlar o'z-o'zidan va agonist-induktsiyali nukleotidlarning chiqarilishini namoyish qilish uchun biosensor sifatida ishlatilgan. Vazopressin 200-300 nmol / L gacha bo'lgan nukleotidlarning eng yuqori kontsentratsiyasini keltirib chiqardi. P2Y2 retseptorlari UTP va ATPni ajrata olmaganligi sababli, chiqarilgan maxsus nukleotid(lar)ni aniqlab bo'lmadi. Xuddi shu tadqiqotda, Odgaard va boshq.4 vazopressin, shuningdek, in vitro perfuziya qilingan sichqoncha kortikal yig'uvchi kanaldan (CCD) nukleotidlar sekretsiyasini qo'zg'atgan; intraluminal kontsentratsiyalar yana 300 nmol / L ga yaqinlashdi.

Garchi bu kontsentratsiyalar P2X retseptorlarini faollashtirish chegarasidan past bo'lsa-da, ommaviy fazani o'lchash hujayra membranasidagi kontsentratsiyalarni deyarli kam baholaydi, chunki ektonukleotidazalar ajralib chiqadigan nukleotidlarni tezda metabollaydi (pastga qarang).

ATP chiqishi mexanizm(lari).

dan nukleotidlar ajralish mexanizmibuyrakquvurli hujayralar hali o'rnatilmagan va segmentdan segmentga farq qilishi mumkin. ATP o'z ichiga olgan pufakchalarning ekzotsitozi bir imkoniyatdir; Bundan tashqari, turli kanallar/transportchilar ishtirok etgan.5 Maksi-anion kanallari NaCl miqdorining ko'payishiga javoban makula densa hujayralarining bazolateral membranasi bo'ylab ATP tashilishida vositachilik qiladi6 (pastga qarang). Kistik fibrozning transmembran o'tkazuvchanligini regulyatori (CFTR) kanallari ham oqim yo'li sifatida ko'rib chiqildi, ammo bu imkoniyat qat'iy qo'llab-quvvatlanmadi.5 Distal nefronda ATP ajralishida konneksin (Cx) yarim kanallarining roli haqida dalillar keldi. Cx30 nokaut sichqonlari yordamida o'tkazilgan tadqiqotdan.7 Qisman bo'lingan ochiq CCD'lar in vitro mikroperfüzyon va P2X2 retseptorlarini ifodalovchi biosensorlar CCD hujayralarining apikal membranalari bilan bevosita aloqada bo'lgan. Yovvoyi tipdagi sichqonlarda quvur oqimining ko'payishi suraminga sezgir (ya'ni nukleotid vositachiligida) biosensor hujayralarida [Ca2 plus] I ning oshishiga olib keldi, Cx30 nokaut sichqonlarida esa javob deyarli yo'q edi. Biroq, Cx yarim kanallari fiziologik sharoitda ochilishiga shubhalar mavjud. Strukturaviy gomologik panneksinlar, aksincha, fiziologik diapazonda membrana depolarizatsiyasi orqali faollashishi mumkin. Panneksinlar ATP o'tkazuvchan yarim kanallarini ham hosil qilishi mumkin, ammo agar mavjud bo'lsa, ularning rolini aniqlash uchun qo'shimcha tadqiqotlar talab qilinadi.buyrak.5

EKTONUKLEOTIDAZALAR

dan ajralib chiqadigan nukleotidlarbuyraktomirlar va epiteliya hujayralaridan sirtda joylashgan va eruvchan fermentlar (ektonukleotidazalar) tomonidan turli nukleotidlarga yoki nukleozidlarga tez parchalanadi. Ektonukleotidazalarning to'rtta oilasi ektonukleozid trifosfat fosfohidrolaza (NTPDazalar), ektonukleotid pirofosfataza fosfodiesteraza (NPP), ekto{0}}'-nukleotidaza va ishqoriy fosfatazalar mavjud. Har to‘rt oila a’zolarining shaxsi aniqlanganbuyrak.8 P2X retseptorlari uchun asosiy ligand ATPning o'zi bo'lganligi sababli, bu fermentlar P2X vositachiligidagi ta'sirga katta ta'sir ko'rsatishi mumkin. Nukleotidlarni parchalaydigan fermentlarga qo'shimcha ravishda, fosforillovchi fermentlarning ikkita oilasi mavjud bo'lib, ular nukleozid 5-trifosfatlarning terminal fosfatini nukleozid 5-difosfatlarga o'tkazishni katalizlovchi nukleozid difosfat kinazlar va ATP dan kataali ishlab chiqaradigan adenilat kinazlar mavjud. va AMP yoki aksincha, tegishli nukleotidlarning kontsentratsiyasiga qarab. Dastlab hujayra sitozoliga cheklangan deb ishonilgan bo'lsa-da, fosforillovchi fermentlar hujayra membranasida ham mavjudligi haqida dalillar mavjud.9 Ektonukleotidazalar va fosforillovchi fermentlarning asosiy katalitik faolligi.buyrak1-jadvalda umumlashtirilgan.

NTPDase oilasi sakkiz a'zoni o'z ichiga oladi, ulardan to'rttasi (NTPDases 1, 2, 3 va 8) hujayradan tashqari nukleotidlarni gidrolizlaydi. NTPDase1 deyarli teng afzallik bilan ATP va ADPni gidrolizlaydi, NTPDase2 esa ATP uchun ko'proq afzalliklarga ega, shuning uchun ADP to'planishiga olib keladi; NTPDase 3 va 8 o'zlarining afzal ko'rishlari bo'yicha oraliqdir.8 Sichqonlar va sichqonlarda NTPDase1 ko'p hollarda mashhurdir.buyrakqon tomirlari va Henlening yupqa ko'tarilish a'zosi va medullar yig'uvchi kanalida (CD) mavjud. NTPDase2 Bowman kapsulalariga va proksimal tubuladan tashqaridagi ko'p nefron segmentlariga immunolokalizatsiya qilingan; NTPDase3 ning buyrak ichidagi ifodasi faqat kalamushda tekshirilgan, u erda NTPDase2 kabi qalin ko'tarilgan oyoq-qo'l (TAL), distal tubula va CDda topilgan.8 NTPDase8 haqida ma'lumot to'liq emas.

NPP oilasi etti a'zodan iborat, ammo faqat NPP1 dan NPP3gacha nukleotidlarni gidrolizlashga qodir. AESlarning buyrak ichidagi tarqalishi to'g'risidagi ma'lumotlar cheklangan. Sichqoncha proksimal tubulalarida va distal tubulalarning bazolateral membranalarida NPP1 oqsili uchun binoni aniqlangan; NPP3 uchun ko'zga ko'ringan bo'yash kalamush glomeruli va pars recta apikal membranasida topilgan, lekin undan uzoqroq segmentlarda emas.8 Ekto-5 -nukleotidaza nukleotidlarning nukleozidga gidrolizlanishining yakuniy bosqichini katalizlaydi. U kalamush PCT apikal membranalarida va butun distal nefronning interkalatsiyalangan hujayralarida, shuningdek peritubulyar bo'shliqda joylashgan.

Ishqoriy fosfataza PCT apikal membranasida va kalamush pars rektasida aniqlangan.buyraklar. Ishqoriy fosfatazalar ATP ni to'g'ridan-to'g'ri adenozingacha parchalash qobiliyatiga ega bo'lgan keng substrat o'ziga xosligiga ega bo'lsa-da, adenin nukleotidlari uchun Km qiymatlari past millimolyar diapazonda bo'lib, bu fermentning nukleotidlarning parchalanishiga nisbatan fiziologik ahamiyatiga shubha tug'diradi.

cistanche tubolosa sog'liq uchun foyda: yaxshilashbuyrakfunktsiyasi

P2X RESEPTORLARI VA BUYRAK FUNKSIYASI

Ko'rib chiqilayotgandabuyrakP2X retseptorlari bilan bog'liq bo'lgan harakatlarni hisobga olish kerak, ular qon tomir va qon tomirlarida mavjud bo'lgan ko'plab P2Y retseptorlari bilan birgalikda ishlashlari mumkinligini yodda tutish kerak.buyrakepiteliy. Bundan tashqari, har qanday plazma membranalaribuyrakhujayra turli xil P2 retseptorlari subtiplarini o'z ichiga olishi mumkin va epiteliya hujayralarida retseptorlar populyatsiyasi apikal va bazolateral sohalarda har xil bo'lishi mumkin. Berilgan P2 retseptoriga ma'lum bir fiziologik javobni tayinlash qiyin bo'lgan bo'lsa-da, rezolyutsiyani oshirish uchun bir qator yondashuvlardan foydalanish mumkin. Birinchidan, immunohistokimyoviy usullar qiziqish mintaqasida (va iloji bo'lsa, membrana domenida) mavjud bo'lgan pastki tiplarni aniqlashi mumkin. Ikkinchidan, farmakologik yondashuvlar o'ziga xos retseptorlarni in situ rag'batlantirish yoki antagonize qilish uchun ishlatilishi mumkin. Biroq, yozish paytida, P2X subbirliklarining har qanday qismi uchun chinakam selektiv agonist etishmayapti, garchi Ip5I (P2X1 antagonisti) va A-740003 (P2X7 antagonisti) kabi bir nechta selektiv antagonistlar mavjud bo'lsa-da.10 Shunday qilib, taxminiy xulosalar chiqarish mumkin bo'lgan farmakologik profilni ta'minlash uchun odatda turli agonistlarga individual javoblarni solishtirish kerak.

Qo'shimcha yondashuv - bu qiziqish retseptorini kodlovchi gen o'chirilgan "nokaut" sichqonlaridan foydalanish. Biroq, bu o'ziga xos muammolardan xoli emas. Muhim funktsiyani bajaradigan retseptorlarning kichik turini global yo'q qilish kompensatsion o'zgarishlarga olib kelishi mumkin. ichidagi P2 retseptorlari profilibuyrakkeyin umumiy chiqarish tezligini tiklash uchun o'zgarishi mumkin, bu esa keyinchalik retseptorning normal roli haqida noto'g'ri xulosalarga olib kelishi mumkin. Cre-loxP tizimi gen-maqsadli yondashuvga aniqlik darajasini qo'shib, to'qima yoki hujayra turiga xos o'chirishga imkon beradi, ammo bu hali buyrak P2 retseptorlarini tadqiq qilishda qo'llanilmagan.

BUYRAKDA P2X RESEPTORLARINI TARQATISHI

Qon tomirlari

Shakl 1(A) P2X retseptorlarining tarqalishi haqidagi mavjud bilimlarni umumlashtiradibuyrakkalamushdagi qon tomir va quvurli tuzilmalar. Immunogistokimyoviy va g'arbiy tahlillar P2X1 retseptorlari kalamushning tomir silliq mushaklarida mavjudligini ko'rsatadi.buyrak, yoysimon va interlobulyar arteriyalarda va afferent arteriolada emas, balki efferentda.buyrak,11 va molekulyar dalillar yaqinda hech bo'lmaganda yoysimon va interlobulyar arteriyalarda P2X4 subbirliklari uchun taqdim etilgan.12 Hujayra madaniyati tizimlarida mRNKni aniqlash va/yoki agonist pro-filling asosida, P2X2,3,4,5 va 7 Glomerulyar mezangial hujayralarda subbirliklar aniqlangan, ammo ulardan faqat kalamush glomerulusida P2X7 immunoreaktivligining past va o'zgaruvchan ifodasi topilgan.13

1-rasm|Sichqonlarning buyragidagi P2X retseptorlari. (A) Mahalliylashtirish. Faqat immunohistokimyoviy tadqiqotlar va/yoki Western blottingdan aniq dalillar olingan retseptorlar ko'rsatilgan. Mumkin bo'lgan hollarda apikal (a), bazolateral (b) yoki hujayra ichidagi (ichki) joylashuvi ko'rsatiladi. (B) P2X retseptorlari stimulyatsiyasining taxminiy ta'siribuyrakfunktsiyasi.

Tubula

Immunohistokimyoviy tadqiqotlar kalamush PCTda P2X6 retseptorlarining bazolateral ifodasini va pars rektaning S3 segmentida P2X5 retseptorlarining apikal ifodasini aniqladi; P2X4 oqsilining past darajadagi ifodasi PCTda ham kuzatilgan, ammo membrana sohasi aniqlanmagan.13

Henlening yupqa pastga tushadigan va ko'tariladigan oyoq-qo'llarining kalamushlarida P2X4 va P2X6 retseptorlari uchun ba'zi immunohistokimyoviy dalillar mavjud (membran domeni ko'rsatilmagan; Ref 13). Xuddi shu narsa TAL uchun ham amal qiladi. Bundan tashqari, kalamush TAL transkriptomini o'rganish P2X3 va P2X4 retseptorlari uchun dalillarni topdi.14 Bazolateral P2X retseptorlari uchun funktsional dalillar Jensen va boshqalar tomonidan taqdim etilgan. [Ca2 plyus ]i da, undan keyin barqaror plato; boshlang'ich cho'qqisi P2Y2 nokaut sichqonlaridan mTALda zaiflashgan bo'lsa, plato fazasi davom etdi, bu esa qo'shimcha bazolateral P2 retseptorlari mavjudligini ko'rsatdi. Plato fazasi hujayradan tashqari Ca2 plyusga bog'liq bo'lganligi sababli, mualliflar Ca2 plyus o'tkazuvchan P2X retseptorini taklif qilishdi.

Distal nefronda immunohistokimyoviy tadqiqotlar kalamush distal tubulasining bazolateral membranasida P2X4 va P2X6 retseptorlarini aniqladi13 va CDda P2X retseptorlarining keng doirasi aniqlandi. Immunohistokimyo P2X1 (faqat natriy bilan cheklangan kalamushlar; faqat interkalatsiyalangan hujayralar), CCD va medullar CDda P2X2, P2X4, P2X5 va P2X6 subbirliklarining ifodalanishini ko'rsatdi.13,15 Asosiy hujayralardagi membrana lokalizatsiyasiga nisbatan P2X4 va 6 edi. apikal va bazolateral membranalarda topilgan; P2X2 va 5 bo'linma uchun bo'yash "hujayra ichidagi" deb belgilandi.15 Sichqonchada immunohistokimyo P2X1 va P2X4 subbirliklarini medullar CD hujayralarining apikal membranasiga joylashtirdi.16 Insonning tahlilibuyraktranskriptomtransport xususiyatlarini ta'minlovchi 258 gen uchun teglar CDda sezilarli miqdorda aniqlangan yagona P2X retseptorlari P2X4 ekanligini aniqladi. 17

P2X RECEPTORLARINI rag'batlantirishning TA'SIRLARI

P2X retseptorlari faollashuvining fiziologik ta'siribuyraktomirlar va tubulaning bo'limlari 1-rasmda (B) umumlashtirilgan.

Qon tomirlari

ATPni tomir ichiga yuborishbuyrakarteriya o'zgaradibuyrakqon tomir qarshiligi, garchi javobning tabiati va kattaligi tomirlarning bazal tonusiga bog'liq. Izolyatsiya qilingan perfused kalamushdan foydalanishbuyrakPreglomerulyar arteriyalar ATP ga nisbatan sezgir emasligi aniqlandi, hatto vaqtinchalik vazokonstriksiyani keltirib chiqarish uchun mikromolyar kontsentratsiyalar talab qilinadi, afferent arteriola esa submikromolyar diapazondagi konsentratsiyalarda doimiy qisqarishni boshdan kechirdi. Efferent arteriola ATP ga to'liq javob bermas edi.11 Shunday qilib, bu preparatda P2X1 retseptorlari stimulyatsiyasi tufayli ATPning buyrak ichiga yuborilishi odatda vazokonstriktivdir. Biroq, qachon asosiybuyrakqon tomir qarshiligi yuqori, ATP P2Y vositachiligida azot oksidi (NO) ishlab chiqarilishi tufayli vazodilatatsiyani keltirib chiqaradi. dan chiqarilgan ATPbuyraknerv terminallari to'g'ridan-to'g'ri tomirlarning silliq mushaklariga ta'sir qiladi, bu esa P2X{1}}vazokonstriksiyani keltirib chiqaradi, ATPning endotelial P2Y retseptorlari yaqinida chiqishi esa NO sintezi va vazodilatatsiyaga yordam beradi.

Cistancheuchun yaxshibuyrakfunktsiyasi

Buyrak avtoregulyatsiyasi

Avtoregulyatsiyabuyrakqon oqimi kamida ikkita mexanizmning birgalikda ta'siridan kelib chiqadi: tomir silliq mushaklarining ichki miyogenik javobi va tubuloglomerulyar aloqa (TGF). Miyojenik javob preglomerulyar tomirlar daraxti bo'ylab ishlaydi, kanal orqali kaltsiy oqimi va natijada tomir silliq mushaklarining vazokonstriksiyasi orqali transmural bosimning oshishiga javob beradi. Aniq signalizatsiya mexanizmlari aniqlanmagan, ammo ATP ning mahalliy chiqarilishi bilan bog'liq. Afferent arteriolada bosim bilan bog'liq vazokonstriksiya P2 retseptorlari antagonistlari PPADS yoki suramin yoki P2 retseptorlari tizimining to'yinganligi va keyinchalik desensibilizatsiyasi bilan sezilarli darajada to'xtatiladi. P2 tizimining markaziy roli P2X{6}}defisitli sichqonlarda o'tkazilgan tajribalar orqali yanada ta'kidlanadi, bunda afferent arteriola diametrining bosim ta'sirida qisqarishi bekor qilinadi.11 Bu klinik jihatdan ahamiyatli bo'lishi mumkin, chunki P2X1 retseptorlari funktsiyasining buzilishi pasayishning asosi bo'lishi mumkin. gipertoniya bilan bog'liq avtoregulyatsiyada.18

TGF - bu Henle halqasidan chiqadigan suyuqlikdagi NaCl kontsentratsiyasining o'zgarishi (naychali suyuqlik oqimi tezligining o'zgarishi tufayli) kelib chiqqan nefronning glomerulyar filtratsiya tezligida teskari o'zgarishlarni keltirib chiqaradigan mexanizm. TGF jukstaglomerulyar apparati (JGA) tomonidan vositachilik qiladi, bu sensor - makula densa va effektor - afferent arteriolaning granüler hujayralarini o'z ichiga oladi; JGA ning boshqa komponentlari (masalan, mezangial hujayralar) ham rol o'ynaydi.

Bell va boshqalar. fiziologik diapazonda luminal NaCl kontsentratsiyasining oshishiga javoban makula densa hujayralarining bazolateral membranasi orqali ATP chiqarilishini ko'rsatdi va kortikal interstitsialdagi ATP kontsentratsiyasi in vivo jonli ravishda TGFni inhibe qilish yoki faollashtirishga mos ravishda javob berishini ko'rsatdi.6 Bu ATP P2X1 retseptorlariga ta'sir qiluvchi TGF uchun asosiy signalizatsiya molekulasi ekanligini ko'rsatadi. Shu bilan birga, gen-maqsadli tajribalar shuni ko'rsatadiki, ATP TGF afferent arteriolaning siqilishiga olib keladigan yakuniy signal bo'lishi mumkin emas; ATP ning adenozinga gidrolizi juda muhim ko'rinadi. In vivo TGF javoblari adenozin A1 retseptorlari yoki ekto{5}}'-nukleotidazaga ega bo'lmagan sichqonlarda zaiflashadi, bu ferment ATPning adenozinga parchalanishining so'nggi bosqichini katalizlaydi.11 Bundan tashqari, yaqinda o'tkazilgan in vivo tadqiqot shuni ko'rsatdiki, vena ichiga yuborish. ATP retseptorlari antagonistlari TGF.19 ga hech qanday ta'sir ko'rsatmadi

Tubula

Proksimal tubula

Proksimal kanalchada P2 retseptorlarini stimulyatsiya qilishning asosiy aniqlangan ta'siri apikal Na plyus / H plyus almashinuvchi (NHE3) faolligining pasayishi natijasida natriy bikarbonat reabsorbtsiyasini inhibe qilishdir. Biroq, selektiv agonist/antagonist bilan davolash asosida bunga P2X retseptorlari emas, balki apikal P2Y1 vositachilik qilishiga shubha yo'q.20 P2 retseptorlari stimulyatsiyasining boshqa proksimal naychali ta'sirlari orasida fosfat reabsorbtsiyasini inhibe qilish va glyukoza so'rilishini rag'batlantirish kiradi. va glyukoneogenez, lekin, yana, P2Y retseptorlari mas'ul ko'rinadi. Ushbu segmentdagi P2Y retseptorlari hukmronligi yaqinda P2X retseptorlari agonistlari, meATP va meATP anesteziya qilingan kalamushlarga tomir ichiga yuborilgan tadqiqot bilan shubha ostiga olindi. Har bir agonist natriuretik edi va GFRda o'zgarish bo'lmaganda lityum klirensi (so'nggi proksimal naychali suyuqlik etkazib berish indeksi) oshdi; Izolyatsiya qilingan proksimal kanalchalarda Na plyus K va ATPaz faolligi ham inhibe qilingan.21 Proksimal naycha reabsorbtsiyasiga ushbu inhibitiv ta'sir uchun javobgar bo'lgan P2 retseptorlari subtipi(lar)ini aniqlab bo'lmadi.

Henle halqasi

Henlening ingichka a'zolaridagi P2 retseptorlarining funktsional ahamiyati hali ham noma'lum, ammo Garvin guruhi tomonidan o'tkazilgan bir qator in vitro tajribalari TALda ATP ta'sirini isbotladi. Kalamush mTAL ning hujayra suspenziyalarida ATP suraminga sezgir, konsentratsiyaga bog'liq holda hujayra ichidagi NO ishlab chiqarishni oshirdi. MeATP ham NO ishlab chiqarishning ko'payishiga sabab bo'lganiga asoslanib, P2Y2/4 agonisti UTP ham zaif ta'sirga ega ekanligi qayd etilgan bo'lsa-da, P2X retseptorlari birinchi navbatda javobgar ekanligi ta'kidlandi.22 NO ishlab chiqarish uchun mas'ul bo'lgan ferment NO sintaza 3 (NOS3): ATP NOS3 nokaut sichqonlarining TAL hujayralarida NO ishlab chiqarishni rag'batlantirishga qodir emas. NO (va, ya'ni, ATP) apikal NKCC-2 faolligini va (kamroq darajada) Na+/H plyus almashinuvini inhibe qilish orqali TAL tashilishini kamaytirishi mumkin. ATP TAL kislorod iste'molini dozaga bog'liq ravishda kamaytiradi va bu NOS inhibitori L-NAME ning suramin yoki millimolyar dozalari bilan bloklanadi. P2X agonisti meATP kislorod iste'molini ham kamaytiradi, P2X antagonisti NF023 esa ATP ta'sirini bloklaydi.22 Ushbu in vitro topilmalar seriyasi P2X retseptorlarining TAL funktsiyasini nazorat qilishda fiziologik rolidan dalolat bersa-da, to'liq baholash keng qamrovli tekshiruvni kutmoqda. Henle halqasida elektrolitlar tashish in vivo.

Distal tubula

Mahalliy distal tubulalarda bevosita tadqiqotlar o'tkazilmagan; Binobarin, ushbu nefron segmentlarida P2 retseptorlarining roli haqidagi bilimimiz parcha-parcha bo'lib, mahalliy hujayralarning birlamchi madaniyatini yoki o'lmas distal yoki "distalga o'xshash" hujayra chiziqlarini o'rganish natijalari bilan cheklangan. Farmakologik jihatdan P2X (membrana domeni ko'rsatilmagan) sifatida tavsiflangan retseptorlarning o'lmas sichqonchaning distal burmalangan hujayra chizig'ida faollashishi magniyning reabsorbtsiyasini inhibe qilishi ko'rsatilgan. Bundan tashqari, quyonlarni birlashtiruvchi kanalchalardan o'stirilgan hujayralar hujayradan tashqari ATPga javob beradi [Ca2 plus] I ko'payishi va natriy va kaltsiyning so'rilishini inhibe qiladi. Bunday holda, farmakologik profillash P2Y2 retseptorlarini (ATP va UTP tengligi asosida) nazarda tutadi, ammo P2X retseptorlari hissasini inkor etib bo'lmaydi.20

Yig'ish kanali

Apikal va bazolateral tomondan harakat qiluvchi hujayradan tashqari nukleotidlar siydik chiqarishni tartibga solishning oxirgi joyi bo'lgan CDda suv va elektrolitlar bilan ishlashga sezilarli ta'sir ko'rsatishi mumkin.

Hozirgi vaqtda P2 retseptorlari stimulyatsiyasi cAMP ning hujayra ichidagi darajasining pasayishi va hujayra ichidagi PGE2 ning ko'payishi natijasida CDda vazopressin bilan stimulyatsiya qilingan osmotik suv o'tkazuvchanligini inhibe qilishining ko'plab dalillari mavjud. 23 Agonist profiliga asoslanib, kalamushda topilgan inhibisyon P2Y2 retseptorlari bilan bog'liq edi va genlarni yo'q qilish bo'yicha tadqiqotlar bu taklifni qo'llab-quvvatlaydi.24 Shunga qaramay, sichqonchaning o'limsiz CCD hujayra liniyasida (mpkC-CDc14) yaqinda o'tkazilgan tadqiqot shuni ko'rsatdiki, P2X retseptorlarining vazopressin vositachiligida suvning reabsorbtsiyasiga inhibitiv ta'sirida ishtirok etishining dalillari. dDAVP ning bazolateral membranaga qo'llanilishi apikal membranada sezilarli AQP2 immunofluoressensiyasiga olib keldi, lekin keyin ATP muhitga apikal yoki bazolateral ravishda qo'shilganda, AQP2 ichki holatga keltirildi.25 dDAVP bilan davolash P2X2 va P2Y2 subtiplarini ko'chirishga olib keldi. navbati bilan apikal va bazolateral membranalar. Ksenopus oositlarida P2 retseptorlari AQP2 bilan birgalikda ifodalanganida, P2X2 va P2Y2 retseptorlari (shuningdek, P2Y4 retseptorlari) faollashishi hujayra membranasining AQP2 ko'pligini va AQP vositachiligida suv o'tkazuvchanligini pasaytirdi. retseptorlari, apikal joylashgan P2X2 retseptorlari AQP2-stimulyatsiya qilingan suv transportining regulyatsiyasini kamaytirishga yordam beradi.

CDda P2 retseptorlari stimulyatsiyasining ta'siri suv tashish bilan chegaralanmaydi; alohida harakat ENaC vositachiligida natriy reabsorbtsiyasini inhibe qilishdir. Birlamchi kulturalar va hujayra liniyalarida olib borilgan tadqiqotlar doimiy ravishda amiloridga (yoki benzamilga) sezgir natriy tashilishini inhibe qilishini ko'rsatdi. P2 retseptorlari uchun mas'ul bo'lgan kichik tip P2Y2 yoki P2X3 yoki 4 ga turlicha bog'langan. 20 Ushbu topilmalardan istisno sifatida, Li va boshq.16 P2X1 va/yoki sichqonchaning CD hujayra chizig'ida 4 ta stimulyatsiyadan keyin qisqa tutashuv oqimining ortishi haqida xabar berishdi. (IMCD-3), garchi amilorid sezgirligi tekshirilmagan. In vitro, apikal yoki bazolateral ATP perfuziyalangan mahalliy sichqoncha CD-sida natriy reabsorbtsiyasini inhibe qiladi, bu ENaC ochiq ehtimolining pasayishi natijasida yuzaga keladi. Farmakologik profilni aniqlash va genetik jihatdan yaratilgan sichqonlardan foydalanish P2Y2-vositachilik ta'siriga ishora qiladi.26 Bundan farqli o'laroq, kalamushlarda o'tkazilgan in vivo tadqiqot nukleotidlarning natriy reabsorbtsiyasiga inhibitiv ta'siri P2X vositachiligida ekanligini ko'rsatdi.20 In Shu nuqtai nazardan, bo'lingan ochiq kalamush CCD ning patch-qisqichli tekshiruvi ikkala apikal P2X va P2Y retseptorlari ENaC faolligiga ta'sir qilishi mumkinligini isbotladi. retseptorlari (P2X4 va/yoki P2X4/6 retseptorlari) natriyning luminal kontsentratsiyasiga qarab ENaC faolligini inhibe qiladi yoki kuchaytiradi. Luminal natriy 50 mM (normal fiziologik kontsentratsiyaga taqlid) bo'lganda, P2X4 va/yoki 4/6 faollashuv ENaC faolligini kuchaytirdi, luminal natriy yuqori (145 mM) bo'lsa, P2X4 va/yoki 4/6 faollashuv ENaC faolligini inhibe qildi. Ushbu harakatlarning aniq ta'siri yuqori intraluminal natriy kontsentratsiyasida ENaC vositachiligida transportning kuchli inhibisyonidir va faqat intraluminal natriyning past konsentratsiyasida engil inhibisyon (2-rasm).

2-rasm|Sichqonlarni yig'ish kanalining (CD) asosiy hujayralarida P2X retseptorlari tomonidan ENaC faolligini tavsiya etilgan tartibga solish. Gipoteza shundan iboratki, kalamush CD dagi ENaC faolligi luminal Na plyus konsentratsiyasiga qarab P2X4 va/yoki 4/6 retseptorlari tomonidan differentsial tartibga solinadi. A. Luminal Na plyus kontsentratsiyasi normal bo'lsa (ya'ni, ~50 mM), apikal ifodalangan P2X4 va/yoki 4/6 retseptorlarining faollashishi PI3K faollashuvi orqali ENaC faolligini oshiradi. Aksincha, apikal ifodalangan P2Y retseptorlarining faollashishi PLC faollashuvi orqali ENaC faolligini inhibe qiladi. NBP2 retseptorlari faollashuvining umumiy ta'siri (P2X va P2Y ham, ATP yordamida) ENaC inhibisyonining kichik darajasidir. B. Luminal Na plyus kontsentratsiyasi yuqori (ya'ni, 145 mM) bo'lsa, P2X4 va/yoki 4/6 retseptorlarining faollashishi noma'lum mexanizm orqali ENaC faolligini inhibe qiladi, ehtimol Na plus oqimini o'z ichiga oladi. Avvalgidek, apikal ifodalangan P2Y retseptorlarining faollashuvi PLC faollashuvi orqali ENaC faolligini inhibe qiladi. P2 retseptorlari faollashuvining umumiy ta'siri (ya'ni, ATP yordamida P2X va P2Y) ENaC inhibisyonining ancha katta darajasidir. (Ref 15 ruxsati bilan qayta nashr etilgan. Mualliflik huquqi 2008 Amerika Nefrologiya Jamiyati)

cistanche nima uchun ishlatiladi: jinsiylikni yaxshilash

BUYRAK PATOFIZIOLOGIYASIDAGI P2X RESEPTORLARI

Buyrakning polikistik kasalligi

Polikistikbuyrakkasallik(PKD) ning nazoratsiz ko'payishi bilan bog'liqbuyrakepiteliya hujayralari va tartibsiz suyuqlik tashish, suyuqlik bilan to'ldirilgan kistlarning shakllanishi va kengayishiga va atrofdagi normal to'qimalarning keyinchalik yo'q qilinishiga olib keladi. Madaniyatda inson PKD hujayralari, asosan, ularning apikal yuzasidan oddiy proksimal naycha hujayralariga qaraganda ko'proq ATP chiqaradi. ATP kista suyuqligida to'plangan bo'lib, bu ATP oqimining kuchayishi va ekto-ATPaz faolligining pasayishini aks ettiradi.27 Bu hujayradan tashqari ATP, kistani qoplaydigan hujayralardagi P2 retseptorlariga ta'sir qiladi va hujayra o'sishi va suyuqlik sekretsiyasini rag'batlantiradi. Bundan tashqari, P2X7 retseptorlarining faollashuvi apoptoz va remodelatsiyani rag'batlantirishi mumkin, bu esa kistaning yanada kengayishiga imkon beradi. Buni qo'llab-quvvatlash uchun P2X7 retseptorlari oqsilining kistozli epiteliysida ifodalanishi haqida xabar berilgan._cpk/cpkautosomal retsessiv PKD ning sichqoncha modeli. Ushbu modeldan ajratilgan hujayralar yordamida keng qo'llaniladigan P2X retseptorlari agonisti BzATP kist sonini kamaytirdi, ammo kist hajmini emas. Avtosomal dominant PKD ning kalamush modelida (Han-SPRD) P2X7 subtipi uchun ortib borayotgan mRNK kist qoplamali hujayralarda aniqlangan, ammo boshqa P2 retseptorlarini kodlovchi mRNKda ham shunga o'xshash o'sish kuzatilgan, bu PKD retseptorlari subtiplarining murakkab o'zaro bog'liqligini ko'rsatadi. .27

Buyrak yallig'lanishi

Sog'liqni saqlashda,buyrakP2X7 retseptorlari ifodasi nihoyatda past, ammo qandli diabet va gipertenziyaning kemiruvchilar modellari kabi bir qator patologik sharoitlarda sezilarli darajada oshadi. P2X7 retseptorlari IL{7}} va IL-18 kabi sitokinlarni chiqarish orqali yallig'lanish reaktsiyasiga vositachilik qilishi mumkin.28 Proliferativ glomerulonefritning kemiruvchilar modelida P2X7 ning glomerulyar ifodasi ortishi bilan mos keladi. proteinuriyaning boshlanishi. Bundan tashqari, P2X7 retseptorlari geni nokauti yoki P2X7 retseptorlari antagonisti bilan davolash kasallikning og'irligini susaytiradi.28 Nihoyat, P2X7 retseptorining potentsial rolibuyrakfibroz bir tomonlama ureter obstruktsiyasining sichqoncha modelida tekshirildi. P2X7 ning vaqtinchalik ifodasi obstruktsiyadan keyin quvurli epiteliya hujayralarida aniqlandi; va makrofag infiltratsiyasi, fibroz va TGF- ifodasi P2X7 retseptorlarini nokautga uchratgan sichqonlarda zaiflashdi.28

Xulosa qilib aytganda, tafsilotlar hali aniqlanmagan bo'lsa-da, P2X retseptorlari (P2Y retseptorlari bilan birgalikda) normal holatni tartibga solishda muhim rol o'ynashi aniq.buyrakfunktsiyasi, shuningdek, bir qator kasallik modellarida. Ushbu harakatlarni o'zgartirish, shu bilan suv va elektrolitlar chiqarilishini o'zgartirish, shuningdek, o'ziga xos kasalliklarni davolash uchun aralashuvlardan foydalanishning yo'li aniq ko'rinadi.buyrakpatologik sharoitlar.

MAQDAT

Biz ushbu qo‘lyozmani do‘stimiz va hamkasbimiz Devid Shirli xotirasiga bag‘ishlaymiz.

Mualliflar laboratoriyalaridagi ishlar Wellcome Trust, Tibbiy tadqiqot kengashi, Britaniya yurak jamg'armasi, Sent-Peterning buyrak, siydik pufagi va prostata tadqiqotlari tresti tomonidan qo'llab-quvvatlangan.BuyrakTadqiqot Buyuk Britaniya.

Cistanche ekstrakti foydalari: buyraklar faoliyatini yaxshilaydi

ADABIYOTLAR

1. Vallon V, Rieg T. tartibga solishbuyrakATP/UTP/P2Y2 retseptorlari tizimi orqali NaCl va suv tashish. Men J PhysiolBuyrakPhysiol 2011, 301: F464–F475.
2. Vekaria RM, Unwin RJ, Shirley DG. Sichqonlarda intraluminal ATP konsentratsiyasibuyraktubulalar. J Am Soc Nephrol 2006, 17:1841–1847.
3. Jensen MEJ, Odgaard E, Christensen MH, Praetorius HA, Leipziger J. Flow-induced [Ca2 plus] I ortishi nukleotidlarning chiqarilishiga va buzilmagan nefronda keyingi purinerjik signalizatsiyaga bog'liq. J Am Soc Nephrol 2007, 18: 2062–2070.
4. Odgaard E, Praetorius HA, Leipziger J. Perfuziyalangan sichqonchaning medullyar qalin ko'tarilgan oyoq-qo'llarida va kortikal yig'ish kanalida AVP tomonidan stimulyatsiya qilingan nukleotid sekretsiyasi. Men J PhysiolBuyrakPhysiol 2009, 297: F341–F349.

5. Praetorius HA, Leipziger J. Qo'zg'almas hujayralardan ATP chiqishi. Purinerjik signal 2009, 5: 433-446.

6. Bell PD, Komlosi P, Zhang ZR. ATP makula densa signalizatsiya vositachisi sifatida. Purinerjik signal 2009, 5: 461-471.

7. Sipos A, Vargas SL, Toma I, Hanner F, Willecke K, Peti-Peterdi J. Connexin 30 etishmovchiligining buzilishibuyrakquvurli ATP chiqishi va bosim natriurezi. J Am Soc Nephrol 2009, 20:1724–1732.
8. Shirley DG, Vekaria RM, Sevigny J. Ektonukleotidazalarbuyrak. Purinerjik signal 2009, 5: 501-511.
9. Yegutkin G.G. Nukleotid va nukleozidga aylantiruvchi ektofermentlar: purinerjik signalizatsiya kaskadining muhim modulyatorlari. Biochim Biophys Acta 2008, 1783: 673-694.
10. Burnstock G. Punerjik neyrotransmissiyaning fiziologiyasi va patofiziologiyasi. Physiol Rev 2007, 87: 659–797.
11. Inscho EW. ATP, P2 retseptorlari vabuyrakmikrosirkulyatsiya. Purinerjik signal 2009, 5: 447-460.
12. Xarxun MI, Povstyan OV, Gordienko DV. dan miotsitlarda purinoreseptor vositachiligidagi oqimbuyrakqarshilik arteriyalari. Br J Pharmacol 2010, 160:987–997.
13. Turner CM, Vonend O, Chan C, Burnstock G, Unwin RJ. Oddiy kalamushlarda tanlangan ATP sezgir P2 retseptorlari subtiplarini taqsimlash sxemasibuyrak: immunologik tadqiqot. Hujayra to'qimalari organlari 2003, 175: 105-117.
14. Yu MJ, Miller RL, Uawithya P, Rinschen MM, Khositseth S, Brauchth DW, Chouh CL, Pisitkunh T, Nelson RD, Knepper MA. Hujayraga xos AQP2 gen ifodasini tizim darajasida tahlil qilishbuyrakyig'ish kanali. Proc Natl Acad Sci USA 2009, 106:2441–2446.
15. Wildman SSP, Marks J, Turner CM, Yew-Booth L, Peppiatt-Wildman CM, King BF, Shirley DG, Wang W, Unwin RJ. Natriyga bog'liq tartibga solishbuyrakapikal P2 retseptorlari tomonidan amiloridga sezgir oqimlar. J Am Soc Nephrol 2008, 19:731–742.
16. Li L, Lynch IJ, Zheng V, Cash MN, Teng X, Wingo CS, Verlander JW, Xia SL. Apikal PRXR [Ca2 plus ] I signalizatsiyasi va ISCin sichqonchasiga hissa qo'shadibuyrakMCD. Biochem Biophys Res Commun 2007, 359:438–444.
17. Charbardes-Garonne D, M `ejean A, Aude JC, Cheval ´ L, Di Stefano A, Gaillard MC, Imbert-Teboul M, Wittner M, Balian C, Anthouard V va boshqalar. Insonda gen ifodasining panoramik ko'rinishibuyrak. Proc Natl Acad Sci USA 2003, 100:13710–13715.
18. Inscho EW, Kuk AK, Clarke A, Zhang S, Guan Z. Angiotensin II-infuzion gipertenziv kalamushlarda yuqori tuzli parhez bilan oziqlangan afferent arteriolalarning P2X1 retseptorlari vositachiligidagi vazokonstriksiya. Gipertenziya 2011, 57: 780-787.
19. Schnermann J. Sichqonlarda P2 purinerjik retseptorlarini o'tkir inhibe qilish paytida tubuloglomerulyar qayta aloqa javoblarini saqlab qoldi. Men J PhysiolBuyrakPhysiol 2011, 300: F339–F344.
20. Beyli MA, Shirli DG. Hujayradan tashqari nukleotidlarning ta'siribuyrakquvurli eritmani tashish. Purinerjik signal 2009, 5: 473-480.

21. Jankowski M, Szamocka E, Kowalski R, Angielski S, Szczepanska-Konkel M. P2X retseptorlari agonistlarining ta'siribuyrakbehushlik qilingan kalamushlarda natriy va suvning chiqarilishi. Acta Physiol 2011, 202:193–201.

22. Garvin JL, Herrera M, Ortiz PA. ni tartibga solishbuyrakNaCl ni azot oksidi, endotelin va ATP orqali tashish: klinik ta'sir. Annu Rev Physiol 2011, 73: 359–376.

23. Kishore BK, Nelson RD, Miller RL, Carlson NG, Kohan DE. P2Y2 retseptorlari va suv transportidabuyrak. Purinerjik signal 2009, 5: 491–499.
24. Rieg T, Bunday RA, Chen Y, Deschenes G, Junger V, Insel PA, Vallon V. P2Y2 retseptorlari mavjud bo'lmagan sichqonlar tuzga chidamli gipertenziyaga ega va buyrak Na plus va suvning reabsorbtsiyasini osonlashtiradi. FASEB J 2007, 21: 3717-3726.
25. Wildman SSP, Boone M, Peppiatt-Wildman CM, Contreras-Sanz A, King BF, Shirley DG, Deen PM, Unwin RJ. Nukleotidlar apikal P2 retseptorlarini faollashtirish orqali aquaporin 2 ni pasaytiradi. J Am Soc Nephrol 2009, 20:1480–1490.
26. Pochynyuk O, Rieg T, Bugaj V, Schroth J, Fridman A va boshqalar. Diyet Na plus epitelial natriy kanalining ochiq ehtimolini inhibe qiladibuyrakapikal P2Y2-retseptorlari ohangini oshirish orqali. FASEB J 2010, 24: 2056–2065.
27. Turner CM, Elliot JI, Tam FWK. Patofiziologiyada P2 retseptorlari. Purinerjik signal 2009, 5: 513-520.
28. Arulkumaran N, Unwin RJ, Tam FWK. Yallig'lanish kasalliklarini davolashda P2X7 retseptorlari (P2X7R) antagonistlari uchun potentsial terapevtik rol. Expert Opin Investig Drugs 2011, 20:897–915.