1-QISM Cistanche Tubulosa (Schenk) Wight ekstrakti orqa oyoq-qo'llarning ish faoliyatini yaxshilaydi va immobilizatsiyalangan sichqonlarda miyozin og'ir zanjiri IId/IIx ifodasini susaytiradi.

Qo'shimcha ma'lumot olish uchun quyidagi manzilga murojaat qiling:Joanna.jia@wecistanche.com

1Neyrotibbiyot fanlari boʻlimi, Toyama universiteti, Tabiiy tibbiyot instituti, 2630 Sugitani, Toyama 930-0194, Yaponiya 2Yaponiya sharq tabobati boʻlimi, Tibbiyot va farmatsevtika fanlari oliy maktabi, Toyama universiteti, 2630 Sugitani, Toyama {{5 }}, Yaponiya

Xat yozish Chihiro Tohdaga yuborilishi kerak; chihiro@inm.u-toyama.ac.jp

2019 yil 14 iyunda qabul qilingan; 2019 yil 13 sentyabrda qayta ko'rib chiqilgan; 2019 yil 17 sentyabrda qabul qilingan; 2019 yil 22 oktyabrda nashr etilgan

Akademik muharrir: Ven-yi Kang

Mualliflik huquqi © 2019 Yoshiyuki Kimbara va boshqalar. Bu Creative Commons Attribution License ostida tarqatiladigan ochiq kirish huquqiga ega maqola boʻlib, asl asardan toʻgʻri iqtibos keltirilsa, har qanday vositada cheksiz foydalanish, tarqatish va koʻpaytirishga ruxsat beradi.

Skelet mushaklarining atrofiyasi ko'plab klinik sharoitlarda uchraydi, ammo farmakologik davolash hali o'rnatilmagan.Cistanche tubulosa(Schenk) Wight - an'anaviy yapon va xitoy tibbiyotida qo'llaniladigan o'simlik dori. Joriy tadqiqotda biz ta'sirini o'rganib chiqdikC. tubulosa ekstrakti(CTE) atrofiyalangan mushak ustida in vivo. Biz, shuningdek, sichqonlarda orqa oyoq-qo'llarining immobilizatsiyasini o'rganib chiqdik va shimgichga o'xshash lenta va yupqa plastik naychadan iborat yangi orqa oyoq-qo'llarni immobilizatsiya qiluvchi gips turini ishlab chiqdik. Ushbu usul yordamida sichqonlarning 4 guruhidan 3 tasi (har bir guruh uchun n 11) orqa oyoqlarda immobilizatsiya qilingan va 13 kun davomida CTE yoki transport vositasini boshqargan. Avtotransport vositasi berilgan to'rtinchi guruh sichqonlarida soxta protsedura o'tkazildi. Keyinchalik, triceps surae mushaklari (TS) kesiladi. Yangi gips tizimi va CTE administratsiyasining mushak atrofiyasiga ta'sirini tahlil qilish uchun biz TS nam og'irligi va miyofiber kesma maydonini (CSA) baholadik. Shuningdek, biz MyHC IId/IIx ifoda darajalarini western blotting orqali aniqladik, chunki ularning ortishi foydalanilmagan mushak atrofiyasining o‘ziga xos belgisi bo‘lib, miofiber turining sekin va tez o‘zgarishini ko‘rsatadi. Bundan tashqari, biz orqa oyoqlarning ishlashini ikkita sinovdan o'tkazdik. Yangi quyma immobilizatsiya usuli TS ho'l vazni va miofaber CSA ni sezilarli darajada kamaytirdi. Bu orqa oyoq funktsiyasining yomonlashishi va MyHC IId/IIx ifodasining oshishi bilan birga bo'ldi. CTE ma'muriyati TS ho'l vazni yoki myofaber CSA ni o'zgartirmadi; ammo, bu orqa oyoq funksiyasini yo'qotish va quyma immobilizatsiyalangan sichqonlarda MyHC IId/IIx ko'payishini bostirish tendentsiyasini ko'rsatdi. Bizning yangi orqa oyoq-qo'llarini immobilizatsiya qilish usuli mushak atrofiyasini samarali ravishda keltirib chiqardi. CTE mushak massasiga ta'sir qilmadi, lekin quyma immobilizatsiyalangan sichqonlarda sekin miyofiber turiga o'tishni bostirdi, bu esa orqa oyoq-qo'l funktsiyasining yomonlashuvini yaxshilaydi.

Cistanche deserticola juda ko'p effektlarga ega, ko'proq bilish uchun shu yerni bosing

1.Kirish

Skelet mushaklari atrofiyasi bilan bog'liq patofiziologik holatlarga sarkopeniya [1], kaxeksiya [2] va glyukokortikoidlar keltirib chiqaradigan skelet mushaklari atrofiyasi [3] kiradi. Skelet mushaklarining atrofiyasi, shuningdek, uzoq muddat foydalanmaslik [4] tufayli yuzaga keladi, bu yotoqda dam olish [5], sinish yoki ligament jarohatlarini davolash uchun gips qo'llash [6] yoki kosmik parvoz [7] bilan bog'liq bo'lishi mumkin. Turli kasalliklar bu holatga olib kelishi mumkinligi sababli, bu aholining katta foiziga ta'sir qiladi.

Mushak atrofiyasini davolash uchun etarli jismoniy mashqlar va ovqatlanish terapiyasi muhim ahamiyatga ega [8]. Bundan tashqari, ba'zi tadkikotlar farmakologik qarshi choralar, jumladan selektiv androgen retseptorlari modulyatorlari, miyostatinga qarshi inson monoklonal antikorlari va selektiv grelin retseptorlari agonistlari samarali ekanligi haqida xabar berdi [9]; ammo, bu yondashuvlar hali o'rnatilmagan.

Yuqorida tavsiflangan mushak atrofik holatlari miofaber tipidagi profilning o'zgarishi va mushak massasining kamayishi bilan birga keladi. Nerv ta'sirini yo'qotish va mexanik yukni yo'qotish natijasida mushaklarning ishlamay qolishi miyofiber turining sekin va tez siljishiga va MyHC IId/IIx ifoda darajalarining oshishi bilan ifodalanadigan miyozin og'ir zanjiri (MyHC) izoform profilining o'zgarishiga olib keladi [10]. [11, 12]. Miyofiber turining tezdan sekinga siljishi o'rniga glyukokortikoidlarni yuborish, kaxeksiya, sepsis va boshqa omillar [10] tomonidan qo'zg'atiladi.

Cistanchedan kelib chiqqan o'simlik dorisidirCistanche deserticolaYC Ma,C. tubulosa(Schenk) Wight yoki C. salsa (CA Mey) Beck, yapon farmakopiyasiga ko'ra [13]. An'anaviy yapon (Kampo) va Xitoy tibbiyotida u bepushtlik, tizimli mushaklar kuchsizligi (ayniqsa, orqa va pastki oyoqlarda) va suyak zaifligi bilan tavsiflangan "buyrak etishmovchiligi sindromi" ni davolash uchun ishlatiladi [14, 15]. Uning tarkibida akteozid, echinakozid va izoakteozid kabi turli xil tarkibiy qismlar mavjudligi ma'lum. Ushbu o'simlikning ekstrakti yoki uning kimyoviy tarkibiy qismlari kardio-, gepato- va neyroprotektiv ta'sir ko'rsatdi; qarishga qarshi, charchoqqa qarshi, qon tomirlarini kengaytiruvchi va afrodizyak ta'sir ko'rsatadi; antioksidant va yallig'lanishga qarshi faollik; va xotira va o'rganishni yaxshilash qobiliyati [15, 16]. Shunga qaramay, bu o'simlikning mushaklarni yo'qotish kasalliklarini oldini olish yoki davolashda samaradorligi tasdiqlanmagan. Shuning uchun, biz ushbu tadqiqotda uning ta'sirini o'rganib chiqdikC. tubulosaekstrakti (CTE) mushak atrofiyasini davolash uchun.

Shu maqsadda biz sichqonlarda mushak atrofiyasini qo'zg'atish uchun orqa oyoq-qo'llarining immobilizatsiyasidan foydalandik, xususan gipsda ishlatiladigan materiallarga e'tibor qaratdik. Har xil quyma tizimlar haqida xabar berilgan, jumladan, gipsli gips [17], shisha tolali gipslar [18], polipropilen mikrosentrifuga quvurlari [19], paxta va po'lat to'rdan tayyorlangan cheklovchi kostyumga o'xshash asboblar [20], proksimalli plastik pipetkalar. shimgichni to'ldirish [21], elastik bo'lmagan bandaj lentasi va vinil bilan qoplangan po'lat simdan yasalgan quyma [22], metall plitalar bilan birlashtirilgan simni kiritish [23] va jarrohlik teri stapleridan foydalanish [24]. Yallig'lanish o'zgarishlarining oldini olish uchun ideal gips minimal invaziv va shikastlanmagan bo'lishi kerak, chunki yallig'lanish mushaklar atrofiyasini keltirib chiqarishi mumkin [25]. Bundan tashqari, eksperimentning so'nggi bosqichlarida gips bilan orqa oyoqning ishlashini tekshirish mumkin bo'lishi kerak. Bundan tashqari, gipsni maxsus bilim va ko'nikmalarsiz boshqarish oson bo'lishi kerak; engil, arzon, sotib olish oson bo'lishi kerak va qo'llash va olib tashlash uchun maxsus qurilmalarni talab qilmasligi kerak.

Mushaklarni yo'qotishning turli xil hayvonlar modellari haqida xabar berilgan. Orqa oyoqlarni tushirish tez-tez qo'llanilgan [11, 12], lekin tizimli yallig'lanishni keltirib chiqarishi mumkin bo'lgan quyruq nekrozini o'z ichiga olgan bir qancha muammolarga ega [25]; tana suyuqliklarining kaudal tomonga og'ishi, bu orqa oyoq-qo'llarining qon tomirlarida anormalliklarga olib keladi [26]; orqa oyoqdagi g'ayrioddiy mikrogravitatsiya, bu protein ifodasiga, shu jumladan mitoxondrial fermentlarga kuchli ta'sir qilishi mumkin [27]. Bu omillarning barchasi mushaklarning zaiflashishiga ta'sir qilishi mumkin. Turli xil usul mushakni neyronal kirishlardan mahrum qilish orqali mushak atrofiyasini keltirib chiqaradi (masalan, siyatik asabni kesish orqali) [28]; mushaklar terminal neyronlarning trofik omillariga tobe bo'lganligi sababli [29], noodatiy deyarli umumiy denervatsiya holatiga olib keladigan bu usul mushaklar atrofiyasi jarayonini o'zgartirishi mumkin. Qandli diabet [30], buyrak yetishmovchiligi [31], kortikosteroidlarni qabul qilish [32] va qarish yoki tezlashgan qarish [33, 34] kabi mushaklar atrofiyasini keltirib chiqaradigan tizimli buzilishlarga duchor bo'lgan hayvonlardan inson namunasi sifatida foydalanish mumkin. kasalliklar; ammo, bu tizimli sharoitlar mushak atrofiyasi jarayoniga ham xalaqit berishi mumkin.

Shunday qilib, biz mushaklar atrofiyasini qo'zg'atish uchun orqa oyoq-qo'llarining immobilizatsiyasini tanladik va biz sichqonlarda buni amalga oshirishning yangi usulini yaratishga harakat qildik, bu orqali biz CTE ning mushak atrofiyasiga ta'sirini o'rgandik.

CistancheDiyetik qo'shimchalarBuyrakKasallikvaKuchaydiKuch

2. Materiallar va usullar

2.1. O'simlik materiallari va ekstraktsiyasi.

CTE Alps Pharmaceutical Industry Co., Ltd (Hida, Gifu, Yaponiya) dan sotib olingan.

C. tubulosa go'shtli poyalari Xitoy Xalq Respublikasining Shinjang Uyg'ur Aptonom rayonidan yig'ilgan. C. tubulosa ning jami 193 kg aralash kukunlari 1883 l 30 foizli etanolga botirildi. Aralash 2 soat davomida 55-64 daraja haroratda qaytarildi. Ekstrakt hosildorligi 7,2 foizni tashkil etdi va tarkibida 3,36 foiz akteozid va 12,72 foiz ekinakozid bor.

2.2. Sichqoncha.

Voyaga etgan ddY (12 haftalik) erkak sichqonlar (Yaponiya SLC, Shizuoka, Yaponiya) alohida plastik qafaslarga joylashtirildi va harorat bilan tartibga solinadigan (25 ± 2 daraja) vivariumda 12- soat yorug'lik/qorong'u tsiklda saqlangan. Barcha hayvonlarga suv va chovga ad libitum ruxsat berildi (Labo MR aksiyasi; Nosan korporatsiyasi, Yokohama, Kanagava, Yaponiya).

Hayvonlar bo'yicha barcha tajribalar va protokollar Toyama universitetining Sugitani kampusidagi laboratoriya hayvonlarini parvarish qilish va ulardan foydalanish bo'yicha yo'riqnomaga muvofiq amalga oshirildi. Hayvonlar ustida oʻtkazilgan tajribalar uchun tasdiqlangan raqam: A2016INM-3. Ishlatiladigan hayvonlar sonini kamaytirish uchun barcha harakatlar qilingan.

2.3. Orqa oyoq mushaklari atrofiyasini keltirib chiqarish va CTE boshqaruvi.

Sichqonlar 4 guruhga bo'lingan (har bir guruhda n 11): 2-kuni barcha sichqonlar behushlik qilingan va ularning sochlari sondan to'piqgacha bo'lgan depilatsiya kremi bilan olingan (Epilat kremi; Kracie, Tokio, Yaponiya). Keyinchalik, 4 (plyus) guruhlardan 3 tasi 1 (a) - 1 (g) rasmlarda ko'rsatilganidek, quyidagi protsedura bo'yicha immobilizatsiya qilindi:

1-qadam. EPDM kauchuk ko‘pikli yopishtiruvchi lentani (Cemedine Corporation, Tokio, Yaponiya) 12 8 25 mm chiziqqa kesib oling (1(a)-rasm).

2-qadam. Orqa oyoqni oyoq Bilagi zo'r holatida ushlab turing va uni to'piq bo'g'imiga yopishtiruvchi lenta bilan juda yumshoq qilib o'rang (1-rasm (b)).

3-qadam. TIC-22 (Nichifu korporatsiyasi, Osaka, Yaponiya) yumshoq PVX izolyatsiya qopqog'ini kesib oling va yopishtiruvchi lentani yoping. Ularni yopishtirish uchun ikki tomonlama lentadan foydalaning (PRO SELF qulay kesilgan ikki tomonlama lenta J-1300; Nitoms Inc., Tokio, Yaponiya) (1-rasm (c)).

Qadam 4. Qopqoqning kesilgan uchlarini yig'ing; suv o'tkazmaydigan yuqori samarali yopishqoq lentani kesib oling (quvvat tasmasi; Asahipen korporatsiyasi, Osaka, Yaponiya) taxminan. 4 48 mm o'lchamda va yig'ilgan uchlarini mahkamlang (1-rasm (d)).

5-qadam. Qopqoqning yuqori uchining old tomoniga kichik bo‘lak (taxminan 5 30 mm) alyuminiy folga lentasini (AL-30; Nichiban korporatsiyasi, Tokio, Yaponiya) qo‘ying (1-rasm). (e)).

6-qadam. Plastmassa tasmasini (vinil elektr izolyatsion lenta № 21; Nitto Denko korporatsiyasi, Osaka, Yaponiya) taxminan kesib oling. 19 × 40 mm va qopqoqni o'rang (1-rasm (f)).

7-qadam. Qarama-qarshi orqa oyoqda ham xuddi shunday amalni bajaring (1-rasm (g)).

Ushbu tadqiqotda foydalanilgan immobilizatsiya muddati 13 kunni tashkil etdi va agar quyidagi holatlardan biri yoki bir nechtasi yuzaga kelgan bo'lsa, gipslar almashtirildi: kuchli pedal shishi, orqa oyoq nekrozi, terining og'ir yaralari, destruktsiya tufayli gipsning bo'shashishi yoki gipsning dislokatsiyasi. oyoq Bilagi zo'r. Qolgan guruhda faqat depilatsiya amalga oshirildi (soxta protsedura) va vosita (fiziologik sho'r suv) depilatsiyadan keyingi kundan boshlab (2-kun) 13 kun davomida qo'llanildi. 3 ta gips (plyus) guruhlar orasida 2 tasiga CTE (kuniga 50 va 100 mg/kg; gips (plyus)/CTE-50 guruhi va gips (plyus)/CTE-100 guruhi), va biri boshqariladi transport vositasi (quyma (plyus)/avtomobil guruhi), shuningdek, 2 kundan boshlab. CTE fiziologik sho'r suvda eritildi va 13 kun davomida og'iz gavaj orqali har kuni boshqariladi.

2.4. Orqa oyoq funktsiyasi va orqa oyoq mushaklarining kuchini baholash.

14-kuni, gips (plyus) guruhining sichqonlari CTE administratsiyasidan keyin yana anesteziya qilindi va gipslar olib tashlandi. Ertasi kuni (15-kun) barcha sichqonlar quyidagi ikkita testdan foydalanib, orqa oyoq-qo'llarining funktsiyasi va mushaklar kuchi uchun sinovdan o'tkazildi:

2.4.1. Yurish tezligini o'lchash.

15 mm kenglikdagi kvadrat yog'och platforma gorizontal ravishda erdan taxminan 50 sm masofada ushlab turildi. Keyin sichqonchani platformaga qo'yishdi va 50 sm masofani bosib o'tish vaqtini sekundomer yordamida qo'lda yozib olish orqali hayvon platformani bosib o'tganda yurish tezligi baholandi. Oldindan, har bir sichqon platformani ikki marta mashq qilish uchun aylanib o'tishga odatlangan edi.

2.4.2. Oyoq xatosi sinovi.

Orqa oyoq mushaklarining kuchini baholash uchun biz "oyoq-noto'g'ri testi" ni o'tkazdik, unda har bir sichqonchani yana platformaga qo'ydik va platformadan orqa oyoqlarning sirpanishlari soni jadvalga keltirildi. Bu sinov statik novda sinovining o'zgartirilgan versiyasi bo'lib, unda antenna tayoqchalari G-qisqich yordamida o'rnatiladi va sichqonlar ularni kesib o'tish uchun tayyorlanadi [35]. Oyoq xatosi sinovi uch marta o'tkazildi va uch seans davomida o'rtacha oyoq tushishi qayd etildi. Mashg'ulotlar o'rtasida kamida 15 daqiqalik dam olish oralig'i mavjud edi.

2.5. Triceps Surae mushaklarining gistologik va morfometrik tahlillari.

Orqa oyoq funktsiyasini baholashdan so'ng, sichqonlar chuqur behushlik qilindi va fiziologik sho'r suv perfuziyasi bilan evtanatizatsiya qilindi. Keyinchalik, orqa oyoqlarning ikkala tomonidan triceps surae (TS) mushaklari kesilgan; chap orqa oyoqdan olingan namunalar 24 soat davomida PBS eritmasida 4 foizli paraformaldegidda mahkamlangan, so'ngra PBSdagi 30 foizli saxaroza eritmasiga o'tkazilgan va kriyoproteksiya va kriyoseksiya uchun inkubatsiya qilingan. Shundan so'ng, kriyostat (Leica 3050S; Leica tizimlari, Nußloch, Germaniya) yordamida har bir mushakning qorinning o'rta qismidan kichik o'qi bo'ylab 12-mkm qalinlikdagi qismlar kesildi. Etti dan o'ntagacha ketma-ket bo'laklar antistrip bilan qoplangan shisha slaydlarga o'rnatildi (MAS-GP Type A, Matsunami Glass Industry, Osaka, Yaponiya), darhol sochlarini fen bilan quritib, 30 daraja haroratda saqlangan va gematoksilin-eozin bilan bo'yalgan (HE bo'yog'i) , ScyTek Laboratories, Logan, Yuta, Amerika Qo'shma Shtatlari). Har bir hayvonning har bir miofiberning qisqa o'qi bo'lagi aniq ko'rinadigan bitta vakili bo'lim tanlandi va uning ko'ndalang kesimi maydoni (CSA) Image J (Milliy sog'liqni saqlash instituti, Bethesda, Merilend, AQSh) yordamida o'lchandi. .

2.6. Western Blotting.

To'g'ri TS dan umumiy oqsil quyidagi usul bilan ajratildi. To'g'ri TS qaychi yordamida maydalangan va darhol suyuq azotda muzlatilgan, 30 daraja haroratda saqlanadi va keyin to'qima lizatini hosil qilish uchun gomogenlashtiriladi. Eritilgan mushaklar 2 ml M-PER sut emizuvchilar oqsili ekstrakti eritmasida (Pirs Biotechnology, Rockford, Illinoys, AQSh) 30 daqiqa davomida muzli sovuqda inkubatsiya qilindi va keyin gomogenlashtirildi. Keyin gomogenatlar 4 daraja va 4000 g haroratda 10 daqiqa davomida santrifüj qilindi va supernatantlar yig'ildi.

Har bir mushak lizatidagi 10 ug jami oqsil yuklangan va natriy dodesil sulfat-poliakrilamid gel elektroforezi (SDS-PAGE) orqali ajratilgan, so‘ngra nitroselüloz membranasiga elektrotransfer qilingan (0,2 mkm, # 1620112, Bio-Rad Laboratories, Hercules, Kaliforniya, Amerika Qo'shma Shtatlari). Spesifik bo'lmagan bog'lanish 0,05% Tween 20 (TBS-T) bilan Tris-buferlangan sho'r suvda 5 foiz yog'siz quruq sut (yog'siz sut kukuni, 190-12865, FUJIFILM Wako Pure Chemical Industries, Osaka, Yaponiya) bilan bloklandi. Keyin membranalar Can Get Signal immunoreaktsiya kuchaytiruvchi eritmasi 1da (Toyobo, Osaka, Yaponiya) eritilgan asosiy antikor bilan 4 daraja kechada inkubatsiya qilindi. Agitatsiya va TBS-T bilan chayishdan so'ng, membranalar 1 soat davomida xona haroratida Can Get Signal immunoreaktsiya kuchaytirgich eritmasida suyultirilgan horseradish peroksidaza (HRP-) konjugatsiyalangan ikkilamchi antikor bilan inkubatsiya qilindi (Toyobo, Osaka, Yaponiya). Membranlardagi signallar luminol yordamida elektroximiluminesans orqali aniqlandi. Keyinchalik CS Analyzer dasturi (Atto, Tokio, Yaponiya) yordamida densitometrik tahlil o'tkazildi. Antikorlar quyidagi tarzda tanlandi va suyultirildi: sichqoncha anti-MyHC IId/IIx monoklonal antikor (1: 1000, klon A4.1025, #05-716, Merck Millipore, Burlington, Massachusets, AQSh), sichqoncha anti-GAPDH yuklanishni nazorat qiluvchi monoklonal antikor (1: 3500, G041 ABM, Vankuver, Kanada) va HRP-konjugatsiyalangan echki sichqonchasi IgG poliklonal ikkilamchi antikor H&L (1: 2000, Abcam, Kembrij, Buyuk Britaniya).

2.7. Statistik tahlillar.

Barcha natijalar o'rtacha ± o'rtacha standart xato (SEM) sifatida ifodalanadi. Guruhlar orasidagi taqqoslashlarning statistik ahamiyati bir tomonlama ANOVA va post hoc Dunnett testlari yoki Tukeyning HSD testi bilan tasdiqlangan; Kruskal-Uollis testi va Dunndan keyingi testlar; yoki takroriy o'lchovlar va post hoc Dunnett testi bilan ikki tomonlama ANOVA. Smirnov-Grubb testi chetdagilarni chiqarib tashlash uchun ishlatilgan. Barcha statistik baholashlar uchun 0.05 dan kichik p qiymatlari statistik ahamiyatga ega deb hisoblandi va barcha tahlillar GraphPad Prism 6 (GraphPad Software, La Jolla, Kaliforniya, AQSh) yordamida amalga oshirildi.

CistancheDiyetik qo'shimchalar qarishga qarshi va kuchni oshiradi

3. Natijalar

3.1. Hayvonlarning salomatligi va CTE ning tana vazniga ta'siri.

Vizual ko'rinishda quyma immobilizatsiya qilingan sichqonlarning orqa oyoqlari gips ( ) / avtomobil guruhi sichqonlari bilan solishtirganda atrofik edi. Gips immobilizatsiyasi tadqiqot bosqichining oxiriga kelib tana vaznining sezilarli darajada yo'qolishiga olib keldi. Aksincha, tana vaznining o'zgarishi gips ( ) / avtomobil guruhi sichqonlarida sezilarli emas edi. Ikki gips (plyus )/CTE guruhlari gips (plyus )/avtomobil guruhi bilan solishtirganda tana vaznida sezilarli o'zgarishlarni ko'rsatmadi (2-rasm).

Immobilizatsiya qilingan sichqonlarning orqa oyoqlarida teri nekrozi yoki gangrena kabi jiddiy asoratlar kuzatilmagan va vivariumda g'ayritabiiy xatti-harakatlar kuzatilmagan. Biroq, engil asoratlar, shu jumladan oyoq shishi, yuzaki teri yaralari va orqa oyoq-qo'llarning ishqalanishi barcha gipsli immobilizatsiyalangan sichqonlarda kuzatilgan (1-rasm (h)). Gipsning bo'shashishi va joyidan chiqib ketishi, gipsni almashtirishga olib keladigan ko'p hollarda ham kuzatildi.

3.2. CTE ning mushaklarning kuchi va mushaklarning ishlashiga ta'siri.

Gips (plyus )/avtomobil guruhi oyoq sinishida orqa oyoqlarda sirpanishlar soni sezilarli darajada oshdi (3(a)-rasm) va yurish tezligi gips ( )/avtomobil guruhidagiga qaraganda sezilarli darajada sekinroq edi (3(b-rasm)) )).

CTE bilan davolash orqa oyoq-qo'llarining sirpanishini kamaytirishga dozaga bog'liq tendentsiyaga olib keldi. Gips (plyus )/CTE-100 guruhida davolash gips (plyus )/avtomobil guruhi bilan solishtirganda (p 0.0604) orqa oyoqlarning sirpanishini kamaytirish tendentsiyasiga ega (3(a)-rasm). Yurish tezligiga kelsak, har ikkala cast ( plus )/CTE-50 va cast ( plus )/CTE-100 guruhlari yurish tezligida cast ( plus )/mobile guruhi bilan solishtirganda sezilarli farq ko'rsatmadi. Tezroq tezlikka tomon ozgina, ahamiyatsiz dozaga bog'liq tendentsiya edi (3-rasm (b)).

3.3. TS va Myofiber CSA ning nam og'irligi.

Quyma immobilizatsiyasi bilan TS ning nam og'irligi gips ( ) / avtomobil guruhi bilan solishtirganda sezilarli darajada kamaydi (4-rasm (a)). CTE administratsiyasi TS nam vazniga ta'sir ko'rsatmadi.

Har bir guruhdagi o'rtacha miofiber CSA ham tahlil qilindi. Gips (plyus )/avtomobil guruhida gips ( )/avtomobil guruhi bilan solishtirganda miyofiber CSA ning sezilarli darajada kamayganligi aniqlandi (4(b)-rasm). Myofiber CSA 4(c)-rasmda ko'rsatilganidek, chastota taqsimoti bo'yicha qo'shimcha tasniflangan va tahlil qilingan. Aktyorlar ( )/avtomobillar guruhidagi eng tez-tez uchraydigan CSA klassi aktyorlar ( plus )/avtomobillar guruhidagidan kattaroq edi; 1350- 2250 mkm2 CSA sinfidagi miyofilalar ulushi quyma ( )/avtomobil guruhida quyma (plyus )/avtomobil guruhiga qaraganda sezilarli darajada yuqori edi yoki bo‘lishga moyil bo‘ldi va qarama-qarshi tendentsiya ko‘rindi. CSA sinfi 0 900 mkm2 guruhlari (4(c)-rasm). CSA taqsimoti ikki gipsli (plyus )/CTE guruhidagi CTE ma'muriyati tomonidan gips (plyus )/avtomobil guruhi bilan solishtirganda ta'sir qilmagan (4-rasm (c)). Miyofiberning vakili tasvirlari 4(d)-rasmda ko'rsatilgan.

3.4. CTE ning TS da MyHC IId/IIx ifoda darajalariga ta'siri.

Western blotting har bir guruhdan oltita vakillik namunalarida amalga oshirildi (5-rasm (a)). Ushbu namunalar, ularning tegishli guruhlari uchun o'rtacha qiymatlarga yaqinroq bo'lgan oyoq-qo'zg'alish sinovini ko'rsatgan hayvonlardan olinganligi asosida tanlangan.

Aktyorlar (plyus )/avtomobil guruhida MyHC IId/IIx aktyorlar ( )/avtomobil guruhiga nisbatan sezilarli darajada oshdi. Ushbu o'sish dozaga bog'liq holda CTE administratsiyasi tomonidan bostiriladi. Kadrlar ( plus )/CTE-100 guruhida MyHC IId/IIx ifodasi aktyorlar (plyus )/avtomobil guruhiga nisbatan pasayish tendentsiyasiga ega (p 0.0810) (5-rasm (b)) . Ichki nazorat sifatida ishlatilgan GAPDH ifodasi guruhlar o'rtasida sezilarli darajada farq qilmadi (5-rasm (c)).

Cistanchetubulosa ko'p ta'sirga ega