2-qism|Siydik yo'llarining eksfoliatsiyalangan hujayralarida glikogen sintaza kinaz 3b giperaktivligi diabetik buyrak kasalligining rivojlanishini bashorat qiladi
Mar 05, 2022
1-qism uchun shu yerni bosing
Qo'shimcha ma'lumot olish uchun quyidagi manzilga murojaat qiling:emily.li@wecistanche.com
MUHOKAZA
Qo'shma Shtatlar va boshqa G'arb mamlakatlarida DKD progressiv etiologiyaning etakchisi bo'lib qolmoqdasurunkali buyrak kasalligiva g'aznachilik va sog'liqni saqlash tizimlariga og'ir yuk yuklaydi, hali aniq davolash mavjud emas.5 Qandli diabet bilan og'rigan bemorlarning hammasi ham DN rivojlana olmasligi uzoq vaqtdan beri tan olingan.5 O'rganilayotgan kogortaga qarab, DN. diabet bilan og'rigan bemorlarning 30 foizidan 50 foizigacha ta'sir qiladi. Hozirgi klinik amaliyotda DKD rivojlanish xavfi ostida bo'lgan qandli diabet bilan og'rigan bemorlarni aniqlash bo'yicha qabul qilingan chora-tadbirlar asosan retinopatiya uchun ko'z tekshiruvi va albuminuriya uchun siydik tahlili bilan chegaralanadi.5 Biroq, birlashtirilgan epidemiologik dalillar shuni ko'rsatadiki, ekstrarenal mikrovaskulopatiya yoki albuminuriya kasallikning keyingi rivojlanishiga sezilarli darajada mos kelmaydi. DKD.12,13,26,27 Shunday qilib, DN xavfi bo'lgan diabetik bemorlarni aniq tabaqalash uchun yangi biomarkerni ishlab chiqish zarurati mavjud. Ushbu tadqiqot birinchi marta GSK3b parenximada haddan tashqari ko'p va giperaktiv ekanligi haqida xabar beradi.buyrakbilan bog'liq bo'lgan eksperimental va klinik DNdagi hujayralarbuyrak kasalligining rivojlanishi. Bundan tashqari, siydikda eksfoliatsiyalangan hujayralardagi GSK3b giperaktivligi DN ning rivojlanishini bashorat qilishga qodir.
Cistanche tubulosa buyrak kasalligining oldini oladi, namunani olish uchun shu yerni bosing
![Deterioration of human diabetic nephropathy (DN) is associated with glycogen synthase kinase 3b (GSK3b) overexpression and hyperactivity in renal glomeruli and tubules. (a) Representative microscopic images of periodic acid–Schiff staining or peroxidase immunohistochemistry staining for GSK3b or the activated form of GSK3b (phosphorylated GSK3b at Y216 [p-GSK3b]) in normal control kidney specimens and in kidney biopsy tissues from diabetic patients, stratified according to histological classes of DN. Specific staining in glomerular podocytes and mesangial cells is indicated by black arrows and black arrowheads, respectively; specific staining in renal tubules is indicated by white arrowheads. Bar ¼ 50 mm. (b) Computerized morphometric analysis was performed on kidney sections stained for GSK3b and integrated pixel density is presented. *P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes; &P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class IV; $P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class III; #P < 0.05 versus tubulointerstitial staining in other DN classes. n ¼ 6–10. (c) Computerized morphometric analysis was performed on kidney sections stained for p-GSK3b and integrated pixel density presented. *P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes; &P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class IV; $P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class III; #P < 0.05 versus tubulointerstitial staining in other DN classes.](/Content/uploads/2021842169/202112101057096935b7a7e83b420997b0a2b2ccb12176.png "Deterioration of human diabetic nephropathy (DN) is associated with glycogen synthase kinase 3b (GSK3b) overexpression and hyperactivity in renal glomeruli and tubules. (a) Representative microscopic images of periodic acid–Schiff staining or peroxidase immunohistochemistry staining for GSK3b or the activated form of GSK3b (phosphorylated GSK3b at Y216 [p-GSK3b]) in normal control kidney specimens and in kidney biopsy tissues from diabetic patients, stratified according to histological classes of DN. Specific staining in glomerular podocytes and mesangial cells is indicated by black arrows and black arrowheads, respectively; specific staining in renal tubules is indicated by white arrowheads. Bar ¼ 50 mm. (b) Computerized morphometric analysis was performed on kidney sections stained for GSK3b and integrated pixel density is presented. *P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes; &P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class IV; $P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class III; #P < 0.05 versus tubulointerstitial staining in other DN classes. n ¼ 6–10. (c) Computerized morphometric analysis was performed on kidney sections stained for p-GSK3b and integrated pixel density presented. *P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes; &P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class IV; $P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class III; #P < 0.05 versus tubulointerstitial staining in other DN classes.")
![Deterioration of human diabetic nephropathy (DN) is associated with glycogen synthase kinase 3b (GSK3b) overexpression and hyperactivity in renal glomeruli and tubules. (a) Representative microscopic images of periodic acid–Schiff staining or peroxidase immunohistochemistry staining for GSK3b or the activated form of GSK3b (phosphorylated GSK3b at Y216 [p-GSK3b]) in normal control kidney specimens and in kidney biopsy tissues from diabetic patients, stratified according to histological classes of DN. Specific staining in glomerular podocytes and mesangial cells is indicated by black arrows and black arrowheads, respectively; specific staining in renal tubules is indicated by white arrowheads. Bar ¼ 50 mm. (b) Computerized morphometric analysis was performed on kidney sections stained for GSK3b and integrated pixel density is presented. *P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes; &P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class IV; $P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class III; #P < 0.05 versus tubulointerstitial staining in other DN classes. n ¼ 6–10. (c) Computerized morphometric analysis was performed on kidney sections stained for p-GSK3b and integrated pixel density presented. *P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes; &P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class IV; $P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class III; #P < 0.05 versus tubulointerstitial staining in other DN classes.](/Content/uploads/2021842169/2021121010573409d6aadc2e1d4dc78124d55406c4e0d6.png "Deterioration of human diabetic nephropathy (DN) is associated with glycogen synthase kinase 3b (GSK3b) overexpression and hyperactivity in renal glomeruli and tubules. (a) Representative microscopic images of periodic acid–Schiff staining or peroxidase immunohistochemistry staining for GSK3b or the activated form of GSK3b (phosphorylated GSK3b at Y216 [p-GSK3b]) in normal control kidney specimens and in kidney biopsy tissues from diabetic patients, stratified according to histological classes of DN. Specific staining in glomerular podocytes and mesangial cells is indicated by black arrows and black arrowheads, respectively; specific staining in renal tubules is indicated by white arrowheads. Bar ¼ 50 mm. (b) Computerized morphometric analysis was performed on kidney sections stained for GSK3b and integrated pixel density is presented. *P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes; &P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class IV; $P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class III; #P < 0.05 versus tubulointerstitial staining in other DN classes. n ¼ 6–10. (c) Computerized morphometric analysis was performed on kidney sections stained for p-GSK3b and integrated pixel density presented. *P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes; &P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class IV; $P < 0.05 versus glomerular staining in other DN classes except class III; #P < 0.05 versus tubulointerstitial staining in other DN classes.")
GSK3b, yuqori darajada konservalangan, redoksga sezgir serin/treonin-protein kinaz, markaziy ravishda insulin signalizatsiyasida, shuningdek, patofizyologik jarayonlar uchun muhim bo'lgan bir qator boshqa uyali signal yo'llarida ishtirok etadi.buyrakjarohat, ta'mirlash va qayta tiklash. Jigar va skelet mushaklari kabi insulinga sezgir to'qimalarda GSK3b bazal sharoitda faol bo'ladi va glikogen sintaza faolligini bostiradi.19,28 Insulin GSK3b ni serin 9da inhibitiv fosforillanish orqali tezda inaktiv qiladi, natijada glikogen biosintezi sodir bo'ladi. O'sib borayotgan dalillar to'plami GSK3b disregulyatsiyasi 2-toifa qandli diabet bilan bog'liqligini ko'rsatadi. , sichqonlarning skelet mushaklarida GSK3b ning transgenik haddan tashqari ko'payishi glyukoza bardoshliligi, insulin qarshiligi va giperinsulinemiyaga sabab bo'ladi.29,35 Aksincha, skelet mushaklarida GSK3b bo'lmagan sichqonlarda glyukoza bardoshliligi yaxshilangan.36 Doimiy ravishda, GSK3 ingibitorlari, masalan. hujayra liniyalari va to'qimalarida insulin ta'sirini taqlid qiladi.37 Bundan tashqari, semiz diabetik sichqonlarda GSK3 inhibitörleri insulin sezgirligi va glyukoza gomeostazini yaxshilagan.38buyrakan'anaviy ravishda insulin ta'sirining maqsadli organi sifatida ko'rib chiqilmagan. Biroq, yaqinda ishonchli dalillar insulin signalini kiritishini ko'rsatdibuyrakHujayralar, xususan podotsitlarda glomerulyar va saqlanishda asosiy rol o'ynaydibuyrakgomeostaz.39-41 Insulin tanqisligi yoki qarshilik tufayli podotsitlarda insulin signalizatsiyasining noto'g'riligi DNda kuzatilgan ko'plab patologik shikastlanishlar uchun asosiy tashabbuskor bo'lishi mumkin. Bundan tashqari, klinik tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, insulin qarshiligi hatto qandli diabet bo'lmagan normadan yuqori bo'lgan bemorlarda ham albuminuriyaning boshlanishi va og'irligi bilan bog'liq bo'lib, insulin qarshiligi o'z-o'zidan albuminuriyaga olib kelishi mumkinligini ko'rsatadi.42 Xuddi shunday, podotsitlarga xos insulin qarshiligi bo'lgan sichqonlar glomerulyar podotsitlarda insulin retseptorlarining shartli nokauti, rivojlangan albuminuriya va DN ni takrorlaydigan glomerulyar lezyonlar, giperglikemiya yoki diabetning yo'qligiga qaramay.41 Aksincha, diabetga chalingan hayvonlarda insulin sensibilizatorlari glyukemik nazoratdan mustaqil ravishda DN rivojlanishini sekinlashtirishga qodir.43 Ushbu topilmalar insulin signalizatsiyasi qondagi glyukoza darajasidan qat'iy nazar podotsitlar faoliyatini tartibga solishini ko'rsatadi. Biroq, insulin signalizatsiya yo'lining asosiy transduseri sifatida GSK3b ning DN patogenezi va rivojlanishidagi roli juda kam o'rganilgan.
Inbuyrak, GSK3b asosan podotsitlarda va kamroq darajada glomerulusdagi mezangial va endotelial hujayralarda ifodalanadi20,21 va keng ko'lamda buyrak tubulyar hujayralarida ifodalanadi. Bizning va boshqa guruhlarimizdan GSK3b ko'p podotsit topatik signalizatsiya yo'llarini integratsiyalashgan holda podotsitlarning avtonom shikastlanishiga vositachilik qilishini ko'rsatadigan ma'lumotlar mavjud. turli diabetik bo'lmagan glomerulopatiyalar.21 Bundan tashqari, progressivsurunkalibuyrakkasallik, GSK3b buyrak naychalari va interstitsial shikastlanishning modulyatori ekanligi aniqlandi. Biroq, GSK3b DNda ishtirok etadimi yoki yo'qmi, noaniq va jiddiy bahsli bo'lib kelgan, garchi ushbu tadqiqot GSK3b faollashuvining kuchayganligini ko'rsatdi.buyrakva siydik chiqarish hujayralarida DKD rivojlanishi yoki rivojlanishi bilan bog'liq bo'lishi mumkin. Masalan, streptozototsin qo'zg'atadigan qandli diabet bilan kasallangan kalamushlarda Lin va boshq. BIO) zaiflashgan proteinuriya va giperglikemiyani tuzatmagan holda DN ning glomerulyar lezyonlarini yaxshilaydi, bu GSK3b DNda zararli rol o'ynashini ko'rsatadi. Shuningdek, streptozototsin qo'zg'atgan qandli diabetga chalingan kalamushlarda Paeng va boshq.22 BIO yordamida shunga o'xshash xulosalar chiqardilar va diabetik sharoitda podotsitlar ichida GSK3b faolligini oshirish podotsitlar apoptozi va DN yo'qolishi bilan bog'liq degan xulosaga kelishdi. Bu boshqa in vitro tadqiqotiga mos keladi, bunda GSK3b yuqori glyukozali muhit ta'siridan keyin podotsitlar deferentsiyasi va shikastlanishiga vositachilik qilishi aniqlangan.47 Aksincha, Mariappan va boshq.48 GSK3b faollashuvi qandli diabet sabab bo'lgan holatni yaxshilaydi, deb ta'kidladilar.buyrakjarohat. Ularning tadqiqotida streptozototsin qo'zg'atgan diabetik sichqonlar GSK3b ni faollashtirishga qodir bo'lgan azot oksidi donori natriy nitroprussid bilan davolashdi. Ular albuminuriya, buyrak gipertrofiyasi va glomeruliyalarda hujayradan tashqari matritsaning to'planishi gipertenziya yoki giperglikemiyada yaxshilanish bo'lmaganda yaxshilanganligini aniqladilar. Biroq, bu topilmalar o'z-o'zidan albuminuriya va podotsitlar shikastlanishini rivojlantirgan konstitutsiyaviy faol GSK3 bilan genga mo'ljallangan knock-in sichqonlarining ma'lumotlariga keskin ziddir.49 Qarama-qarshi xulosalarni yarashtirish uchun kimyoviy ingibitorlar yoki aktivatorlar yordamida yaratilgan ma'lumotlarni sharhlashda ehtiyot bo'lish kerak. GSK3b. BIO GSK3b ning yuqori selektiv kichik molekulali inhibitori ekanligi bir necha bor tasdiqlangan bo'lsa-da, natriy nitroprussid GSK3b ning o'ziga xos faollashtiruvchisi emas, balki kuchli gemodinamik ta'sirga ega ekanligi ma'lum,50 bu uning albuminuriyani kamaytiradigan va renoprotektiv ta'sirini buzishi mumkin. diabetik sichqonlar. Birgalikda, ba'zi qarama-qarshi ma'lumotlarga qaramay, ustun dalillar GSK3b bilan bog'liqligini tasdiqlaydi.buyrakjarohatva DNda proteinuriya. Ushbu tadqiqotning bir nechta cheklovlarini ta'kidlash kerak. Birinchidan, klinikadan oldingi ma'lumotlar faqat JB/DB murin modellari bilan cheklangan. GSK3b ning rolining umumlashtirilishini aniqlashdiabetik buyrak shikastlanishi, DN ning boshqa modellarida, shu jumladan 1-toifa DN modellarida topilmalarni tasdiqlash kerak. Ikkinchidan, bu erda klinik kuzatuvlar cheklangan namuna hajmi va nisbatan qisqa kuzatuv vaqtiga ega bo'lgan diabetli bemorlarning retrospektiv kogortalaridan olingan. To'g'ri, keng miqyosli, istiqbolli, randomizatsiyalangan, ko'p markazli tadqiqotlar bizning kuzatuvlarimizni tekshirish va DKD natijalarini bashorat qilishda siydikdagi eksfoliatsiyalangan hujayralardagi GSK3b kuchini tasdiqlash uchun talab qilinadi.
![Receiver operating characteristic curve analysis of the power of baseline urinary albumin excretion (UAE) or relative glycogen synthase kinase 3b (GSK3b) activity (phosphorylated glycogen synthase kinase 3b at Y216 [p-GSK3b]/GSK3b) in urinary exfoliated cells for predicting the progression of renal impairment in diabetic patients.](/Content/uploads/2021842169/20211210111332cbda6209b31c4cb483b3aea3a6fafbed.png "Receiver operating characteristic curve analysis of the power of baseline urinary albumin excretion (UAE) or relative glycogen synthase kinase 3b (GSK3b) activity (phosphorylated glycogen synthase kinase 3b at Y216 [p-GSK3b]/GSK3b) in urinary exfoliated cells for predicting the progression of renal impairment in diabetic patients.")
GSK3b, yuqori darajada konservalangan, redoksga sezgir serin/treonin-protein kinaz, markaziy ravishda insulin signalizatsiyasida, shuningdek, patofizyologik jarayonlar uchun muhim bo'lgan bir qator boshqa uyali signal yo'llarida ishtirok etadi.buyrakjarohat, ta'mirlash va qayta tiklash. Jigar va skelet mushaklari kabi insulinga sezgir to'qimalarda GSK3b bazal sharoitda faol bo'ladi va glikogen sintaza faolligini bostiradi.19,28 Insulin GSK3b ni serin 9da inhibitiv fosforillanish orqali tezda inaktiv qiladi, natijada glikogen biosintezi sodir bo'ladi. O'sib borayotgan dalillar to'plami GSK3b disregulyatsiyasi 2-toifa qandli diabet bilan bog'liqligini ko'rsatadi. , sichqonlarning skelet mushaklarida GSK3b ning transgenik haddan tashqari ko'payishi glyukoza bardoshliligi, insulin qarshiligi va giperinsulinemiyaga sabab bo'ladi.29,35 Aksincha, skelet mushaklarida GSK3b bo'lmagan sichqonlarda glyukoza bardoshliligi yaxshilangan.36 Doimiy ravishda, GSK3 ingibitorlari, masalan. insulinga taqlid qiladi
hujayra liniyalari va to'qimalarda ta'siri.37 Bundan tashqari, semiz diabetik sichqonlarda GSK3 ingibitorlari insulin sezgirligi va glyukoza gomeostazini yaxshilagan.38 Buyrak an'anaviy ravishda insulin ta'sirining maqsadli organi sifatida ko'rib chiqilmagan. Shu bilan birga, yaqinda ishonchli dalillar buyrak hujayralarida, xususan podotsitlarda insulin signalizatsiyasi glomerulyar va buyrak gomeostazini saqlashda muhim rol o'ynashini ko'rsatdi.39-41 Insulin etishmovchiligi yoki qarshilik tufayli podotsitlardagi nuqsonli insulin signalizatsiyasi asosiy tashabbuskor bo'lishi mumkin. DNda kuzatilgan ko'plab patologik lezyonlar uchun. Bundan tashqari, klinik tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, insulin qarshiligi hatto qandli diabet bo'lmagan normadan yuqori bo'lgan bemorlarda ham albuminuriyaning boshlanishi va og'irligi bilan bog'liq bo'lib, insulin qarshiligi o'z-o'zidan albuminuriyaga olib kelishi mumkinligini ko'rsatadi.42 Xuddi shunday, podotsitlarga xos insulin qarshiligi bo'lgan sichqonlar glomerulyar podotsitlarda insulin retseptorlarining shartli nokauti, rivojlangan albuminuriya va DN ni takrorlaydigan glomerulyar lezyonlar, giperglikemiya yoki diabetning yo'qligiga qaramay.41 Aksincha, diabetga chalingan hayvonlarda insulin sensibilizatorlari glyukemik nazoratdan mustaqil ravishda DN rivojlanishini sekinlashtirishga qodir.43 Ushbu topilmalar insulin signalizatsiyasi qondagi glyukoza darajasidan qat'iy nazar podotsitlar faoliyatini tartibga solishini ko'rsatadi. Biroq, insulin signalizatsiya yo'lining asosiy transduseri sifatida GSK3b ning DN patogenezi va rivojlanishidagi roli juda kam o'rganilgan.
Buyrakda GSK3b asosan podotsitlarda va ozroq darajada glomerulusning mezangial va endotelial hujayralarida ifodalanadi20,21 va buyrak tubulyar hujayralarida keng tarqalgan. Bizning va boshqa guruhlarimizdan GSK3b ko'p podotsitlar patik signalizatsiya yo'llarini integratsiyalash orqali podotsitlarning avtonom shikastlanishiga vositachilik qilishini ko'rsatadigan ma'lumotlar mavjud. turli diabetik bo'lmagan glomerulopatiyalar.21 Bundan tashqari, progressiv surunkalibuyrakkasallik, GSK3b buyrak naychalari va interstitsial shikastlanishning modulyatori ekanligi aniqlandi. Biroq, GSK3b ning DN bilan bog'liqligi va qanday ishtirok etishi noaniq va keskin bahsli bo'lib kelgan, garchi ushbu tadqiqot buyrak va siydikda eksfoliatsiyalangan hujayralardagi GSK3b faollashuvining kuchayishi DKD rivojlanishi yoki rivojlanishi bilan bog'liq bo'lishi mumkinligini ko'rsatdi. Masalan, streptozototsin qo'zg'atadigan qandli diabetga chalingan kalamushlarda Lin va boshq. BIO) zaiflashgan proteinuriya va giperglikemiyani tuzatmagan holda DN ning glomerulyar lezyonlarini yaxshilaydi, bu GSK3b DNda zararli rol o'ynashini ko'rsatadi. Shuningdek, streptozototsin qo'zg'atgan qandli diabetga chalingan kalamushlarda Paeng va boshq.22 BIO yordamida shunga o'xshash xulosalar chiqardilar va diabetik sharoitda podotsitlar ichida GSK3b faolligini oshirish podotsitlar apoptozi va DN yo'qolishi bilan bog'liq degan xulosaga kelishdi. Bu boshqa in vitro tadqiqotiga mos keladi, bunda GSK3b yuqori glyukozali muhit ta'siridan keyin podotsitlar deferentsiyasi va shikastlanishiga vositachilik qilishi aniqlangan.47 Aksincha, Mariappan va boshq.48 GSK3b faollashuvi qandli diabet sabab bo'lgan holatni yaxshilaydi, deb ta'kidladilar.buyrakjarohat. Ularning tadqiqotida streptozototsin qo'zg'atgan diabetik sichqonlar GSK3b ni faollashtirishga qodir bo'lgan azot oksidi donori natriy nitroprussid bilan davolashdi. Ular albuminuriya, buyrak gipertrofiyasi va glomeruliyalarda hujayradan tashqari matritsaning to'planishi gipertenziya yoki giperglikemiyada yaxshilanish bo'lmaganda yaxshilanganligini aniqladilar. Biroq, bu topilmalar o'z-o'zidan albuminuriya va podotsitlar shikastlanishini rivojlantirgan konstitutsiyaviy faol GSK3 bilan genga mo'ljallangan knock-in sichqonlarining ma'lumotlariga keskin ziddir.49 Qarama-qarshi xulosalarni yarashtirish uchun kimyoviy ingibitorlar yoki aktivatorlar yordamida yaratilgan ma'lumotlarni sharhlashda ehtiyot bo'lish kerak. GSK3b. BIO GSK3b ning yuqori selektiv kichik molekulali inhibitori ekanligi bir necha bor tasdiqlangan bo'lsa-da, natriy nitroprussid GSK3b ning o'ziga xos faollashtiruvchisi emas, balki kuchli gemodinamik ta'sirga ega ekanligi ma'lum,50 bu uning albuminuriyani kamaytiradigan va renoprotektiv ta'sirini buzishi mumkin. diabetik sichqonlar. Birgalikda, ba'zi qarama-qarshi ma'lumotlarga qaramay, ustun dalillar GSK3b bilan bog'liqligini tasdiqlaydi.buyrakjarohatva DNda proteinuriya. Bir nechta cheklovlar
hozirgi tadqiqotni alohida ta’kidlash lozim. Birinchidan, klinikadan oldingi ma'lumotlar faqat dB / dB sichqoncha modellari bilan cheklangan. GSK3b ning rolining umumlashtirilishini aniqlashdiabetik buyrak shikastlanishi, DN ning boshqa modellarida, shu jumladan 1-toifa DN modellarida topilmalarni tasdiqlash kerak. Ikkinchidan, bu erda klinik kuzatuvlar cheklangan namuna hajmi va nisbatan qisqa kuzatuv vaqtiga ega bo'lgan diabetli bemorlarning retrospektiv kogortalaridan olingan. To'g'ri, keng miqyosli, istiqbolli, randomizatsiyalangan, ko'p markazli tadqiqotlar bizning kuzatuvlarimizni tekshirish va DKD natijalarini bashorat qilishda siydikdagi eksfoliatsiyalangan hujayralardagi GSK3b kuchini tasdiqlash uchun talab qilinadi.
Xulosa qilib aytganda, bizning tadqiqotlarimiz eksperimental va klinik DNda buyrak ifodasi va GSK3b faolligini kuchaytirganligini ko'rsatdi. Siydikdagi eksfoliatsiyalangan hujayralardagi GSK3b faolligi DN rivojlanishini bashorat qilish uchun yangi biomarker bo'lib xizmat qilishi mumkin. Bizning ma'lumotlarimiz siydikda eksfoliatsiya qilingan hujayralardagi GSK3b DN ning prognostik biomarkeri bo'lib xizmat qilishi mumkin bo'lgan qiymatni keng miqyosli, chuqur o'rganish uchun yo'l ochishi mumkin.
USULLARI
Hayvonlarni o'rganish
Hayvonlarni o'rganish institutsional hayvonlarni parvarish qilish va qo'mitasi tomonidan tasdiqlangan va ular AQSh Qishloq xo'jaligi departamenti qoidalariga va Milliy Sog'liqni saqlash institutining Laboratoriya hayvonlarini parvarish qilish va ulardan foydalanish bo'yicha qo'llanmasiga mos keladi. 6 haftalik yoshdagi erkak DB/DB sichqonlari va nazorat db/m littermatlar NanjingUniversity Model Animal Research Center (Nankin, Xitoy) dan sotib olindi va Zhengzhou universitetining markaziy hayvonot muassasasiga joylashtirildi. Barcha sichqonlar ad libitum bilan oziqlangan va 8-10 sichqon belgilangan yoshda o'ldirilgan. Belgilangan vaqtlarda siydik va qon namunalari olinadi. O'ldirgandan so'ng, buyraklar keyingi tekshirish uchun yig'ib olindi. Siydikdagi albumin darajasi sichqoncha albumini fermenti bilan bog'langan immunosorbent tahlil miqdorini aniqlash to'plami (Bethyl Laboratories, Montgomery, TX) yordamida o'lchandi. Siydikdagi kreatinin darajasi kreatinin tahlili to'plami (BioAssay Systems, Hayward, CA) yordamida aniqlandi.
Hujayra madaniyati
21 va 25-bo'laklar orasidagi shartli o'lmas sichqon podotsitlari Roswell Park Memorial Institute 1640 muhitida, avval aytib o'tilganidek, ruxsat etilgan sharoitlarda 10 foiz homila sigir zardobi bilan to'ldirilgan muhitda yetishtirildi. keyin 5 mM glyukoza, glyukoza (25 mM) va o'sish omili b1 (2 ng / ml) dan iborat diabetik muhit yoki 48 uchun 20 mM mannitolni o'z ichiga olgan yuqori osmolallikni nazorat qiluvchi muhitga ta'sir qiladi. soat. Sichqoncha proksimal quvurli epiteliya hujayralari va sichqonchaning glomerulyar mezangial hujayralari Dulbekkoning o'zgartirilgan Eagle muhitida/F12 5 foizli homila sigir zardobi bilan to'ldirildi. Hujayralar 24 soat davomida 5% homila sigir zardobini o'z ichiga olgan muhitga w70% qo'shilish darajasida qoplandi, so'ngra yana 24 soat davomida sarum ochligini boshdan kechirdi, so'ngra 5 mM glyukozani o'z ichiga olgan oddiy muhit/madaniy muhitga ta'sir qildi, diabetik muhit. glyukoza (25 mM) va transformatsion o'sish omili b1 (2 ng/ml) yoki 48 soat davomida 5 mM glyukoza va 20 mM mannitolni o'z ichiga olgan yuqori osmolallik nazorati vositasi. Hujayra hayotiyligi Tripan ko'k istisno bilan baholandi. Belgilangan vaqt nuqtalarida hujayralar o'rnatildi yoki keyingi tekshirish uchun hujayra lizatlari to'plandi.
Vektorlarning vaqtinchalik transfeksiyasi
Bo'sh vektorni yoki GSK3b ning konstitutsiyaviy faol (S9A) mutantini (S9A-GSK3b-HA/ pcDNA3) belgilangan gemagglutininni (HA) kodlovchi vektorlar doktor Geyl VW Jonson (Birmingem, AL) tomonidan taqdim etilgan va madaniy podotsitlarga transfektsiya qilingan, mezangial hujayralar va quvurli epitelial hujayralar Lipofektamin 2000 (Life Technologies, Carlsbad, CA) dan yuqorida ta'riflanganidek. Keyinchalik hujayralar to'plangan va Western blot tahlili yoki boshqa tahlillar uchun tayyorlangan.
RNK
GSK3b ga xos 3 ta sichqonchadan iborat kichik, interferensiya qiluvchi RNK duplekslari — 50-CUUGUCCUGUAGAACUUUCtt-30, 50-AUGAUCCAUUUCCAAUCACtt-30 va 50-AUACCGCAGUCGGACUAUGtt-30 — Sichqoncha GSK3b genining toʻliq kodlash ketma-ketligiga muvofiq ishlab chiqilgan va sintez qilingan (GenBank kirish no.BC060743.1). Bundan tashqari, RNK nazorati sifatida sichqonlar, kalamushlar yoki odamlardan olingan maʼlum genlar ketma-ketligiga oʻxshash boʻlmagan shifrlangan kichik, interferension RNK ketma-ketligi (50-GCGAGUAGCGCUAGGAAGUtt-30) ishlatilgan. Lipofektamin (Invitrogen, Carlsbad, CA) vositachiligida genlarni o'chirish samaradorligi GSK3b uchun immunoblot tahlili bilan baholandi. RNKdan 24 soat o'tgach, madaniy podotsitlar, mezangial hujayralar va quvurli epiteliya hujayralarida GSK3b oqsilining ifodalanishining qoniqarli bostirilishi kuzatildi. Keyin hujayralar keyingi tahlillar uchun qayta ishlanishidan oldin yuqorida aytib o'tilganidek, 48 soat davomida normal muhit/madaniy muhit, diabetik muhit yoki yuqori osmolallik nazorati muhitiga ta'sir qildi.
Klinik tadqiqotlar
Ushbu tadqiqotning klinik qismi 1975 yil Xelsinki deklaratsiyasining axloqiy qoidalariga mos keldi va Zhengzhou universitetining birinchi bog'langan kasalxonasining institutsional tekshiruv kengashi tomonidan tasdiqlangan. Inson tadqiqot ishtirokchilari ushbu tadqiqot uchun maxsus jalb etilmagan. Barcha klinik ma'lumotlar retrospektiv diagrammani ko'rib chiqish va arxivlangan to'qimalar bo'limlarini yoki siydik namunalarini tekshirish orqali to'plangan. Ortiqcha yoki tashlab yuborilgan buyrak biopsiyasi namunalari, shuningdek fraksiyalangan siydik namunalari Chjenchjou universitetining birinchi filiali kasalxonasining Nefrologiya institutida muntazam ravishda bankka olindi. DN ning turli bosqichlarida bo'lgan bemorlardan arxivlangan noma'lum formalin bilan biriktirilgan kerosin bilan o'rnatilgan buyrak biopsiya to'qimalari tekshirish uchun tasodifiy tanlangan. Qon tomir anomaliyalari sababli transplantatsiya uchun tashlab yuborilgan buyraklardan yoki preimplantatsiyadan oldingi biopsiya to'qimalaridan gistomorfologik lezyonsiz qo'shimcha buyrak namunalari olindi va oddiy nazorat sifatida xizmat qildi. Retrospektiv kohort tadqiqoti uchun 2010 yildan beri kuzatilgan 2-toifa qandli diabet bilan og'rigan jami 127 bemor fraksiyalangan siydik namunalari bilan ushbu tadqiqotga qo'shilish uchun retrospektiv tekshiruvdan o'tkazildi. O'rganilgan bemorlar 29 yoshdan 80 yoshgacha bo'lgan va Amerika Diabet Assotsiatsiyasi mezonlariga ko'ra 2-toifa diabet tashxisi qo'yilgan. Cheklash mezonlari kuzatuvni yo'qotish, noto'g'ri ma'lumot,buyrakdisfunktsiya, or overt proteinuria at baseline, or other superimposed kidney diseases such as acute kidney injury or glomerulopathies. Finally, 60 patients have enrolled in this study for further assessment. All patients had been followed up for >5 yil. Muntazam kuzatuv davomida demografik ma'lumotlar, shuningdek, klinik ko'rsatkichlar, jumladan, jinsi, yoshi, qo'shma kasalliklar, dori-darmonlar, diabetning davomiyligi, qon bosimi, glisemik daraja, sarum kreatinin darajasi, siydik tahlili ma'lumotlari, BAA va eGFR. 5 yillik kuzatuvdan keyingi klinik natija buyrak yetishmovchiligining rivojlanishining mavjudligi yoki yo‘qligi bo‘lib, u eGFR ning 25 foizga kamayishi yoki albuminuriyaning turli klinik bosqichlarida og‘irlik darajasining oshishi bilan ko‘rsatilgan albuminuriyaning rivojlanishi sifatida belgilangan. DN, ya'ni normoalbuminuriya, mikroalbuminuriya, makroalbuminuriya yoki ochiq proteinuriya. Barcha bemorlar yozma ma'lumotli rozilik berishdi.
Buyrak morfologiyasini baholash va immunohistokimyoviy tahlil
Parafin bilan o'rnatilgan formalin bilan biriktirilgan sichqonchaning buyrak to'qimalari bloklari 3- mm bo'laklarga kesildi. Umumiy gistologiya uchun bo'limlar davriy kislota-Schiff bo'yash uchun qayta ishlandi. GSK3b va p-GSK3b uchun immunohistokimyoviy bo'yash VECTASTAIN ABC to'plami (Vector Laboratories, Burlingame, CA) yordamida amalga oshirildi. hech qanday binoni sodir bo'lmadi. Barcha bo'limlarning morfologik xususiyatlari bitta kuzatuvchi tomonidan buyrak patologi yordami bilan ko'r-ko'rona baholandi.
Immunofluoresan bo'yash
O'stirilgan hujayralar yoki muzlatilgan kriostat bo'limlari birlamchi antikorlar bilan mahkamlangan va bo'yalgan va keyin Alexa Fluor bilan konjugatsiyalangan ikkilamchi antikorlar (Invitrogen) qo'llaniladi. Salbiy nazorat sifatida birlamchi antikorlar bir xil turdagi preimmun IgG bilan almashtirildi; hech qanday binoni sodir bo'lmadi. Nihoyat, bo'laklar 40,{1}}diamidino-2-fenilindol yoki propidiy yodid bilan qarama-qarshi bo'yalgan va VECTASHIELD o'rnatish vositasi (Vector Laboratories) bilan o'rnatilgan. FL floresan mikroskopi uchun barcha bo'limlar bir vaqtning o'zida ftoroxromning o'zgaruvchan parchalanishi tufayli artefaktlarni istisno qilish uchun tahlil qilindi. Bo'limlar Spot II raqamli kamerasi (Olimp, Tokio, Yaponiya) bilan jihozlangan Olympus FL floresan mikroskopi yordamida tekshirildi. Ikki rangli binoni uchun, bo'yoq aralashuviga yo'l qo'ymaslik uchun tasvirlar ketma-ket olingan. ImageJ dasturi (Milliy Sog'liqni saqlash institutlari, Bethesda, MD) tasvirlarni qayta ishlash, masalan, masshtablash, birlashtirish va kolokalizatsiya tahlili uchun ishlatilgan.
Kompyuterlashtirilgan morfometriya
Immunohistokimyoviy bo'yash tasvirlari mikroskopga (Olympus BX41, Olympus) va kompyuterga biriktirilgan yuqori aniqlikdagi zaryad bilan bog'langan raqamli kameradan iborat kompyuterlashtirilgan tasvirni tahlil qilish tizimi yordamida olingan va raqamlangan. Tasvirlar 1024 768 piksel (fazoviy oʻlcham, 0,24 mm/piksel) piksel oʻlchamlari bilan koʻrsatildi. Inson buyragi to'qimalarining immunohistokimyoviy bo'yalgan tasvirlari uchun ImageJ dasturi tasvirni segmentatsiyalash, chegarani belgilash va signal intensivligini o'lchash uchun ishlatilgan. Zarur bo'lganda qo'lda tuzatishlar amalga oshirildi. Umuman olganda, morfometrik tahlil uchun 10 ta glomeruli yoki 10 ta tasodifiy tubulointerstitial maydonlar namunasi olindi va yakuniy ma'lumotlar nazorat guruhiga nisbatan integratsiyalangan piksel zichligi qiymati sifatida ifodalandi.
G'arbiy immunoblot tahlili
Madaniyatli hujayralar lizing qilindi;buyrakto'qimalaryoki ajratilgan buyrak glomerullari proteaz inhibitörleri bilan to'ldirilgan radioimmunopresipitatsiya assay buferida homogenlashtirildi va namunalar immunoblot tahlili uchun ishlangan. Siydikdagi cheklangan miqdordagi eksfoliatsiyalangan hujayralarni immunoblot tahlil qilish uchun Western blot protokoli yuqori samarali NuPAGE Bis-Tris Gels (Invitrogen) va yuqori sifatli uzatish membranalaridan foydalangan holda yuqorida tavsiflanganidek o'zgartirildi.25 Qayta qilingan immunoblotting. 1000 ga yaqin hujayralarda o'rtacha darajada ifodalangan oqsillarni aniqlang. GSK3b, fibronektin, kollagen IV, aktin va glitseraldegid{6}}fosfatdehidrogenazaga (GAPDH) qarshi antikorlar Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA) dan sotib olingan; sinaptopodinga qarshi bo'lganlar PROGEN Biotechnik GmbH (Heidelberg, Germaniya) dan sotib olingan; va ZO-1 va p-GSK3bga qarshi bo'lganlar Cell Signaling Technology (Danvers, MA) dan sotib olingan.
Statistik tahlil
All in vitro studies were repeated 3 to 6 times. For immunoblot analysis, bands were scanned and the integrated pixel density was determined using a densitometer and the ImageJ analysis program, version 1.48 (National Institutes of Health). Data were expressed as mean -SD or median (interquartile range). All included patients had baseline data. Patients with missing data or lost to follow-up were excluded from this study. Continuous variables were analyzed as appropriate by using the t-test, Mann-Whitney U test, or 1-way analysis of variance (ANOVA) followed by the Student-NewmanKeuls test if there were 3 comparisons or by the Scheffé test if there were >3 ta taqqoslash. Kategorik ma'lumotlar guruhlar o'rtasida chi-kvadrat testi yordamida taqqoslandi. 2 parametr orasidagi mumkin bo'lgan munosabatlarni tekshirish uchun chiziqli regressiya tahlili qo'llanildi. Tegishli o'zgaruvchilar va buyrak etishmovchiligining rivojlanish xavfi o'rtasidagi bog'liqlikni baholash uchun Univariate Cox proportsional xavf regression tahlillari o'tkazildi, so'ngra potentsial chalkashliklar bo'yicha ko'p o'lchovli tahlillar o'tkazildi. Qandli diabet bilan og'rigan bemorlarda buyrak etishmovchiligining rivojlanishini bashorat qilishda ma'lum o'zgaruvchilarning kuchini tahlil qilish uchun ROC egri chizig'i tahlili o'tkazildi va ROC egri chizig'i ostidagi joylar o'lchandi. Birlashgan Arab Amirliklari kabi noodatiy taqsimlanmagan o'zgaruvchilar, ROC egri chizig'i tahlillari uchun Cox proportsional xavf regressiya tahlillari uchun normallikka erishish uchun logarifm orqali o'zgartirildi. Barcha statistik tahlillar PSS versiyasi 22 (IBM Corporation, Armonk, NY) yordamida amalga oshirildi. P qiymatlari<0.05 in2-tailed="" tests="" were="" considered="" statistically="" significant="" in="" all="">
OSHHOR QILISh
Barcha mualliflar raqobatdosh manfaatlar yo'qligini e'lon qilishdi.
MAQDAT
Ushbu tadqiqotning bir qismi KidneyWeek 2016 da og'zaki taqdimot sifatida taqdim etildi: Amerika Nefrologiya Jamiyatining yillik yig'ilishi, 2016 yil 15-20 noyabr, Chikago, IL. RG qisman Sog'liqni saqlash jamg'armasi tomonidan qo'llab-quvvatlandi. XL sirtqi ta'lim olish uchun tadqiqot stipendiyasi tomonidan qo'llab-quvvatlandi. ZL Xitoyning Milliy Tabiatshunoslik Jamg'armasi tomonidan U1604284, 81770672 va 81873612 grantlari tomonidan qo'llab-quvvatlandi. Ushbu tadqiqotni ishlab chiqish va o'tkazish, ma'lumotlarni to'plash va talqin qilish, qo'lyozmani tayyorlash va tasdiqlashda moliyachilarning roli yo'q edi.
MUALFOLAR HISSALARI
RG kontseptual g'oyalarni ishlab chiqdi. XL, ZL va RG tadqiqot dizayniga hissa qo'shdilar. XL, PW, BC, YG, AYG va BF hujayra madaniyati tajribalarini o'tkazdilar. XL va ZL hayvonlar ustida tajriba o'tkazdilar va diabetga chalingan bemorlardan ma'lumotlarni to'pladilar. XL, LJW, DKM, LDD, ZL va natijalarni muhokama qilish va sharhlashga hissa qo'shdi. qo‘lyozmani yozishda yetakchilik qildi. XL, BC va BF qo'lyozmalarni tahrirlashga hissa qo'shgan. Barcha mualliflar ushbu asarning barcha kontseptsiyasi va mulk huquqi RGga tegishli ekanligiga rozi bo'lishdi. Barcha mualliflar yakuniy qo'lyozmani tasdiqladilar.
QO'SHIMCHA MATERIAL
Qo'shimcha usullar.
S1-jadval. Nazorat sub'ektlari va diabetik nefropatiya bilan og'rigan bemorlarning xususiyatlari, diabetik nefropatiyaning gistologik sinflari bo'yicha tabaqalashtirilgan. Jadval S2. DKD belgilari bo'lmagan erta bosqichdagi diabetik bemorlarning retrospektiv kohortasining asosiy demografik, klinik va laboratoriya ma'lumotlari. Jadval S3. 2-toifa diabet bilan og'rigan erta bosqichdagi bemorlarning demografik, klinik va laboratoriya ma'lumotlari, 5 yillik kuzatuvdan so'ng buyraklar natijalariga ko'ra tabaqalashtirilgan. S1-rasm. GSK3b ning kuchaygan buyrak faoliyati rivojlanishi va og'irligini bashorat qiladiqandli diabetbuyrakkasallikdb/db sichqonlarda. Erkak db/db va db/m sichqonlari 4 va 13 haftalar orasida kuzatilgan. (A) 4 va 7 haftaliklarida och bo'lmagan sichqonlardan qon namunasi olindi va plazmadagi glyukoza darajasi tahlil qilindi. *P < 0.007="" haftalik="" sichqonlarga="" nisbatan="" 1="" db/m.="" n="" ¼="" 15–18.="" (b)="" spot="" siydik="" namunasi="" 4,="" 7,="" 10="" va="" 13="" xaftaliklarda="" olindi="" va="" siydik="" albumin="" va="" kreatinin="" nisbatlarini="" (uacr)="" aniqlash="" uchun="" siydik="" albumini="" va="" siydik="" kreatinin="" tahlilidan="" o'tkazildi.="" *="" 10="" haftalik="" sichqonlarga="" nisbatan="" p=""><0,001 db/m="" (n="" ¼="" 15-18);="" 13="" haftalik="" sichqonlarga="" nisbatan="" #p=""><0,001 db/m.="" n="" ¼="" 15–18.="" (c)="" barcha="" sichqonlar="" 7="" haftalik="" yoshida="" ochiq="" buyrak="" biopsiyasi="" oldilar="" va="" biopsiya="" namunalari="" p-gsk3b,="" gsk3b="" va="" gapdh="" uchun="" immunoblot="" tahlili="" uchun="" qayta="" ishlandi.="" (d)="" immunoblotlar="" densitometrik="" tahlildan="" o'tkazildi.="" gsk3b="" va="" p-gsk3b="" ning="" nisbiy="" ko'pligi,="" nazorat="" db="" m="" sichqonlari="" bilan="" solishtirganda,="" katlama="" o'zgarishi="" sifatida="" tegishli="" molekula="" gapdh="" ning="" densitometrik="" nisbati="" sifatida="" aniqlandi.="" gsk3b="" ning="" nisbiy="" faolligi="" nazorat="" db/m="" sichqonlarining="" burmalari="" sifatida="" p="" gsk3b="" ning="" gsk3b="" nisbati="" sifatida="" hisoblangan.="" (e)="" chiziqli="" regressiya="" tahlili="" db/db="" sichqonlarda="" 7="" xaftalikdagi="" buyrak="" gsk3b="" faolligi="" va="" albuminuriya="" rivojlanishi="" va="" zo'ravonligi="" o'rtasida="" statistik="" jihatdan="" muhim="" ijobiy="" korrelyatsiyani="">qandli diabetbuyrakkasallik13 haftalik yoshda. R ¼ 0,699; P ¼ 0.0{{20}}1. (F) Qabul qiluvchining operatsion xarakteristikasi egri chizig'i tahlili shuni ko'rsatdiki, diabetning dastlabki bosqichlarida (7 haftalik) buyrak GSK3b faolligi db / db sichqonlarda 13 haftalik yoshda albuminuriya va DKD rivojlanishini bashorat qilishda ajoyib aniqlik va quvvat beradi. S2-rasm. Insulin qarshiligi va yuqori muhitdagi glyukoza buyrak hujayralarida GSK3b ni sinergik tarzda faollashtiradi. (A) Madaniyatli sichqon podotsitlari, (B) siydik glomerulyar mezangial hujayralari (MMC) va (C) buyrak tubulasi epitelial hujayralari (TEC) siRNK oligonükleotidlari (siCon) yoki siRNK oligonukleotidlari (siIRb) izoformasi bilan transfektsiyalangan. In vitro insulin qarshiligi holatini modellashtirish uchun insulin retseptorlari (IRB). Keyin hujayralar 48 soat davomida oddiy glyukoza o'z ichiga olgan normal muhitga (NG) yoki yuqori glyukoza o'z ichiga olgan diabetik muhitga (HG) ta'sir qildi. Hujayra lizatlari to'plandi va IRB, p-GSK3b, GSK3b va GAPDH uchun immunoblot tahlilidan o'tkazildi, so'ngra blotlarning densitometrik tahlili o'tkazildi. *SiCon bilan davolash qilingan hujayralardagi IRB ifodasiga nisbatan P <0,01 (n="3)," siirb+ng="" yoki="" sicon+hg="" guruhidagi="" (n="3)" bir="" xil="" protein="" ifodasiga="" nisbatan=""><0,05,>< ikkinchi="" +="" hg="" yoki="" siirb="" +="" ng="" guruhidagi="" bir="" xil="" protein="" ifodasiga="" nisbatan="" 0,05="" (n="" ¼="" 3).="" s3-rasm.="" sog'lom="" tirik="" donorlar="" va="" diabetik="" nefropatiya="" bilan="" og'rigan="" bemorlardan="" olingan="" inson="" buyragi="" namunalarida="" gsk3b="" mrnkning="" ifoda="" darajalari.="" ma'lumotlar="" www.nephroseq.org="" saytidan="" ju="" ckd="" glom="" ma'lumotlar="" to'plami51="" asosida="" olingan="" va="" log2="" o'rtacha="" markazlashtirilgan="" intensivlik="" sifatida="" ifodalangan.="" s4-rasm.="" qandli="" diabet="" bilan="" og'rigan="" bemorlarning="" siydik="" chiqarish="" hujayralarida="" gsk3b="" faolligi="" oshishi="" diabetik="" buyrak="" kasalligining="" rivojlanishini="" taxmin="" qiladi.="" (a,="" b)="" qandli="" diabet="" bilan="" og'rigan="" erta="" bosqichdagi="" bemorlardan="" (pts)="" va="" sog'lom="" nazoratdan="" (ctrls)="" to'plangan="" siydik="" chiqarish="" hujayralarida="" gsk3b="" va="" faollashtirilgan="" gsk3b="" ni="" aniqlash.="" siydik="" yo'llarining="" eksfoliatsiyalangan="" hujayralari="" to'plangan="" va="" lizislangan.="" hujayra="" lizatlari="" gsk3b,="" p-gsk3b="" va="" gapdh="" uchun="" immunoblot="" tahlili="" uchun="" ishlangan.="" (c)="" immunoblotlar="" densitometrik="" tahlildan="" o'tkazildi.="" gsk3b="" va="" p-gsk3b="" ning="" nisbiy="" ko'pligi="" tegishli="" molekula/gapdh="" ning="" densitometrik="" nisbati="" sifatida,="" nazorat="" (ctrls)="" bilan="" solishtirganda="" qatlam="" o'zgarishi="" sifatida="" aniqlandi.="" gsk3b="" ning="" nisbiy="" faolligi="" p-gsk3b="" ning="" gsk3b="" ga="" nisbati="" sifatida="" normal="" nazorat="" burmalari="" (ctrls)="" sifatida="" hisoblangan.="" (d)="" qabul="" qiluvchining="" ishlash="" xarakteristikasi="" egri="" chizig'ini="" tahlil="" qilish="" shuni="" ko'rsatdiki,="" erta="" bosqichdagi="" diabet="" bilan="" kasallangan="" bemorlardan="" to'plangan="" siydik="" chiqarish="" hujayralarida="" nisbiy="" gsk3b="" faolligi="" (p-gsk3b="" gsk3b="" nisbati)="" diabet="" rivojlanishini="" bashorat="" qilishda="" juda="" yaxshi="" aniqlikni="">diabetik buyrak kasalligi5 yil ichida, egri chiziq ostidagi maydon (AUC) bilan 0,886.
ADABIYOTLAR
1. Umanat K, Lyuis JB. Diabetik nefropatiya bo'yicha yangilanish: Asosiy o'quv dasturi 2018. Am J Kidney Dis. 2018;71:884–895.
2. Gregg EW, Li Y, Vang J va boshqalar. Qo'shma Shtatlarda diabet bilan bog'liq asoratlarning o'zgarishi, 1990-2010. N Engl J Med. 2014;370:1514–1523.
3. Haller H, Ito S, Izzo JL Jr va boshqalar. Olmesartan 2-toifa diabetda mikroalbuminuriyani kechiktirish yoki oldini olish uchun. N Engl J Med. 2011;364:907–917.
4. Schena FP, Gesualdo L. Diabetik nefropatiyaning patogenetik mexanizmlari. J Am Soc Nephrol. 2005;16 (qo‘shimcha 1):S30–S33.
5. Ritz E, Zeng XX, Rychlik I. Diabetik nefropatiyaning klinik ko'rinishi va tabiiy tarixi. Nefrolga hissa qo'shing. 2011;170:19–27.
6. Xolman RR, Pol SK, Bethel MA va boshqalar. 10-2-toifa diabetda intensiv glyukoza nazoratining yillik kuzatuvi. N Engl J Med. 2008;359:1577–1589.
7. Perkins BA, Ficociello LH, Ostrander BE va boshqalar. Mikroalbuminuriya va 1-toifa diabetda buyrak funktsiyasining erta progressiv pasayishi xavfi. J Am Soc Nephrol. 2007;18:1353–1361.
8. Koye DN, Magliano DJ, Reid CM va boshqalar. Qandli diabet bilan og'rigan odamlarda normoalbuminurik CKD ning buyrak kasalligining yakuniy bosqichiga o'tish xavfi: CRIC (surunkali buyrak etishmovchiligi kohorti) tadqiqoti. Am J Buyrak Dis. 2018;72:653–661.
9. Caramori ML, Fioretto P, Mauer M. Diabetik nefropatiya xavfining erta bashoratchilariga bo'lgan ehtiyoj: albuminning ajralib chiqish darajasi etarlimi? Qandli diabet. 2000;49:1399–1408.
10. Caramori ML, Fioretto P, Mauer M. Normoalbuminurik tip 1 diabetli bemorlarda past glomerulyar filtratsiya darajasi: yanada rivojlangan glomerulyar lezyonlarning ko'rsatkichi. Qandli diabet. 2003;52:1036–1040.
11. Krolevski AS. Buyrakning progressiv pasayishi: 1-toifa diabetdagi diabetik nefropatiyaning yangi paradigmasi. Qandli diabetga g'amxo'rlik qilish. 2015;38:954–962.
12. Robles NR, Villa J, Gallego RH. Proteinurik bo'lmagan diabetik nefropatiya. J Clin Med. 2015;4:1761–1773.
13. Adler AI, Stevens RJ, Manley SE va boshqalar. 2-toifa diabetda nefropatiyaning rivojlanishi va rivojlanishi: Buyuk Britaniyaning istiqbolli diabet tadqiqoti (UKPDS 64). Buyrak Int. 2003;63:225–232.
14. Gluhovschi C, Gluhovschi G, Petrica L va boshqalar. Erta diabetik nefropatiyani baholashda siydik biomarkerlari. J Diabetes Res. 2016; 2016: 4626125.
15. Doi T, Moriya T, Fujita Y va boshqalar. Siydik IgG4 va Smad1 diabetik nefropatiyaning dastlabki bosqichlarida buyrakning strukturaviy va funktsional o'zgarishlarining o'ziga xos biomarkerlari hisoblanadi. Qandli diabet. 2018;67:986–993.
16. De S, Kuwahara S, Hosojima M va boshqalar. Ekzotsitoz vositachiligida siydik bilan to'liq uzunlikdagi megalin ajralishi diabetik nefropatiyaning patogenezi bilan bog'liq. Qandli diabet. 2017;66:1391–1404.
17. Xu W, Ge Y, Liu Z va boshqalar. Glikogen sintaza kinaz 3b paxillin faolligini modulyatsiya qilish orqali podotsitlar harakatini va fokal adezyon aylanishini belgilaydi: podotsitopatiyada past dozali litiyning himoya ta'siriga ta'siri. Men J Pathol. 2014;184:2742–2756.
18. Ali A, Xoefiich KP, Vudget JR. Glikogen sintaza kinaz-3: xususiyatlari, funktsiyalari va tartibga solinishi. Chem Rev. 2001;101:2527–2540.
19. Beurel E, Grieco SF, Jope RS. Glikogen sintaza kinaz-3 (GSK3): tartibga solish, harakatlar va kasalliklar. Pharmacol Ther. 2015;148:114–131.
20. Li C, Ge Y, Dworkin L va boshqalar. GSK3 ning b izoformasi proteinurik glomerulopatiyada podotsit avtonom shikastlanishiga vositachilik qiladi. J Patol. 2016;239:23.