Abstrakt

Dendrobium loddigesii chang poyalarining suvli etanol ekstraktlari uchta yangi fenolik moddalarni, shu jumladan uchta -7-O-etil-9-O-(4-gidroksifenil)propionil-diatsilgliserol (1), (R){{ 7}},5,4ʹ-trigidroksi-3,3ʹ, -trimetoksibibenzil (2) va (S)-5,5′,7-trigidroksi-3′,4′ -dimetoksifavanon (3), o'n bitta ma'lum analoglari bilan birga. Ularning tuzilmalari keng spektroskopik tahlil orqali aniqlandi. Tabiiy antioksidantlar, oqartiruvchi va qarishga qarshi vositalarni aniqlash uchun ushbu fenolik moddalarning 1,{24}}difenil-2-pikrilgidrazil (DPPH) radikalini, tirozinaza ishlab chiqarishni inhibe qilish qobiliyatini tozalash qobiliyati baholandi. inson teri fibroblastlari-kattalar (HDFa) tahlili orqali kollagen ishlab chiqarishni rag'batlantirish qobiliyatlari. 1, 4-8, 13 va 14 birikmalari sezilarli DPPH radikallarini tozalash faolligini, 10 birikmasi tirozinazni inhibe qiluvchi faollikni (IC50 37.904 ug/ml) va 9 birikmasi kollagen ishlab chiqarishni sezilarli darajada ko'rsatishi aniqlandi. EC50 qiymati 3,182 ug/ml. Ushbu natijalar D. loddigesii ning fenolik tarkibiy qismlari nomzod antioksidantlar, terini oqartiruvchi va / yoki qarishga qarshi vositalar bo'lishi mumkinligini ko'rsatadi.

Tegishli tadqiqotlarga ko'ra,cistancheumumiy hisoblanadio'tBu "umrni uzaytiruvchi mo''jizaviy o't" sifatida tanilgan. Uning asosiy komponentisistanozidkabi turli xil effektlarga egaantioksidant, yallig'lanishga qarshi, vaimmunitet funktsiyasini rag'batlantirish. Cistanche va o'rtasidagi mexanizmterini oqartirishning antioksidant ta'sirida yotadicistanche glikozidlari. Inson terisida melanin oksidlanishi natijasida hosil bo'laditirozintirozinaz tomonidan katalizlanadi va oksidlanish reaktsiyasi kislorodning ishtirokini talab qiladi, shuning uchun organizmdagi kislorodsiz radikallar melanin ishlab chiqarishga ta'sir qiluvchi muhim omilga aylanadi. Cistanche tarkibida antioksidant bo'lgan va tanadagi erkin radikallarning paydo bo'lishini kamaytiradigan sistanozid mavjud.melanin ishlab chiqarishni inhibe qiladi.

Cistanche Tubulosa qo'shimchasini bosing

Qo'shimcha ma'lumot uchun:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Grafik abstrakt

1.Kirish

Dendrobium (Orchidaceae) jinsi dunyo bo'ylab taxminan 1500 turni o'z ichiga oladi, shundan 80 ga yaqin turi Xitoyda o'sadi [1]. Ushbu turdagi bir nechta o'simliklarning poyalari "Shi-Xu" nomi bilan mashhur bo'lib, ular ming yillar davomida an'anaviy xitoy tabobati va surunkali atrofik gastrit, terining qarishi, isitma, yurak-qon tomir kasalliklarini davolashda xalq davolari sifatida ishlatilgan. tana suyuqliklarini ishlab chiqarishni rag'batlantirish uchun tonik [2]. Ushbu jins bo'yicha oldingi tadqiqotlar bir qator polisaxaridlar, fenolik birikmalar, alkaloidlar va seskiterpenoidlarni [1, 3-5] ajratib olishga olib keldi, ularning ba'zilari turli xil bioaktivlikka ega, shu jumladan yallig'lanishga qarshi [6], mikroblarga qarshi [2], antioksidant. [7], antitumor [8], antiplatelet agregatsiyasi [9], immunomodulator [10] va gripp A ga qarshi [11].

Dendrobium loddigesii koʻp yillik epifitik oʻt Xitoyning Guansi, Guychjou va Yunnan provinsiyalari kabi janubi-gʻarbiy hududlarida keng tarqalgan [12]. Uning poyasi xalq tabobatida gastrit, isitma va bosh aylanishini davolashda qo‘llanilgan [13]. Ushbu turdan tarkibiy jihatdan xilma-xil va biologik faol tabiiy mahsulotlarni qidirishni davom ettirishda [1, 5, 14-17], bu o'simlik turidan farmakologik faol tarkibiy qismlarni chuqur tekshirish o'tkazildi. Natijada, D. loddigesii poyasining 80 foizli etanolik ekstraktidan uchta yangi fenolik birikma (1-3), shuningdek, ma'lum bo'lgan o'n bitta (1-rasm) ajratildi. Ushbu birikmalarning izolyatsiyasi, tuzilishi va biologik bahosi bu erda keltirilgan.

2 Natijalar va muhokama

Oq qattiq modda sifatida olingan 1-birikma (−)-HRESIMS ioni tomonidan m/z 389,1602 [M−H]− (C21H25O7 uchun hisoblangan, 389,16{{) bilan aniqlangan C21H26O7 molekulyar formulasini berdi. 28}}6) to‘qqiz daraja to‘yinmaganlik bilan. 1 ning 1H NMR spektri dH 6.85 (1H, d, J=1.7 Gts), 6.75 (1H, d, J=8.0 Gts), 6.68 (1H) da etti aromatik protonni o'z ichiga oladi. , dd, J = 8.0, 1.7 Gts), 7.01 (2H, d, J = 8.5 Gts) va 6.68 (2H, d, J = 8.5 Gts), 1,3,{43}}uch almashtirilgan benzol halqasi va 1,{45}}almashtirilgan benzol halqasi mavjudligini nazarda tutadi. Uning 13C NMR spektri 21 ta uglerod rezonansini, shu jumladan ikkita metil (bitta metoksi), to'rtta alifatik metilen, to'qqizta metin (ikkita sp3, etti sp2) va oltita to'rtlamchi uglerodni (bir karbonil, beshta olefin, shu jumladan uchta kislorodli) ko'rsatdi. H-7/C-1 (DC 131.6), C-2 (DC 111.7), C-6 (DC 121.4), C ning HMBC korrelyatsiyasi (2-rasm) -8 (DC 74.2) va C-10 (DC 65.3); H-9/C-7 (DC 83,8) va C-8 (DC 74,2); H-10/C-11 (DC 15,6); 3-OMe (dH 3.81)/C-3 (DC 149.1), H-7/H-8/H2-9 va H{{ korrelyatsiyalari bilan birga 1 H–1 H COZY spektridagi 87}}/H3-11 (2-rasm) 7-O-etilguayatsilgliserol [18] mavjudligini ko‘rsatdi. Shprits-glitserinlar va diatsilgliserol hosilalari uchun J7,8 eritroizomer uchun taxminan 5 Gts va uchta izomer uchun 7 Gts chastotasi haqida xabar berilgan. Shunday qilib, 1-birikma J7,8 (6,5 Gts) bilan uchta izomer deb hisoblangan [18]. H-7ʹ (DH 2.79, t, J = 7.5 Gts)/C-8ʹ (DC 37.1), C-1ʹ (DC 132.7), C-2ʹ, 6ʹ (DC 130.2) va C-9ʹ (DC) HMBC korrelyatsiyasi 174,6), H-8ʹ (DH 2,59, t, J = 7,5 Gts)/C-7ʹ (DC 31,0), C-1ʹ va C-9ʹ hamda H-8ʹ/H-7ʹ ning COZY kesishuv cho`qqilari ko`rsatilgan p-gidroksikumar kislotasining mavjudligi [19]. Yuqorida tavsiflangan dalillar asosida 1 ga 7-O-etilguaitsilgliserol qismi va ester aloqasi orqali p-gidroksi-kumar kislotasi bo'lishi taklif qilindi. HMBC korrelyatsiyasi H-9 dan C-9'gacha bo'lgan ester aloqasi C-9 va C-9' o'rtasida ekanligini ko'rsatdi. Shunday qilib, 1 ning tuzilishi ko'rsatilgandek aniqlandi.

(R){0}},5,4ʹ-trigidroksi-3,3ʹ, -trimetoksibibenzil (2) oq rangli qattiq modda sifatida olindi. HRESIMS 2 spektri m/z 319,1180 [M−H]− (C17H19O6, 319,1187 uchun hisoblangan) 8 daraja toʻyinmaganlik bilan kvazimolekulyar ion choʻqqisini koʻrsatdi. 2 ning 1H NMR spektri dH 3.75 (3H, s), 3.7 0 (3H, s) va 3.17 (3H, s) da uchta metoksil guruhini ko'rsatdi; dH 4.13 (1H, t, J=6.8 Hz, H-) da bitta kislorodli metin proton; dH 2.73 (1H, dd, J=13.5, 6.9 Hz) va 2.96 (1H, dd, J=13.5, 6.9 Hz) da ikkita metilen signali; va besh aromatik proton, 1,3,4,{51}}tetraalmashtirilgan aromatik halqa sifatida DH 6.28 (1H, d, J=1.8 Hz) va 6.34 (1H, d, J{{) 60}}.8 Hz) va 1,3{64}}uch almashtirilgan aromatik halqa DH 6.49 (1H, d, J=2.0 Hz), 6.62 (1H, d, J=8.0 Hz) va 6.52 (1H, dd, J = 8.0, 2.0 Gts). 2 ning 13CNMR va DEPT spektrlari uchta oksimetilen, bitta metilen, bitta kislorodli metin va 12 aromatik uglerodni (beshta kislorodli) ko'rsatdi. Uning NMR ma'lumotlarini (1-jadval) dendrokandin C [20] bilan taqqoslash katta o'xshashliklarni ko'rsatdi, bundan mustasno, HMBC korrelyatsiyalari bo'yicha 3'-OMe va H-5' dan C-3' da joylashgan yana bitta metoksil guruhi mavjudligi. C-3ʹ (DC 148,4). Bundan tashqari, 3-OMe va H-2/C ning bir nechta HMBC shovqinlari (2-rasm) -3 (dC 149,5); -OMe/C- (DC 86.9) mos ravishda C-3 va C-da boshqa metoksil guruhlarini taklif qildi. C-dagi mutlaq konfiguratsiya afilli D [h] 20 D –20,3, MeOH kabi salbiy optik aylanish ([h] 26 D -12,46) asosida R sifatida aniqlandi [15]. Shunga ko'ra, 2 ning tuzilishi ko'rsatilgandek aniqlandi.

(S){0},7,5'-Trigidroksi-3',4'-dimetoksifavanon (3) sariq amorf kukun shaklida olingan va molekulyar C17H16O7 (1{{69}) } vodorod tanqisligi indekslari) m/z 331.0819 [M – H]− (331.0823 hisobi) da (−)-HRESIMS ioniga koʻra. 206 va 294 nm da ultrabinafsha nurlanishining maksimal yutilishi flavanon mavjudligini ko'rsatdi [21]. 1H NMR spektri (1-jadval) aromatik bo'lmagan hududda joylashgan uchta signalni ko'rsatdi dH 5.29 (1H, dd, J=12.7, 3.1, H-2), 3.04 (1H, dd, J=17.1, 12.7, H-3ax) va 2.71 (1H, dd, J=17.1, 3.1, H-3 ekv), toʻrt aromatik protonlar dH 5.87 (1H, d, J=2.2, H-6), 5.91 (1H, d, J=2.2, H-8), 6.62 (1H, d, J=2.0, H-2ʹ) va 6.61 (1H, d, J=2.0, H-6ʹ), ikkita metoksil guruhi dH 3.83 (3H, s) va 3,77 (3H, s). 13C NMR va DEPT spektrlari (1-jadval) ikkita metoksi, bitta metilen, bitta metin, bitta karbonil uglerod va 12 aromatik uglerodni o'z ichiga olgan 17 uglerod uchun rezonanslarni o'z ichiga oladi. Uning NMR ma'lumotlarining keng qamrovli tahlili shuni ko'rsatdiki, uning planar tuzilishi dihidrotrisin bilan chambarchas bog'liq [22], dihidrotritsindagi OH-4' va OCH3-5' rezonanslari bundan mustasno, 3 da transpozitsiya qilingan. Bu HMBC o'zaro faoliyat bilan tasdiqlangan. tepaliklar (2-rasm) H-2ʹ, H-6ʹ va OCH3-4ʹ dan C-4ʹ gacha (DC 137,7), H-6ʹ dan C-5ʹ gacha (DC 151,8). C-2 dagi mutlaq konfiguratsiya uning optik aylanishida manfiy o'ziga xos aylanish qiymati (- 46,64, MeOH) asosida S-shaklida bo'lgan deb taxmin qilingan [23]. Shunday qilib, 3- birikmaning tuzilishi ko'rsatilgandek bir ma'noda tayinlangan.

O'n bitta ma'lum bo'lgan birikmalar trepidatsiya 4 [24], meskalin 5 [25], 4,5,4'-trihidroksi- 3,3'-dimetoksibibenzil 6 [26], 4',5- dihidroksi-3,3'- dimetoksibibenzil 7 [27], Tristin 8 [28], III dagi batatlar 9 [27], 3,5,3'-gidroksibibenzil 10 [29], afilli C 11 [15], dentiform A 12 [30], dihidrokoniferil dihidro-p-kumarat 13 [31], p-gidroksifenil trans-ferulat 14 [32] spektroskopik tahlil qilish va ularning spektral ma'lumotlarini adabiyotlar bilan solishtirish.

Fenolik birikmalar inson ratsionining ajralmas qismi bo'lib, kuchli zanjirni buzuvchi ta'siri tufayli kuchli antioksidantlar sifatida tanilgan va ular to'g'ridan-to'g'ri oksidlanishga qarshi faollikka hissa qo'shishi mumkin [33]. DPPH radikalini tozalash tahlili antioksidant faollikni baholash uchun ishlatiladigan eng keng tarqalgan va nisbatan tez usullardan biridir. DPPH radikaliga vodorod atomini beradigan, so'ngra DPPH ning qisqargan shaklini keltirib chiqaradigan birikmalar potentsial antioksidant moddalar hisoblanadi. Barcha birikmalar DPPH radikallarini tozalash faoliyati uchun baholandi. Mavjud natijalar (2-jadval) shuni ko'rsatdiki, fenolik birikmalarning aksariyati (1, 4-8, 13 va 14) 100 ug / ml da 89,411 dan 94,278 foizgacha bo'lgan tozalash qobiliyatiga ega bo'lgan muhim faollikni ko'rsatdi.

Boshqa tomondan, tirozinaza mis o'z ichiga olgan ferment bo'lib, melanotsitlarda melanin biosintezi yo'lini boshqarishda muhim rol o'ynaydi [34]. Shuning uchun tirozinaz inhibitörleri giperpigmentatsiya va terini oqartirish vositalarini ishlab chiqish uchun kosmetika yoki dorivor mahsulotlarning muhim tarkibiy qismiga aylandi. Ushbu tadqiqotda barcha izolatlar tirozinazni inhibe qiluvchi faolligi uchun baholandi (2-jadval). Ijobiy nazorat sifatida terini oqartiruvchi vosita bo'lgan kojik kislota ishlatilgan. 3,5,3'-gidroksibibenzil (10) IC50 qiymati 37,904 ug / ml bo'lgan muhim inhibitiv faollikni aniqladi. Aphyllals C (11) o'rtacha inhibisyonni ko'rsatdi (IC50, 152,56 ug / ml). Qolgan barcha birikmalar 200 ug/ml gacha bo'lgan konsentratsiyalarda faol emas edi. Ushbu tadqiqotda 10 va 11 birikmalari melanin biosintezi bilan bog'liq teri kasalliklarini davolash uchun potentsial nomzod bo'lishi mumkin degan xulosaga kelish mumkin.

Ushbu turning tibbiy maqsadlarda terining qarishi uchun ishlatilishini hisobga olsak, kollagen terining mustahkamligi va elastikligi uchun juda muhimdir va uning buzilishi qarish bilan birga keladigan ajinlarga olib keladi [35]. Shunday qilib, barcha birikmalar HDFa da kollagen ishlab chiqarishga ta'siri uchun ataylab baholandi. Natijalar (2-jadval) 9- birikma HDFa kollagen ishlab chiqarish faolligini sezilarli darajada rag'batlantirishini ko'rsatdi (EC50 3,182 ug/ml). 6 va 7 birikmalar zaifroq faollikni ko'rsatdi, kollagen ishlab chiqarish 10 ug / ml da mos ravishda 33,062 va 29,157 foizni tashkil etdi. Mavjud natijalar nafaqat D. loddigesii ning etnofarmakologik qo'llanilishini qo'llab-quvvatladi, balki kuyish va oshqozon yarasi kabi kollagen etishmovchiligi bilan bog'liq kasalliklarni rivojlantirish uchun ishonchli tuzilma shablonini ham taqdim etdi.

3 Eksperimental

3.1 Umumiy eksperimental protseduralar

3.2 O'simlik moddasi

D. loddigesii poyalari 2014-yil sentabr oyida Xitoy Xalq Respublikasi, Yunnan provinsiyasi, Venshan shahridan toʻplangan va professor Xong Yu (Yunnan universiteti, Kunming, Xitoy Xalq Respublikasi) tomonidan aniqlangan. Vaucher namunasi (№ 20,140,829) G'arbiy Xitoydagi Fitokimyo va o'simlik resurslari davlat kalit laboratoriyasiga, Xitoy Fanlar akademiyasi Kunming Botanika institutiga saqlangan.

3.3 Ekstraktsiya va izolyatsiya

D. loddigesii ning quritilgan va changlangan poyalari (10,2 kg) xona haroratida 8{68}}% etanol bilan uch marta ekstraksiya qilingan va past bosim ostida konsentrlangan. Keyin qoldiq H2O ga to'xtatildi va EtOAc fraktsiyasini (22 0 g) olish uchun EtOAc bilan bo'lindi, u neft efiri/aseton gradienti (15:1 dan {{) gradienti bilan elutsiyalangan silikagel kolonnali xromatografiyasiga o'tkazildi. {110}}:1) 22 kasrni olish uchun (Fr.1–22). Fr.11 (6 g) CHCl3/MeOH (300:1) bilan elut qilingan silika jeli CCga, so'ngra MCI ustuniga (MeOH/H2O gradienti, 60:40-95:5) va silikagel CC (CHCl3/) ta'sir qildi. MeOH, 200:1) 12 (4 mg) hosil qilish uchun. Fr.13 (850 mg) MCI (MeOH/ H2O, 60:40 dan 95:5 gacha) ustunidan beshta fraksiya (Fr.13.1–Fr.13.5) hosil qilish uchun ajratildi. Fr.13.4 (150 mg) HPLC preparati (MeOH/H2O, 60:40) orqali 4 (3 mg) va 5 (5 mg) birikmalarini berdi. Fr.16 (19 g) 6 ta subfraktsiyani (Fr.16.1-Fr.16.6) hosil qilish uchun CHCl3/MeOH (100:1 dan 20:1) bilan elutsiyalangan silikagel ustunida xromatografiya qilindi. Fr.16.4 (2,3 g) MeOH/H2O (50:50–100:0) bilan elutsiya qilingan MCI ustuni qo'llanildi va keyin Sephadex LH-20 (MeOH/H2O, 90:10) ustuni ustida fraksiyalanadi. hosil 7 (716 mg) va 13 (39 mg). Fr.16.4, Fr.16.6 (240 mg) ning bir xil shartlaridan foydalangan holda 9 (7 mg) birikmasini oldi. Fr.18 (10 g) silika gel CC (CHCl3/MeOH, 100:1-20:1) bilan ajratilgan, so'ngra MCI (MeOH/H2O gradienti, 50:50-100:0) va Sephadex LH{{ dan o'tgan. 96}} (MeOH/H2O, 90:10) ustunlari 3 (25 mg) va 11 (4 mg) hosil qiladi. Fr.19 (20 g) etti fraksiyani (Fr.19.1-Fr.19.7) olish uchun MeOH / H2O (30: 70-100: 0) bilan elutlangan MCI ustuniga ta'sir qildi. Fr.19.5 (2.3 g) 8 (15 mg) va 10 (7 mg) olish uchun takroriy silikagel ustuni (CHCl3 / MeOH, 30: 1) bilan ajratildi. Fr.19.6 (4.3 g) silikagel ustunida (CHCl3/MeOH, 30:1) fraksiyalangan boʻlib, 5 ta fraksiya hosil boʻldi (Fr.19.6.1– Fr.19.6.5). Fr.19.6.1 (1,2 g) silika gel ustuniga (CHCl3/MeOH, 30:1) va HPLC (MeOH/H2O, 45:55) bilan tozalashdan so'ng 1 (15 mg) ni ta'minladi. Fr.19.6.3 (540 mg) MeOH/H2O (90:10) bilan elutsiya qilingan Sephadex LH-20 ustunining ustuniga qo'llanildi va keyin yarim tayyor HPLC (MeOH/H2O, 45:55) bilan tozalandi. 2 (6 mg) va 6 (5 mg) berish. Fr.20 (12 g) MCI jeli (MeOH/H2O, 30:70-100:0) xromatografik bosqichga qo'llangan va keyin 14 (21) hosil qilish uchun silikagel CC (CHCl3 / MeOH, 30:1) ga o'tkazilgan. mg).uchta{0}}O-Etil-9-O-(4-gidroksifenil) propionil-diatsilgliserol (1): oq rangli qattiq; [ ]D 26 – 3,72 (c 0,51, MeOH); UV (MeOH) lmax (log e) 203 (4,53), 225 (4,17), 280 (3,66) nm; IQ (KBr) nmax 3426, 1727, 1516, 829 sm−1; 1 H va 13C NMR (CD3OD), 1-jadvalga qarang; ESIMS m/z 389 [M−H]−, HRESIMS m/z 389.1602 [M−H]− (C21H25O7 uchun hisoblangan, 389.1606).

(R)-4,5,4'-Trigidroksi-3,3ʹ, -trimetoksibibenzil (2): oq amorf kukun; [ ]D 26 –12,46 (c 1,07, MeOH); UV (MeOH) lmax (log e) 204 (4,59), 286 (3,75) nm; IQ (KBr) nmax 3418, 1607, 1517, 1455, 1434, 796 sm−1; 1 H va 13C NMR (CD3OD), 1-jadvalga qarang; ESIMS m/z 319 [M−H]−, HRESIMS m/z 319.1180 [M−H]− (C17H19O6 uchun hisoblangan, 319.1187).

(2S)-5,7,3ʹ-trigidroksi-6,4,5-trimetoksifavon (3): sariq amorf kukun; [ ]D 26 – 46,64 (c 0,46, MeOH); UV (MeOH) lmax (log e) 206 (4,70), 294 (4,17) nm; IR (KBr) nmax 3335, 2940, 1641, 1514, 1462, 1345, 1434, 1182, 1091, 998, 833 sm−1; 1 H va 13C NMR (CD3OD), 1-jadvalga qarang; ESIMS m/z 331 [M−H]−, HRESIMS m/z 331.0819 [M−H]− (C17H15O7 uchun hisoblangan, 331.0823).

3.4 DPPH Radikallarni tozalash faolligini tahlil qilish

Erkin radikallarni tozalash faolligini tahlil qilish avvalgi usul [36] bo'yicha ba'zi o'zgartirishlar bilan amalga oshirildi. Qisqacha aytganda, 270 mL DPPH eritmasiga (100 mkM, eritmada erigan 1000 ug/ml, etanolda eritilgan) 30 mkl namunalar va Trolox (1 mM) qo‘shildi. metanol), mos ravishda. Reaksiya 1 soat davomida 37 gradusda 96-quduq mikroplastinasida davom etdi. So‘ngra absorbans 515 nm da o‘qildi va radikal tozalashning umumiy faolligi ulushi quyidagi formula bo‘yicha hisoblandi: inhibisyon foizi =[(A0− A1)/A0]×100 foiz, bunda A0 - bu yutilish darajasi Namunasiz DPPH (nazorat reaktsiyasi) va A1 namunalar bilan inkubatsiya qilingan DPPH ning absorbsiyasidir. Barcha testlar uch nusxada o'tkazildi va Trolox ijobiy nazorat agenti sifatida ishlatilgan.

3.5 Qo'ziqorin tirozinazasini inhibe qiluvchi tahlil

Tirozinaz faolligining inhibisyonu ilgari tasvirlangan [36] usulga muvofiq, ba'zi o'zgartirishlar bilan spektrofotometrik tarzda aniqlandi. Qisqacha aytganda, 10% DMSO tarkibida turli konsentratsiyali sinov birikmalari tayyorlangan. Namuna eritmasining har biri (2{15}} mM) L-Dopa (1,25 mM) bilan aralashtirildi va 97{17} mL 0,05 mM natriy fosfat tampon (PBS,) bilan suyultirildi. pH 6,8) probirkalarda. Reaksiya qo'ziqorin tirozinazasini (25 U/ml) qo'shish orqali boshlandi. Reaksiya aralashmasi xona haroratida 5 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi. Aralashmadagi Dopaxrom miqdori har bir quduqning yutilish qobiliyatini 490 nm da o'lchash orqali aniqlandi. Kojik kislota ijobiy nazorat sifatida ishlatilgan. Tirozinazaning inhibitiv ulushi quyidagi tenglama bo'yicha hisoblangan: Inhibisyon foizi=[(A0− A1)/A0] × 100 foiz, bunda A0 dopaxromning sinov birikmalarisiz (nazorat reaktsiyasi) va A1 absorbsiyasidir. sinov birikmalari bilan inkubatsiya qilingan Dopaxromning absorbsiyasidir.

3.6 HDFa tahlili orqali kollagen ishlab chiqarish

Minnatdorchilik Ushbu loyiha Yunnan provinsiyasi fan va texnologiya departamenti tomonidan moliyaviy qo‘llab-quvvatlandi (№ 2017ZF003-04, 2015HB093 va 2019HA001). Mualliflar barcha spektrlarni o'lchash uchun G'arbiy Xitoydagi Fitokimyo va o'simlik resurslari davlat asosiy laboratoriyasi, Kunming Botanika instituti, Xitoy Fanlar akademiyasi tahliliy guruhi xodimlariga minnatdorchilik bildiradilar.

Axloqiy me'yorlarga muvofiqlik

Ochiq kirishUshbu maqola Creative Commons Attribution 4 shartlari boʻyicha tarqatilgan.0 Asl muallif(lar) va manbaga tegishli eʼtirof berilgan taqdirda, har qanday vositada cheksiz foydalanish, tarqatish va koʻpaytirishga ruxsat beruvchi xalqaro litsenziya , Creative Commons litsenziyasiga havolani taqdim eting va o'zgartirishlar kiritilganligini ko'rsating.

Ma'lumotnomalar

Batafsil ma'lumot uchun: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501