Yuqori tezlikdagi qarama-qarshi oqim xromatografiyasi yordamida Deserticola YC Ma dan to'rtta birikmani tayyorlovchi izolyatsiyalash va tozalash

Aloqa: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Annotatsiya:

Silikagel ustunida tarkibiy boyitish bosqichidan so'ng, to'rttafeniletanoid glikozidlardan muvaffaqiyatli ajratildiCistanches deserticolava etil asetat-n-butanol-etanol-suv (40:6:6:50, v/v) dan tashkil topgan ikki fazali erituvchi tizimi bilan preparativ yuqori tezlikdagi qarama-qarshi oqim xromatografiyasi (HSCCC) bilan tozalangan. /v/v). HPLC-ELSD tomonidan aniqlangan jami 30,9 mg akteozid, 13,0 mg izoakteozid, 12,5 mg syringalid A 3'- -L-ramnopiranozid va 7,2 mg 2'-asetillakteosid tozaligi 95 foizdan yuqori bo'lgan. 297 mg dan bir bosqichli ajratishda olinganCistanche deserticola ekstrakti, mos ravishda. Ularning tuzilmalari HR-MS, 1H-NMR va 13C-NMR tomonidan aniqlangan.

Kalit so'zlar: yuqori tezlikdagi qarama-qarshi oqim xromatografiyasi;Cistanches deserticola YC Ma;feniletanoid glikozidlar; akteozid; izoakteozid; syringalid A 3'- -L-ramnopiranozid; 2'-asetilakteozid.

Kirish

Cistanches deserticolaYC Ma ning bir turiCistanchesOrobanchaceaefamily oilasiga mansub, buyrak etishmovchiligi, ayollarning bepushtligi, morbid leykoreya, nevropraksiya va qarilik ich qotib qolishini davolash uchun mashhur an'anaviy xitoy tabobati hisoblanadi [1]. Bu Xitoyning shimoli-g'arbiy qismida keng tarqalgan parazit o'simlik. Hozirgacha bu turdan bir qancha birikmalar, jumladan, feniletanoid glikozidlar (PhG), iridoidlar va lignanlar ajratilgan [2]. Ba'zi PHGlar antioksidant, gepatoprotektiv va neyroprotektiv faollikka ega ekanligi xabar qilingan [3-6]. Biroq, PhGlarni izolyatsiya qilish va tozalash jarayoni qiyin va ko'p vaqt talab qiladi. Bundan tashqari, klassik ko'p xromatografik usullar nafaqat ko'p miqdordagi organik erituvchilardan foydalanadi, balki namunaning kamroq tiklanishini ham ta'minlaydi. Yuqori tezlikdagi qarama-qarshi oqim xromatografiyasi (HSCCC), qo'llab-quvvatlanmaydigan suyuqlik-suyuqlik bo'linish xromatografik texnikasi, ba'zi an'anaviy usullarga nisbatan namunani mukammal qayta tiklashni taklif qiladi va turli xil tabiiy mahsulotlarni ajratish va tozalash uchun keng qo'llaniladi [7-9] . Garchi bir nechta PhGlar tozalangan bo'lsa-daCistanchesHSCCC tomonidan nasl va boshqalar [10-14], hech bir qog'ozda akteozid, izoakteozid, syringalid A 3'- -L-ramnopiranozid va 2'-asetilaktozidning bitta ikki fazali tizimda tozalanishi haqida xabar berilmagan.

Ushbu maqolada biz C. deserticola dan to'rtta PhGni ajratish va tozalashning oddiy usuli haqida xabar beramiz. Nihoyat, bir bosqichda 30,9 mg akteozid, 13,0 mg izoakteosid, 12,5 mg syringalid A 3'- -L-ramnopiranozid va 7,2 mg 2'-asetillakteosid olindi. 297 mg fraksiyadan mos ravishda 99 foiz, 95 foiz, 99 foiz va 98 foiz tozalik bilan ajratish. Ularning tuzilmalari 1H- va 13C-NMR spektral ma'lumotlari va HR-MS spektrlari asosida tavsiflangan. Ushbu tadqiqotda aniqlangan to'rtta PhG tuzilmalari 1-rasmda ko'rsatilgan.

Natijalar va muhokama

Xom ekstraktining HPLC tahlili

C. deserticolaning n-butanoik ekstraktining tarkibiy boyitilgan qismi HPLC-UV bilan tahlil qilindi. Ishlatilgan ustun Accurasil C18 (250 mm × 4,6 mm, id 5 mkm) (Thermo-Fisher Scientific Instruments, shahar, shtat qisqartmasi, AQSh), mobil faza metanol-suv (30:70, v/v) edi. Oqim tezligi 1 ml/min edi. Detektorning to'lqin uzunligi 254 nm ga o'rnatildi. HPLC xromatogrammasi 2-rasmda ko'rsatilgan. 1 dan 4 gacha cho'qqilar akteozid (1), izoakteozid (2), syringalid A 3'- -L-ramnopiranozid (3) va 2'-asetillakteozid (4) ga to'g'ri keladi, mos ravishda.

Ikki fazali erituvchi tizimni tanlash

HSCCC bilan muvaffaqiyatli ajratish ko'p jihatdan mos ikki fazali erituvchi tizimni tanlashga bog'liq, ikki fazali erituvchi tizim har bir maqsadli komponentning bo'linish koeffitsienti qiymatlariga (K) muvofiq tanlangan va K ning optimal diapazoni {{ dan bo'lishi kerak. 2}}.5 dan 2 gacha.

Tajribada bir nechta ikki fazali erituvchi tizimlarning maqsadli komponentlari uchun K qiymatlari 1-jadvalda ko'rsatilgan (cho'qqi 4 uchun biroz yuqoriroq bo'lsa ham, natijalar maqbul ekanligi ko'rsatilgan). Ular orasida etil asetat-n-butanol-etanol-suv (40:6:6:50, v/v/v/v) maqsadli birikmalar uchun mos bo'linish koeffitsientlarini berdi. Oxir-oqibat, etil asetat-n-butanol-etanol-suvdan (40: 6: 6: 50, v/v/v/v) tashkil topgan erituvchi tizim C. deserticolaning to'rtta birikmasini ajratib olish va tozalash uchun ishlatilgan. Shakl 3. 2-rasmda ko'rsatilganidek, har bir HSCCC fraktsiyasining HPLC tahlili shuni ko'rsatdiki, to'rtta sof PhG (akteozid, 99 foiz; izoakteozid, 95 foiz; syringalid A 3'- -L-ramnopiranozid 99 foiz va 2'- asetilakteozid 98 foiz ) xom fraksiyadan olinishi mumkin edi.

Eksperimental

Qurilma

Ushbu tadqiqotda foydalanilgan HSCCC uskunasi TBE{0}}B yuqori tezlikdagi qarama-qarshi oqim xromatografiya tizimi (Shanghai Tauto Biotech Co., Shanxay, Xitoy) ketma-ket ulangan uchta ko'p qatlamli spiral ajratish ustunlari (naycha diametri) bo'lgan.=2.6 mm, umumiy hajmi=300 ml) va 20 ml namunali halqa. Revolyutsiya radiusi yoki ushlagich o'qi va markaziy orasidagi masofasantrifuganing o'qi (santrifuganing o'qi (R) 5 sm edi va qiymat ichki terminalda 0,5 dan tashqi terminalda 0,8 gacha (=r/R, bu erda r - lasandan ushlagich miligacha bo'lgan masofa). Tajribada haroratni nazorat qilish uchun HX 1{14}}5 doimiy haroratli aylanma moslama (Beijing Changliu Lab Instrument Company, Pekin, Xitoy) ishlatilgan. HSCCC tizimi namunadagi TBP-5002 o‘rta bosimli doimiy oqim nasosi, 254 nm chastotada ishlaydigan TBP{11}} modeli UV detektori va V4.0 namunadagi ish stantsiyasi (Jinda Biochemistry Instrument Company, Shanxay, Xitoy).

Yuqori samarali suyuq xromatografiya (HPLC) uskunasi G1312A ikkilik nasosi, G1329A avtonamuna oluvchi, G1314A oʻzgaruvchan toʻlqin uzunligi detektori (VWD), G1316A termostatlangan ustun boʻlimi, Agilent 1200 tizimi, Agilent 1200 tizimidan foydalanilgan. ish stantsiyasi. Tozalikni aniqlash uchun Alltech 3300 ELSD ishlatilgan. Aralashmalarning strukturasini aniqlash uchun Agilent 6520 Q-TOF va Bruker AVANCE III 500-NMR spektrometrlari ishlatilgan. 1H va 13C-NMR spektrlari (mos ravishda 500 va 125 MGts da) xona haroratida (22 daraja / 295,1 K) o'lchandi.

Reaktivlar va materiallar

Etil asetat, n-butanol va etanol analitik darajalar, metanol esa HPLC darajasi edi. Barcha erituvchilar Tianjin Concord Technology kompaniyasidan (Tyanjin, Xitoy) sotib olingan. Barcha eritmalar va suyultirishlar uchun Milli-Q suv (18,2 MŌ) (Millipor, Bedford, MA, AQSh) ishlatilgan. C. deserticola ildizpoyasi 2009 yil iyun oyida Xitoy Xalq Respublikasining Ichki Moʻgʻuliston viloyatidan yigʻilgan. Oʻsimlik professor Lijuan Chjan tomonidan aniqlangan va vaucher namunasi (№ 20091001) laboratoriyamizga joylashtirilgan.

Xom namunani tayyorlash

C. deserticola (1 kg) ning chang havoda quritilgan go'shtli poyalari har safar 2 soat davomida suvli etanol (8 L, 60 foiz v/v) bilan ikki marta qaytarildi. Ekstrakt past bosim ostida va 60 daraja haroratda etanolning to'liq bug'lanishiga qadar bug'langan. Qoldiq suvda to'xtatildi va xloroform, etil asetat va n-butanol bilan ketma-ket uch marta ekstraksiya qilindi, bug'langandan so'ng 5,16 g n-butanik ekstrakt olindi, past bosim ostida quritildi. Keyin n-butanik ekstrakt silikagel ustunida (200-300 mesh) sakkizta fraktsiyani berish uchun progressiv gradient elyusiyasi (CHCl3-MeOH, 10: 1 → 1: 1) yordamida ajratildi. Fraksiya 6 (297 mg) keyingi HSCCC izolyatsiyasi va ajratish uchun ishlatilgan.

Ikki fazali erituvchi tizimlarni tanlash

Ikki fazali erituvchi tizimlar C. deserticola fraktsiyasidagi maqsadli komponentlarning bo'linish koeffitsienti (K) bo'yicha tanlangan. K qiymatlari LC tahlili bilan quyidagicha aniqlandi: Tegishli miqdordagi xom ekstrakt kukuni (6-qism) erituvchi tizimining quyi bosqichida eritildi va HPLC tomonidan tahlil qilindi. Cho'qqilarning maydonlari A1 sifatida qayd etilgan. Keyin eritmaga teng hajmdagi yuqori faza qo'shildi va bo'linish muvozanatiga erishish uchun yaxshilab aralashtiriladi. Pastki bosqich HPLC tomonidan yana tahlil qilindi. Oxirgi tepalik joylari A2 sifatida qayd etilgan. K-qiymatlari quyidagi tenglama bo'yicha hisoblangan: K=(A1 - A2)/A2 [15,16].

Ikki fazali erituvchi tizim va namunali eritma tayyorlash

Ushbu tadqiqotda HSCCC ajratish uchun etil asetat-n-butanol-etanol-suv (40: 6: 6: 50, v/v/v/v) dan tashkil topgan ikki fazali erituvchi tizim ishlatilgan. Har bir erituvchi ajratuvchi voronkaga qo'shildi va xona haroratida yaxshilab muvozanatlashtirildi. Yuqori va pastki fazalar ajratilgan va foydalanishdan oldin 30 daqiqa davomida sonikatsiya orqali gazsizlangan. Namuna eritmasi etil asetat-n-butanol-etanol-suvning 15 ml pastki fazasida (40: 6: 6: 50, v/v/v/v) 297 mg fraksiya 6 ni eritib tayyorlandi.

HSCCC ajratish tartibi

HSCCC quyidagi tarzda amalga oshirildi. Ko'p qatlamli o'ralgan ustun birinchi navbatda yuqori organik statsionar faza bilan to'ldirilgan. Keyin pastki suvli mobil faza 1,5 ml / min oqim tezligida ustunning bosh uchiga pompalandi va shu bilan birga, HSCCC apparati 900 rpm aylanish tezligida ishladi. Gidrodinamik muvozanat o'rnatilgandan so'ng, quyruq chiqishida (taxminan ikki soatdan so'ng) tozalangan mobil fazadan ko'rinib turibdiki, 297 mg xom ekstrakti (6-qism) bo'lgan 15 ml namuna eritmasi in'ektsiya klapan orqali yuborildi. Ustunning oqava suvlari doimiy ravishda 254 nm ostida kuzatildi. Xromatogramma bo'yicha to'rtta eng yuqori fraktsiyalar to'plangan va keyin pasaytirilgan bosim ostida bug'langan. Qurilmaning harorati 25 darajaga o'rnatildi.

HPLC tahlili va HSCCC tepalik fraksiyalarini aniqlash

HSCCC ning eng yuqori fraktsiyalari HPLC-ELSD tomonidan tahlil qilindi. Ishlatilgan ustun Accurasil C18 (250 mm × 4,6 mm, id 5 mkm), mobil faza metanol-suv (30:70, v/v) edi. Oqim tezligi 1 ml/min edi. ELSD quyidagi sharoitlarda ishladi: Harorat 45 daraja, gaz 1,6 L/min. To'rtta HSCCC tepalik fraktsiyalarining strukturaviy identifikatsiyasi HR-ESI-MS, 1H va 13C-NMR spektroskopiyasi orqali amalga oshirildi.

Strukturaviy identifikatsiya

I fraksiya: HR-ESI-MS m/z 623.2001 (M−H)− da kuzatilgan, C29H35O15 uchun hisoblangan, 623.1981. 1H-NMR (500 MGts, CD3OD) d ppm: 1,09 (3H, d, J=6 Gts, CH3 ramnoz), 2,79 (2H, t, J=7,5 Gts, Ar-CH 2-), 4,37 (1H, d, J=8 Hz, H{29}} glyukoza), 5,18 (1H, d, J=1 Gts, H{{34} } ramnoz), 6,27 (1H, d, J=15.5 Gts, Ar-CH=CH-), 7,59 (1H, d, J=15,5 Gts, Ar -CH=CH-), 6,5-7,1 (6H, aromatik H).13C-NMR (125 MGts, CD3OD) d ppm: 131,5 (C-1), 117,2 (C{65} }), 146,2 (C-3), 144,7 (C-4), 116,4 (C-5), 121,3 (C-6), 72,4 (C-), 36,6 (C- ), 127,7 (Kafe-1), 115,3 (Kaf-2), 146,9 (Kaf-3), 149,8 (Kaf-4), 116,6 (Kaf{{ 98}}), 123,2 (Caf-6), 168,3 (Caf-), 114,8 (Caf-), 148,1 (Caf-), 104,3 (G-1), 76,1 (Glc{{116} }), 81,7 (Glc-3), 70,5 (Glc-4), 76,3 (Glc-5), 62,4 (Glc-6), 103,1 (Rha{{131} }), 72,3 (Rha-2), 72,1 (Rha-3), 73,9 (Rha-4), 70,7 (Rha-5), 18,5 (Rha{{146} }). Adabiyotda [17] keltirilgan ma'lumotlar bilan taqqoslaganda, I fraktsiyasi akteozidga mos keladi.

Fraksiya II: HR-ESI-MS m/z 623.1987 (M−H)− da kuzatilgan, C29H35O15 uchun hisoblangan, 623.1981. 1H-NMR (500 MGts, CD3OD) d ppm: 1,25 (3H, d, J=6.5 Gts, CH3 ramnoz), 2,78 (2H, t, J=7 Hz, Ar-CH2-), 4,33 (1H, d, J=8 Hz, H{29}} glyukoza), 5,17 (1H, d, J {{ 33}} Gts, H{34}} ramnoz), 6,28 (1H, d, J=15,5 Gts, Ar-CH=CH-), 7,56 (1H, d, J=15,5 Hz, Ar-CH=CH-), 6,5-7,0 (6H, aromatik H). 13C-NMR (125 MGts, CD3OD) d ppm: 131,5 (C-1), 117,2 (C-2), 146,2 (C-3), 144,7 (C-4 ), 116,5 (C-5), 121,3 (C-6), 72,4 (C-), 36,7 (C-), 127,8 (Caf-1), 115,2 (Kaf{{89) }}), 146,8 (Kafe-3), 149,7 (Kafe-4), 116,6 (Kaf-5), 123,2 (Kaf-6), 169,2 (Kaf- ), 115,0 (Caf-), 147,3 (Caf-), 104,5 (G-1), 75,5 (Glc-2), 84,2 (Glc-3), 70,1 (Glc-4 ), 75,7 (Glc-5), 64,7 (Glc-6), 102,8 (Rha-1), 72,4 (Rha-2), 72,4 (Rha-3 ), 74,1 (Rha-4), 70,5 (Rha-5), 17,9 (Rha-6). Adabiyotda [18] xabar qilinganidek, 1H-NMR va 13C-NMR spektral ma'lumotlari izoakteozid ma'lumotlari bilan mos edi.

III fraksiya: HR-ESI-MS m/z 6{{108}}7.2032 (M−H)− da kuzatilgan, C29H35O14 uchun hisoblangan, 607.2032. 1H-NMR (500 MGts, CD3OD) d ppm: 1,09 (3H, d, J=6 Gts, CH3 ramnoz), 2,84 (2H, t, J=7,5 Gts, Ar-CH 2-), 4,37 (1H, d, J=8 Hz, H{29}} glyukoza), 5,19 (1H, d, J=1,5 Gts, H{{ 35}} ramnoz), 6,27 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH=CH-), 7,59 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-), 6,6-7,1 (7H, aromatik H). 13C-NMR (125 MGts, CD3OD) d ppm: 130,8 (C-1), 116,2 (C-2), 130,9 (C-3), 156,8 (C-4 ), 130,8 (C-5), 116,2 (C-6), 72,4 (C-), 36,4 (C-), 127,8 (Caf-1), 114,8 (Kaf{{88) }}), 149,8 (Kaf-3), 146,9 (Kaf-4), 116,6 (Kaf-5), 123,2 (Kafe-6), 168,3 (Kaf- ), 115,4 (Caf-), 148,0 (Caf-), 104,3 (G-1), 76,3 (Glc-2), 81,7 (Glc-3), 70,4 (Glc-4 ), 76,1 (Glc-5), 62,5 (Glc-6), 103,0 (Rha-1), 72,3 (Rha-2), 72,2 (Rha-3 ), 73,9 (Rha-4), 70,7 (Rha-5), 18,4 (Rha-6). Adabiyot [18] maʼlumotlariga koʻra, III fraksiya syringalid A 3'- -L-ramnopiranozidga mos keladi.

IV fraksiya: HR-ESI-MS m/z 665,21{{20}} (M−H)− da kuzatilgan, C31H37O16 uchun hisoblangan, 665,2087. 1H-NMR (500 MGts, CD3OD) d ppm: 1.09 (3H, d, J=6.5 Gts, CH3 ramnoz), 2.00 (3H, s, OAc), 2.72 (2H, t, J { {25}},5 Gts, Ar-CH2-), 4,55 (1H, d, J=8 Hz, H-1 glyukoza), 4,90 (1H, d, J { {37}} Gts, H{38}} ramnoz), 6,29 (1H, d, J=15,5 Gts, Ar-CH=CH-), 7,62 (1H, d, J=15,5 Hz, Ar-CH=CH-), 6,5-7,0 (6H, aromatik H). 13C-NMR (125 MGts, CD3OD) d ppm: 131,9 (C-1), 117,3 (C-2), 146,1 (C-3), 144,7 (C-4 ), 116,4 (C-5), 121,4 (C-6), 72,7 (C-), 36,4 (C-), 127,7 (Caf-1), 115,4 (Kaf{{93) }}), 146,9 (Kaf-3), 149,9 (Kaf-4), 116,6 (Kaf-5), 123,2 (Kaf-6), 168,1 (Kaf-), 114,7 (Caf-), 148,2 (Caf-), 101,8 (G-1), 75,3 (Glc-2), 80,3 (Glc-3), 70,8 (Glc-4 ), 76,2 (Glc-5), 62,3 (Glc-6), 103,3 (Rha-1), 72,0 (Rha-2), 71,8 (Rha-3 ), 73,7 (Rha-4), 70,8 (Rha-5), 18,5 (Rha-6), 171,5 (C=O), 20,9 (OAC). 1H-NMR va 13C-NMR spektral ma'lumotlari 2'-asetillakteozid [17] bilan mos edi.

Xulosa

Akteozid, izoakteozid, syringalid A 3'- -L-ramnopiranozid va 2'-asetilaktozidni tayyorlash uchun ajratish va tozalash uchun HSCCC usuli.Cistanches deserticola YC Matashkil etildi. Ushbu tadqiqot shuni ko'rsatadiki, HSCCC o'simlik materiallaridan bioaktiv tarkibiy qismlarni tayyorlash va tozalash uchun juda kuchli texnikadir. Bundan tashqari, aralashmalar yuqori tozalik bilan etarlicha katta miqyosda ajratilishi mumkin va keyinchalik xromatografiya yoki bioaktivlikni o'rganish uchun mos yozuvlar moddalari sifatida ishlatilishi mumkin. Usul murakkab tabiiy mahsulotlarni tezkor izolyatsiyalashning mumkin bo'lgan, iqtisodiy va samarali usuli hisoblanadi.

Minnatdorchilik

Ushbu ish Changjiang olimlari va Universitetdagi innovatsion tadqiqot guruhi dasturi (PCSIRT), Xitoy Fan va texnologiya vazirligining Xalqaro hamkorlik rejasi loyihasi (2008DFB30070) va Alashan chap bayrog'i ilmiy dasturi ({{2) tomonidan qo'llab-quvvatlandi. }}).

Ma'lumotnomalar

1. Xitoy farmakopeya komissiyasi. Xitoy Xalq Respublikasi farmakopeyasi; Xalq tibbiyot nashriyoti: Pekin, Xitoy, 2010; 1-jild, p. 126.

2. Jiang, Y.; Tu, PF Cistanche turlarida kimyoviy tarkibiy qismlarni tahlil qilish. J. Xromatogr. 2009, 1216, 1970–1979 yillar.

3. Morikava, T.; Pan, Y.; Ninomiya, K.; Imura, K.; Matsuda, X.; Yoshikava, M.; Yuan, D.; Muraoka, O. Cistanche tubulosa cho'l o'simligidan gepatoprotektiv faollikka ega asillangan feniletanoid aminoglikozidlar. Bioorg. Med. Kimyo. 2010, 18, 1882–1890.

4. Chen, X.; Jing, FC; Li, CL; Tu, PF; Chjan, QS; Vang, ZH Echinacoside monoamin neyrotransmitterlarining striatal hujayradan tashqari darajasining 6-gidroksidopamin lezyonli kalamushlarda pasayishini oldini oladi. J. Etnofarmakol. 2007, 114, 285–289.

5. Muraoka, O.; Ninomiya, K.; Morikava, T.; Vakayama, H.; Matsuda, X.; Yoshikava, M. Cistanche tubulosa poyasidan gepatoprotektiv tarkibiy qismlar. Yakugaku Zasshi 2007, 127, 49–51.

6. Koo, KA; Sung, SH; Park, OH; Kim, SH; Li, KY; Kim, YC Callicarpa dicotomasidan feniletanoid glikozidlarning in vitro neyroprotektiv faoliyati. Planta Med. 2005, 71, 778–780.

7. Li, M.; Liu, RM; Quyosh, AL; Vu, SJ; Liu, NN Makroporous adsorbsion qatron va yuqori tezlikda qarshi oqim xromatografiyasining kombinatsiyasi orqali xitoylik dorivor o't Herba Cirsii dan rutin va akasinni ajratish va tozalash. J. Xromatogr. Sci. 2009, 47, 329–332.

8. Yin, H.; Chjan, S.; Luo, XM; Liu, YH Acanthus ilicifolius L. dan ikkita benzoksazinoid glyukozidni yuqori tezlikda qarama-qarshi oqim kromatografiyasi orqali tayyorlash uchun izolyatsiyalash va tozalash. J. Xromatogr. 2008, 1205, 177–181.

9. Peng, AH; Li, R.; Xu, J.; Chen, LJ; Chjao, X.; Luo, HD; Ha, HY; Yuan, Y.; Wei, YQ Oqim tezligi gradienti yuqori tezlikda qarama-qarshi oqim xromatografiyasi, Triperygium wilfordii dan beshta diterpenoidni ajratish va kattalashtirish. J. Xromatogr. 2008, 1200, 129–135.

10. Xie, J.; Deng, J.; Tan, F.; Su, J. Penstemon barbatus (Can.) Rothdan echinakosidni yuqori tezlikda qarshi oqim xromatografiyasini qayta ishlash orqali ajratish va tozalash. J. Xromatogr. B2010, 878, 2665–2668.

11. Li, L.; Tsao, R.; Yang, R.; Liu, C.; Young, JC; Zhu, H. dan feniletanoid glikozidlarni ajratish va tozalashCistanche deserticolayuqori tezlikdagi qarama-qarshi oqim xromatografiyasi orqali. Oziq-ovqat kimyosi. 2008, 108, 702–710.

12. Li, L.; Tsao, R.; Liu, ZQ; Liu, SY; Yang, R.; Young, JC; Chju, HH; Deng, ZY; Xie, MY; Fu, ZH Plantago psyllium L. dan akteozid va izoakteozidni yuqori tezlikda qarama-qarshi oqim xromatografiyasi bilan ajratish va tozalash. J. Xromatogr. 2005, 1063, 161–169. Molekulalar 2012, 17 8284

13. Ley, L.; Yang, FQ; Chjan, TY; Tu, PF; Vu, LJ; Ito, Y. Cistanches salsa (CA Mey.) G. Beck dan akteozid va 2'-asetil akteozidni yuqori tezlikda qarama-qarshi oqim xromatografiyasi bilan tayyorlash uchun izolyatsiyalash va tozalash. J. Xromatogr. 2001, 912, 181–185.

14. Ley, L.; Yang, FQ; Chjan, TY; Tu, PF; Vu, LJ; Chen, FK; Ito, Y. Feniletanoid glikozidlarni yuqori tezlikda qarama-qarshi oqim xromatografiyasi yordamida beagle itlarining najas ekstraktidan tayyorlangan izolyatsiyasi va tozalash. J. Liq. Xromatogr. Aloqa. Technol. 2001, 24, 2187–2195.

15. Gao, SY; Feng, B.; Chju, RN; Ma, JK; Vang, W. Rumex japonicus dan uchta antrakinonni yuqori tezlikda qarshi oqim kromatografiyasi bilan tayyorlash. Molekulalar 2011, 16, 1201–1210.

16. U, F.; Bai, YH; Vang, J.; Vey, J.; Yu, CY; Li, S.; Yang, WL; Xan, CH izodon rubescensning butun o'simlikidan oridoninni yuqori tezlikda qarama-qarshi oqim xromatografiyasi bilan ajratish va tozalash. Molekulalar 2011, 16, 7949–7957.

17. Kobayashi, X.; Oguchi, X.; Takizava, N.; Miyase, T.; Ueno, A.; Usmangoniy, K.; Ahmad, M. Cistanche tubulosa (Schrenk) Hook dan yangi feniletanoid glikozidlar. f. I. Kimyo. Farm. Buqa. 1987, 35, 3309–3314.

18. Yoshizava, F.; Deyama, T.; Takizava, N.; Usmangoniy, K.; Ahmad, M. Cistanche tubulosa (Schrenk) Hookning tarkibiy qismlari. f. II. Yangi feniletanoid glikozid va yangi neolignan glikozidning izolyatsiyasi va tuzilmalari. Kimyo. Farm. Buqa. 1990, 38, 1927–1930 yillar.