Rouchongrong (Cistanche Deserticola) dan olingan feniletanoid glikozidlar ekstraktining ApoE jigarida lipid metabolizmiga ta'sirini yaxshilash bo'yicha tadqiqot - / - ACOX1 - CPT2 ifodalarini tartibga solish asosida yuqori yog'li dietaga ega sichqonlar

Xulosa Maqsad:Tadqiq qilish uchunFeniletanoid glikozidlar ekstraktining ta'siridanCistanche deserticola(PGCD) yuqori yog'li dietadan kelib chiqqan ApoE- / - sichqon jigarida lipidlar almashinuvi bo'yicha. Usullari: Yuqori yog'li parhez bilan oziqlangan 70 ta erkak ApoE- / - sichqonlari 5 guruhga bo'lingan, model (MOD) guruhi, ijobiy nazorat guruhi sichqonlariga Atorvastatin [20 mg / (kg · d)] + Ezetimibe [20 mg / (kg) berildi. ·d)](A + E), PGCD past, o'rta va yuqori dozali guruhlar berildiPGCD[250, 500, 1000 mg / (kg · d)]; yana 14 ta erkak C57BL/6J sichqonlari acho dietasi bilan normal nazorat (CON) guruhi sifatida belgilandi. 12-dam olish kunida foydalanish yo'riqnomasiga muvofiq zardob va jigar to'qimalarida TG tarkibi va ALT va AST faolligi aniqlandi. Yangi jigar to'qimalari bir hil holga keltirildi va tarkibidagi yog' kislotasi sintazasi (FAS), uzun zanjirli asil-CoA dehidrogenaz (LCAD) va glutation peroksidaza (GSH - Px),superoksid dismutaza (SOD)faoliyati ELISAmethod bilan sinovdan o'tkazildi, shu bilan birga, malondialdegid (MDA) va lipid peroksid (LPO) tarkibi bolalar usullari bilan aniqlandi. Asil-koenzim A oksidaza 1 (ACOX1) va karnitin palmitoiltransferaza 2 (CPT2) ning mRNK ifodalari RT-PCR tajribalari bilan aniqlandi.

80% BILISh UCHUN SHU YERGA BOSINGFENİLETANOID GLYKOSIDLARTABIY ORGANIK CISTACHE EKSTRAKTI

Wecistanche-ning qo'llab-quvvatlovchi xizmati - Xitoydagi eng yirik sistanche eksportchisi:

Email:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Batafsil texnik xususiyatlar uchun xarid qiling:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

Natijalar:Model guruhidan farqli o'laroq,uch dozali PGCD hammasi TG darajasini pasaytirdijigarda va qon zardobida dozaga bog'liq bo'lib, sarumda ALT va AST faolligini pasaytiradi. Uch dozali PGCD barchasi FAS tarkibini dozaga bog'liq holda kamaytirdi va jigarda LCAD miqdorini sezilarli darajada oshirdi.PGCD targ'ib qilindiGSH - Px va SOD faoliyati va jigarda MDA va LPO tarkibini sezilarli darajada kamaytiradi. RT-PCR tajribalari shuni ko'rsatdiki, PGCD jigar to'qimalarida ACOX1 va CPT2 mRNK darajasini oshirdi.

Xulosa:PGCD lipidlar almashinuvini va oksidlovchi stress reaktsiyasini yaxshilashi va ACOX1 va CPT2 ning mRNK ifodalarini tartibga solish orqali jigar to'qimalarida lipid birikmasini kamaytirishi mumkin.

Kalit so‘zlar:Cistanche deserticola dan feniletanoid glikozidlar ekstrakti; ACOX1; CPT2;lipidlar almashinuvi;oksidlovchi stress; ApoE- / - sichqonlar

Alkogolsiz yog'li jigar kasalligi(NAFLD) dunyodagi eng keng tarqalgan jigar kasalliklaridan biri bo'lib, umumiy aholi orasida deyarli 30% tarqaladi. Xitoyda yog'li jigar kasalligi yiliga 0,594% ga o'sib bormoqda [1]. NAFLDning paydo bo'lishi va rivojlanishi tananing ortiqcha kaloriya iste'moli bilan chambarchas bog'liq. Yog'li dieta jigarda yog'ning haddan tashqari to'planishiga olib keladi va NAFLDni keltirib chiqaradi [2] va uning patogenezida dastlabki qadam triatsilgliserolning (TG) jigar hujayralarida cho'kishi hisoblanadi[2] 3]. Bugungi kunga qadar NAYQQ patogeneziga qaratilgan maxsus terapevtik preparatlar mavjud emas. NAFLDning oldini olish va davolashning aniq mexanizmlariga ega xavfsiz, samarali dori-darmonlarni topish tadqiqotchilar uchun muhim vazifaga aylandi. Cistanche deserticola YC Ma — Orobanchaceae oilasiga mansub parazit oʻsimlik. Uning asosiy komponenti, feniletanoid glikozidlar, organizmning immun funktsiyasini kuchaytirish, qarishga qarshi, radiatsiyaga qarshi, antioksidant va gepatoprotektiv va boshqa ta'sirga ega [4-5]. Ushbu tadqiqot mexanizmi bo'yicha dastlabki tadqiqot o'tkazishni maqsad qilganCistanche deserticola dan feniletanoid glikozidlar(PGCD) lipid metabolizmini yaxshilashda.

1 Eksperimental materiallar

1.1 Eksperimental preparatlar

Cistanche deserticola o‘simligining go‘shtli poyalari (namligi 8,5%) Hotan Dichen Pharmaceutical Co., Ltd.dan xarid qilingan; feniletanoid glikozidlar (asosiy komponentlar verbaskozid va echinaceaside) mos yozuvlar moddalari (ikkalasi ham tozaligi > 98%) Manster, Chengdu, Sichuan Biotechnology Co., Ltd.dan sotib olingan; Atorvastatin: Pfizer Shanghai; Ezetimibe: Merck Pharmaceuticals Co., Ltd.

1.2 Eksperimental hayvonlar

6-8 haftalik erkak C57BL/6J sichqonlari va ApoE-/- sichqonlari, tana vazni (20 ± 2) g, Changzhou Cavins Experimental Animal Co., Ltd.dan sotib olingan, litsenziya raqami: SCXK (Su) 2016-0010 , 12 soat / 12 soat yorug'lik davri, harorat (22 ± 1) daraja , namlik 50% ~ 60%, oziq-ovqat va suvni bepul iste'mol qilish. Tajribadan oldin sichqonlar moslashish uchun 1 hafta davomida standart parhez bilan oziqlangan. Barcha hayvonlarni parvarish qilish va eksperimentlar Shandong Birinchi Tibbiyot Universitetining Eksperimental Hayvonlar Etikasi Qo'mitasi qoidalariga amal qiladi (Etika №: W202107080303).

1.3 Eksperimental qaytaagentlar

Yog'li ozuqa: Harlan Teklad; TG, ALT, AST to'plamlari: Beijing Solebao Biotechnology Co., Ltd.; FAS, LCAD to'plamlari: Shanghai Langton Biotechnology Co., Ltd.; GSH-Px to'plami: Shanghai Jining Biotechnology Co., Ltd.; SOD, MDA, LPO, BCA to'plamlari: Nanjing Jiancheng Biotechnology Co., Ltd.; Trizol to'plami: Invitrogen, Carlsbad, CA; ACOX1 va CPT2 primerlari: Sangon Bioengineering (Shanghai) Co., Ltd tomonidan ishlab chiqilgan.

1. 4 ta eksperimental asboblar Hei - VAP Expert Rotary Evaporator: Germaniya

Geydolf; Varioskan LUX ko'p funksiyali mikroplastinka o'quvchi: ThermoFisher; FD8508 vakuumli muzlatish fen mashinasi: Ilshin, Janubiy Koreya; F6/10 gomogenizatori: Shanxay Fluoroko; Agilent1260 yuqori samarali suyuqlik xromatografi, Cary 3500 UV spektrofotometri: Agilent Technologies Ltd.; Quant studio5RT - PCR asbobi: Thermo Fisher Biochemicals, Inc.

2.3.1 Tana massasi va jigar indeksi

12-haftaning oxirida sichqonlar ro'za tutdi va tortildi. Sichqonlarga natriy pentobarbital bilan behushlik qilishdi va qurbonlik qilishdi. Jigar indeksini hisoblash uchun jigar yig'ib olindi.

2.3.2 Sarum indikatorini aniqlash

Sarumni oling va sarum aspartat aminotransferaza (AST) va alanin aminotransferaza (ALT) faolligini to'plam operatsiyasiga muvofiq ketma-ketlikda aniqlang; BCA zardobdagi oqsil miqdorini aniqlaydi va TG tarkibini aniqlaydi.

2.3.3 Jigar to'qimalarida lipid almashinuvi bilan bog'liq omillarni aniqlash

4 graduslik sharoitda, tegishli miqdorda yangi jigarni torting va uni PBSda bir hil holga keltiring, sentrifuga (tsentrifuga radiusi 7,5 sm, 3 000 r/min) gomogenatni 1 minutga o'tkazing, supernatantni oling va oqsil miqdorini o'lchang. BCA tomonidan jigar to'qimasi. To'qimalarda TG tarkibi, jigar to'qimalarida yog 'kislotasi sintazasini (FAS) va uzun zanjirli asil-CoA dehidrogenaza (LCAD) tarkibini aniqlash uchun Elishay usuli.

2.3.4 Jigar to'qimalariga tegishli oksidlovchi omillarni aniqlash

4 graduslik sharoitda, tegishli miqdorda yangi jigarni torting va uni PBSda bir hil holga keltiring, gomogenatni (sentrifugal radiusi 7,5 sm, 3 000 r/min) 15 daqiqa davomida santrifüj qiling, supernatantni oling va oqsil miqdorini o'lchang. BCA bilan jigar to'qimasi. Reagentlarga rioya qiling Qutidagi ko'rsatmalar superoksid dismutaza (SOD) va glutation peroksidaza (GSH-Px) faolligini aniqlaydi va bir vaqtning o'zida malondialdegid (MDA) va lipid peroksid (LPO) darajasini aniqlaydi.

2. 3. 5 RT-PCR aniqlash

Jigar to'qimalarida ACOX1/CPT2 mRNK ifodasi: Yangi jigar to'qimalarining tegishli miqdorini oling, jigar to'qimalarining umumiy mRNKsini ajratib olish uchun Trizol to'plamidan foydalaning, cDNKni sintez qilish uchun MuLV teskari transkriptazasidan foydalaning va real vaqt rejimida flüoresans miqdorini bajarish uchun cDNA dan shablon sifatida foydalaning. PCR (Qpcr) aniqlash. , reaksiya sharoitlari: 2 daqiqa davomida 95 daraja oldindan denatürasyon; 95 gradusda 10 soniya davomida denatürasyon, tavlanish: 60 gradus 30 s, uzaytirish 72 daraja 35 soniya, 34 tsikl va nihoyat 72 gradusda 5 daqiqaga uzaytirish va real vaqt rejimida avtomatik analizator yordamida miqdorni aniqlash. ACOX1 va CPT2 mRNK ifodasi. Rotor-gen Q dasturiy ta'minot. Ma'lumotlarni tahlil qilish uchun 1.7 (Qiagen) ishlatilgan va mRNK va GAPDH ning nisbiy darajalarini hisoblash uchun 2-△△Ct usuli ishlatilgan. Har bir tajriba guruhi parallel ravishda > 3 marta o'tkazildi. Primer ketma-ketliklari quyidagicha: GAPDH, yuqori oqim: 5' - GCCACCC AGAAGACTGTG - 3', quyi oqim: 5' - ATGTAGGCCATGAGGTCCAC - 3'; ACOX1, yuqori oqim: 5' -CGCCACCTT CAATCC AGAGT - 3' quyi oqim: 5' -TCTGCGATGCCAAATTCCC - 3'; CPT2, yuqori oqim: 5'- TCCTCCTACTC AGGACGCAA - 3' quyi oqim: TTGGGATCTTCCGCTCACAC.

2.4 Statistik usullar

Ma'lumotlarni tahlil qilish uchun SPSS 20.0 statistik dasturidan foydalanildi. O'lchov ma'lumotlari (x ± s) sifatida ifodalangan. Guruhlar o'rtasidagi taqqoslash uchun dispersiyaning bir tomonlama tahlili qo'llanildi. P <0,05 statistik jihatdan muhim farq deb hisoblandi.