Kalamushlarda ijtimoiy izolyatsiyadan keyin atrof-muhitni qisqa boyitishning differentsial ta'siri 2-qism

Ochiq maydon testi

Umumiy tayanch-harakat faolligini o'lchash uchun ochiq maydon (72 × 72 × 45 sm) ishlatilgan. Har bir hayvon sinovdan oldin 5-sinov xonasiga olib borildi va yana 5 daqiqa davomida OFT kamerasiga joylashtirildi.

So'nggi yillarda tobora ko'proq ilmiy tadqiqotlar vosita faoliyati va xotira o'rtasida uzviy bog'liqlik mavjudligini ko'rsatdi. Har xil turdagi sport mashg'ulotlari har xil yoshdagi odamlar uchun xotirani rivojlantirishga sezilarli ta'sir ko'rsatadi, bu bizning kundalik o'qishimiz, ishimiz va hayotimiz uchun katta ahamiyatga ega.

Jismoniy mashqlar tanadagi qon aylanishini va nafas olish tizimini rag'batlantirishi va metabolizmni rag'batlantirishi mumkin. Shu tariqa, miyadagi qon tomirlari yaxshi qon ta'minlanadi va miya hujayralarining normal ishlashini ta'minlash uchun ko'proq kislorod va oziq moddalar bilan ta'minlanadi. Bu yaxshi jismoniy holat diqqatni yaxshiroq e'tiborga olishga, o'rganish va xotira qobiliyatlarini yaxshilashga yordam beradi. Natijada, muntazam ravishda jismoniy faoliyat bilan shug'ullanadigan odamlar, odatda, xotirasini va aqliy hayotiyligini yaxshi saqlab qolishadi.

Bundan tashqari, har xil turdagi mashqlar har xil xotira turlariga ta'sir qilishi mumkin. Masalan, uzoq masofaga yugurish kabi aerob mashqlari gippokampning o'sishiga yordam beradi va shu bilan odamlarning fazoviy xotira qobiliyatini yaxshilaydi. Stol tennisi o'ynash kabi tezkor muvofiqlashtirish faoliyati raqs xotirasini va qisqa muddatli xotirani rag'batlantirishi mumkin. Keksalar uchun shaxmat kabi fikrlaydigan sport turlari bilan shug'ullanish aql va fazoviy idrok nuqtai nazaridan xotirani sezilarli darajada yaxshilaydi.

Bundan tashqari, jismoniy mashqlar stressni kamaytirish va uyqu sifatini yaxshilash orqali xotirani yanada yaxshilashi mumkin. Stress va uyqusizlik nafaqat miyaning qon ta'minoti va metabolizmiga ta'sir qiladi, balki odamlarni tushkunlikka soladi va charchatadi, bu esa diqqatni jamlay olmaydi. Tegishli jismoniy mashqlar diqqatni chalg'itishi, tana va miyadagi stressni engillashtirishi, uyqu sifatini yaxshilashga yordam berishi, diqqatimizni o'rganish va ishlashga osonlashtirishi va xotirani yaxshilashi mumkin.

Xulosa qilib aytganda, jismoniy mashqlar qon aylanishini va metabolizmini rag'batlantirishi, jismoniy holat va ruhiy salomatlikni yaxshilashi va shu bilan xotirani yaxshilashga yordam beradi. Shuning uchun tana va miya salomatligini saqlash va xotirani yaxshilash uchun kundalik hayotimizda turli xil sport mashg'ulotlarida qatnashishimiz kerak. Ko'rinib turibdiki, biz xotirani yaxshilashimiz kerak. Cistanche deserticola xotirani sezilarli darajada yaxshilashi mumkin, chunki Cistanche deserticola neyrotransmitterlar muvozanatini ham tartibga solishi mumkin, masalan, atsetilxolin va o'sish omillari darajasini oshirish. Ushbu moddalar xotira va o'rganish uchun juda muhimdir. Bundan tashqari, go'sht qon oqimini yaxshilaydi va kislorod yetkazib berishni rag'batlantiradi, bu esa miyaning etarli miqdorda ozuqa va energiya olishini ta'minlaydi, shu bilan miya hayotiyligi va chidamliligini oshiradi.

Xotirani kuchaytirish uchun bilish qo'shimchalarini bosing

Seanslar EthoVision (Noldus, Wageningen, NL) hayvonlarni kuzatish dasturi yordamida harakatchanlikning umumiy davomiyligini va o'ziga xos xulq-atvor namunalarini, jumladan, tarbiya va tigmotaksisni baholash uchun videoga yozib olingan.

Ko'tarilgan ortiqcha labirint

Er sathidan 51 sm balandlikda o'rnatilgan EPM (Handley & Mithani, 1984; Pellow va boshqalar, 1985; Pellow & File, 1986) tashvishga o'xshash xatti-harakatlarni baholash uchun ishlatilgan. U to'rtta tor qo'l (50 × 10 sm) bo'lgan yog'och asosdan iborat.

Ikki qarama-qarshi qo'l shaffof akril shisha yon tomonlari bilan qoplangan bo'lib, ular ochiq qo'llar deb nomlanadi, qolgan ikkitasi esa yog'och tomonlari bilan yopiq bo'lib, sezilarli darajada qorong'i yo'laklarga olib keladi.

Har bir hayvon markaziy bo'limga joylashtirildi va labirintda 5 daqiqaga qoldirildi. Labirint markazida ochiq va yopiq qo'llarda o'tkazgan umumiy vaqt EthoVision yordamida qayd etilgan va hisoblangan. Ochiq qo'llarda o'tkazilgan vaqt anksiyolitik ta'sirni ko'rsatadi, yopiq qo'llar esa tashvishga o'xshash xatti-harakatlar bilan bog'liq (Walf & Frye, 2007).

Suv Y-labirint

Biz Del Arco va boshqalar tomonidan ishlab chiqilgan suv T-labirintining o'zgartirilgan versiyasidan foydalandik. (2007) va Locchi va boshqalar tomonidan tasdiqlangan (2007). Bir-biridan 120 graduslik uchta qo'ldan (har biri 45 × 15,5 × 45 sm) tashkil topgan akril shisha Y-labirint, fazoviy ish xotirasining ishlashini o'z-o'zidan almashtirish orqali baholash uchun 24 ± 0,5 gradusda 30 sm suv bilan to'ldirilgan.

Har bir kalamush 5 kun davomida kuniga oltita ketma-ket sinovdan o'tkazildi, intertrial interval 30 soniya bilan ajratildi. Hayvonlar sinov xonasiga birinchi sinovdan 5 daqiqa oldin atrof-muhit bilan tanishish uchun olib kelingan. Har bir sinovda hayvonlar boshi labirint markaziga qaragan holda boshlang'ich qo'lning orqa tomoniga joylashtirildi va ular ikkita nishon qo'ldan birini tanlash uchun suzib ketishdi (A yoki B qo'l).

Kichkina shaffof platforma nishon qo'llaridan birida (A yoki B qo'llarida) suv sathidan 1 sm pastroqda, birinchi sinov boshida muvozanatli tarzda joylashtirildi va har bir sinov uchun ikkita nishon qo'l o'rtasida almashindi.

60 s ichida platformani topa olmagan hayvonlarni dumi bilan ohista yo‘naltirishdi. Oxirgi sinovdan so'ng, ular uy qafaslariga qaytarilgunga qadar 40 daqiqa davomida quritilishi uchun kichik qafasga joylashtirildi. Har bir sessiya EthoVision yordamida videoga yozib olingan. Har bir sinovda yashirin platformani topish uchun kechikish va noto'g'ri qo'l yozuvlari (xatolar) soni kodlangan.

Perfuzion-fiksatsiya, to'qimalarni qayta ishlash va immunohistokimyo

Hayvonlarning perfuzion fiksatsiyasi oxirgi xulq-atvor testidan 41,24 soat o'tgach amalga oshirildi (WYM 5-kun). Hayvonlar (SI yoki EE) kataklaridan olib tashlandi, ketamin-ksilazin eritmasi (100-15 mg/kg, IP) bilan chuqur anesteziya qilindi va 4% depolimerizatsiyalangan paraformaldegid (pH7.4) bilan perfuziya qilindi.

Xuddi shu eritmada bir kecha-kunduzda mahkamlangandan so'ng, koronal bo'laklar (40-50 mkm) vibratom (VT1000 S, Leica Biosystems, Nussloch, Germaniya) bilan kesilib, fosfat tamponli sho'r suvda (PBS; pH 7,4) yuviladi.

C-Fos oqsilining ekspressiyasi immunohistokimyo yordamida turli xil miya hududlaridagi o'z-o'zidan faol neyronlar soniga uy sharoitlarining ta'sirini baholash uchun aniqlandi.

Toʻqimalarga kirib borishiga PBS (PBS-Tx) ga {0}}.05%Triton X-100 (pH 7.4) qoʻshish orqali erishildi. Bo'limlar blokirovka eritmasiga o'tkazilgunga qadar xona haroratida (RT) 30 daqiqa davomida vodorod periks (0,6%) bilan ishlov berildi.

Ular RT da 30 daqiqa davomida PBS-Tx da 20% normal echki zardobi (NGS; Vector Laboratories) bilan bloklandi va PBS-Tx da anti-c-Fos antikori (sichqoncha monoklonal, Santa Cruz 8047, 1:500 konsentratsiyasi) bilan inkubatsiya qilindi. 1%NGS bilan 3 kecha 4 daraja haroratda. Keyin bo'limlar PBS da yuvildi (3 × 10 min), ikkilamchi antikor eritmasiga (biotinillangan sichqonchaga qarshi IgG, 1% NGS bilan PBS-Txda 1:250) o'tkazildi va RT da 2 soat davomida inkubatsiya qilindi.

Yana bir qator chayishdan so'ng ular avidin-biotinillangan peroksidaza (ABC to'plami, vektor laboratoriyalari) bilan PBS da 20 daqiqa atRT davomida inkubatsiya qilindi. Peroksidaza mahsuloti nikel bilan mustahkamlangan3,30-Diaminobenzidin tetrahidroklorid gidrat (DAB, Sigma-Aldrich D5637) bilan paydo bo'ldi.

Mikroskopiya va hujayralarni hisoblash

Biz 12 ta hayvondan jami 48 ta qismni (6 ta uzluksiz SI va 6 SI dan EEgacha; har bir hayvon uchun 4 ta qism) yaxshi perfuziya sifati bilan qayta ishladik. c-Fos-immunopozitiv (c-Fos+) yadrolari soni retrosplenial korteks (RSC), agranulyar peririnal korteks (35-maydon; XXR), amigdalaning lateral yadrosi (LA) va amigdalaning bazolateral yadrosi (BL) uchun aniqlangan. .

Qiziqarli hududlar kalamush miyasi atlasi bilan sitologik taqqoslash orqali aniqlandi (Paxinos & Watson, 2006). Tasvirlar monoxromCCD kamerasi (Olympus XM10) bilan jihozlangan epifloresan mikroskop (Olympus BX53) yordamida olingan. Tahlillar immunohistokimyodan oldin tanlangan to'qimalarga cheklangan va ma'lumotlar yig'ilgandan keyin qo'shimcha bo'limlar qayta ishlandi.

Belgilangan hujayralar yarim avtomatik rejimda hisoblangan. Birinchidan, yuqorida aytib o'tilgan hududlardagi c-Fos + hujayralari soni ImageJ-da acell-hisoblash plagini (ITCN) yordamida aniqlandi va miqdori aniqlandi (Schneider va boshq., 2012).

ITCN har bir mintaqada aniqlangan hujayralarni ko'rsatadigan chiqish tasvirlarini yaratdi. Eksperimental sharoitlarga ko'r bo'lmagan ikkita mustaqil ball muallifi noto'g'ri-salbiy holatlarni aniqlash va hisoblash uchun ushbu rasmlarni baholadi (ya'ni, dasturiy ta'minot tomonidan o'tkazib yuborilgan zaif yorliqli hujayralar). Ushbu ikkita noto'g'ri-salbiy hujayralar sonining o'rtacha arifmetik qiymati har bir bo'lim uchun ITCN tomonidan aniqlangan hujayralarning umumiy soniga qo'shildi.

Natijalar

Og'irlik o'zgarishi

Hayvonlarning tana vazni EEmanipulyatsiyadan oldin (1, 15 va 31-kunlar) va keyin (41-kun) to'rtta vaqtda qayd etilgan. Biz vaqtning tana vazniga ta'sirini topdik (F (3, 42)=7.69, p < 0.001) va tortish vaqti guruhining o'zaro ta'siri (F (3, 42) )=3.30, p=0.029, 2 × 4 ikki tomonlama aralash ANOVA), boyitilgandan keyin EE hayvonlarida sezilarli vazn yo'qotishiga ishora qiladi: 1-kundagi og'irliklar (M= 324 .6, SD=15.7), 15-kun (M=334.6, SD=13.3) va 31-kun (M=325.5, SD {{ 33}}.6) 41-kunnikidan yuqori edi (M=311.9, SD=14; barcha ps <0.05).

Uzluksiz SI guruhida bunday o'zgarishlar kuzatilmadi (1-kun, M=321, SD =12.5; 15-kun, M=325, SD=15.5; 31-kun , M=322.3, SD= 15.5; 41-kun, M=320.1, SD=12.9).

Xulq-atvorda umidsizlik

Biz FST{1}} umumiy harakatsizlik ko'rsatkichlarini qayd qilish va solishtirish orqali SI tomonidan qo'zg'atilgan stressdan keyin qisqa EE manipulyatsiyasining xatti-harakatlardagi umidsizlikka ta'sirini baholadik (Slattery & Cryan, 2012; Yankelevich-Yahav va boshq., 2015).

SI dan EE guruhiga (M=49.04, SD=21.77) harakatsizlik darajasi doimiy SI guruhida kuzatilganidan sezilarli darajada yuqori edi (M=29.47, SD { {6}}.04; t (14)=2.18, p=0.047,d=1.09, mustaqil namunalar t-testi; 2-rasm), xatti-harakatlarga ishora qiladi qisqa EE ta'siriga uchragan hayvonlarda umidsizlik va uzluksiz SI ning relativ antidepressant ta'siri.

Shuni ta'kidlash kerakki, doimiy SI (M=41.32, SD=17.02) va SI - EE hayvonlarining (M {{5}) asosiy, ya'ni FST-1, harakatsizlik ko'rsatkichlari. }}.18, SD=11.42) juda oʻxshash edi. Shunday qilib, FSTning sinov bosqichida kuzatilgan farq tayanch-harakat faoliyatidagi asosiy farq bilan bog'liq emas edi. Xuddi shunday, OFTda (quyida) baholanganidek, FST-2 dan keyin umumiy tayanch-harakat faolligi darajasida noalternatsiya kuzatildi.

Harakat faoliyati va izlanish harakati

Biz doimiy SI va SI dan EE hayvonlari o'rtasidagi tayanch-harakat faolligidagi potentsial farqlarni baholash uchun OFT dan foydalandik. Nazorat (M =160.05, SD=53.95) va tajriba hayvonlari (M=206.93, SD=76.36; t () oʻrtasida farq yoʻq edi. 14)=1.42, p=0.178, mustaqil namunalar t-testi; 3-rasm, qisqa EE ning metabolik (ya'ni, vazn o'zgarishi) ta'siri umumiy harakatchanlikni o'zgartirmaganligini va aralashmasligini ko'rsatadi. FST bilan.

Tarbiyaviy xatti-harakatlar, kashfiyotchi xatti-harakatlarning ko'rsatkichi ham guruhlar o'rtasida sezilarli farqni ko'rsatmadi, garchi SI toEE hayvonlari doimiy SI bilan solishtirganda ko'pincha ko'proq tarbiya ko'rsatgan (M=38.75, SD =31.91). hayvonlar (M=18.75, SD=11.83; t (14)=1.66, p=0.119, mustaqil namunaviy test). Kuzatishlar markaz bilan chegaralanganda natija o'zgarmadi (SI to EE M=2.25, SD=1.75 va boshqalar.

uzluksiz SI M {0}}.38, SD=2.77) yoki periferiya (SI toEE M=34.25, SD=34.44 va uzluksiz OFTning SI M=16.38,SD=9.93) (barcha ps > 0.05). Guruhlardan qat'i nazar, tarbiya xatti-harakatlarining aksariyati markazdan farqli o'laroq, ko'pincha devorlarga (M=25.31, SD =25.34) qarama-qarshilikda (ya'ni, mustaqil tarbiya) aks ettirilgan. ;M=2.31, SD=2.17; t (15)=3.54, p=0.003, d=1.28, juftlangan namunalar t-testi).

Anksiyete

Differensial tarbiya va markazda o'tkaziladigan umumiy muddat OFTning chetiga nisbatan umumiy tashvish darajasining o'zgarishini ko'rsatadi. Ushbu kuzatishdan so'ng biz tashvishlanishning standart o'lchovi - EPMni qo'lladik va doimiy SI va SI hayvonlarining tashvishga o'xshash xatti-harakatlarini EE hayvonlariga solishtirdik.

SI to EE guruhi nazorat hayvonlari bilan solishtirganda (M=60.87, SD { {6}}.51;t (14)=−2.33, p=0.036, d=1.16, mustaqil namunaviy test; 4-rasm), anksiyolitikni ko'rsatadi SI tomonidan qo'zg'atilgan stressdan keyin qisqa boyitishning ta'siri.

Fazoviy operativ xotira

Fazoviy ishchi xotiraning ishlashi WYMda ketma-ket besh kun davomida baholandi. Yashirin qochish platformasi (F (1.47, 20.64)=12.95, p=0.001, 2 × 5 ikki tomonlama joylashishni aniqlash uchun oʻrtacha kechikish bilan oʻlchanadigan sinov kunida sezilarli taʼsir topdik. aralash ANOVA), o'rganishga erishilganligini ko'rsatdi.

Bonferroni tuzatgan posthoc testlari shuni ko'rsatdiki, platformani aniqlash uchun kechikish birinchi kun (M {0}}.26, SD=10.13) uchinchi (M=6) bilan solishtirganda sezilarli darajada yuqori bo'lgan. 79, SD= 2.25), toʻrtinchi (M=4.73, SD =1.44) va beshinchi (M=6.29, SD {{14} }.03) WYM kunlari (barcha p<0.05; 5-rasm).

Na sinov kuni-sharoit oʻzaro taʼsiri (F (1.47, 20.64)=2.54, p=0.115) yoki eksperimental holatning asosiy taʼsiri (F (1, 14)=3 .87, p=0.069, 2 × 5 ikki tomonlama aralash ANOVA) topildi.

Biz ish xotirasi samaradorligining qo'shimcha o'lchovi sifatida sinovlar davomida noto'g'ri qo'l kiritishlarining umumiy sonini (ya'ni, xatolar) tahlil qildik va sinov kunining sezilarli ta'sirini topdik (F (4, 56)=4.71, p {{4). }}.002, 2 × 5 ikki tomonlama aralashANOVA). Bonferroni tuzatgan post-hoc testlari shuni ko'rsatdiki, xatolarning umumiy soni to'rtinchi kuni (M=8.69, SD=1.82) WYMning birinchi kuni (M=12) bilan solishtirganda sezilarli darajada kamaygan. .69, SD=4.27; p <0.05), bu oʻrganishga erishilganligini koʻrsatadi.

Eksperimental holatning asosiy ta'siri (F (1, 14)=2.46, p=0.139, 2 × 5 ikki tomonlama aralash ANOVA) yoki sinov kuni-sharoit o'zaro ta'siri (F) yo'q edi. (4, 56)=1.34, p=0.269). Xatolik darajasi tahlillari shuni ko'rsatadiki, to'rtinchi kuni ikkala guruh ham o'rganishga erishgan. Biroq, SI to EE hayvonlari WYM ning dastlabki 2 kunida yaxshiroq ko'rinishga ega bo'ldi (5-rasm).

Platformani aniqlash uchun kechikishdagi bu farq WYM ning ikkinchi kunida sezilarli boʻldi (SI dan EE M=7.13, SD= 2.63 va doimiy SI M=11.09, SD=4.47; t (14) =2.17, p=0.048, d=1.08, mustaqil namunalar t-testi), tezroq oʻrganishga ishora xotira vazifasining dastlabki bosqichida.

For more information:1950477648nn@gmail.com