Siydik chiqarish ekzosomalari vankomitsin bilan bog'liq o'tkir buyrak shikastlanishida yallig'lanish yo'llarini aniqlaydi.

Aloqa:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Linda Avdishu 1,*, Emi Le 1, Jordan Amato 1, Vidxyut Jani 1, Soma Bal 2, Robert X. Mills 1, Marvik Karrillo-Terrazas 1, Devid J. Gonsales 1, Ashita Tolvani 3, Anjali Acharya 4, Xorxe Serda 5, Melanie S. Joy 6,7, Paola Nikoletti 8, Etienne Macedo 2, Sucheta Vaingankar 2, Ravindra Mehta 2, Satish P. Ramachandra Rao 9 va bevosita tergovchilar nomidan †

1 Skaggs farmatsiya va farmatsevtika fanlari maktabi, Kaliforniya universiteti, San-Diego, CA 92093, AQSH;a6le@ucsd.edu (AL); jegilmor@ucsd.edu (JA); vgjani@ucsd.edu (VJ); rhmills@health.ucsd.edu (RHM);mac215@health.ucsd.edu (MC-T.); djgonzalez@ucsd.edu (DJG)

2 Tibbiyot maktabi, Kaliforniya universiteti, San-Diego, CA 92093, AQSh; sobal@ucsd.edu (SB);emacedo@ucsd.edu (EM); svaingankar@health.ucsd.edu (SV); rmehta@ucsd.edu (RM)

3 School of Medicine, University of Alabama, Birmingham, AL 35233, USA; atolwani@uab.edu

4 Albert Einstein College of Medicine, The Bronx, NY 10461, USA; anjali2526@gmail.com

5 Albany tibbiyot kolleji, Albany, NY 12208, AQSH; jorge.cerda82@gmail.com

6 Buyrak kasalliklari va gipertenziya bo'limi, Skaggs farmatsevtika va farmatsevtika maktabi, Aurora, CO 80045, AQSh; MELANIE.JOY@cuanschutz.edu

7 Tibbiyot maktabi, Kolorado universiteti, Aurora, CO 80045, AQSh

8 Mount Sinay tibbiyot maktabi, Nyu-York, NY 10029, AQSh; paola.nicoletti@mssm.edu

9 Hujayra va molekulyar tibbiyot bo'limi, Michigan tibbiyot tizimi universiteti, Ann Arbor, MI 48109, AQSh; satishpr@med.umich.edu

* Muloqot: lawdishu@ucsd.edu; Tel.: plus 858-534-3919

† To'g'ridan-to'g'ri tergovchilarning a'zoligi minnatdorchilikda ko'rsatilgan.

Annotatsiya:

Fon:Vankomitsin odatda metitsillinga chidamli Staphylococcus aureus kabi gram-musbat organizmlar uchun birinchi darajali terapiya sifatida ishlatiladi. Vankomitsin tomonidan qo'zg'atilgan o'tkirbuyrakjarohat(V-AKI) bemorlarning 43 foizida, ayniqsa yuqori maqsadli konsentratsiyali bemorlarda qayd etilgan. Odamlarda shikastlanishning aniq mexanizmi tushunarsiz bo'lib qolmoqda, so'nggi dalillar proksimal tubula hujayralari apoptoziga qaratilgan. Ushbu tadqiqotda biz V-AKI bo'lgan bemorlarda siydik ekzosomalarining oqsil tarkibini shikastlanish mexanizmlari va potentsial javoblarning biomarkerlarini yanada tushuntirish uchun tekshirdik. Usullari: DIRECT tadqiqotiga kiritilgan va UAB-UCSD O'Brien markazi biorepozitsiyasidan mos keladigan sog'lom nazorat guruhidagi V-AKI bo'lgan bemorlarning siydik namunalari tahlilga kiritildi. Ekzozomalar erituvchini istisno qilish printsipi va polietilen glikol bilan qo'zg'atilgan yog'ingarchilik yordamida ekstraktsiya qilindi. Protein identifikatori va miqdori yorliqsiz suyuqlik xromatografiyasi-mass spektrometriyasi (LC/MS) bilan aniqlandi. Sarum kreatininining o'rtacha cho'qqisi 3,7 ± 1,4 mg / dL ni tashkil etdi va bu vaqtbuyrakjarohat4.0 ± 3.0 kun edi. Chiqarish paytida bemorlarning 90 foizi qisman tiklanishni ko'rsatdi; Beshta V-AKI va 7 nazorat namunasidagi proteomik tahlillar barcha namunalarda 2009 ta oqsil va V-AKI bilan sezilarli darajada bog‘langan 251 ta oqsilni aniqladi (Pi-skor > 1). Eng yaxshi ajratuvchi oqsillar komplementC3, komplement C4, galektin{16}}bog'lovchi oqsil, fibrinogen, alfa{17}} makroglobulin, immunoglobulin og'ir doimiy mu va serotransferrin edi.

Xulosa:Siydik ekzosomasi V-AKIda nefrotoksik shikastlanishdan so'ng yallig'lanish oqsillarining yuqori regulyatsiyasini aniqlaydi. Patofizyologik mexanizmlarni tushuntirish va potentsial shikastlanish biomarkerlarini tasdiqlash uchun ushbu topilmalarni tasdiqlash uchun katta bemor namunasi uchun keyingi tadqiqotlar zarur.

Kalit so‘zlar:vankomitsin; AKI; nefrotoksiklik; ekzosomalar; yallig'lanish; to'ldiruvchi; immun yo'llari

Cistanche o'tbuyrak shikastlanishini davolash mumkin

Chengdu Wecistanche borcistanchebuyrak shikastlanishini davolash uchun mahsulotlar

1.Kirish

Vankomitsin - og'ir bemorlarda metitsillinga chidamli Staphylococcus aureus infektsiyalarini davolash uchun ishlatiladigan glikopeptidli antibiotik. Nefrotoksiklik jiddiy noxush hodisa bo'lib, davolangan bemorlarning 10-20 foiziga ta'sir qiladi va kasalxonada qolish muddatining oshishi, 30-kunlik kasalxonaga qayta yotqizilish darajasi va barcha sabablarga ko'ra 30-kunlik o'lim [1] bilan bog'liq. Vankomitsin bilan bog'liq o'tkirbuyrakjarohat(V-AKI) dozaga bog'liq va terapiya boshlanishi 4-17 kundan boshlanadi. V-AKI uzoq vaqtdan beri vankomitsinning asosiy yon ta'siri sifatida tan olingan bo'lsa-da, nefrotoksiklik mexanizmlari hali ham yaxshi tushunilmagan. Vankomitsin tomonidan qo'zg'atilgan hujayrali va molekulyar javoblarni tushunish V AKI xavfini va u bilan bog'liq xarajatlarni minimallashtirish va infektsiyalarni davolashda uning samaradorligini oshirish uchun mexanizmlarni tushunish va strategiyalarni ishlab chiqish uchun muhim ahamiyatga ega. Buyrakning toksik reaktsiyasi vankomitsinning proksimal kanalchalar epiteliysiga bevosita ta'siridan kelib chiqqan ko'rinadi [2]. Bugungi kunga qadar sichqoncha modellarida V-AKI ni o'rganish uchun standart toksikogenomik yondashuvlar qo'llanilgan, ammo insoniy tadqiqotlar etishmayapti [3-5]. Hayvon modellari shuni ko'rsatadiki, vankomitsinni qabul qilish buyrak shikastlanishiga yordam beradigan oksidlovchi stressni keltirib chiqaradi [6,7]. Shikastlanishning mumkin bo'lgan mexanizmlaridan biri bu preparatning proksimal naycha hujayralarida tutilishi, chunki u organik kation tashuvchilar (OKT) tomonidan bazolateral membrana va proksimal tubula hujayralariga tashiladi, ammo faol oqim tashish mexanizmlari aniqlanmagan. –8].

Ekzosomalar hujayralararo aloqada va oqsil/nuklein kislotalarni yetkazib berishda muhim rol o'ynaydigan membranadan kelib chiqqan mikrositar pufakchalar bo'lib, klinik diagnostikada yordam beradigan yangi biomarkerlarni kashf qilish imkoniyatini beradi.buyrakjarohat[9]. An'anaviy zardob va siydik namunalaridan foydalangan holda transkriptomik va proteomik yondashuvlar bilan solishtirganda namunalarning barqarorligi bilan bog'liq bo'lgan ekzosomalar biomarkerlarni aniqlash uchun ko'proq o'ziga xoslik va sezgirlikka ega ekanligi taklif qilindi [9]. Ushbu tadqiqotda biz V-AKI ga javoban siydik ekzosomasi oqsillarining o'zgarishi shikastlanish mexanizmlarini tushuntirishga yordam beradi, degan gipotezani sinab ko'rdik va tasdiqlangan buyrak shikastlanishi bilan og'rigan bemorlarda yangi biomarkerlarni aniqlashga yordam beradi. Buning uchun biz Dori-induktsiyali buyrak shikastlanishi konsortsiumi (DIRECT) tadqiqotida qatnashgan sub'ektlarni jalb qildik, bu xalqaro, ko'p markazli kogorta bo'lib, giyohvand moddalar bilan bog'liq o'tkir o'tkir kasalliklarning klinik jihatdan ko'rib chiqilishi mumkin.buyrakjarohatva genom miqyosidagi assotsiatsiyadan foydalangan holda farmakogenomik bashorat qiluvchilarni tekshirish uchun populyatsiyaga asoslangan nazorat. DIRECT tadqiqotining tafsilotlari Usullar bo'limida va laboratoriyamizning yaqinda chop etilgan nashrida tasvirlangan [10].

2. Natijalar

Tahlillarga 22 ta sub'ektdan, 10 ta V-AKI holatlaridan va 12 ta nazoratdan olingan siydik namunalari kiritilgan. Bemorlarning demografik ko'rsatkichlari V-AKI holatlari va nazorat guruhlari o'rtasida o'xshash edi va 1-jadvalda jamlangan. Kutilganidek, gipertenziya, diabet va yurak etishmovchiligi V-AKI holatlarida nazorat bilan solishtirganda yuqori bo'lgan (1-jadval).

Barcha V-AKI holatlari Buyrak kasalligining global natijalarini yaxshilash (KDIGO) mezonlari (1-rasm) [11] tomonidan aniqlanganidek, AKI 2 yoki undan yuqori bosqichda rivojlangan. V-AKI boshlanishi vankomitsin boshlanganidan 4.0 ± 3.0 kun oʻtgach sodir boʻlgan. Kasalxonaga yotqizilgandan so'ng va undan keyin qon zardobidagi kreatinin (Scr) o'zgarishi vaqti 1-rasmda ko'rsatilgan.

Shakl 1. V-AKI kursi davomida sarum kreatininidagi o'zgarishlar. Bu raqam vankomitsin bilan bog'liq bo'lgan o'tkir davrda 10 ta holatda sarum kreatininidagi o'zgarishlarni ko'rsatadi.buyrakjarohatkasalxonaga yotqizilganidan keyin jarohatdan keyingi 90 kungacha. Vaqt nuqtalari Drug-Induced Renal Injury Consortium (DIRECT) tadqiqot vaqti nuqtalariga mos keladi. Qisqartmalar: SCr=qon zardobida kreatinin, kasalxonaga=kasalxonaga yotqizish, dori ta'siridan oldingi dori =, DIRI=dori vositasidan kelib chiqqan buyrak shikastlanishi ta'rifi, DrugDC {{8} } giyohvand moddalarni iste'mol qilishni to'xtatish yoki dozasini kamaytirish, Nodir Scr=V-AKI dan keyin eng past sarum, Hospital Disch= kasalxonadan chiqish

V-AKI holatlarida boshlang'ich xavf omillariga sepsis (30 foiz), yurak kasalligi (30 foiz), qandli diabet (30 foiz), anemiya (20 foiz), radiokontrastli ta'sir qilish (10 foiz), jigar kasalligi (10 foiz) va gipoalbuminemiya (10 foiz) (2-rasm).

Ko'pincha, V-AKI holatlarida vankomitsinning uchta dori dozasi epizodlari qabul qilingan. Vankomitsinning sutkalik dozalari 1000 dan 4000 mg gacha. Har bir dozalash epizodida o'tkazilgan o'rtacha (kvartallar oralig'i (IQR)) kunlar soni 3-rasmda ko'rsatilgan. 1-3 dozalash epizodlari bilan bog'liq bo'lgan o'rtacha (standart og'ish (SD)) vankomitsinning plazma kontsentratsiyasi 20,6 ± 8,1 ga ko'tarilgan. 29,6 ± 16,3, 38,0 ± 13 mg / L, mos ravishda. Biroq, epizodlarning har biri orasidagi kontsentratsiyalardagi farq statistik jihatdan ahamiyatli emas edi (1-qism va 2-b=0.5, 2-qism va 3-b=0.41)

Boshqa natijalar ma'lumotlari 2-jadvalda jamlangan. Shikastlanishning og'irligini hisobga olgan holda, bemorlarning 20 foizi buyrakni almashtirish terapiyasini talab qildi. Kasalxonada o'lim darajasi 10 foizni tashkil etdi. Kasalxonadan chiqqandan so'ng, bemorlarning 90 foizi V-AKIdan tuzalmadi. Oltita bemorda Scr jarohatdan keyingi 28-kuni va to'rttasida 90-kuni o'lchandi. 28-kunga kelib, oltita bemorning ikkitasida (33 foiz) AKD bo'lgan, ammo qolgan to'rtta bemorning hech birida 90-kunida AKD bo'lmagan.Buyrakbiopsiya V-AKI holatlarining 20 foizida o'tkazildi (2-jadval).

Peptidlarni o'zlarining qarindosh spektrlari bilan moslashtirish uchun filtr o'rnatilgandan so'ng tahlil qilish uchun malakali bo'lgan 12 ta namunada jami 2009 ta oqsil mavjud edi. Ushbu oqsillar qo'shimcha tahlil qilindi. Birinchidan, har bir namunaning umumiy proteomasini solishtirish uchun asosiy koordinatalar tahlili (PCoA) o'tkazildi. Ushbu tahlil AKI va nazorat namunalari (4-rasm) o'rtasida sezilarli bo'linish (PERMANOVA p-qiymati=0.037) aniqlandi, bu tizimli darajadagi fenotipni ekzosoma oqsillari darajasida ham takrorlaydi va shu bilan bizning ushbu ma'lumotlar to'plamlariga bo'lgan ishonchimizni oshiradi. . Har bir oqsil va V-AKI holati o'rtasidagi bog'liqlik kuchi p-qiymati ahamiyatini katlama o'zgarishi bilan birlashtirgan pi-qiymat ko'rsatkichi yordamida baholandi [12].

Shakl 4. Proteom tarkibi V-AKI bemorlari va nazorat qiluvchilarning siydik ekzosomalarini ajratib turadi. (A) Asosiy proteoma namunalari tahlilini muvofiqlashtiradi. Namuna proteomasi o'rtasidagi farqni hisoblash uchun Brey-Kurtis masofa ko'rsatkichi ishlatilgan va asosiy koordinatalar grafigi ko'rsatilgan. AKI namunalari (qizil) va nazorat namunalari (ko'k) o'rtasida 1 va 3 o'qlari bo'ylab ajralish kuzatildi. (B) Nazorat va AKI namunalari o'rtasidagi Bray-Kurtis masofasini jamlagan quti. (A) da ko'rsatilgan AKI va nazorat namunalari o'rtasidagi statistik ajratish dispersiya testining permutatsion tahlili (PERMANOVA) yordamida sinovdan o'tkazildi. Nazorat yoki AKI namunalarini nazorat qilish masofalarini solishtirganda natijalarni umumlashtiruvchi qutilar ko'rsatilgan.

Keyinchalik, V-AKI va nazorat namunalari o'rtasidagi ikkilik taqqoslashlar AKI fenotipi bilan sezilarli darajada bog'langan 42 ta oqsilni va nazorat fenotipi bilan bog'liq bo'lgan 26 ta oqsilni (Pi ball> 1) berdi (Qo'shimcha jadval S1). Har bir oqsil bilan bog'liq bo'lgan ahamiyati va qatlam o'zgarishini ko'rsatadigan vulqon syujeti 5A-rasmda ko'rsatilgan. V-AKI holatlari uchun eng yaxshi diskriminatsion oqsillar fibrinogen, komplement C3, komplement C4, galektin{10}}bog'lovchi oqsil, alfa{11}} makroglobulin, immunoglobulin og'ir doimiy mu va serotransferrin edi (5B-rasm). V-AKI bemorlarida o'zgargan oqsillar toifalarini aniqlash uchun muhim oqsillar orasida gen to'plamini boyitish tahlili o'tkazildi va natijalar S1 qo'shimcha jadvalida jamlangan. AKI-fenotipi bilan bog'liq bo'lgan bir nechta oqsillar yallig'lanish bilan bog'liq va/yoki yallig'lanish fenotipiga vositachilik qiladigan funktsiyalarga ega ekanligi ko'rsatilgan. Ushbu protein o'zgarishlarining asosiy sitokin signalizatsiyasidagi o'zgarishlar bilan bog'liqligini tekshirish uchun sitokin xulosasi o'tkazildi, bu AKI bilan bog'liq oqsillar va IL10, IL6 va TNF sitokinlari o'rtasidagi kuchli aloqani ko'rsatdi. Ushbu sitokinlar 5C-rasmda keltirilganidek, 2.8, 2.3 va 2.{24}}AKI bilan bogʻlangan oqsillarga nazorat bilan bogʻlangan oqsillarga qaraganda koʻproq bogʻlanishni oʻz ichiga oladi. AKI bilan bog'liq oqsillar va sitokinlarning oqsil-oqsil o'zaro ta'sir tarmoqlari 5D-rasmda umumlashtirilganidek, AKI bilan bog'liq oqsillar o'rtasida asosan yallig'lanishga qarshi aloqalarni ko'rsatdi.

Shakl 5. V-AKI ga oqsil darajasidagi uyushmalar. (A) Har bir oqsilning V-AKI holatiga o'zgarishi va t-test ahamiyatini aks ettiruvchi vulqon syujeti. AKI va nazorat holati bilan bog'liq eng yaxshi 10 ta oqsil mos ravishda ko'k va qizil rangda ko'rsatilgan. Pi ball > 1ga asoslangan boshqa bog'langan oqsillar sariq rangda ko'rsatilgan. (B) Har bir oqsil uchun katlama o'zgarishi va t-test ahamiyatini hisobga oladigan Pi balli hisoblab chiqilgan va eng kuchli assotsiatsiyaga ega bo'lgan oqsillar chizilgan. (C) AKI yoki nazorat oqsillari bilan bog'liq topsitokinlar. Tarmoqqa asoslangan sitokin xulosasi yondashuvi qo'llanildi va AKI yoki nazorat bilan bog'liq oqsillarga nisbatan eng kuchli boyitish ko'rsatkichlarini ko'rsatadigan sitokinlar ko'rsatilgan. Qizil chiziqlar AKI bilan bog'liq oqsillar bilan bog'liq sitokinlarni, ko'k chiziqlar esa nazorat bilan bog'liq oqsillar bilan bog'liq sitokinlarni ifodalaydi. (D) AKI bilan bog'langan oqsillar va AKI bilan boyitilgan sitokinlarning oqsil-oqsil o'zaro ta'siri. Protein tugunlarining tashqi qirrasi yallig'lanishga qarshi yoki yallig'lanishga qarshi sitokinlarning assotsiatsiyasiga qarab rangga ega. Har bir tugunning o'lchami har bir oqsilning AKI holatiga statistik bog'lanish kuchini ifodalaydi.

Cistanche tubulosabuyrak shikastlanishini davolash mumkin

3. Munozara

Biz dori-darmonlarni keltirib chiqaradigan patofiziologik mexanizmlar haqida ma'lumot berish uchun siydik ekzosomalaridan foydalanishning yangi yondashuvi haqida xabar beramiz.buyrakjarohatprototipik buyrak toksikanti sifatida vankomitsindan foydalanish. Ushbu tadqiqotning kuchli tomonlaridan biri bu DIRECT tadqiqotining [10] yaxshi tavsiflangan bemorlar darajasidagi ma'lumotlarning, shu jumladan, dori vositalaridan kelib chiqqan genomika mexanizmlarini tushuntirish uchun ishlab chiqilganligidir.buyrakjarohat. AKI 2 yoki undan yuqori bosqichga ega bo'lgan sub'ektlar dastlabki bosqichda an'anaviy xavf omillariga duchor bo'lishdi. Barcha tadqiqot sub'ektlari kuniga 4 g umumiy qabul qilingan nefrotoksiklik chegarasidan kamroq kunlik dozalarni qabul qilishlariga qaramay, vankomitsinning plazma kontsentratsiyasini sezilarli darajada oshirdi [13]. Ko'pgina sub'ektlar kasalxonaga yotqizilganida V-AKI dan to'liq tuzalmagan va jarohatdan keyingi bir oy davomida o'tkir buyrak kasalligi bo'lgan. Kutilganidek, bir nechta bemorlar buyrak biopsiyasini oldilar.

Siydik ekzosomasi/hujayradan tashqari pufakchalar (EV) proteomikasi shuni ko'rsatdiki, V-AKI holatlari uchun maqsadli diskriminatsion oqsillar orasida C3 komplementi, C4 komplementi, galektin{3}}bog'lovchi oqsil, fibrinogen, alfa{4}} makroglobulin, immunoglobulin og'ir doimiy mu , va serotransferrin. Ushbu ekzozoma topilmalari V-AKI uchun subcellular/supra-molekulyar darajadagi shikastlanish mexanizmlari haqida ma'lumot beradi va potentsial ravishda dori-darmonli kasallik jarayonining davomi bo'ylab biomarkerlar bo'lib xizmat qiladi.

Qon va siydikda mavjud bo'lgan ekzosomalar hujayralararo aloqa, koagulyatsiya va chiqindilarni boshqarishda muhim rol o'ynaydi [14]. Toksin bilan bog'liq o'tkirdan keyinbuyrakjarohat, Naychali epiteliya hujayralaridan chiqarilgan ekzosomalar makrofag infiltratsiyasini jalb qilish va tubulointerstitial yallig'lanishni rag'batlantirish uchun shikastlanish signallarini yuborishi mumkin [15]. Biz ekzosomalarning oqsil tarkibi V-AKI holatlari va sog'lom nazorat o'rtasida farq qiladi deb o'yladik. V-AKIda ikki yuz ellik bir oqsil disregulyatsiya qilingan va ular asosan yallig'lanish va koagulyatsion yo'llarda ishtirok etgan ko'rinadi. Ushbu 251 ta oqsil orasida bizning tahlilimiz shuni ko'rsatdiki, C3 komplementi, C4 komplementi, galektin{7}} bog'lovchi oqsil, fibrinogen, alfa{8}} makroglobulin, immunoglobulin og'ir doimiy mu va serotransferrin V-AKI holatlari bilan sezilarli darajada bog'liq.

Bizning natijalarimizga asoslanib, C3 va C4 eng yaxshi ajratuvchi V-AKI ekzosoma oqsillari qatoriga kiradi, biz komplement tizimining faollashuvi vankomitsin bilan bog'liq buyrak naychalari shikastlanishida ishtirok etishini taklif qilamiz. Bu, shuningdek, nashr etilgan adabiyotlar bilan yaxshi mos keladi, komplement tizimining faollashuvi immun kompleks glomerulonefrit va turli xil buyrak kasalliklarida rol o'ynaydi [16]. Ishemiya yoki nefrotoksin ta'siridan kelib chiqqan holda, AKIda komplement faollashuvi vositasida buyrak shikastlanishi uzoq organlarning shikastlanishi va bemorlarning o'limiga olib keladigan tizimli yallig'lanish hodisalari bilan bog'liq [17]. Ishemiya-reperfuziya (IR) shikastlanishi modellarida gipoksiya, ATP etishmovchiligi va mitoxondriyal shikastlanish reperfuziya paytida erkin kislorod radikallarining paydo bo'lishiga olib keladi [18]. Sitokinlar, kimyokinlar va komplement faollashuvi yallig'lanishni kuchaytiradi, bu esa o'tkir naycha shikastlanishiga olib keladi. Bundan tashqari, C3a va C5a retseptorlari etishmovchiligi bo'lgan sichqonlar IQ shikastlanishidan himoyalangan [19,20]. IQ shikastlanishi tomonidan komplement komponentlarini mahalliy ishlab chiqarishni tartibga solish ko'rsatilganbuyrakendotelial va quvurli hujayralar [16,21]. Hayvonlar modellari va odamlarda o'tkazilgan bir qator tadqiqotlar natijasida C3 va C4 kabi komplement oqsili mahsulotlarining tubula membranasi bo'ylab shikastlanish yoki shikastlanishdan keyin ko'payishi aniqlangan.buyrak. Ushbu ko'tarilgan cho'kma darajasi peritubulyar yoki glomeruli mintaqada sezilarli darajada mavjud emas, lekin odamlar va hayvonlarning buyraklar biopsiyalarida ko'rinib turganidek, quvurli membranada kuchli to'plangan [17]. Ekzosomalar va EV'lar komplement faollashuvi tartibga solinmaganda qon aylanish komplementi komponentlarini tashishi mumkin [22,23]. Bir nechta uyali eksperimentlar va klinik kuzatuvlar shuni tasdiqladiki, chiqarilgan EVlar komplement oqsillarini olib yuradi va modulyatsiya qiladi va bir vaqtning o'zida yallig'lanish sharoitida ularning ishlab chiqarilishi qon aylanish pufakchalari soniga ham ta'sir qilishi mumkin [23]. Ikki jarayonning o'zaro bog'liqligi EV'lar AKI ning yallig'lanish mexanizmlari doirasida juda dolzarb bo'lgan komplement va immunomodulyar birikmalarga nisbatan biomarker manbalari, maqsadlari va terapevtik etkazib berish agentlari bo'lish potentsialini namoyish etadi degan xulosaga olib keladi. Bizning topilmamiz V-AKI namunalari sog'lom nazorat bilan solishtirganda, buyrak naychalari hujayralarida vankomitsinning to'g'ridan-to'g'ri toksikligiga immun javoblarning rolini ko'rsatadi. Yuqoridagi barcha protein tarkibiga qo'shimcha ravishda, siydikdan olingan ekzosomalar / EV'lar, shuningdek, buyrak biopsiyasiga alternativa sifatida potentsial noinvaziv biomarkerlarni ifodalaydi va komplement tizimining dori bilan qo'zg'atilishidagi roli haqida ma'lumot beradi.buyrakjarohat.

Oldingi ko'plab tadqiqotlar (aniq havolalar uchun keyingi bir necha jumlalarga qarang) galektin-3 (Gal-3) ning roliga qaratilgan bo'lsa-da.buyrakjarohat, galektin-3 bog'lovchi oqsil (Gal-3-bp) haqida kam ma'lumot mavjud. Gal-3 buyrakning yig'uvchi kanalchalarida ifodalanadi va nefrogenezni rag'batlantirish, hujayra-hujayra va hujayra-matritsa o'zaro ta'sirini modulyatsiya qilish va yallig'lanishni tartibga solish vazifasini bajaradi [24-26]. Henderson va boshqalar. Gal-3ning yallig'lanishdagi rolini ko'rib chiqdi va Gal-3 surunkali yallig'lanishning asosiy komponenti ekanligini va agar to'qimalarning shikastlanishi takroriy bo'lsa, aniqladi. Bu to'qimalarning shikastlanishini "devor bilan yopish" ni osonlashtiradi, shikastlanishning tarqalishini kechiktiradi [27]. Bundan tashqari, Nishiyama va boshqalar. ishemik AKI bo'lgan kalamushlarda Gal{10}} mRNKning ko'tarilganligini ko'rsatdi va keyingi reperfuziya, immunohistokimyo nefron segmentlarida Gal{11}} ko'payganini aniqladi [25]. Tsuchiyama va boshqalar. Nefrotoksik zardobli nefritli kalamushlarga Gal{13}} ni yuborish siydik bilan oqsil ajralishi, yarim oy shakllanishi va makrofaglarning glomeruliyaga infiltratsiyasining pasayishiga olib kelishi aniqlandi [28]. Bu shuni ko'rsatadiki, ishemik yoki immun vositali jarohatlardan keyin Gal-3 regeneratsiyada rol o'ynaydi. Gal-3ning qarindosh hamkori sifatida, Gal{18}}bp ning asosiy roli va uning vankomitsin va boshqa agentlar ta'sirida nefrotoksik shikastlanishda ko'tarilishi sababi kelgusidagi tadqiqotlarda muhim ahamiyatga ega bo'ladi.

Tadqiqotimiz shuni ko'rsatdiki, fibrinogenning barcha uchta bo'linmasi avval e'lon qilingan ma'lumotlarga mos ravishda tartibga solinmagan. Fibrinogen eruvchan dimerik plazma molekulasi bo'lib, har bir dimer uchta polipeptiddan iborat: alfa, beta va gamma [29]. U gemostaz va koagulyatsiyada asosiy rol o'ynaydi, ammo yallig'lanish bilan bog'liq sharoitlarni tartibga solishda ham muhim ekanligi ko'rsatilgan [30-32]. Ajay va boshqalar. fibrinogen mavjudligi buyrak funktsiyasi, yallig'lanish va omon qolish uchun muhim ekanligini ko'rsatdi [33]. Bundan tashqari, fibrinogen buyrak epitelial hujayralariga antiadheziv ta'sir ko'rsatishi mumkin, bu esa quvurli obstruktsiyani oldini olishga yordam beradi [34]. Fibrinogen AKIda sezilarli darajada ko'payadi va tartibga solinadi va ilgari OKI ni erta aniqlash uchun potentsial biomarker sifatida baholangan [29]. Hoffman va boshqalar, kalamushlarda ishemiya/reperfuziya va sisplatin qo‘llangandan keyin fibrinogenning o‘zgarishini o‘rgandilar va mRNK ikki tomonlama IQ shikastlanishidan 30 minut o‘tgach ko‘tarildi va 48-72 soatda cho‘qqiga yetdi, sisplatinni qo‘llashda esa fibrinogenning mRNK ifodasi bo‘lgan. 24 soatda aniqlangan [29]. Siydik fibrinogeni ishemik reperfuzion shikastlanishdan 3 soat o'tgach va sisplatin qabul qilingandan 24 soat o'tgach aniqlandi, bu esa siydikchillarning katta o'sishiga mos keladi.buyrakjarohatmolekula 1 (KIM-1) [29].

Cistanche foydalari: davolash mumkinbuyrak shikastlanishi

Tarixiy jihatdan V-AKI uchun ikki xil patofizyologik mexanizmlar umumiy qabul qilingan: to'g'ridan-to'g'ri toksik ta'sirlardan kelib chiqqan o'tkir quvurli nekroz va o'tkir interstitsial nefrit. Buyrak proksimal tubulali epiteliysi o'tkir quvurli nekrozda sitoskeletal yaxlitlikni, nekroz va apoptozni yo'qotadi [35]. Nekrotik hujayralar tug'ma immunitet tizimini tartibga soluvchi molekulalarni chiqaradi, bu yallig'lanishni keltirib chiqaradi va naycha shikastlanishini tezlashtiradi [35]. Joriy tadqiqotda biz V-AKI bo'lgan bemorlarning siydik EVlarida yallig'lanish belgilarini ko'rsatdik. Bundan tashqari, biz IL10, IL6 va TNF sitokinlari va bizning yuqori AKI kamsituvchi oqsillarimiz o'rtasida yallig'lanishga qarshi aloqani topdik. Birgalikda bu ma'lumotlar shuni ko'rsatadiki, V-AKI patofiziologiyasi shikastlanishdan keyingi 24-72 soat davomida yallig'lanishning ko'tarilishi bilan naychali toksiklikdir.

Bizning tadqiqotimizda bir nechta cheklovlar mavjud. Erkak va asosan kavkazlik bo'lgan 22 bemorning kichik namunasi bizning topilmalarimizni boshqa jinslar, irqlar va etnik guruhlarga umumlashtirishni cheklaydi. Tadqiqotimizning ikkinchi cheklovi shundan iboratki, har bir bemorning siydik ekzosoma namunasida umumiy oqsil miqdori har xil bo'lgan, shuning uchun o'ziga xos oqsillarni o'lchashni qiyinlashtirgan, ayniqsa mutlaq miqdori pastroq bo'lganlar uchun. Garchi bu o'z-o'zidan bu tadqiqotning cheklovi bo'lmasa-da, chunki har bir odamning siydik ekzosomalariga oqsillarni to'plash qobiliyati tabiiy ravishda o'zgaruvchan bo'lsa-da, ba'zi odamlarda oqsillarning kam miqdori keyingi tahlil qilish va umumlashtirilishi mumkin bo'lgan mazmunli xulosalar chiqarish qobiliyatimizni cheklaydi. kattaroq populyatsiyalar. Uchinchi cheklov - bu yagona vaqt nuqtasi namunasi bo'lib, u AKI kontinuumining turli bosqichlarida sodir bo'ladigan hujayra o'zgarishlarini tushunishimizni cheklaydi, masalan, darhol shikastlanish fazasi, tuzatish bosqichi va boshqalar. Ketma-ket namuna olish ekzosoma tarkibining vaqt kursini tushunishimizni yanada kengaytiradi. o'zgarishlar, dori to'planishi natijasida kelib chiqadigan oksidlovchi stress va tiklanishda immunitet yo'llarining ko'tarilishi. Joriy tadqiqot Scr chegaralari bilan belgilangan bemorlarni o'z ichiga oladi. Sarum kreatinin buyrak funktsiyasining nomukammal biomarkeridir, chunki Scr ko'tarilishi ko'pincha shikastlanishdan orqada qoladi [36]. Bu erta aniqlash uchun Scr sezgirligi va o'ziga xosligini cheklaydibuyrakjarohat[36], va tadqiqotlar aniqlash paydo bo'ldibuyrakjarohatkabi biomarkerlarbuyrak jarohatnefrotoksiklikni erta aniqlash uchun molekula 1 (KIM1) va neytrofil jelatinaza bilan bog'langan lipokalin (NGAL) [37,38]. Ilgari xabar qilinganidek, biomarkerlar dori-darmon sabab bo'lgan aniq va subklinik darajalarni aniqlash potentsialiga ega.buyrakjarohat[39,40].

4. Materiallar va usullar

4.1. Bemorni tanlash

DIRECT tadqiqotida qatnashgan V-AKI bilan kasallangan 10 nafar bemorning siydik namunalari [10] va UAB-UCSD O'Brien markazi biorepozitorisidan 12 ta sog'lom nazorat siydik namunalari tahlilga kiritildi. Nazorat sub'ektlari jinsi, irqi va o'n yillik yoshi bo'yicha o'rganilayotgan sub'ektlar bilan taqqoslandi va vankomitsin yoki ma'lum bo'lgan ta'sirga ega emas edi.buyrakjarohat. DIRECT tadqiqoti bu dori vositalaridan kelib chiqadigan farmakogenetik ko'rsatkichlarni o'rganuvchi xalqaro tadqiqotdirbuyrakjarohatholatlarning genom miqyosidagi assotsiatsiyasini o'rganish va populyatsiyaga asoslangan nazoratdan foydalanish [10]. DIRECT tadqiqoti institutsional tadqiqot kengashi (IRB №121651) tomonidan ma'qullangan va ro'yxatdan o'tishdan oldin barcha ishtirokchilardan kelajakdagi tahlillar uchun saqlangan namunalardan foydalanishni o'z ichiga olgan yozma xabardor qilingan rozilik olingan. DIRECTda AKI quyidagi mezonlardan biri bilan namoyon bo'ladigan buyrak funktsiyasining keskin pasayishi sifatida aniqlangan: (1) qon zardobida kreatininning (Scr) mutlaq ortishi (0,3 mg/dL dan ortiq yoki unga teng yoki 26,4 mkmol/ dan ortiq yoki unga teng) L) (48-soat vaqt oralig'ida) mos yozuvlar Scr qiymatidan, (2) etti kun ichida Scr ning 50 foizdan katta yoki teng foiz ortishi (aniqlikdan 1,5 marta), (3) siydikning kamayishi chiqish (hujjatlangan oliguriya<0.5 ml/kg/h="" for="">6 h) agar kerak bo'lsa, etarli suyuqlik reanimatsiyasiga qaramay, (4) Scr ning 0 dan katta yoki unga teng mutlaq kamayishi, 3 mg/dL yoki 26,4 mkmol/L dan ortiq yoki unga teng (48- doirasida). h vaqt oynasi) mos yozuvlar Scr dan va (5) etti kun ichida 50 foizdan katta yoki teng bo'lgan Scr nisbiy kamayishi (ma'lumotnomadan 1,5 marta). Tadqiqotga vankomitsin ta'siridan keyin 2-bosqich yoki undan yuqori AKI bo'lgan bemorlar ro'yxatga olingan. Klinik ma'lumotlar, jumladan demografiya, kasallik tarixi, fizik tekshiruv natijalari, hayotiy belgilar, qon va siydik kimyosi, biopsiya natijalari va dori dozasi ma'lumotlari quyidagi vaqt nuqtalarida to'plangan: (1) kasalxonaga yotqizish, (2) vankomitsinni boshlash, ( 3) shikastlanishning cho'qqisi, (4) preparatni to'xtatish yoki dozani kamaytirish, (5) jarohatni bartaraf etish, (6) kasalxonadan chiqish, (7) jarohatdan keyin 28 kun va (8) 90 kun. Vankomitsinni dozalash epizodi doza yoki chastotaning o'zgarishi sifatida aniqlandi. O'tkir buyrak kasalligi (AKD) 1-bosqich OKI yoki undan yuqori bo'lgan ta'sirdan keyin 7 kundan ortiq yoki undan ko'proq davom etishi sifatida aniqlanadi [41]. Bemorlar AKD 1 yoki undan yuqori bosqichda davom etsa va kasalxonadan chiqish vaqti etti kundan ortiq bo'lsa, kasalxonadan bo'shatilganda AKD bilan toifalarga bo'lingan. Barcha ishtirokchilardan siydik va to'liq qon namunalari olindi. V-AKI ning barcha holatlari sababini aniqlash uchun ikkita mustaqil nefrolog (EM, JC, RL) tomonidan hal qilindi. Usullarning to'liq tavsifi ilgari e'lon qilingan [10].

4.2. Ekzosoma tayyorlash va proteomik ma'lumotlarni yig'ish

DIRECT tadqiqot ishtirokchilaridan siydik va qon namunalari to'plangan va namunalar eksozoma tayyorlashdan oldin -80 ◦C da muzlatilgan. Ushbu tahlilda ishlatiladigan siydik namunalari buyrak shikastlanishiga eng yaqin vaqt oralig'ida 24 dan 72 soatgacha bo'lgan vaqt oralig'ida tanlangan.buyrakjarohat. Rao va boshq.da ta'riflanganidek, polietilen glikol (PEG) qo'zg'atadigan yog'ingarchilikdan foydalangan holda, erituvchini istisno qilish printsipi asosida ishlab chiqilgan ichki protokol yordamida muzlatilgan AKI siydik namunalaridan ekzosomalar ajratildi. Yaqinda nashr etilgan [42] ekzosomal oqsillar sahifasi nazorat va-AKI siydik namunalari ekzosomalaridan 40 mkL oqsilni hal qilish uchun NuPAGE bisTris10 foizli akrilamid 12 quduqli jellar yordamida gel tripsinizizatsiyasidan oldin amalga oshirilgan.

Jel ekstraktlari 75 mM NaCl (Sigma, Sent-Luis, MO, AQSh), 3 foiz natriy dodesil sulfat (SDS, Fischer, Arnold AFB, Tullahoma, TN, AQSh), 1 mM NaF ni o'z ichiga olgan proteolizning oldini olish uchun bufer bilan birlashtirildi. (Sigma, Sent-Luis, MO, AQSh), 1 mM beta glitserofosfat (Sigma, Sent-Luis, MO, AQSh), 1 mM beta-gliserofosfat (Sigma, Sigma, Sent-Luis, MO, AQSh), 1 mM natriy orthovanadate (Sigma, Sent-Luis, MO, AQSH), 10 mM natriy pirofosfat (Sigma, Sent-Luis, MO, AQSH), 1 mM fenilmetilsulfonil ftorid (PMSF, Sigma) va 1 × Komple Mini EDTA bepul proteaz inhibitori tabletkalari hammasi 50 mM HEPES (Sigma, Sent-Luis, MO, AQSh), pH 8,5. Proteinlarni denatüratsiya qilish uchun 50 mM HEPES, pH 8,5 ga teng hajmdagi 8 M karbamid qo'shildi va 25 foiz amplituda ikki 10- oraliqdan foydalangan holda zond sonikatsiyasi amalga oshirildi. Proteinlar, avvalroq ta'riflanganidek, ditiotreitol va yodoasetamid yordamida kamaytirildi, alkillanadi va söndürülür [43]. Proteinlar muz ustidagi namunalarga trikloroatsetik kislotani (Sigma, Sent-Luis, MO, AQSh) qo'shib, oqsillarni 4 ◦C da sentrifugalash orqali cho'ktirildi. Protein pelletlari ikki marta muzli aseton bilan yuvilgan. Protein granulalari 56 ◦C da 30 daqiqa davomida quritilgan, so'ngra 50 mM HEPESda 1 M karbamidda qayta suspenziya qilingan, so'ngra xona haroratida 6 mkg LysC (Vako, Richmond, Virjiniya Hamdo'stligi, AQSh) bilan bir kechada hazm qilingan va keyin {{27} }h 37 ◦C da ketma-ketlik darajasi tripsin bilan hazm qilish (Promega, Fitchburg, WI, AQSh). Namunalar C18 Sep-Paks orqali tuzsizlantirildi va oqsillar miqdori aniqlandi [44]. Har bir namunada jami 1,0 ug protein suyuq xromatografiya-tandem massa spektrometriyasi (LC-MS [2]) yordamida Easy-nLC 1000 (Thermo Fischer Scientific, Waltham, MA, AQSH) da 85 daqiqalik suyuq xromatografiya gradienti yordamida tahlil qilindi. Orbitrap Fusion massa spektrometriga (Thermo Fischer Scientific) ulangan.

Xromatografiya uydan tortilgan va qadoqlangan 3{3}} sm kolonkada uch marta qadoqlangan 0.5 sm, 0.5 sm va 30 sm 5 mkm C4, 3 bilan oʻtkazildi. mkm C18 va 1,8 mkm C18 mos ravishda va 60 ◦C ga qadar isitiladi. Peptidlar dastlab 500 barda yuklangan, keyin 70 daqiqa davomida 6 dan 25% gacha bo'lgan atsetonitrilning xromatografiya gradienti, so'ngra 5-min gradienti 100% asetonitril bo'lib, 10 daqiqa ushlab turilgan. Elektrospray ionizatsiyasi analitik ustunni va Easy-nLC tizimini bog'laydigan zanglamaydigan po'latdan yasalgan T-birikmasi orqali 2000 V kuchlanishni qo'llash orqali amalga oshirildi. Har bir namunadan so'ng 15 daqiqa davomida 3 dan 100% gacha bo'lgan gradientdan boshlab, 100% asetonitrilda qo'shimcha 10 daqiqa bilan ikkita yuvish amalga oshirildi. Zaryad qilish massasi (m/z) diapazoni 375–1500 boʻlgan peptidlar skanerdan oʻtkazilib, zaryad holati 2–6 oraligʻida boʻlgan. Cho'qqilarni aniqlash uchun markazlashtirilgan ma'lumotlar ishlatilgan. Qabul qilish ma'lumotlarga bog'liq musbat ion rejimida amalga oshirildi. Xom spektrlar Proteome Discoverer Version 2.1 da peptid va noto‘g‘ri kashfiyotlarni nazorat qilish uchun foydalaniladigan teskari ma’lumotlar bazasi yondashuvi bilan bir qatorda Sequest algoritmi [18] yordamida Homo sapiens uchun ma’lumot bazasiga (www.uniprot.org (2017 yil 5 noyabrda kirilgan)) qarshi qidirildi. stavkalari (FDR) 1 foizgacha [17]. Silikon-tripsinda izlash parametrlarida ko'rsatilgandek, peptidning minimal uzunligi oltita aminokislotadan iborat. Qidiruv sozlamalari shuningdek, metioninlarning oksidlanishi uchun dinamik modifikatsiyani va sisteinlarning karbamidometilatsiyasining statik modifikatsiyasini o'z ichiga oladi. Prekursorning massa bardoshliligi 50 ppm va fragmentning massa bardoshliligi 0,6 Da ga o'rnatildi.

Spektral o'yinlar va oqsillarga qo'shimcha ravishda cheklangan<1% fdr,="" peptide="" matches="" were="" further="" screened="" to="" only="" include="" peptide="" spectral="" matches="" (psms)="" identified="" with="" high="" confidence.="" the="" summed="" abundance="" of="" the="" area="" under="" the="" curve="" of="" ms1="" peaks="" associated="" with="" psms="" was="" used="" to="" represent="" protein="" abundances.="" to="" help="" account="" for="" run-to-run="" variation="" in="" lc-ms2="" experiments,="" the="" raw="" protein="" abundances="" were="" next="" normalized="" by="" a="" two-step="" process.="" in="" the="" first="" step,="" protein="" abundances="" were="" divided="" by="" the="" average="" abundance="" of="" a="" given="" protein="" throughout="" the="" experiment="" divided="" by="" the="" median="" of="" the="" protein="" averages="" observed="" throughout="" the="" experiment.="" in="" the="" second="" step,="" the="" adjusted="" protein="" abundances="" were="" divided="" by="" the="" median="" protein="" abundances="" observed="" within="" their="" respective="" samples="" divided="" by="" the="" median="" protein="" abundance="" observed="" in="" the="" entire="" experiment.="" records="" of="" the="" normalization="" and="" analysis="" of="" proteomics="" data="" are="" available="" in="" a="" jupyter="" notebook="" form="" at="">

4.3. Proteomika ma'lumotlarini tahlil qilish

Proteomika ma'lumotlarini tahlil qilish yozuvlari Jupyter daftar formatida Github omboriga yuklandi (2021 yil 3 martda kirilgan). Prinsipial koordinatalar tahlili (PCoA) Qiime2 (versiya 2019-7) [45] yordamida amalga oshirildi. Vaqt xilma-xilligining asosiy o'lchovlari buyrug'i Bray-Kurtis metrikasi va PCoA yordamida vizualizatsiya yordamida namunalar orasidagi masofani hisoblash uchun ishlatilgan. Nazorat va V-AKI namunalari orasidagi masofalarning statistik tahlili "qiime xilma-xilligi beta-guruh ahamiyati" buyrug'i orqali juftlik PERMANOVA testi yordamida amalga oshirildi. Ushbu natijalarning syujetli vizualizatsiyasi dengizda tug'ilgan paket orqali yaratilgan (2021-yil 3-martda kirish mumkin). V-AKI holatlari va nazorat sub'ektlarining ikkilik taqqoslashlari teng bo'lmagan dispersiyaga ega mustaqil t-testi yordamida scipy paketi ((2021 yil 3 martda kirish) yordamida amalga oshirildi. Har bir oqsil va V-AKI holati o'rtasidagi bog'lanish kuchi p-qiymati ahamiyatini katlama o'zgarishi bilan birlashtirgan pi-qiymati ko'rsatkichi yordamida baholandi [12]. Yuqorida ta'riflanganidek [46] eng yuqori o'rinli, muhim assotsiatsiyalar pi-qiymati > |1|ga ega bo'lgan holda aniqlangan. V-AKI holatiga har bir oqsil assotsiatsiyasi vulqon syujetida yuqori oʻrindagi-10 oqsillarning joylashuvini yanada taʼkidlash uchun chizilgan. Gen to'plamini boyitish tahlili DAVID serveri [47] yordamida muhim oqsillarni (pi-qiymati > |1|) ma'lumotlar to'plamida aniqlangan barcha oqsillar foniga solishtirgan holda amalga oshirildi. Tegishli funktsional boyitishlar klasterlari S1 qo'shimcha jadvalida keltirilgan.

To test for a relationship between V-AKI-associated proteins and inflflammatory cytokines, a recently developed network-based cytokine inference approach was utilized [48]. Briefly, a list of cytokines (TGFb, TNF, IFN, IL1-40, CXCL1-16, CCL1-27) was submitted alongside signifificantly altered proteins (pi-value > |1|) to the STRING-db tool [49]. Connections between proteins were determined using all interaction sources and a minimum interaction score >0.4. Sitokinlar birinchi navbatda sezilarli darajada o'zgargan oqsillarga kamida beshta ulanishga ega bo'lishi uchun filtrlangan. Keyinchalik, har bir sitokin va V-AKI bilan bog'langan yoki nazorat bilan bog'langan oqsillar o'rtasidagi bog'lanishlar nisbati V-AKI yoki nazorat bilan bog'liq oqsillar o'rtasidagi umumiy ulanishlar soni bilan taqqoslandi. Har bir sitokinning boshqa oqsillar bilan bog'lanishlar sonidagi farqlarni hisobga olish uchun bu qiymat har bir sitokinning barcha sezilarli darajada o'zgargan oqsillar bilan bo'lgan ulanishlar soni bilan taqqoslandi. Tanlangan sitokinlar uchun boyitish ballari ularning V-AKI- yoki nazorat bilan bog'liq oqsillar bilan bog'liqligi uchun tuzilgan. Nihoyat, Cytoscape 3.5.1 [50] versiyasidan foydalangan holda V-AKI bilan bog'langan oqsillar va V-AKI bilan bog'langan oqsillar bilan boyitilgan aloqaga ega bo'lgan sitokinlarning aniq qidiruvi ularning o'zaro ta'siri uchun vizualizatsiya qilindi. Protein-oqsil o'zaro ta'sir tarmoqlari V-AKI bilan bog'liq bo'lgan har bir oqsilning o'lchamini ularning V-AKI holatiga pi-skor assotsiatsiyasiga ko'ra o'lchami bilan bezatilgan va yallig'lanishga qarshi yoki yallig'lanishga qarshi ta'sirga ega bo'lgan boyitilgan sitokinlar bilan bog'langan holda ranglangan.

ajdaho o'tlar cistanchedavolash mumkinbuyrak shikastlanishi

5. Xulosalar

Biz klinik jihatdan ko'rib chiqilgan holatlarda V-AKI uchun shikastlanish mexanizmini yaxshiroq tushunishga harakat qildik va qiziq tomoni shundaki, biz komplement, galektin{1}} bog'lovchi oqsil va fibrinogen V-AKI bilan sezilarli darajada bog'langanligini aniqladik. Oldingi va bizning tadqiqotlarimiz natijalari V-AKIda komplement tizimi va yallig'lanish yo'llarining rolini ko'rsatadi. Vankomitsin ta'sirida yuzaga keladigan zarardagi molekulyar jarayonlarni va undan keyingi tiklanish yo'llarini tasdiqlash uchun kattaroq tadqiqotlar talab qilinsa-da, natijalar siydik ekzosomalari patofizyologik mexanizmlar haqida muhim ma'lumotlarga hissa qo'shishi va dorilar tomonidan qo'zg'atilgan biomarkerlar bo'lib xizmat qilishi mumkinligini ko'rsatadi.buyrakjarohat.

Muallif hissalari:

Konseptualizatsiya, LA va SPR, metodologiya, SV, SPR, DJG, RM; dasturiy ta'minot, DJG, RHM, rasmiy tahlil, LA, AL, RHM; tergov, AL, JA, VJ, SB, MC-T., PN; yozish-asl qoralama tayyorlash, AL, JA, VJ, LA; yozish — ko‘rib chiqish va tahrirlash, RHM, DJG, MC-T., AT, AA, JC, MSJ, EM, RM, PN; nazorat, SV, SPR; loyiha boshqaruvi, LA; moliyalashtirish sotib olish, LA Barcha mualliflar qo'lyozmaning nashr etilgan versiyasini o'qib chiqdi va rozi bo'ldi.

Moliyalashtirish:

Ushbu tadqiqot Xalqaro jiddiy salbiy hodisalar konsorsiumi tomonidan moliyalashtirildi. MCT T32 Training Grant DK007202 tomonidan qo'llab-quvvatlandi.

Institutsional Tadqiq Kengashining bayonoti: Tadqiqot Xelsinki deklaratsiyasining ko'rsatmalariga muvofiq o'tkazildi va San-Diegodagi Kaliforniya universiteti Institutsional Tadqiq Kengashi (yoki Etika qo'mitasi) tomonidan tasdiqlangan (IRB # 121651).

Axborotlangan rozilik bayonoti: Tadqiqotda ishtirok etgan barcha sub'ektlardan xabardor qilingan rozilik olindi

Minnatdorchilik:

DIRECT tergovchilarining hissalarini tan olishni istaymiz: Dinna Kruz, Styuart Goldshteyn, Patrik Myurrey, Endryu Devenport, Endryu Lyuington, Devid Selevski, Maykl Zappitelli, Marlies Ostermann, Li Yang, Bhavna Pandya, Patrik Brofi, Daniela Ponse, Juli Steyn, Juli Steyn. Bouchard, Karlos Irarrazabal, Devid Askenazi, Nitin Kolhe, RolandoKlaure-Del Granado, Nadin Benador, Kler Kasledin, Jonatan Barratt, Sunil Bhandari, AlissaRayli, Ayse Akcan-Arikan, TK Devis, Kristofer Farmer, Mark Tomas, Fred Pang , Hansjoerg Rothe.

Manfaatlar to'qnashuvi:

Mualliflar manfaatlar to'qnashuvi yo'qligini e'lon qilmaydi.

Kimdan: "Siydik chiqarish ekzosomasi vankomitsin bilan bog'liq o'tkir buyrak shikastlanishida yallig'lanish yo'llarini aniqlaydi" Linda Avdishu

---Int. J. Mol. Sci. 2021 yil, 22, 2784 yil