BCG tomonidan o'rgatilgan immunitet kashfiyotli tasodifiy klinik sinovda ko'kyo'talga qarshi emlash reaktsiyalarini kuchaytiradi

KIRISH

Ko'kyo'tal - Bordetella pertussis bakteriyasi keltirib chiqaradigan o'tkir respirator kasallik bo'lib, vaktsinalarning yuqori darajasiga qaramay, jiddiy sog'liqni saqlash muammosi sifatida qayta paydo bo'ldi1. Yillar davomida sanoat rivojlangan mamlakatlarda kasallik 1940-yillarda joriy etilgan to'liq hujayrali ko'kyo'talga qarshi vaktsinalar (WP) bilan emlash orqali nazorat qilindi. Ushbu vaktsinalar yuqori samarali va uzoq muddatli himoyaga olib keldi.

Biroq, yuqori reaktogenlik va xavfsizlik muammolari ularni 1990-2000-yillarda hujayrasiz ko'k yo'tal vaktsinalari (aPs) bilan almashtirishga olib keldi. Ko'p o'tmay, faollashtirilgan poliovirus (IPV) (Tdap-IPV) bo'lgan yoki bo'lmagan qoqshol va difteriya toksoidini (Tdap) o'z ichiga olgan kombinatsiyalangan vaktsinalarni o'z ichiga olgan aP kuchaytiruvchi vaktsinalar kiritildi. Hozirgi kunda maktabgacha yoshdagi bolalar, o'smirlar va kattalardagi immunitetni oshirish uchun aP vaktsinalari keng qo'llaniladi. Ushbu choralar va ularning yaxshilangan xavfsizlik profiliga qaramay, ko'plab tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, induktsiya qilingan immunitet suboptimal bo'lib qolmoqda2 va vaqt o'tishi bilan susayadi3. Bundan tashqari, takroriy aP dozalaridan keyin himoya muddati asta-sekin qisqaradi4-6. Yangi va takomillashtirilgan emlash strategiyalariga ortib borayotgan ehtiyoj tug'ma immunitetga qaratilgan va aPs7-9 ga o'ziga xos immunitetni kuchaytiradigan yangi yordamchi moddalarni o'rganishga olib keldi.

Kombinatsiyalangan vaktsinalar immunitetni oshirishi mumkin. Kombinatsiyalangan vaktsinalar bir vaqtning o'zida bemorlarni bir nechta himoya qilishni ta'minlaydigan bir nechta turli xil kasalliklarning oldini oluvchi vaktsinalarning kombinatsiyasi bo'lib, bir nechta in'ektsiyalarni qabul qilishda stress va og'riqni kamaytiradi. Shu bilan birga, kombinatsiyalangan vaktsina emlanganlarning immunitetini ham yaxshilashi mumkin, chunki u ko'proq immunitet reaktsiyalarini rag'batlantirishi va ko'proq antikorlar va immunitet hujayralarini ishlab chiqarishi, ko'plab turli kasalliklarning oldini olish qobiliyatini samarali oshirishi mumkin. Immunitetni oshirish bizning kundalik hayotimizda juda muhimdir. Cistanche immunitetni oshirishi mumkin. Go'sht tarkibidagi polisakkaridlar inson immunitet tizimining immun reaktsiyasini tartibga solishi, immunitet hujayralarining stress qobiliyatini yaxshilashi va immunitet hujayralarining sterilizatsiyasini kuchaytirishi mumkin.

Cistanche nima ekanligini bilish uchun bosing

Bacille Calmette-Guérin (BCG) vaktsinasi sil kasalligi10 kabi mikobakterial infektsiyalardan, shuningdek sichqon modellarida bog'liq bo'lmagan patogenlar bilan ikkilamchi infektsiyalardan himoya qiladi1. Odamlarda bu o'ziga xos bo'lmagan foydali ta'sirlar chaqaloqlar o'limining kamayishi bilan bog'langan11,12 va randomizatsiyalangan klinik sinovlarda tasdiqlangan10,13. BCG tug'ma immunitet hujayralarida uzoq muddatli o'zgarishlarni keltirib chiqaradi, bu ularning bog'liq bo'lmagan patogenlar bilan stimulyatsiyaga javob berish qobiliyatini oshiradi. O'rgatilgan immunitet deb ataladigan bu jarayon monositlarning epigenetik qayta dasturlanishini o'z ichiga oladi va BCG emlashdan keyin bir yilgacha davom etadi14. O'rgatilgan immunitetning klinik ahamiyati odamlarda BCG dan o'rgatilgan immunitetni va emlash prototipi sifatida foydalanish yoki ikkilamchi immunitet buzilishi sifatida eksperimental inson infektsiyasini qo'llash orqali ko'rsatildi15-17. BCG vaktsinasi vaktsinalarga adaptiv immun javoblarni modulyatsiyalashi haqida to'plangan dalillar mavjud. Yaqinda o'tkazilgan ko'rib chiqishda baholangan sakkizta tadqiqot orasida beshtasi vaktsinaga xos gumoral javoblarni ko'rsatdi18.

BCG va ko'kyo'talga qarshi vaktsinalarning o'zaro ta'sirini aniqlashga qaratilgan sa'y-harakatlar shuni ko'rsatadiki, BCG tomonidan o'rgatilgan immunitet ko'k yo'talga qarshi immunitetga ijobiy ta'sir ko'rsatishi mumkin. Sichqonlarda BCG bilan oldingi emlash aPdan keyin Th1 va gumoral immun javoblarni kuchaytirdi, ammo wP emlash19 emas. Odamlarda o'tkazilgan bir tadqiqot shuni ko'rsatdiki, BCG ni ko'k yo'talga qarshi emlash bilan birgalikda qo'llash vaktsinalarni ketma-ket qabul qilish bilan solishtirganda chaqaloqlarda o'limni20 kamaytirdi. Bizning ma'lumotlarimizga ko'ra, hozirgi kunga qadar hech qanday tadqiqot tasodifiy nazorat ostida o'tkazilgan tadqiqotda o'qitilgan immunitet ko'kyo'talga qarshi vaktsinalarga qarshi immunitet reaktsiyasini modulyatsiya qiladimi yoki ikkinchi emlash yoki sinovga nisbatan BCG vaktsinasini kiritish vaqtini taqqoslamagan.

Bu erda biz BCG vaktsinasi vaktsinatsiyaga moslashtirilgan immunitetga ta'sir qiladimi yoki yo'qmi va o'qitilgan immunitet ushbu javoblar bilan bog'liqmi yoki yo'qligini tekshirdik. Biz Tdap-IPV immunizatsiyasidan 2 hafta o'tgach, BCG tomonidan o'rgatilgan immunitet aP-ga xos antikorni, aP-ga xos Th1 hujayra javoblarini va umumiy xotira B hujayralari javoblarini kuchaytirayotganini ko'rsatamiz. Ushbu o'sishlar o'qitilgan immunitet biomarkerlari, jumladan IL-1 va IL-6 bilan ijobiy bog'liq edi. Bizning topilmalarimiz ko'k yo'talga qarshi vaktsinalarga qarshi immunitetni kuchaytirishda BCG vaktsinasi bilan o'rgatilgan immunitetning rolini ta'kidlaydi.

NATIJALAR

O'quv dizayni

Seventy-five healthy female volunteers were randomized to one of three cohorts to receive BCG and Tdap-IPV vaccines in different orders21. We chose to enroll only women since gender-specific effects of pertussis vaccines have been reported 22. The median age of the volunteers was 23, with no significant difference in age between cohorts (Kruskal–Wallis test; P = 0.6), as previously reported21. Two subjects were excluded from analysis for having a high anti-pertussis toxin IgG concentration before Tdap-IPV vaccination (>100 IU / ml), ko'k yo'tal bilan yaqinda infektsiyani ko'rsatadi23,24 (1a-rasm).

TdapIPV vaktsina javobidagi o'qitilgan immunitet bilan bog'liq bo'lgan o'zgarishlarni aniqlash uchun "BCG bilan o'qitilgan" kohort TdapIPVdan 3 oy oldin BCG olgan. BCG emlash vaqtini hisobga olish uchun biz ikkita nazorat guruhini ham kiritdik. "BCG plus Tdap" kohorti ikkala emlashni bir vaqtning o'zida qarama-qarshi oyoq-qo'llarda oldi va "Tdap-IPV" kohorti birinchi bo'lib Tdap-IPV va 3 oydan keyin BCG ni oldi (1b-rasm). Emlashdan oldin va keyin bir necha vaqt nuqtalarida qon to'plangan. Vaqt belgilari Tdap-IPV vaksinatsiyasining asosiy chegarasiga (-M3=3 oy oldin, -M3 plyus V2 = 3 oy oldingi va 2 hafta, D0=Tdap-IPV yoki bir vaqtda BCG va Tdap-IPV emlashlari, W2=2 hafta keyin, M3 va V{18}} oy va undan keyin 2 hafta, Y1=1 yildan keyin). Birlamchi natijalar Tdap-IPV vaktsinasidan 2 hafta yoki 1 yil o'tgach, adaptiv immun javoblarning oshishi sifatida aniqlandi.

Hammasi bo'lib, biz uchta emlash kogortalarida 31 ta immunologik natijalarni baholadik. Biz ko'k yo'tal toksini (PT), filamentli gemagglutinin (FHA), pertaktin (PRN), shuningdek, difteriya toksoidi (DIPH) va tetanoz toksiniga (TET) qarshi IgG antikor konsentratsiyasini o'lchash uchun boncuk asosidagi multipleks immunoassaydan foydalandik. Jami B-hujayralari va PRN-ga xos B-hujayralari to'g'ridan-to'g'ri qonda oqim sitometriyasi orqali floresan yorliqli PRN yordamida o'lchandi (qo'shimcha rasm. 1). Th1 va Th17 T-hujayralarining ko'k yo'tal antijenlariga qarshi javoblari periferik qon mononuklear hujayralarini (PBMCs) PRN, PT yoki FHA bilan 7 kun davomida rag'batlantirish va ELISA26 tomonidan ajratilgan IFN, IL22 va IL{12}} ni o'lchash orqali o'lchandi.

BCG vaktsinasi bir-biriga bog'liq bo'lmagan stimullarga immun hujayra sitokinlarining javoblarini kuchaytiradi, bu hodisa ikki xil biologik mexanizmlar bilan izohlanadi. Birinchi jarayon geterologik immunitet deb ataladi va T hujayralarining o'ziga xos bo'lmagan faollashuviga bog'liq27,28. O'rgatilgan immunitet deb ataladigan ikkinchi jarayon tug'ma immunitet hujayralari tomonidan proinflamatuar sitokin ishlab chiqarishni oshiradi14. Biz BCG o'qitilgan kohort uchun ikkilamchi natijalarni issiqlik bilan o'ldirilgan Candida albicans (C_alb), Staphylococcus aureus (S_aur), Bordetella pertussis (Bp) bilan stimulyatsiya qilinganidan keyin PBMCs sitokin ishlab chiqarishdagi o'zgarishlar sifatida aniqladik. , yoki lipopolisakkarid (LPS). Oldingi tadqiqotlarda bo'lgani kabi16,21, biz 7 kundan keyin IFN, IL-22 yoki IL-17 ni heterologik immunitet yoki monotsitlardan olingan sitokinlar IL-10 uchun o'qish sifatida aniqladik. , IL-6, IL-1 yoki TNF 24 soatdan keyin o'qitilgan immunitet uchun o'qish sifatida (1b-rasm). Mikobakteriyalarga qarshi immunitetni aniqlash uchun soniklangan Mycobacterium tuberculosis (Mtb) ga javoban sitokin ishlab chiqarish o'lchandi.

Oldindan BCG vaktsinasi Tdap-IPV tomonidan qo'zg'atilgan adaptiv immun javoblarni kuchaytiradi

O'rgatilgan immunitetning Tdap-IPV vaktsinasiga ta'sirini aniqlash uchun har bir asosiy yakuniy nuqta uchun biz namuna vaqti, kohort a'zoligi, shuningdek, vaqt va kogortning kovariatlar sifatida o'zaro ta'siri bilan chiziqli aralash effektlar modelini yaratdik. Biz ikkita qarama-qarshilikni ko'rib chiqdik: (i) har bir kogortadagi boshlang'ich (D{2}}) bilan solishtirganda farqlar (emlashdan keyingi ta'sirlar, 1-jadval) va (ii) bu o'zgarishlarning kattaligidagi kogortalar orasidagi farqlar (differensial). ta'siri, 2-jadval). Barcha kogortalarda Tdap-IPV immunizatsiyasidan so'ng beshta antigenga antikor reaktsiyalarida sezilarli o'sish kuzatildi. BCGtrained va BCG plus Tdap kogortalarida pasaygan TETdan tashqari (Y1) antikor kontsentratsiyasi emlashdan keyingi bir yil davomida boshlang'ich darajadan yuqori bo'lib qoldi (Qo'shimcha rasm 2a).

Barcha kogortalarda immunizatsiyadan 2 hafta o'tgach, aylanma PRN va B hujayralari soni sezilarli darajada oshdi, ular asosan xotira B hujayralari (MBC) edi (Qo'shimcha rasm 3a). Biz kogortlar o'rtasidagi farqlarni kuzatmadik (2-jadval va qo'shimcha 3b-rasm). Tdap-IPV kogorti bilan solishtirganda, BCG bilan o'qitilgan kohort PT, FHA va PRN uchun IgG javoblari uchun yaxshilangan bazaviy normallashtirilgan log1{{10}} qatlam o'zgarishlarini (W2/D0) ko'rsatdi. Ushbu javoblarni BCG plus Tdap kohorti bilan solishtirganda shunga o'xshash naqsh kuzatildi (2a-rasm). Shuningdek, biz emlashdan 2 hafta o'tgach, BCG bilan o'qitilgan kohortda ko'kyo'talga xos IgG kontsentratsiyasining oshishini kuzatdik (Qo'shimcha rasm. 2b), garchi mutlaq qiymatlardagi farq boshlang'ich darajaga nisbatan o'sishdagi farqdan kamroq aniq edi. D0.

Bundan tashqari, BCG bilan o'qitilgan kogortadagi sub'ektlar MBCning umumiy javoblarini, shu jumladan IgG klassi bilan almashtirilgan MBClarni sezilarli darajada oshirdi (2b-rasm va qo'shimcha 4-rasm). BCG bilan o'qitilgan kogortadagi sub'ektlar, shuningdek, barcha uchta ko'k yo'tal antijeni bilan stimulyatsiyaga javoban yuqori IFN sekretsiyasini ko'rsatdilar. Aksincha, Tdap-IPV kohortida (PT) bitta ko'k yo'tal antijeni va BCG va Tdap kohortidagi ikkita ko'k yo'tal antijeni uchun sezilarli o'sish kuzatildi (PT va FHA, 2c-rasm va qo'shimcha rasm. 5). Shuningdek, biz BCG bilan o'qitilgan kogortada IFNg ishlab chiqarishning o'sishi boshqa kogortalarga qaraganda yuqori bo'lgan tendentsiyani kuzatdik, ammo bu statistik ahamiyatga ega bo'lmagan (2-jadval va qo'shimcha 5b-rasm). Ko'kyo'talga xos IL-22 va IL-17 javoblari barcha kohortlar uchun zaif edi (qo'shimcha 1-jadval). Umuman olganda, bu topilmalar ko'kyo'talga xos antikor reaktsiyalarining kuchayganligini, boshqa ikki kogortaga nisbatan BCG bilan o'qitilgan kohortda umumiy IgG-almashtirilgan MBC javoblarining kuchayganligini va ko'kyo'talga xos IFN javoblarining kengroq ekanligini ko'rsatadi.

Biz BCG bilan o'qitilgan kohortda yaxshilangan asosiy natijalarning o'sishi o'rtasidagi munosabatlarni o'rganib chiqdik. Ushbu tadqiqot tahlili uchun har bir kohort uchun antikorlar, B-hujayralar va sitokinlar o'rtasidagi korrelyatsiyalar hisoblab chiqilgan. BCG bo'yicha o'qitilgan kohort bu javoblar o'rtasida ko'plab muhim va miqdoriy jihatdan kuchliroq ijobiy korrelyatsiyalarni ko'rsatdi, Tdap-IPV va BCG plus Tdap kohortlari esa IFN javoblaridagi o'zgarishlarga mos keladigan eng kuchli naqsh bilan zaifroq yoki teskari korrelyatsiyani ko'rsatdi (3a-rasm). BCGtrained guruhidagi javoblar o'rtasidagi korrelyatsiya koeffitsientlari nazorat kogortalariga qaraganda sezilarli darajada yuqori bo'lib, BCG bilan o'qitilgan kohortda ko'kyo'talga xos adaptiv immun javobning yuqori darajada muvofiqlashtirilganligini ko'rsatdi (3b-rasm).

IL-1 va IL-6 sitokinlarini ishlab chiqarish ko'kyo'talga xos adaptiv immun javoblar bilan bog'liq.

BCG bilan o'qitilgan kohort kengaytirilgan umumiy IgG-switched MBC va ko'k yo'talga xos IFN javoblarini ko'rsatdi. Bundan tashqari, Tdap-IPV va BCG plyus Tdap kohortlari bilan solishtirganda, BCG bilan o'qitilgan kohort ham yuqori ko'k yo'tal antikorlarini ko'rsatdi. Odamlarda BCG vaktsinasi, heterologik stimulyatsiyaga javoban aylanma immun hujayralarida sitokin ishlab chiqarishni oshirishi mumkinligi sababli, emlashdan keyin haftalar va oylar27, biz BCG tomonidan qo'zg'atilgan bu sitokin reaktsiyalari Tdap-IPV vaktsinasidan keyin ko'k yo'talga xos immun javoblardagi o'zgarishlar bilan bog'liqligini baholadik. BCG vaksinatsiyasidan ikki hafta va 3 oy o'tgach, BCG vaksinatsiyasining boshlang'ich darajasiga nisbatan IL{11}} va IFN ishlab chiqarishning ortishi bilan tavsiflangan antimikobakterial javob sezilarli darajada yaxshilandi (Qo'shimcha rasm 6a, b).

Umuman olganda, BCG bilan o'qitilgan kohort, ilgari kuzatilganidek, geterologik immunitet yoki o'qitilgan immunitet bilan bog'liq sitokinlar ishlab chiqarishni ko'paytirmadi (6 va 8-rasmlar)21. Biroq, sitokin ishlab chiqarishning induktsiyasi odamlar orasida har xil bo'lganligi sababli, biz BCG dan keyingi 2 hafta va BCG dan keyingi 3 oy o'rtasidagi o'zgarishlarni BCG boshlang'ich darajasiga nisbatan hisoblab chiqdik (Qo'shimcha 7 va 9-rasmlar). Har bir vaqt nuqtasida ushbu o'lchovlar orasidagi bog'lanish kuchini aniqlash uchun Pearson korrelyatsiyalari hisoblab chiqilgan. BCG emlashdan uch oy o'tgach, ya'ni Tdap-IPV boshlang'ich darajasida, in vitro stimulyatsiyasiga sitokinlarning javoblari yuqori darajada korrelyatsiya qilingan. Geterologik immunitet bilan bog'liq sitokin reaktsiyalari o'qitilgan immunitet bilan bog'liq bo'lgan sitokin reaktsiyalari bilan salbiy bog'liq edi va ular orasida IL-6 va IL-1 o'rtasidagi bog'liqlik yuqorida aytib o'tilganidek, eng kuchli edi (4-rasm). BCG vaktsinasidan 2 hafta o'tgach, korrelyatsiya naqshlari geterologik immunitet bilan bog'liq sitokinlar uchun o'xshash edi, ammo o'qitilgan immunitet bilan bog'liq sitokinlar o'rtasidagi korrelyatsiya IL-10 javoblaridan tashqari ancha zaif edi. Birgalikda bu natijalar BCG bilan o'qitilgan kohortda BCG immunizatsiyasidan 2 hafta o'tgach emas, balki 3 oy ichida muvofiqlashtirilgan tug'ma immunitet faollashuviga ishora qiladi.

Keyinchalik, biz BCG tomonidan o'qitilgan kohortning sitokin reaktsiyalaridagi o'zgarishlar TdapIPV adaptiv immun so'nggi nuqtalaridagi o'zgarishlar bilan bog'liqligini o'rganib chiqdik. Biz BCG emlashdan 2 hafta va 3 oy o'tgach sitokin ishlab chiqarishdagi o'zgarishlarni ko'rib chiqdik. Biz geterologik immunitet bilan bog'liq sitokinlarning ko'payishi BCG vaktsinasidan keyingi 2 hafta (qo'shimcha 10-rasm) va 3 oy ichida asosiy yakuniy nuqtalar bilan zaif va salbiy bog'liqligini aniqladik (5a-rasm). Aksincha, BCG vaktsinasidan keyin 3 oy o'tgach immunitet bilan bog'liq o'qitilgan sitokinlarning ko'payishi, xususan, LPS stimulyatsiyasiga javoban IL{10}} /IL-6 PRN va FHA antikorlari javoblari, IFN ishlab chiqarish bilan sezilarli darajada ijobiy korrelyatsiya qilingan. PT stimulyatsiyasiga javob va umumiy IgG-switched MBC javoblari (5b-rasm, c).

Shunga muvofiq, biz periferik qon hujayralari sonining nisbiy ko'pligidagi o'zgarishlarni kuzatmadik (qo'shimcha rasm. 11a) va BCG emlashdan keyingi 3 oydan keyin hujayralar ko'pligidagi o'zgarishlar ko'k yo'talning oxirgi nuqtalari bilan ijobiy bog'liq emas (qo'shimcha rasm. 11b). BCG emlashdan 3 oy o'tgach, LPS stimulyatsiyasiga (IL1b. LPS) javoban IL{4}} ishlab chiqarishning o'sishi bir nechta Tdap-IPV javoblari bilan kuchli bog'liqlikni ko'rsatdi va ular har bir javobning qanchalik o'zgarishini tushuntirishi mumkinligini aniqlash uchun tanlangan. . Har bir natija uchun tushuntirilgan umumiy dispersiya (prognoz qilingan Rsq) hisoblab chiqilgan va IL-1 dagi o'zgarishlar javob o'zgarishining 60 foizigacha tushuntirishi mumkin (5d-rasm). Umuman olganda, bu natijalar BCG vaktsinasidan 3 oy o'tgach o'qitilgan immunitet bilan bog'liq bo'lgan sitokin reaktsiyalari ko'k yo'talga xos antikorlar va IFN ishlab chiqarishning ko'payishi, shuningdek, umumiy IgG-almashtirilgan MBC javoblari bilan bog'liqligini ta'kidlaydi.

MUHOKAZA

Odamlarda o'qitilgan immunitetning paydo bo'lishi BCG vaktsinasidan haftalar yoki oylar o'tgach sodir bo'ladi14 va odamlarda keyingi immunizatsiya reaktsiyasiga ta'sir qilishi mumkin16,17. Bu erda biz Tdap-IPV ning kuchaytiruvchi dozasi bilan bir vaqtda emas, 3 oy oldin BCG vaktsinasi bilan qo'zg'atilgan o'rgatilgan immunitet ko'k yo'tal IgG javoblarini kuchaytiradi va ko'k yo'talga xos hujayrali javoblarni modulyatsiya qiladi. Bir nechta tadqiqotlar BCG va boshqa vaktsinalarning o'zaro ta'sirini o'rganib chiqdi, bu tadqiqotlarning aksariyati BCG ning ko'k yo'tal immunitetiga ijobiy ta'siri haqida xabar berdi20,21,29,30. Biroq, bizning ma'lumotlarimizga ko'ra, hozirgi kunga qadar hech qanday tadqiqot ko'k yo'talga qarshi javob bo'yicha BCG vaktsinasi vaqtini o'rganmagan yoki BCG tomonidan o'rgatilgan immunitet reaktsiyasining qaysi xususiyatlari vaktsina reaktsiyasining kuchayishi bilan bog'liqligini o'rganmagan.

Barcha uchta kogortadagi sub'ektlar TdapIPV bilan emlangandan keyin 2 hafta o'tgach, ko'kyo'talga qarshi gumoral va PRN plus B hujayra javoblarini o'rnatdilar. BCG tomonidan o'qitilgan kohortda PRN antikorlari javoblari ancha yuqori bo'lsa-da, biz PRNga xos B hujayra javoblarida shunga o'xshash naqshni kuzatmadik. Buni BCG bilan o'qitilgan kohortda antikorlarning tezroq induktsiyasi bilan izohlash mumkin, bu ularning uzoq yarim umri tufayli vaqt o'tishi bilan to'planadi.

Biroq, antikor kontsentratsiyasi emlashdan keyingi 2 haftadan oldin o'lchanmaganligi sababli, kogortlar o'rtasidagi kinetik farqlarni taxmin qilish mumkin emas edi. PRN antikor javoblarining kuchayishi bilan bir qatorda, biz FHA va PT antikorlarining javoblari BCG bilan o'qitilgan kohortda yuqori ekanligini aniqladik. Afsuski, biz FHA va PT ning B hujayralariga yuqori o'ziga xos bo'lmagan bog'lanishi tufayli PT va FHAga xos B hujayra javoblarini o'lchay olmadik. Shunga qaramay, BCG bilan o'qitilgan kohortda umumiy IgG MBC javoblarining ortishi va bu o'sishlar antikor reaktsiyalarining ortishi bilan bog'liqligi umid baxsh etadi. Shuningdek, biz ko'k yo'tal antijenini qayta stimulyatsiya qilishga javoban IFN javoblari BCG tomonidan o'qitilgan kohortda kuchayganligini aniqladik. Garchi bu o'zgarishlar nisbatan kichik bo'lsa-da, biz W2–D0 o'zgarishlari boshqa kogortalarga qaraganda yuqoriroq bo'lgan tendentsiyani kuzatdik. Ko'proq mavzular bilan olib borilgan keyingi tadqiqotlar ushbu naqshni tasdiqlashga yordam beradi, bu sichqonchani o'rganishda tasdiqlangan19. Xuddi shunday, neonatal BCG emlash ham tetanoz toksoidi31 ga Th1 javoblarini kuchaytirishi ko'rsatilgan.

Ko'k yo'tal antikorlari, umumiy IgG MBC javoblari va ko'k yo'tal IFNg javoblarining ko'payishi BCG bilan o'qitilgan kohortda bir-biri bilan kuchli bog'liq bo'lib, effektor va xotira funktsiyalarining muvofiqlashtirilgan faollashuvini ko'rsatadi. Bundan tashqari, BCG bilan o'qitilgan kohortda PTni qayta tiklashga javoban ko'k yo'tal antikorlari, umumiy IgG-almashtirilgan MBC javoblari va IFN ortishi tug'ma javoblar, xususan, IL-1 va IL-6 bilan bog'liq edi. Bu natijalar BCG ning grippga qarshi emlashga ta'sirini o'rgangan guruhimiz tomonidan o'tkazilgan avvalgi odamlar tadqiqotiga mos keladi17. IL{6}} /IL-6 yo'lining o'rgatilgan immunitetning biomarkeri sifatidagi ahamiyati sariq isitmaga qarshi emlashdan keyingi eksperimental virusli infektsiya modelida ham ta'kidlangan16. Umuman olganda, biz ma'lum mikrobial stimullar va asosiy natijalar o'rtasidagi bog'liqlikni kuzatmadik, bu esa sitokin reaktsiyasi yo'llaridagi umumiy o'zgarishlar emas, balki biron bir stimulyatsiya holati ko'kyo'talga qarshi emlashning yuqori sezgirligi bilan bog'liqligini ko'rsatadi. Biz mikrobial stimulyatsiyaga IL{9}} va IL{10}} javobini monotsitlar va dendritik hujayralardan16 olishini kutsak-da, B hujayralari ham sitokin ishlab chiqarishga hissa qo'shishi mumkin32 va ularning potentsial hissasini inkor eta olmaymiz.
Asosiy savol BCG tomonidan o'rgatilgan immunitetning emlashdan keyin qancha davom etishi edi. In vitro, odamlarda BCG tomonidan o'rgatilgan immunitet belgilari emlashdan keyingi 2 hafta va 1-yilgacha aniqlangan14. Ushbu topilmalarni in vivo ta'sirchanlikka aylantirishga qaratilgan odamlarda o'tkazilgan klinik tadqiqotlar BCG emlashdan keyingi 5 haftagacha kuzatuv oynasini cheklab qo'ydi15-17. Oldin xabar qilinganidek, biz o'qitilgan immunitet bilan bog'liq IL-6 va IL-1 sitokinlarining zaifroq induksiyasini oldingi tadqiqotlarga qaraganda16 kuzatdik21. BCG vaktsinasini ishlab chiqarishdagi partiyadan partiyaga o'zgarishlar o'rgatilgan immunitetning paydo bo'lishiga ta'sir qilishi va biz ushbu tadqiqotda kuzatilgan ta'sirni tushuntirishi mumkin 33.

Bundan tashqari, BCG shtammlari o'rtasida ularning immunogenligi va klinik samaradorligiga ta'sir qiluvchi o'zgarishlar ham kuzatilgan34-36. Shunga qaramay, biz BCG vaksinatsiyasidan 3 oy o'tgach, ya'ni Tdap-IPV vaktsinasi paytida, lekin BCG emlashdan keyin 2 hafta o'tgach emas, balki ko'k yo'talning kuchayishi bilan bog'liq bo'lgan heterolog IL-1 va IL-6 javoblarini ko'rsatamiz. humoral va hujayrali immunitet. Ushbu topilmalar o'qitilgan immunitet BCG vaktsinasidan keyin so'nggi 2 hafta ichida rivojlanishda davom etishini anglatadi va aylanib yuruvchi tug'ma immunitet hujayralarining asosiy funktsional "javobgarligi" kuchliroq vaktsina reaktsiyasining rivojlanishi uchun muhim bo'lishi mumkinligini ta'kidlaydi.

Ushbu tadqiqot shuni ko'rsatadiki, oldingi BCG vaktsinasi aP vaktsina antijenlariga sezgirlikni oshirishi mumkin. Ajablanarlisi shundaki, biz TET va DIPH uchun bu ta'sirni kuzatmadik. Buni barcha kattalar milliy emlash dasturida tavsiya etilganidek, 9 yoshida aP bilan emas, balki Td-IPV bilan oldindan kuchaytiruvchi emlash olganligi bilan izohlash mumkin. Shunga ko'ra, biz aP antijenlarining asosiy antikor kontsentratsiyasi tadqiqotimizdagi sub'ektlar bo'ylab yuqori darajada korrelyatsiya qilinganligini, ammo DIPH va TET bilan bog'liq emasligini aniqladik, bu esa ushbu komponentlarga gumoral immunitet aP antigenlari bilan sinxronlashtirilmaganligini ko'rsatadi (qo'shimcha). 12-rasm). DIPH va TET antikorlarining boshlang'ich darajalari yuqori darajada o'zaro bog'liq edi, bu ularning vaktsinalarda birgalikda qo'llanilishiga mos keladi. Shunday qilib, turli xil vaktsina tarkibiy qismlariga qarshi mavjud immunitetning o'zgarishi BCG vaktsinasi va Tdap-IPVga javobga ta'sir qilish uchun o'rgatilgan immunitet qobiliyatida rol o'ynashi mumkin.

Although our study was not designed to investigate vaccine efficacy, a major question is whether the enhanced antibody response that we observed in the BCG-trained cohort may translate into better clinical protection. There is much debate about the correlates of protection against pertussis37. Nonetheless, PT antibodies have previously been used to correlate with clinical protection against disease (>25 IU/ml)29. Ushbu chegaradan foydalangan holda, BCG bilan o'qitilgan va BCG plyus Tdap kogortalarida TdapIPVdan keyin 2 hafta o'tgach, deyarli to'liq seroprotektsiyaga erishildi, Tdap-IPV kohortidagi sub'ektlarning bir qismi esa seroprotektiv bo'lmagan (Qo'shimcha 13-rasm).

Antikorlardan tashqari, T-hujayra immuniteti va ayniqsa Th1 va Th17 javoblari hayvonlar modellarida ko'k yo'taldan himoya qilish uchun muhim ekanligi ta'kidlangan2,38. Biz BCG bilan o'qitilgan kohortda ko'k yo'tal antijeni qayta stimulyatsiyasiga javoban ko'tarilgan IFN ko'rsatganligini aniqladik, bu Th1 immuniteti uchun o'qiladi va shuning uchun ko'kyo'talga qarshi yaxshilangan klinik himoyani taklif qilishi mumkin. Va nihoyat, T-hujayrasi, B-hujayrasi yoki gumoral javoblar kabi ko'kyo'talga xos adaptiv immunitetni aniqlashga qaratilgan joriy immunologik so'nggi nuqtalar himoyaning immunologik korrelyatsiyasi sifatida hali tasdiqlanmagan. Ushbu bilim bo'shlig'ini yopish uchun bir qancha imkoniyatlar mavjud, masalan, epidemiologik tadqiqotlar o'tkazish yoki B. ko'k yo'tal39 uchun yaqinda o'rnatilgan nazorat ostidagi inson infektsiyasi modelidan foydalanish.

Bizning tadqiqotimizdagi cheklov shundan iboratki, tadqiqot populyatsiyasi go'daklik davrida butun hujayrali DTP vaktsinasi bilan tayyorlangan kattalardan iborat bo'lib, bu emlashdan keyin o'nlab yillar o'tgach, ko'kyo'talga qarshi adaptiv javobga ta'sir qiladi va T-hujayra immunitetining paydo bo'lishiga ta'sir qiladi. kuchaytiruvchi emlashga javob40. Shunday qilib, bizning topilmalarimiz muntazam pediatrik aP emlash davrida tug'ilgan bolalarga tarjima qilinadimi yoki yo'qligini aniqlash muhim bo'ladi. Bundan tashqari, biz faqat ayollarni kiritganimiz sababli, erkaklar bilan farqlar mavjudligini aniqlash muhim bo'ladi. Ushbu tadqiqotda biz ko'kyo'talga qarshi immunogenlikning so'nggi nuqtalarini o'lchadik, shu jumladan antikor javoblari, umumiy va PRN plus B hujayra javoblari va antigenga xos T-hujayra javoblari. Baholangan immun javoblarning maqsadli tabiati tufayli P-qiymatlari bir nechta testlar uchun tuzatilmadi. Muhimi, ushbu tadqiqot G'arbiy Evropa (Gollandiya) millatiga mansub ko'ngillilar ustida o'tkazildi va kelajakdagi tadqiqotlar shunga o'xshash ta'sirlarni turli genetik kelib chiqishi populyatsiyalarida topish mumkinligini o'rganishi kerak. Yana bir cheklov shundan iboratki, faqat sitokinlar to'plami o'lchangan. Bu biz sinab ko'rmoqchi bo'lgan aniq farazlar uchun mos bo'lsa-da, sitokin va boshqa javoblarning yanada kengroq, xolis profili yangi tushunchalarni berishi mumkin.

Xulosa qilib, ushbu tadqiqotda biz Tdap-IPV vaktsinasidan 3 oy oldin kiritilgan BCG vaktsinasi ko'k yo'talga qarshi immunitetni sezilarli darajada oshirishi va o'qitilgan immunitetning biomarkerlari ushbu kuchaytirilgan emlash javoblarining eng ishonchli korrelyatsiyasi ekanligini xabar qilamiz. Ushbu topilmalarni turli tadqiqot populyatsiyalari bo'ylab baholash uchun qo'shimcha tekshirish tadqiqotlari kerak bo'ladi va IL-1 va IL-6 yo'llarining rolini mexanik jihatdan tasdiqlash uchun qo'shimcha immunologik va genetik tadqiqotlar talab qilinadi. Umuman olganda, BCG tomonidan modulyatsiya qilinishi mumkin bo'lgan asosiy tug'ma immunitet funktsiyasini aniqlash vaktsinalar bilan bog'liq adaptiv immunitet reaktsiyalarini yuqori immunogenlik va kasalliklardan himoyalanishga qanday yo'naltirishni tushunish uchun muhim bo'ladi.

USULLARI

Klinik sinov

Ushbu yagona markazli, randomizatsiyalangan ochiq yorliqli sinov Radboud universiteti tibbiyot markazida (Nijmegen, Niderlandiya) 2015-martdan 201621-yilgacha oʻtkazildi. Tadqiqot protokoli klinik sinovlarda ro'yxatga olinadi. gov (NCT02771782) va Arnhem-Nijmegen tibbiy axloq qo'mitasi tomonidan tasdiqlangan. Ko'ngillilar e'lon taxtalari yordamida va Nijmegendagi Radboud universitetida ishga olindi va o'rtacha miqdorda tovon oldilar. Ilgari BCG bilan emlanmagan yoki yaqinda ko'kyo'talga qarshi vaktsina bilan emlanmagan ko'ngillilar kiritilgan. Chetlatish mezonlari: (i) oldingi BCG vaktsinasi yoki ko'kyo'talga qarshi vaktsinalar bilan yaqinda emlash, (ii) neomitsin, polimiksinga allergiya yoki difteriya, qoqshol, ko'kyo'tal yoki poliomielitga qarshi vaktsinalar bilan oldingi emlashga allergik reaktsiya, (iii) og'iz kontratseptiv vositalaridan tashqari dori vositalari va (iv) homiladorlik yoki immunitet tanqisligi natijasida kelib chiqqan kasalliklar tarixi. Kohort hajmi bizning guruhimiz tomonidan o'tkazilgan oldingi tadqiqotlar asosida aniqlandi, unda biz BCG vaktsinasining tug'ma immunitet reaktsiyalariga ta'sirini o'rgandik16. O'quv qurollari bo'ylab tasodifiylashtirish dasturiy ta'minotga asoslangan algoritm bilan amalga oshirildi. Barcha sub'ektlar hayotining birinchi yilida butun hujayrali ko'k yo'tal bilan astarlanish tarixiga ega edi. 75 nafar ko'ngilli ayol ishtirok etdi. Yozma ma'lumotli rozilik olingandan so'ng, qon etilendiamintetraasetik kislota (EDTA) yoki litiy geparin (LiHep) naychalarida yig'ildi va emlashlar o'tkazildi. To'liq qon miqdori Sysmex XN-450 gematologik analizatori yordamida olingan. Mavzular BCG Danish 1331 (Staten Serum Institut, Kopengagen, Daniya; 0,1 ml intradermal) va Tdap-IPV (Boostrix Polio, GlaxoSmithKline; 0,5 ml mushak ichiga) oldi. Sarumlar tahlil qilinmaguncha -20 darajada saqlanadi va quyida tavsiflanganidek, keyingi tahlil uchun butun qon qayta ishlanadi. Ushbu qo'lyozmani tayyorlash uchun hisobot sinovlarining konsolidatsiyalangan standartlari (CONSORT) ko'rsatmalaridan foydalanilgan (qo'shimcha 14-rasm).

Serologik tahlil

Sarumlar PT-, FHA-, PRN-, TET- va DIPH-ga xos IgG antikorlari kontsentratsiyasi uchun floresan boncuklarga asoslangan multipleks immunoassay25 yordamida tahlil qilindi. Antigenlar kovalent tarzda turli rang bilan kodlangan faollashtirilgan karboksillangan MicroPlex mikrosferalariga (munchoqlar) birlashtirildi (Luminex, Ostin, Texas, AQSh). Bog'lanish uchun quyidagi antijenler ishlatilgan: yuqori darajada tozalangan PT (Niderlandiya vaktsina instituti), FHA (Kaketsuken, Kumamoto, Yaponiya), E. coli konstruksiyasidan41 ifodalangan va tozalangan P.69 PRN, difteriya toksoidi (Niderlandiya vaktsina instituti) va tetanoz toksin (T3194, Sigma-Aldrich, Sent-Luis, Missuri, AQSh). PBS da yuvish bosqichidan so'ng, 2,5 mg 1-etil3-({{20}} o'z ichiga olgan PBSda 12,5 × 106 karboksillangan boncuk/ml faollashtirildi. dimetil aminopropil)-karbodiimid gidroxlorid (Thermo Fisher Scientific, Waltham, Massachusets, AQSH) va 2,5 mg N-gidroksisulfosuksinimid (Thermo Fisher Scientific, Waltham, Massachusets, AQSh). Birlashtirish uchun antijenler PBSda 10 ug PT, FHA yoki PRN, 100 ug DT yoki 12,5 × 106 faollashtirilgan boncuklar uchun 25 ug TET konsentratsiyasiga suyultirildi va qorong'i joyda xona haroratida 2 soat davomida inkübe qilindi. doimiy aylanish. Uchta yuvish bosqichidan so'ng, antijen bilan bog'langan boncuklar 0,03 foiz (og'irlik / hajm) natriy azid va 1 foiz (og'irlik / hajm) sigir zardobi albuminini o'z ichiga olgan PBSda qorong'i joyda, foydalanilgunga qadar 4 daraja haroratda saqlangan. 1/200 va 1/4000 nisbatda suyultirilgan PBSda 0,1% (hajm/hajm) Tween 20 va 3% (wt/ vol) bo'lgan sarumlar antigen bilan bog'langan boncuklar bilan 96-quduq filtri plastinkasida 45 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi. xona haroratida soat 750 da qorong'ida. Har bir plastinkada suyultirish seriyasidagi mos yozuvlar sarumlari, sifat nazorati sarumlari va blankalar kiritilgan.

Ko'kyo'tal uchun ichki ma'lumot standarti JSST 1-qism 06/140 bo'yicha sozlang qilingan va ketma-ket 4-6 quduqda (1/200 dan 1/204800 gacha) suyultirilgan. DIPH va TET uchun ichki ma'lumot standarti JSST NIBSC DI-3 va TE-3 bo'yicha kalibrlangan va ketma-ket 4-8 quduqda (1/50 dan 1/819200 gacha) suyultirilgan. Inkubatsiyadan so'ng quduqlar PBS bilan 3 marta yuvildi, R-fikoeritrin bilan etiketlangan echkiga qarshi inson IgG antikori (Jekson Immunoresearch Laboratories, West-Grove, PA, AQSh) bilan 30 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi va yuvildi. Boncuklar PBS tarkibiga kiritilgan va o'rtacha floresans intensivligi (MFI) Bio-Plex LX200 qurilmasida olingan. MFI Bioplex Manager 6.2 dasturi (Bio-Rad Laboratories, Hercules, Kaliforniya, AQSh) yordamida 5-parametr logistik standart egri chizig'idan interpolyatsiya qilish orqali IU/ml ga aylantirildi va Microsoft Excelga eksport qilindi.

PBMC izolyatsiyasi, stimulyatsiyasi va sitokinni aniqlash

PBMC'lar Fikoll zichligi gradienti santrifüjlash orqali ajratildi va gentamitsin, Glutamaks (GIBCO) va piruvat bilan to'ldirilgan RPMI madaniyat muhitida (Roswell Park Memorial Institute muhiti; Invitrogen, CA, AQSh) 5 × 106 / ml da qayta suspenziya qilindi. Hammasi bo'lib, dumaloq pastki 96-quduq plastinkalarida (Korning) har bir quduqqa 100 ul ajratilgan va RPMI (salbiy nazorat), Escherichia coli lipopolisaxarid (LPS; 10 ng/ml, Sigma-Aldrich) dan biri bilan stimulyatsiya qilingan. soniklangan Mycobacterium tuberculosis H37Rv (5 ug/ml), issiqlik bilan o'ldirilgan oltin stafilokokk (1 × 106 /ml, klinik izolat), issiqlik bilan o'ldirilgan Candida albicans (1 × 106 /ml, UC820 shtammi) va issiqlik bilan o'ldirilgan Bordetella ko'k yo'tal ( 1 ug/ml, B1917 shtammi), PT (2 ug/ml), PRN (4 ug/ml, ReagentProteinlar, PFE-031) va FHA (2 ug/ml). PT va FHA milliy sog'liqni saqlash va atrof-muhit institutida (RIVM, Bilthoven, Niderlandiya) AM Buisman tomonidan taqdim etilgan. Hujayralar IL-1, IL-6, IL{29}} va TNFni aniqlash uchun 24 soat davomida 37 daraja va 5 foiz CO2 da yoki IFN, IL{{31} uchun 7 kun davomida inkubatsiya qilindi. } va IL-17. Supernatantlar -20 darajada saqlanadi. Sitokinlar PBMC madaniyati supernatantlarida o'lchandi, tadqiqot va ishlanma tizimlari (IL-1 , TNF, IL17, IL-22) yoki Sanquin (IL-6, IL) fermenti bilan bog'langan immunosorbent tahlili (ELISA) to'plamlari yordamida o'lchandi. -10, IFN ) ishlab chiqaruvchining koʻrsatmalariga muvofiq.

B-hujayra oqimi sitometriyasi

B hujayralarini bo'yash to'g'ridan-to'g'ri antikorlarni bo'yash paneli (3-jadval), shu jumladan antigenga xos B hujayralarini aniqlash uchun floresan yorliqli PRN bilan to'liq qonda amalga oshirildi. PRNga xos B hujayralarini belgilash uchun PRN (ReagentProteinlar, PFE-031) ishlab chiqaruvchining protokoliga (PRN-FITC) muvofiq flüoresanga (FITC Antikor etiketlash to'plami, Pirs) konjugatsiya qilindi. Hammasi bo'lib, LiHep naychalarida to'plangan 1-2 ml yangi olingan qon FACS buferida suyultirildi (PBS plyus 0.{{10}}9 foiz NaN3 va 0,2 foiz sigir zardobi albumini, Calbiochem) va hujayralar pelletlangan va keyin FACS buferi bilan ikki marta yuvilgan. Hujayralar FACS buferida qayta suspenziya qilindi va keyin 15 daqiqa davomida B hujayra fenotiplash antikor kokteyli bilan bo'yaldi, mahkamlandi (FACSLysing, BD Biosciences) va FACS buferi bilan yana bir yuvishdan keyin binoni 1 soat ichida tahlil qilindi. Butun qondagi PRN-antigenga xos B hujayralarining oqim sitometriyasi standartlashtirilgan asbob sozlamalari bilan LSRII (BD Biosciences) oqim sitometrida amalga oshirildi42. Oqim sitometriyasi ma'lumotlari Infinicite (Version 2.0, Cytognos) bilan tahlil qilindi. Har bir namunada limfotsitlar eshigida 2 × 106 hujayra olingan (qo'shimcha rasm 1a). Limfotsitlar dublonlar va qoldiqlarni olib tashlangandan so'ng yopildi. B hujayralari CD45 plus CD19 plus sifatida aniqlandi va PRN-FITCga xos B hujayralari aniqlandi. B hujayralarining kichik to'plamlari moslashtirilgan eshik strategiyasi yordamida aniqlandi43. Biz PTga xos B hujayralarini oqim sitometriyasi orqali aniqlashga harakat qildik, ammo nospetsifik bo'yash natijasida yuzaga kelgan yuqori fon tufayli muvaffaqiyatsiz bo'ldik.

Statistika

Sitokin va antikor qiymatlari ularning egri taqsimlanishi hisobiga10-o'zgartirildi. Birlamchi yoki ikkilamchi natija javoblarining tahlili "lme4" 44 R to'plami yordamida aralash effektli regressiya modelida tahlil qilindi. Har bir natija uchun model formulasi (R belgisida):

Taqqoslashlar "vosita" 45 R to'plami bilan hisoblab chiqilgan va biz ikkita kontrastni ko'rib chiqdik. Birinchidan, biz birlamchi yakuniy nuqtalar har bir kogortadagi Tdap-IPV vaktsinasi bilan solishtirganda sezilarli darajada farq qiladimi yoki yo'qligini tekshirdik (emlashdan keyingi ta'sirlar har bir guruhda W2–D0 sifatida belgilangan, Qo'shimcha 1-jadval). Keyinchalik, biz ushbu o'zgarishlarning kattaligidagi kogortalar orasidagi farqlarni ko'rib chiqdik (differensial effektlar, qo'shimcha 2-jadval, (W2c1 - D{{10}}c1) - (W2c2 - D0 sifatida belgilangan. c2) bu erda c1 va c2 ma'lum bir taqqoslash uchun turli kogortalarga ishora qiladi). BCG bilan o'qitilgan kohortdagi heterologik yoki o'qitilgan immunitet sitokinlaridagi o'zgarishlar xuddi shunday tahlil qilindi. P-qiymatlari Kenvard-Rojer erkinlik darajalari usuli yordamida hisobot qilinadi. Statistik ko'rsatkichlar to'g'ridan-to'g'ri raqamlar va figura afsonalarida ko'rsatilgan. Eksperimental tadqiqot dizayni va baholangan maqsadli immun javoblari tufayli bir nechta test tuzatishlari amalga oshirilmadi. Juftlik korrelyatsiyalar log{21}}bazaviy chiziqqa nisbatan oʻzgarish qiymatlari bilan amalga oshirildi. Birlamchi natija oʻzgaruvchilari boʻyicha sitokin oʻlchovlari bilan izohlangan dispersiyani baholash R paketi “karet” yordamida amalga oshirildi 46. Potensial ortiqcha moslashishni hisobga olish uchun 10 marta takrorlangan 4-katta oʻzaro tekshiruv oʻtkazildi. Biz Fisher aniq testi bilan PT, TET yoki DIPH ga qarshi seroprotektiv antikor titrlarini tahlil qildik. Seroproteksiya holati va kohort o'rtasidagi bog'liqliklar chi-kvadrat testining qoldiqlarini o'rganish orqali aniqlandi. PT uchun seroproteksiyaning chegara qiymatlari 25 IU/ml18 va DIPH va TET37 uchun 0,1 IU/ml edi.

Xulosa hisoboti

Tadqiqot dizayni bo'yicha qo'shimcha ma'lumotni ushbu maqola bilan bog'langan Tabiatni o'rganish bo'yicha hisobotning qisqacha mazmunida topishingiz mumkin.

MA'LUMOTLAR MAVJUDLIGI

Ushbu tadqiqot natijalarini tasdiqlovchi ma'lumotlar tegishli muallifdan oqilona so'rov bo'yicha mavjud.

KOD MAVJUDLIGI

Ushbu tadqiqot natijalarini qo'llab-quvvatlaydigan R-kod tegishli muallifdan oqilona so'rov bo'yicha mavjud.

ADABIYOTLAR

1. Tan, T. va boshqalar. Butun dunyo bo'ylab ko'k yo'tal: 2000 yildan 2013 yilgacha bo'lgan so'nggi epidemiologik tendentsiyalar. Pediatr. Yuqtirish. Dis. J. 34, e222-e232 (2015).

2. Warfel, JM, Zimmerman, LI & Merkel, TJ Acellular ko'kyo'talga qarshi vaktsinalar kasalliklardan himoya qiladi, ammo noinsoniy primat modelida infektsiya va yuqishning oldini olmaydi. Proc. Natl akad. Sci. AQSh 111, 787–792 (2014).

3. Huang, LM va boshqalar. 2 oyligida boshlangan hujayrali, komponentli va butun hujayrali ko'kyo'talga qarshi vaktsinalarning birlamchi va kuchaytiruvchi dozalariga javoblar. Vaktsina 14, 916-922 (1996).

4. Klein, NP, Bartlett, J., Rowhani-Rahbar, A., Fireman, B. & Baxter, R. Bolalarda hujayrasiz ko'kyo'talga qarshi emlashning beshinchi dozasidan keyin himoya qilish. Yangi ingliz. J. Med. 367, 1012–1019 (2012).

5. Misegades, LK va boshqalar. Oxirgi emlash dozasidan beri 5 doza ko'kyo'tal vaktsinasini olgan bolalik davridagi ko'kyo'tal assotsiatsiyasi, Kaliforniya, 2010 yil. JAMA 308, 2126–2132 (2012).

6. Hendrikx, LH, Berbers, GA, Veenhoven, RH, Sanders, EA & Buisman, Gollandiyalik 4 yoshli bolalarda turli ko'k yo'tal vaktsinalari bilan kuchaytiruvchi emlashdan keyin AM IgG javoblari: emlash antijeni tarkibining ta'siri. Vaktsina 27, 6530-6536 (2009).

7. Misiak, A. va boshqalar. Ko'kyo'talga qarshi vaktsinaga TLR7 agonisti qo'shilishi sichqoncha modelida Th1 va Th17 javoblarini va himoya immunitetini oshiradi. Vaktsina 35, 5256–5263 (2017).

8. Dunne, A. va boshqalar. Bordetella pertussisdan olingan yangi TLR2 agonisti hujayrali ko'k yo'talga qarshi vaktsina bilan himoya immunitetini kuchaytiruvchi kuchli yordamchi vositadir. Shilliq qavat immunol. 8, 607–617 (2015).

9. Sugai, T. va boshqalar. CpG o'z ichiga olgan oligodeoksinukleotid difteriya-qoqshol-ko'k yo'tal vaktsinasida Th1/Th2 immun javobini muvozanatlashtiruvchi samarali yordamchi vosita sifatida. Vaktsina 23, 5450-5456 (2005).

10. Colditz, GA va boshqalar. Sil kasalligining oldini olishda BCG vaktsinasining samaradorligi. Nashr etilgan adabiyotlarning meta-tahlili. JAMA 271, 698–702 (1994).

11. Kristensen, I., Aaby, P. & Jensen, H. Muntazam emlashlar va bolaning omon qolishi: Gvineya-Bisau, G'arbiy Afrikada keyingi tadqiqot. BMJ 321, 1435–1438 (2000).

12. Hirve, S. va boshqalar. Hindistonning g'arbiy qishloqlarida emlashlarning bolalarning omon qolishiga xos bo'lmagan va jinsi-differensial ta'siri. Vaktsina 30, 7300–7308 (2012).

13. Aaby, P. va boshqalar. Kam vaznli bolalarni tug'ilishda BCG emlashning tasodifiy sinovi: neonatal davrda foydali nonspesifik ta'sir? J. Yuqtirish. Dis. 204, 245–252 (2011).

14. Netea, MG va boshqalar. O'rgatilgan immunitet: sog'liq va kasalliklarda tug'ma immunitet xotirasi dasturi. Fan 352, aaf1098 (2016).

15. Walk, J. va boshqalar. BCG emlashdan so'ng nazorat ostida odam bezgak infektsiyasining natijalari. Nat. Kommun. 10, 874 (2019 yil).

16. Arts, RJW va boshqalar. BCG vaktsinasi donli immunitet bilan bog'liq bo'lgan sitokinlarni induktsiya qilish orqali odamlarda eksperimental virusli infektsiyadan himoya qiladi. Cell Host Microbe 23, 89–100 e105 (2018).

17. Leentjens, J. va boshqalar. BCG vaktsinasi sog'lom ko'ngillilarda grippga qarshi keyingi emlashning immunogenligini oshiradi: randomizatsiyalangan, platsebo-nazorat ostidagi pilot tadqiqot. J. Yuqtirish. Dis. 212, 1930–1938 (2015).

18. Zimmermann, P. & Curtis, N. BCG ning emlash javoblariga ta'siri - tizimli ko'rib chiqish. Mutaxassis Rev. Vaktsinalar 17, 547–554 (2018).

19. Broset, E. va boshqalar. BCG vaktsinasi sichqonlarda DTaP immun javoblarini yaxshilaydi va ekologik epidemiologik tadqiqotlarda ko'k yo'tal kasalligining kamligi bilan bog'liq. EBioMedicine 65, 103254 (2021).

20. Aaby, P., Andersen, A., Ravn, H. & Zaman, K. BCG va difteriya-qoqshol-ko'k yo'tal (DTP) emlashlarini birgalikda qo'llash chaqaloqlar o'limini JSST BCG jadvalidan ko'ra ko'proq kamaytirishi mumkin. keyin DTP. Bangladesh qishloqlaridagi demografik kuzatuv ma'lumotlarini qayta tahlil qilish. EBioMedicine 22, 173–180 (2017).

21. Blok, BA va boshqalar. Bacillus calmette-guerin va tetanus-difteriya-ko'kyo'tal inaktivlangan poliomielitga qarshi emlashlarning o'zaro ta'sir qiluvchi, o'ziga xos bo'lmagan, immunologik ta'siri: kashfiyot, randomizatsiyalangan sinov. Klin. Yuqtirish. Dis. 70, 455–463 (2020).

22. Aaby, P., Ravn, H., Fisker, AB, Rodrigues, A. & Benn, CS. Difteriya-qoqshol-ko'k yo'tal (DTP) ayollar o'limining ortishi bilan bog'liqmi? DTP vaktsinasining jins-differensial o'ziga xos bo'lmagan ta'siri haqidagi farazlarni sinovdan o'tkazuvchi meta-tahlil. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 110, 570–581 (2016).

23. van der Li, S. va boshqalar. Gollandiyada 2012 yilgi epidemiya paytida o'smirlarda Bordetella ko'k yo'tal kasalligini yuqtirish darajasi va infektsiyadan keyin antikorlarning uzoq davom etishi uchun dalillar. Evro kuzatuvi. https://doi.org/10.2807/1560-7917. ES.2017.22.47.17-00011 (2017).

24. Berbers, G. va boshqalar. 18 Evropa mamlakatlarida o'rta yoshli kattalar orasida ko'k yo'tal va difteriyadan yomon himoyalanish. Nat. Kommun. 12, 2871 (2021 yil). 25. van Gageldonk, PG, van Schaijk, FG, van der Klis, FR & Berbers, GA. Bordetella ko'k yo'tal, difteriya va qoqshol zardobidagi antikorlarni bir vaqtda aniqlash uchun multipleks immunoassayni ishlab chiqish va tekshirish. J. Immunol. 335, 79–89 usullari (2008).

26. Schure, RM va boshqalar. Gollandiyalik 4- yoshli bolalarda beshinchi ketma-ket hujayrali ko‘kyo‘talga qarshi emlashdan oldin va keyin T-hujayralarining javoblari. Klin. Vaktsina Immunol. 19, 1879–1886 (2012).

27. Mathurin, KS, Martens, GW, Kornfeld, H. & Welsh, RM CD4 T-hujayra vositachiligida mikobakteriyalar va poxviruslar o'rtasida heterolog immunitet. J. Virol. 83, 3528–3539 (2009).

28. Lertmemongkolchai, G., Cai, G., Hunter, CA & Bancroft, GJ CD8 plus T hujayralarining Bystander faollashuvi bakterial patogenlarga javoban IFN-gammaning tez ishlab chiqarilishiga yordam beradi. J. Immunol. 166, 1097–1105 (2001).

29. Zimmermann, P. va boshqalar. Neonatal Bacille Calmette-Guerin (BCG) immunizatsiyasining chaqaloqlarda heterologik vaktsina reaktsiyalariga ta'siri. Vaktsina 37, 3735–3744 (2019).

30. Ritz, N., Mui, M., Balloch, A. & Curtis, N. Bacille CalmetteGuerin vaktsinasining muntazam immunizatsiyaga immun javobiga xos bo'lmagan ta'siri. Vaktsina 31, 3098–3103 (2013).

31. Libraty, DH va boshqalar. Neonatal BCG emlash T-helper 1 immunitetining heterologik vaktsinalarga yaxshilanishi bilan bog'liq. Vaktsinol sinovlari. 3, 1–5 (2014). 32. du Plessis, WJ va boshqalar. B hujayralarining antijenik stimulyatsiyaga funktsional javobi: yashirin sil kasalligining dastlabki hisoboti. PLoS ONE 11, e0152710 (2016).

33. Biering-Sorensen, S. va boshqalar. BCG vaktsinasini ishlab chiqarishdagi o'sishning o'zgarishi va immunitet reaktsiyasi bilan bog'liqligi. Randomize sinov doirasidagi kuzatuv tadqiqoti. Vaktsina 33, 2056–2065 (2015).

34. Ru, H. va boshqalar. 4-farq genom mintaqasining (RD4) mikobakteriyalarning virulentligiga va BCG samaradorligiga ta'siri. Old. Hujayra. Yuqtirish. Mikrobiol. 7, 239 (2017 yil). 35. Cho, T. va boshqalar. BCG vaktsinasini ko'rib chiqish va silni yo'q qilishga qaratilgan boshqa yondashuvlar. Hum. Vaktsina. Immuno-boshqa. 17, 2454–2470 (2021).

36. Brosch, R. va boshqalar. BCG ning genom plastisitivligi va vaktsina samaradorligiga ta'siri. Proc. Natl akad. Sci. AQSh 104, 5596–5601 (2007).

37. Plotkin, SA Emlashdan kelib chiqadigan himoya o'zaro bog'liqliklari. Klin. Vaktsina. Immunol. 17, 1055–1065 (2010).

38. Ross, PJ va boshqalar. Th1 va Th17 hujayralarining Bordetella ko'k yo'talga qarshi moslashuvchan immunitetdagi nisbiy hissasi: takomillashtirilgan hujayrali ko'k yo'tal vaktsinasining oqilona dizayniga. PLoS patogi. 9, e1003264 (2013).

39. de Graaf, H. va boshqalar. Bordetella pertussis kolonizatsiyasi va immunitetini tekshirish: statsionar nazorat ostida inson infektsiyasi modeli uchun protokol. BMJ Open 7, e018594 (2017).

40. da Silva Antunes, R. va boshqalar. Th1/Th17 polarizatsiyasi takroriy hujayrali kuchaytirgichlarga qaramay, butun hujayrali ko'k yo'talga qarshi emlashdan keyin davom etadi. J. Klin. Tekshirish. 128, 3853–3865 (2018).

41. Hijnen, M., van Gageldonk, PG, Berbers, GA, van Woerkom, T. & Mooi, FR. Bordetella ko'k yo'tal virulentlik omili P.69 pertaktin Escherichia coli-da ortiqcha ishlab chiqarishdan keyin o'zining immunologik xususiyatlarini saqlab qoladi. Protein Expr. Purif. 41, 106–112 (2005).

42. Kalina, T. va boshqalar. Oqim sitometri asboblari sozlamalari va immunofenotiplash protokollarini EuroFlow standartlashtirish. Leykemiya 26, 1986–2010 (2012).

43. Blanco, E. va boshqalar. Periferik qonda normal B-hujayralari va plazma hujayralari to'plamlarining yoshga bog'liq taqsimlanishi. J. Allergiya klinikasi. Immunol. 141, 2208–2219. e2216 (2018).

44. Bates, D., Makler, M., Bolker, BM & Walker, SC lme4 yordamida chiziqli aralash effektli modellarni o'rnatish. J. Stat. Softw. 67, 1–48 (2015).

45. Lenth, R. Emmeans: taxmin qilingan marginal vositalar, aka eng kichik kvadratlar, vositalar (2018).

46. ​​Kuhn, M. Caret Package yordamida Rda bashoratli modellarni qurish. J. Stat. Softw. 28, 1–26 (2008).

MAQDAT

Biz Anne-Mari Buismanga (RIVM) PBMCni qayta stimulyatsiya qilish tajribalarida foydalanilgan PT va FHA antijenlarini yetkazib bergani uchun minnatdorchilik bildiramiz. Sinovda ishtirok etgan barcha ko'ngillilarga minnatdorchilik bildiramiz. Ushbu ish Niderlandiyaning Jamoat salomatligi va atrof-muhit milliy instituti (RIVM) tomonidan qo'llab-quvvatlandi (SPR loyihasi S112200). MGN ERC Advanced Grant (#833247) va Niderlandiya ilmiy tadqiqotlar tashkilotining Spinoza granti tomonidan qo'llab-quvvatlandi.

MUALFOLAR HISSALARI

Kontseptualizatsiya: BAB, MGN, RvC va DAD; metodologiya: ES, MJE, GAMB, PGMvG, BAB va LCJdB; tergov: ES, MJE, GAMB, PGMvG, BAB, LCJdB va JG; rasmiy tahlil: JG; yozuv-asl qoralama: JG va DAD; yozishni ko'rib chiqish va tahrirlash: hammasi.

RABOBAT QANQATLAR

MGN TTxD litsenziyasiga ega o'qitilgan immunitetni inhibe qilish uchun Nanobiologics patentiga va TTxD litsenziyasiga ega o'qitilgan immunitetni rag'batlantirish uchun nanobiologiyaga patentga ega. Boshqa barcha mualliflar hech qanday potentsial ziddiyat haqida xabar berishmaydi. Barcha mualliflar potentsial manfaatlar to'qnashuvlarini oshkor qilish uchun ICMJE formasini topshirdilar.

QO'SHIMCHA MA'LUMOT

Qo'shimcha ma'lumot Onlayn versiyada https://doi.org/10.1038/s41541-022-00438-4 manzilida mavjud qo'shimcha materiallar mavjud.

Materiallar uchun yozishmalar va so'rovlar Dimitri A. Diavatopoulosga yuborilishi kerak.

Qayta nashrlar va ruxsatnomalar haqida ma'lumot http://www.nature.com/ reprints saytida mavjud

Nashriyotning eslatmasi Springer Nature nashr etilgan xaritalar va institutsional bog'lanishlar bo'yicha yurisdiksiyaga oid da'volarga nisbatan neytral bo'lib qoladi.

Ochiq kirish

Ushbu maqola Creative Commons Attribution 4 boʻyicha litsenziyalangan.0 Xalqaro litsenziya boʻlib, u asl muallif(lar)ga tegishli baho bergan holda istalgan vosita yoki formatda foydalanish, almashish, moslashtirish, tarqatish va koʻpaytirishga ruxsat beradi. ) va manba, Creative Commons litsenziyasiga havolani taqdim eting va o'zgartirishlar kiritilganligini ko'rsating. Ushbu maqoladagi tasvirlar yoki boshqa uchinchi tomon materiallari, agar materialning kredit liniyasida boshqacha ko'rsatilmagan bo'lsa, maqolaning Creative Commons litsenziyasiga kiritilgan. Agar material maqolaning Creative Commons litsenziyasiga kiritilmagan bo'lsa va sizning maqsadli foydalanishingiz qonun hujjatlarida ruxsat etilmagan bo'lsa yoki ruxsat etilgan foydalanishdan oshsa, to'g'ridan-to'g'ri mualliflik huquqi egasidan ruxsat olishingiz kerak bo'ladi.

For more information:1950477648nn@gmail.com