Xitoy tibbiyoti Cistanche kimyoviy tarkibi va tanadagi komponentlarning tahlili Ⅲ
Apr 12, 2024
2-bob Cistanche deserticola kimyoviy tarkibini sifatli o'rganish
Cistanche - quruq qobiqli bargning go'shtli poyasiCistanche deserticola YC.Mava Cistanche tubulosa (Schenk) R.Wight. Bu mashhur buyrak-yang oziqlantiruvchi an'anaviy xitoy dori-darmonlaridan biridir. ning funktsiyalariga egaoziqlantiruvchi buyrak-yang, mohiyat va qonni to'ldiruvchi va namlovchi U laksatif ta'sirga ega va ko'pincha iktidarsizlik, bepushtlik, bel va tizzalar og'rig'i, mushaklar va suyaklarning zaifligi, ichakning quruqligi va ich qotishi va boshqalarni davolash uchun ishlatiladi. demans, anti-Parkinson kasalligi, miya ishemiyasidan himoya qilish, o'rganish va xotira qobiliyatlarini yaxshilash. Buning uchun moddiy asosni aniqlashtirish uchunCistanche deserticolaning samaradorligi, ushbu bobda HPLC va LC-IT-TOF-MS dan har tomonlama tavsiflash uchun foydalaniladi.Cistanche kimyoviy komponentlari. Har xil turdagi kimyoviy komponentlarning kreking qoidalarining tizimli xulosasiga asoslanib, Cistanche deserticola xossalari tizimli ravishda tahlil qilinadi. Kimyoviy tarkibi, ishonchli manbalardan boy ma'lumotlarni taqdim etishchuqur tushuntirishning shifobaxsh xususiyatlaridanCistanche deserticolain vivo.

CISTANCHE QANCHA VA QANCHA KETADI?
1-bo'lim Eksperimental materiallar
1. Asbob
Shimadzu HPLC-IT-TOF-MS suyuq massa spektrometri (2 ta LC-20ADXR nasoslari, SIL-20AC avtomatik namuna oluvchi, CTO-20AC ustunli pech, SPD-M20A UV detektori bilan jihozlangan, DGU-20A3R zararsizlantirish Gaz mashinasi, CBM-20Kontroller, ESI ion manbai, Shimadzu kompaniyasi, Yaponiya), Milli-Q ultra toza suv tozalash tizimi (Milipore kompaniyasi, AQSh): Mettler ME204 elektron analitik balansi ( Mettler Toledo kompaniyasi, Shveytsariya).
2. Reaktivlar
Xromatografiya darajasi va massa spektrometriya darajasi metanol, asetonitril va massa spektrometriya darajasi chumoli kislotasi Thermo-Fisher kompaniyasidan (Pittsburg, PA, AQSh) sotib olindi. Suv laboratoriyada tayyorlangan Milli-Q o'ta toza suv edi (Millipore, Bedford, MA, AQSh). Qolgan reagentlar analitik sinfga tegishli.
Salidrosid, 6-deoksikatalpol, 8-epi-loganik kislota, echinakozid, akteozid, izozid Verbaskozid (izoakteosid) va pinoresinol- -D-glukopiranozid (pinoresinol- -D-glyukopiranozid) Ularning ikkalasi ham Pekin universitetidagi tabiiy va biomimetik dorilarning asosiy laboratoriyasi professori Tu Pengfeyning tadqiqot guruhi tomonidan taqdim etilgan. Sarkozid F ( cistanosideF ) Chengdu Mansite Biotechnology Co., Ltd. dan sotib olingan, sistanozid A (sistanozid A), 2'-asetillakteozid (2'-asetillakteosid), 2'-asetilpoliumozid (2'-asetilpoliumozid), sistanozid (Polyglucoside) ), cistanoside E (cistanosideE), isocistanoside E (isocistanosideE), cistanoside C (cistanosideC), isocistanoside C (isocistanosideC) va cistanoside D (cistanosideD) hammasi Shanghai Shidande Biotechnology Co., Ltd., tubulosideA (tubuloside) dan sotib olingan. tubuloside B (tubulosideB) Chengdu Weikeqi Biotechnology Co., Ltd kompaniyasidan sotib olindi.
2-bo'lim Eksperimental tarkib
1. Namuna tayyorlash
1.1 Malumot moddasini tayyorlash
Yuqoridagi "1-bo'lim eksperimental materiallar"da turli xil mos yozuvlar moddalarining tegishli miqdorini aniq torting va DMSO bilan 10 mM eritmalar tayyorlang. Har bir eritmadan 2 ml dan aniq pipetka bilan o'tkazing va 2 mkM aralash nazorat eritmasini hosil qilish uchun uni 25% asetonitril bilan suyultiring. 1.2 Tekshiriluvchi eritma tayyorlash
Cistanche deserticolaning suvli ekstrakti laboratoriyamiz tomonidan tayyorlangan va namuna Pekin xitoy tibbiyot universiteti an'anaviy xitoy tibbiyoti maktabi an'anaviy xitoy tibbiyotini modernizatsiya qilish tadqiqot markazida saqlanadi. 20 mg Cistanche deserticola kukuni oling, eritish uchun 40 ml suv qo'shing, aylantiring va aralashtiring, 10000 aylanish tezligida 10 daqiqa davomida santrifüj qiling va supernatantni oling. Ya'ni, sinov eritmasi olinadi.
3. Mass-spektrometriya sharoitlari
Elektrospray ion manbai (ESI), skanerlash rejimi bir vaqtning o'zida ijobiy va salbiy ionlarni skanerlash va avtomatik ravishda ko'p darajali massa spektrometriyasini ishga tushirishdir. Musbat ionlar uchun MS'~MS' ning ommaviy skanerlash diapazoni m/z50~800, manfiy ionlar uchun m/z100~1000. Püskürtme kamerasining kuchlanishlari mos ravishda 4,5kV va -3,5kV: atomizatsiya gazining (Nz) oqim tezligi 1,5 Lmin; quritish gazining bosimi 110MPa; aniqlash kuchlanishi 1,55 kV; kavisli erituvchi trubaning (CDL) va isitish modulining harorati ikkalasi ham 200 daraja. To'qnashuv kamerasining bosimi 1,5e-Pa; ion tutqich bosimi 2,8e-Pa; ijobiy va salbiy birinchi bosqichlarning takrorlanish soni 1 ta, ion to'planish vaqti esa 30 ms; ijobiy va manfiy ikkinchi bosqichlarning takrorlanish soni 2 ta, ion to'planish vaqti esa 20ms. ; To'qnashuvdan kelib chiqqan dissotsiatsiya (CID) energiyasi 50% ni tashkil qiladi.
3-bo'lim Natijalar va muhokama
Ustun tanlash
Yaxshiroq xromatografik ajratishni olish uchun biz turli ishlab chiqaruvchilar va spetsifikatsiyalarning xromatografik ustunlarini, masalan, ACEUltraCore 2.5 SuperC8 xromatografik ustuni (3.0x150mm, 2.5 um, Advance Chromatography Technologies Ltd., Aberdin, Shkotlend), keng qamrovli skrining qildik. Shiseido Capcell Core Ci8 (2,1 mm x 150 mm, 2,7 mkm), Waters Acquity UPLC HSS T3 ustuni (2,1 x 100 mm, 1,8 mkm, Milford, MA, AQSh) va Capcell Core ADME ustuni (2,1 x 150 mm, 2,7 mkm, Shiseido korporatsiyasi, Yaponiya). Tizimli taqqoslash natijasida, Capcell Core ADME xromatografik ustunidan (2,1x150 mm, 2,7 mkm, Shiseido Co., Ltd., Yaponiya) foydalanganda har bir xromatografik signalni yaxshiroq ajratish mumkinligi aniqlandi (3-1-rasm).
2. Suyuq faza sharoitlarini tanlash
ning asosiy kimyoviy komponentlari beriCistanche deserticolafeniletanol glikozidlari, lignanlar, iridoidlar va boshqa birikmalar bo'lib, u odatda salbiy ion sharoitida yaxshi javob beradi. Cistanche deserticola suv ekstraktidagi past darajadagi kimyoviy komponentlarni aniqlash uchun quvvatni oshirish uchun harakatlanuvchi fazaga kislotalar qo'shilishi kerak bo'lishi mumkin, deb taxmin qilinadi. Shuning uchun bu tajribada tadqiqot uchun mobil fazali tizimlar sifatida suv-metanol, suv-asetonitril, 0,1% chumoli kislotali suv-metanol va 0,1% chumoli kislotali suv-asetonitril ishlatilgan. Aniqlanishicha, 0.1% chumoli kislotali suv-asetonitril eng yaxshi ajratuvchi taʼsirga ega, yaxshi choʻqqi shakli va katta choʻqqilik sigʻimi, shuning uchun 0.1% chumoli kislotali suv va asetonitril tanlab olingan. mobil faza. 3. Kimyoviy komponentlarning sifat tahlili. Cistanche deserticoladagi har xil turdagi birikmalarning massa spektrometriya parchalanish qoidalarini o'rganish uchun 19 ta mavjud mos yozuvlar moddalaridan foydalaning. Aralash mos yozuvlar moddalari ADME ustunida 340 nm da PDA xromatogrammalari va ijobiy va manfiy ion rejimlarida BPC jadvallaridir. 3-1-rasmga qarang. Biz PubMed, RSC, CNKl, Springer, ScienceDirect, VIP va Wanfang va boshqalar orqali tegishli adabiyotlarni ko'rib chiqdik va Cistanche deserticola kimyoviy komponentlarining o'z-o'zidan ishlab chiqarilgan ma'lumotlar bazasini yaratdik. Mass-spektrometriyaning parchalanish qoidalari va ma'lum birikmalarni saqlash vaqtlarini taqqoslash asosida biz Cistanche deserticola da 45 ta birikmani oldindan aniqladik. birikmalar, jumladan, 31 feniletanol glikozid, 9 iridoid, 3 benzil glikozid va 2 lignan, 3-1-jadvalda ko'rsatilganidek.

11, 12, 13, 17, 21, 22, 24, 25, 26, 28, 29, 32, 33, 36, 37, 38 birikmalarining maxfiylik vaqtini, MS spektrini va mos yozuvlar moddasining MS spektrini taqqoslash orqali. Genipin, sistanxein F, sistanxeozid E, echinatseasid, xrizantozid, sistanxein A, tuberosin A, larxrezinol 4-0- -D glyukozid, mullen glikozidlari, izokannabinoid glikozid, pinoreskozid glikozid, e koside C, izocistancoside C, tuberosin B va cistanche glikozid D.
Ushbu tajriba HPLC-IT-TOF-MS texnologiyasidan foydalangan holda Cistanche deserticola suv ekstrakti tarkibidagi murakkab kimyoviy komponentlarni tez va aniq tizimli tahlil qiladi, bu esa Cistanche deserticola sifatini kompleks tahlil qilish va farmakologik moddalar bo‘yicha in vivo tadqiqotlar uchun asos yaratadi.

Shakl 3-1 Aralash mos yozuvlar moddasi xromatogrammasi Yuqori: musbat ion rejimidagi BPC diagrammasi: Pastki: manfiy ion rejimidagi BPC diagrammasi

Shakl 3-1 Aralash mos yozuvlar moddasi xromatogrammasi Yuqori: musbat ion rejimidagi BPC diagrammasi: Pastki: manfiy ion rejimidagi BPC diagrammasi










