Guruch oqsili gidrolizatlarining antioksidantlar, oqlash va qarishga qarshi xususiyatlarini baholash

Aloqa:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Hui-Ju Chen 1,2, Fan-Jhen Dai 2, Cheng-You Chen 3, Siao-Ling Fan 2, Ji-Xong Zheng 4, Yu-Chun Huang 2, Chi-Fai Chau 1, Yung-Sheng Lin 3, 4,5,* va Chin-Shuh Chen 1,*

Annotatsiya:O'simliklardan olingan protein gidrolizatlari ovqatlanishda potentsial qo'llanmalarga ega. Proteinlarning ajoyib manbai bo'lgan guruch proteinhidrolizatlari (RPH) kosmetsevtikani rivojlantirish uchun e'tiborni tortdi. Biroq, kam sonli tadqiqotlar RPH inanalizining potentsial qo'llanilishi haqida xabar bergan va bu tadqiqot ularni o'rganib chiqdiantioksidantteri qorish fermentlarining faoliyati va inhibitiv faoliyati. Natijalar shuni ko'rsatdiki, jami fenolik va flavonoid kontsentratsiyasi 2.06 ± 0,13 mg gallik kislota ekvivalenti/g RPH va 25,96 ± 0,52 mkg quercetin ekvivalenti/g RPH, mos ravishda. RPHlar 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil [yarim maksimal inhibitiv kontsentratsiya (IC50)=42,58 ± 2,1 mg/g RPH] va 2 dan erkin radikallarni tozalash uchun dozaga bog'liq faollikni ko'rsatdi. ,20-azino-bis (3-etilbenzotiazolin-6-sulfonik kislota) (IC50=2,11 ± 0,88 mg/g RPH), dozaga bog‘liq kamaytirish qobiliyati (6,95 ± 1,40) mg vitamin C ekvivalenti/g RPH) va kislorodning radikal so'rilish qobiliyati (473 mkmol Trolox ekvivalenti/g RPH). Gialuronidazaning 50 foiz inhibisyoniga erishish uchun zarur bo'lgan RPH eritmasining konsentratsiyasi vatirozinazafaolliklari mos ravishda 8,91 va 107,6 mg/ml deb aniqlandi. Ushbu tadqiqot RPHlarning mavjudligini ko'rsatdiantioksidant,antigialuronidaza va antitirozinaz faoliyati kelajakdagi kosmetik ilovalar uchun.

Kalit so‘zlar:guruch oqsili gidrolizati;antioksidant; gialuronidaza;tirozinaza; kosmetika

cistancheoqlashta'sirteri ustidaantioksidlanish

1.Kirish

Ultraviyole nurlanish ta'siri fotoaging (yoki tashqi qarish) uchun javobgardir; Bundan farqli o'laroq, hujayra metabolizmida hosil bo'lgan reaktiv kislorod turlari va biologik funktsiyalarning yomonlashishi ichki qarish uchun javobgardir [1,2]. Qayta ishlangan ovqatlar ko'pincha tabiiy moddalarni o'z ichiga oladiantioksidantlarkatexinlar, askorbin kislotasi, tokoferollar, rozmarin kislotasi va turli o'simliklardan olingan fenolik ekstraktlar kabi. Tabiiy antioksidantlar bo'yicha olib borilgan tadqiqotlar endi an'anaviy bo'lmagan manbalarni ko'rib chiqmoqda. Tabiiy manbaantioksidantlarkimyoviy ishlab chiqarilgandan ko'ra ko'proq ma'qulantioksidantlarchunki ba'zi sintetik antioksidantlar kanserogen ekanligi xabar qilingan [3]. Guruch (Oryza sativa) butun dunyodagi odamlar, ayniqsa Osiyoda yashovchilar uchun asosiy oziq-ovqat mahsulotidir. Dunyoda yillik guruch ishlab chiqarish taxminan 741 million tonnani tashkil qiladi [4]. Maʼlumotlarga koʻra, Osiyo mamlakatlarida guruch 2 milliarddan ortiq kishining energiya isteʼmolining 75 foizini tashkil qiladi [5]. Guruchning keng ko'lamli ishlab chiqarilishi tegishli miqdorda qo'shimcha mahsulot ishlab chiqarishga olib keladi. Guruch ishlab chiqarish jarayonining qoldiq mahsuloti don oqsilining katta qismini (~60-85 foiz) o'z ichiga oladi, lekin u tashlanadi yoki hayvonlarni boqish uchun ishlatiladi [6-8]. Xabarlarga ko'ra, turli xil protein gidrolizatlaridan olingan peptidlar potentsial sifatida ishlaydiantioksidantlar[9]. Shuning uchun tabiiy va toksik bo'lmagan antioksidantlar oziq-ovqat oqsili gidrolizatlaridan potentsial ravishda olinishi mumkin. Ko'pgina olimlar lipidga boy modellardan foydalanganlar va protein gidrolizatlari, shuningdek sut, zein va soya proteini peptidlari muhim antioksidant xususiyatlarga ega bo'lishi uchun erkin radikallarni tozalash, oziq-ovqat va in vitro lipid peroksidatsiyasini inhibe qilish va o'tish metallarining xelyatsiyasini o'z ichiga oladi. 12].

Gialuron kislotasi (HA) terini yoshartirishga yordam beradi, chunki u yopishqoqlikni oshiradi, namlikni o'z ichiga oladi va hujayradan tashqari suyuqliklarni kamroq o'tkazuvchan qiladi. Ajoyib suvni ushlab turish qobiliyati tufayli HA terining yoshligini, namlanishini va silliqligini oshiradi va ajinlar darajasini pasaytiradi [13,14]. Afsuski, teridagi HAin darajasi yosh bilan tabiiy ravishda kamayadi. Gialuronidaza HA ni yo'q qiladigan ferment bo'lib, terining mustahkamligi, moslashuvchanligi va namligini yo'qotadi, bu esa o'z navbatida terining qarishiga olib keladi.Shuning uchun ajinlarni gialuronidazani inhibe qilish va terining HA tarkibini saqlab qolish orqali davolash mumkin [15,16]. Melanin ishlab chiqaruvchi fermenttirozinazamelanin ishlab chiqarish jarayonining tezligini cheklovchi bosqichiga hayotiy hissa qo'shadi. Shuning uchun pigmentatsiya kasalliklari odatda davolanadi va terining oqartirishiga inhibe qilish yoki kamaytirish orqali erishiladi.tirozinazafaoliyati [17,18].

Bir nechta tadqiqotlarda don oqsili gidrolizatlari va ulardan olinishi mumkin bo'lgan peptidlar antioksidant, antihipertenziv va antitumoraktivlikka ega ekanligi aniqlangan [19,20]. Oziq-ovqatdan kelib chiqadigan peptidlar va oqsillarning inson salomatligiga ijobiy hissasi asta-sekin e'tirof etilmoqda [21]. Iste'molchilar kosmetika va sog'liqni saqlash sanoatida tabiiy bioaktiv birikmalardan foydalanishni talab qilmoqdalar. Guruch proteinhidrolizatlari (RPH) oqsillarning ajoyib manbai sifatida e'tiborni tortdi. Biroq, kam sonli tadqiqotlar RPH ning tavsifi va funktsional tahlili haqida xabar bergan. Shuning uchun, bu tadqiqot antioksidant faolligi va gialuronidaza va baholanditirozinaza- RPH ning inhibe qiluvchi faolligi.

2. Natijalar va muhokama

2.1. Jami fenolik konsentratsiya (TPC) va umumiy flavonoid tarkibi (TFC)

TPC tahlilida standart bir necha konsentratsiyali gallik kislota edi. Yuqori absorbsiya yuqori TPC ni ko'rsatdi. RPH namunalarining TPC qiymati RPH namunalarining optik absorbans qiymatlarini gallik kislota kalibrlash egri chizig'iga kiritish orqali olingan. RPH konsentratsiyasini fenolik kontsentratsiyaga (1a-rasm) solishtirib, o'rtacha TPC 2.06 ± 0,13 mg GAE/g RPH olindi. 25,96 ± 0,52 µg QE/gRPH TFC shunga o‘xshash protsedurani bajarish orqali olingan (1b-rasm). 1c-rasmda RPH namunalarining TPC va TFC bilan bog'liqligi keltirilgan. Bu shuni ko'rsatadiki, TPC va TFC o'rtasidagi munosabat y=0.0121x plyus 0,0659 sifatida ifodalanishi mumkin, bunda x va y mos ravishda TPC va TFC hisoblanadi.

RPH larning TPC fenolik aminokislotalar va peptidlarning fenolik birikmalarining kontsentratsiyasini o'z ichiga oladi. Protein-fenol birikmalarining o'zaro ta'siri odatda kovalent va kovalent bo'lmagan bog'lanishni o'z ichiga oladi. Enzimatik gidroliz jarayonida fenolik birikmalar ajralib chiqadi. Maxsus fermentlar oqsil-polifenol komplekslarini yo'q qilishga qodir bo'lishi mumkin; bu tirozin kabi fenolik guruhlarga ega bo'lgan ko'proq miqdordagi fenolik birikmalar va peptidlarning ajralib chiqishiga olib keladi [22]. Donalardagi umumiy polifenol miqdori va ularning biologik faolligi o'rtasida kuchli bog'liqlik borligi haqida xabar berilgan. Polifenollar kuchli antioksidant ta'sirga ega ekanligi yaxshi ma'lum [23]. Guruchdagi terpenlar [24] yoki seskiterpenlar [25] kamroq miqdorda bo'lsa-da, antioksidant faollikka hissa qo'shishi mumkin.

2.2. Antioksidantlarning faolligi

2.2.1. DPPH erkin radikallarini radikal tozalash faoliyati

2-rasmda RPH eritmasidagi DPPH erkin radikallarini tozalash faolligi tasvirlangan. Eritmaning yuqori konsentratsiyasi yuqori faollikka olib kelishi aniqlandi. Yarim maksimal inhibitiv kontsentratsiya (IC50), ya'ni barcha DPPH erkin radikallarining yarmini tozalash mumkin bo'lgan ekstrakt konsentratsiyasi 42,58 ± 2,1 mg / ml guruch peptidlarini tashkil etdi.

2.2.2. ABTS erkin radikallarini tozalash faoliyati

3-rasmda ko'rsatilgan RPHlarning ABTS erkin radikallarini tozalash faolligi ko'proq ekstrakt konsentratsiyasi ishlatilganda yuqori bo'lgan. IC5 0 2,11 ± 0,88 mg/ml guruch peptidlarini tashkil etdi. Bu natija RPHlarning kuchli ABTS erkin radikallarini tozalash faolligiga ega ekanligini ko'rsatdi. Oltingugurt o'z ichiga olgan aminokislotalar, shu jumladan Met va Cys va hidrofobik aminokislotalar, jumladan Ala, Val, Ile, Leu, Met, Cys, Tyr, Phe, Try va Pro, ABTS erkin radikaliga nisbatan muhim omillar bo'lishi mumkin. tozalash faoliyati.

Ushbu tadqiqotda ABTS erkin radikallarini tozalash faolligining IC50 qiymati Jatropha curcas L. urugʻining qobigʻi va yadrosi [28] hamda jujube urugʻi va qobigʻi pulpasi [29] natijalariga mos keladigan DPPH erkin radikallarni tozalash faolligidan past boʻldi. Bu topilma, shuningdek, 43,98–66,25 mkmol Trolox ekvivalenti/g namunasi va DPPH erkin radikalni tozalash faolligi va ABTS erkin radikalni tozalash faolligi uchun 403,28–430,12 mkmol Trolox ekvivalenti/g namunasi bo‘lgan guruch kepagi oqsili gidrolizatlari hisobotiga ham mos keladi.

Mumkin bo'lgan sabablardan biri DPPH erkin radikali (yog'da eriydigan) va ABTS erkin radikali (yog'da/suvda eriydigan) o'rtasidagi eruvchanlikdagi farqdir [30,31]. Guruch kepagi oqsili gidrolizatlarining antioksidant potentsiali uning molekulyar og'irligi, aminokislotalar tarkibi va hidrofobikligi bilan ta'sirlangan [32].

2.2.3. Imkoniyatlarni kamaytirish

RPHlar uchun pasayish qobiliyatini tahlil qilish natijalari 4-rasmda keltirilgan. RPH konsentratsiyasi bilan pasaytirish qobiliyati oshdi. Kamaytirish qobiliyati 6,95 ± 1,40 mg VCE/g RPH ni tashkil etdi, bu RPHlarning samarali antioksidant ekanligini ko'rsatadi.

2.2.4. Kislorod radikalini yutish qobiliyati (ORAC)

ORAC tahlili antioksidant faollikni aniqlashning boshqa yondashuvlariga nisbatan afzalliklarga ega, jumladan, ishlatiladigan reaktivlar fiziologik oksidlovchilarga o'xshash reaksiya mexanizmi va redoks potentsialiga ega peroksi radikallari; umumiy zaryad va protonatsiya holatiantioksidantlarreaktsiyalar inson tanasidagi reaktsiyalarga o'xshaydi [33]. ORAC usuli inson organizmidagi antioksidantlarning samaradorligiga ham biologik ahamiyatga ega. 5-rasmda RPH va Trolox standartining turli konsentratsiyalarda ORAC tahlili natijalari tasvirlangan. ORAC aniq AUC ni Trolox kontsentratsiyasiga bog'lovchi kalibrlash egri chizig'ining regressiya tenglamasidan olingan. Natijalar shuni ko'rsatdiki, RPHshad ORAC 473 mikromol TE/g RPHs.

Antioksidant peptidlar yoki aminokislotalarni fermentativ oqsil gidrolizi orqali olish mumkin, bu oksidlovchilarga nisbatan yuqori faollikka olib keladi [34]. Metall ionlarining xelyatsiyasi, lipid peroksidlanishini inhibe qilish va biologik faol peptidlarning erkin radikallarini tozalash ularning antioksidant faolligi uchun javobgardir. Erkin radikallar so'ndirilishi mumkin va oksidlovchi-stressni kamaytiradigan oqsillar va fermentlarning ifodasi antioksidant peptidlar tomonidan tartibga solinishi mumkin. Protein gidrolizatlari va peptidlarining antioksidant samaradorligi aminokislotalar ketma-ketligiga va peptid hajmiga bog'liq bo'lib, ular gidroliz sharoitlari, oqsil manbai va proteaza turiga ta'sir qiladi [35]. Adebiy va boshqalarga ko'ra. [36], eng katta hazm bo'ladigan guruch kepagi oqsili subtilisin ta'sirida kichikroq bo'laklarga bo'linishi mumkin, natijada protein miqdori va tarkibi ko'proq bo'ladi. Gidrolizatning TPC va antioksidant faolligiga fermentlarning o'ziga xosligi ta'sir qilishi mumkin. Shuning uchun peptidning antioksidant faolligiga oqsil manbasining xususiyatlari, fermentning o'ziga xosligi va gidroliz darajasi ta'sir qiladi [37].

Antioksidant peptidlarni olish uchun o'simliklardan olingan oqsillarni gidrolizlash uchun proteazlar (masalan, Bacillus turlaridan asubtilisin A ning tijorat nomi Alkalaz) yordamida ko'plab hisobotlar mavjud. Shu nuqtai nazardan, soya proteini eng ko'p qayd etilgan oqsillardan biridir [38]. Bundan tashqari, guruch kepagi oqsilining alkalaz gidrolizi ham topilgan. Optimal sharoitlarda glyutinli guruch kepagining alkalazgidrolizi natijasida DPPH erkin radikallarini tozalashda IC5 0 qiymati 0,87 ± 0,02 mg/ml bo‘lgan protein gidrolizatlari hosil bo‘ldi [39]. Bizning tadqiqotimizda RPH ning IC50 qiymati 42,58 ± 2,1 mg / ml ni tashkil etdi. Ushbu tadqiqotda DPPH erkin radikallarini tozalashdagi IC50 qiymati guruch kepagi oqsilidagi kabi samarali bo'lmasa-da, ABTS erkin radikallarini tozalash (IC50=2,11 mg/ml) alkalazgidroliz natijasida olingan soya oqsili gidrolizatlariga qaraganda samaraliroq bo'ldi. IC50=2,93 mg/ml) [40].

2.3. Gialuronidazani inhibe qiluvchi faollik

Proteolitik ferment, gialuronidaza dermisda joylashgan bo'lib, hujayradan tashqari matritsada HA parchalanishini katalizlaydi [41]. Ushbu tadqiqot taqqoslash maqsadida tanin kislotasini apozitiv nazorat sifatida ishlatgan. Shakl 6 tanin kislotasi yuqori gialuronidaza faolligini inhibe qilganligini ko'rsatadi; IC5 0 0, 14 mg/ml, Nishida va boshqalar tomonidan olingan qiymatga o'xshash edi. (0,121 mg/ml; 71,1 mM) [42]. Aksincha, RPH eritmasi uchun 8,91 mg/ml IC50 hisoblangan. RPH eritmasining bu natijasi bizning oldingi IC50 qiymatiga to'g'ri keldi, 7,61 mg/ml [43]. Proteinlar, polisaxaridlar, o'simlik va sintetik birikmalar gialuronidaza inhibitörleri mavjud bo'lgan birikmalar qatoriga kiradi. Ushbu inhibitorlar HA sintezi-degradatsiyasi muvozanatini saqlashga yordam beradi [44]. Terida past HA konsentratsiyasi quruqlik va ajinlar paydo bo'lishiga olib keladi. Shuning uchun gialuronidaza faolligini inhibe qilish terining morfologiyasini yaxshilash va uning qarishini kechiktirish yo'lidir.

2.4. Tirozinazani inhibe qiluvchi faollik

Tabiiy manbalardan olingan protein gidrolizatlari inhibe qilish imkoniyatiga egatirozinaza faolligi. In-vitro tirozinazni inhibe qilish testi odatda terini oqartiruvchi vositalar tirozinaz faolligiga qanday ta'sir qilishini baholash uchun ishlatiladi [45]. Melaninsintez tezligini cheklovchi bosqichda ishtirok etib, tirozinaza L-tirozin gidroksillanishini L-DOPA ga, so'ngra ikkinchisining o-dopakinonga oksidlanishini katalizlaydi. Agar melanin biosintezini oldini olish kerak bo'lsa, L-tirozinaza faolligini inhibe qilish juda muhim bo'lishi mumkin. Bu yerda,tirozinazaRPH antitirozinaz faolligini o'lchash uchun ishlatilgan. 7-rasmda ko'rsatilganidek, kontsentratsiya107,6 mg/ml tirozinaz faolligini 50 foizga inhibe qildi. Askorbin kislota yuqori tirozinazni inhibe qiluvchi faollikni (IC50=0,098 mg/mL) ko'rsatdi, bu Seo va boshq. xabar berdi [46].

Guruch kepagi oqsil gidrolizatlari sezilarli darajada yuqori bo'lgantirozinaza-ingibitor faoliyat [47,48]. RPH eritmasining tirozinazni inhibe qiluvchi faolligi peptidlarning aminokislotalar profilidan kelib chiqishi mumkin. Schurink va boshqalar. samarali ekanligini tasvirlab berditirozinaza-ingibitor peptidlar arginin qoldiqlari va fenilalanindan iborat [49]. Tirozinazni inhibe qiluvchi faolligi hidrofobik aminokislota qoldiqlari (masalan, alanin) tomonidan yaxshilanishi mumkin va melanin ishlab chiqarilishi alanin tomonidan buzilishi mumkin [50]. Bundan tashqari, Zhang va boshqalar. Shuningdek, guruch oqsili gidrolizati UVB-induktsiyalangan hujayra modelida melanin tarkibini va tirozinaz faolligini kamaytirishi mumkinligini xabar qildi [51].

cistanche bodibilding

2.5. Aminokislota profillari va RPHlarning MWlari

Ushbu tadqiqotda kraxmal olib tashlanganidan keyin guruch tarkibidagi protein miqdori og'irlikning 23,56 foizini tashkil etdi va proteaza bilan gidrolizlangan namunaning gidrolizlanish darajasi 9,36 foizni tashkil etdi. 1-jadvalda RPHdagi aminokislotalarning tarkibi batafsil ko'rsatilgan. Namunada har 100 g 5,18 g aminokislotalarni o'z ichiga oladi. Aminokislota tarkibiy qismlariga kelsak, RPHlar alanin, leysin, arginin, glutamik kislota va aspartik kislotaga boy edi. Har 100 g namunada jami 1,73 g hidrofobik aminokislotalar (alanin, valin, leysin, izolösin, prolin, fenilalanin va sistein) mavjud. Bu natija amilaza eritmasi va uning kraxmalni olib tashlash uchun ishlov berish haroratidagi avvalgi hisobotimizdan [43] butunlay farq qildi. Hidrofob aminokislotalarning tarkibi avvalgi hisobotimizdan 1,90 baravar yuqori edi. Ushbu tadqiqotda pastroq ishlov berish harorati (60 ◦C) aminokislotalarning faolligini yaxshiroq saqlab qolish uchun ko'p miqdorda oqsillarning denatüratsiyasini oldini oladi. Bundan tashqari, shunga o'xshash xulosa boshqa qo'ziqorin amilaza va glyukoamilaza oq guruch kepagidagi kraxmalni sakkarifikatsiya qilishdan ham olingan [52].

Tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, hidrofobik aminokislotalarga o'xshashantioksidantlarturli oqsil manbalaridan olingan protein gidrolizatlari va peptidlarida lipidga asoslangan eruvchanligini oshirish orqali erkin radikallar bilan o'zaro ta'sirni kuchaytiradi [38,53]. Ba'zi aminokislotalar Chen va boshqalar tomonidan xabar qilingan. [54] odatda bo'lishantioksidantlar; qayd etilgan kislotalarga triptofan, sistein, metionin, tirozin va histidin kiradi. Ushbu tadqiqotda aromatik aminokislotalar (fenilalanin, tirozin va triptofan) 0,53 g/100 g RPH ni tashkil qilgan. Shuning uchun, bu peptidlardan kelib chiqqan aminokislotalar, ehtimol, RPHlarning antioksidant faolligi uchun javobgardir.

Bundan tashqari, qisqaroq peptidlarga gidrolizlangan oqsillar boshqa MW taqsimotiga ega va to'liq tabiiy protein molekulalarining ichki qismida katlanmış ba'zi hidrofobik guruhlar odatda suvli fazaga ta'sir qiladi. Bu protein molekulalarining strukturaviy qayta tashkil etilishi va shuning uchun oqsilning funktsional xususiyatlari bilan bog'liq [55,56]. Trisin-SDS-PAGE ma'lumotlari RPHlarning MVt 5-35 kDa oralig'ida ekanligini ko'rsatdi (8a-rasm).

8b-rasmda RPHdagi turli MWlarning nisbiy mazmuni tasvirlangan. Umuman olganda, barcha oqsillarning 45,24 foizi asosiy bandda (MW ≈ 2,4 kDa) edi. Guruch kepagi oqsili gidrolizatlari peptidiga nisbatan ham xuddi shunday natijalarga erishildi. Thamnarathip va boshqalar tomonidan olingan eng yuqori antioksidant faollik. [37] bu MVt=6–50 kDa peptidlar uchun edi. Bundan tashqari, oqsil gidrolizatlarining funktsiyasi va aminokislotalarning MVt taqsimlanishi va tarkibi o'rtasida aloqalar mavjud [57]. Bu ushbu tadqiqotda kuzatilgan RPHlarning antioksidant faolligini tushuntiradi.

2.6. Hujayra toksikligi testi

Kelajakdagi ilovalar uchun past hujayra toksikligi talab qilinadi. RPH ning sitotoksikligi va biomoslashuvini baholash uchun RPH eritmasidagi xom 264,7 hujayraning hujayra hayotiyligi MTT usuli bilan o'lchandi. 9-rasmda ko'rsatilgandek, 24 soat va 48 soat davomida 25-2000 mkg/ml RPH bilan ishlov berilganda hujayra hayotiyligi 100 foizdan yuqori bo'lgan. Natijalar RPH ning sezilarli darajada past sitotoksikligini ko'rsatadi. Shuning uchun, RPHlar potentsial ravishda juda past sitotoksiklikka ega kosmetik ilovalar sifatida ishlatilishi mumkin.

3. Materiallar va usullar

3.1. Reaktivlar

Temir (III) xlorid, 2,20-azino-bis(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonik kislota) (ABTS), Trolox (6-gidroksi-2,5 ,7,8-tetrametilkroman-2-karboksilik kislota), l-3,4-dihidroksifenilalanin(L-DOPA), 1,1-difenil-2- pikrilhidrazil (DPPH) va trikloroatsetik kislota Alfa Aesardan (Tewksbury, MA, AQSH) olingan. 2,20-azobis(2-metilpropionamidin) dihidroxlorid (AAPH), Folin-Ciocalteu fenol reaktivi, gallik kislota, askorbin kislota, qo'ziqorintirozinaza, va flüoresan natriy Sigma-Aldrichdan (Sent-Luis, MO, AQSh) olingan. Natriy karbonat Riedel-de Haën (Zelze, Germaniya) dan olingan. Nihoyat, kaliy ferrisiyanid, natriy vodorod fosfat va natriy dihidrogen fosfat Showa Chemical (Tokio, Yaponiya) dan olindi.

3.2. RPHlarni tayyorlash

RPHlar yuqorida tavsiflanganidek tayyorlangan, faqat qo'ziqorin amilazasi yuqori haroratlarda bakterilamilaza gidrolizi natijasida kelib chiqqan aminokislotalarga zarar etkazmaslik uchun guruch unidagi kraxmalni shakarlash uchun qabul qilingan [43,58]. Yuz gramm guruch uni 0,5% zamburug‘li amilaza bo‘lgan 1000 ml distillangan suvda namlangan (Genenkor, NY, AQSh); keyin aralashma 24 soat davomida 60 ◦C gacha qizdirilgan ( pH 4.2), shundan so'ng xona haroratiga qadar sovushiga ruxsat berildi. Qolgan supernatantni olib tashlash uchun 1968 × g da 10 daqiqa davomida santrifüjlash amalga oshirildi. Erimaydigan qismga 20-katlangan suv va 2 ml 0,1 foizli gidrolitikproteaza (Healthmate, Changhua, Tayvan) qo'shilgandan so'ng, eritma chayqatildi va 4 soat davomida 55 ◦C da inkubatsiya qilindi. Eritmaning pH darajasini optimal darajada ushlab turish uchun pH-stati usuli qo'llanildi va keyin 10 daqiqa forferment inaktivatsiyasi uchun 85 ◦C isitish amalga oshirildi. Qolgan erimaydigan fraktsiya 3075 × g da 15 daqiqa davomida santrifüjlash orqali olib tashlandi. Liyofilizatsiya supernatantda amalga oshirildi, u foydalanishdan oldin -20 ◦C da saqlanadi.

3.3. RPHlarning antioksidant faolligi

3.3.1. Jami fenolik konsentratsiya (TPC)

RPH larning TPC ni aniqlash uchun Folin-Ciocalteu usuli qo'llanildi [59].Birinchi navbatda, 200 mkl Folin-Ciocalteu fenol reaktivi (0,3M) 200 daqiqa chayqatish orqali5-bir xilda aralashtirildi. µL RPH eritmasi va bu aralashmaga 400 µL deionizatsiyalangan (DI) suv va 200 µL 10% (w/v) natriy karbonat eritmasi qo‘shildi. Aralashtirilgan eritma xona haroratida qorong'ida 60 daqiqa inkubatsiyadan o'tkazildi. Keyin 3000 rpm tezlikda 15 daqiqa davomida santrifüj qilindi. O'lchov uchun 100 µL supernatant ishlatilgan. Quruq RPH namunasi (birlik: mg GAE/g RPH) uchun gallik kislota ekvivalentining (GAE) TPC (birlik: mg) ni aniqlash uchun optik absorbsiya ma'lumotlari gallik kislotani ifodalovchi standart egri chiziqqa kiritildi. Absorbans EpochMicroplate Spektrofotometri (BioTek, VT, AQSh) yordamida 700 nm da olingan.

3.3.2. Jami flavonoid tarkibi (TFC)

TFC Wathoni va boshqalarning yondashuvidan keyin olingan. kichik o'zgartirishlar bilan [60]. Birinchidan, namunaning har biri 500 µL va alyuminiy xloridning 2 foizli eritmasi aralashtirildi. Reaksiya eritmasi yaxshilab aralashtirildi va 10 daqiqaga qoldirildi va 415 nm absorbans darajasi baholandi. Natija quruq RPH namunasining grammiga (µg QE/g RPH) kversetin ekvivalentining mikrogramlarida (QE) xabar qilinadi.

cistanche bodibilding

3.3.3. DPPH erkin radikallarni tozalash faoliyati

Birinchidan, 198 mkM DPPH etanol eritmasi (5 0 mkl) va RPH eritmasi yoki DI suvi (mos ravishda 0,5 mkL; namuna va nazorat) aralashtirildi va keyin xona haroratida 30 daqiqa qorong'ilikda turishiga ruxsat berildi. Eritmaning 517 nm yutuvchanligi keyinchalik olindi. Nisbiy tozalash faolligi namuna va nazorat o'rtasidagi absorbans farqini aniqlash orqali hisoblangan. Yuqori DPPH erkin radikallarni tozalash faolligi past optik absorbans bilan aks ettirilgan. RPH eritmasining DPPH erkin radikallarni tozalash faolligini baholashda standart S vitamini ishlatilgan [61-63].

3.3.4. ABTS erkin radikallarini tozalash faoliyati

Wu va boshqalar tomonidan bildirilgan yondashuv. RPH eritmasining antioksidant faolligini baholash uchun ishlatilgan [64]. Birinchidan, 7 mM ABTS eritmasi (25{8}} µL) 2,45 mM kaliy persulfat (250 mkl) bilan reaksiyaga kirishib, ABTS erkin radikal kationini (ABTS• plus ) hosil qildi, aralashma saqlanib qoldi. 16 soat davomida 4 ◦C da zulmatda ishlatishdan oldin. Xona haroratida zulmatda muvozanatlashgandan so'ng, eritmani 734 nm da 0,70 ± 0,02 absorbansga suyultirish uchun 0,1 M fosfat tamponli sho'r suv (PBS; pH 7,4) qo'llanildi. Keyin 180 µL suyultirilgan ABTS eritmasiga 20 µL Trolox (ijobiy nazorat) yoki RPH eritmasi (namuna) qo‘shiladi. Keyin aralash 10 daqiqa xona haroratida inkubatsiyaga o'tkazildi. Ushbu tadqiqot 734 nm da optik absorbansni aniqladi; pastroq absorbans ABTS erkin radikallarini tozalash faolligiga mos keladi. RPHsolutionning ABTS erkin radikallarini tozalash faolligini baholash uchun standart Trolox antioksidanti edi.

3.3.5. Imkoniyatlarni kamaytirish

Temirni kamaytiruvchi antioksidant quvvat tahlili RPHsolutionning umumiy antioksidant faolligini aniqlash uchun ishlatilgan. Lin va boshqalar xabar berganidek. [29], RPH eritmasi (200 µL) 1 foizli (g/v) K3Fe(CN)6 va 0,2 M PBS buferi (pH 6,6; har biri 100 µL) bilan bir xilda aralashtirilgan. .20 daqiqa davomida aralashmani isitish uchun 50 ◦C suv hammomi ishlatilgan; Vannadan aralashmani olib tashlangandan so'ng, u 3 daqiqa davomida tez sovutiladi. Keyinchalik, 10% (w/v) trikloroasetik kislota (100 µL) qo‘shildi va 3000 rpm tezlikda 10-min. santrifüjlash amalga oshirildi. Shundan so‘ng supernatant (400 mkl) ekstraksiya qilindi va uni 0 bilan bir xilda aralashtirish amalga oshirildi. 1 foiz (g/v) FeCl3 (100 µL) va DI suv (400 µL). Fe4[Fe(CN)6]3 bu aralashmaning qorong'uda10-minimum reaksiyasi natijasida olindi. Keyinchalik, yuqori optik absorbans (700 nm da o'lchangan) yuqori pasayish qobiliyatini ko'rsatdi. Standart C vitamini har bir gramm RPH uchun vitamin C ekvivalentini (VCE) aniqlash uchun ishlatilgan.

3.3.6. Kislorod radikalini yutish qobiliyati (ORAC)

Ushbu tadqiqot ORACni ilgari xabar qilingan usulni o'zgartirish orqali oldi [65]. RPH namunasi distillangan suvda eritilgandan so'ng, RPH eritmasi (50 µL) 96-quduq mikrotitr plastinkasida flüoresein (10 mkM) bilan aralashtirildi. Eritma 37 ◦C da 15-daqiqa inkubatsiyadan oʻtkazildi, soʻngra 50 µL AAPH (500 mM) qoʻshildi. Har 5 daqiqada va jami 120 daqiqada floresans qayd etildi (mos ravishda λex va lem=485 va 528 nm). RPHlarning antioksidant qobiliyati egri chiziq ostidagi maydonni (AUC) hisoblash orqali floresan parchalanish kinetikasidan aniqlandi. ). RPH ORAC ni hisoblashda standart 15–250 µM Trolox edi. ORAC quruq RPH namunasining Trolox ekvivalenti (TE) pergramining mikromollari (µmol TE/g RPHs) sifatida xabar qilinadi.

3.4. Gialuronidazani inhibe qiluvchi faollik

Gialuronidazani inhibe qilish testi {{0}}quduq mikroplastinkasi va avval xabar qilingan usul yordamida, biroz oʻzgartirishlar [40] yordamida amalga oshirildi. N-asetilglyukosamin gialuronidazani HA substrati bilan reaksiyaga kirishishi natijasida chiqarilgan. Har qanday ingibitor ishtirokida N-asetilglyukozaminning chiqarilishi pasaygan, bu ajralib chiqish 600-nm absorbansni olish orqali aniqlanadi. HA 1 M asetat buferi (pH 3,9) va sigir zardobi albuminidan (1 mg/ml) tashkil topgan kislotali albumin eritmasi bilan cho'ktirildi. Namuna eritmasi va 5 mg/ml gialuronidaza 37 ◦C da 20-daqiqa inkubatsiyadan o‘tkazildi. Keyinchalik inkubatsiya aralashmasiga HA (1{{20}}0 mL; 0,1 M asetat tamponida 5,0 mg/mL) qo'shildi. Keyingi inkubatsiya 37 ◦C da 40 daqiqa davomida amalga oshirildi. Enzimatik reaktsiyani to'xtatish uchun 0,1 ml 0,4 M ishqoriy borat eritmasi qo'shildi.

3.5. Tirozinazani inhibe qiluvchi faollik

Ushbu tadqiqot RPH ning antitirozinaz faolligini o'zgartirishlar bilan ilgari xabar qilingan protokol yordamida baholadi [66]. Ferment eritmasi (135 U/ml) tirozinazani 20 mM fosfat tamponida (pH 6,8) eritish orqali tayyorlangan. Bundan tashqari, DIwater 1,25 mM L-DOPA eritmasini tayyorlash uchun ishlatilgan. Keyin 40 mkl turli konsentratsiyali RPH namunasi eritmasi 40 mkl tirozinaz eritmasi va 120 mkl L-DOPA eritmasi bilan aralashtirildi. 30 daqiqa davomida bu aralashma 37 ◦C da RPH ning inhibisyon testida saqlanadi.tirozinazafaoliyat. 475-nm absorbansni olish uchun spektrofotometr (FLUOstar Omega MicroplateReader, BMG Labtech GmbH, Germaniya) ishlatildi. Barcha o'lchovlar uch marta amalga oshirildi. Tegishli guruhning absorbsiyasi qachontirozinazamavjud emas edi ayirildi. Fermentning inhibisyon darajasi quyidagicha aniqlandi

3.6. RPH ning xarakteristikasi

3.6.1. Aminokislota profillari

Ushbu tadqiqot RPHlarning aminokislotalar tarkibini aniqladi. Birinchidan, 24 soat va 115 ◦C da namunalarni evakuatsiya qilingan muhrlangan naychalarda gidrolizlash uchun 4 M metansülfonik kislota ishlatildi. Ikkita Waters 51{9}} erituvchi yetkazib berish tizimi va aminokislota analizatori (L 8900; Hitachi, Tokio, Yaponiya) 25 m oʻlchamdagi aSpherisorb ODS2 ustunida hosilalangan aminokislotalarni ajratish uchun ishlatilgan. × 64,6 mm. Ushbu tadqiqotda quyidagi erituvchilar qo'llanildi: (a) natriy asetat (0,14 M) va trietilamin (850 µL/L; pH 5,6) va (b) 60 foiz asetonitril, ular uchun gradient 2 daqiqa davomida 0 foizni tashkil etdi; 15,5 daqiqa davomida 0–42 foiz (qavariq egri); 4 minut davomida 100 foiz. 254 nm [67,68] da aminokislotalar profillarini o'lchash uchun ikki nusxadagi namunalar olindi.

3.6.2. Proteinning molekulyar og'irligi (MW).

Schägger usuli [69] ga muvofiq va kamaytiruvchi sharoitlarda bu tadqiqot trisin-natriy dodesil sulfat (SDS)-poliakrilamidgel elektroforezi (PAGE) orqali kichik oʻzgarishlar bilan MVt taqsimotini oldi. Namuna buferi (30 g/L SDS, 0,375 MTris-HCl, 0,125 g/L Coomassie Brilliant Blue G-250 va 75 g/ L glitserin; pH 7) muzlatilgan quritilgan namunani tarqatish uchun ishlatildi, keyin yuklashdan oldin santrifüj qilindi. 1 ml trisin-SDS-PAGE namunasiga jami 20 µL 2-merkaptoetanol qo‘shildi. Namuna 90 soniya davomida 100 ◦C da qizdirildi. Namuna qudug'iga mikroshprits yordamida har bir namuna va Unstained Protein Standard Broad Range (Bio-Rad Laboratories, Germaniya) yuklangan. Keyin elektroforez amalga oshirildi - birinchi navbatda doimiy 30 mV da butun namuna stacking gel ichida bo'lgunga qadar va so'ngra doimiy 100 mVda tugaguncha. Keyinchalik, jelni bo'yash uchun 0,02 foizli Coomassie Brilliant Blue R-250 eritmasi qo'llanildi. Jellarning mutlaq fonini yo'qotish jellarni bir kechada 10% sirka kislotasida silkitish orqali amalga oshirildi. Nihoyat, yo'laklardagi oqsil tasmalarini aniqlash uchun jel tasviri tahlil qilindi; bu tahlil ImageJ (USNational Institutes of Health, Bethesda, MD, AQSH) da amalga oshirildi. MVt baholangan kalibrlash egri chizig'ini olish uchun standart markerlardan foydalanilgan. Qisqacha aytganda, birinchi qadam ajratuvchi jelning yuqori qismidan har bir bandning migratsiya uzunligini (Rf) aniqlash edi. Ushbu ikkinchi qadam Rf va log (MW) dan ma'lum MVt bilan standart markerdan foydalangan holda kalibrlash egri chizig'ini hisoblash edi. MVtni aniqlash RPH larda Rf ofprotein bantlari yordamida amalga oshirildi.

3.7. Sitotoksiklik tahlili

Xom 264,7 hujayra yuqori glyukozali Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) da 1{28}}% xomilalik sigir zardobi (FBS), 4,5 g/L glyukoza, 1% antibiotik eritmasi (100 birlik/)da yetishtirildi. ml penitsillin va 100 mkg/ml Streptomitsin), 4 mM L-glutamin va 1,5 g/lnatriy bikarbonat 37 ◦C va 5 foiz CO2. RPHs uchun xom 264,7 hujayraning hujayra toksikligi 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5 difenil-tetrazolium bromid (MTT) proliferatsiyasini tahlil qilish usuli bilan o'lchandi. . Har bir quduqqa taxminan 1 × 104 hujayra 96-quduq plastinkalariga qo'yildi. 24 soatdan so'ng hujayralarga turli konsentratsiyali RPH (0–2000 mkg/ml) qo'shildi. 24 va 48 soatlik inkubatsiyadan keyin 100 µL MTT eritmasi (0,5 mg/ml) qo‘shildi. Mikroskop ostida tekshirilganda ko'k formazankristallar kuzatilgan. DMEM olib tashlandi va har bir quduqqa 100 mL dimetil sulfoksid (DMSO) qo'shildi. Absorbans mikrotitr plastinka o'quvchi yordamida o'lchandi. Keyin hujayra hayotiyligi (foiz) [A570 (davolangan hujayralar) - A570 (fon)] / [A570 (davolanmagan hujayralar) - A570 (fon)] × 100 foiz [70] sifatida hisoblangan.

3.8. Statistik tahlil

Har bir gidrolizat namunasi uchun hisobot uchta mustaqil takroriy tajriba va aniqlashning o'rtacha qiymati edi. O'rtacha ± standart og'ish (SD) bilan ifodalangan natijalar StatisticalAnalysis System (20.0; SPSS, Armonk, NY, AQSH) yordamida bir tomonlama ANOVA va Dunkanning post hoc testi orqali tahlil qilindi. P<0,05 qiymatlari="" statistik="" ahamiyatga="" ega="" deb="">

4. Xulosalar

Ushbu tadqiqot RPH funktsiyalarini o'rganib chiqdi. Eksperimental natijalar shuni ko'rsatdiki, RPHlar fenolik birikmalar va flavonoidlarni o'z ichiga oladi va DPPH va ABTSni tozalash, kamaytirish qobiliyati va ORAC kabi bir qator antioksidant faollikni namoyish etdi. Bundan tashqari, RPHlar samarali ravishda inhibe qilinaditirozinazava gialuronidaza faolligi. Proteaz RPH ning MW naqshlariga ta'sir qiluvchi muhim omil edi. RPH tahlili ularning kosmetika tarkibiy qismi sifatida foydalanish imkoniyatlarini ko'rsatadi.

cistanche bodibilding

Ma'lumotnomalar

1. Ichixashi, M.; Ando, ​​X.; Yoshida, M.; Niki, Y.; Matsui, M. Terining fotosurati. Qarishga qarshi Med. 2009, 6, 46–59. [CrossRef]

2. Kim, J.-S.; Kim, D.; Kim, H.-J.; Jang, A. Eshak terisi jelatin gidrolizatlarining inson terisi fibroblastlarining UVB-induktsiyali fotoagingga himoya ta'siri. Jarayon. Biokimyo. 2018, 67, 118–126. [CrossRef]

3. Karocho, M.; Ferreira, IC Antioksidantlar, prooksidantlar va tegishli qarama-qarshiliklar bo'yicha sharh: Tabiiy va sintetik birikmalar, skrining va tahlil usullari va kelajak istiqbollari. Oziq-ovqat kimyosi. Toksikol. 2013, 51, 15–25. [CrossRef]

4. Guo, X.; Chjan, J.; Ma, Y.; Tian, ​​S. Guruch qoldig'ida oqsillarning cheklangan gidrolizini optimallashtirish va mahsulotlarning funktsional xususiyatlarini tavsiflash. J. Food Proc. saqlanish. 2013, 37, 245–253. [CrossRef]

5. Park, H.-Y.; Li, K.-V.; Choy, H.-D. Guruch kepagi tarkibiy qismlari: Immunomodulyator va terapevtik faoliyat. Oziq-ovqat funktsiyasi. 2017, 8935–943. [CrossRef] [PubMed]

6. Chjou, K.; Konserva, C.; Quyosh, S. Mikrobial proteazlar va ultrafiltratsiya bilan tayyorlangan guruch oqsili gidrolizatlarining erkin radikallar va go'sht lipidlari oksidlanishiga ta'siri. LWT 2013, 50, 331–335. [CrossRef]

7. Piu', LD; Tassoni, A.; Serrazanetti, DI; Ferri, M.; Babini, E.; Tagliazucchi, D.; Gianotti, A. Guruch gidrolizlangan oqsillardan bioaktiv peptidlarni ishlab chiqarish uchun kraxmal sanoati suyuq mahsulotidan foydalanish. Oziq-ovqat kimyosi. 2014, 155, 199–206. [CrossRef]

8. Ferri, M.; Graen-Xedfeld, J.; Brets, K.; Guillon, F.; Mishelini, E.; Kalabretta, MM; Lamborghini, M.; Gruarin, N.; Roda, A.;Kraft, A.; va boshqalar. Ekologik toza jarayon orqali guruchning qo'shimcha mahsulotlaridan olingan peptid fraktsiyalari VitroSalomatlik bilan bog'liq bioaktivliklarni namoyish etadi. PLOS ONE 2017, 12, e0170954. [CrossRef]

9. Ven, C.; Chjan, J.; Chjan, X.; Duan, Y.; Ma, H. O'simlik oqsilidan olingan antioksidant peptidlar: izolyatsiya, identifikatsiya, ta'sir mexanizmi va oziq-ovqat tizimlarida qo'llanilishi: sharh. Trends Food Sci. Technol. 2020, 105, 308–322. [CrossRef]

10. Felan, M.; Aherne, A.; FitzJerald, RJ; O'Brien, NM Kazeindan olingan bioaktiv peptidlar: biologik ta'sirlar, sanoat maqsadlarida foydalanish, xavfsizlik jihatlari va tartibga solish holati. Int. Sut mahsulotlari J. 2009, 19, 643–654. [CrossRef]

11. Udenigve, CC; Aluko, RE Oziq-ovqat oqsilidan olingan bioaktiv peptidlar: ishlab chiqarish, qayta ishlash va sog'liq uchun potentsial foyda. J.Food Sci. 2012, 77, 11–24. [CrossRef] [PubMed]

12. Fardet, A.; Rok, E. Sut, yogurt, fermentlangan sut va pishloqlarning in vitro va in vivo antioksidant salohiyati: dalillarni tahlil qilish. Nutr. Res. Vahiy 2018, 31, 52–70. [CrossRef]

13. Leach, JB; Katrin, AB; Charlz, WPJ; Christine, ES Fotokross-bog'langan gialuron kislotasi gidrogellari: Tabiiy, biologik parchalanadigan to'qimalarni muhandislik iskalalari. Biotexnologiya. Bioeng. 2003, 82, 578–589. [CrossRef]

14. Jegasoti, SM; Zabolotniaia, V.; Bielfeldt, S. Odamlarda yangi dolzarb nano-gialuron kislotasining samaradorligi. J. Klin. Estetik.Dermatol. 2014, 7, 27–29.

15. Ndlovu, G.; Fuche, G.; Tselanyane, M.; Kordier, V.; Steenkamp, ​​V. In vitro to'rtta janubiy Afrika dorivor o'simliklarining qarishga qarshi salohiyatini aniqlash. BMC qo'shimchasi. Muqobil. Med. 2013, 13, 304. [CrossRef]

16. Jiratchayamaethasaqul, C.; Ding, Y.; Xvan O.; Im, S.-T.; Jang, Y.; Myung, S.-V.; Li, JM; Kim, H.-S.; Ko, S.-C.; Li, S.-H. In vitro elastaz, kollagenaza, gialuronidaza va tirozinazni inhibe qiluvchi va yangi kosmetsevtika uchun 22 ta halofiteplant ekstraktining antioksidant faolligini tekshirish. Baliq. Aquat. Sci. 2020, 23, 1–9. [CrossRef]

17. Kang, M.; Park, S.-H.; Oh, SW; Li, SE; Yo, JA; Nho, YH; Li, S.; Xan, BS; Cho, JY; Li, J. Rezorsinolning anti-melanogen ta'siri cAMP signalizatsiyasini bostirish va p38 MAPK signalizatsiyasini faollashtirish orqali amalga oshiriladi. Biosci. Biotexnologiya. Biochem.2018, 82, 1188–1196. [CrossRef]

18. Chatatikun, M.; Yamauchi, T.; Yamasaki, K.; Aiba, S.; Chiabchalard, A. Croton roxburghii va Crotonsublyratus barglarining antimelanogen ta'siri -MSH rag'batlantirdi B16F10 hujayralari. J. Tradit. To'ldiruvchi. Med. 2019, 9, 66–72. [CrossRef] [PubMed]

19. Rizzello, CG; Nionelli, L.; Koda, R.; Gobbetti, M. Xamir fermentatsiyasi paytida sut kislotasi bakteriyalari tomonidan saraton profilaktikasi peptid lunasin sintezi. Nutr. Saraton 2012, 64, 111-120. [CrossRef] [PubMed]

20. Rizzello, CG; Tagliazucchi, D.; Babini, E.; Rutella, GS; Saa, DLT; Gianotti, A. Sabzavotli oziq-ovqat matritsalaridan bioaktiv peptidlar: Sintez va tiklanish uchun tadqiqot tendentsiyalari va yangi biotexnologiyalar. J. Funksiya. Oziq-ovqatlar 2016, 27, 549–569. [CrossRef]

21. Coscueta, ER; Kampos, DA; Osorio, X.; Nerli, BB; Pintado, M. Enzimatik soya oqsili gidrolizi: biofunktsional oziq-ovqat tarkibiy qismlarini ishlab chiqarish uchun vosita. Oziq-ovqat kimyosi. X 2019, 1, 100006. [CrossRef]

22. Aydemir, LY; Yemenicioglu, A. Aysbergning ko'rinmaydigan qismidagi pulslarda oqsil bilan bog'langan fenolik antioksidantlar bormi? J. Zavod. Biokimyo.Fiziol. 2013, 1, 1–3. [CrossRef]

23. Huang, SH; Ng, LT. Tayvandagi ba'zi tijorat guruch navlarining polifenol tarkibi va bioaktiv tarkibiy qismlarining miqdori. J. Oziq-ovqat kompozitsiyasi. Analiz. 2012, 26, 122–127. [CrossRef]

24. Yoshitomi, K.; Taniguchi, S.; Tanaka, K.; Uji, Y.; Akimitsu, K.; Gomi, K. Rays terpen sintaza 24 (OsTPS24) guruch patogeniga qarshi antibakterial -terpinen ishlab chiqaradigan jasmonat sezgir monoterpen sintazasini kodlaydi. J. Zavod. Fiziol. 2016, 191,120–126. [CrossRef]

25. Kamolsukyeunyong, V.; Suxaket, V.; Pitija, K.; Torngkham, P.; Mahathiranont, S.; Toojinda, T.; Vanavichit, A. RaysSesquiterpene Guruchdagi jigarrang Planthopperga qarshi antiksenozda muhim rol o'ynaydi. O'simliklar 2021, 10, 1049. [CrossRef][PubMed]

26. Liu, Y.; Vang, Z.; Li, H.; Liang, M.; Yang, L. Guruch oqsilining in vitro antioksidant faolligi ishqoriy daraja va oshqozon-ichak proteazining hazm bo'lishidan ta'sirlanadi. J. Sci. Oziq-ovqat qishloq xo'jaligi. 2016, 96, 4940–4950. [CrossRef] [PubMed]

27. Phongthai, S.; D'Amiko, S.; Schoenlechner, R.; Xomtavornchoo, V.; Rawdkuen, S. In vitro gastrointestinal hazm qilish orqali rag'batlantirilgan guruch kepagi oqsillari gidrolizatlarining fraksiyasi va antioksidant xususiyatlari. Oziq-ovqat kimyosi. 2018, 240, 156–164. [CrossRef][PubMed]

28. Huang, S.-L.; Vang, V.-H.; Zhong, X.-Y.; Lin, C.-T.; Lin, V.-S.; Chang, M.-Y.; Lin, Y.-S. Jatropha curcas L.Seed Shell va yadro ekstraktining antioksidant xususiyatlari. Ilova. Sci. 2020, 10, 3279. [CrossRef]

29. Lin, Y.-S.; Lin, V.-S.; Tung, J.-V.; Cheng, Y.-C.; Chang, M.-Y.; Chen, C.-Y.; Huang, S.-L. Jujube mevalari urug'lari va qobig'i pulpasining antioksidant imkoniyatlari. Ilova. Sci. 2020, 10, 6007. [CrossRef]

30. Shohi, Z.; Sayyid-Alangi, SZ; Najafian, L. Ferment turi va jarayon vaqtining gidroliz darajasiga ta'siri, yog'siz Bunium persicum Biossdan olingan gidrolizlangan oqsillarning elektroforez tasmasi va antioksidant xususiyatlari. tortni bosing. Heliyon 2020, 6,e03365. [CrossRef] [PubMed]

31. Xie, X.; Xuan, J.; Vu, MVt; Xu, J.; Xiong, X.; Zhao, Q. Sovuq va issiq fermentlarni deaktivatsiya qilishning guruchli oqsil gidrolizatlarining strukturaviy va funktsional xususiyatlariga ta'siri. Oziq-ovqat kimyosi. 2021, 345, 128784. [CrossRef]

32. Rani, S.; Puja, K.; Pal, GK. Guruch oqsili gidrolizatlari va peptidlarini antioksidant potentsialga maxsus havola bilan o'rganish: Biologik faollikni aniqlash uchun hisoblash usuli. Trends Food Sci. Technol. 2018, 80, 61–70. [CrossRef]

33. Bisbi, RH; Bruk, R.; Navaratnam, S. Kislorod radikalini yutish qobiliyati (ORAC) tahlilida antioksidant oksidlanish potentsialining ta'siri. Oziq-ovqat kimyosi. 2008, 108, 1002–1007. [CrossRef]

34. Elias, RJ; Kellerbi, SS; Decker, E. Proteinlar va peptidlarning antioksidant faolligi. Krit. Rev. Food Sci. Nutr. 2008, 48, 430–441.[CrossRef] [PubMed]

35. Mine, Y.; Li-Chan, E.; Jiang, B. (Eds.) Funktsional oziq-ovqat va ozuqaviy moddalar sifatida bioaktiv oqsillar va peptidlar; Wiley-Blackwell: Xoboken, NJ, AQSh, 2010; 29–42-betlar.

36. Adebiyi, AP; Adebiyi, AO; Yamashita, J.; Ogava, T.; Muramoto, K. Guruch kepagi oqsili gidrolizatlaridan olingan antioksidant peptidlarni tozalash va tavsiflash. Yevro. Oziq-ovqat Res. Technol. 2008, 228, 553–563. [CrossRef]

37. Thamnarathip, P.; Jangchud, K.; Nitisinprasert, S.; Vardhanabhuti, B. Yuqori antioksidant faollikka ega guruch kepagi protein gidrolizatidan peptid molekulyar og'irligini aniqlash. J. Yorma fanlari. 2016, 69, 329–335. [CrossRef]

38. Tacias-Paskacio, VG; Morellon-Sterling, R.; Siar, E.-H.; Tavano, O.; Berenguer-Mursiya, A.; Fernandez-Lafuente, R. Alkalazadan bioaktiv peptidlarni ishlab chiqarishdan foydalanish: sharh. Int. J. Biol. Makromol. 2020, 165, 2143–2196. [CrossRef] [PubMed]

39. Sarringkarin, V.; Laokuldilok, T. Antioksidlovchi xususiyatlarga ega glyutinli guruch kepagi oqsil gidrolizatini ishlab chiqarish sharoitlarini optimallashtirish. CMU J. Nat. Sci. 2017, 16, 1–18. [CrossRef]

40. Chjan Q.; Tong, X.; Qi, B.; Vang, Z.; Li, Y.; Sui, X.; Jiang, L. Simulyatsiya qilingan gastrointestinal hazm qilish va transepitelial tashish ostida Alkalaz gidrolizlangan soya fasulyesi gidrolizatining antioksidant faolligidagi o'zgarishlar. J. Funksiya. Oziq-ovqatlar 2018, 42, 298–305. [CrossRef]

41. Tu, PTB; Tawata, S. Alpinia zerumbetning ikki navidan olingan efir moylarining anti-oksidant, qarishga qarshi va anti-melanogen xususiyatlari. Molekulalar 2015, 20, 16723–16740. [CrossRef]

42. Nishida, Y.; Sugahara, S.; Vada, K.; Toyoxisa, D.; Tanaka, T.; Ono, M.; Yasuda, S. Scilla scilloides lampochkalaridan etil asetat ekstraktining lipoksigenaza va gialuronidaza faoliyatiga inhibitiv ta'siri. Farm. Biol. 2014, 52, 1351–1357. [CrossRef]

43. Chen, H.-J.; Dai, F.-J.; Fan, S.-L.; Huang, Y.-C.; Chau, C.-F.; Lin, Y.-S.; Chen, C.-S. Rays (Oryza sativa L.) oqsil gidrolizatining gialuronidaza inhibisyonining kinetikasi. Ilova. Sci. 2020, 10, 9087. [CrossRef]

44. Girish, K.; Kemparaju, K. Sehrli elim gialuronan va uning o'chirgichi gialuronidaza: biologik nuqtai nazar. Hayot fanlari. 2007, 80,1921–1943. [CrossRef] [PubMed]

45. Zolgadri, S.; Bahromiy, A.; Xan, MTH; Munoz-Munoz, J.; Garsiya-Molina, F.; Garsiya-Kanovas, F.; Saboury, AA Tirozinaz inhibitörleri bo'yicha keng qamrovli sharh. J. Enzim. Inhib. Med. Kimyo. 2019, 34, 279–309. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Seo, EJ; Hong, ES; Choi, MH; Kim, KS; Li, SJ Rhamnus yoshinoi ekstraktining antioksidant va terini oqartiruvchi ta'siri. KoreyalikJ. Oziq-ovqat fanlari. Technol. 2010, 42, 750–754.

47. Ochiai, A.; Tanaka, S.; Tanaka, T.; Taniguchi, M. Guruch kepagi oqsili tirozinazni inhibe qiluvchi faollik bilan antimelanogen peptidlarning kuchli manbai sifatida. J. Nat. Prod. 2016, 79, 2545–2551. [CrossRef] [PubMed]

48. Kubglomsong, S.; Theerakulkait, C.; Reed, RL; Yang, L.; Maier, CS; Stivens, JF Gidrolizlangan guruch kepagidan olingan albumindan tirozinaz inhibitori va mis-xelatlovchi peptidlarni izolyatsiya qilish va identifikatsiya qilish. J. Agrik. Oziq-ovqat kimyosi. 2018, 66, 8346–8354.[CrossRef]

49. Shurink, M.; van Berkel, WJ; Vichers, H.; Boeriu, CG tirozinaz inhibitiv faolligi bilan yangi peptidlar. Peptidlar 2007, 28,485–495. [CrossRef]

50. Ishikava, M.; Kavase, I.; Ishii, F. Aminokislotalarning kombinatsiyasi B16F0 melanoma hujayralarida pigmentatsiyani kamaytiradi. Biol. Pharm.Bull. 2007, 30, 677–681. [CrossRef] [PubMed]

51. Chjan, R.; Vey, Y.; Li, M.; Cai, M.; Gu, R.; Ma, Y.; Chen, L.; Vang, J. Guruch oqsili gidrolizatining melanogenez ta'siri va uning xarakterli peptidlari Leu-Leu-Lys, Leu-Pro-Lys va pyroGlu-Lys UVB tomonidan qo'zg'atilgan inson epidermal melanotsit hujayralariga. FoodFunct. 2020, 11, 8757–8767. [CrossRef]

52. Vang, Y.; Cai, D.; U, M.; Vang, Z.; Qin, P.; Tan, T. Oq guruch kepagi yordamida bir vaqtning o'zida saccharifikatsiya va fermentatsiya yordamida l -laktik kislotaning ochiq fermentativ ishlab chiqarilishi. Bioresur. Technol. 2015, 198, 664–672. [CrossRef] [PubMed]

53. Pan, M.; Jiang, TS; Pan, JL kolza oqsili gidrolizatlarining antioksidant faolligi. Oziq-ovqat bioprotsessi. Technol. 2009, 4, 1144–1152.[CrossRef]

54. Chen, HM; Muramoto, K.; Yamauchi, F.; Nokihara, K. Soya oqsilining hazm bo'lishidan ajratilgan antioksidant peptidga asoslangan ishlab chiqilgan peptidlarning antioksidant faolligi. J. Agrik. Oziq-ovqat kimyosi. 1996, 44, 2619–2623. [CrossRef]

55. Liu, Q.; Kong, B.; Xiong, YL; Xia, X. Antioksidant faolligi va gidroliz darajasidan ta'sirlangan cho'chqa plazma oqsili gidrolizatining funktsional xususiyatlari. Oziq-ovqat kimyosi. 2010, 118, 403–410. [CrossRef]

56. Lemes, A.; Sala, L.; Rudalar, JDC; Braga, ARC; Egea, MB; Fernandes, KF Proteinga boy chiqindilardan shifrlangan bioaktiv peptidlarning so'nggi yutuqlarini ko'rib chiqish. Int. J. Mol. Sci. 2016, 17, 950. [CrossRef] [PubMed]

57. Vang, J.-S.; Chjao, M.-M.; Chjao, Q.-Z.; Jiang, Y.-M. Turli oksidlanish tizimlarida bug'doy kleykovinasining papain gidrolizatlarining antioksidant xususiyatlari. Oziq-ovqat kimyosi. 2007, 101, 1658–1663. [CrossRef]

58. Gao, M.-T.; Kaneko, M.; Xirata, M.; Toorisaka, E.; Hano, T. Guruch kepagidan fermentativ sut kislotasi ishlab chiqarish uchun ozuqa manbai sifatida foydalanish. Bioresur. Technol. 2008, 99, 3659–3664. [CrossRef] [PubMed]

59. Huang, WY; Lin, YR; Xo, RF; Liu, HY; Lin, YS Suv eritmalarining yashil choy barglarini ekstraktsiyasiga ta'siri. Sci. Jahon J. 2013, 2013, 368350. [CrossRef]

60. Vatoni, N.; Shan, CY; Shan, WY; Rostinavati, T.; Indradi, RB; Prativi, R.; Muchtaridi, M. Indoneziya mangostinining (Garcinia mangostana L.) qobig'idan pektinning xarakteristikasi va antioksidant faolligi. Heliyon 2019, 5, e02299. [CrossRef]

61. Tsay, C.-C.; Chan, C.-F.; Huang, W.-Y.; Lin, J.-S.; Chan, P.; Liu, H.-Y.; Lin, Y.-S. Lactobacillus rhamnosus SpentCulture supernatantining kosmetik antioksidlanish, oqartirish va namlikni saqlash dasturlarida qo'llanilishi. Molekulalar 2013, 18, 14161–14171.[CrossRef]

62. Huang, W.-Y.; Li, P.-C.; Xsu, J.-C.; Lin, Y.-R.; Chen, H.-J.; Lin, Y.-S. Suv sifatining Yerba Mate ExtractPowders eritmasiga ta'siri. Sci. Jahon J. 2014, 2014, 1–6. [CrossRef] [PubMed]

63. Chan, C.-F.; Vu, C.-T.; Huang, W.-Y.; Lin, V.-S.; Vu, H.-V.; Huang, T.-K.; Chang, M.-Y.; Lin, Y.-S. Har xil Dendrobium tosaense ekstraktlarining antioksidlanish va melanogenezni inhibe qilish. Molekulalar 2018, 23, 1810. [CrossRef] [PubMed]64. Vu, C.-T.; Agraval, Kolumbiya okrugi; Huang, W.-Y.; Xsu, H.-C.; Yang, S.-J.; Huang, S.-L.; Lin, Y.-S. Gidrotermal usul bilan olingan sarflangan qahva maydalangan ekstraktlarning funksionallik tahlili. J. Chem. 2019, 2019, 1–8. [CrossRef]

65. Dorta, E.; Rodriges-Rodriges, EM; Ximenes-Kezada, A.; Fuentes-Lemus, E.; Speiskiy, X.; Lissi, E.; Lopez-Alarkon, C. Mango (Mangifera indica L.) qo'shimcha mahsulotlarning go'sht oqsili oksidlanishini inhibe qilish qobiliyatini bashorat qilish uchun kislorodning radikal yutilish sig'imi (ORAC) tahlilidan foydalanish. Oziq-ovqat anal. Usullar 2016, 10, 330–338. [CrossRef]

66. Lin, Y.-S.; Chen, H.-J.; Huang, J.-P.; Li, P.-C.; Tsay, C.-R.; Xsu, T.-F.; Huang, W.-Y. Vitis vinifera barglari ekstrakti yordamida tirozinazni inhibe qiluvchi faollikning kinetikasi. BioMed Res. Int. 2017, 2017, 5232680. [CrossRef] [PubMed]

67. Bidlingmeyer, BA; Koen, SA; Tarvin, TL Kolonnadan oldingi derivatizatsiya yordamida aminokislotalarning tezkor tahlili. J. Xromatogr. BBiomed. Sci. Ilova. 1984, 336, 93–104. [CrossRef]

68. Asai, TT; Oikava, F.; Yoshikava, K.; Inoue, N.; Sato, K. Oziq-ovqatdan olinadigan kollagen peptidlari, prolil-gidroksiprolin (Pro-Hyp) va gidroksiprolil-glisin (gip-glisin) homila sigir zardobini gidroksiprolildan xoli ishlatib, birlamchi madaniy sichqon teri fibroblastining o'sishini kuchaytiradi. Int. J. Mol. Sci. 2019, 21, 229. [CrossRef]

69. Schägger, H. Tricine – SDS – PAGE. Nat. Protok. 2006, 1, 16–22. [CrossRef]

70. Diao, J.; Chi, Z.; Guo, Z.; Chjan, L. Mung loviya oqsili gidrolizati NF-kB yo'li inlipopolisakkaridlari bilan stimulyatsiya qilingan RAW 264.7 makrofaglari orqali immun javobini modulyatsiya qiladi. J. Oziq-ovqat fanlari. 2019, 84, 2652–2657.[CrossRef]