Kosmetika sanoatida ko'p funktsiyali bo'yoqlar sifatida gul ekstrakti 2-qism

Iltimos, murojaat qilingoscar.xiao@wecistanche.comqo'shimcha ma'lumot uchun

Ko'pgina tabiiy mahsulotlar an'anaviy tibbiyot tizimlarida og'riq va yallig'lanish alomatlarini engillashtirish uchun ishlatiladi [61], shuning uchun tahlil qilingan ekstraktlarning lipoksigenaza va proteinaz faolligini inhibe qilishga ta'siri o'rganildi. Tahlil qilingan konsentratsiyalar oralig'ida (100-500 ug/ml), CTE suv ekstrakti proteinazni inhibe qilishning eng kuchli qobiliyatini ko'rsatdi (4-rasm) (500 ug/ml konsentratsiya uchun 57 foiz). Ushbu faoliyat nazorat sifatida ishlatiladigan taniqli proteinaz inhibitori diklofenak bilan taqqoslandi (sinovdan o'tgan eng yuqori konsentratsiyada taxminan 89 foiz inhibisyon). Biroq, xuddi shunday natijalar GGE va KTE ekstrakti uchun olingan (eng yuqori konsentratsiyalar uchun mos ravishda taxminan 56 foiz va 53 foiz). PRE va PGE ekstraktlari uchun past proteinaz inhibisyonu kuzatildi. Lipoksigenazni inhibe qilish qobiliyatini o'lchaydigan keyingi sinovda KTE va CTE dan olingan suvli ekstraktlar eng yuqori qiymatlarni ko'rsatadi (500 ug/ml konsentratsiya uchun mos ravishda taxminan 67 va 64 foiz inhibisyon). Diklofenak ham nazorat sifatida ishlatilgan. GGE, PGE va PRE ekstraktlari ham sezilarli darajada yuqori qiymatlarga ega (mos ravishda 60 foiz, 57 foiz va 54 foiz).Shuningdek, LOX va proteinaza fermentlarini inhibe qilish qobiliyati ekstrakt konsentratsiyasiga bog'liqligi qayd etilgan (5-rasm).

Oldingi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, ko'plab polifenolik birikmalar ko'plab o'simlik ekstraktlarining yallig'lanishga qarshi faolligiga sezilarli hissa qo'shgan [62]. Tadqiqotlar ROS ning yallig'lanish jarayonida ishtirok etishini ko'rsatdi va gallik va xinik kislota kabi fenolik birikmalar lipoksigenaza faolligini inhibe qilish orqali araxidon kislotasi metabolizmini bloklashi mumkin yoki araxidon kislotasi paytida hosil bo'lgan reaktiv erkin radikallarni tozalash vazifasini bajarishi mumkin. [63]. BenSaad va boshqalar tomonidan olingan natijalar. P. granatumdan ajratilgan ellagik kislota, gallik kislota va punikalagin A&B lipopolisakkarid (LPS) taʼsirida azot oksidi (NO), prostaglandin E2 (PGE2) va interleykin 6 (IL-6) ishlab chiqarishni inhibe qilganligini koʻrsatadi. RAW 267.4 makrofaglar. Ushbu birikmalar yagona agent sifatida ishlaydimi yoki sinergik ta'sirga egami, hali ham savol [64]. Ko'pgina flavonoidlar yallig'lanishga qarshi xususiyatlarga ega bo'lganligi sababli, ularning ichki antioksidant harakati tufayli ular turli xil yallig'lanish kasalliklarida ishtirok etgan.flavonoidlarni olish usuli pdf,Xususan, quercetin eng qiziqarli molekuladir, chunki u o'ziga xos biologik yo'llarga aralashadi. Bundan tashqari, tadqiqotlar shuni ko'rsatadiki, u turli xil mexanizmlar orqali bir nechta modellarda ishtirok etgan yallig'lanish jarayonini kamaytirishi mumkin [65]. Xususan, AMP bilan faollashtirilgan protein kinaz va giston/protein deasetilaz (AMPK/SIRT1) yo'li yallig'lanishni yanada qiziqarli boshqarishga olib keladi. Shunday qilib, AMPK faollashtiruvchilari makrofaglarning yallig'lanishini kamaytirishi mumkin. AMPK va SIRT1 faollashtiruvchisi sifatida quercetin va boshqa flavonoidlar ushbu yo'lga aralashib, yallig'lanishni kamaytirishi mumkin [66]. Shuningdek, quercetin va quercetin monoglyukozidlari yuqori LOX inhibisyon potentsialiga ega ekanligi ko'rsatilgan [67]Nair va boshqalar. mangaslin Qu 3-[2G] ramnosilrutinozid, Qu 3-O-dirhamnozid va rutin kabi quercetin qismiga ega flavonollarning mavjudligini baholash orqali KTE ekstraktining yallig'lanishga qarshi xususiyatlarini ko'rsatdi. Bu molekulalar COX-2 faolligini kuchli inhibe qilishini va ROSni qisman bostirishni ko‘rsatdi. Umuman olganda, CTE tarkibida mavjud bo'lgan polifenollar RAW 264.7 makrofag hujayralarida LPS tomonidan qo'zg'atilgan yallig'lanishda yallig'lanishga qarshi xususiyatlarni ko'rsatdi [68].

Iltimos, ko'proq bilish uchun shu yerni bosing

2.5.Sitotoksiklikni baholash

Yangi kosmetik xom ashyoni yaratishda eng muhim xususiyatlardan biri ulardan foydalanish xavfsizligi hisoblanadi. Kosmetikada foydalanish uchun mo'ljallangan moddalar, ayniqsa, keratinotsitlar va fibroblastlar kabi teri hujayralariga nisbatan toksik bo'lmasligi kerak. Tahlil qilingan ekstraktlarning HaCaT va BJ hujayralarida toksikligini aniqlash uchun ikki turdagi testlar qo'llanilgan.flavonoidlarNeytral qizil qabul qilish tahlilidan foydalangan holda birinchi tadqiqot tahlil qilingan ekstraktlar bilan ishlov berilgan hujayralarning hayotiyligini baholashga imkon beradi. Bu bo'yoq tirik hujayraning lizosomalariga kiradi va o'lik hujayralar sitoplazmasiga chiqariladi. Kuzatilgan (6-rasm) CTE ekstrakti HaCaT va BJ hujayralarining proliferatsiyasini oshirish uchun eng yuqori qobiliyatga ega. Nazorat bilan solishtirganda, bu ekstrakt mos ravishda 250 mkl/ml (HaCaT va B】) va 500 mL/ml (BJ hujayralar) konsentratsiyasida sinovdan o'tgan parametrdan taxminan 20 foiz va 40 foizga yuqori qiymatlarga erishdi. 100 va 250 mkL/ml konsentratsiyadagi GGE ekstrakti va 500 mkl/ml konsentratsiyadagi KTE ekstrakti BJ hujayralariga ozgina toksik ta'sir ko'rsatishi bilan ajralib turardi. Boshqa ekstraktlar bu hujayralarning hayotiyligiga ijobiy ta'sir ko'rsatdi. 100 mkl/ml konsentratsiyadagi PRE va PGE ekstraktlari nazoratdan unchalik farq qilmadi va ular BJ hujayralarining proliferatsiyasini 250 va 500 mkl/kontsentratsiyadagi nazorat bilan solishtirganda taxminan 10-15 foizga oshirdi. ml. Keratinositlar holatida hujayra hayotiyligining pasayishi kuzatilmadi. PGE, PRE va CTE ekstraktlari uchun konsentratsiyaning ortishi bilan proliferatsiyaning ortishi qayd etilgan, KTE va GGE ekstraktlari kontsentratsiyasining ortishi bilan hujayra hayotiyligining pasayishi ko'rsatilgan.

Sinov qilingan ekstraktlarning sitotoksikligini aniqlash uchun o'tkazilgan ikkinchi sinov rezazurin testi (Alamar Blue) edi. Ko'rsatilgan (7-rasm) hujayralarning hayotiyligi hujayralar inkubatsiya qilingan ekstrakt konsentratsiyasiga bog'liq. Fibroblastlar bo'lsa, PRE, PGE va CTE ekstraktlari ularning konsentratsiyasining oshishi bilan yuqori hujayra proliferatsiyasiga olib keladi. Eng yuqori tahlil qilingan konsentratsiyada (500 mkl/ml) nazorat bilan solishtirganda taxminan 20 foizga yuqori proliferatsiya kuzatildi.hesperidin ishlatiladiKTE va GGE ekstraktlarida ekstraktlar konsentratsiyasining oshishi bilan hujayra hayotiyligining pasayishi kuzatildi. Ushbu ekstraktlar 250 va 500 mL/ml konsentratsiyalarda BJga ozgina toksik ta'sir ko'rsatdi. Keratinositlar holatida, tahlil qilingan ekstraktlarning teri hujayralariga o'xshash ta'siri kuzatilgan, ammo ularning ko'payish qobiliyati fibroblastlardagi kabi kuchli emas edi. Keratinositlar proliferatsiyasini oshirishning eng yuqori qobiliyati tahlil qilingan kontsentratsiyalarning barcha diapazonida CTE ekstrakti uchun kuzatildi. Shunga o'xshash qiymatlar PRE ekstrakti uchun 250 mkL/ml konsentratsiyada va PGE ekstrakti uchun 500 mkl/ml konsentratsiyada olingan. KTE ekstrakti HaCa hujayralariga GGE ekstraktiga qaraganda ancha yuqori toksik ta'sir ko'rsatdi.

Tahlil qilingan ekstraktlar ilgari teri hujayralariga toksikligi uchun keng qamrovli sinovdan o'tkazilmagan. Ekstraktlar yoki ularning asosiy faol moddalari, ayniqsa saraton hujayralariga nisbatan bir nechta sitotoksiklik tadqiqotlari mavjud. Oldingi tadqiqotlar mualliflari ushbu ekstraktlar odatda teri hujayralariga toksik ta'sir ko'rsatmasligini va ularning hujayra proliferatsiyasini oshirish qobiliyati ko'pincha polifenollar, antosiyaninlar va flavonoidlarning yuqori miqdori bilan bog'liqligini ta'kidladilar [45,69-73 ]. Ba'zi mualliflar, shuningdek, ekstraktlar tarkibidagi individual komponentlar teri hujayralariga toksik ta'sir ko'rsatishi mumkinligini ta'kidladilar, ammo ekstrakt umuman yo'q. Ali Hijoziy va boshqalar. [69] Punica granatumdan olingan alkaloidlar oddiy va saraton hujayralari uchun zaharli ekanligini, butun ekstrakti esa kamroq zaharli ekanligini ko'rsatdi. Nosiri va boshqalarni o'rganish. [70] Punica granatum gul ekstrakti teri hujayralarining ko'payishini oshirish qobiliyati tufayli yarani davolash jarayonini tezlashtirishda foydali bo'lishi mumkinligini ko'rsatadi. Bizning oldingi tadqiqotimizda [45], tahlil qilingan o'simliklardan olingan suv-etanol ekstraktlari BJ hujayralarining ko'payishini oshirish qobiliyati bilan ajralib turishi va KTE va GGE ekstraktlari bu hujayralarga kamroq toksik ta'sir ko'rsatdi. .yo'qolgan imperiya cistancheSuv-etanol ekstraktlarining HaCaT hujayralariga ta'siri sof suvli ekstraktlarga o'xshash edi, ammo etanol bilan olingan ekstraktlarda suvli ekstraktlarga qaraganda biroz qulayroq proliferatsiya xususiyatlari kuzatildi. Tahlil qilinadigan har ikki turdagi ekstraktlarning tarkibi o'rtasidagi farq ularning toksikligida farqlarga olib kelishi mumkin. Ko'rsatilganidek, suv ekstraktlari suv-etanol ekstraktlari kabi biologik faol moddalarga boy emas. Eng katta farqlar rutin va izokersitrin tarkibida kuzatiladi.

Cistanche qarishga qarshi bo'lishi mumkin

2.6.Quyoshdan himoya faktorini aniqlash

Ultrabinafsha nurlanishining teriga salbiy ta'siri ta'sir qilishdan ko'p o'tmay, hatto yillar o'tib ham aniqlanishi mumkin. Quyosh nurlanishi immunosupressiv ta'sirga ega bo'lib, terining qarish jarayonini tezlashtiradi, bu bilan bog'liq barcha oqibatlar, shu jumladan kanserogenezning kuchayishi [74]. Hozirgi kuzatilayotgan tendentsiyalar nafaqat foydalanishda juda yuqori darajadagi xavfsizlik, balki ko'p funksiyaliligi bilan ajralib turadigan mahsulotlarni ishlab chiqishga bo'lgan ehtiyojning ortib borayotganligini ko'rsatadi, ya'ni mahsulotlar hozirgacha qo'llanilganidan ko'ra kengroq ta'sir doirasiga ega terini radiatsiyaga qarshi himoya qiladi. Ba'zi o'simlik moddalari bu jihatda bebaho rol o'ynaydi, bu nafaqat quyoshdan himoya qilish, balki quyosh nurlarining teriga allaqachon mavjud bo'lgan salbiy ta'sirini zararsizlantirishga qodir [75-77]. O'tkazilgan tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, tahlil qilingan o'simlik ekstraktlari PRE, PGE, KTE, CTE va GGE yuqori SPF koeffitsientlari bilan tavsiflanadi.

Yuqorida ko'rsatilgan o'simliklardan 10 va 50 mg / ml konsentratsiyalarda olingan suv ekstraktlari uchun koeffitsientlar (SPF) tahlili o'tkazildi. Har bir tekshirilgan o'simlik uchun ekstraktning yuqori konsentratsiyasi SPF qiymatining sezilarli darajada oshishiga olib keldi.mikronlangan tozalangan flavonoid fraktsiyasi 1000 mg qo'llaniladiEkstraktlar o'rtasidagi taqqoslash shuni ko'rsatadiki, SPFning eng yuqori qiymatlari KTE ekstrakti uchun kuzatilgan, bu ikkala tekshirilgan konsentratsiyaga ham tegishli. Yana bir qiziq kuzatuv shundan iboratki, hatto o'rganilgan past konsentratsiyalarda ham KTE ekstrakti yuqori SPF ni namoyish etgan, boshqa ekstraktlar uchun qiymatlar sezilarli darajada pasaygan. KTE uchun natija boshqa ekstraktlarga qaraganda qanchalik yuqori ekanligini tahlil qilsak, bu aniq. 50 mg/ml kontsentratsiya uchun SPF 1,2 faktorga (PGE, CTE bilan solishtirganda) deyarli 1,9 omilga (PRE, GE bilan solishtirganda) yuqori bo'lgan. 10 mg/ml kontsentratsiyasi uchun xuddi shunday hisoblash 1,4 dan (PGE bilan solishtirganda) 2-3 oralig'idagi omillarga (CTE, GGE bilan solishtirganda), hatto 10 kabi omillarga nisbatan ko'rsatkichlarni beradi. PRE. KTE ekstraktiga e'tibor qaratilayotganda, ekstrakt konsentratsiyasining 5 omilga (50 mg/ml qiymatidan 10 ml/ml qiymatiga) kamayishi SPF qiymatining 3,4 omilga pasayishiga olib kelishini ko'rish mumkin. , ya'ni SPF konsentratsiyadan sekinroq kamayadi. Yuqoridagilar shuni ko'rsatadiki, KTE ekstrakti past konsentratsiyalarda qo'llanilganda ham samarali bo'lishi mumkin (8-rasm).

2.7.Transepidermal suv yo'qotilishi (TEWL) va terining namlanishini o'lchash

O'simlik xom ashyosining biologik va farmakologik faolligining keng doirasi tufayli ekstraktlar tarkibidagi o'simlik moddalari terining holatiga sezilarli ta'sir ko'rsatadi. Xususan, biz bu erda ikkilamchi metabolitlarning terimiz holatiga ta'siri haqida gapiramiz [78,79].

Tadqiqotning keyingi bosqichida hidratsiya va TEWL tahlillari o'tkazildi. Sinov qilingan ekstraktlarning teriga ta'siri baholandi. O'lchovlar 10 mg / ml ekstrakti konsentratsiyasi uchun 60 va 360 minutlik ikki vaqt oralig'ida amalga oshirildi. TEWL o'lchovi uchun eng katta foiz pasayish PGE ekstrakti uchun ko'rsatilgan, bu erda 13,9 nazorat qiymati 8,71 ga tushib ketgan, natijada 37 foizga pasaygan. Bundan tashqari, KTE ekstraktini shu nuqtai nazardan tahlil qilish kerak, chunki bu eng yuqori SPF qiymatlarini namoyish etgan. KTE ekstrakti uchun TEWL nazorat qiymati 10,22 qiymatiga kamaydi, bu 26 foizga pasayish demakdir (9A-rasm).

Biroq, ikkinchi asbobni o'lchashda, tahlil qilingan ekstraktlar 60 daqiqadan keyin ham, 360 daqiqadan keyin ham nazorat namunasiga nisbatan namlikning oshishiga olib kelishi ko'rsatilgan.

Tahlillar natijasida tahlil qilingan PRE, PGE, KTE, CTE va GGE ekstraktlari terining namlanishini oshirishi aniqlandi (9B-rasm). Preparatlardagi ekstrakt konsentratsiyasining oshishi bilan birga namlovchi xususiyatlarning oshishi kuzatildi. Eng kuchli namlovchi xususiyatlar PRE va PGE ekstraktlarida 60 daqiqadan so'ng 32 va 29 foizni, 360 daqiqadan keyin esa 21 foiz va 22 foizni tashkil etgan holda kuzatilgan. Teri namligining eng past darajasi KTE ekstrakti uchun 60 daqiqadan keyin 18 foizga va 360 daqiqadan keyin 3 foizga yaqin bo'lganligi aniqlangan.

2.8. Ilova tahlili

2.8.1. Ekstraktlarning rang parametrlarini aniqlash

Tabiiy rangi tufayli o'simlik gullarining faol moddalari ko'plab tijorat mahsulotlarida, masalan, kosmetika va oziq-ovqat mahsulotlarida tabiiy bo'yoq sifatida ishlatilishi mumkin. Olingan ekstraktlar uchun rang tahlili o'tkazildi (5-jadval).

PRE, KTE va CTE ekstraktlari tabiiy kosmetik pigmentlar sifatida eng yuqori salohiyatga ega ekanligi aniqlandi. Biroq, CTE uchun eng yuqori xrom qiymatlari (C *) kuzatildi. h daraja parametrining qiymatiga asoslanib, bu ekstraktining sariq rangi kuzatilgan va oddiy ko'zga ko'rinadiganligi aniqlandi. KTE va PRE ekstraktlarida, past C* qiymatiga (2.8) qaramay, bu ekstraktlarning rangi yalang'och ko'z bilan aniq ko'rinadi va PRE uchun qizil-binafsha, KTE ekstrakti uchun ko'k-binafsha rang sifatida belgilangan. PGE va GGE ning suv ekstraktlari qizg'ish va bir oz to'q sariq rangga ega bo'lib, olingan xroma qiymatlari 1,3 darajasida edi. Ushbu rang uchun bu qiymatlar yalang'och ko'z bilan sezilarli darajada sezilmadi.

2.8.2. Ekstraktlar asosida kosmetika vositalarining rang parametrlarini aniqlash

So'nggi yillarda, ayniqsa, oziq-ovqat va kosmetika sanoatida tabiiy kelib chiqishi bo'lgan yangi bo'yoqlarni yaratishga katta ehtiyoj sezildi. Sintetik ravishda olingan bo'yoqlar bilan solishtirganda, ular inson salomatligi va atrof-muhitga kamroq salbiy ta'sir ko'rsatishi mumkin [80]. Olingan ekstraktlar model miselyar bo'yanish tozalovchi suyuqlikni shakllantirishda ishlatilgan. Har bir formulada ular 1 foiz konsentratsiyada ishlatilgan. Model kosmetikasining rang parametrlarining natijalari 6-jadvalda keltirilgan.

PRE, PGE, CTE va GGE dan 1 foizli suv ekstrakti qo'shilishi bo'yanish vositasining rangiga sezilarli ta'sir ko'rsatishi kuzatildi. Har bir namunaning rangi yalang'och ko'zga aniq ko'rinardi. PRE ekstrakti kosmetika rangini to'q sariq rangga, PGE, CTE va GGE ekstrakti esa sariq rangga o'zgartirdi.

Tahlil qilingan ekstraktlardan potentsial bo'yoqlar sifatida foydalanish imkoniyati △Estrakt/asosiy bo'yanish tozalagichli bo'yanish tozalagichning nisbatan yuqori qiymatlari bilan tasdiqlanadi, bu esa solishtirilgan ekstrakt qo'shilishi bilan model kosmetika rangining sezilarli o'zgarishini ko'rsatadi. asosiy namunaga (ekstrakti qo'shmasdan). Adabiyot ma'lumotlari [73] shuni ko'rsatadiki, agar AE qiymatlari 5 dan yuqori bo'lsa, rang yalang'och arafada idrok qilinadi va rang effekti sifatida qabul qilinadi. PRE, KTE va CTE ekstraktlarini o'z ichiga olgan bo'yanish vositalari uchun mos ravishda 8,83, 9,17 va 8,14 AE qiymatlari olingan. PGE va GGE ekstraktlari bo'lgan mahsulotlarda preparat rangiga ekstraktning sezilarli ta'siri kuzatilmadi. AE qiymatlari 2.51-2.82 oralig'ida. Bu shuni anglatadiki, rangdagi farq faqat tajribali kuzatuvchiga seziladi [80,81].

3. Materiallar va usullar

3.1. O'simlik materiali va ekstraktsiya tartibi

Tadqiqotda foydalanilgan oʻsimlik materiali mahalliy oʻsimliklar doʻkonidan olingan P. rhoeas L., P.granatum L., C.ternatea L., C.tinctorius L. va G.globosa L.ning quruq gullari edi. . Ekstraksiya jarayoni ultratovushli vannada (Digital Mgtrasonic Cleaner, Berlin, Germaniya) amalga oshirildi, bu Yang va boshqalar [82] tomonidan tasvirlangan usul yordamida amalga oshirildi. Sinovdan o'tgan o'simliklarning suv ekstraktini tayyorlash uchun 10 gramm quruq gul va 100 g suv ishlatilgan. Jarayon xona haroratida 20 daqiqa davomida amalga oshirildi. Keyin olingan ekstraktlar yig'ildi va Whatman No1 filtr qog'ozidan uch marta filtrlandi. Filtrlashdan so'ng, ekstraktlar 40 daraja past bosim ostida bug'lanadi. Quritilgan ekstraktlardan 100 mg/ml konsentratsiyali eritma tayyorlandi va keyingi tahlilga qadar 4 daraja qorong'i joyda saqlanadi. Quyidagi qisqartmalar ishlatiladi: PRE—Papaver rhoeas ekstrakti, PGE—Punica granatum ekstrakti, GGE—Gomphrena globosa ekstrakti, CTE—Carthamus tinctorius ekstrakti, KTE—Clitoria ternatea ekstrakti.

3.2. HPLC-UV-ESI-MS orqali bioaktiv birikmalarni aniqlash

Olingan ekstraktlar HPLC (DionexUltiMate 300{{20}} RS Thermo Fisher Scientific, Sunnyvale, CA, AQSh) yordamida asosiy bioaktiv birikmalarini aniqlash uchun tahlil qilindi. massa spektrometri (4000 QTRAP, AB Sciex, Concord, ON, Kanada), elektrosprey ionlash manbai (ESI) va uch karrali toʻrtpol-ionli tutqich massasi bilan jihozlangan. analizator. Xromatografik ajratish gradient teskari fazali tizim yordamida amalga oshirildi. Bundan tashqari, 100×4,6 mm xromatografik ustun Kinetex 3,5 mkm XB-C18 100 A izo-butil yon zanjirli va shunga o'xshash kompozitsion himoya ustuni bilan ishlatiladigan TMS so'nggi yopish statsionar fazasi Phenomenex'dan sotib olindi va 30 daraja haroratda saqlangan. . A erituvchisi sifatida 0,1 foiz (o/v) suvli chumoli kislotasi va B erituvchisi sifatida metanolni o'z ichiga olgan ikkilik erituvchi tizim gradient rejimida 19,1 daqiqa ish vaqti davomida ishlatilgan. Qo'llaniladigan elutsiya shartlari quyidagicha edi: 0.0-15.0 min 25-100 foiz B,15.0-17.0 min 100 foiz B,17.0-17.1 min 100-25 foiz B,17.1-19.1 min 25 foiz B. Mobil fazaning oqim tezligi 0,6 ml/min, inyeksiya hajmi esa 10 mkl edi. Eluent manfiy ion rejimida elektrosprey ion massa spektrometri (ESI-MS) tomonidan nazorat qilindi va m/z 20 dan 1000 Da gacha skanerdan o'tkazildi. Miqdoriy tahlil qilish uchun uch quadrupole MS detektori ko'p reaktsiya monitoringi (MRM) skanerlash rejimida ishlagan. Optimal massa analizator sharoitlari va alohida birikmalar uchun mahsulot ionlarini tanlash eksperimental tarzda aniqlandi. Shu maqsadda, doimiy namunani etkazib berishda ishlaydigan infuzion nasos yordamida mobil faza tarkibidagi tekshirilgan birikmalarning standart eritmalari (1 ng / ml) kiritildi. To'g'ri prekursor ioni tanlanganiga ishonch hosil qilgandan so'ng, declustering potentsiali (DP), kirish potentsiali (EP), to'qnashuv hujayralarining chiqish potentsiali (CXP) va to'qnashuv energiyasi (CE) har bir MRM o'tishi uchun optimallashtirildi (jadval S1). Ikki MRM o'tish kuzatildi, biri miqdoriy aniqlash uchun, biri tasdiqlash uchun. MS parametrlari quyidagicha o'rnatildi: kapillyar harorati 600 C, parda gazi 35 psi, nebulizer gazi 60 psi va quritish gazi 50 psi. Bioaktiv birikmalarni aniqlash uchun manfiy ionlanish rejimi manba kuchlanishi -4500 V qo'llanildi. Azot parda va to'qnashuv gazi sifatida ishlatilgan. Ma'lumotlar tahlili Analyst 1.5.1 dasturi yordamida amalga oshirildi. Tanlangan birikmalarning identifikatsiyasi molekulyar massa va har bir alohida birikmaning anion kirish qismi bo'yicha amalga oshirildi va MS2 parchalanishi bilan tasdiqlandi. To'qqizta birikmaning identifikatori ularning kimyoviy formulasi, deprotonlangan molekulyar ionlar va har bir alohida cho'qqi uchun xarakterli fragment ionlari bilan birga aniqlandi. Oltita birikma analitik standartlarning eng qizg'in MRM o'tishlarining eng yuqori hududlari yordamida yaratilgan kalibrlash egri chizig'i asosida aniqlandi. Miqdori aniqlangan birikmalar uchun detektor javobining chiziqliligi 0,01 ug/ml dan 2ug/ml gacha bo'lgan sakkiz kontsentratsiya darajasida kalibrlash standartlarini kiritish orqali ko'rsatildi. Kalibrlash egri chiziqlari korrelyatsiya koeffitsientlari (R) 0,99 dan katta bo'lgan chiziqli edi. Agar namunalar CMS detektorining chiziqli diapazoniga tushmasa, namunalar suyultirildi.

Xinik kislota, gallik kislota, kofein kislotasi, kofeoilkinik kislotalar (CQA, ikkita izomer: 3- va 5-CQA) va quercetinning analitik standartlari Sigma-Aldrich, Sent-Luis, MO, AQShdan sotib olingan. ). Amaldagi barcha standartlar analitik darajada bo'lgan (2 99 foizdan yuqori yoki unga teng).

Standart eritmalar 2 mg/ml konsentratsiyani berish uchun har bir standartdan 2{5}} mg 10 ml LC-MS sinfidagi metanolda aniq tortish va eritish orqali tayyorlangan. 2.{10}} ug/ml, 1,5 ug/ml,1.0 ug/mL, 0,5ug/mL,0 ketma-ket suyultirishlar .1 ug/mL, 0.05 ug/mL, 0.02 ug/mL va 0.01 ug/mL LC-MS sinfidagi metanol eritmasi yordamida tayyorlandi. Miqdor chegarasi (LOQ) 0,01 ug/ml sifatida belgilangan.

LC-MS/MS tahlili uch nusxada amalga oshirildi. Olingan ma'lumotlar o'rtacha ± standart og'ishlar sifatida taqdim etildi.

3.3. Antioksidant xossalarini aniqlash

3.3.1.ABTS· plyus Scavenging Assay

Birinchidan, ABTS eritmasi 19,5 mg ABTS va 3,3 mg kaliy persulfatni 7 ml fosfat tampon (pH =7.4) bilan aralashtirish orqali tayyorlangan va 16 soat qorong'ilikda eritilgan. Keyin eritma taxminan 1.0 darajasida absorbansga suyultirildi. Absorbanslar nm =734 nm toʻlqin uzunligida oʻlchandi. Keyinchalik, 20 ml KTE, PGE, PRE, CTE va GGE ekstraktlari (10,100,250,500 ug/ml) 980 ml suyultirilgan ABTSe ​​plus eritmasi bilan aralashtiriladi va keyin 10 daqiqa qorong'ilikda inkubatsiya qilinadi. Keyingi bosqichda tayyorlangan namunalarning absorbsiyasi UV/VIS spektrofotometri Aquamate Helion (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, AQSh) yordamida nm=734 nm da o‘lchandi. Blank sifatida distillangan suv ishlatilgan. ABTS plyus tozalash (1) tenglama bo'yicha hisoblab chiqilgan:

bunda: As—namunaning yutilishi; Ac - nazorat namunasining yutilishi. O'lchovlar har bir olingan namuna uchun uch nusxada amalga oshirildi. Jarayon Gawel-Beben va boshqalar tomonidan tasvirlangan. [83].

3.3.2.DPPH Radikallarni tozalash tahlili

Ekstraktlarning erkin radikallarni tozalash qobiliyati Brand-Williams va boshqalar tomonidan tasvirlangan usul yordamida amalga oshirildi. [84]. U 1,1-difenil-2-pikrilgidrazil (DPPH) radikalidan foydalanishga asoslangan. Birinchidan, 100 ug/ml konsentratsiyadagi 33 mkl suvli ekstrakt eritmalari 167 mkl DPPH (4 mM) metanol eritmasi bilan aralashtirildi va 96-quduq plastinkasiga o'tkazildi, so'ngra chayqatish orqali aralashtirildi. Shundan so'ng, namunalarning absorbsiyasi 517 nm to'lqin uzunligida o'lchandi. O'lchovlar har 5 daqiqada 30 daqiqa davomida UV-VIS filtri Max=5 spektrofotometrida (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, AQSH) amalga oshirildi. Har bir ekstrakt uchun uchta mustaqil replikatsiya amalga oshirildi. Tekshirish vositasi sifatida DPPH eritmasi bo'lgan suv ishlatilgan. Antioksidant quvvati tenglama (2) yordamida DPPH inhibisyonining foizi sifatida ifodalangan:

bunda: As—namunaning yutilishi; Ac - nazorat namunasining yutilishi. O'lchovlar har bir olingan namuna uchun uch nusxada amalga oshirildi.

3.3.3.Reaktiv kislorod turlarining hujayra ichidagi darajasini aniqlash (ROS)

Tahlil qilingan ekstraktlarning HaCaT va BJ hujayralarida reaktiv kislorod turlarini hujayra ichidagi ishlab chiqarish qobiliyatini aniqlash uchun ftorogen H, DCFDA bo'yog'i ishlatilgan. Ushbu birikma passiv diffuziya orqali hujayralarga kirish qobiliyatiga ega, u erda hujayra ichidagi esterazlar tomonidan floresan bo'lmagan birikmaga deasetillanadi. Agar hujayrada reaktiv kislorod turlari mavjud bo'lsa, bu birikma yuqori lyuminestsent DCF ga aylanadi. HaCaTs va BJdagi ROS ning hujayra ichidagi darajasini aniqlash uchun hujayralar 96-quduq plastinkalariga ekilgan. Keyin hujayralar 24 soat davomida inkubatorda o'stirildi. DMEM muhiti olib tashlandi va zardobsiz DMEM muhitida eritilgan 10 mkM H2DCFDA (Sigma Aldrich, St.Louis, MO, AQSh) bilan almashtirildi. HaCaT va BJ hujayralari H, DCFDA da 45 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi va keyin 100, 250 va 500 ug/ml konsentratsiyalarda ekstraktlar bilan inkubatsiya qilindi. 1 mM vodorod peroksid (H2O2) bilan ishlov berilgan hujayralar ijobiy nazorat sifatida ishlatilgan. Nazorat namunalari sinovdan o'tgan ekstraktlar bilan ishlov berilmagan hujayralar edi. DCF floresansi har 90 daqiqada FilterMax F5 mikroplata o'quvchi (Thermo Fisher Scientific) yordamida 485 nm maksimal qo'zg'alishda va 530 nm emissiya spektrlarida o'lchandi [85].

3.4. Matritsali metallopptidazalarni inhibe qilishni baholash

3.4.1.Elastaga qarshi faollikni aniqlash

Matritsa metalloproteinazasini, neytrofil elastazani (NE) inhibe qilish imkoniyatini aniqlash uchun florometrik to'plam (Abcam, ab118971) qo'llanildi. Sinov to'plamga biriktirilgan ko'rsatmalarga muvofiq va Niziol-Lukaszewska va boshqalar tomonidan tavsiflangan protsedura bo'yicha amalga oshirildi. [86]. Tahlillar tiniq tekis tubiga ega standart 96-quduq plastinkasida amalga oshirildi. Tahlil qilish uchun 100 va 250 ug / ml konsentratsiyadagi o'simlik ekstraktlari ishlatilgan. Dastlab, ko'rsatmalarga muvofiq NE fermenti eritmalari, NE substrati va inhibitor nazorati (SPCK) tayyorlangan. Suyultirilgan NE eritmasi barcha quduqlarga qo'shildi va keyin sinov namunalari, inhibitor nazorati va ferment nazorati (tahlil buferi) keyingi quduqlarga qo'shildi. Keyin namunalar aralashtiriladi va 37 daraja haroratda 5 daqiqa davomida inkubatsiya qilinadi. Ayni paytda, Assay Bufer va NE substratini aralashtirish orqali reaktsiya aralashmasi tayyorlandi. Aralash har bir quduqqa qo'shildi va yaxshilab aralashtiriladi. Floresans darhol qo'zg'alish to'lqin uzunligi nm =400 nm va emissiya n =505 nm da mikroplastinka o'quvchi yordamida o'lchandi (FilterMax F5, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, AQSh) Tahlil qilinayotgan NE faolligini inhibe qilish qobiliyati namunalar (3) tenglamadan hisoblab chiqilgan:

Yakuniy natija uchta mustaqil o'lchovning o'rtacha arifmetik qiymati edi.

3.4.2. Anti-kollagenaza faolligini aniqlash

Olingan ekstraktlarning kollagenaza faolligini inhibe qilish qobiliyatini baholash uchun ftor-metrik to'plam (Abcam, Kembrij, Buyuk Britaniya, ab211108) qo'llanildi. Sinov to'plamga biriktirilgan ko'rsatmalarga muvofiq va Niziol-Lukaszewska va boshqalar tomonidan tavsiflangan protsedura bo'yicha amalga oshirildi. [86]. Tahlillar tubi aniq tekis bo'lgan standart 96-quduq plastinkasida o'tkazildi. Tahlil qilish uchun 100 va 250 ug / ml konsentratsiyadagi o'simlik ekstraktlari ishlatilgan. Birinchidan, kollagenaza (COL) kollagenaz tahlil tamponida (CAB) eritildi. Keyin tahlil qilingan namunalar COL va CAB ga qo'shildi. Inhibitor nazorati namunalari kollagenaza inhibitori (1,{8}}fenantrolin(80 mM)ni kollagenaza va CAB buferi bilan aralashtirish orqali tayyorlandi. Enzim nazorat quduqlari suyultirilgan COLni CAB bilan aralashtirish orqali tayyorlandi. CAB buferi fon nazorati sifatida ishlatilgan. Keyin namunalar xona haroratida 15 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi.Kollagenaza substratini CAB bilan aralashtirish orqali reaksiya aralashmasi tayyorlandi.Shu usulda tayyorlangan reaksiya aralashmasi barcha tahlil qilingan namunalarga qoʻshildi va yaxshilab aralashtirildi.Soʻngra floresans darajasi oʻlchandi. qo'zg'alish to'lqin uzunligi 490 nm va emissiya 520 nm. O'lchov kinetik rejimda 37 C da 60 daqiqa davomida amalga oshirildi. Olingan ekstraktlarning COL faolligini inhibe qilish qobiliyati (4) tenglama bilan hisoblab chiqilgan:

3.5. Yallig'lanishga qarshi xususiyatlarni aniqlash

3.5.1. Protein denaturatsiyasini inhibe qilish

PRE, PGE, KTE, CTE va GGE ekstraktlarining proteinaz inhibitiv faolligi Sakat va boshqalar [87] usuliga muvofiq amalga oshirildi, bu Gunathilake va boshqalar [88] tomonidan o'zgartirildi. Qisqacha aytganda, reaksiya eritmasi (2 ml) 2{{10}} mM Tris-HCl buferidagi (pH7,4) va 1 ml sinov namunasidagi ({{17}) 1 ml 1% tripsindan iborat. },02 ml ekstrakti 0,980 ml suv). Eritma inkubatsiya qilindi (5 daqiqa davomida 37 daraja), so'ngra 1 ml 0,8 foizli (v/v) kazein qo'shildi va aralashma yana 20 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi. Inkubatsiya oxirida reaktsiyani yakunlash uchun 2 ml 70% perklorik kislota qo'shildi. Aralash santrifüjdan o'tkazildi va supernatantning absorbsiyasi blank sifatida tamponga nisbatan 210 nm da o'lchandi. Fosfat tampon eritmasi nazorat sifatida ishlatilgan. Protein denaturatsiyasining foiz inhibisyoni quyidagi formula bo'yicha hisoblanadi:

Bunda nazorat namunasining A1= yutilishi va sinov namunasining A2= yutilishi.

3.5.2. Lipoksigenaza faolligini inhibe qilish

Olingan ekstraktlarning lipoksigenaza faolligini inhibe qilish qobiliyati Sarvesvaran va boshqalar tomonidan tasvirlangan usul yordamida aniqlandi. 【89】. Birinchidan, turli konsentratsiyalarda (100, 250 va 500 ug/ml) 10 mkl o'simlik ekstrakti 96-quduq plastinkasida 160 mL 100 mM PBS va 20 mkl soya lipoksigenaza eritmasi (167 U/) bilan aralashtirildi. ml）. Namunalar 25 daraja haroratda 10 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi va bu vaqtdan keyin reaktsiyani boshlash uchun 10 mL natriy linoleik kislota qo'shildi. Keyin FilterMax F5mikroplate o'quvchi (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, AQSh) yordamida har daqiqada 3 minut davomida 234 nm chastotada namunalarning absorbsiyasi o'lchandi. Ijobiy nazorat sifatida diklofenak ishlatilgan. Lipoksigenaza faolligini inhibe qilish foizi tenglama (6) bo'yicha hisoblab chiqilgan:

Bu erda: tekshirilgan namunaning absorbsiyasi kabi, Ac - salbiy nazoratning absorbsiyasi.

Yakuniy natija uchta mustaqil o'lchovning o'rtacha arifmetik qiymati edi.

3.6. Sitotoksiklik tahlili

3.6.1. Hujayra madaniyati

Ushbu tadqiqotda ikkita teri hujayralari chizig'i ishlatilgan: oddiy inson keratinotsitlari (HaCaT) va fibroblastlar (BJ). HaCaT'lar CLSCell Lines Service (CLS Cell Lines Service GmbH, Eppelheim, Germaniya) va BJ'lar American Type Culture Collection (American Type Culture Collection) dan olingan. Manassas, VA, AQSH). Hujayralar Dulbecco's Modification of Eagle's Medium (DMEM, Biological Industries, Cromwell, CO, AQSH)da natriy piruvat, L-glutamin va yuqori glyukoza miqdori (4,5 g/L) bilan o'stirildi. Muhit, shuningdek, mikroblarning ifloslanishini oldini olish uchun 10 foizli homila sigir zardobi (Gibco, Waltham, MA, AQSh) va 1 foiz antibiotiklar (100 U/ml penitsillin va 1000 ug/ml streptomitsin, Gibco) bilan boyitilgan. Hujayralar inkubatorda 37 daraja haroratda 95 foiz havo va 5 foiz karbonat angidriddan iborat namlangan atmosferada o'stirildi.

3.6.2.Alamar Blue Assay

Madaniy hujayralar (HaCaT va BJ) kerakli qo'shilish darajasiga erishgandan so'ng, DMEM muhiti madaniyat kolbalarida aspiratsiya qilindi. Pastki biriktirilgan hujayralar ikki marta steril fosfat tamponli sho'r suv bilan yuvilgan. Hujayra qatlami tripsin bilan ajratildi va keyin hujayralar yangi DMEM muhitiga joylashtirildi. Hujayralar 96-quduqli tekis taglikli plitalarga (VWR, Radnor, PE, AQSH) qoplangan va plitalarning pastki qismiga biriktirilgandan so'ng, hujayralar ekstraktlar (100, 250 va 500 ug/ml) bilan ishlov berilgan. Hujayralar 24 soat davomida inkubatsiya qilindi.

Sitotoksiklik testi Alamar Blue tahlili bilan o'tkazildi (Sigma, R7017, Life Technologies, Bleiswijk, Niderlandiya). Inkubatsiyadan keyin quduqlarga 60 uM konsentratsiyali rezazurin eritmasi qo'shildi, so'ngra plitalar 2 soat davomida 37 daraja inkubatorga joylashtirildi. Bu vaqtdan so'ng, floresans o'lchanadi (h=570nm). Har bir ekstrakt konsentratsiyasi uchta takrorlashda amalga oshirildi.

3.6.3. Neytral qizil qabul qilish tahlili

Neytral Red Uptake Assay - bu PRE, PGE, KTE, CTE va GGE ning sitotoksikligini aniqlash uchun ishlatiladigan ikkinchi test. Birinchidan,96-yaxshi tekis taglikli plitalar oldingi bo'limda tasvirlanganidek tayyorlangan. Hujayralar ekstraktlarga 24 soat ta'sir qilgandan so'ng, ular aspiratsiya qilindi va neytral qizil bo'yoq (40 ug / ml) bilan almashtirildi va 2 soat davomida inkubatsiya qilindi. Bu vaqtdan keyin hujayralar fosfat tamponli sho'r suv bilan yuvildi. Keyingi bosqichda quduqlarga rangsizlantiruvchi bufer (150 mkl) qo'shildi. Keyin neytral qizil dve ning qabul qilinishi optik zichlikni (OD) 540 nm da o'lchash yo'li bilan aniqlandi. Har bir ekstrakt konsentratsiyasi uchta takrorlashda amalga oshirildi.

3.7. Quyoshdan himoya qiluvchi omilni aniqlash (In Vitro)

Quyoshdan himoya qiluvchi omil (SPF) 290 dan 320 nm gacha bo'lgan to'lqin uzunligi oralig'ida 5-nm oraliqda 10 ug/ml va 50 ug/ml konsentratsiyalarda ekstraktlarning suvli eritmasining absorbsiyasini o'lchash yo'li bilan aniqlandi. Olingan natijalardan SPF Mansur tenglamasidan [90] hisoblab chiqilgan: bu yerda∶ EE（l）— eritema effekti spektri, I（y）—quyosh intensivligi spektri, ABS（h）—quyoshdan himoya qiluvchi mahsulotning yutilishi, CF— tuzatish koeffitsienti（=10）, E（N）×I（l）—Sayre tomonidan aniqlangan qiymatlardan foydalanilgan [91].

3.8. Transepidermal suv yo'qotilishi (TEWL) va terining namlanishini o'lchash

TEWL va terining namlanishi o'lchovlari MPA adapteriga ulangan TEWAmeter TM 300 probi va Corneometer CM 825 zondi (Courage plus Khazaka Electronic, Kyoln, Germaniya) yordamida o'tkazildi. Tadqiqotda beshta ko'ngilli ishtirok etdi. Ularning bilaklarida. teri, oltita maydon (o'lchami 2 × 2 sm) belgilangan.Besh joyga 0,2 ml sinovdan o'tgan o'simlik ekstrakti qo'llangan, oltinchi o'rinda nazorat (hech qanday namunalar bilan ishlov berilmagan) 60 va 360 daqiqadan so'ng. , hidratsiya darajasi va TEWL o'lchovlari olindi.Yakuniy natija beshta mustaqil o'lchov (terining hidratsiyasi) va 20 o'lchovning (TEWL) arifmetik o'rtacha (har bir ko'ngillidan) bo'ldi.

3.9. Tarkibida ekstraktlar bo'lgan namunaviy kosmetik vositalarni tayyorlash (makiyajni tozalash).

Modelli kosmetika (makiyajni tozalash vositasi) tayyorlandi. Amaldagi barcha komponentlar EcoCert va COSMOS talablariga muvofiq edi. Formulyatsiya 7-jadvalda keltirilgan.

Mahsulot ingredientlarni (1-banddan 6-bandgacha) xona haroratida bir hil suyuqlik olinmaguncha aralashtirish orqali ishlab chiqarilgan. Oxirgi bosqichda formulaning pH darajasi sozlandi. Makiyajni tozalash vositasi qismlarga bo'lingan. Har bir qismga ekstraktning 1 foizli zaxira eritmasi qo'shiladi va yaxshilab aralashtiriladi.

3.10. Tarkibida ekstraktlar bo‘lgan ekstrakt va kosmetika vositalarining rang parametrlarini aniqlash.

Ekstraktlar va ekstraktlar bilan kosmetika namunalari xona haroratida, ular tayyorlanganidan keyin 48 soat o'tgach sinovdan o'tkazildi. Rang parametrlarini (CIELAB koordinatalarini) baholash uchun CHROMA METER CR-400(Konica Minolta, Sensing Inc., Tokio, Yaponiya) ishlatilgan. CIELAB tizimi 1978 yilda Xalqaro yoritish komissiyasi tomonidan belgilangan. U uchta rang atributiga asoslanadi: L*, a*,b, bu erda L* Munsell tizimidagi qiymatga mutanosib yorqinlik oʻzgaruvchisi va a* va b* xromatik koordinatalar. a* va b* koordinatalari mos ravishda qizil/yashil va sariq/ko‘k o‘qlardagi pozitsiyalarni bildiradi (plyus=qizil, -a=yashil; plyus b=sariq, - b =ko'k).

Olingan ma'lumotlarga asoslanib: L *, a * va b *, quyidagi rang parametrlari hisoblab chiqilgan: xroma (C *) va rang (h). Quyidagi tenglamalar ishlatilgan:

4. Xulosalar

Olingan natijalarga asoslanib, sinovdan o'tgan o'simlik ekstraktlari bir nechta ijobiy xususiyatlarga ega degan xulosaga kelish mumkin, buning natijasida ular kosmetika ishlab chiqarishda xavfsiz va bioaktiv tarkibiy qism sifatida ishlatilishi mumkin. Bu o'simliklar polifenollarning boy manbai ekanligi ko'rsatildi, bu ularga antioksidant xususiyatlarni beradi. PRE erkin radikallarni tozalashning eng yaxshi qobiliyatini ko'rsatdi, bu, ehtimol, boshqa o'simliklarga nisbatan polifenollarni o'z ichiga oladi. PGE va PRE hujayralardagi ROS ishlab chiqarishni kamaytirishning eng yaxshi qobiliyatini ko'rsatdi. Bundan tashqari, o'simliklar hech qanday sitotoksik faollik ko'rsatmaydi. Barcha tekshirilgan ekstraktlar elastaz va kollagenaz fermentlariga inhibitiv ta'sir ko'rsatdi, P. granatum va GGE eng katta inhibitiv ta'sirga ega. Bu shuni ko'rsatishi mumkinki, bu o'simliklar kosmetikada qarish jarayonlarini sekinlashtiradigan moddalar sifatida ishlatilishi mumkin. Bundan tashqari, olingan natijalar bu o'simliklarning yallig'lanishga qarshi xususiyatlarga ega ekanligini ko'rsatadi. Bu holatda CTE va KTE eng yaxshisi bo'lib chiqdi. KTE va PGE hatto past konsentratsiyalarda ham UV nurlanishiga qarshi himoya ta'sirini ko'rsatdi. Yuqori konsentratsiyalarda barcha o'simliklar ultrabinafsha nurlanishdan himoya qiluvchi ta'sirga ega edi. Bundan tashqari, o'simliklar terining namlanishiga ijobiy ta'sir ko'rsatdi va transepidermal suv yo'qotilishini kamaytiradi. PRE, KTE va CTE ekstraktlari kosmetika mahsulotlarida samarali rang beruvchi sifatida ishlatilishi mumkin. Yuqorida aytib o'tilgan ekstraktlarni o'z ichiga olgan bo'yanish uchun mo'ljallangan suyuqlik vaqt o'tishi bilan qizg'in va barqaror rang bilan ajralib turardi. PGE va GGE ekstraktlari bo'lgan kosmetikaning rangi faqat tajribali kuzatuvchilar tomonidan sezilishi mumkin va ular ekstrakti qo'shilmagan holda bo'sh kosmetik namunadan sezilarli darajada farq qilmaydi. Olingan barcha natijalarni hisobga olgan holda, Papaver rhoeas, Clitoria ternatea va Carthamus tinctorius foydalanish uchun xavfsiz bo'lgan kosmetika ishlab chiqarishda sariq, to'q sariq, ko'k va binafsha rang bo'yoqlar manbalari sifatida muvaffaqiyatli qo'llanilishi mumkin degan xulosaga kelish mumkin. yana nima, teriga ijobiy ta'sir qiladi.

Ushbu maqola Molecules 2022, 27, 922 dan olingan. https://doi.org/10.3390/molecules27030922 https://www.mdpi.com/journal/molecules