Gemodializ yaxshilangan biomoslashuviga qaramay, uglerod markazli radikallar orqali oksidlovchi stressni oshiradi

Leykotsitlarning faollashishi va natijadaoksidlovchi stresstomonidan induktsiya qilinganbiologik mos kelmaydigan materiallardavomidagemodializ ta'siribemorlarning prognozi. Ko'plab yutuqlarga qaramaygemodializ dializatorlari, thegemodializ prognozibilan chuqur bog'liq bo'lgan asoratlari bo'lgan bemorlaroksidlovchi stress, kabiqandli diabet mellitus kambag'al bo'lib qoladi. Shunday qilib, biz ta'sirini qayta baholadikgemodializni yanada takomillashtirish uchun elektron spin-rezonansga asoslangan usullardan foydalangan holda bir nechta reaktiv kislorod turlari bo'yichabiomoslashuvichidagemodializ. Biz yuqori oqimli polisulfon dializatorlari yordamida gemodializdan o'tayotgan barqaror ahvoldagi 31 nafar bemorni ro'yxatga oldik. Gemodializning reaktiv kislorod turlariga ta'siri ikki usul bilan baholandi: bir nechta hidrofil reaktiv kislorod turlariga qarshi sarumni tozalash faoliyatini baholovchi MULTiS va lipofil uglerod markazi radikallarini aniqlaydigan i-STrap. Oldingi tadqiqotlarga o'xshab, biz gemodializdan so'ng sarum gidroksil radikallarini tozalash faolligi sezilarli darajada yaxshilanganligini aniqladik. Oldingi tadqiqotlardan farqli o'laroq, biz alkoksil radikallariga qarshi tozalash faolligi sezilarli darajada kamayganini aniqladik.gemodializ. Bundan tashqari, qandli diabet bilan og'rigan bemorlarda gemodializdan so'ng alkil peroksil radikallariga qarshi zardobni tozalash faolligi pasaygan va lipofil uglerod markazi radikallari ko'paygan. Ushbu natijalar shuni ko'rsatadiki, dializator membranalarida keng ko'lamli yaxshilanishlarga qaramay, shakllarireaktiv kislorod turlaridializ paytida yo'q qilinishi mumkin bo'lgan moddalar cheklangan va gemodializ paytida ko'plab reaktiv kislorod turlari yuqori darajada qoladi.

Kalit so'zlar:gemodializ, biologik moslik, alkil peroksil radikal elektron spin rezonansi, MULTiS, i-STrap

BUYRAK FONKSIYASI UCHUN 25% EKINAKOSID VA 9% AKTEOSID BILAN TABIY ORGANIK SİSTANCHE EKSTRAKTINI OLISH UCHUN SHU YERGA BOSING

Wecistanche-ning qo'llab-quvvatlovchi xizmati - Xitoydagi eng yirik cistanche eksportchisi:

Email:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp% 2fTel:+86 15292862950}

Batafsil texnik xususiyatlar uchun xarid qiling:

https://www.xjcistanche.com% 2fcistanche-shop

Surunkali buyrak kasalligi(CKD) bilan bog'liqligi ma'lumyuqori oksidlovchi stress. (-4)Uremik toksinning to'planishilarga olib keladigan pro-oksidlovchi xususiyatlarga egamikroyallig'lanishtufayli yuzaga kelganyallig'lanishga qarshi sitokinning ko'tarilishisning asosiy xususiyati hisoblanadiCKD patofiziologiyasi. (s-, gemodializ (HD), keng miqyosda o'tkaziladigan buyrakni almashtirish terapiyasi, CKD bilan og'rigan bemorlarda oksidlovchi stressni kamaytirish uchun ikki qirrali qilich vazifasini bajaradi. HD davrlarida membrana yoki boshqa sun'iy yuzalar bilan aloqa qilish tufayli polimorf yadroli leykotsitlarning faollashishi. , HD.s tomonidan qo'zg'atilgan oksidlovchi stressning asosiy sababidir-) Aksincha, prooksidlovchi uremik toksinlarni, ayniqsa trimetilamin-Noksideor guanidino birikmalari kabi past molekulyar og'irlikdagi hidrofilik birikmalarni olib tashlash HD ning antioksidant tabiatini yaxshilashi mumkin, omon qolish darajasi va hayot sifatining uzoq muddatli yaxshilanishiga olib keladiCKD bilan og'rigan bemorlar. (2,13) ​​Bundan tashqari, atsidozni tuzatish antioksidant fermentlarning qayta faollashishiga va kardio oldini olishga olib keladigan hajmning ortiqcha yuklanishini kamaytirishga olib keladi. qon tomir asoratlari antioksidant mexanizmlardir. (4 Shunday qilib. HD materiallari uchun leykotsitlar faollashuvini minimallashtirish va antioksidant ta'sirni maksimal darajada oshirish uchun zarurdir. Ushbu muammoni bartaraf etish uchun E vitamini bilan qoplangan dializator misolida keltirilgan antioksidant va biomoslashuvchan HD material ishlab chiqilgan. (si7) Ammo HD dializatorlaridagi ko'plab yutuqlarga qaramay, HD bilan og'rigan bemorlarning prognozi qoniqarsiz bo'lib qolmoqda, ayniqsa qandli diabet (DM), bu yuqori oksidlanish holatiga olib keladigan kasallik.oksidlovchi stress bilan bog'liq reaktsiyalaryetarlicha tahlil qilinmagan. Shunday qilib, ushbu tadqiqot organizmdagi oksidlovchi va antioksidant reaktsiyalarning har bir maqsadli joyini biokimyoviy tavsiflash kerak degan kontseptsiyaga asoslanib, oksidlovchi stress reaktsiyalarining yuqori oqimidagi hodisalar sifatida HD ning reaktiv kislorod turlari (ROS) dinamikasiga ta'sirini aniqlashga qaratilgan. ma'lum bir vaqt va makonda. Buning bir izohi abatafsil tahlilning yo'qligibu hujayra reaktsiyalarini rag'batlantiradigan oksidlovchi stress bilan bog'liq reaktsiyalarning yuqori oqimi. Oksidlanish stress reaktsiyalarining stimulyatorlari yoki oksidlovchi stimulyatorlarni hosil qilish uchun ROS o'rtasidagi o'zaro ta'sirlar sifatida ishlaydigan ROSni aniqlash yuqori reaktsiya tezligi va murakkab reaktsiya zanjirlari tufayli qiyin. ROS bir xil emasligi va individual ROS in vivo reaktsiyalar davomida o'ziga xos xususiyatlarga ega bo'lganligi sababli, bir nechta ROS tahlili talab qilinadi. (9-2n Shunday qilib, antioksidant va biomoslashuvchan materiallardan foydalanish asosida biomoslashuvni yaxshilash uchun HD dan kelib chiqqan ROS dinamikasidagi o'zgarishlarni tushunish kerak.

HD paytida ROS dinamikasini o'rganish uchun biz ikkita yangi ishlab chiqilgan elektron spin-rezonansga (ESR) asoslangan usullarni qo'lladik. bir nechta hidrofilik erkin radikallarni tozalash tahlili (MULTIS) va butun qonda lipofil radikalni aniqlash tahlili (i-STrap) ESR orqali ROSni tozalash faolligi bo'yicha tadqiqotlar keng bo'lmasa-da, bu turni aniqlash va dinamikani o'rganish uchun yagona usul bo'lib qolmoqda. ROS. Usul yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi tipidagi oqim tizimini ESR tizimi bilan birlashtiradi va 5-(2,2-dimetil-1.3-propoksisiklofosforil)-5- ishlatadi. metil{10}}pirrolinNoksid(CYPMPO) aylanma tuzoq sifatida. MULTIS anʼanaviy ESR tahlillariga qaraganda ROS tozalash oʻlchovi uchun yuqori sezuvchanlik va barqarorlikni taʼminlaydi.22-24) Bizning hammualliflarimizdan biri avval 5-bosqich KKD boʻlgan bemorlarda MULTIS oʻlchagan ROS tozalash faoliyati haqida xabar bergan edi. Biroq, ular HD.e2 taʼsirini baholamadilar) Bundan tashqari, i-STrap usuli ESRga asoslangan usul boʻlib, 2-difenilfosfinoil-2-metil-3 yordamida butun qondagi ROSni aniqlaydi. {20}}dihidro-2H-pirrol N-oksidDPhPMPO) uning spin tuzog'i sifatida va organik ekstraktsiyadan so'ng ESRni o'lchaydi, shuning uchun lipofil ROSni aks ettiradi.26. Ushbu tadqiqotda biz bir nechta ROS darajalarini aniqladik. HD bilan ko'paygan va yo'q qilinmagan, bu HDdan keyin radikal zanjir reaktsiyalari hali ham etarli darajada nazorat qilinmaganligini ko'rsatadi. Bu ta'sir qilishi mumkinCKD bilan og'rigan bemorlarning prognozi.

Materiallar va usullar

Mavzular va xabardor qilingan rozilik. Inson sub'ektlarida o'tkazilgan barcha protseduralar individual yozma rozilik olinganidan keyin amalga oshirildi. Amaldagi protokol Tsukuba Texnologiya Universiteti Qo'mitasi tomonidan tasdiqlangan (AuthorizationNo. 201809). Bu kuzatuv tadqiqotidir; shuning uchun bemorlarga aralashuvlar amalga oshirildi. Tadqiqotga jami 31 ta barqaror HD bemorlari kiritilgan. Biz har bir bemor uchun klinik va demografik ma'lumotlarni oldik va qayd etdik. Barcha bemorlar yuqori oqimli polisulfon membran dializatorlari (Toray Medical Co., Ltd., Tokio, Yaponiya) har bir shaxsning tana konstitutsiyasiga moslashtirilgan turli xil membrana sirt maydonlari bilan davolashdi. Bemorlar so'nggi bosqichdagi buyrak kasalligi sabablariga qarab ikki guruhga bo'lingan: diabetga chalingan bo'lmagan guruh (DM bo'lmagan guruh, n=17) va diabetik guruh, n=14).

Namuna yig'ish. Qon namunalari dializ bilan davolashning boshlanishi va oxirida HD sxemasining arterial tomonida joylashgan namunadan olingan. MULTIS o'lchovlari uchun sarumlar ajratildi va muzlatgichda {0}} darajada saqlangan (o'lchov o'tkazilgunga qadar, i-STrap o'lchovlari uchun. To'liq qon namunalari ruxsat etilgan geparin bilan qoplangan naychalarda to'plangan. o'lchovlardan oldin bir soat turish. Sarumdagi bir nechta erkin radikallarni tozalash faolligini o'lchash Gidrofil ROSni tozalash faoliyati MULTIS usuli bilan kichik modifikatsiyalar bilan avval tavsiflangan protokollar yordamida o'lchandi.2227) Beshta ROSga, ya'ni gidroksil radikaliga (OH) qarshi tozalash faoliyati , superoksid (0,"), alkoksil radikali (RO"), alkil peroksil radikali (ROO") va singlet kislorod ('0,) o'lchandi. X diapazonli ESR spektrometri( RR-Xl ESR: Radical Research Inc., Tokio, Yaponiya) 100 kHz dala modulyatsiyasi va WN-RAD operatsion dasturidan (Radical Research Inc.) foydalanilgan. Ishlatilgan ESR spin tutqich reagentlari "CYPMPO" uchun ishlatilgan. OH, O, RO' va ROO' va "O" uchun 4-gidroksi-2,2,6,6-tetrametilpiperidin (TEMP). Odatda spektrometr sozlamalari quyidagicha edi: maydon modulyatsiyasi kengligi.0,1 mT; mikroto'lqinli quvvat, 10 mVt; maydonni skanerlash kengligi va tezligi+7,5 mT/2 min; va vaqt konstantasi, 0,1 s. Har bir ROS 200 Vt quvvatli oʻrta bosimli simob/ksenon yoy chiroqi va kvarts yorug'lik qo'llanmasi, rezonator bo'shlig'iga ulangan. ROS ishlab chiqarish uchun ishlatiladigan yorug'lik manbalari, yorug'lik vaqtlari, prekursorlar va fotosensibilizatorlar 1-jadvalda jamlangan. ROSni tozalash faoliyati avval tavsiflangan usul 22) bo'yicha hisoblab chiqilgan va ma'lum toza tozalash vositalariga ekvivalent birlikka aylantirilgan: OH uchun glutatyon (GSH). va 'O, O uchun superoksid dismutaza (SOD), RO uchun 6-gidroksi-2,5,7,8-tetrametilkroman-2-karboksilik kislota (Trolox)' va a -ROO'MULTIS uchun lipoik kislota har bir ROS uchun o'lchovlar uch nusxada amalga oshirildi.

Lipofillikni o'lchash

i-Strap yordamida butun qondagi Rosni tozalash faoliyati. Lipofil RO ni tozalash faolligi ishlab chiqaruvchining protokoli va oldingi hisobotga asoslangan i-STrap ESR o'lchash ki(Dojin-Glocal/Dojindo, Kumamoto, Yaponiya) yordamida o'lchandi.2s Bu usul to'liq qondagi antioksidantlar va DPhPMPO o'rtasidagi raqobatdosh reaktsiyaga asoslangan. tert-butil gidroperoksid (BuOOHradical. To'liq qon namunalari DPhPMPO(1{{10}} mM) va test-BuOOH (10 mM) bilan xona haroratida 30 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi. Kuluçkadan so'ng spin organik fazadagi qo'shimchalar xloroform va metanol eritmalari yordamida ekstraksiya qilindi; ESR o'lchovlari ushbu organik namunalar yordamida o'tkazildi. O'lchash shartlari MULTISmeasurement bilan bir xil edi, maydonni skanerlash kengligi va tezligidan tashqari, +5 da o'rnatilgan. .0 mT/2 min, i-STrapmeasurement uchun maxsus antioksidantlar mavjud emas edi, shuning uchun tozalash faolligi an10/-1 qiymati sifatida ifodalangan, bu erda “0” namunasiz signal intensivligini va “” signalni bildiradi. namuna bilan intensivlik.(28)Reagentlar. CYPMPO RR INC. (Yaponiya) dan olingan; riboflavin, 2,2'-azobis (2-amidinopropan) dihidroxlorid (AAPH), matn-BuOOH, dimetil sulfoksid (DMSO) va atirgul Bengal Sigma-Aldrich Yaponiyadan (Tokio, Yaponiya) va TEMP sotib olindi Tokio kimyo sanoatidan (Tokio, Yaponiya). Vodorod periks va buferlar WakoChemical Co. (Osaka, Yaponiya) dan olingan. Statistik tahlil."Statistik tahlil Mac OS X kompyuter dasturi uchun Prism 6 (GraphPad SoftwareInc., La Jolla, CA) yordamida amalga oshirildi. Ma'lumotlar Student's dasturi yordamida sinovdan o'tkazildi. juftlashgan t-testi. Maʼlumotlar 95% ishonch oraligʻi (95% CI) bilan oʻrtacha qiymatlar sifatida ifodalangan.