Cistanche Tubulosa umumiy glikozidlarining gipoglikemik va gipolipidemik ta'siri
Mar 28, 2022
Aloqa:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Kuiniu Chju a,b,1, Chjaoqing Meng a,c,1, Yushan Tyan d, Rui Gu a, Chjungkun Xu a, Xui Fang a, Venjun Liu a, Wenzhe Huang a, Gang Ding a, Vey Xiao a,*
ANTRACT
Etnofarmakologik ahamiyatga ega:Cistanche tubulosa (Schrenk) R. Wight (Orobanchaceae) Xitoyda diabetni davolash uchun ishlatiladigan ko'plab an'anaviy o'simlik retseptlarida tez-tez buyuriladigan komponent hisoblanadi. So'nggi tadqiqotlarda Cistanche tubulosa ekstraktining diabetga qarshi faolligi tasdiqlangan. Biroq, Cistatnche tubulosa (TGCT) umumiy glikozidlari bo'yicha tizimli tadqiqotlar haqida xabar berilmagan.
Tadqiqot maqsadi:Ushbu tadqiqot TGCT ning gipoglikemik va hipolipidemik ta'sirini va diet / streptozotsin (STZ) bilan qo'zg'atilgan diabetik kalamushlarda potentsial mexanizmlarni o'rganish va TGCT ning asosiy tarkibiy qismlarini kimyoviy tavsiflashga qaratilgan.
Materiallar va uslublar:TGCT ning asosiy tarkibiy qismlari HPLC/Q-TOF-MS bilan tavsiflangan va analitik miqdoriy aniqlash HPLC-DAD yordamida amalga oshirilgan. 2-toifa diabetik kalamushlar yuqori yog'li yuqori saxaroza dietasi (HFSD) va STZ ning bir martalik in'ektsiyasi (30 mg / kg) tomonidan qo'zg'atilgan. TGCT (50 mg / kg, 100 mg / kg va 200 mg / kg) yoki metformin (200 mg / kg) 6 hafta davomida og'iz orqali yuborilgan. Tajriba davomida tana vazni va kaloriya iste'moli kuzatildi. Ro'za plazmasidagi glyukoza (FPG), og'iz orqali glyukoza bardoshlik testi (OGTT), glyukoza egri chizig'i ostidagi maydon (AUC-G), glikozillangan gemoglobin (HbA1c), ochlik uchun insulin, sarum C-peptid, glikogen miqdori va insulinga sezgirlik indeksi sinovdan o'tkazildi. . Fosforlangan protein kinaz B va fosforlangan glikogen sintaza kinaz 3 darajalari, geksokinaza va piruvat kinazning faolligi tekshirildi. Shu bilan birga, sarum lipid profilidagi o'zgarishlar, superoksid dismutaza, glutation peroksidaza, malondialdegid va yallig'lanish omillari o'lchandi. Oshqozon osti bezining gistologik tekshiruvi gematoksilin-eozin bo'yash bilan ham baholandi.
Natijalar:Bizning tekshiruvimiz feniletanoid glikozidlar (PhGs) mavjudligini aniqladi: echinacoside (500,19 ±11,52 mg/g), akteozid (19,13 ± 1,44 mg/g) va izoakteozid (141,82 ± 5,78 mg CTG/g) Farmakologik testlar shuni ko'rsatdiki, TGCT STZ sabab bo'lgan vazn yo'qotishini sezilarli darajada qaytardi (11,1 foiz, 200 mg / kg); FPG (56,4 foiz, 200 mg/kg) va HbA1c (37,4 foiz, 200 mg/kg) kamaygan; OGTT, AUC-G va insulin sezuvchanligini yaxshilagan; glikogen miqdorining oshishi (jigarda 40,8 foiz va mushaklarda 52,6 foiz, 200 mg/kg) va uglevod almashinuvchi fermentlarining faolligi; tartibga solinadigan lipid profilining o'zgarishi va antioksidant fermentlarning faolligi; dozaga bog'liq ravishda oksidlovchi stress va yallig'lanishning sarum belgilarining pasayishi (p <>
Xulosa:Ushbu tadqiqot TGCT diet / STZ bilan bog'liq diabetik kalamushlarda giperglikemiya va giperlipidemiyani yaxshilash uchun samarali oziqlantiruvchi vosita ekanligini tasdiqladi, bu asosan TGCT ning oksidlovchi stress va yallig'lanishni inhibe qilish bo'yicha faoliyati bilan bog'liq bo'lishi mumkin.
Cistanche atributini inhibe qilish bo'yicha faoliyatgaoksidlovchi stressvayallig'lanish.
1.Kirish
Diabetes mellitus metabolik kasallik sifatida qaraladi, bu insulin ishlab chiqarishning buzilishi yoki / yoki insulin qarshiligi (IR) natijasida giperglikemiya bilan tavsiflanadi (Amerika Diabet Assotsiatsiyasi, 2019). Surunkali giperglikemiya nefropatiya, retinopatiya, neyropatiya va yurak muammolari kabi ko'plab og'ir asoratlar bilan bog'liq (Ekoe, 2019). 2019 yilda global qandli diabetga chalinganlar soni 463 million (9,3 foiz) bo‘lib, 2030 yilga kelib 578 millionga (10,2 foiz) va 2045 yilga kelib 700 millionga (10,9 foiz) ko‘tarilishi taxmin qilinmoqda (Saeedi va boshq., 2019). Metformin (Met, jigar glikogenini ishlab chiqarishni kuchaytiruvchi), insulin (glyukoza ishlab chiqarishni bostirish va glyukozadan foydalanishni ko'paytirish) va sulfoniluriya (oshqozon osti bezi orol hujayralarini insulin ishlab chiqarishni rag'batlantirish) kabi bir qancha dorilar glikemiyani kamaytirishda samarali. Biroq, ko'plab kiruvchi nojo'ya reaktsiyalar (jumladan, vazn ortishi, gipoglikemiya, IR va shish) ulardan foydalanishni cheklab qo'ygan (Moller, 2001). Shunday qilib, ko'plab tadqiqotchilar so'nggi yillarda diabetni davolash uchun an'anaviy o'simlik ekstraktlaridan biologik faol birikmalarni izlashdi (Kasangana va boshq., 2019; Liu va boshq., 2020).
Cistanche tubulosa (Schrenk) R. Wight (Orobanchaceae) an'anaviy xitoy tabobatida keng qo'llanilgan, bu ko'pincha buyrak etishmovchiligi, ayollarning bepushtligi va diabetes mellitusni davolash uchun an'anaviy formulalarda buyuriladi (Li va boshqalar, 2016; Han va boshq. , 2017; Su va boshqalar, 2017). So'nggi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, Cistanche tubulosa suvli ekstrakti 2-toifa diabet (T2DM) bo'lgan db / db sichqonlarida gipoglikemik va hipolipidemik ta'sir ko'rsatdi (Xiong va boshq., 2013) va streptozototsinda qon glyukoza, IR va lipid peroksidatsiyasini yaxshilagan. (STZ) -nikotinamid bilan qo'zg'atilgan diabetik kalamushlar (Kong va boshq., 2018). Feniletanoid glikozidlar (PhGs) Cistanche tubulosa (Morikawa va boshq., 2014) ning asosiy tarkibiy qismlari bo'lib, ular turli xil biologik faolliklarga ega, masalan, antioksidant (Xue va boshq., 2017) va saratonga qarshi (Fu va boshq., 2019) . Bundan tashqari, PhGs kraxmalli sichqonlarda ovqatdan keyin qon glyukoza darajasining oshishini sezilarli darajada inhibe qildi (Morikawa va boshq., 2014), natriyga bog'liq glyukoza kotransportatori {15}}ichak epitelial hujayralarida glyukoza so'rilishini bostirdi (Shimada va boshq. 2017) va kalamush linzalarida aldoz reduktaza faolligini inhibe qildi (Morikawa va boshq., 2019). Biroq, ilgari hech qanday tadqiqot Cistanche tubulosa (TGCT) umumiy glikozidlarining antihiperglisemik faolligini o'rganmagan.
Ushbu tadqiqotda TGCT ning antidiyabetik xususiyatlari yuqori yog'li yuqori sukrozli dietada (HFSD) va STZ bilan kasallangan diabetik kalamushlarda baholandi. Bundan tashqari, TGCT ning potentsial mexanizmini har tomonlama tushunish uchun antioksidant va yallig'lanishga qarshi faoliyat ham tekshirildi.
2. Materiallar va usullar
2.1. Kimyoviy moddalar va reagentlar
STZ Sigma-Aldrich korporatsiyasidan (Sent-Luis, AQSH) xarid qilingan. Met Xitoy-Amerika Shanxay Squibb Pharma kompaniyasidan olingan. ELISA insulin, C-peptid to'plamlari Elabscience Biotechnology Co., Ltd (Uxan, Xitoy) tomonidan etkazib berildi. Glyukoza, glikozillangan gemoglobin (HbA1c), umumiy xolesterin (TC), triatsilgliserol (TG), past zichlikdagi lipoprotein xolesterin (LDL-C), yuqori zichlikdagi lipoprotein xolesterin (HDL-C), superoksid dismutaza (SOD) Elishay to'plamlari. , glutatyon peroksidaza (GSH-Px), malondialdegid (MDA), o'simta nekrozi omili- (TNF), interleykin 1 (IL-1), interleykin 6 (IL-6) Nankin Jiancheng biomuhandislik institutidan xarid qilingan . Fosforlangan protein kinaz B (p-PKB) va fosforlangan glikogen sintaza kinaz 3 (p-GSK3) Elishay to'plamlari Shanxay Enzyme-linked Biotechnology Co., Ltd. Echinacoside (tozaligi 98 foizdan katta yoki unga teng) dan sotib olingan. (tozaligi 97 foizdan katta yoki teng) Oziq-ovqat va giyohvand moddalarni nazorat qilish milliy institutlaridan sotib olingan. Izoakteozid (tozaligi 98 foizdan yuqori yoki unga teng) Chengdu Must Biotechnology Co., Ltd tomonidan taqdim etilgan.
cistanche foydali ekstrakti kukuni
2.2. O'simlik resurslari va TGCTni tayyorlash
Cistanche tubulosaning quritilgan suvli poyasi Bozhou Yihongtang Pharmaceutical Co., Ltd., (Anxuy, Xitoy) dan sotib olingan va Janubi-g'arbiy Minzu universiteti farmatsevtika botanika bo'limi doktori Puyang Gong tomonidan aniqlangan. Vaucher namunasi (№ 20161103) kukun holida ezilgan va Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co., Ltd gerbariysiga joylashtirilgan. SFDA milliy dori standarti "Congrong Zonggan Jiaonang"ga muvofiq. " (YBZ07482005-2011Z), xom preparat (1 kg) 1 soat davomida namlangandan keyin uch marta suv bilan ekstraksiya qilindi. Filtrlashdan so'ng filtrat past bosim ostida konsentratsiya qilindi, etanol konsentratsiyasi 60 foizga etguncha konsentrlangan eritmaga spirt qo'shildi. Suyuq supernatant alkogol ta'mi yo'qligi uchun konsentratsiyalangan va keyin makro gözenekli qatronlar bilan tozalangan. Birinchidan, keyinchalik foydalanish uchun suv elimenti va 40% etanol elimenti ketma-ket yig'ildi. Ikkinchidan, suv elimenti makro gözenekli qatronga qayta yuborildi va suv bilan elut qilindi. Suv elimenti tashlab yuborildi. Uchinchidan, 40 foizli etanol bilan elyut va eluent keyinchalik foydalanish uchun yig'ildi. Nihoyat, 40 foizli etanol elimentlari birlashtirildi va aylanadigan evaporatator tomonidan konsentratsiya qilindi, keyin eritma purkagich bilan quritildi. Taxminan 60 g jigarrang quvvat olindi (ya'ni TGCT). TGCT ning tozaligi standart (YBZ07482005-2011Z) bo'yicha aniqlandi, u 853 mg/g gacha yetdi. TGCT (0,21 mg) va uchta aralash standartlar (exinakozid: 131,3 ug, akteozid: 4,2 ug, izoakteozid: 39,4 ug) mos ravishda 1 ml metanol: suvda (50/50, v/v) eritildi va keyin 0,45 ugleroddan filtrlandi. in'ektsiyadan oldin mkm membrana.
2.3. HPLC/Q-TOF-MS tomonidan TGCT ni sifatli tahlil qilish
HPLC tizimi elektrosprey ionizatsiyasi bilan jihozlangan Agilent 6538 Q-TOF-MS (Agilent Corp, AQSH) bilan ulangan. Tahlil Zorbax SB-C18 ustunida (15{{10}} mm × 4,6 mm, 5 mkm) o'tkazildi. Mobil faza metanol-suvdan tashkil topgan (tarkibida 0,1 foiz H3PO4 mavjud). Oqim tezligi 1.0 ml/min edi. Gradient elutsiya dasturlari quyidagicha umumlashtirildi: 0-20 min, 18 foiz -28 foiz A; 20-50 min, 28 foiz -32 foiz A; 50-60 min, 32 foiz A; 60-70 min, 32 foiz -50 foiz. TOF-MS musbat va manfiy ion rejimida m/z 100–3000 da quyidagi ish parametrlari ostida amalga oshirildi: kapillyar kuchlanish 3500 V (ESI-) yoki 4000 V (ESI plus ); quritish gazi, 10,0 l / min; gaz harorati, 350 ◦C; nebulizer bosimi, 35 psi; skimmer kuchlanishi, 65 V; fragment kuchlanishi, 135 V; OCTRFV, 750 V. Barcha ma'lumotlar TOF/ Q-TOF Ver. uchun ma'lumotlarni yig'ish orqali nazorat qilingan. B.03.01 va Sifatli tahlil Ver. B.03.01 (Agilent Technologies, AQSH) mos ravishda.
2.4. HPLC-DAD tomonidan TGCTning miqdoriy tahlili
Ajratish Zorbax SB-C18 ustunida (150 mm × 4,6 mm, 5 mkm) 50 daqiqa (1,0 ml/min) ichida amalga oshirildi. HPLC-DAD uchun kromatografik sharoitlar sifat tahlili bilan bir xil edi. Inyeksiya hajmi, ustun harorati va UV to'lqin uzunligi mos ravishda 5 mkL, 30 ◦C va 330 nm ga o'rnatildi.
2.5. Eksperimental hayvonlar
Og'irligi 180 ± 20 g bo'lgan erkak SD kalamushlar Nankin Qinglongshandagi Laboratoriya hayvonlar markazidan [Sertifikat No. SCXK (SU) 2017-0001] sotib olindi va Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co., Ltd.dagi hayvonlarni parvarish qilish muassasasiga joylashtirildi. (Jiangsu, Xitoy). Hayvonlarni parvarish qilish va eksperimental protseduralar Hayvonlarni parvarish qilish va ulardan foydalanish institutsional qo'mitasi, Huzhou oziq-ovqat va giyohvand moddalarni nazorat qilish instituti (Tasdiqlash № 19018) tomonidan tasdiqlangan va Xitoyning Hayvonlar tajribalari qoidalariga muvofiq amalga oshirilgan. Kalamushlar nazorat ostida harorat (24 ± 2 ◦C) va namlik (50 ± 10 foiz) ostida 12 soat yorug'lik va qorong'u tsikl bilan saqlanishi, 7 kun davomida normal laboratoriya cho'mi va suv ad libitum bilan yashash sharoitlariga moslashtirilgan.
2.6. Qandli diabetning paydo bo'lishi
Oddiy nazorat guruhidagi kalamushlar (NC, n {0}}) oddiy ovqat bilan, eksperimental kalamushlar esa HFSD (20 foiz saxaroza, 10 foiz cho‘chqa yog‘i, 2,5 foiz qo‘shilgan oddiy parhez) bilan oziqlangan. foiz xolesterin va 1 foiz xolat, 3,95 kkal/g) 4 hafta davomida. 12 soatlik ro'za tutishdan so'ng, kalamushlarga bir martalik STZ (30 mg / kg) dozasi qorin bo'shlig'iga yuborildi, u foydalanishdan oldin sovuq sitrat tamponida (0,1 M, pH 4,5) eritildi. STZ in'ektsiyasining 8-kunida bir martalik qon olish ignasi bilan quyruq qismidan qon namunasi olindi va ochlik plazmasidagi glyukoza (FPG) portativ glyukometr (LifeScan, Inc. UK) tomonidan aniqlandi. Poliuriya, polidipsiya va FPG belgilari 11,1 mmol/L dan yuqori yoki unga teng bo'lgan kalamushlar diabetik kalamushlar sifatida qabul qilindi va tasodifiy besh guruhga bo'lingan (n =10).
I guruh: NC, 0,5 foiz natriy karboksilmetilselüloza (CMCNa, 10 mL/kg) bilan oziqlangan.
II guruh: diabetik nazorat (DC), 0,5 foiz CMC-Na (10 ml/kg) bilan oziqlangan.
III guruh: TGCT-50, TGCT bilan davolash (50 mg/kg).
Guruh Ⅳ: TGCT-100, TGCT bilan ishlov berilgan (100 mg/kg).
Guruh Ⅴ: TGCT-200, TGCT bilan ishlov berilgan (200 mg/kg).
Guruh Ⅵ: Met-200, Met bilan davolash (200 mg/kg).
Ushbu tadqiqotda ishlatiladigan dozalar Xitoy farmakopiyasi (2015 yil nashri) asosida tanlangan. Barcha guruhlar kuniga bir marta og'iz orqali qabul qilindi va yana 6 hafta davomida o'z dietalarini olishda davom etdilar.
Cistanche jigarni himoya qiladi.
2.7. Sichqonlarning umumiy holatini kuzating
Har kuni mo'yna holati, siydik chiqishi va kalamushlarning omon qolishi kuzatildi. Tajriba davomida tana vazni (BW) va kaloriya iste'moli kuzatildi. FPG TGCT bilan davolashdan keyin 0, 2, 4 va 6 haftalarda baholandi.
2.8. Og'iz orqali glyukoza bardoshlik testi (OGTT)
OGTT butun tadqiqotning terminal bosqichida bir kechada och qolgan kalamushlarda o'tkazildi. Orbital sinusdan (0 soat) kapillyar pipetka yordamida atigi 6{2} mL qon namunasi olindi, keyin TGCT (50 mg/kg, 100 mg/kg va 200 mg/kg) bilan yuborildi. yoki Met (200 mg/kg) mos ravishda. Qon namunalari glyukoza yukidan (2 g / kg) keyin 0,5 soat, 1 soat, 2 soatdan keyin to'plangan. Qon olishdan oldin kalamushlar bir necha daqiqa izofluran bilan behushlik qilishdi va keyin darhol gemostatik paxta bilan qon ketishini to'xtatish uchun bosing. Barcha tajribalar hayvonlarning farovonligini ta'minlash uchun ehtiyotkorlik bilan amalga oshirildi. Plazmadagi glyukoza kontsentratsiyasi glyukoza oksidaza peroksidaza usuliga asoslangan glyukoza to'plami bilan aniqlandi. Glyukoza egri chizig'i ostidagi maydon (AUC-G) adabiyotga murojaat qilish uchun hisoblab chiqilgan (Shao va boshq., 2013).
2.9. Ro'za insulinini (FINS) va insulinga sezgirlik indeksini (ISI) aniqlash
OGTTdan keyin 1 kunlik interval, barcha kalamushlar ko'rlik va yallig'lanish kabi alomatlarsiz yaxshi sharoitda edi. Keyin ular 12 soat davomida ochlikdan keyin pentobarbital natriy (40 mg/kg, ip) bilan behushlik qilindi va biokimyoviy baholash uchun qorin aortasidan geparinli va geparinsiz qon namunalari olindi. Sarum qon namunalaridan (geparinsiz) sentrifugalash yo'li bilan yig'ildi. FINS Elishay to'plami tomonidan tekshirildi. FPG glyukoza peroksidaza usuliga asoslangan tijorat to'plami yordamida aniqlandi. ISI quyidagi formula bo'yicha hisoblab chiqilgan: ISI=1/[FINS (pmol/L) × FPG (mmol/L)] (Vang va boshq., 2013).
2.10. Jigar va mushaklarda glikogen sintezini baholash
Jigar va gastroknemius mushaklari kesilgan, yuvilgan, tortilgan va -70 ◦C da saqlanadi. Jigar va mushaklardagi glikogen yuqorida ta'riflanganidek antron usuli bilan o'lchandi (Ren va boshq., 2015). Glikogen miqdori to'qimalarning nam og'irligi mg / g sifatida ifodalangan. Jigardagi geksokinaza (HK) va piruvat kinaz (PK) ning faolligi ishlab chiqaruvchining ko'rsatmalariga muvofiq sotiladigan to'plamlar bilan aniqlangan.
2.11. Biokimyoviy tahlil
To'liq qondagi HbA1c (geparin bilan) diagnostika to'plami bilan o'lchandi. Sarum C-peptid, p-PKB, p-GSK3, TC, TG, LDL-C, HDL-C, SOD, GSH-Px, MDA, TNF-, IL-6 va IL-1 ishlab chiqaruvchining ko'rsatmalariga muvofiq tijorat to'plamlari yordamida sinovdan o'tkazildi.
2.12. Oshqozon osti bezining gistologik bahosi
Oshqozon osti bezi to'qimalari ham kesilgan, yuvilgan va 10% neytral formalinda mahkamlangan, so'ngra gradient etanol (75%, 85%, 95% va 100%) va ksilenda (100%) suvsizlangan. O'tkazgandan so'ng, ular kerosinga solingan va aylanadigan mikrotom bilan 3 mkm qalinlikdagi qismlarga bo'lingan. To'qimalarning qismlari engil mikroskopik tekshiruvlar uchun gematoksilin-eozin (H&E) bilan bo'yalgan (Chen va boshq., 2014).
2.13. Statistik tahlil
Statistik tahlil SPSS 16.0 dasturi yordamida amalga oshirildi. Ma'lumotlar o'rtacha ± SD bilan taqdim etilgan. Guruhlar o'rtasidagi statistik taqqoslashlar bir tomonlama ANOVA, so'ngra Tukey testi yordamida amalga oshirildi va p < 0.05="" qiymati="" statistik="" ahamiyatga="" ega="" deb="" qabul="">
3. Natijalar
3.1. TGCT ning fitokimyoviy tahlili
Sifatli tahlil o'tkazildi va qo'shimcha materiallarda taqdim etildi. Salbiy ion rejimidagi umumiy ion xromatogrammasi S1-rasmda ko'rsatilgan. MS ma'lumotlari oldingi hisobotdagi (Li va boshq., 2015) ma'lumotlar bilan taqqoslash orqali oldindan tayinlangan va S1-jadvalda umumlashtirilgan. Belgilar miqdorini aniqlashning analitik usullari ham tasdiqlangan va qo'shimcha materiallarda qisqacha tavsiflangan. HPLC xromatogrammalari 1-rasmda keltirilgan. TGCT ning uchta asosiy tarkibiy qismi (exinakozid, akteozid va izoakteozid) mos yozuvlar moddalari bilan solishtirganda aniqlangan. TGCTdagi birikmalarning identifikatsiyasi va ularning kontsentratsiyasi 1-jadvalda ko'rsatilgan.
3.2. TGCT ning BW va kaloriya iste'moliga ta'siri
2A-rasmda ko'rsatilganidek, HFSD bilan oziqlangan kalamushlar 4 haftadan so'ng NC guruhiga nisbatan og'irlik o'rtacha 41 g ga oshganini ko'rsatdi. Biroq, STZ NC guruhi bilan solishtirganda kalamushlarning BW ni kamaytirgani aniq. Aksincha, TGCT guruhlaridagi BW (100 va 200 mg/kg) tajriba davri oxiriga kelib DC guruhiga nisbatan mos ravishda 8,1 va 11,1 foizga bosqichma-bosqich va sezilarli darajada oshdi (p <0,05). ,="" bu="" tgct="" patologik="" sharoitlarda="" ortiqcha="" vazn="" yo'qotishining="" oldini="" olishi="" mumkinligini="" ko'rsatdi.="" nc="" guruhining="" kaloriya="" iste'moli="" boshqa="" guruhlarga="" qaraganda="" sezilarli="" darajada="" past="" edi="" va="" boshqa="" besh="" guruh="" o'rtasida="" kaloriya="" iste'molida="" sezilarli="" farq="" yo'q="" edi="">
3.3. TGCT ning FPG, OGTT va HbA1c ga ta'siri
STZ bilan qo'zg'atilgan diabetik kalamushlar NC guruhiga nisbatan (p < 0.="" 0="" 1)="" 3a-rasmda="" tasvirlanganidek,="" fpgda="" sezilarli="" o'sishni="" ko'rsatdi.="" tgctni="" og'iz="" orqali="" yuborish="" vaqt="" va="" dozaga="" bog'liq="" ravishda="" gipoglikemik="" ta'sir="" ko'rsatdi.="" tgct="" (1{44}}0="" va="" 200="" mg/kg)="" dc="" guruhi="" bilan="" solishtirganda="" 4="" (22,1="" foiz="" va="" 24,8="" foiz)="" va="" 6="" (23,2="" foiz="" va="" 56,4="" foiz)="" haftalarda="" fpg="" darajasini="" sezilarli="" darajada="" kamaytirdi.="" 3b="" va="" c-rasmda="" tasvirlanganidek,="" tgct="" (100="" mg/kg="" va="" 200="" mg/kg)="" qondagi="" glyukoza="" miqdorini="" 0,5="" soatda="" 16,1="" foizga="" va="" 22,2="" foizga,="" 1="" soatda="" esa="" 17,2="" foizga="" va="" 26,5="" foizga,="" aucni="" esa="" aniq="" pasaytirdi.="" -tgct="" guruhlari="" ham="" mos="" ravishda="" 8,1="" foizga,="" 18,5="" foizga="" va="" 25,4="" foizga="" qisqardi.="" 3d-rasmda="" ko'rsatilganidek,="" nc="" guruhi="" bilan="" solishtirganda="" hba1c="" (93,3="" foiz)="" sezilarli="" darajada="" oshdi,="" diabetik="" kalamushlarga="" tgct="" (100="" mg="" kg="" va="" 200="" mg="" kg)="" og'iz="" orqali="" yuborish="" sezilarli="" darajada="" kamaydi="" (p=""><0,05) dc="" guruhi="" bilan="" solishtirganda="" hba1c="" (mos="" ravishda="" 26,7="" va="" 37,4="">
1-rasm. TGCT ning HPLC spektri va TGCTdagi asosiy birikmalarning kimyoviy tuzilmalari.
3.4. Jigar va mushaklardagi glikogen tarkibi
4A va B-rasmda ko'rsatilganidek, diabetik kalamushlarda glikogen darajasi sezilarli darajada kamaydi. Qandli diabetga chalingan kalamushlarga 6 hafta davomida turli xil konsentratsiyalarda TGCT qo'llanilganda, TGCT guruhlarida jigar glikogeni (100 mg/kg va 200 mg/kg) ko'proq (25,2 foiz va 40,8 foiz) bo'lgan. DC guruhidagilar (p <0,05, 4a-rasm).="" xuddi="" shunday="" ta'sir="" tgct="" guruhlarida="" (100="" mg="" kg="" va="" 200="" mg="" kg)="" glikogen="" dc="" guruhidagilarga="" qaraganda="" yuqori="" (40,7="" foiz="" va="" 52,6="" foiz)="" bo'lgan="" mushaklarda="" ko'rsatildi="" (p=""><0,05,>
3.5. TGCT ning sarum insulin, C-peptid va ISIga ta'siri
As shown in Table 2, insulin and C-peptide were obviously (p < 0.01) decreased in diabetic rats compared with the NC group. However, TGCT at all doses caused no significant increase in insulin and C-peptide levels (p >{0}}.05), hatto TGCT bilan davolash qilingan guruhlardagi insulin va C-peptid DC guruhidagidan bir oz yuqori bo'lsa ham. Ayni paytda biz ISI ni 4C-rasmda hisoblab chiqdik. Insulin sekretsiyasidan farqli o'laroq, ISI TGCT (100 mg / kg va 200 mg / kg) tomonidan DC guruhiga nisbatan mos ravishda 32,9 va 37,8 foizga ko'tarildi (p <>
1-jadval TGCT ning fitokimyoviy markerlarining tarkibi.
3.6. Oshqozon osti bezining gistopatologik tekshiruvi
TGCT ning oshqozon osti bezi orollaridagi regeneratsiyaga ta'sirini tekshirish uchun oshqozon osti bezining gistologik tahlili o'tkazildi. 5A-rasmda NC guruhida normal gistologik tuzilish va o'lchamdagi orolchalar kuzatilgan. Bundan farqli o'laroq, STZ in'ektsiyalari sezilarli mikrovezikulyar o'zgarishlarga ega bo'lgan orolchalar soni va diametrining pasayishiga olib keldi (5B-rasm). TGCT ham, Met ham ballni tahlil qilish orqali orolchalar soni va hajmini sezilarli darajada oshirdi (5C-F-rasm).
3.7. TGCT ning p-PKB, p-GSK3, HK va PK ga ta'siri
2-jadvalda PKB va GSK3 ning fosforillanish darajasi diabetik kalamushlarda sezilarli darajada kamayganligi aniqlangan (p < 0.{{10}}5).="" tgct="" (1{21}}0="" mg/kg="" va="" 200="" mg/kg)="" p-pkb="" kontsentratsiyasini="" sezilarli="" darajada="" oshirdi="" (tgct-100:="" 13,5="" foiz).="" ,="" p="">< 0,05="" va="" tgct-200:="" 16,7="" foiz,="" p=""><0,05) va="" p="" gsk3="" (tgct-200:="" 18,3="" foiz,="" p=""><0,01). tgct="" ning="" hk="" va="" pk="" ga="" o'xshash="" ta'siri="" ham="" kuzatildi.="" tgct="" guruhlari="" hk="" (tgct-100:="" 30,2="" foiz="" ,="" p="">< 0,05="" va="" tgct-200:="" 59,1="" foiz,="" p="">< 0,01)="" va="" pk="" (tgct-200:="" 32,7="" foiz,="" p)="" faolligini="" oshirdi.="">< 0,05)="" dc="" guruhidagilarga="">
2-rasm. STZ bilan kasallangan diabetik kalamushlarda TGCT ning tana vazniga (A) va kaloriya iste'moliga (B) ta'siri.
3.8. TGCT ning dislipidemiyaga ta'siri
3-jadvalda ko'rsatilganidek, TGCT (100 mg/kg va 200 mg/kg) bilan davolash qilingan kalamushlarda lipid anormalliklari sezilarli darajada yaxshilangan. TG 19,8 foizga (p <0,05) va="" 25,9="" foizga="" (p=""><0,01) kamaydi;="" tc="" 28,5="" foizga="" va="" 31,4="" foizga="" kamaydi="" (p=""><0,05); ldl-c="" 20,0="" foizga="" kamaydi="">< 0.01)="" compared="" with="" dc="" group.="" however,="" the="" suppressed="" hdl-c="" level="" in="" dc="" group="" was="" significantly="" elevated="" by="" 26.8%="" (p="" <="" 0.05)="" in="" tgct-200="">
3.9. TGCT ning oksidlovchi stress va yallig'lanishga ta'siri
Qandli diabet patofiziologiyasida oksidlovchi stress va yallig'lanishning muhim rolini hisobga olgan holda, biz diabetik kalamushlarda TGCTning oksidlovchi stress va yallig'lanishga qarshi qobiliyatini baholadik. TGCT (100 va 200 mg/kg) samarali tarzda oshdi (14,7 foiz, p <0,05 va="" 20,5="" foiz,="">< 0.01)="" the="" activity="" of="" sod,="" remarkably="" elevated="" (16.3%,="" p="" <="" 0.01="" and="" 22.3%,="" p="" <="" 0.01)="" the="" gsh-px="" activity="" and="" significantly="" decreased="" (15.0%,="" p="" <="" 0.05="" and="" 19.7%,="" p="" <="" 0.05)="" the="" mda="" formation="" compared="" with="" dc="" group="" in="" table="" 3.="" similarly,="" tgct="" (200="" mg/kg)="" treatment="" also="" blocked="" the="" stz-induced="" overproduction="" of="" pro-inflammatory="" cytokines="" tnf-α="" (21.8%,="" p="" <="" 0.01),="" il-6="" (14.0%,="" p="" <="" 0.05)="" and="" il-1β="" (15.2%,="" p=""><>
4. Munozara
Qandli diabet progressiv va surunkali metabolik kasallik bo'lib, asosan giperglikemiya bilan tavsiflanadi. Hozirgi vaqtda FPG qondagi glyukoza kontsentratsiyasining o'ziga xos o'lchovidir, OGTT - glyukozani yo'q qilishda erta anormalliklarni aniqlashning sezgir mezoni, HbA1c esa glyukoza nazorati uchun oltin standart indeks sifatida keng qo'llaniladi, testdan 120 kun oldin o'rtacha glyukoza darajasini aks ettiradi ( Nagy va boshq., 2018; Gan va boshq., 2018). FPG, OGTT va HbA1c klinik jihatdan prediabet va diabetni tashxislash va boshqarish uchun ishlatiladi (Chai va boshq., 2017). Bizning tadqiqotimizda TGCT (100 mg / kg va 200 mg / kg) bilan davolangan diabetik kalamushlarning FPG si DC guruhiga nisbatan sezilarli darajada kamaydi. OGTT va AUC-Gda ko'rsatilgan ma'lumotlarga ko'ra, diabetik kalamushlarda buzilgan glyukoza bardoshlik va glyukoza qabul qilish darajasi TGCT tomonidan qaytarildi. Shu bilan birga, natija HbA1c tarkibini o'lchash bilan ham tasdiqlandi. Ushbu ma'lumotlar shuni ko'rsatdiki, TGCT qon glyukoza gomeostazini tartibga solish orqali diabetik kalamushlarning fiziologik ko'rsatkichlarini yaxshilagan.
3-rasm. Qandli diabetga chalingan kalamushlarda 6 hafta davomida TGCT qo'llanganda FPG o'zgarishi.
Insulin sekretsiyasi va IQ buzilishi giperglikemiya rivojlanishida hal qiluvchi rol o'ynaydi. Glisemik nazoratni yaxshilash va T2DM ning oldini olish uchun ulardan birini maqsad qilib qo'yish maqsadga muvofiqdir (Szoke va Gerich, 2005; Punthakee va boshq., 2018). Bir necha turdagi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, yuqori yog'li parhez va past dozali STZ kombinatsiyasi hayvonlar bilan o'tkazilgan tajribalarda T2DM ni qo'zg'atishning samarali vositasidir. Kam dozali STZ insulin sekretsiyasining engil buzilishiga olib keladi, bu T2DM ning keyingi bosqichlariga ko'proq o'xshaydi (Gheibi va boshq., 2017). Ushbu tadqiqotda TGCT insulin sekretsiyasini sezilarli darajada oshirmaydi va diabetik kalamushlarning oshqozon osti bezi orolchasini tiklamaydi, hatto TGCT bilan davolash qilingan guruhlardagi insulin va orolchalar soni DC guruhidagiga qaraganda yuqori bo'lsa ham. Ushbu topilmalar db / db sichqonlarida oldingi tadqiqotga mos keladi (Xiong va boshq., 2013). Bizning natijalarimiz TGCT bilan davolangan diabetik kalamushlarda sezilarli darajada og'irlikning oshishini ko'rsatdi, bu mushak to'qimalarida oqsil katabolizmini inhibe qilishi mumkin bo'lgan insulin miqdorining biroz oshishi bilan izohlanishi mumkin (Adams va boshq., 2019). Bundan tashqari, ISI natijasi shuni ko'rsatdiki, TGCT diabetik kalamushlarning IR ni yaxshilagan, bu avvalgi hisobotga mos keladi (Kong va boshq., 2018), bu TGCT ning antidiyabetik ta'siri bo'yicha potentsial mexanizmga nisbatan yangi dalillarni taqdim etdi.
Barchamizga ma'lumki, PKB/GSK3 yo'li insulin signalizatsiyasining eng muhim yo'llaridan biri bo'lib, insulin tomonidan qo'zg'atilgan glikogen sinteziga vositachilik qilish taklif qilingan (Zheng va boshq., 2015). HK va PK diabetni farmakologik davolashda potentsial dori maqsadlari sifatida ishlaydi. IRda HK va PK faolligining pasayishi tasdiqlangan, shu bilan birga HK va PK faollashuvi ko'proq glikogen zahiralarini yoki glikolizni keltirib chiqaradi va qon glyukozasidan foydalangan holda to'liq energiya hosil qiladi (Hu va boshq., 2014). Ushbu tadqiqotda TGCT bilan davolash bir vaqtning o'zida PKB va GSK3 ning fosforlangan oqsillari ifodasini oshirdi, HK va PK faolligini sezilarli darajada teskarisiga olib keldi va qon glyukozasining pasayishi bilan jigar va mushaklardagi glikogen tarkibini sezilarli darajada tikladi. Ushbu natijalar TGCT insulin signalizatsiya yo'lining asosiy fermentlarini faollashtirganini ko'rsatdi va bundan tashqari, diabetik kalamushlarda insulin sezgirligi haqiqatan ham yaxshilanganligini isbotladi.
2-jadval TGCT ning diabetik kalamushlarda insulin sekretsiyasi va uglevod almashinuvi fermentlariga ta'siri.
Uzoq muddatli diabet, shuningdek, LDL-C darajasini oshirishga va lipid disregulyatsiyasini keltirib chiqaradigan HDL-C darajasini pasaytirishga yordam beradi (Jayashankar va boshq., 2016) va dislipidemiya diabetdagi endotelial disfunktsiya va yurak-qon tomir xavfi uchun belgilangan belgidir (Shahvan va boshq., 2019). Bizning tadqiqotimizda TGCT (200 mg / kg) TC, TG va LDL-C darajasini sezilarli darajada pasaytirdi va diabetik kalamushlarda HDL-C darajasini oshirdi, bu Cistanche tubulosa lipidni samarali tartibga solganligi haqidagi oldingi hisobotlarga mos keladi. sichqonlarda metabolizm (Shimoda va boshq., 2009; Xiong va boshq., 2013). Ushbu topilmalar qon lipidlari anormalliklari bo'lgan diabetga chalingan odam uchun TGCT ko'proq foydali bo'lishi mumkinligini ko'rsatdi.
STZ keng spektrli antibiotik bo'lib, superoksid radikalining ko'payishi natijasida pankreatik orol hujayralariga yuqori selektiv toksik ta'sir ko'rsatadi va o'z navbatida yomon glisemik nazoratga ega (Ghosh va boshq., 2015; Swain va boshq., 2020). ). Shu bilan birga, oksidlovchi stress ham ko'plab muhitlarda IR ning muhim sababidir (Taniguchi va boshq., 2006). IR va diabet SOD va GSH-Px kabi antioksidant fermentlarning kamayishi bilan bog'liq (Styskal va boshq., 2012). Oldingi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, oksidlovchi stressni bostirish diabetik kalamushlarda qon glyukoza darajasini pasaytirishi mumkin (Lim va boshq., 2012; Gao va boshq., 2016). Ushbu tadqiqotda TGCT bilan davolash SOD va GSH-Px ning hujayrali mudofaa funktsiyalarini sezilarli darajada tikladi va diabetik kalamushlarda MDA darajasini pasaytirdi, bu TGCTning antioksidant xususiyatlariga ega ekanligini ko'rsatdi.
TGCT ning asosiy tarkibiy qismlari PhGs bo'lib, echinacoside, acteosid va isoacteosidlarning umumiy miqdori 661 mg / g dan ortiq. PhGs kabi yuqori antioksidant tarkibiy qismlarga ega bo'lgan o'simliklar odatda gipoglikemik ta'sirga ega ekanligi isbotlangan (Morikawa va boshq., 2014; Shimada va boshq., 2017; Spínola va boshq., 2019). Shuning uchun biz TGCT ning diabetga qarshi ta'siri qisman PhGsning antioksidant faolligi bilan bog'liq bo'lishi mumkinligini taxmin qildik. TGCT tarkibidagi echinacoside tarkibini hisobga olgan holda, in vivo va in vitro modellarida echinacoside IR va diabetga ta'sirini o'rganish uchun qo'shimcha tadqiqotlar talab etiladi.
Qandli diabetning yallig'lanish kasalligi ekanligi hamma tomonidan tan olingan. TNF-, IL-6 va IL-1 kabi yallig'lanish sitokinlari insulin retseptorlari signalizatsiya yo'liga xalaqit berishi va keyinchalik IR ga olib kelishi mumkin (Bastard va boshq., 2006). Yallig'lanish IRni davolashda va kengayishi bilan diabetni davolashda hayotiy dori maqsadi bo'lib ko'rinadi (Chen va boshq., 2015). Hozirgi tadqiqotda TGCT TNF-, IL-6 va IL-1 darajasini pasaytirishi mumkin, bu esayallig'lanishga qarshi ta'sir. Bu diabetik kalamushlarda TGCTning diabetga qarshi boshqa mexanizmi bo'lishi mumkin.
To'plangan dalillar shuni ko'rsatadiki, doimiy yuqori qon glyukozasi aylanma oqsillar va lipidlarning tuzilishi va funktsiyalarida anormalliklarga olib keladi, bu glikoksidlanish va peroksidlanishga olib keladi va keyin yallig'lanish sitokinlarini ishlab chiqarishga yordam beradi. Xuddi shunday, yallig'lanish sitokinlarining ko'payishi reaktiv kislorod turlarini va boshqa reaktiv qismlarni ishlab chiqarishga olib keladi, bu oksidlovchi stress va oksidlanish shikastlanishiga yordam beradi. Bu yovuz tsiklga olib keladi (Aghadavod va boshq., 2016; Domingueti va boshq., 2016). Shuning uchun qon glyukoza va lipidlarni kamaytirish TGCT ning antioksidant va yallig'lanishga qarshi ta'siriga hissa qo'shishi mumkin. Qaysidir ma'noda diabetga qarshi aniq mexanizm to'liq aniq emas va ko'proq tekshirishni talab qiladi.
5. Xulosa
Xulosa qilib aytganda, ushbu tadqiqot TGCT diet / STZ bilan qo'zg'atilgan diabetik kalamushlarda giperglikemiya va giperlipidemiyani davolash uchun samarali vosita ekanligini ko'rsatdi. Bundan tashqari, antidiyabetik ta'sir asosan TGCT ning antioksidant va yallig'lanishga qarshi xususiyatlari bilan bog'liq bo'lishi mumkin. Ushbu tadqiqot diabetni davolashda TGCTni joriy etish imkoniyatini ilgari suradi. Biroq, TGCT ning batafsil antidiyabetik mexanizmi noaniqligicha qolmoqda va in vivo va in vitro qo'shimcha tadqiqotlar zarur.
Cistanche davolash uchun samarali vosita edigiperglikemiyavagiperlipidemiya.
