Ichak bakteriya konsorsiumining in Vivo boshqaruvi urolitin ishlab chiqarmaydigan kalamush modelida A va B urolitin metabotiplarini takrorlaydiⅠ
Dec 25, 2023
O'nlab yillar davomida ellagitanninlar (ET) vaellagik kislota (EA) iste'moli ko'plab biologik ta'sirlar, jumladan antioksidant, saratonga qarshi, yallig'lanishga qarshi, antibakterial va OIVga qarshi replikatsiya faoliyati bilan bog'liq edi.1 Biroq, ET va EA ning so'rilishi va bioavailability. Oldingi odamlarda olib borilgan tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, EA va EA-O-glyukuronidning siydik bilan chiqarilishi qabul qilinganidan 1% dan kam. (Uros), ET va (yoki) EAga boy oziq-ovqatlarning foydali ta'siri uchun hech bo'lmaganda qisman javobgardir.1,4
Birinchidan, EA ellagitannaza deb nomlanuvchi ferment tomonidan ET ning ester aloqalarini gidrolizlash orqali chiqariladi. 5 EA keyingi degradatsiyaga uchraydi va Uros deb ataladigan 6H-dibenzo[b,d]piran-6-bir hosila hosil qiladi. Ushbu reaktsiyalar kaskadi laktonaza fermenti tomonidan lakton halqasining bo'linishi bilan boshlanadi, natijada lutein kislotasi hosil bo'ladi, so'ngra pentagidroksi-Uro (Uro-M5) ga dekarboksillanadi. Ketma-ket degidroksillanish uni tetragidroksi-Urosga (Uro-D, Uro-E, va) aylantiradi. Uro-M6) va trihidroksi-Uros (Uro-C, UroM7 va Uro-G) natijasida dihidroksi-Uros (Uro-A andisoUro-A) va monogidroksi-Uro (Uro-B) hosil bo'ladi, ikkinchisi odatda aniqlanadi. isoUro-A ham ishlab chiqarilganda.1
ETga boy oziq-ovqatlarni iste'mol qilgandan so'ng odamlarda aniqlangan Uro metabolik profillarining keng o'zgarishi ET degradatsiyasi uchun mas'ul bo'lgan yo'g'on ichak mikrobiotasidagi individual farqlarni ko'rsatadi.6-8 Yo'g'on ichak bakteriyalari va xost qiluvchi organizm o'rtasidagi ko'plab mumkin bo'lgan o'zaro ta'sirlar dietaning turli metabolik taqdirini tushuntirishi mumkin. )fenollar.6,9 Ichak mikrobiotasi va (poli)fenollar o'rtasidagi bu ikki tomonlama o'zaro ta'sir ilmiy hamjamiyatni populyatsiyani ularning tarkibiga qarab guruhlashga undadi.Polifenollarning ta'siridagi farqlarni tushuntirish uchun metabolik fenotip (metall turi).
G'arbiy va Sharqiy populyatsiyalarda uch xil Uro ishlab chiqarish profiliga tegishli uchta inson UMsi (UM-A, UM-B va UM-0) tasvirlangan. bir nechta oraliq Uros hosil qiladi, lekin faqat urolitin A (Uro-A), bu UMda asosiy so'rilgan Uro, mikrobial katabolik yo'lning oxirida. Metabotip B (UM-B) ba'zi bir oraliq Uros va uchta oxirgi Uros, ya'ni urolitin B (Uro-B), urolitin A (IsoUro-A) va Uro-A hosil qiladi, ular UM-Bda asosiy so'rilgan Uros hisoblanadi. Shu sababli, oraliq Uros asosan ichakda harakat qilishi mumkin, oxirgilari esa mahalliy va tizimli ta'sir ko'rsatishi mumkin.6 Bundan farqli o'laroq, metall turi 0 (UM{-0) bo'lgan shaxslar bu oxirgi Urosni ishlab chiqara olmaydi (faqat Urolitin-M5 prekursori aniqlangan, u ichakda so'rilmaydi).
Uroprofillardagi farqlar UM va yo'g'on ichak bo'ylab kuzatilgan bo'lib, bu distal-kolon mintaqasida Uroning asosiy ishlab chiqarilishini ko'rsatadi.16–19 Ajablanarlisi shundaki, ispan va xitoylik sog'lom ko'ngillilarda UM-0 ulushi taxminan 10% va undan ham yuqoriroq bo'lishi mumkin. AQSH populyatsiyasi.13–15 Gordonibacter va Ellagibacter bakteriya avlodlari EA ni baʼzi Uroslarga metabollash qobiliyatiga ega ekanligi aniqlangan. M7, va Uro-G) va yakuniy Uros (Uro-A va Uro-B) bu bakteriyalarning sof kulturalarida ishlab chiqarilmaydi, bu boshqa bakteriyalarga UM-A va UM-B ni sozlaydigan Uros to'plamini to'ldirish zarurligini bildiradi. . Yaqinda in vitro uroproduktsiya qiluvchi metabotiplarni (UM-A va UM-B) hosil qilish uchun EA metabolizmida ishtirok etadigan ichak bakteriyasi konsorsiumlari aniqlandi.24
Gordonibacter plusEnterocloster genera va Ellagibacter plus Enterocloster o'z ichiga olgan bakterial konsorsiumlar mos ravishda UM-A va UM-B bilan bog'liq urolitinlarni in vitro ishlab chiqaradi.25 Biroq, bu bakterial konsorsiumlarning UM-A vaUM-B bilan bog'liq bo'lgan inson Uro profillarini in vivo takrorlash qobiliyati. hali noma'lum. Bundan tashqari, ushbu uro ishlab chiqaruvchi bakteriyalarni yangi probiyotiklar sifatida iste'mol qilish xavfsizligi hali ham noaniq, chunki u ilgari hayvonlar yoki odamlarda sinovdan o'tkazilmagan. Ushbu tadqiqotda yuqoridagi bakterial konsortsiumlar Uro ishlab chiqarmaydigan (UM{8}}kalamushlar) ichaklarini kolonizatsiya qilish va ularni mos ravishda UM-A va UM-B ga taqlid qiluvchi uroproduktorlarga aylantirish qobiliyati uchun baholandi. Ushbu bakterial konsortsiumlarning xavfsizligi ham baholandi. Bundan tashqari, najas namunalarida Ellagibacter va Enteroklosterni aniqlash va miqdorini aniqlash uchun real vaqt rejimida kantitativ PCR (qPCR) asosidagi ikki yangi protsedura ishlab chiqildi.
Materiallar va usullar
Kimyoviy va reaktivlar
Uros kimyoviy sintez qilingan va VillapharmaResearch SL (Parque Tecnológico de Fuente Alamo, Mursiya, Ispaniya) tomonidan tozalangan. EA Sigma-Aldrichdan (Sent-Luis, MO, AQSh) sotib olingan. Fosfat tampon tuzi (PBS) FisherScientific (AQSh), metanol, etanol va chumoli kislotasi esa Panreac Química (Barselona, Ispaniya) dan olingan. Suyuq xromatografiya-mass-spektrometriya (LC-MS) darajasidagi erituvchilar JT Baker (Deventer, Niderlandiya) dan sotib olindi. Tadqiqot davomida ultrapure Millipur suvi (Bedford, MA, AQSh) ishlatilgan. Barcha kimyoviy moddalar va reagentlar analitik darajada edi.
Bakterial konsortsiumlarni tayyorlash
Gordonibacter urolithinfaciens DSM 27213T, Ellagibacter isourolithinifaciens DSM 104140T va Enterocloster murvatli CEBASS4A9, ularning barchasi ajratilgan va laboratoriyamizda identifikatsiya qilingan (CEBAS-CSIC, Ispaniyada) -Chalgren anaerob muhiti (WAM, Oksoid) quvurlari Concept 400 anaerob kamerasida (BakerRuskin Technologies Ltd, Bridgend, Janubiy Uels, Buyuk Britaniya) 37 gradusda 48 soat davomida va 10% glitserin va 0,05% L-sistein gidroxlorid bilan to'ldirilgan PBSda qayta suspenziyalangan. Química, Barselona, Ispaniya). Anaerob inkubatsiyadan so'ng konsortsiumlar tayyorlandi.24,25 Qisqacha aytganda, "bakterial konsortsium A" tarkibida G. urolithinfaciens va E. bolteae shtammlari; "bakterial konsortsiumB" tarkibida E. isourolithinifaciens va E. bolteae kulturalari mavjud; va "nazorat kokteyli" tarkibida 10% glitserin va 0,05% L-sistein gidroxlorid bilan steril PBS mavjud. Qo'llashdan oldin barcha kokteyllar 3,5 ml alikvotlarga taqsimlandi va -80 darajada saqlanadi.
Hayvonlar, parhezlar va eksperimental dizayn
Eksperimental protokol (ma'lumotnoma 624/2020) mahalliy hukumat, Ispaniya Milliy tadqiqot kengashining Bioetika qo'mitasi (Madrid, Ispaniya) va Mursiya universiteti (Ispaniya) Hayvonlar bilan tajriba o'tkazish etikasi qo'mitasi tomonidan tasdiqlangan. Eksperimentlar Yevropa Ittifoqining hayvonlar tajribasiga oid tavsiyalariga amal qildi (Yevropa Parlamentining 2010/63/EU direktivasi va ilmiy maqsadlarda foydalaniladigan hayvonlarni himoya qilish kengashi). Og'irligi 240 ± 31 g bo'lgan Wistar kalamushlari (n=18; 9 urg'ochi va 9 erkak) Envigodan (Barselona, Ispaniya) olingan. Bu kalamush modeli, turli kalamush modellaridan najas namunalari sinovdan o‘tkazilgan dastlabki tadqiqotlarimizda kuzatilgan Uros hosil qila olmasligi asosida tanlangan. Har biriga 6 ta hayvonni (3 ta urg‘ochi va 3 ta erkak kalamush) tasodifiy belgilash yo‘li bilan uchta guruh (A, B va C) tuzilgan. ) har bir guruh uchun (1-rasm).
Har bir kalamush guruhi ikki xil qafasda, jinsga bo'lingan holda, harorat bilan boshqariladigan muhitda (22 ± 2 daraja) 55 ± 10% nisbiy namlik va boshqariladigan yorug'lik-qorong'u tsikli (12 soat) bo'lgan xonaga joylashtirildi. Kalamushlar (%/100 g yangi vazn) 14,3% oqsillar (makkajo'xori kleykovina uni), 48% uglevodlar (o'rta bug'doy, maydalangan bug'doy, maydalangan makkajo'xori) va 4% yog' (soya yog'i) o'z ichiga olgan standart chow dietasi (Teklad, Barselona, Ispaniya) oldilar. ), 2,9 kkal g−1 energiya zichligi va 4,1% xom tola, EA kukuni bilan to'ldirilgan 95% dan katta yoki unga teng (100 g chow uchun 3,6 mg). EA bir xilda maydalangan standart ozuqa bilan aralashtiriladi, qayta pelletlanadi va liyofilizatsiya qilinadi. EA bilan boyitilgan parhez namlik va yorug'likdan uzoqroqda saqlangan. EA dozasiratsiondagi kalamushlar kuniga taxminan 0, kalamush boshiga 72 mg (EA1x diet), inson ekvivalent dozasi kuniga 41 mg-1,26 Barcha guruhlar tajriba davomida EA 1x dietasi va musluk suvi bilan ad libitum bilan oziqlangan ( 5 hafta). Najas namunalarida aniqlangan EA birinchi haftada past bo'lganligi sababli, keyingi kunlarda qo'shimcha EA qo'shildi. 3-haftada suvda eritilgan kalamush uchun kuniga 1,5 mgEA qo'shimcha dozasi hayvonlarga og'iz orqali yuborilgan (jami=EA 3x diet), bu faqat 1 hafta davomida berilgan. Nihoyat, 4-haftada kalamush uchun kuniga ≈5 g yong'oq (boshqa EA manbai) EA 1x dietasiga qo'shildi va oziq-ovqat matritsasini o'z ichiga olgan EA ning bakteriyalarning chidamliligiga ta'sirini baholash uchun tadqiqot oxirigacha saqlanib qoldi. Uros ishlab chiqarish. Og'irlik, oziq-ovqat va suv iste'moli har kuni o'lchandi. Ichakdagi bakterial konsortsium og'iz orqali gavaj orqali yuborildi. A guruhi 500 mkl A bakterial kokteyli, B guruhi 500 mkl B bakterial kokteyli va C guruhi (nazorat) 500 mkl PBS oldi. Og'zaki gavaj dastlabki ikki haftada har 2 kunda va keyingi 2 hafta davomida har kuni amalga oshirildi. Oxirgi haftada (28 dan 32 kungacha) hayvonlar EA va yong'oq bilan to'ldirilgan bir xil ovqatlanishni davom ettirdilar, ammo og'iz orqali bakteriyalar kiritilmagan. Tadqiqot oxirida hayvonlar CO2 kamerasi yordamida qurbon qilindi.
Namuna olish tartiblari
Najas namunalari UPLC-ESI-QTOF-MS/MS va ichak mikrobiotasini 16S rRNAgen sekvensiyasi va qPCR orqali Uro tahlili uchun tadqiqot davomida yig'ildi. Qon gematologik va sarum biokimyoviy tahlillari uchun turli vaqt nuqtalarida (boshlang'ich, 28-kun va tadqiqot oxiri) olingan. Qon namunalari quyruq venasidan (≈500 mkL) olindi va boshlang'ich chiziqda va 28 va 32-kunlarda geparin o'z ichiga olgan naychalarga yig'ildi (1-rasm). Plazmani ajratish darhol 3000 g da 10 daqiqa davomida 4 gradusda santrifüjlash orqali amalga oshirildi va - da muzlatildi. Serobiokimyoviy o'zgaruvchilarni keyingi aniqlashgacha 80 daraja. Qurbonlik paytida morfologik farqlarni aniqlash uchun jigar, buyraklar va taloq yig'ildi, tortildi va tekshirildi.
qPCR orqali Ellagibacter va Enterocloster miqdorini aniqlash uchun primerlarni loyihalash va optimallashtirish.
Ellagibacter isourolithinifaciens DSM 104140T va E. bolted CEBAS S4A9 ning 16S rRNK genlarining ketma-ketligi GenBank ma'lumotlar bazasidan (EMBL ma'lumotlar bazasi) olingan. Ketma-ketliklar molekulyar evolyutsion genetik tahlil dasturini (MEGA 11) yaratuvchi filogenetik jihatdan yaqin bakteriyaga moslashtirildi va Ellagibacter va Enteroklosterni aniqlash va miqdorini aniqlash uchun primerlarni loyihalash va zondlarni loyihalash uchun saqlanib qolgan va oʻzgaruvchan ketma-ketliklar hududlari uchun tekshirildi (1-jadval). Primer va zond mos ravishda Primer Questand Oligo Analyzer asboblari (Integrated DNATechnologies, Inc., Belgiya) bilan ishlab chiqilgan va tasdiqlangan. (6FAM) va BlackBerry o'chirgich (BBQ), mos ravishda. qPCR ABI 7500sequence aniqlash tizimi yordamida amalga oshirildi. Har bir primer va zondning yakuniy kontsentratsiyasi Ellagibacter uchun 300 va 375 nM, Enterocloster uchun 200 va 500 nM edi. Ellagibacter va DNKni kuchaytirish uchun an'anaviy qPCR protokoli o'tkazildi.O'z navbatida enterokloster. Ellagibacteramplification uchun ramping profili 5 daqiqa davomida 95 gradusda 1 tsikl, keyin 15 soniya davomida 95 daraja, 40 soniya uchun 50 daraja va 31 soniya uchun 72 daraja. Nihoyat, 5 daqiqa davomida 72 daraja 1 tsikl qo'shildi. . Enteroklosterni kuchaytirish uchun ramping profili 5 daqiqa davomida 95 gradusda 1 tsikl, keyin 15 soniya uchun 95 graduslik 40 tsikl, 40 soniya uchun 65 daraja va 31 soniya davomida 72 daraja edi. Nihoyat, 5 daqiqa davomida 72 daraja haroratda 1 tsikl qo'shildi.
Najas DNK ekstraktsiyasi va ichak mikrobial tahlillari
Najas namunalaridan DNK ekstraktsiyasi ishlab chiqaruvchining ko'rsatmalariga binoan NucleoSpin® to'qimalarining DNKni tozalash to'plami (Macherey-Nagel, Germaniya) yordamida ba'zi o'zgartirishlar bilan amalga oshirildi. DNK florimetriya (Qubit3.0 – ThermoFisher Scientific™, Buyuk Britaniya) yordamida miqdori aniqlandi va tozalik 260/280 nm (A260/A280) to‘lqin uzunligidagi absorbans nisbati asosida o‘lchandi (NanoDrop-ThermoFisher Scientific™,UK). ). Ichak mikrobiota tarkibi Illumina protokollari (Illumina Inc., San-Diego, CA, AQSh) 16S rRNK genining V3 va V4 oʻzgaruvchan hududlarini oʻqish uzunligi 2 × 300 bp (MiSeqReagent Kit v3) boʻyicha ketma-ketlikda aniqlash orqali aniqlandi. , Illumina Inc.). Metagenomik ketma-ketlik MiSeq-Illumina platformasida (FISABIO sequencingservice, Ispaniya) amalga oshirildi. Taksonomik tasnifni olish uchun ma'lumotlarni qayta ishlash, ximerik ketma-ketlikni olib tashlash, ketma-ketlikni moslashtirish va 16S rRNK gen ketma-ketligini klasterlash boshqa joyda ta'riflanganidek amalga oshirildi.8,27 Gordonibacter DNK kuchaytirilishi ABI 7500 qPCR tizimida avvalroq ta'riflanganidek amalga oshirildi. Ushbu tadqiqotda ishlab chiqilgan maxsus primerlar va zondlar yuqorida tavsiflangan qPCR protokoli bo'yicha ishlatilgan. Miqdorni aniqlash uchun Gordonibacter, Enterocloster va Ellagibacter genomik DNK standart egri chiziqlari ishlatilgan. Barcha najas namunalari uch nusxada tahlil qilindi.
Najas namunalarida urolitinlarni olish, aniqlash va miqdorini aniqlash
Najas namunalari ({0}},2–0,5 g) 1:10 nisbatda, MeOH/H2O (8{{) eritmasi bilan ajratildi. 20}}/20), 0.1% HCl bilan kislotalanadi va 2 daqiqa davomida vortekslash va blokli isitgichda xona haroratida 1500 aylanish tezligida 10 minut chayqatish orqali bir hil holga keltiriladi. Suspenziya 14 000g haroratda 10 daqiqa davomida santrifüj qilindi va supernatant a0,22 mkm PVDF membran filtri (Millipore Corp., Bedford, MA) orqali filtrlandi va MeOH (0,1% chumoli kislotasi) bilan 3 marta suyultirildi. ) UPLC-ESI-QTOF-MS tizimiga yuborishdan oldin. UPLC tizimi (Agilent 1290Infinity) to'rt kutupli parvoz vaqti (QTOF) LC/MSsystem (6550 Accurate-Mass) (Agilent Technologies, Waldbronn, Germaniya) bilan bog'langan holda najas metabolitlarini avvalroq gradient elutsiya usuli yordamida tahlil qilish uchun ishlatilgan. .29,30 Qisqacha aytganda, ajratish aPoroshell 120 EC-C18 teskari fazali ustunida, suv va asetonitrildan foydalangan holda amalga oshirildi, ikkalasi ham 0,1% chumoli kislotasi bilan kislotali, mobil fazalar sifatida. Oqim tezligi 0,4 ml min−1, inyeksiya hajmi esa 5 mkL edi. Ma'lumotlarni qayta ishlash uchun MassHunter Qualitative Analysis dasturi (versiya B.10, Agilent Technologies, Waldbronn,Germaniya) ishlatilgan. Barcha metabolitlar standartlar bilan to'g'ridan-to'g'ri taqqoslash yo'li bilan aniqlandi va ularning molekulyar massasi bilan tasdiqlandi. EA va turli xil Uros uchun kalibrlash egri chiziqlari yaxshi chiziqli (R2 > 0,99) bilan olingan.
Gematologiya va klinik kimyo
Gematologik o'zgaruvchilar geparinlangan qonda kalamush qon namunalari uchun maxsus dasturiy ta'minotga ega avtomatlashtirilgan gematologik analizator yordamida aniqlandi (AVDIA 120, Siemens, Myunxen, Germaniya). Tahlil qilingan o'zgaruvchilar o'rtacha korpuskulyar hajm (MCV), o'rtacha korpuskulyar gemoglobin (MCH), o'rtacha korpuskulyar gemoglobin kontsentratsiyasi (MCHC), eritrotsitlar taqsimoti (RDW), trombotsitlarning o'rtacha hajmi (MPV), trombotsitlar (PCT), trombotsitlarning tarqalish kengligi (PDW) , o'rtacha trombotsitlar komponenti (MPC), trombotsitlarning o'rtacha massasi (MPM), trombotsitlar soni (PLT), retikulotsitlar gemoglobin miqdori (CHr), va o'rtacha retikulotsitlar korpuskulyar hajmi (MCVr). Plazma biokimyoviy o'zgaruvchilari, kaltsiy (Ca) va fosfor (P) Olympus AU400 kimyo va toksikologiya analizatori (Bekman Koulter, Kaliforniya, AQSh) yordamida tahlil qilindi. Biokimyoviy o'zgaruvchilar umumiy oqsillar (PROT), albumin (ALBU), globulin (GLOB), kreatinin (CREA), glyukoza (GLUC), xolesterin (CHOL), triglitseridlar (TRIGL), gidroksidi fosfataza (ALP), gamma-glutamil transpeptidaza edi. GGT), aspartat aminotransferaza (AST) va alanin aminotransferaza (ALT). Nihoyat, tiroksin (T4) darajalari IMMULITE® 1000immunoassay tizimi (Siemens) yordamida tahlil qilindi.
Statistik tahlil
Ma'lumotlar o'rtacha ± standart og'ish (SD) sifatida ifodalangan. Statistik tahlil SPSS dasturiy ta'minotining 27-versiyasi bilan amalga oshirildi.0 (SPSS Inc., Chikago, IL, AQSh) va farqlar < 0.05 statistik jihatdan ahamiyatli deb hisoblangan. Ma'lumotlarning normalligi Shapiro-Wilk testi bilan baholandi. Turli davolash guruhlari o'rtasidagi taqqoslash ma'lumotlarning mos ravishda normal yoki noan'anaviy taqsimlanishiga qarab, Tukey yoki Dunnettning T3 post hoc testi bilan takroriy o'lchangan dispersiya tahlili (RM ANOVA) yordamida amalga oshirildi. Erkaklar va ayollar o'rtasidagi farqlar, mos ravishda, ma'lumotlar normal yoki noodatiy taqsimlangan bo'lsa, juftlashtirilgan Student's t-testi yoki Wilcoxon signedrank testi yordamida o'rganildi. Guruhlar orasidagi differentsial bakterial xususiyatlarni aniqlash uchun Chi-kvadrat chiziqli diskriminant tahlil effekti (LEfSe) ishlatilgan. Oddiy taqsimlangan ma'lumotlardagi o'zgaruvchilar orasidagi mumkin bo'lgan assotsiatsiyalarni tahlil qilish uchun Pearson korrelyatsiyasi ishlatilgan, Spearman korrelyatsiyasi esa normal taqsimlanmagan ma'lumotlarda qo'llanilgan. Ma'lumotlar chizmalari Sigma Plot 14.5 (Systat Software, San-Xose, CA, AQSh) yordamida amalga oshirildi.
Qabziyatni yo'qotish uchun tabiiy o'simlik dori-Cistanche
Cistanche - Orobanchaceae oilasiga mansub parazit oʻsimliklar turkumi. Bu o'simliklar shifobaxsh xususiyatlari bilan mashhur va asrlar davomida an'anaviy xitoy tabobatida (TCM) ishlatilgan. Cistanche turlari asosan Xitoy, Moʻgʻuliston va Markaziy Osiyoning boshqa qismlarida qurgʻoqchil va choʻl hududlarida uchraydi. Cistanche o'simliklari go'shtli, sarg'ish poyalari bilan ajralib turadi va ularning sog'liq uchun foydali foydalari uchun juda qadrlanadi. TCMda Cistanche tonik xususiyatlarga ega ekanligiga ishoniladi va odatda buyrakni oziqlantirish, hayotiylikni oshirish va jinsiy funktsiyani qo'llab-quvvatlash uchun ishlatiladi. Bundan tashqari, qarish, charchoq va umumiy farovonlik muammolarini hal qilish uchun ishlatiladi. Cistanche an'anaviy tibbiyotda uzoq vaqtdan beri qo'llanilgan bo'lsa-da, uning samaradorligi va xavfsizligi bo'yicha ilmiy tadqiqotlar davom etmoqda va cheklangan. Biroq, uning dorivor ta'siriga hissa qo'shishi mumkin bo'lgan feniletanoid glikozidlar, iridoidlar, lignanlar va polisakkaridlar kabi turli xil bioaktiv birikmalar mavjud.
Wecistanche ningcistanche kukuni, cistanche tabletkalari, cistanche kapsulalari,va boshqa mahsulotlar yordamida ishlab chiqiladicho'lcistanchexom ashyo sifatida, bularning barchasi ich qotishini bartaraf etishga yaxshi ta'sir qiladi. Muayyan mexanizm quyidagicha: Cistanche an'anaviy qo'llanilishi va tarkibidagi ba'zi birikmalar asosida ich qotishidan xalos bo'lish uchun potentsial foyda keltirishi mumkin. Cistanchening konstipatsiyaga ta'siri bo'yicha ilmiy tadqiqotlar cheklangan bo'lsa-da, uning ich qotishidan xalos bo'lish potentsialiga hissa qo'shishi mumkin bo'lgan ko'plab mexanizmlar mavjud deb hisoblanadi. Laksatif ta'siri:Cistancheuzoq vaqtdan beri an'anaviy xitoy tabobatida ich qotishi uchun vosita sifatida ishlatilgan. Uning engil laksatif ta'siri bor, bu ichak harakatini rag'batlantirish va ich qotishini keltirib chiqarishi mumkin. Bu ta'sir Cistanche tarkibidagi turli xil birikmalar, masalan, feniletanoid glikozidlar va polisakkaridlar bilan bog'liq bo'lishi mumkin. Ichaklarni namlash: An'anaviy foydalanishga asoslanib, Cistanche, ayniqsa, ichaklarga mo'ljallangan namlovchi xususiyatlarga ega. Ichaklarning namlanishi va yog'lanishini rag'batlantirish asboblarni yumshatishga yordam beradi va o'tishni osonlashtiradi va shu bilan ich qotishini engillashtiradi. Yallig'lanishga qarshi ta'sir: ich qotishi ba'zida ovqat hazm qilish tizimidagi yallig'lanish bilan bog'liq bo'lishi mumkin. Cistanche tarkibida yallig'lanishga qarshi xususiyatlarga ega deb hisoblangan ma'lum birikmalar, jumladan, feniletanoid glikozidlar va lignanlar mavjud. Ichaklardagi yallig'lanishni kamaytirish orqali u ichak harakatining muntazamligini yaxshilashga va ich qotishidan xalos bo'lishga yordam beradi.