Intraserebroventrikulyar-xinolin kislotasi kalamush modelida diosmin bilan bog'liq neyroproteksiya va xotirani yaxshilashga mexanik tushuncha: mitoxondrial funktsiyalar va antioksidantlarning tirilishi 4-qism

2.12.4. Superoksid dismutaza faolligi. .e SOD (EC1.15.1.1) ta'sir tezligi (bir mg protein uchun birlik) Kakkar va boshqalar tomonidan ko'rib chiqilgan. [33]. .e reaktsiyasi tarkibiga 0,3 ml gomogenat, 100 mkl 5-metilfenaziniummetil sulfat (197 mkM) va 1,3 ml natriy difosfattetrabazik (0,066 mM, pH 7,2) kiradi. .e reaktsiya 200 µl -nikotinamid adenin dinukleotid (DPNH) (780 mkM) yordamida boshlandi va 60 soniyadan so'ng bu aralashmada 1 ml glacialCH3COOH yordamida to'xtatildi. Yaratilgan xromogen miqdori lmax 560 nm da rang kuchini qayd etish orqali hisoblangan.

Superoksid dismutaza (SOD) organizmda antioksidant rol o'ynashi mumkin bo'lgan muhim ferment moddasidir. Ko'proq va ko'proq tadqiqotlar SOD va xotira o'rtasida yaqin munosabatlar mavjudligini ko'rsatdi.

Birinchidan, SOD fermenti tanadan erkin radikallarni olib tashlashga va oksidlovchi stressning neyronlarga zararini kamaytirishga yordam beradi va shu bilan asab tizimining normal faoliyatini himoya qiladi. Asab tizimining normal ishlashi inson xotirasi, o'rganish va boshqa ilg'or fikrlash faoliyatining kalitidir. Shuning uchun etarli SOD darajasi xotira, bilish va o'rganishning yaxshi holatini saqlab qolishimizga yordam beradi.

Ikkinchidan, SOD shuningdek, inson tanasini etarli miqdorda kislorod bilan to'ldirishga yordam beradi. Yoshi va atrof-muhitning o'zgarishi bilan organizmdagi kislorod ta'minoti asta-sekin kamayadi. Kislorod inson hujayralari metabolizmi uchun asosiy moddalardan biri bo'lib, yaxshi xotirani saqlash uchun ham juda muhimdir. SOD organizmga kislorod darajasini saqlab turishga yordam beradi va inson tanasining normal asosiy metabolik funktsiyalarini ta'minlaydi, shu bilan xotirani yaratish va saqlash uchun sharoit yaratadi.

Kundalik hayotda etarli SOD darajasini saqlab qolish ham juda oson. Yashil sabzavotlar, karam va sabzi kabi SODga boy sabzavotlarni iste'mol qilish kabi parhez orqali organizmdagi SOD miqdorini oshirishimiz mumkin. Bundan tashqari, yaxshi yashash odatlarini saqlab qolish, shuningdek, o'rtacha jismoniy mashqlar, etarli uyqu va boshqalar kabi sog'lom SOD darajasini saqlashga yordam beradi.

Muxtasar qilib aytganda, SOD fermenti va xotira o'rtasida yaqin munosabatlar mavjud. Tanadagi SOD miqdorini oshirish bizga sog'lom asab tizimini saqlashga yordam beradi va ilg'or fikrlash faoliyatining normal rivojlanishiga yordam beradi. Biz xotiramizni yaxshiroq himoya qilish uchun ilmiy ovqatlanish, yashash odatlari va jismoniy mashqlar orqali organizmga SOD miqdorini etarli darajada ushlab turishga yordam berishimiz kerak. Ko'rinib turibdiki, biz xotirani yaxshilashimiz kerak va Cistanche xotirani sezilarli darajada yaxshilashi mumkin, chunki Cistanche antioksidant, yallig'lanishga qarshi va qarishga qarshi ta'sirga ega, bu miyadagi oksidlanish va yallig'lanish reaktsiyalarini kamaytirishga yordam beradi va shu bilan miyaning sog'lig'ini himoya qiladi. asab tizimi. Bundan tashqari, Cistanche nerv hujayralarining o'sishi va tiklanishiga yordam beradi va shu bilan neyron tarmoqlarning ulanishi va funktsiyasini oshiradi. Ushbu effektlar xotirani, o'rganish qobiliyatini va fikrlash tezligini yaxshilashga yordam beradi, shuningdek, kognitiv disfunktsiya va neyrodegenerativ kasalliklarning paydo bo'lishining oldini oladi.

Xotirangizni yaxshilash uchun hozir bosing

2.12.5. Katalaza faoliyati. Katalaza (EC1.11.1.6) ta'sir tezligini baholash uchun 5{23} µl dan iborat tahlil qilingan aralashmaning (3.0 ml) OD nomuvofiqligi (lmax − 240 nm) hisoblanadi. tadqiqot namunasi, Na+-K+ [PO4]2- buferida (pH7,91, 0,06 M) 1,22 ml H2O2 (0,03 M) va 1,63 ml 0,06 M Na{{ 29}}K+ [PO4]2- bufer (pH 7,1) qayd etildi.

Katalaza faolligi (miyaning bir mg oqsiliga daqiqada µmol H2O2 parchalanishi) e � 43,6/M/sm [34].2.12.6 qo‘llash orqali hisoblangan. To'liq nitritlar darajasi. .e texnikasi Sastry va boshq.[35] butun miya nitritlarini (mkmolper mg miya oqsili) baholash uchun amalga oshirildi.

1{7}}0 mkl tadqiqot namunasini o'z ichiga olgan probirkalarda 145 mg mis-kadmiy amalgam, 500 mkl H2CO3 buferi (pH 8,89), 0,44 M 100 mkl NaOH va 119,8 mM 400 mkl SO4 400 mkl SO 40 400 x 400 mg 500 quvvatda olindi. 10 daqiqa davomida, va ortiqcha yuqori suyuqlik (supernatant) tanho.

Griess kimyoviy (5{6}} µl) 100 µl s ortiqcha suyuqlik tarkibiga kiritilgan. 60 daqiqalik inkubatsiyadan so'ng, OD (lmax - 548 nm to'lqin uzunligi) egizak nurli UV1700 spektrofotometridan (Shimadzu) foydalangan holda qayd etildi. Natriy azot kislotasining (0,02-0,2 mM) odatiy egri chizig'i ishlab chiqilgan va butun nitrit tenglashtirilgan.

2.12.7. Umumiy oqsillarni aniqlash. .e umumiy protein darajasi (mg/ml gomogenat) sigir zardobidagi albuminning atipik egrilik grafigi yordamida hisoblab chiqilgan, eritma kuchi 0,3 dan 3,8 mg/ml gacha. Tekshiruv kombinatsiyasi 250 µl gomogenat, 5,1 ml Lowry reaktivi, Na+-K+ [PO4]2- bufer (900 µl) va 1,1 N 500 µl FCR bilan tashkil etildi. .e OD ning nomuvofiqligi lmax - 650 nm [36] da kuzatildi.

2.13. Miya bo'limlari gistopatologiyasi. Gravitatsiya bilan oziqlanadigan diffuziya moslamasidan foydalanib, kalamushlar 10% neytral tamponlangan formaldegid (10% NBF) eritmasi bilan intrakardial (chap qorincha orqali) tarqaldi va keskin anesteziya qilindi. Gippokamp va kortikal sektorlar fiksatorga (10:1 fiksator: to'qima nisbati), ya'ni 10% NBFga bir hafta (4 daraja), 0,04% natriumazid (pH 7,4) bilan botiriladi.

Etil spirti (7 0%) 4 darajada saqlanadigan qattiq to'qimalar qismlari uchun qadoqlash eritmasi sifatida ishlatilgan. Yupqa qismlarni (8,0 mkm) olish uchun mikrotom kesgich (aylanish turi) ishlatildi, ular gematoksilin va eozin (H&E) bo'yoq bilan bo'yalgan. .slaydlar DPX-qatroni yordamida doimiy holga keltirildi, keyinchalik ular qopqoq bilan qoplangan va optik mikroskop (durbin) orqali ×40 kattalashtirishda tekshirilgan.

2.14. Statistik tahlil. Malakali eksperimentator hayvonlar kohortlariga berilgan turli xil dori-darmonlarni ko'r qilish rejimlarini tekshirib chiqdi va ma'lumotlarni baholadi. Ma'lumotlarda chet ko'rsatkichlar pragmatik emas edi (Grubb testi) va Kolmogorov-Smirnov testi va Leven testi mos ravishda o'zgaruvchilarning normal taqsimlanishini va dispersiyaning bir xilligini tasdiqladi (HOV p > 0.05, Leven testi).

Aks holda, teng bo'lmagan dispersiya (HOV p < {0}}.05, Leven testi), Welch's ANOVA (p < 0.05, F'-statistik), va Games – Howell post hoc testlari qo'llanilishi mumkin. .e normal taqsimlangan o'zgaruvchilarning vositalari tekshirildi va bir tomonlama yoki takroriy o'zgarishlarni ikki tomonlama tahlil qilish (ANOVA) bilan bog'liq edi. ANOVA holatida F-statistikada natijalar ahamiyatli (p <0,05), bir nechta taqqoslash testlari, ya'ni Tukey's HSD (halol muhim farq) yoki Bonferroni qo'llanildi. Statistik ahamiyatga ega p<0,05 da qabul qilindi va natijalar o'rtacha ± o'rtacha standart xatosi (SEM) sifatida ko'rsatildi.

3. Natijalar

3.1. QA-ICV qo'llaniladigan kalamushlarning tana massasi (g), dietasi va suvini yutish bo'yicha DSM natijalari. Tana vazni, ozuqa va suv iste'moli har hafta, birinchi kundan boshlab tahlil qilindi.

7, 14-kunlarda tana massasi (g), ozuqa va suv iste'moli sezilarli darajada kamaygan (p < {{{10}}}.001). , va 21 toshham hamkasblari bilan solishtirganda 1-kuni QA-ICV in'ektsiyasiga duchor bo'lgan kalamushlarda pragmatik edi (2-rasm). DSM (1{22}}0 mg/kg) dozasi tana vaznining sezilarli darajada oshishiga olib keldi (7p < 0.05, 14 kun p < {{38} }.01, 21-kun p < 0.001), tasma (7-kun < 0.{{6{63} }}}5, 14 kun p < 0.01, 21 kun p < 0,001) va suv iste'moli (7 kun p < 0,01, 14 kun p < 0,05) kalamushlarda QA-ICV.DSM (50) ga qarshi mg/kg), shuningdek, QA-ICV in'ektsiyasini o'tkazgan kalamushlarga nisbatan tana vaznining (21-kun p <0,05) va ozuqa iste'molining (7-kun p <0,01) QA-ICV sabab bo'lgan pasayishini sezilarli darajada susaytirdi. QA-ICV- va DNP bilan davolash qilingan kalamushlar tana massasi (g) (7p <0.05 kun, 14-kun p <0.001, 21-kun p <0.001), ozuqa (7p <0.001, 14-kun, p <0.01) sezilarli darajada oshishini aniqladi. 21 kun p <0,001) va suv iste'moli (7, 14, 21 p <0,01) yolg'iz QA-ICV ta'sirida qolgan kalamushlarga nisbatan.

3.2. DSM ning QA-ICV ga qarshi kalamushlarning harakatlanish, harakatni muvofiqlashtirish va yurishiga ta'siri. Ushbu tadqiqotda hayvonlarning lokomotoraktivligi QA-ICV yoki dori vositalaridan ta'sirlanmadi.

QA guruhi soxta guruhga nisbatan aktinometr apparatida 5 daqiqada o'rtacha hisobda sezilarli o'zgarishlarni ko'rsatmadi (3(a)-rasm). Sichqonlarning sensorimotor ishlashi va yurishini baholash uchun Rotarod va oyoq izlari tahlili ishlatilgan.

Natijalar shuni ko'rsatdiki, QA-ICV (p < 0.001) kalamushlarning harakat koordinatsiyasi (3(b)-rasm) va yurishi (3(c)-rasm) sezilarli darajada to'sqinlik qilgan, bu aylanuvchi mildan tushish uchun kechikishning pasayishi bilan aks ettirilgan. va tosham hamkasblari bilan solishtirganda oyoq izini tahlil qilishda kalamushlarning qadam uzunligi.

QA + DSM50 va QA + DSM100 guruhlari pasaygan kechikish (p < 0.05, p < 0.01) va qadam uzunligining (p) sezilarli darajada oshishini tasvirladi. <0,05, p <0,001)QA guruhiga nisbatan.

DNP bilan davolash QA-ICV ni sezilarli darajada susaytirdi va berilgan kalamushlarga nisbatan pasayish kechikishini (p < 0.001) va qadam uzunligini (p < 0,001) pasayishiga olib keldi. Faqat QA-ICV. Bundan tashqari, DSM (100 mg / kg) bilan davolash QA-ICVga duchor bo'lgan kalamushlarda DSM (50 mg / kg) ga nisbatan sezilarli yaxshilanishni (p <0,01) ko'rsatdi.

3.3. DSM ning QA-ICV ga qarshi kalamushlarning ishchi xotirasi va fazoviy uzoq muddatli xotirasiga ta'siri. NORTda diskriminatsiya indeksining (%) pasayishi ishchi turdagi xotiraning pasayishini tasdiqladi.

4 kunlik o'quv sinovlari davomida ELT darajasining bosqichma-bosqich o'sishi va izlash sinovlarida TSTQning pasayishi (oxirgi mashg'ulot sinovidan 24 soat o'tgach) MWMda kalamushlarda uzoq muddatli xotira yo'qolishini ko'rsatdi.

Ushbu tadqiqotda yolg'iz QA-ICV bilan davolashga duchor bo'lgan kalamushlar kamsitilish indeksida (%) sezilarli pasayish (p < 0.001) ko'rsatdi (4-rasm (a)).

MWM testida 17 kunlik o'quv sinovlari turli guruhlarda ELTda sezilarli o'zgarishlarni aniqlamadi, ammo 18-kuni ELTda sezilarli o'zgarishlar qayd etildi. QA kohorti soxta hamkasblarga nisbatan sezilarli darajada (p < 0.001) ELT (18-20-kun) o'sishini (rasm 4(b)) va TSTQning pasayishini (21-kun) (4-rasm (c)) ko'rsatdi.

DSM (100 mg/kg) zaiflashtirilgan QA-ICV bilan davolash diskriminatsiya indeksining (%) pasayishiga olib keldi (p < 0.0{{14} }1), faqat QA-ICV in'ektsiyasini o'tkazgan kalamushlar bilan solishtirganda ELTning oshishi (18 kun p <0,05, 19 kun p <0,01, 20 kun p <0,001) va TSTQning pasayishi (p <0,001).

QA + DSM50 kohortasi diskriminatsiya indeksining (%) (p < 0.001) sezilarli o'sishini, 20 kunlik ELTning pasayishini (p < 0,01) va o'sish darajasini ko'rsatdi. QA guruhiga nisbatan TSTQ (p <0,001).

DNPdavolash diskriminatsiya indeksini kuchaytirdi (%)(p < {{0}}.001), ELTni pasaytirdi (18-kun p < 0.01, kun 19p <0.001, 20-kun p <0.001) va QA-ICV qo'llangan kalamushlarda TSTQ (p <0.001) ko'tarildi, ular avtomobil bilan davolash qilingan QA-ICV kalamushlari bilan solishtirganda. Bundan tashqari, DSM (100 mg / kg) takroriy in'ektsiyalari QA-ICVga duchor bo'lgan kalamushlarda DSM (50 mg / kg) ga nisbatan xotira funktsiyalarida sezilarli yaxshilanishni aniqladi.

3.4. QA-ICV AOK qilingan kalamushlarda miya mitoxondrial kompleksida DSM natijalari.

Butun miya gomogenatidagi mitoxondriyal faollik xulq-atvor sinovlaridan so'ng baholandi. Natijalar soxtaga nisbatan QA-ICV tomonidan miya gomogenatining mitoxondrial fraktsiyasida kompleks I/II stavkalarining sezilarli darajada pasayishini ko'rsatdi (p < 0.001) (5-rasm) ..QA-ICV bilan davolash bilan kompleks I/II faolligining pasayishi zaiflashdi (murakkab I p < {{0}}.05, p < 0,001; murakkab II p < 0,01, p <0,001) DSM (50 va 100 mg/kg) tomonidan 21 kun ketma-ket berilgan QA-ICV boshqariladigan kalamushlar bilan solishtirganda, faqat dori vositalarini davolash. DNP, QA-ICVinjected kalamushlarda transport vositasidan farqli o'laroq, I/II kompleksining faolligini sezilarli darajada oshirdi (p <0,001).

3.5. DSM ning QA-ICV AOK qilingan kalamushlarda miya mitoxondrial oksidlovchi stressiga ta'siri. Natijalar TBARSda sezilarli o'sish (p < 0.001) va umumiy nitritlar va GSH, GPx, SOD va miyaning mitoxondrial qismida katalaza faolligining pasayishini ko'rsatdi. QA-ICV bilan gomogenlash shamga nisbatan (6-rasm). .miyadagi TBARS (p < 0.05, p < 0.001) va umumiy nitritlar (p < {{ 21}}.05,p < 0.01) va GSHdagi pasayish (p < 0.05, p < {{ 39}}.001), GPx (p < 0.05, p < 0.001), SOD (p < 0.01, p < 0.001) va katalaza (p < 0.05, p < 0.001) DSM tomonidan zaiflashtirilgan QA-ICV bilan davolash (p<0.001) 50 va 100 mg/kg) faqat dori vositalari bilan davolash qilingan QA-ICV-administredratlarga nisbatan 21 uzluksiz kun davomida berilgan. DNP sezilarli darajada kamaygan (p <0.001) miya TBARS va totalnitritlar to'planishi va GSH, GPx, SOD va katalaza faolligini kuchaytirdi (p <0.001) QA-ICV bilan davolash qilingan kalamushlar bilan solishtirganda.

Bundan tashqari, DSM (100 mg/kg) bilan davolash lipid peroksidlanishda sezilarli pasayish (p < 0.001) va intensivlikni ko'rsatdi. QA-ICV ga duchor bo'lgan kalamushlarda DSM (50 mg / kg) ga nisbatan GSH (p <0,001), GPx (p <0,01), SOD (p <0,05) va katalaza (p <0,05) kabi endogen antioksidantlar. 3.6. QAICV ga qarshi kalamushlarda DSM ning miya gistopatologiyasiga ta'siri.

Gistopatologik tahlilda QA guruhida hujayra arxitekturasida katta o'zgarishlar kuzatildi. Shamanlar neyrodegeneratsiya belgilarini ko'rsatmadi. QA-ICV davolash kortikal va hipokampusda (CA 1 va (2) neyronlarda piknoz va plazma membranasining shishishi bilan ajralib turadigan sezilarli o'zgarishlarga olib keldi. QAICV kalamushlarini DSM yoki DNP bilan davolash neyrodegeneratsiyaning patologik belgilarini susaytirdi (7-rasm).

4. Munozara

QA (2,{1}}piridin dikarboksilik kislota) toglutamatga o'xshash eksitotoksin bo'lib, neyrodegeneratsiyani keltirib chiqarishi mumkin, chunki uning konsentratsiyasi yoshga qarab kuchayadi [5]. .e NMDAR va aminofosfonatlarning antagonistlari QA ning neyrodegenerativ eksitotoksikligini taqiqlashi mumkin, bu esa QA miyadagi NMDARlar orqali harakat qilishini ko'rsatadi [9]. BBB himoya to'sig'i sifatida ishlaydi va QA ning neyrotoksikligini cheklaydi.

Biroq, dalillar turli neyrodegenerativ kasalliklarda QA ning patologik to'planishi kuchayganligini ko'rsatadi.

Miyada xinolinat fosforiboziltransferaza (QPRT) QAto NAD+ va karbonat angidridni katabolizatsiya qiladi. QPRT faolligi eng yuqori hid bilish lampochkasida va eng pasti korteks, hipokampus va striatumda bo'ladi, bu erda QA miyaning ushbu hududlarida katta darajada neyrotoksik ta'sir ko'rsatishi mumkin. Miyaning bu sohalari kognitiv buzilishlarga olib keladigan AD, PD, HD va shizofreniya kabi ko'plab neyrodegenerativ kasalliklardan salbiy ta'sir ko'rsatadi [9, 10].

Ushbu tadqiqotda kattalar kalamushlarida BBB cheklovini bartaraf etish uchun QA to'g'ridan-to'g'ri ICV yo'li orqali o'tkazildi. DSM - bu bioaktiv tabiiy flavonoid bo'lib, u miya travmatik shikastlanishiga [16], skopolamin keltirib chiqaradigan amneziya [17], apomorfin va ketamin keltirib chiqaradigan psixoz [18] va surunkali oldindan aytib bo'lmaydigan engil stressga [19] qarshi terapevtik ta'sir ko'rsatdi.

DSM glyukoza metabolizmini, insulin signalizatsiyasini va diabetik asoratlarni kuchaytirishga qodir va u energiyaning kamayishi va neyrodegenerativ kasalliklarda yuzaga keladigan salbiy oqibatlarning oldini oladi [14, 15].

QA neyrodegenerativ kasalliklardan salbiy ta'sir ko'rsatadigan miya mintaqalarida mitoxondrial funktsiyani va energiya ishlab chiqaruvchi aerob nafas olish yo'llarini taqiqlaydi [5].

Shunday qilib, ushbu tadqiqotda dayonda QA-ICV qo'llangan kalamushlar ketma-ket 21 kun davomida DSM davolashga duchor bo'lishdi va biokimyoviy parametrlar va xatti-harakatlar funktsiyalari baholandi.

idonitrosativ stress va butun miya gomogenatining mitoxondrial fraktsiyasida QA-ICV tomonidan endogen antioksidant darajalarining pasayishi. Oldingi tadqiqotlar, shuningdek, QAin eksperimental hayvonlarida erkin radikallarning NMDARga bog'liq va NMDARga bog'liq bo'lmagan o'sishi va yallig'lanishning yomonlashishini ko'rsatadi [5, 9, 10].

Joriy tajribalarda QA miyadagi lipid peroksidatsiyasini va umumiy nitritlarni kuchaytirdi. Erkin radikallar va lipidlar, oqsillar va DNK kabi hujayrali biomolekulalardagi keyingi o'zgarishlar neyrodegenerativ kasalliklarda asosiy patogen o'zgarishlarga asoslanadi.

Lipid peroksidlar, masalan, malondialdegid (MDA), 4-gidroksi 2-nominal (4-HNE), izoprostanlar va akroleinlar juda zaharli aldegidlar bo'lib, ular bio-qo'shimchalar shaklida osongina to'planadi va chidamli bo'ladi. otofagik va boshqa olib tashlash mexanizmlariga [37, 38].

Ushbu erimaydigan qo'shimchalarning patogen ko'tarilishi hujayraning yaxlitligini buzadi, bu ichki gomeostazning yo'qolishiga, ichki komponentlarning oqishi va hujayra o'limiga olib keladi [38].

Bundan tashqari, nitratlarning ko'payishi kalamushlar miyasidagi azot oksidi ajralish darajasi bilan bevosita bog'liq. Birinchi kunida QA-ICVon qo'llanilishi kalamushlar miyasida nitratlarning sezilarli darajada oshishiga olib keldi. Azot oksidi gazsimon neyrotransmitter bo'lib, NMDARlar orqali orqaga qarab harakat qilib, sinaptik modulyatsiya va uzoq muddatli potentsiallashuvda ishtirok etadi [39, 40].

Azot oksidi postsinaptik NMDARlarning faollashuviga javoban nitrik oksid sintaza (NOS-neyronal) tomonidan biosintezlanadi. Postsinaptik NMDARlar orqali kaltsiy ionlarining kirib borishi neyron NOSni faollashtiradi, bu sinapsda presinaptik glutamat chiqarilishini rag'batlantiradigan azot oksidi hosil bo'lishiga olib keladi.

Biroq, haddan tashqari NMDAR faollashishi va natijada kaltsiy ionlari va azot oksidi biosintezining hujayra ichidagi ochiq oqimi alkoksil (RO_), superoksid (O•-2) kabi reaktiv kislorod turlarining (ROS) ko'payishiga olib keladi. , peroksil (RO2·), gidroksil radikallari (OH•) va vodorod peroksid (H2O2) va azotli angidrid (N2O3), peroksinitrit (ONOO−) va azot dioksidi (•NO2) kabi reaktiv azot turlari (RNS) [41–43].

RNS oqsillarni o'zgartiradi, bu toprotein nitrozilatsiyasiga va S-glutatiollar va nitrosotiollarning shakllanishiga olib keladi. Azot oksidi qon tomirlarining shikastlanishida (masalan, BBB va ishemiya shikastlanishi) va makrofaglar, astrositlar, matritsa metalloproteinazalari (MMP) va adezyon molekulalarining faollashishi orqali yallig'lanish reaktsiyasida ishtirok etadi [44, 45].

Peroksinitritlar guanin nukleotidlarining nitrlanishiga olib keladi, bu esa DNKning bir zanjirli yorilishiga olib keladi, PARP yo'lini qo'zg'atadi va DNKni tuzatish fermentlarini taqiqlaydi [46].

Nitrik oksid sitoxrom c oksidazasini inhibe qiladi va shu bilan mitoxondriyal ATP ishlab chiqarishni bostiradi [39]. Demak, ortiqcha nitrit to'planishi miyada energiya tanqisligi holatini keltirib chiqarishi mumkin, bu esa ATPga bog'liq ion nasoslarining disfunktsiyasini, natriy ionlarining to'planishini (hujayra shishishiga olib keladi), kaltsiy oqimining kuchayishini va yuqori qo'zg'aluvchanlikni ta'minlaydi [47]. .sitoplazmadagi kaltsiy darajasini oshirish ROS va RNS chiqishining asosiy mexanizmi va proteazlar va kalpainlarning faollashuvi orqali kaltsiyga bog'liq hujayralarni yo'q qilish yo'llarini faollashtirishdir [48].

Neyrodegenerativ kasalliklarda erkin radikallar, kaltsiy, lipidlarning peroksidlanishi va DNKning buzilishi kasalliklarning patogen rivojlanishining asosini tashkil qiladi. Oldingi tadqiqotlarda oksidlovchi stressning biomarkerlarini tahlil qilish miya omurilik suyuqligida MDA, 4-HNE va 8-gidroksi-2'-deoksiguanozin (8-OHdG) ning kuchayishini aniqladi. , miya va qon namunalari [49, 50].

Joriy tajribalarda DSM (50 va 100 mg/kg) miyaning mitoxondrial qismida lipid peroksidatsiyasi va umumiy nitritlarning QA-ICV tomonidan qo'zg'atilgan kuchayishini sezilarli darajada oshirdi.

Avvalgi hisobotlar, shuningdek, eksperimental hayvonlarning butun miyasida DSM ning erkin radikallarni susaytiruvchi va yallig'lanishga qarshi harakatlarini tasdiqlaydi [16-20]. .e standart dori, DNP, shuningdek, QA-ICV ta'siriga uchragan kalamushlar miyasida lipid peroksidatsiyasini (TBARS) va umumiy nitritlarni susaytiradi.

ROS va RNS biosintezining asosiy joylari mitoxondriyalar, peroksizomalar, endoplazmatik retikulum va plazma membranalaridir [51]. Mitoxondriyadagi hujayrali nafas olish superoksid va gidroksil radikallari kabi ROS ning asosiy generatoridir. Peroksizomalar vodorod peroksid hosil qilishning markaziy markazidir.

Superoksid anioni molekulyar kisloroddan elektronni oladi va Fenton reaktsiyasi orqali vodorod peroksidga dismutaz qiladi. Keyinchalik, bu vodorod periks katalaza tomonidan suv va kislorodga metabollanadi yoki gidroksil radikallarini hosil qilishi mumkin.

H2O2, shuningdek, Xaber-Vays reaktsiyasi orqali zaharli gidroksil radikallarini hosil qilishi mumkin. Superoksid anioni azot oksidi bilan reaksiyaga kirishib, peroksinitritlar hosil qilishi mumkin [52, 53]. Bu erkin radikallar mitoxondrial o'tkazuvchanlik o'tish teshiklarini (mPTP) qo'zg'atadi, bu sitoxrom c ning oqishi, mitoxondriyal degeneratsiya va hujayralar nobud bo'lishiga olib keladi.

Mitoxondrial kompleks I NADH dan nafas olish zanjiriga oldingi elektronlarning kirish eshigidir. I va II komplekslar yuqori NADH/NAD+ nisbatiga ortiqcha javob sifatida superoksid anionlarini hosil qilishi mumkin, bu esa kompleks I va elektronda anabridjlangan FMN (flavin mononukleotid) maydoniga olib keladi. suksinat dehidrogenaza (SDH)-qaytarilgan Q koenzimiga qo'shgan hissasi yuqori protonmotiv kuch bilan bog'liq bo'lib, teskari elektron tashishga olib keladi [54]. QA mitoxondrial funktsiyalarning yaxshi tan olingan inhibitoridir [5].

Ushbu tadqiqotda QA-ICV kalamushlarda miya mitofragment kompleksi I va II tezligini inhibe qilishga olib keldi. .e Mitoxondriyal elektron tashish zanjiri funktsiyalarida QA bilan bog'liq buzilishlar kalamushlar miyasida oksidlovchi shikastlanishning asosiy sababi bo'lishi mumkin. Biroq, DSM (50 va 100 mg / kg) QA-ICV bilan bog'liq kalamushlarda miya kompleksi I va II faoliyatini tiriltirdi.

DNP bilan davolash, shuningdek, QA-ICV sitotoksikligiga qarshi miya mitoxondriyalarida kompleks I va II funktsiyalarida sezilarli yaxshilanishni ko'rsatdi. Antioksidant darajalarining tahlili shuni ko'rsatdiki, 21 kun ketma-ket DSM bilan davolash GSH, GPx, SOD va katalaza kabi endogen antioksidantlarning QA-ICV sabab bo'lgan pasayishini susaytirgan.

SOD, katalaza va tiolga bog'liq antioksidantlar, masalan, GSH va GPx, oksidlovchi shikastlanishga qarshi himoyaning 1-chi liniyasidir. SOD va katalaza mos ravishda superoksidianionlar va H2O2 ni detoksifikatsiya qiladi, GPx va GSH esa H2O2 ni olib tashlash va lipidperoksidlarni (MDA, 4-HNE va boshqalar) tegishli spirtlarga, xususan, mitoxondriya va sitoplazmaga parchalashda ishtirok etadi. 55]. Hozirgi tadqiqotda DSM (50 va 100 mg/kg) yoki DNP rejimlari kalamushlarning miyasida QA-ICV neyrotoksikligiga qarshi antioksidant ta'sirni kuchaytirdi.

DSM va DNP tomonidan neyroprotektsiya kalamush miyasining hipokampus va kortikal mintaqalarini H&E bo'yash tahlilida aniq bo'ldi. QA-ICV bilan davolash hujayra arxitekturasida sezilarli o'zgarishlarga olib keldi, bu piknoz, hujayralar shishishi va plazma membranasining ko'payishi bilan ajralib turadi. Ushbu patogen o'zgarishlar kalamushlarning alohida guruhlarida DSM va DNPtreatments tomonidan susaytirildi. Joriy protokolda DSM (100 mg/kg) QA-ICV ga nisbatan inbiokimyoviy ko'rsatkichlarning sezilarli yaxshilanishini ko'rsatdi va DSM (50 mg/kg) bilan solishtirganda gistologik tahlilda aniqlangan patologik hujayra mutilatsiyasini susaytirdi. Shunday qilib, ushbu topilmalar neyrodejeneratsiyaning QA-ICV kalamush modelida DSM ning dozaga bog'liq ta'sirini ko'rsatdi.

Haftalik tahlilda QAICV bilan davolash qilingan kalamushlarda o'rtacha tana massasi (g), ozuqa va suvni iste'mol qilishning sezilarli darajada pasayishi pragmatik edi. Faqatgina QA-ICV bilan davolashda harakatni muvofiqlashtirish (rotarod testi) va yurish (oyoq izini tahlil qilish) ham salbiy ta'sir ko'rsatdi.

Joriy tajribalar to'plamida turli xil dori-darmonlarni davolash tayanch-harakat faoliyatiga ta'sir ko'rsatmadi. Biroq, DSM yoki DNP bilan davolash qilingan kalamushlar QA-ICV toksikligiga qarshi harakatni muvofiqlashtirish va yurishda sezilarli yaxshilanishni ko'rsatdi. Tana massasi (g), parhez va suv iste'moli, shuningdek, QA-ICV bilan davolash qilingan kalamushlarning DSM yoki DNP alohida guruhlari tomonidan yaxshilandi.

Xotira parametrlari NORT (16 kun) va MWM (17-21 kun) paradigmalari yordamida baholandi. NORTda QAICV bilan davolash qilingan kalamushlarning diskriminatsiya qobiliyatining pasayishi ish xotirasining yo'qolishini qo'llab-quvvatladi.

MWM sinovlarida QA-ICV to'rt kunlik o'quv sinovlari davomida ELTning oshishiga va 5-kuni TSTQin olish sinovlarining pasayishiga olib keldi. Ushbu topilmalar QAICV bilan davolashda kalamushlarning uzoq muddatli fazoviy xotirasi pasayganligini ko'rsatdi. DSM yoki DNP muolajalari kamsitish indeksining, TSTQning pasayishini va 1-kuni QA-ICV bilan e'tiroz bildirilgan ELTin kalamushlarining ko'payishini susaytirdi. .Zamonaviy topilmalar eksperimental hayvonlarda DSM xotirasini yaxshilash faolligini tasdiqlovchi oldingi hisobotlarga mos keladi [16-20] ].

DSM (100 mg/kg) QA-ICV ga nisbatan DSM (50 mg/kg) ga nisbatan ishchi xotira va uzoq muddatli xotirada dozaga bog'liq yaxshilanishni ko'rsatdi. .e topilmalar DSM QA-ICV modelida kalamushlarda xotira, harakatni muvofiqlashtirish va yurish kabi miya funktsiyalarini yaxshilashi mumkinligini ko'rsatdi. Diosmin aflavonoid glikozid bo'lib, shakar qismi (rutinosiddisaxarid) va aglikon guruhi diosmetinga ega. Bir nechta preklinik tadqiqotlarda diosmin parenteral yo'l (ip) orqali yuboriladi [17, 56] va klinik sharoitda klinikadan oldingi natijalarni yaxshiroq tarjima qilish uchun mos formulani topish kerak.

Zarrachalar hajmini kamaytirish va sirt maydonini ko'paytirish uning biologik to'siqlar orqali tashishini kuchaytirish uchun ishlatilishi mumkin [57]. Shu nuqtai nazardan, mikronlashtirilgan diosmin formulasi [58] ko'proq bioavailability va farmakokinetik xususiyatlarni ko'rsatdi, ammo diosminni miyaga maqsadli etkazib berish hali ham katta muammo bo'lib qolmoqda.

5. Xulosalar

Hozirgi terapevtik stsenariyda neyrodegenerativ holatlarning patogen evolyutsiyasini jonlantirishga yordam beradigan bunday dori mavjud bo'lmaganda, masalan, AD va HD, tabiiy vositalarga o'tish pragmatik hisoblanadi. Hozirgi terapevtik strategiyalar faqat simptomatik yaxshilashga qaratilgan va hech kim kasallikning rivojlanish ketma-ketligini o'zgartira olmaydi. Biz neyrodegeneratsiyaning QA-ICV kalamush modelida diosmin kognitiv funktsiyalarni (ishchi va uzoq muddatli fazoviy xotira) tiriltirganini kuzatdik. Diosmin sensorimotor ish faoliyatini va QA-ICV ga qarshi kalamushlarning yurishini yaxshiladi. Diosmin bilan davolangan QA-ICV kalamushlarida xatti-harakatlarning yaxshilanishi, birinchi navbatda, mitoxondrial disfunktsiyaning susayishi va miyaning oksidlovchi shikastlanishi bilan bog'liq. Demak, diosmin mitoxondriyal disfunktsiyadan kelib chiqadigan neyrodegenerativ kasalliklarga qarshi muqobil terapevtik vosita sifatida ishlatilishi mumkin. Biroq, uning neyroprotektiv mexanizmini va klinik ko'rinishlarini qo'llashni ko'zda tutish uchun qo'shimcha tadqiqotlar majburiydir.

Ma'lumotlar mavjudligi

.e ushbu tadqiqot ma'lumotlariga tegishli muallifning tegishli talabiga binoan kirish mumkin.

Axloqiy tasdiqlash
.e Hayvonlar boʻyicha tajribalarning butun toʻplami IAEC tomonidan maʼqullangan (Tasdiqlash raqami. ASCB/IAEC/14/20/145) va “Hayvonlar boʻyicha eksperimentlarni nazorat qilish va nazorat qilish qoʻmitasi (CPCSEA) tomonidan chiqarilgan hayvonlarni sinovdan oʻtkazish boʻyicha axloqiy yoʻriqnomalar asosida amalga oshirilgan, GOI, Nyu-Dehli."

Manfaatlar to'qnashuvi

Mualliflar manfaatlar to'qnashuvi yo'qligini e'lon qiladi.

Ma'lumotnomalar

[1] T. Heinbockel va B. Antonei: Kirish bobi: Neyron funktsiyasi va disfunktsiyasining ekimyoviy asoslari, Miya funktsiyasi va disfunktsiyasining neyrokimyoviy asoslari.

[2] AV Eapen, D. Fernandez-Fern ´ Mendez, J. Georgiou va boshqalar, ´ "GluN2D o'z ichiga olgan NMDA retseptorlarining qisqa muddatli potentsiallashuvi va sichqonchaning gipokampal bo'laklarida uzoq muddatli potentsiallashuvining ko'p roli", Neyrofarmakologiya, vol. 201, b. 108833,2021.

[3] A. Singh, R. Kukreti, L. Saso va S. Kukreti, "Oksidativ stress: neyrodegenerativ kasalliklarda asosiy modulyator", Molecules, jild. 24, yo'q. 8, p. 1583, 2019.[4] J. Song, X. Yang, M. Zhang, C. Vang va L. Chen, "Mitoxondriyadagi glutamat almashinuvi Altsgeymer kasalligi bilan chambarchas bog'liq", Altsgeymer kasalligi jurnali, jild. 84, yo'q. 2, 557–578-betlar, 2021 yil.

[5] R. Lugo-Huitron, P. Ugalde Muñiz, B. Pineda, J. Pedraza-´Chaverri, C. Ríos va V. Perez-de la Cruz, "Kinolin kislotasi: endogen neyrotoksin. bir nechta maqsadlar bilan, "Oxidative Medicine and Cellular Longevity, jild. 2013 yil, ID-modda 104024,14 bet, 2013 yil.

[6] TW Stone va LG Darlington, "Kinurenin yo'llari kognitiv va neyrodegenerativ kasalliklarda terapevtik maqsad", British Journal of Pharmacology, jild. 169, yo'q. 6, bet. 1211–1227, 2013 yil.

[7] VK Sharma, TG Singh, NK Prabhakar va A. Mannan, "Kynurenin metabolizmi va Altsgeymer kasalligi: potentsial maqsadlar va yondashuvlar", Neyrokimyoviy tadqiqotlar, 2022.

[8] DC Maddison va F. Giorgini, "Kinurenin yo'li va neyrodegenerativ kasallik," Hujayra va rivojlanish biologiyasi bo'yicha seminarlar, jild. 40, 134–141-betlar, 2015 yil.

[9] Y. Liang, S. Xie, Y. He va boshq., "Kynurenin yo'li Altsgeymer kasalligida biomarkerlar metabolitlari", Kasallik belgilari, jild. 2022, maqola ID 9484217, 15 bet, 2022 yil.

[10] GJ Guillemin, "Kinolin kislotasi, qochib bo'lmaydigan neyrotoksin", FEBS jurnali, jild. 279, yo'q. 8, 1356–1365-betlar, 2012 yil.

[11] MK Arora, A. Kisku va A. Jangra, "Mangiferin intraserebroventrikulyar-xinolin kislotasi tomonidan qo'zg'atilgan kognitiv nuqsonlarni, oksidlovchi stressni va Wistarratsdagi neyroinflamatsiyani yaxshilaydi", Hindiston Farmakologiya jurnali, jild. 52, yo'q. 4, bet. 296–305, 2020.

[12] M. Sharifi-Rad, C. Lankatillake, DA Dias va boshq., "Tabiiy birikmalarning neyrodegenerativ kasalliklarga ta'siri: preklinikdan farmakoterapevtikaga", Journal of ClinicalMedicine, jild. 9, yo'q. 4, p. 1061, 2020 yil.

For more information:1950477648nn@gmail.com