1-qism: Isorhamnetinning qandli diabetga ta'siri va u bilan bog'liq asoratlar: In Vitro va In Vivo tadqiqotlarini ko'rib chiqish va ishtirok etgan molekulyar yo'lning post Hoc transkriptom tahlili

Qo'shimcha ma'lumot uchun. aloqatina.xiang@wecistanche.com

Abstrakt: Qandli diabetmellitus, ayniqsa 2-toifa (T2DM) global sog'liqni saqlashning asosiy muammosidir. DM insulin sekretsiyasi va hujayralarning insulinga sezgirligi tufayli insulin qarshiligi deb ataladigan yuqori darajada glikemiya va insulinemiya bilan tavsiflanadi. T2DM nefropatiya, neyropatiya va retinopatiya kabi ko'plab va og'ir asoratlarni keltirib chiqaradi, bu esa turli ichki to'qimalarda, xususan, oshqozon osti bezi, yurak, yog 'to'qimalari, jigar va buyraklarda hujayra oksidlovchi shikastlanishiga olib keladi. O'simlik ekstraktlari va ularning bioaktiv fitokimyoviy moddalari T2DM va unga bog'liq bo'lgan asoratlar uchun yangi terapevtik va profilaktika muqobillari sifatida qiziqish uyg'otmoqda. Shu munosabat bilan, isorhamnetin, o'simlikflavonoid, uning diabetga qarshi potentsial ta'siri uzoq vaqtdan beri o'rganilgan. Ushbu sharh uning glyukoza darajasini pasaytirish, oksidlanish holatini yaxshilash, yallig'lanishni engillashtirish va in vitro va in vivo tadqiqotlarda bildirilgan signalizatsiya yo'llarini tartibga solish orqali lipid metabolizmi va adipotsitlar differentsiatsiyasini modulyatsiya qilish orqali diabet bilan bog'liq kasalliklarni kamaytirishga ta'sirini tavsiflaydi. Bundan tashqari, biz ildiz hujayralariga asoslangan vosita yordamida izorhamnetinning biologik faolligini post hoc butun genom transkriptom tahlilini o'z ichiga olamiz.

Kalit so'zlar: izorhamnetin; quercetin; biologik faoliyat; qandli diabet; molekulyar yo'llar; mikromassiv

Qo'shimcha kontaktlarni bilish uchun shu yerni bosing

1.Kirish

O'simliklar qadim zamonlardan beri dunyoning deyarli barcha qit'alarida an'anaviy tibbiyot sifatida ishlatilgan. Ularning dorivor maqsadlarda qo‘llanilishi sabablarini o‘rganish bo‘yicha olib borilgan ilmiy tadqiqotlar bioaktiv molekulalarni o‘rganishga olib keldi. Ekstremal atrof-muhit sharoitida o'sadigan ekstremofil o'simliklar manfaatdor bioaktiv molekulalarning yaxshi potentsial manbai hisoblanadi. Aslida, bu ekologik cheklovlar disfunktsional kislorod almashinuvining kelib chiqishidadir, bu reaktiv kislorod turlarini (ROS) ko'paytirish orqali oksidlovchi stressga olib keladi [1,2]. Ba'zi o'simliklar, masalan, galofitlar kuchli kuchga egaantioksidantUshbu zararli birikmalarni yo'q qilish tizimi. Qiziqarli bioaktiv molekulalar orasida fenolik birikmalar mavjud. Bir qator tadqiqotlarda polifenollarga boy o'simliklarni laboratoriya sharoitida cheklovchi sharoitda yoki bo'lmagan holda baholagan [3-10]. Yallig'lanishga qarshi va saratonga qarshi faollik kabi polifenollarga boy ekstraktlarga bir qancha biologik ta'sirlar berilgan [11-13]. Boshqa tadqiqotlar izorhamnetinning antioksidant, mikroblarga qarshi [8,{4}}] hamda semizlikka qarshi, diabetga qarshi va jigarga qarshi steatotik [17-19] ta'sirini ko'rsatdi. Ushbu polifenollar orasidaflavonoidlarajralib turadilar. Bu guruh flavonollar kabi bir nechta kichik guruhlarni o'z ichiga oladi. Isorhamnetin flavonollarning asosiy birikmalaridan biridir. Isorhamnetin - flavonoidlar sinfidan monometoksi flavon yoki O-metillangan flavonol. Buquercetinbunda metoksi guruhi 3' pozitsiyasida gidroksi guruhini almashtiradi. Ba'zi izoramnetin hosilalari tabiatda mavjud, masalan, Calendula officinalis L izoramnetin 3-O- -d-glyukopiranozid, izorhamnetin 3-O-neohesperidozid va izoramnetin 3-O-rutinosid [20]. Isorhamnetin antioksidant [21], saratonga qarshi [22], mikroblarga qarshi [23], virusga qarshi [24], yallig'lanishga qarshi va diabetga qarshi ta'sirlar [21,25-33] kabi muhim biologik xususiyatlarga ega.

Ushbu sharhda birinchi e'tibor izorhamnetinning kelib chiqishi, kimyoviy tuzilishi, izolyatsiyasi va ekstraktsiya usullari, shuningdek, fitokimyoviy jihatiga qaratiladi. Keyin, ikkinchi qismda biz ushbu flavonolning qandli diabet bilan bog'liq kasalliklarni glyukoza darajasini pasaytirish, oksidlanish holatini yaxshilash, yallig'lanishni engillashtirish va lipid metabolizmi va adipotsitlar differentsiatsiyasini modulyatsiya qilish orqali kamaytirish orqali diabetga qarshi potentsial ta'sirini tasvirlashga e'tibor qaratamiz. Nihoyat, biz ildiz hujayralariga asoslangan vositada izorhamnetinning diabet bilan bog'liq bioaktivligini o'rganish uchun ilgari nashr etilgan butun genom mikroarray ma'lumotlarimizni ikkilamchi tahlil qildik. Shuningdek, biz ushbu tadqiqot sohasida qo'llaniladigan in vitro va in vivo tadqiqotlar haqida xabar berish orqali ushbu molekulaning jalb qilingan signalizatsiya yo'llarini tartibga solishga ta'sirini ta'kidlashni maqsad qilganmiz. Ushbu sharhda biz izorhamnetinning diabetga qarshi faolligi bilan solishtirganda xususiyatlarini ochib berdik.quercetinBu izorhamnetinning metaboliti va diabetni tabiiy davolashda muhim ma'lumotnoma hisoblanadi.

2. Muayyan polifenollar va flavonoidlardagi bioaktiv molekulalarning umumiy ko'rinishi

2.1. O'simliklardagi bioaktiv molekulalarning kelib chiqishi sifatida oksidlovchi stress

Bir nechta o'simliklar turli xil atrof-muhit sharoitlariga (sho'rlanish, qurg'oqchilik, UV nurlari, og'ir metallar, haddan tashqari harorat, ozuqa moddalarining etishmasligi, havoning ifloslanishi va patogen hujumlar) duch kelishi mumkin. Ushbu cheklovlar reaktiv kislorod turlarini (ROS) ko'paytirish orqali oksidlovchi stressni keltirib chiqaradigan kislorod almashinuvi disfunktsiyalarining kelib chiqishi hisoblanadi. Kislorod molekulasi (O2) fotosintez qiluvchi organizmlarda muhim rol o'ynaydi. Dastlab, yuqori o'simliklar va suv o'tlarida elektronlar ishtirok etgan gaz almashinuvi xloroplastlarda kun davomida karbonat angidridni ushlab, kislorod hosil qilish orqali sodir bo'ladi. Bu gaz almashinuvi elektronlarni o'z ichiga oladi. Haqiqatan ham, jiddiy ekologik cheklovlar sharoitida kislorodning katta qismi kamaymaydi va shuning uchun xloroplastlarning to'g'ri ishlashi va elektronlarning uzatilishidagi nomutanosiblik tufayli o'simlik hujayralarining ba'zi organellalarida ROS hosil qilishi mumkin [1,2]. 1]. Bundan tashqari, yuqorida aytib o'tilgan ekologik cheklovlar ostida gidroksil radikali (OH), superoksid anion radikali (O,-), alkoksil va peroksil radikallari (mos ravishda RO: va RO2), vodorod peroksid (H2O2) kabi ko'plab ROSlar ishlab chiqariladi. ), gipoxlorit radikali (-OCl), yagona kislorod (O2), azot oksidi radikali (NO) va boshqa lipid peroksidlar (masalan, malondialdegid va 4-gidroksinonenal)[2,34,35]. Ba'zida ROS o'simliklarning fiziologik xulq-atvorida, masalan, urug'larning o'sishi va rivojlanishi, to'qimalarning rivojlanishi va differentsiatsiyaning oldingi bosqichlarida hujayra proliferatsiyasidan hujayra uzayishiga o'tish jarayonida hujayra signalizatsiyasida rol o'ynashi mumkin [36] . Yuqori darajada, bu molekulalar membranalarning lipid peroksidatsiyasi, oqsillar va DNKning o'zgarishi va hujayra o'limi kabi molekulyar zararga olib keladi [1,35,37]. Ba'zi o'simliklar, masalan, galofitlar kuchli antioksidant tizim orqali bu sharoitlarga yaxshi moslashish qobiliyatiga ega. Galofitlar polifenollar [3-10] kabi ikkilamchi metabolitlarning manbai ekanligi ma'lum. Ushbu mualliflarning ta'kidlashicha, og'ir sharoitlarda polifenollar stressdan kelib chiqadigan oksidlovchi shikastlanishdan himoya qilishda muhim rol o'ynash uchun sintezlanadi. Ushbu fenolik birikmalarning biosintezi, tarkibi va faoliyati ularning tarkibi va o'simliklarda tarqalishiga ta'sir qiluvchi bir qancha tashqi (yorug'lik, harorat, sho'rlanish va quruqlik) va ichki (genotip, organ va rivojlanish bosqichi) parametrlariga bog'liq. 8,38,39]. Masalan, Pyracantha coccinea da flavanonlar, flavonlar va flavonollar kabi ba'zi flavonoidlar vegetativ fazada kurtaklarda va faqat reproduktiv davrda ildizlarda mavjud 40]. Boshqa tomondan, bir qancha mualliflar bu fenolik birikmalar yallig'lanishga qarshi va saratonga qarshi faollik kabi boshqa biologik xususiyatlarga ega ekanligini ko'rsatdi [11-13]. Boshqa tadqiqotlar fenolik ekstraktlarning antioksidant, mikroblarga qarshi [8,{27}}] hamda diabetga qarshi [18,41,42] ta'sirini ko'rsatdi.

2.2. Tabiiy antioksidantlarning tasnifi

Antioksidant tizimni ushbu komponentlarning tabiatiga ko'ra fermentativ yoki ferment bo'lmagan birikmalarga ajratish mumkin. Birinchisiga superoksid dismutaza (SOD), katalaza (CAT), askorbat peroksidaza va glutation reduktaza kiradi [1,3542-44]. Ushbu fermentlar bilan bog'liq genlar o'rim-yig'imdan keyin saqlash ildizining fiziologik buzilishi va osmotik stress va abscisik kislota, shuningdek Xanthomonas axonopodis infektsiyasiga javoban ularning ahamiyatini ochib berdi [44]. Ikkinchi guruhga asosan fenolik birikmalar, karotinoidlar, vitaminlar va osmolitlar kiradi [1]. Fenolik birikmalar bir yoki bir nechta benzol halqalarining mavjudligi bilan ajralib turadi va asos molekulasining murakkabligi, gidroksilning soni va joylashishi, polimerlanish darajasi bilan farqlanadi. Ushbu birikmalar ikkilamchi metabolitlar bo'lib, ular uchta keng guruhga bo'linadi: fenolik kislotalar (benzoik va sinnamik kislotalarning hosilalari), flavonoidlar (flavonollar, flavonollar, flavanonlar, flavonlar, antosiyaninlar) va taninlar (gidrolizlanadigan taninlar va proantosiyanidinlar). Bu molekulalardan tashqari stilbenlar, lignanlar va kumarinlar ham ajralib turadi [45].

2.3. Flavonoidlarning kelib chiqishi va biokimyoviy tuzilishi, xususan, Isorhamnetin

Fenolik birikmalar o'simliklarda keng tarqalgan ikkilamchi metabolitlardir. Ushbu birikmalar bir yoki bir nechta gidroksil guruhlari (OH) bo'lgan aromatik halqaga ega va oddiy fenolik kislotalardan taninlar kabi polimerlangan birikmalargacha bo'lgan molekulalarni o'z ichiga oladi. Fenolik birikmalarning sintezi murakkab jarayon bo'lib, bir necha bosqichlardan o'tadi. Fenolik birikmalar ikkita kelib chiqish yo'li bo'lgan bioaktiv molekulalardir: bir tomonda shikimik kislota va boshqa tomondan fenilpropanoid molekulalari. Izoramnetin kabi flavonoidlarning biosintezi shu yo'llarga asoslanadi. Aslida, bir tomondan, shikimat bir yoki bir nechta gidroksil funktsiyasini bajaradigan bir yoki bir nechta benzol halqalariga (C6) ega bo'lgan polifenollarning asosiy skeletini beradi. Boshqa tomondan, fenilalaninning sinnamik kislotaga kondensatsiyasi natijasida hosil bo'lgan C6-C3 asosining sintezi mavjud (1-rasm)[46].

Aniqroq aytganda, shikimik kislota bir necha reaksiyalar asosida bo'lib, fenolik birikmalarning tashabbuskorlari bo'lgan aromatik aminokislotalarning skeletini ifodalaydi. Birinchi bosqich ikkita molekula birikmasidan iborat: fosfoenolpiruvat va eritroz 4-fosfat, ular to'rtta reaktsiyadan so'ng fenoliklarning birinchi skeleti: shikimat yoki shikimik kislota (CHoOs) hosil bo'lishiga olib keladi. Bu keyinchalik ikkita gidroksil guruhi bilan fenolik moddalarni tavsiflovchi birinchi halqani taqdim etadi. Shikimat oltita reaksiyaga kirishadi, ular birinchi aminokislota bilan yakunlanadi: fenilalanin. Ikki asosiy ferment, fenilalanin ammiak-liyaza (PAL) va sinnamat{2}}gidroksilaza (C4H) tufayli fenilalanin ketma-ket sinnamat va p-kumarat hosil qiladi. fenolik birikmalar. P-kumarat molekulasi kumarin hosilalarining kelib chiqishida joylashgan. Fenilpropanoid molekulalarini sintez qilish yo'li 4-kumarat CoA ligaza (4CL) deb ataladigan asosiy ferment mavjudligi bilan tavsiflanadi, u koenzim A (CoA) p-kumarikning tiol funktsiyasi ishtirokida katalizlanadi. kislotani 4-kumaroil CoA(C30Ha2N-O18P, S) ga aylantiradi. Flavonoidlarning aromatik A-halqasi malonil-KoA (-C6) ning uchta molekulasining kondensatsiyasini ta'minlaydi.

Keyinchalik, 4-kumaroyl CoA naringenin xalkonini hosil qildi, bu aromatik B-halqa va 3C halkon (C6-C3-) o'rtasidagi bog'liqlikni tushuntirdi. Kalkon bu mavzuda asosiy element hisoblanadi, chunki u ikkita benzol halqasidan iborat o'n besh uglerodli skeletga asoslangan barcha flavonoidlarning kashshofi hisoblanadi. Keyinchalik, xalkon izomeraza (CHI) ta'sirida naringeninga (flavanon yoki trihidroksi flavon deb ataladi) aylanadi. Bir tomondan, apigenin, akasetin, xrizin yoki luteolin kabi flavonlar flavon ishtirokida naringenindan sintezlanadi. sintaza (FNS).Boshqa tomondan, naringenindan ikkita ferment ishtirokida turli flavonollar va süksin kislotasi birikmalari hosil bo'ladi; flavanon 3-dioksigenaza (F3D) va flavonol sintaza (FS). Flavonol hosilalaridan tashqari kaempferol, miritsetin va quercetin kabi boshqa birikmalar ham ishlab chiqariladi. S-adenosil-L-metionindan metil guruhini o'tkazish orqali izorhamnetin flavon 3'-O-metiltransferaza (FMT) [47,48] ishtirokida ishlab chiqariladi. Keyin izorhamnetin flavonoidlar sinfidan monometoksi flavon yoki O-metillangan flavonoldir. Bu quercetin (prekursor) bo'lib, unda 3' pozitsiyasidagi gidroksi guruhi metoksi guruhi bilan almashtiriladi. Tabiatda ba'zi izoramnetin hosilalari mavjud, masalan, Calendula officinalis L izoramnetin 3-O- -d-glyukopiranozid, izoramnetin 3-O-neohesperidozid va izoramnetin 3-O-rutinosid .[20].

Aslida, flavonoidlar polifenollar oilasining eng muhim guruhlaridan biri hisoblanadi. Ular yopiq piran halqasini (C halqasini) tashkil etuvchi uchta uglerodli zanjir bilan bog'langan ikkita benzol halqalari (A va B halqalari, 2-rasmga qarang) bo'lgan difenil propan turiga asoslangan tuzilishga ega. Shuning uchun ularning tuzilishi C6-C3-C6 deb ataladi. O-glikozillanish pozitsiyalari flavonlar, izoflavonlar, flavanonlar va flavonollarda C7, flavonollar va antosiyanidinlarda C3. C-glikozillanish pozitsiyalari flavonlarda C6 va C8 dir [49]. Bundan tashqari, fenolik birikmalarning antioksidant rolining ahamiyati molekulaning gidroksillanish darajasi bilan bog'liq. Flavonoidlar tarkibiga izoflavonlar, flavonlar, flavanonlar va ularning glikozidlari va flavonollari kiradi. O'simliklarda UDPga bog'liq bo'lgan glikosiltransferaza fermenti izoramnetinning glikozid shakli (isorhamnetin 3-O-glyukozid) uchun javobgardir. Ushbu ferment metil guruhini tsiklga o'tkazish va glikozid funktsiyasini izorhamnetin bilan bog'lash uchun nukleotid difosfat shakarlardan, odatda uridin difosfat (UDP) - shakarlardan foydalanadi [51].

2.4. Dorivor o'simliklardan olingan Ilsorhamnetinni ajratish va tahlil qilish

Dorivor o'simliklarda izorhamnetinning tarqalishi juda keng va olish va tahlil qilish usullari xilma-xildir. Isorhamnetin hosilalari ayniqsa talab qilinadi. Gidroksil va metil guruhlari ularning tavsifida yordam beradi. Izoramnetinni ajratib olish uchun ba'zi usullar qo'llaniladi, ular orasida fraksiyalash, kimyometrik yondashuvlar, ferment va superkritik suyuqlik ekstraktsiyasi (SFE-CO2) yordamida. Birinchidan, fraksiyalash lipid o'z ichiga olgan namunalardan barcha yog' va lipofil pigmentlarni olib tashlash orqali ekstraktsiyani soddalashtirish uchun ishlatilishi mumkin. Yog'sizlangan namuna, shuningdek, metanol va suv aralashmasida maseratsiyadan oldin ultratovush qilinadi. Keyin xromatografiya fenolik birikmalarni, ayniqsa flavonoidlarni tahlil qilish uchun ishlatilishi mumkin [49]. Ushbu oxirgi birikmalar uchun LC-MS ishlatiladi va elektrosprey ionizatsiyasi (ESI) va atmosfera bosimi kimyoviy ionizatsiyasi tez-tez qo'llaniladi va flavonoidlar uchun eng yaxshi sezgirlik odatda salbiy ion rejimida erishiladi [49]. Masalan, Tunis cho'lidan to'plangan Calligonum Azel Maire o'simlik fraksiyalarining fitokimyosi baholandi va flavonlar orasida fenolik moddalarni aniqlash uchun UHPLC-ESI-QTOF massa spektrometriyasining to'rt baravar parvoz vaqti bilan birlashtirilgan ultra yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi qo'llanildi. va flavanollar aniqlangan eng ko'p fenolik birikmalar edi [52]. Aniqroq aytganda, LC/ESI-MS/MS texnologiyasidan foydalangan holda, Mesembryanthemum edule yegulik halofitining barglarida asosiy birikmalar sifatida izoramnetin glyukozid va izoramnetin glyukozil-ramnozid mavjudligi tasdiqlandi [3]. Bu ishni ko'plab polifenollarni tavsiflash uchun LC-ESI-TOF-MS dan foydalangan boshqalar kuzatdilar; Ular orasida flavonoidlar arthrocnemum indicum [5], Tamarix gallica [16], Glaucium flavum [13] va Salsola kali[8] kabi halofitlarning toʻliq gullash bosqichining havo qismlaridan aniqlangan. Oxirgi ishlarga o'xshab, flavonlar, flavonollar va flavonoid alkaloidlari kabi fenolik moddalarni aniqlash uchun Artemisia o'simlikining LC-ESI-TOF-MS va GC-MS profillashi amalga oshirildi [7]. Pancratium maritimum ustida yana bir ish olib borildi va HPLC-DAD-ESI/MS tahlili flavonoidlar, shu jumladan flavonolni pentoksid bilan izorhamnetin va geksozid konjugatlari, masalan, izorhamnetin di-geksozid [53] mavjudligini aniqladi.

Yog'li bo'lmagan birikma sifatida flavonollarni geksan bilan ajratib olish mumkin. Keyin, etanol kabi qutbli erituvchi ishlatilishi mumkin. HPLC yordamida Limoniastrum guyonianum bo'yicha o'tkazilgan tadqiqot ko'plab fenolik moddalar mavjudligini ko'rsatdi, ular orasida izorhamnetin-3-O-rutinosid [54].

Fenolik ekstraktlardan uzoqda, fenolik birikmalar zaytun moyi kabi yog'larda ham uchraydi [55]. Ushbu birikmalar yog'larni oksidlanishdan himoya qilish va yog'ning ozuqaviy qiymatini yaxshilash qobiliyatiga ega. Isorhamnetin, shuningdek, fenolik birikma sifatida, neft yoki geksanga muqobil 2-metil tetrahidrofuran (MeTHF) kabi yashil erituvchi bilan olingan Tunis qora zira (Nigella sativa L.) urug'laridan yog' ekstraktida ham aniqlangan. -neft bilan boyitilgan fenolik birikmalarni ajratib olish uchun asoslangan erituvchi [10]. Izorhamnetin mavjudligi HPLC tahlili bilan tasdiqlangan. Diodli massiv detektori (LC-DAD) bilan suyuqlik xromatografiyasidan foydalangan holda tahlillar qora ziradan MeTHF va geksan yordamida moy ajratib olingandan so'ng, mos ravishda 6,3 va 6,6 (ug/g moy) orasida bo'lgan yuqori miqdorda izorhamnetinni aniqladi. Bundan tashqari, H yadro magnit rezonansi (HNMR) va C yadro magnit rezonansi (CNMR) dan foydalangan holda, kaempferol-3-O-rutinozid (nikotiflorin) va izoramnetin-3-O-rutinozid (narsisizm) kabi ba'zi flavonol glikozidlar Eronning Kurdiston viloyati, Marivan shahrida toʻplangan Peucedanum aucheri Boissning havo qismlaridan tavsiflangan [56]. NMR usuli birikmaning ma'lum atom yadrolari magnit maydon bilan o'zaro ta'sir qilish xususiyatini aniqlaydi. Muayyan chastotada magnit aks sado hosil qilish uchun mo'ljallangan bu xususiyat molekulaning tuzilishi haqida ma'lumot beradi. Ikkinchidan, matematik modellar flavonol ekstraktsiyasining samaradorligini baholash, ayniqsa izoramnetin-3-O-rutinosid [20] olishning eng yaxshi usulini tushunish uchun tanlanadi. Calendula officinalis gullari yordamida ko'p o'zgaruvchan faktoriy tahlil o'tkazildi. Chiziqli, kvadratik, to'liq kubik va maxsus kubik modellar tahlil qilindi. Oxirgi toʻliq kubik eng mos boʻldi, bu izorhamnetin-3-O-rutinosidni 60 foizga olish samaradorligini oshirish imkonini berdi. Ushbu tadqiqot uchun Rapides Maxi Fruit va Viskozim fermentlari bosim, harorat, pH, vaqt va suvli etanol eritmasi kabi o'ta kritik CO2 sharoitida ferment faolligiga ta'sir qiluvchi muhim omillar ostida ishlatilgan. Nihoyat, flavonollar kabi fenolik birikmalarni olish uchun superkritik suyuqlik ekstraktsiyasi usuli ishlatilgan. Ko'p yillar oldin, suv, etil asetat va etanol bilan sof va o'zgartirilgan CO2 dan foydalangan holda, birinchi marta Evkalipt globulus qobig'ida superkritik suyuqlik olish usuli qo'llanilgan [57]. Mualliflar shuni ko'rsatdiki, o'ta kritik CO2 etanol bilan birlashganda ko'p miqdorda fenolik birikmalarni, shu jumladan izorhamnetinni ajratib olishi mumkin. HPLC-MS miqdorini aniqlashda ba'zi flavonollar, masalan, izoramnetin-geksozid (0,26 gg-I ekstrakt) va oddiy izoramnetin (14,29 mg: gI ekstrakt) aniqlandi. Etanol birgalikda erituvchi sifatida ishlatilgan. Miqdorni aniqlash fotodiodli massiv detektori bilan jihozlangan yuqori bosimli suyuqlik xromatografiyasi yordamida amalga oshirildi. Isorhamnetin 3-O-glukosil-ramnosil-ramnosid, izoramnetin 3-O-glyukosil-ramnosil-pentoksid, izoramnetin 3-O-glyukosil-ramnozid va izoramnetin {{47}O- -pentoksid O. ficus-indica superkritik ekstraktlaridan olingan eng ko'p flavonollar edi. Yuqorida aytib o'tilganidek, yuqori bosimli suyuqlik xromatografiyasi yoki HPLC fenolik birikmalarni tahlil qilish uchun keng tarqalgan usuldir. Olma sharbati va nok sharbatida izorhamnetin 3-O-glyukozid aniqlandi. Aslida, "Brettacher" olma ekstraktidagi flavonol glikozidlarini HPLC va massa spektrometriyasi yordamida ajratish izoramnetin 3-O-glyukoza va izoramnetin 3-O-galaktozid kabi ikkita glikozid shakli mavjudligini aniqladi. 58].