Cistanche Deserticola Deserticola dan polisaxaridlarning tarkibiy tahlili va antioksidant faolligini o'rganish

Abstrakt: Ushbu maqolada Cistanche deserticola ning neytral shakar CLP1 va kislotali shakar CLP2 Cistanche deserticola deserticola dan polisakkaridni ajratib olish va Cistanche deserticola deserticola xom polisaxarid CLP ni DEAE tsellyuloza ustunli xromatografiyasi bilan tozalash orqali olingan. Cistanche deserticola xom polisaxarid CLP, Cistanche deserticola neytral shakar CLP1 va Cistanche deserticola kislotasi shakar CLP2 tarkibidagi umumiy shakar, uron kislotasi va oqsil miqdori ultrabinafsha spektr skanerlash orqali aniqlandi va polisaxaridning molekulyar og'irligi va monosaxarid tarkibi aniqlandi. Shu bilan birga, Cistanche deserticola xom polisaxarid CLP tarkibidagi DPPH radikal tozalash qobiliyati va Cistanche deserticola deserticola neytral shakar CLP1 va Cistanche deserticola deserticola kislotali shakar CLP2 ning umumiy antioksidant qobiliyati eksperimental tahlil qilindi. O'lchangan ma'lumotlar shuni ko'rsatdiki, Cistanche deserticola deserticola xom polisaxarid CLP, Cistanche deserticola deserticola neytral shakar CLP1 va Cistanche deserticola deserticola CLP2 kislotali shakar tarkibi o'xshash, ammo tarkibi sezilarli darajada farq qiladi; Cistanche deserticola deserticolaning neytral shakar CLP1 va Cistanche deserticola deserticola kislotali shakar CLP2 DEAE tsellyuloza xromatografik ustuni orqali ajratilganda va tozalanganda bir nechta elutsiya cho'qqilariga ega bo'lishi mumkin va molekulyar og'irligi 0 va 10000 Da orasida bo'ladi. Cistanche deserticola deserticola polisaxaridining asosiy komponenti kichik molekulyar shakardir. Cistanche deserticola deserticola tarkibidagi neytral shakar CLP1 monosaxaridlari Cistanche deserticola deserticola deserticoladagi neytral shakar CLP1 tarkibidagi monosaxaridlar asosan Mannoz, Galaktoza uronik kislota, glyukoza, Galaktoza va Arabinoza ekanligini ko'rsatdi; Cistanche deserticol kislotasi shakar CLP2 monosaxaridlarini aniqlash natijalari shuni ko'rsatdiki, Cistanche deserticol kislotasi shakar CLP2 tarkibidagi monosaxaridlar asosan ramnoz, galaktoza uron kislotasi, glyukoza va galaktozadan iborat. Cistanche deserticoladagi polisakkaridlarning DPPH erkin radikallarini tozalash tajribasi va jami antioksidant salohiyati tajribasi shuni ko'rsatdiki, Cistanche deserticoladagi neytral shakar CLP1 ning antioksidant qobiliyati Cistanche deserticoladagi xom polisaxarid CLP va Cistanche deserticola kislotali shakar CLP2 dan yuqori.

Kalit so'zlar: Cistanche deserticola; polisaxaridlar; Komponentlarni tahlil qilish; Antioksidant faolligi; absorbsiya

Cistanche deserticola tajribasi

Cistanche deserticola deserticola oʻtsimon parazit oʻsimligi boʻlib, tarkibida koʻp miqdorda fenolik glikozidlar, alkaloidlar, fenetil spirti glikozidlari, qandlar va spirtlar mavjud. Ular orasida qandlar asosan polisaxaridlar shaklida bo'ladi. Cistanche deserticola polisaxaridlari kuchli immunitet faolligini tartibga solish funktsiyasiga ega [1-2]. Inson hayotidagi oraliq metabolit sifatida erkin radikallar beqaror holatda va yuqori oksidlanish faolligiga ega, bu esa inson organizmidagi biomakromolekulalar to'qimalari va organlariga zarar etkazadi. Shu sababli, erkin radikallarni yo'q qilish uchun tabiiy antioksidantlardan foydalanish hozirgi oziq-ovqat tadqiqotlarining asosiy yo'nalishiga aylandi. Cistanche deserticola tarkibidagi polisaxarid komponentlari kuchli antioksidant xususiyatga ega bo'lib, inson organizmidagi erkin radikallarni yo'q qilishga yordam beradi [3].

Cistanche tubulosa foydalari - antioksidant

Ushbu maqolada tadqiqot ob'ekti sifatida Cistanche deserticola deserticola olindi va polisaxarid moddalari ajratildi va tasniflandi. Cistanche deserticola deserticola polisaxarid moddalarining molekulyar og‘irligi yuqori samarali gel o‘tkazuvchanlik xromatografiyasi yordamida o‘lchandi. Shu bilan birga, polisaxarid moddalarning tarkibi chuqur tahlil qilindi. Cistanche deserticola deserticola polisaxaridining antioksidant faolligi Cistanche deserticola deserticola polisaxarid komponentlarining erkin radikallarni tozalash qobiliyati va umumiy antioksidant qobiliyatini o‘lchash yo‘li bilan tahlil qilindi.

Cho'lda yashovchi sistanche

Cistanche mahsulotlarini ko'rish uchun shu yerni bosing

【Batafsil ma'lumot so'rang】 Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1 Cistanche desertikoladan namuna tayyorlash

2,5 kg Cistanche desertikolini torting, tilimga kesib oling, 12,5 litr distillangan suv qo'shing va 3 soat qaynatib oling. Qaynatgandan so'ng filtrlang va filtratni yig'ing. 75 foiz etanol qo'shing va 24 soat turing. Uni 4000 r/min tezlikda 30 daqiqa davomida santrifüj qiling, cho‘kmani to‘plang va Cistanche deserticola xom polisaxarid CLP ni olish uchun cho‘kmani muzlatib quriting [4]. DEAE tsellyulozasini oling, uni gazsizlantirishdan oldin namlang va shishiring, uni DEAE tsellyuloza anion almashinuvi xromatografiyasi kolonnasiga yuklang va distillangan suv va NaCl eritmasi bilan muvozanatlang. Cistanche deserticola deserticola dan 100 mg xom polisaxarid CLP torting va uni 10 ml distillangan suvda eritib oling. Distillangan suv bilan yuvib bo'lgandan so'ng, eluantni to'plang va Cistanche deserticola deserticola dan neytral shakar CLP1 olish uchun muzlatib quritish uchun konsentratsiyalang; NaCl eritmasi bilan elutsiya qilingandan so'ng, elyuent to'plangan, konsentratsiyalangan va dializdan keyin Cistanche deserticola kislotali shakar CLP2 ni olish uchun muzlatilgan quritilgan [5].

Cistanche deserticolaning neytral shakar CLP1 va kislotali shakar CLP2 ni mos ravishda 1 mg/ml konsentratsiyali polisakkarid eritmalariga tayyorlang. UV spektroskopiyasini skanerlash uchun 210-600nm spektrofotometrdan foydalaning. 260-280nm da cho'qqi paydo bo'lganda, eritmada oqsil va nuklein kislota borligi tasdiqlanadi [6].

Cistanche deserticola ning asosiy kimyoviy tarkibiy qismlari

2 Cistanche deserticolaning polisaxarid komponentlarini aniqlash

Cistanche deserticola tarkibidagi umumiy shakar miqdori fenol sulfat kislota usuli bilan aniqlandi. {0}}, 0.2, 0.4, 0.6, {{10}}.8 va 1ml ni oʻlchang. 0,1 mg/ml konsentratsiyali glyukoza eritmalari va shisha probirkalarga soling. Doimiy hajmdagi 1 ml distillangan suv soling, so’ngra probirkalarga 6 foiz konsentratsiyali 0,5 ml fenol reaktivi va 2,5 ml konsentrlangan sulfat kislota qo’shing. Yaxshilab silkiting va xona haroratiga sovutib oling. Spektrofotometr yordamida 490 nm chastotada absorbsiyani o‘lchang, shakar miqdori x o‘qi va absorbsiyani y o‘qi sifatida o‘lchaydi, standart egri chizing va [7-8] regressiya tenglamasini hisoblang.

Cistanche deserticola namunalaridagi oqsil miqdorini aniqlash uchun Coomassie brilliant blue usulidan foydalanilgan. Har xil konsentratsiyali 1 ml standart namunalar va 0,1 mg/ml konsentratsiyali namuna eritmalaridan oling, har bir probirkaga mos ravishda 4 ml Coomassie yorqin ko‘k eritmasi qo‘shing, yaxshilab silkiting va so‘ng to‘xtab turing. 495 nm da absorbansni o'lchash uchun spektrofotometrdan foydalaning va standart egri tenglama [9] bo'yicha namunadagi oqsil miqdorini hisoblang.

Cistanche deserticola tarkibidagi uron kislotasining miqdori m-gidroksifenil usuli bilan aniqlandi. Har xil konsentratsiyali 0,4 ml standart eritma va konsentratsiyasi 0,1 mg/ml bo‘lgan namuna eritmasi olib, probirkaga 2,5 ml konsentrlangan sulfat kislota qo‘shing, yaxshilab chayqab, so‘ng o‘tkazing. 25 daqiqa qaynayotgan suv hammomida, uni chiqarib oling va xona haroratiga sovutib oling, ichiga konsentratsiyasi 0,3% bo'lgan m-gidroksifenil va 0,5% konsentratsiyali natriy gidroksid eritmasi qo'shing. probirkani yaxshilab silkitib, 30 daqiqaga qo'ying, 525nm chastotada absorbansni o'lchash uchun spektrofotometrdan foydalaning va standart egri tenglama [10-11] bo'yicha namunadagi uron kislotasi miqdorini hisoblang. Cistanche deserticola polisaxaridining nisbiy molekulyar og‘irligi yuqori samarali gel xromatografiyasi, Cistanche deserticola deserticolaning monosaxarid tarkibi esa yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi yordamida aniqlandi [12].

3 Cistanche deserticolaning polisaxarid komponentlarini aniqlash natijalari va tahlili

Fotometrning 210-600nmdagi UV spektrini skanerlash egri chizig'i 1-rasmda ko'rsatilgan.

1-rasm UV spektral skanerlash egri chizig‘i (210-600nm)

1-rasmdan ko'rinib turibdiki, Cistanche deserticola deserticola neytral shakar CLP1 280 nm da aniq yutilish cho'qqisiga ega va Cistanche deserticola deserticola CLP2 kislotali shakar 260-280nm da aniq yutilish cho'qqisiga ega emas, lekin UV yutilish spektri yuqori. Protein tarkibidagi triptofan va tirozin 280 nm ultrabinafsha nurlar uchun katta yutilish qiymatiga ega bo'lganligi sababli, Cistanche deserticolaning neytral shakar CLP1 tarkibida glikoprotein borligini aniqlash mumkin va Cistanche deserticola kislota shakar CLP2 tarkibida nuklein bor yoki yo'qligini aniqlash mumkin emas. kislota va oqsil.

DEAE tsellyuloza anion almashinadigan xromatografik ustun xromatografiyasi polisakkarid moddalarini ajratishni amalga oshirish uchun xromatografik ustundagi ion moddalar va aralashmalarni adsorbsiyalashi mumkin. Distillangan suv yuvish eritmasini konsentratsiyalash va quritishdan so'ng Cistanche deserticola'dan jami 34,68 mg neytral shakar CLP1 olindi va NaCl eritmasi bilan elutsiya, konsentratsiya va quritishdan so'ng Cistanche'dan jami 16,52 mg kislota shakar CLP2 olindi. desertikola. Tajriba davomida umumiy qand miqdori, oqsil miqdori va Cistanche deserticola uroniy kislotasining standart egri tenglamalari olingan. 1-jadvalda ko'rsatilganidek, Cistanche deserticola tarkibidagi umumiy shakar, oqsil va uron kislotasining tarkibi o'lchandi.

1-jadval. Cistanche deserticolaning umumiy shakar, oqsil va uron kislotasi

Regressiya tenglamasini standart namunaning molekulyar og'irligi va tepalik maydonini aniqlash orqali olish mumkin. Tekshiriladigan namunaning molekulyar og'irligi tekshirilayotgan namunaning fotoemissiya signali qiymatini regressiya tenglamasiga almashtirish orqali olinishi mumkin. Keyinchalik tahlil qilish va hisoblash natijasida neytral shakar CLP1 va Cistanche deserticola kislota shakar CLP2 ning o'rtacha molekulyar og'irligi, o'rtacha molekulyar og'irligi va dispersiya koeffitsientini olish mumkin. Cistanche deserticola neytral shakar CLP1 va Cistanche deserticola kislotasi shakar CLP2 ning yuqori samarali gel o'tkazuvchanligi xromatogrammasining ushlab turish vaqti va molekulyar og'irligini hisoblash natijalari 2-jadvalda ko'rsatilgan. O'lchangan molekula hajmini ifodalash uchun o'rtacha molekulyar og'irlikdan foydalaniladi, va molekulyar tarqalish kengligini ifodalash uchun o'rtacha molekulyar og'irlikning sonining o'rtacha molekulyar og'irligiga nisbati ishlatiladi.

2-jadval Saqlash cho'qqisini aniqlash vaqti va molekulyar og'irlikni hisoblash natijalari

2-jadvaldan ko'rinib turibdiki, Cistanche deserticolaning neytral shakar CLP1 va Cistanche deserticola kislotali shakar CLP2 ning molekulyar og'irlik taqsimoti diapazoni 0~10000 Da ni tashkil qiladi, bu Cistanche deserticola tarkibidagi polisaxaridning kichik ekanligini ko'rsatadi. turli molekulalar bilan molekula polisakkarid, va molekulyar og'irligi heterojenlik ko'rsatadi. Bundan xulosa qilish mumkinki, Cistanche deserticolaning neytral shakar CLP1 va Cistanche deserticola kislota shakar CLP2 bir nechta polisakkarid moddalarining aralashmasidir.

To‘qqizta monosaxarid standart namunalari, Cistanche deserticola deserticola neytral shakar CLP1 va Cistanche deserticola deserticola kislota shakar CLP2 uchun HPLC cho‘qqilari va maksimal saqlanish vaqtlari uchun 3-jadvalga qarang. Tepalik vaqtini taqqoslab, Cistanche deserticolaning neytral shakar CLP1 tarkibida beshta aniq monosaxaridlar va Cistanche deserticolaning CLP2 kislotali shakarida to'rtta aniq monosaxaridlar mavjud degan xulosaga kelish mumkin. Cistanche deserticola deserticola ning neytral shakar CLP1 va Cistanche deserticola deserticola kislotali shakar CLP2 tarkibidagi monosaxaridlarning nisbati 4-jadvalda keltirilgan.

3-jadval. Monosaxaridlarning yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi cho'qqilarini ushlab turish vaqti

4-jadval Cistanche deserticola tarkibidagi monosaxaridlarning nisbati

Gidrolizdan so'ng Cistanche deserticolaning neytral shakar CLP1 ning monosaxarid tarkibi Cistanche deserticola CLP2 kislota shakaridan sezilarli darajada farq qiladi. Cistanche deserticola tarkibidagi neytral shakar CLP1 tarkibidagi glyukoza miqdori 88,62 foizni tashkil qiladi, Cistanche deserticola kislotali shakar CLP2 tarkibidagi glyukoza miqdori atigi 9,99 foizni tashkil etadi va CLP2 kislota shakarining galaktoza aldegid kislotasi, galaktoza va ramnoz miqdori Cistanche deserticola hammasi 5 foizdan ortiq.

4 Cistanche deserticola polisaxaridining antioksidant faolligini tahlil qilish

Cistanche deserticola deserticola polisaxaridining antioksidant eksperimental tahlili davomida Cistanche deserticola deserticola polisaxarididan {0}}, 0.25, 0 konsentratsiyasi boʻlgan Cistanche deserticola deserticola polisaxarid eritmasi tayyorlandi. .5, 1.0, 2.0, 4.0 mg/mL va DPPH erkin radikallarini tozalash tezligi va eritmaning umumiy antioksidant qobiliyati oʻlchandi. Cistanche deserticola deserticola polisakkarid eritmasining DPPH erkin radikallarini tozalash tezligini aniqlashda 2 × jami 2 ml 10-4mol/L DPPH qo'shing, bir tekisda aralashtiriladi va qorong'i joyda 15 daqiqaga qo'yiladi. Eritma santrifuga tezligi 4000 r/min va 15 minut sentrifuga vaqti bilan santrifüj qilindi. Spektrofotometr yordamida eritmaning yutilish qiymatini 517 nm to‘lqinda o‘lchang, undan 5-jadvalda ko‘rsatilganidek, Cistanche deserticola deserticola polisakkarid eritmasining DPPH radikal tozalash tezligini olish mumkin.

5-jadval Cistanche deserticola polisaxarid eritmasining DPPH radikalini tozalash tezligi

5-jadvaldan ko'rinib turibdiki, Cistanche deserticolaning xom polisaxarid CLP va Cistanche deserticola neytral shakar CLP1 ning DPPH erkin radikallari bo'yicha tozalash darajasi Cistanche deserticola CLP2 kislota shakarining DPPH erkin radikallariga nisbatan sezilarli darajada yuqori. Eritmaning konsentratsiyasi 2.0mg/ml dan kam boʻlsa, Cistanche deserticola deserticola xom polisaxarid CLP va Cistanche deserticola deserticola neytral shakar CLP1 ning DPPH radikal tozalash darajasi konsentratsiyaning oshishi bilan asta-sekin ortadi va nihoyat barqaror bo'ladi.

Cistanche deserticola deserticola polisakkaridining umumiy antioksidant qobiliyatini aniqlashda tezkor aniqlash uchun antioksidant sig'im test to'plami ishlatilgan. Trolox standart aniqlash eritmasini oling va uni distillangan suv bilan {0}}, 0.25, 0.5, 1.0, 2.{ {10}} va mos ravishda 4,0 mg/ml. Aniqlash quduq plastinkasiga peroksidaza ishchi eritmasini qo'shing, so'ngra sinovdan o'tkaziladigan namunani yoki standart aniqlash eritmasini qo'shing va nihoyat tezkor aniqlash to'plamining ishchi eritmasini qo'shing. Yaxshilab aralashtiramiz va 6 daqiqaga qoldiring. Cistanche deserticola polisaxaridining umumiy antioksidant sig‘imi 405 nm va 734 nm [14-15] to‘lqin uzunligidagi mikroplastinka o‘quvchi tomonidan aniqlandi. Cistanche deserticola deserticola polisakkarid eritmasining umumiy antioksidant yutuqlari testining sinov natijalari uchun 6-jadvalga qarang.

6-jadval Cistanche deserticola polisaxarid eritmasining umumiy antioksidant qobiliyati

6-jadvaldan ko'rinib turibdiki, Cistanche deserticola eritmasining konsentratsiyasi 4,{2}}mg/ml dan kam bo'lsa, Cistanche deserticolaning xom polisaxarid CLP, Cistanche deserticolaning neytral shakar CLP1 va kislotali shakarning umumiy antioksidant sig'imi. Cistanche deserticola CLP2 eritma konsentratsiyasining oshishi bilan ortadi; Cistanche deserticola deserticola ning neytral shakar CLP1 ning antioksidant qobiliyati Cistanche deserticola deserticola xom polisaxarid CLP va Cistanche deserticola deserticola deserticola CLP2 kislota shakaridan sezilarli darajada yuqori.

Cistanche choyi

5 Xulosa

Cistanche deserticola deserticola polisaxaridini yuqori samarali gel o'tkazuvchanlik xromatografiyasi yordamida tahlil qilish natijalari shuni ko'rsatdiki, uning tarkibidagi polisaxaridning molekulyar og'irligi 10000 Da dan oshmaydi va uning tarkibida bir nechta elyusiya cho'qqilari mavjud. Cistanche deserticola deserticola polisakkaridi ma'lum antioksidant xususiyatlarga ega edi. Ushbu tadqiqot natijalari Cistanche deserticola ni yanada rivojlantirish va undan foydalanish uchun asos yaratdi.

Adabiyotlar:

 [1] Bi Cuicui, Liu Yinlu, Vey Fenfen va boshqalar. Cistanche deserticola [J] ning asosiy kimyoviy tarkibiy qismlari va biologik faolligi bo'yicha tadqiqot ishlari. Giyohvand moddalarni baholash tadqiqoti, 2019, 42 (9): 1896-1900

[2] Dong Yuvey, Miao Jingji, Li Yong. Sarimsoq polisaxaridlari va uning in vitro antioksidant faolligi uchun er-xotin fermentlarni ekstraksiya qilish jarayonini optimallashtirish ［ J ］. Xitoy ziravorlari, 2020, 45 (10): 30-35, 48

[3] Yang Ting, Eladan Makintayr, Tao Yichun va boshqalar. Cistanche tubulosa qoldiqlarining polisaxarid tarkibini va antioksidant faolligini aniqlash ［ J］. Shinjon tibbiyot universiteti jurnali, 2019, 42 (2): 234-236241

[4] Liu Lisa, Chjan Qing, You Lin va boshqalar. Cistanche tubulosa [J] dan Fenetil spirti glikozidlarini erituvchi bilan ajratib olish texnologiyasini o'rganish. Oziq-ovqat fanlari va texnologiyasi, 2019, 44 (4): 225-229

[5] Liu Yaowey, Su Zixao. Cistanche deserticola ［ J ］ da echinacea va Verbascum thapsus glikozidlarini flesh-ekstraksiya jarayonini o'rganish. Tibbiy parhez va salomatlik, 2020, 18 (23): 27-28

[6] Tian Venjing, Chjou Xuan, Huang Qunhui va boshqalar. Ultrasonik davolashning Cistanche deserticola deserticola polisakkaridining reologik xususiyatlariga ta'siri ［ J ］. Biologiya byulleteni, 2021, 56 (2): 48-53

[7] Feng Jie, Guo Yehong, Chju Venjuan va boshqalar. Turli xostlar, yashash joylari va o'rim-yig'im sanalarining Cistanche deserticola ［ J ］ tarkibidagi faol moddalar tarkibiga ta'siri. Xitoy yovvoyi o'simliklari resurslari, 2021, 40 (5): 18-23

[8] Lv Mingshuai, Chjao Bo, Sun Wenyu va boshqalar. Selenga boy Auricularia auricula-judge polisaxarid ［ J］ ning fizik-kimyoviy xossalari va antioksidant faolligini o'rganish. Xitoy lazzatlari, 2021, 46 (6): 54-59

[9] Chen Yuebay. Lentinan ekstraktsiya jarayonining skriningi va uning sog'liqqa ta'siri bo'yicha tadqiqotlarning hozirgi holatini tahlil qilish [J]. Xitoy lazzatlari, 2021, 46 (8): 189-191

[10] Guo Qiaoli, Vu Zhibo, Chjou Yubi va boshqalar. Lanzhou ［ J ］ Cistanche deserticola dan polisaxaridlarning tarkibi tahlili va antioksidant faolligi. Oziq-ovqat sanoati fanlari va texnologiyasi, 2021, 42 (15): 96-103

[11] Cao Libo, Gong Xingcheng, Jia Jinru va boshqalar. Cistanche salsa kimyoviy tarkibiy qismlarini to'g'ridan-to'g'ri in'ektsiya ko'p bosqichli massa spektrometriyasi to'liq skanerlash usuli bilan tezkor sifat tahlili ［ J ］. Xitoy an'anaviy xitoy tabobati jurnali, 2021, 46 (16): 4150-4156

[12] Xu Dongbao, Du Vey, Yang Men. Macrocybe gigantea dan polisakkaridning ekstraktsiya jarayoni va antioksidant faolligini javob yuzasi metodologiyasi bilan optimallashtirish ［ J ］. Xitoy ziravorlari, 2021, 46 (10): 78-82

[13] Syu Sheng, Chay Shasha. Cistanche deserticoladagi asosiy faol moddalarni tezkor aniqlash usuli [J]. Vuxan kasb-hunar kolleji jurnali, 2021, 20 (4): 116-120

[14] Chjan Hongchi, Liu Rui, Jiao Lele va boshqalar. Kvadrat regressiya aylanish ortogonal usuli asosida Lentinanning ekstraktsiya jarayonini optimallashtirish ［ J ］. Xitoy aromatizatori, 2021,46 (11): 88-93

[15] Song Qingqing, Chjan Ke, Li Ting va boshqalar. Bir vaqtning o'zida Cistanche deserticolaning ko'p komponentli tarkibini teskari fazali gidrofil o'zaro ta'sir xromatografiyasi moslashtirilgan ko'p reaktsiyali monitoring usuli bilan aniqlash [J]. Analitik kimyo, 2020, 48 (11): 1573-1593