An'anaviy xitoy o'ti Cistanchening antidepressant va kognitiv yaxshilash faoliyati Ⅰ
Jun 23, 2022
Abstrakt
Odamlarning o'ndan ko'prog'i umr bo'yi kamida bir marta ruhiy tushkunlik epizodidan va u bilan bog'liq ruhiy kasalliklardan aziyat chekadi va depressiya va u bilan bog'liq ruhiy kasalliklar dunyodagi eng katta sog'liqni saqlash muammolaridan biridir. Ko'p tizimli nazariya shuni ko'rsatadiki, ko'p tizimlarning disregulyatsiyasi depressiya va unga bog'liq ruhiy kasalliklarning patogenezi asosida yotadi va ko'p tizimli disregulyatsiya nazariyasiga asoslangan yangi terapiya zudlik bilan zarur. Ushbu tadqiqotda o'tlardan tayyorlangan damlamaning antidepressant ta'siriCistanche deserticolaYCMa vaCistanche tubulosatekshirildi. O'tCistanchekaynatma sichqon dumi suspenziyasi sinovida harakatsizlik davrini sezilarli darajada qisqartirdi. O'simlik qaynatmasi bilan davolangan sichqonlar Morris suv labirintidagi testda fazoviy o'rganish va xotiraning yaxshilanganini ko'rsatdi. Guruhlar bilan davolash qilingan o'tlar qaynatmalari monoamin oksidaza (MAO) faolligini pasaytiradi; miyadagi dopamin (DA) kontsentratsiyasi yuqoriga ko'tarildi, bu o'tni ko'rsatadiCistancheqaynatma asab qo'zg'aluvchanligini yaxshilaydi; qon zardobidagi kortikosteron kontsentratsiyasi (CORT) pastga tushirildi, bu sichqonlar stress darajasining pasayishidan foyda ko'rganligini ko'rsatdi. Demak, antidepressantning samaradorligi va mexanizmian'anaviy xitoy o'tiCistancheushbu tadqiqotda o'rganildi. O'tCistanchedepressiya uchun qo'shimcha va muqobil terapiya sifatida ishlab chiqilishi potentsialini ko'rsatdi.
1.Kirish
Depressiya va u bilan bog'liq kayfiyatning buzilishi, aholining 12-17 foizi umr bo'yi kamida bitta epizodni boshdan kechiradi, ruhiy nogironlikning asosiy sabablaridan biri hisoblanadi va butun dunyo bo'ylab sog'liqni saqlashning asosiy muammolaridan biri hisoblanadi. Depressiya bilan og'rigan bemorlarning katta qismi xotirani yo'qotish, diqqatni jamlash muammolari, energiya yoki charchoqning pasayishi, sevimli mashg'ulotlariga va mashg'ulotlariga qiziqish yoki zavqlanishning yo'qolishi, uxlash, erta tongda uyg'onish yoki ko'p uxlash kabi muammolardan aziyat chekadi. Depressiya va shunga o'xshash sindromlarda anormallik uchun nerv substratlari noaniq bo'lsa-da, neyroplastiklik va hujayra moslashuvchanligining buzilishi depressiyaning patofiziologiyasini keltirib chiqaradi va muvaffaqiyatli davolash neyrotransmitter darajasining aralashuviga bog'liq bo'lishi mumkin. Depressiyani davolashga yondashuv asosan monoamin tizimining klassik gipotezasiga asoslangan bo'lib, unda monoaminlarning, ayniqsa serotonin (5-HT) va norepinefrin (NE) disregulyatsiyasi depressiya patogeneziga va neyrotransmitter tizimining dofamin bilan aralashuviga yordam beradi. agonistlar va dopamin-noradrenerjik modulyatorlar asosiy depressiya buzilishining alomatlarini engillashtiradi. Keng tarqalgan bo'lsa-da, antidepressantlarning shifobaxsh samaradorligi shubhali va yon ta'sirini e'tiborsiz qoldirib bo'lmaydi, chunki bemorlarning katta qismi monoamin tizimining manipulyatsiyasiga javob bermaydi. So'nggi paytlarda depressiya patogenezining yangi nazariyalari shuni ko'rsatadiki, yallig'lanish yo'llari, oksidlovchi stress yo'li, gipotalamo-gipofiz-adrenal (HPA) o'qi, metabolik va bioenergetika tizimi, neyrotrofik yo'llar, glutamat tizimi, opioid tizimi va boshqalar. xolinergik tizim, depressiya paydo bo'lishi bilan chambarchas bog'liq. Dalillar shuni ko'rsatadiki, bir nechta maqsadli aralashuv bitta maqsadli aralashuvga qaraganda yaxshiroq samaradorlikni keltirib chiqardi. Ko'p tizimli disregulyatsiya nazariyasiga asoslangan yangi terapiya zudlik bilan zarur.
Cistanche imtiyozlari haqida batafsil ma'lumot qidirilmoqda
Xabarlarga ko'ra, o'simlik mahsulotlari AQSh aholisining yarmidan ko'pini iste'mol qiladi; Depressiyani davolashning qo'shimcha usuli sifatida o't yoki o'simlik mahsulotlariga qiziqish va talab butun dunyoda ortib bormoqda. Ko'plab dorivor o'simliklar depressiyadan xalos bo'lish uchun foydali ta'sir ko'rsatadi. Depressiyani bostirish va kognitiv funktsiyani yaxshilash ta'siriga ega bo'lgan o'tlar orasida dengiz itshumurti,Ginkgo biloba,Piper nigrum,Hypericum perforatum,Griffonia simplicifolia. Ferul kislotasi va piperinning kombinatsiyasi monoaminergik tizimni manipulyatsiya qilish orqali sichqonlarda sinergik antidepressantga o'xshash ta'sir ko'rsatdi. Albiflorin neyrotransmitter retseptorlari va tashuvchilarga yuqori selektiv yaqinlik bilan ajralib turadi va erkin harakatlanuvchi kalamushlarning gipotalamusida 5-HT va NE ning hujayradan tashqari konsentratsiyasini sezilarli darajada oshirdi. Tibbiy o'simlikMelissa officinalisL. serotonergik neyrotransmitter darajasiga ta'sir ko'rsatish orqali sichqonlarning depressiv xatti-harakatlarini engillashtirdi. Depressiya uchun muqobil vositalar sifatida ishlab chiqilgan bu o'tlar yoki damlamalar depressiya alomatlarini engillashtirishga yordam beradi va rivojlanayotgan antidepressant dori uchun yangi manba bo'ladi. O'tCistancheXitoyning shimoliy qismidagi qurgʻoqchil erlar va choʻllarda tarqalgan anʼanaviy xitoy tabobati oʻsimliklari boʻlib, Xitoyda 1000 yildan ortiq vaqt davomida turli kasalliklarni davolashda keng qoʻllanilgan. O'simlikning ko'p ta'siriCistancheafrodizyak o'rtasidagi kaynatma oralig'i [14], immunitetni kuchaytiruvchi [15], antioksidant [16] va gepatoprotektiv [17] xususiyatlari.C. deserticolaQaynatmalar moyak steroidogen fermentlarini induktsiya qiladi.18], jinsiy olatni erektil reaktsiyasini kuchaytiradi va kastratsiya qilingan kalamushlarda erektil reaktsiyaning kechikish davrini qisqartiradi [19]. O'tCistancheInhibitor apoptoz genlari va neyrotrofik omillarni tartibga solish orqali dopaminerjik neyronlarning faoliyatini inhibe qilishi haqida xabar berilgan.20].C. tubulosaQaynatmalar A tomonidan kelib chiqqan kognitiv disfunktsiyani tuzatdi 1-42 amiloid birikmasini blokirovka qilish orqali xolinergik va hipokampal dopaminerjik neyronal funktsiyani tikladi [21]. O'simliklarning neyroprotektiv xususiyatiCistanchekognitiv kasalliklarda terapevtik salohiyatni nazarda tutadi. Depressiya - bu umumiy simptomlar sifatida unutuvchanlik va kognitiv pasayish bilan birga hissiy reaktsiyalarning umumiy aralash usuli.22]. O'tCistancheodatda unutuvchanlikni davolash uchun an'anaviy xitoy tibbiyoti sifatida ishlatilgan; Bundan tashqari, so'nggi hisobot shuni ko'rsatadiki, makkajo'xori uni erta kattalar uchun qabul qilish bilan to'ldiriladiC. tubulosaumurtqasiz hayvonlarda uzoq umr ko'rish va hid bilish bilan bog'liq o'rganish va xotirani yaxshilash uchun foydalidirDrosophilamodel [23]. Bu faktlar o'tning kognitiv yaxshilash xususiyatidan dalolat beradiCistanche; Bu erda ushbu tadqiqotda biz birinchi marta monoamin tizimini va HPA o'qini tartibga solish orqali antidepressant xususiyatini va uning sutemizuvchilar modelidagi kognitiv takomillashtirish faoliyati bilan aloqasini tavsifladik. O'tning antidepressant xususiyati va dastlabki mexanizmini yoritishCistancheo'tlarni qo'llash spektrini kengaytirishi mumkinCistanche, bu depressiya uchun muqobil vosita sifatida ishlab chiqilishi mumkin.
2. Cistanchening antidepressiya funktsiyasining materiallari va usullari
2.1. Cistanchening o'simlik moddasi va qaynatmasini tayyorlash
C. deserticolaYCMa Xitoyning Ney Mo'g'ul avtonom viloyatidan olingan;C. tubulosaXitoyning Shinjon-Uyg‘ur avtonom rayonidan olingan. Qaynatmadan oldin o't (C. deserticolaYCMa yokiC. tubulosa) HPLC (yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi) (Milford, MA, Waters, AQSh) yordamida echinacoside va verbascoside tarkibini aniqlash uchun tekshirildi va tegishli mahsulot (Xitoy Xalq Respublikasi Farmakopeyasiga ko'ra) hayvonlar tajribalari uchun ishlatilgan. . Qaynatma Sun Yatsen universiteti Davlat ta'lim vazirligining Oziq-ovqat va sog'liqni saqlash muhandisligi tadqiqot markazi tomonidan ishlab chiqilgan suvni bug'lash usuli asosida olingan. QuritilganCistanche deserticola125 g lik YCMa parchalanib, toʻr pardasi orqali 120-elakdan oʻtkazildi, soʻngra kukun 3 l oʻta toza suvda eritildi, 1{9}}0 darajada 2 soat davomida isitiladi, keyin xona haroratiga qadar sovutiladi va elakdan oʻtkazildi. ; supernatant qayta ishlandi. Keyin cho'kma 2 L ultra toza suvda eritildi va keyin 1,5 soat davomida isitiladi va supernatantni qayta ishlash uchun yuqorida aytib o'tilganidek sovutiladi; keyin cho'kma supernatantni qayta ishlash uchun ishlatilgan. Barcha supernatantning tarkibi 60 daraja aylanadigan vakuumli evaporatörler tomonidan boyitilgan; Nihoyat, xom dori konsentratsiyasi 0,5 g / ml ga o'rnatildi va mahsulot -20 darajada saqlanadi.
2.2. HPLC tahlili bo'yicha Echinacoside va Verbascoside Assay
Ekinakozid va verbaskozidning sifat va miqdoriy tahlilini o'lchash uchun HPLC (yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi) ishlatilgan; verbaskozid (tozalik > 93 foiz) va echinacoside (tozalik > 93 foiz) oziq-ovqat va giyohvand moddalarni nazorat qilish milliy institutidan (Pekin, Xitoy) sotib olindi va standart nazorat sifatida foydalanildi.
2.3. Hayvonlarni parvarish qilish va Cistancheda eksperimental o'tkazish
Mavzular Guangdong provintsiyasidagi Tibbiy eksperimental hayvonlar markazi tomonidan ta'minlangan 21 ~ 25 gramm og'irlikdagi SPF (o'ziga xos patogensiz) erkak Kunming sichqonlari edi. Hayvonlar plastik qafaslarga joylashtirildi (har bir katak uchun o'nta); atrof-muhit holati quyidagicha o'rnatildi: namlik 40 ~ 70 foiz, xona harorati 21 ± 1 daraja va 12 soat: 12 soat yorug'lik-qorong'i davr. Hayvonlar ustida o'tkazilgan barcha tajribalar Sun Yat-sen universitetining Hayvonlar etikasi qo'mitasi tomonidan tasdiqlangan.
2.4. Cistanche bo'yicha quyruq suspenziyasi sinovi
Quyruq suspenziyasi sinovi Cryan va boshqalar tomonidan tasvirlangan protokolga muvofiq amalga oshirildi. [24] kamtarona o'zgarishlar bilan. Qisqacha aytganda, 21-kuni sichqonlar neylon kateter bilan bog'langan, boshi poldan 50 mm balandlikda bo'lgan metall dorlardan foydalanib, dumi bilan osilgan. Sichqonlar ilgakka dumining uchidan 10 ~ 20 mm masofada yopishqoq lentalarga osib qo'yilgan va akustik va vizual ravishda plitkalar bilan izolyatsiya qilingan. Sichqonchaning tana harakatlari qayd etilgan va nafas olish harakatlari e'tiborga olinmagan. Tajriba kunidan oldin sichqonlar moslashish uchun 8 daqiqaga to'xtatildi.
2.5. Cistanche bo'yicha Morris suv labirint testi
Suv labirint testi Vorhees va boshqalarning tavsifiga muvofiq amalga oshirildi. [25–27] Xitoy Tibbiyot fanlari akademiyasi tomonidan ishlab chiqilgan qurilma yordamida. Suv bilan to'ldirilgan dumaloq hovuz (diametri 150 sm) (26 ± 1 daraja; jant balandligi (suv sathidan devor chetiga bo'lgan masofa): 10 sm), dumaloq qutqaruv platformasi (diametri: 11 sm; platformaning markaziy nuqtasi va hovuz orasidagi masofa) ishlatilgan. devor: 27 sm) suv sathidan 1-1,5 sm pastga cho'kib ketgan va ko'zgularni oldini olish uchun sinov maydoni bilvosita yoritish (50 ± 10 lyuks) bilan yoritilgan. To'rtta boshlang'ich joydan foydalanildi, N, S, E va W. Fazoviy o'rganish testi uchun hayvonlar har kuni 9-11 kunlarda belgilangan boshlang'ich joyida o'qitildi. Qochishning kechikish davri sichqonlarning fazoviy xotirasi va o'rganish qobiliyatini ko'rsatish uchun o'lchanadi. Agar sichqonlar platformani topa olmasa yoki unga chiqolmasa, sichqonlar platformaga olib boriladi va 10 soniya davomida qoladi. 60 soniya dam olgandan so'ng keyingi mashg'ulotlar boshlanadi. Oxirgi fazoviy o'rganish testidan olingan ma'lumotlar kalıplama uchun asosiy qiymat sifatida ishlatilgan. 23-28 kunlarda joyni navigatsiya qilish testi va fazoviy prob o'tkazildi. Joyni navigatsiya qilish testi 6 kun davom etdi va soat 13:00 da o'tkazildi, hayvonlar suvga boshlari hovuz devoriga soat yo'nalishi bo'yicha joylashtirildi va kechikish davri (2 daqiqa ichida) qayd etildi. Joy navigatsiyasi testi o'tkazilgandan so'ng, platforma olib tashlandi. Sichqonlar suvga boshlari hovuz devoriga qaragan holda tasodifiy joyda joylashtirildi va harakatlanish izi va sichqonlarning platforma bo‘ylab 2 daqiqa ichida suzib o‘tish chastotasi qayd etildi. Harakat izi sichqonlar harakatining koʻp funksiyali avtonom yozuvchisi (YLS-1A, Yiyan Technology, Jinan, Xitoy) tomonidan yozib olingan.
2.6. MAO faoliyatini aniqlash
MAO faolligi MAO aniqlash to'plami (A034, Nankin Jiancheng biomuhandislik instituti, Nankin, Xitoy) yordamida o'lchandi va aniqlash ishlab chiqarish protokoliga muvofiq amalga oshirildi. Miya to'qimalaridan homogenat olingan; 500μ300 bilan aralashtirdimμl Agent 1 va 300μl agent 2, 3 soat davomida 37 darajada inkubatsiya qilinadi va keyin ketma-ket 300 ga qo'shiladi.μl, Agent 3, 3 ml Agent 4 va 2 minut davomida vorteks. Reaksiya aralashmasi 10 daqiqa davomida 3,{5}} rpm santrifüj qilindi va supernatantning optik zichligi 242 nm qo'zg'atuvchi yorug'lik yordamida ultrabinafsha va ko'rinadigan spektr spektrofotometri (Lambda 25, PerkinElmer, AQSh) orqali aniqlandi.
2.7. Neyrotransmitterlar va ACTH va CORTning ferment bilan bog'liq immunosorbent tahlili
Dofamin (DA), norepinefrin (NE) va 5-gidroksitriptamin (5-HT) uchun ferment bilan bog'langan immunosorbent tahlilini (ELISA) aniqlash to'plami Shanxayning BLUE GENE kompaniyasidan sotib olindi. Elishay aniqlash to'plamlari Guanchjoudagi Qiyun Biotech kompaniyasidan sotib olindi.
Jarayonlar quyidagicha: tajriba xona haroratida o'tkazildi. PVX mikrotitr plitasining quduqlarini 1-10 darajasida tutuvchi antikor bilan yopingμKarbonat/bikarbonat tamponidagi g/mL konsentratsiyasi (pH 9,6). Plastinani yoping va bir kechada 4 daraja inkübe qiling; plastinkani PBS/tween bilan 3 marta yuving va o'ziga xos bo'lmagan bog'lanish joylari Blok eritmasi bilan bloklanadi; keyin plastinkani PBS/tween bilan 3 marta yuving. Standartlar va namunalar Blocking Solution va 100 da suyultiriladiμl plastinkaning qudug'iga qo'shiladi va plastinka muhrlanadi va 37 daraja haroratda 1 soat davomida inkubatsiya qilinadi. 100 qo'shingμl suyultirilgan aniqlovchi antikor va plastinkani 37 daraja haroratda 1 soat davomida inkubatsiya qiling; plastinkani PBS/Tween bilan 3 marta yuving. 50 qo'shingμl rangni ishlab chiqish eritmasi va plastinkani yorug'likdan uzoqroq tuting va xona haroratida 15 daqiqa davomida inkubatsiya qiling; 50μl reaktsiyani to'xtatish uchun to'xtash buferi qo'shiladi. Har bir quduq uchun optik zichlikni (OD) 30 daqiqada 405 nm ga o'rnatilgan mikroplata o'quvchi bilan o'lchang.
2.8. Statistik tahlil
Barcha ma'lumotlar o'rtacha ± SEM (o'rtacha standart xato) sifatida taqdim etildi, muhim farq tomonidan tahlil qilindi t-test yoki bir tomonlama ANOVA, so'ngra SPSS 16.0 yordamida Dunkanning ko'p diapazonli testi va guruhlar o'rtasidagi farqlarP< 0.05 statistik jihatdan ahamiyatli deb topildi.
