Cistanche total glikozidning hidga ta'siri bormi?

Aloqa:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Sistanx jami glikozidlarining kalamushlarni hidlash hujayralariga ta'siri va ularning neyrotrofik omillarni sekretsiyasi.

Li Chuangfeng, Guo Jinyu, Chjan Xu, Liu Yunnan

Orqa miya shikastlanishi (SCI) - markaziy qismning jiddiy shikastlanishiasab tizimi, jami jarohatlarning {0}},2 foizi —0,5 foizini tashkil qiladi. Orqa miya sinishida 16% -40% umurtqa pog'onasi shikastlanishi bilan murakkablashadi, ko'pincha og'ir nogironlik qoldiradi, bu esa bemorlarning hayot sifatiga ta'sir qiluvchi kundalik hayotdagi qiyinchiliklarga olib keladi va oila va jamiyat uchun katta yuk bo'ladi.Xushbo'y hidqoplovchi hujayralar (OECs) nerv elimining maxsus turidir. Plazma hujayralari miyaga o'tishi mumkinhidlashnerv aksonlari va NGF, GDNF, BDNF, NT-3, neyropeptid-Y va S-100 kabi koʻplab oʻsish omillarini ajratib olishi mumkin. Ushbu xususiyatlar tufaylihidlashhujayralarni qoplagan holda, OEClar SCIni tiklash uchun hujayra transplantatsiyasi uchun istiqbolli urug 'hujayralaridan biri hisoblanadi. Hozirgi vaqtda reabilitatsiya tibbiyoti sohasida SCIni davolash asosan kompleks reabilitatsiyaga asoslangan. Samaraliroq usulni topish uchun ta'siri bo'yicha quyidagi tadqiqotlar o'tkazildicistanchejamiglikozidlarOEClar bo'yicha:

Xushbo'y hujayralar uchun Cistanche umumiy glikozid

1 Materiallar va usullar

1.1 Eksperimental materiallar

Wistar kalamush (Ichki Mo'g'uliston universiteti hayvonlar markazi tomonidan taqdim etilgan);cistanchejamiglikozidlar, DMEM/F12 muhiti, homila buzoq zardobi (FCS), poli-D-lizin, arabinosid (Ara-C), tripsin, D-Hanks eritmasi, quyonlarga qarshi p75NGFR (Santa Kruz), ELISA to'plami (Promega), hujayra inkubatori (Termo-HEPA Class 100), teskari fazali kontrastli mikroskop (Olympus CKX41, Yaponiya), o'ta toza ish stoli (Suzhou Antai Air Technology Co., Ltd.) Kompaniya, SW-CJ-2FD), ferment yorliq analizatori (Wellscan MKH), oqim sitometri va boshqalar.

1.2 Tadqiqot usullari

1.2.1 OEC madaniyati, tozalash va identifikatsiyasi: Wistar kalamushlari boshi kesilib, 5 daqiqa davomida sharobga namlangan holda qurbon qilindi. Bosh suyagining oldingi qismi ochilganhidlashlampochka. Ikkihidlashlampochkalar diseksiyon mikroskop ostida butunlay olib tashlangan. D-Hanks eritmasida yuving; kesibhidlashmikrojarrohlik qaychi bilan lampochka, 2 ml 0.25 foiz pankreatin qo'shing va 37 daraja haroratda 20 daqiqa davomida inkubatsiya qiling; 2ml santrifüj trubasiga 10 foiz buzoq zardobini o'z ichiga olgan D MEM/F12 madaniyat muhitini qo'shing Ovqat hazm qilish o'rtada tugatildi; avtobus pipetkasi to'liq hazm bo'lmagan to'qimalarni 800 rpm tezlikda aspiratsiya qildi va 5 daqiqa davomida santrifüj qilindi, supernatantni tashladi; Nihoyat konditsioner muhitdan foydalanilgan (20% FCS plus 20|i, mol/LForskolin plus 20|ig/mlBPE plus DMEM /F12) Uni lx 107ml bir hujayrali suspenziyaga soling, uni polilizin bilan qoplangan hujayra madaniyati kolbasiga joylashtiring, joylashtiring uni 37 daraja, 5 foiz CO2 inkubatorida va keyin qo'shing Ara-c tozalash 36 soatda amalga oshirildi. Immunogistokimyoviy hujayralarni aniqlash va floresan mikroskopda kuzatish uchun quyonga qarshi p75E va FITC etiketli echkiga qarshi quyonga qarshi IgG ikkilamchi antikoridan foydalaning.

1.2.2 ning ta'sirini aniqlash uchun MTT va oqim sitometriyasidan foydalaningcistanche umumiy glikozidlariyoqilganhidlashqoplovchi hujayralar: ekilgan va tozalanganlarni emlashhidlashhujayralarni 1X106 oʻlchamdagi 96-quduq plastinkasiga oʻrab qoʻying va qoʻshingcistanche umumiy glikozidlari(harakat konsentrasiyalari Ijig/ml, 10mg/ml, 100mg/ml), OD qiymatini o'lchang va 24 soatlik ta'sirdan keyin hujayra oqimi sitometriyasini o'lchang. Boshqaruv guruhini sozlang vaCistanche umumiy glikozidlariturli konsentratsiyali guruhlar: A guruhi (nazorat guruhi): zardob o'z ichiga olgan madaniyat muhiti salbiy nazorat sifatida ishlatiladi; B guruhi (cistanche umumiy glikozidlaripast konsentratsiyali guruh: llig / ml); C guruhi (cistanche umumiy glikozidlar o'rta konsentratsiyasi Guruh: L10jxg/MK); D guruhi (cistanche umumiy glikozidlariyuqori konsentratsiyali guruh: 100|xg/mlo): har bir guruhda 15 ta kalamush.

1.2.3 Elishay usuli yordamida supernatantdagi neyrotrofik omil miqdorini aniqlash: ekilgan va tozalanganlarni emlash.hidlash1x106 oʻlchamdagi 6-quduq plastinkasiga hujayralarni qoplash, qoʻshingcistanche umumiy glikozidlari(yuqoridagi konsentratsiyada) 24 soatdan so'ng va 24 soat davomida harakat qiling va supernatantni alohida yig'ing, -80 Uzoq vaqt saqlangan. Suyuqlikdagi nerv o'sish omillarining tarkibi Elishay usuli bilan aniqlandi.

1.3 Statistik tahlil

Ushbu tadqiqotdagi ma'lumotlar o'lchov ma'lumotlari sifatida ko'rib chiqiladi va olingan ma'lumotlar o'rtacha ± standart og'ish sifatida ifodalanadi va statistik tahlil uchun SPSS 11.0 statistik dasturiy ta'minotidan foydalaniladi. Olingan ma'lumotlar dispersiya tahlili bilan tahlil qilinadi va P<0.05 indicates="" that="" there="" is="" a="" significant="">

2 Natijalar

2.1 ta'siricistancheumumiy glikozidlar ustidahidlashqoplovchi hujayralar

2.1.1 Metiloksazolil tetrazol usuli (MT) aniqlash natijalari: A guruhi: 0.617±0.149; B guruhi: 0.589±0.147; C guruhi: 0.761±0.138; D guruhi: 0.732±0.234. TaqqoslashCistanche umumiy glikozidlari group (B) and Control group (A), P>0.05, farq muhim emas edi;Cistanche umumiy glikozidlari10mg/ml, 100mg/ml konsentratsiyali guruh (C, D) nazorat guruhi (A) P bilan solishtirganda<0.05, the="" difference="" is="">

2.1.2 Oqim sitometriyasini aniqlash natijasi 1-rasmda ko'rsatilgan. Nazorat guruhi bilan taqqoslaganda,cistanche umumiy glikozidlariguruhi Nazorat guruhidan yuqori edi va apoptotik hujayralar ulushi Nazorat guruhidan past edi.

2.2 Fermentga bog'liq immunosorbent tahlili (ELISA) natijalari

Sinov natijalari shuni ko'rsatdiki, glial-hujayra chizig'idan olingan neyrotrofik omil (GDNF): dozalashdan oldin: 302,1 ± 16,6 pg / ml, A guruhi: 340,5 ± 13,2 pg / ml; B guruhi: 333,2±23,6pg/ml; C guruhi: 355,2±17,6pg/ml; D guruhi; 379,2±15,3pg/ml. Oldindan ma'muriyat bilan solishtirganda, GDNF tarkibi sezilarli darajada oshdi; Nazorat guruhi (A) bilan solishtirganda, GDNF tarkibiCistanche umumiy glikozidlari100mg / ml konsentratsiyali guruh (D) sezilarli darajada oshdi.

3 Munozara

Aksonlarni qayta tiklashdagi qiyinchilik, orqa miya jarohatidan keyin tiklanish qiyin bo'lgan asosiy sabablardan biridir. OEClar markaziy neyron aksonlarini qayta tiklashda rol o'ynaydi, boshqa turdagi hujayralarni almashtirish qiyin. So'nggi yillarda tadqiqotlarhidlashhujayralarni qoplaydigan issiq nuqtaga aylandi.Xushbo'y hidqoplovchi hujayralar Schwann hujayralari va astrositlarning xususiyatlariga ega bo'lgan maxsus turdagi glial hujayralardir. Ular dan kelib chiqadihidlashbazal membrana bo'lib, yuzasida keng tarqalganhidlashshilliq qavat,hidlashasab, vahidlashlampochka. U hayot uchun bo'linish va qayta tiklanish qobiliyatiga ega va unga hamroh bo'lishi mumkinhidlashmiyaga ko'chib o'tish uchun nerv aksonlari. ning aksonlarihidlashnerv periferik nerv sistemasi va markaziy nerv sistemasi oʻrtasidagi tutashuvdan har 30-60 kunda oʻtib, yana oʻsib boradi.hidlashqobiq va sinaptik aloqalarni o'rnatish4.Xushbo'y hidqoplovchi hujayralar NGF, BDNF, GDNF, NT-3, neyropeptid-Y va S-100 kabi ko'plab o'sish omillarini ajratishi mumkin. Tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, nerv o'sish omili (NGF) o'murtqa qizil yadro neyronlarining atrofiyasini oldini oladi va kortikomurilik traktini kuchaytiradi va qizil yadro orqa miya nerv yo'lining yangilanishiga yordam beradi; Miyadan olingan neyrotrofik omil (BDNF) va neyrotrofin-3 (NT-3) aksotomizlangan jarohati bo'lgan kattalar kalamushlarida qizil yadro orqa miya hujayralari apoptozini oldini oladi va o'layotgan neyronlarni qutqaradi va aksonal regeneratsiyani rag'batlantiradi. Qo'shimcha,hidlashQoplovchi hujayralar, shuningdek, hujayra membranalarida hujayra yopishishi va akson o'sishida ishtirok etadigan nerv hujayralari yopishish omili (N-CAM) kabi boshqa omillarni ham ifodalaydi. Ushbu xususiyatlar tufaylihidlashhujayralarni qoplagan holda, OEClar SCIni tiklash uchun hujayra transplantatsiyasi uchun istiqbolli urug 'hujayralaridan biri hisoblanadi.

Kimyoviy tarkibiy qismlarCistancheasosan feniletanoid glikozidlar, iridoidlar, uchuvchi komponentlar, lignanlar, polisakkaridlar va alkaloidlarni o'z ichiga oladi. Tadqiqot shuni aniqladiCistancheva uning kimyoviy komponentlari neyroprotektiv ta'sirga ega. Deng va boshqalar. tubulosa B ning o'simta nekrozi omili (TNF) tomonidan qo'zg'atilgan SH-SY5Y neyronlarining apoptoziga ta'sirini o'rgandi. Natijalar shuni ko'rsatdiki, 100ug/dan keyin SH-SY5Y neyronlari 36 soatlik TNF L bilan davolashdan keyin tipik apoptoz xususiyatlarini ko'rsatdi, tubulin B ni 2 soat davomida davolash TNF tomonidan qo'zg'atilgan apoptozni sezilarli darajada kamaytirishi mumkin. Bundan tashqari, tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, feniletanoid glikozidlar kaspaza-3 va kaspaza-8 ni inhibe qilish orqali kalamush serebellar granulalari hujayralarining apoptozini inhibe qilishi va metil fenil tetrahidropiridin (MPTP) tufayli kelib chiqqan C57 sichqon qorasiga qarshi. Sifatli dopaminerjik neyronlarning shikastlanishi himoya ta'siriga ega. Faqat bu emas, balkiCistancheasab tizimining ishemiya-reperfuziyasi kabi turli zararlarni ham engillashtirishi mumkin. Sichqoncha miya ishemiyasi shikastlanishi tajribasi shuni ko'rsatadiki, miya yarim ishemiya-reperfuzion guruhidagi ishemiyadan keyin 24 va 48 soatlik infarkt oralig'i o'rtacha 72,98 foiz va 60,45 foizni tashkil qiladi. Aksincha,cistancheumumiy glikozidlar katta, o'rta va past dozali guruhlar (250.0mg·kg/d; 125,0mg·kg/d; 62,5mg·kg/d) mos ravishda sichqonlarning miyasini hosil qilishi mumkin. miya ishemiyasi-reperfuziyadan keyin 24 soat infarkt hajmi 25,94 foizga, 25,81 foizga va 31,13 foizga, miya infarkti hajmi esa 22,14 foizga, 20,06 foizga va 22,27 foizga kamaydi. Ikkalasi o'rtasida sezilarli farq bor edi, bu neyronal apoptozga sezilarli inhibitiv ta'sir ko'rsatdi.

Ushbu tadqiqotda turli konsentratsiyalarcistanche umumiy glikozidlariOEClarga nisbatan qo'llanilgan. MTT usuli va oqim sitometriyasini o'lchash 10mg/ml100mg/ml ekanligini tasdiqladi.cistanche umumiy glikozidlaritarqalishiga yordam berishi mumkinhidlashqoplovchi hujayralar. Oqim sitometriyasi natijalari shuni ko'rsatdicistanche umumiy glikozidlaritarqalishiga yordam berishi mumkinhidlashQoplovchi hujayralar Bu asosan G1 siklining ko'payishiga yordam beradihidlashsperma hujayralari va apoptotik hujayralarni sezilarli darajada kamaytiradi. Shuning uchun,Cistanche umumiy glikozidlarinafaqat tarqalishiga yordam bera olmaydihidlashhujayralarni qoplaydi, balki hujayra faolligini oshiradi va ularning apoptozini inhibe qiladi. Fermentga bog'liq immunosorbent tahlili buni isbotlaydiCistanche umumiy glikozidlaritomonidan GDNF sekretsiyasini sezilarli darajada rag'batlantirishi mumkinhidlashqoplovchi hujayralar. Yuqoridagi natijalar klinik qo'llanilishi uchun eksperimental asos bo'lib xizmat qiladiCistanche umumiy glikozidlari.

Ma'lumotnomalar

[1] Qiu Weihong, Zhu Hongxiang, Chjan Baixiang va boshqalar. Reabilitatsiya davrida umurtqa pog'onasi shikastlangan bemorlarning hayot sifatiga ta'sir qiluvchi omillar [J]. Xitoyning reabilitatsiya tibbiyoti jurnali, 2009, 4(24): 313.

[2] Richter MW, Fletcher PA, Liu J, va boshqalar. Lamina propria vahidlashbuqa bilan qoplangan hujayralar differensial integratsiya va migratsiyani namoyon qiladi va shikastlangan orqa miyada deferensial aksonning o'sishiga yordam beradi [J]. J Neurosci, 2005.25 (46): 10700 -10711.

[3] Fairless R, Bamet SC. Xushbo'y hidli hujayralar: ularning markaziy asab tizimini tiklashdagi roli [J.Int J Biochem Cell Biol. 2005,37(4):693-699.

[4] Chen X, Fang X. Shvob JE. Tozalangan ko'p potentsial. transplantatsiya qilingan glyukoza bazal hujayralarihidlashepiteliya [J]. J Comp Neurol, 2004, 46914): 457-474.

[5] La P, Jons LL. Tuszinskiy MH. BDNFni ifodalovchi marostromal hujayra; orqa miya shikastlanishi [J] joylarida keng aksonal o'sishni qo'llab-quvvatlaydi. Exp Neurol, 2005,191(2):344-360.

[6] Deng M, Zhao JY, Ju XD va boshqalar. Tubuloza B ning neyron hujayralarida TNF tomonidan qo'zg'atilgan apoptozga himoya ta'siri [J]. Acta Pharmacol Sin, 2004,25(102 1276

[7] TianXue-Fei, PuXiao-Ping.FeniletanoidglikozidlardanCistanchessalsa neyronlardagi 1-metil-4-fenilpiridiniy ioni [J] tomonidan qoʻzgʻatilgan apoptozni inhibe qiladi. J Ethnopharmacol, 2005,97 (1):59.

[8] Geng X, Song L.Pu X va boshqalar. Neyroprotektiv ta'sir