RNK M6 A o'quvchi YTHDF2 NK hujayralari antitumor va antiviral immunitetni boshqaradi 4-qism

Ma'lumki, YTHDF2 m6A o'quvchi sifatida ishlaydi, u m6A o'z ichiga olgan RNKlarni taniydi va bog'laydi va m6A transkriptlarining parchalanishini tartibga soladi.
Keyin biz NK hujayralarida YTHDF2 bilan bog'langan maqsadli transkriptlarni xaritalash uchun YTHDF2 antikoridan foydalangan holda RNK immunoprecipitatsiyasini (RIP) ketma-ketligini bajardik. YTHDF{2}}bog'lanish joylari oqsil kodlash ketma-ketligi mintaqasida va 39UTRda boyitilgan (S5, E va F-rasm).

O'quvchilar va xotira o'rtasidagi aloqa juda yaqin. O'qish xotirani yaxshilashning eng yaxshi usullaridan biridir.

Biz o'qiganimizda miyamiz murakkab jarayondan o'tadi. Biz so'zlarni skanerlab, ularni ma'noga aylantirganimizda, miyamiz doimo yangi neyron aloqalarini yaratadi. Ushbu neyron aloqalari bizning xotira tizimimizni tashkil qiladi va ma'lumotni uzoq muddatli xotirada saqlashga yordam beradi.

Bundan tashqari, o'qish bizning tasavvurimizni va ijodimizni rag'batlantiradi, bu ham xotiramizni yaxshilashga yordam beradi. Biz ongimizda tasvirlar va sahnalarni yaratganimizda, miyamiz faol ishlaydi, shuning uchun ko'proq neyron aloqalari hosil bo'ladi, bu bizning xotira qobiliyatimizni kuchaytiradi.

Va nihoyat, o'qish bizning diqqatimizni va diqqatimizni yaxshilaydi. O'qishga e'tibor qaratsak, miyamiz doimiy ravishda qayta-qayta mashq qiladi, bu esa xotiramizni mustahkamlaydi.

Umuman olganda, o'qish bizning xotiramizga juda ijobiy ta'sir ko'rsatishi mumkin. O'qish odatini o'stirish va o'qish orqali miyamizni rag'batlantirish orqali biz xotira qobiliyatimizni yaxshilashimiz va yanada boy va qiziqarli hayot kechirishimiz mumkin. Ko'rinib turibdiki, biz xotirani yaxshilashimiz kerak va Cistanche deserticola xotirani sezilarli darajada yaxshilashi mumkin, chunki Cistanche deserticola an'anaviy xitoylik dorivor material bo'lib, u juda ko'p noyob ta'sirga ega, ulardan biri xotirani yaxshilashdir. Cistanche deserticola samaradorligi uning tarkibidagi ko'plab faol moddalar, jumladan, tanin kislotasi, polisakkaridlar, flavonoid glikozidlar va boshqalardan kelib chiqadi. Ushbu ingredientlar turli yo'llar orqali miya salomatligini mustahkamlashi mumkin.

Xotirani yaxshilashning 10 ta usulini bilish tugmasini bosing

Biz 1290 ta transkriptdan 3951 ta potentsialYTHDF2 bog'lanish cho'qqilarini aniqladik, ulardan 426 tasi (33%) m6A sezilarli boyitilganligi bilan aniqlandi. GO boyitish tahlili shuni ko'rsatdiki, 1290 YTHDF2 maqsadli transkriptlari oqsillarni tarjima qilish, RNKni bog'lash va RNKni birlashtirish bilan boyitilgan (S5 G-rasm).

Keyin biz RNK-seq, m6A-seq va RIP-seqand orqali bir-biriga o'xshash transkriptlardan potentsial maqsadli transkriptlarni aniqladik va YTHDF2 bilan bog'langan va m6A bilan belgilangan 29 ta transkript to'plami (har ikkala Ythdf2WT va Ythdf2DNK NK hujayralarida) NK hujayralari o'rtasida differentsial tarzda ifodalanganligini aniqladik. Ythdf2WTand Ythdf2DANK sichqonlaridan (7-rasm G). Ular orasida Ythdf2DNK sichqonlarining NK hujayralarida Ythdf2WT NKcells bilan solishtirganda 12 ta transkript yuqori tartibga solingan va 17 ta transkript pastga tushirilgan (7-rasm).

YTHDF2 ning funktsional tavsifi va RNK-seq ma'lumotlaridan olingan GO tahliliga asoslanib, Ythdf2 etishmovchiligi NK hujayra bo'linishi va ko'payishiga ta'sir qiladi, ehtimol hujayra siklini nazorat qilish nuqtalarining mRNK degradatsiyasini yoki hujayra bo'linishi paytida salbiy regulyatorlarni osonlashtirishi mumkin.

12 ta yuqori tartibga solinadigan transkriptlar orasida uchtasi hujayra bo'linishi yoki ko'payishni salbiy tartibga solishi haqida xabar berilgan, shu jumladan Mdm2 (sichqonchaning qo'sh daqiqasi 2 [MDM2]; Frum va boshq., 2009; Giono va Manfredi, 2007; Giono va boshq., 2017), Tardbp TAR DNK bilan bog'lovchi protein 43 [TDP43]; Ayala va boshq., 2008; Sanna va boshq., 2020) va Crebzf (CREB/ATFBZIP transkripsiya omili; Hu va boshq., 2020; López-Mateo va boshq., 2012) , ular YTHDF2in NK hujayralarining potentsial nishonlari ekanligini ko'rsatadi.

Shunisi e'tiborga loyiqki, m6A cho'qqilari Integrative Genomics Viewer tomonidan ko'rsatilganidek, Mdm2 va Tardbp ning 39UTRdagi YTHDF{1}}bog'lanish joylari va Crebzf genlarining 59UTR bilan yaxshi mos keladi (7-rasm H).

QPCR dan keyin m6A yoki YTHDF2 antikoridan foydalangan holda RIP Mdm2, Tardbp va Crebzf haqiqatan ham m6Ametillanganligini va asosan NK hujayralarida YTHDF2 tomonidan boyitilganligini tasdiqladi (7-rasm, I va J), bu ma'lumotlarni m6A-seq va RIP-seq-ni qo'llab-quvvatlaydi. uchta gen YTHDF2 inNK hujayralarining potentsial nishoni hisoblanadi.

YTHDF2 mRNA barqarorligini modulyatsiya qilish orqali Mdm2, Tardbp va Crebzf ifodasini tartibga soladimi yoki yo'qligini tekshirish uchun biz Ythdf2DENK va Ythdf2WT sichqonlarining NK hujayralarida aktinomitsin D bilan transkripsiyani inhibe qilish orqali uchta nishonning mRNK degradatsiyasini o'lchadik.

Natijalar shuni ko'rsatdiki, Mdm2 va Tardbp, lekin Crebzf emas, Ythdf2DNK sichqonlarining NK hujayralarida Ythdf2WT sichqonlari bilan solishtirganda uzoqroq yarim umrga ega (7-rasm, K–M), bu Mdm2 va Tardbpare NK hujayralarida YTHDF2 tomonidan bevosita boshqarilishini ko'rsatdi.

Immunoblotting yordamida biz MDM2 va TDP43 protein darajasi Ythdf2DNK sichqonlarining NK hujayralarida ko'tarilganligini tasdiqladik (S5 H-rasm). Bu ikki gen YTHDF2 ning funktsional maqsadlari ekanligini tasdiqlash uchun biz Mdm 2- yoki Tardbp dan foydalandik. -in vitroda ikkita genning ifodasini yo'q qilish uchun maxsus siRNK (S5, I va J-rasm).

Keyin biz hujayra proliferatsiyasi va Ythdf2DNKNK hujayralarining omon qolishini IL-15 ishtirokida Mdm2 yoki Tardbp ning nokdaunsizligi bilan solishtirdik. Natijalar shuni ko'rsatdiki, Tardbp ning ishdan chiqishi Ythdf2DNK sichqonlarining NK hujayralarida hujayra proliferatsiyasi va hujayra omon qolishidagi nuqsonni hech bo'lmaganda qisman qutqarishi mumkin (7-rasm, N va O).

Biroq, Mdm2 ning qulashi hech qanday qutqaruv ta'siriga ega emas edi (S5, K va L-rasm). Ushbu natijalar YTHDF2 NK hujayralarining ko'payishi va bo'linishini Tardbp ning mRNK barqarorligini hech bo'lmaganda qisman inhibe qilish orqali tartibga solishini ko'rsatadi.

Munozara

Ushbu tadqiqotda biz YTHDF{0}}m6A metilatsiyasining NK hujayra immunitetida ko'p qirrali roli haqida xabar beramiz. Biz m6A modifikatsiyalarining eng muhim o'quvchilaridan biri bo'lgan YTHDF2 NK hujayralari gomeostazini, kamolotini, IL-15 vositachiligida omon qolishini va antitumor va antiviral faollikni saqlash uchun juda muhim ekanligini aniqladik.

Shuningdek, biz STAT5 va YTHDF2 oʻrtasida, IL-15 ning quyi oqimida, sichqonchaning NK hujayralarida effektor funksiyalari va omon qolishiga hissa qoʻshadigan yangi ijobiy aloqa zanjirini aniqladik. Bizning tadqiqotimiz YTHDF2 yoki m6A metilatsiyasining NK hujayralarining tug'ma immunitetida umuman biologik rollarini aniqlaydi. U YTHDF2 xavfli o'zgarishlarga va virusli infektsiyaga tug'ma immunitetni qanday tartibga solishi haqidagi bilimlardagi bo'shliqni to'ldiradi.

Bizning topilmalarimiz NK hujayralari antitumorimmunitetini qo'llash uchun yangi yo'nalish beradi va bir vaqtning o'zida tug'ma immunitetni shakllantirishda m6A modifikatsiyalari haqidagi tushunchamizni rivojlantiradi. m6A o'quvchi oqsili YTHDF2 maqsadli mRNKlarning barqarorligini tartibga soladi (Du va boshq., 2016; Vang va boshq., 2014). Ko'plab tadqiqotlar YTHDF2 ning turli biologik jarayonlarga keng ta'sirini qo'llab-quvvatladi.

YTHDF2 normal gematopoetik ildiz hujayralarining kengayishi va o'z-o'zini yangilanishini bostiradi, lekin uzoq muddatli gematopoetik ildiz hujayralarini saqlash uchun ham talab qilinadi (Li va boshq., 2018; Mapperley va boshq., 2021 Paris va boshq., 2019; Vang va boshq., 2018a). Yaqinda bu gen bakterial infektsiya paytida yallig'lanishni to'xtatishda ishtirok etadi (Wu va boshq., 2020a). YTHDF2 ning o'sma rivojlanishidagi roli va mexanizmi yaxshi o'rganilgan.

YTHDF2 leykemiya ildiz hujayralari rivojlanishiga va o'tkir miyeloid leykemiya boshlanishiga yordam beradi (Parij va boshq., 2019). Leykemiyadan tashqari, YTHDF2 prostata saratoni (Liet boshq., 2020), glioblastoma (Dixit va boshq., 2021) va gepatotsellyulyar karsinoma (Chen va boshq., 2018; Hou va boshq.) kabi qattiq o'smalarning rivojlanishiga yordam berishi ko'rsatilgan. 2019; Chjan va boshq., 2020), turli xil m6A bilan o'zgartirilgan transkriptlarni nishonga olish orqali, masalan, LHPP va NKX astumor bostiruvchilari3-1 (Li va boshq., 2020), IGFBP3 (Dixit va boshq., 2021), OCT4 ( Chjan va boshq., 2020) va SOCS2 (Chenet boshq., 2018).

YTHDF2 o'simta rivojlanishida rag'batlantiruvchi rol o'ynasa-da, bizning tadqiqotimiz YTHDF2 ning o'simta hujayralariga, xususan, virusli infektsiyalarga va malign transformatsiyalarga qarshi tug'ma immunitetning asosiy komponenti bo'lgan NK hujayralariga immun javobida foydali rolini ochib beradi.

Shu sababli, YTHDF2 ingibitorlarini saraton terapiyasi uchun maqsadli o'simta hujayralari uchun kelajakda ishlab chiqish ehtiyotkorlik bilan amalga oshirilishi kerak, chunki YTHDF2 ning inhibisyoni NK hujayralari tomonidan xost antitumor reaktsiyasini buzishi mumkin. Boshqa tomondan, YTHDF2 ning NK hujayralarida yoki boshqa immun hujayralarida o'smaga qarshi faolligidan foydalanish uning bevosita o'simta hujayralariga ta'sir etuvchi potentsial ta'sirini hisobga olishi kerak. O'simta hujayralari va immun hujayralarida YTHDF2 ning differentsial nishonlanishi o'smaga qarshi faollikni maksimal darajada oshirishi kerak.

For more information:1950477648nn@gmail.com