Teri tana haroratini tartibga solishda, og'riq va bosimni his qilishda muhim rol o'ynaydi

Iltimos, murojaat qilingoscar.xiao@wecistanche.comqo'shimcha ma'lumot uchun

ANTRACT

Fon:Coffee arabica L. oilasining yashil loviyalari: Rubiaceae polifenollarning boy manbai bo'lib, terining oksidlanish shikastlanishini oldini oladi. Ushbu tadqiqotda lipozomalar topikal qo'llash uchun polifenollarning teri o'tkazuvchanligini oshirish uchun dori tashuvchilar sifatida ishlab chiqilgan. Materiallar va usullar: Yashil qahva loviya ekstrakti metanol va suv nisbatlarini o'zgartirish orqali tayyorlangan. Keyingi tadqiqotlar uchun eng yaxshi ekstraktni tanlash uchun barcha ekstraktlarda fitokimyoviy tahlil va in vitro antioksidant bahosi o'tkazildi. Tanlangan ekstraktning sitotoksiklik potentsiali (MTT tahlili) va anti-elastaz faolligi oqim sitometri yordamida L929 hujayra chiziqlarida baholandi. Ekstraktning lipozomalari yupqa plyonkali hidratsiya usuli bilan tayyorlangan va fosfatidilxolinning xolesterin nisbatini o'zgartirish va asta-sekin ekstrakt miqdorini oshirish orqali optimallashtirilgan. Liposoma formulasi jelleştiruvchi vosita sifatida karbopol "974P" dan foydalanib jelga aylantirildi. Tayyorlangan liposomal suspenziya va liposomal gel turli formulalar parametrlari uchun baholandi. Natijalar: Fitokimyoviy tahlil natijalari, in vitro antioksidant tahlillari va in vitro baholash. L929 hujayra liniyalari 25% metanolik ekstrakti eng yuqori fenolik tarkibga ega bo'lgan toksik bo'lmagan va yaxshi antielastaz faolligini ko'rsatgan degan xulosaga keldi. Optimallashtirilgan liposomal formulada xlorogen kislotaning inkapsulyatsiya samaradorligi 75% ni tashkil etdi.Liposomal gel preparatning 12% gacha barqaror chiqarilishini ko'rsatdi. soat an'anaviy formulaning 6-7 soatiga nisbatan Xulosa: Yashil qahva loviya ekstrakti yuklangan liposomal asosli gel qarishga qarshi ta'sir uchun potentsial tashuvchi bo'lib xizmat qilishi mumkin.

Kalit so‘zlar:Yashil qahva loviyalari (GCB), xlorogen kislota, ekstrakt, lipozomalar, antioksidant, qarishga qarshi.

KIRISH

Teri tana haroratini modulyatsiya qilishda, og'riq va bosimni idrok etishda muhim rol o'ynaydi va atrof-muhitning ifloslanishiga qarshi hal qiluvchi to'siq bo'lib, terining qarishini juda aniq ko'rsatadi.1 Teri ultrabinafsha nurlanishiga uzoq muddatli ta'sir qilish terida oksidlovchi stressni keltirib chiqaradigan erkin radikallarni hosil qiladi. terining fotoqarishi, quyosh yonishi, melanogenez, immunosupressiya va fotokarsinogenez rivojlanishiga olib keladi.² Erkin radikallar o'ta reaktiv kislorod molekulalari bo'lib, ular kollagen molekulalari bilan o'zaro bog'lanishni hosil qiladi, bu esa terining elastikligini yo'qotadi.3 Qarish sarkma bilan namoyon bo'ladi, terida noziklik, quruqlik va dog'lar. Shunday qilib, yosh ko'rinish istagi bilan qarishga qarshi mahsulotlar katta talabga ega. Kosmetika sanoatida o'simlik kelib chiqadigan antioksidantlar katta ahamiyatga ega. Antioksidantlar erkin radikallar keltirib chiqaradigan oksidlovchi zararni tiklash va oldini olishga yordam beradi. O'tlarning antioksidant faolligi asosan fenolik birikmalarning oksidlanish-qaytarilish xususiyatiga bog'liq.4 Shunday qilib, antioksidantlar ajinlar, yosh dog'lari va nozik chiziqlar kabi qarish belgilarini kechiktirishda istiqbolli ekanligi aniqlandi.

Yashil qahva (Coffea arabica L, Rubiaceae) loviyalari xlorogen kislota va uning kofein kislotasi, kumarik kislota va ferul kislotasi kabi birikmalari kabi polifenollarning boy manbai bo'lib, terining oksidlanish shikastlanishini oldini oladi. Tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, C. arabica ekstraktlari antibakterial, 5 antiviral, 6 yallig'lanishga qarshi, 7 teri yaralarini davolovchi va makromolekulyarlarning oksidlovchi shikastlanishini kamaytirishga ega? va metalloproteinaza ifodasining supressiv faolligi.10

Yashil qahva loviyalarining asosiy polifenol birikmasi bo'lgan xlorogen kislota antioksidant va depigmentatsiya xususiyatlariga ega va ultrabinafsha nurlar ta'sirida terining shikastlanishini inhibe qiladi. I2 Ilmiy tadqiqotlarga ko'ra, yashil qahva donalarida qovurilgan qahva va boshqa o'simliklarga qaraganda ko'proq miqdorda xlorogen kislota mavjud. "3

Iltimos, ko'proq bilish uchun shu yerni bosing

Polifenollarni teri orqali etkazib berish uning cheklangan penetratsiyasi tufayli samarasiz. Shunday qilib, uning penetratsiyasini kuchaytiruvchi formula asosi yoki penetratsion kuchaytirgichlar kerak." Shunday qilib, lipozomalar dori tashuvchisi sifatida tanlangan, chunki ular amfifil tabiatga ega va gidrofil molekulalar konsentrik ikki qatlamga osongina joylashtirilishi mumkin. Hujayra membranasiga fiziologik jihatdan o'xshash lipozomalar emas. -toksik tabiatli.Liposomalarda fosfolipidlarning mavjudligi dori fosfolipid kompleksining teriga yopishishi kuchayganligi sababli preparatning epidermisdan pastki qatlamlarga topikal so'rilishini yaxshilaydi.'5 Ushbu tadqiqotning maqsadi: Yashil qahva loviya ekstrakti yuklangan lipozomalarni o'z ichiga olgan jel, qarishga qarshi ta'sir uchun antioksidant kosmetik formula sifatida ishlatiladi.

MATERIALLAR VA USULLAR Materiallar

Yashil kofe arabica L loviyalari 2019-yil avgust oyida Mumbay mahalliy bozoridan olingan va doktor Xarshad M. Pandit tomonidan tasdiqlangan. Guru Nanak Xalsa kolleji, Botanika kafedrasining sobiq rahbari va dotsenti, Mumbay, Hindiston. Fosfatidilxolin HiMedia Laboratories Pvt Ltd, xolesterin 99 foizi Loba Chemie Pvt Ltd, 2,2-difenil-1-pikrilgidrazil (DPPH) va xlorogen kislota Otto Chemie Pvt Ltd, Mumbaydan sotib olindi. . Galli kislotasi va askorbin kislotasi Mumbaydagi SD Fine Chemicals Ltd kompaniyasidan sotib olindi. Ushbu tadqiqotda ishlatilgan barcha kimyoviy moddalar AR darajasida edi. Liposomalar Rotary evaporator, Rotaeva, Equitron va UV-ko'rinadigan spektrofotometr yordamida ishlab chiqarilgan, Shimadzu 1800 lipozomalarni baholash uchun ishlatilgan.

Cistanche qarishga qarshi bo'lishi mumkin

Usullari

Ekstraksiya metodologiyasi

Kukunli yashil qahva loviyalari sokslet apparatida 3 soat davomida neft efiri 40-60 daraja (1:6 foiz vazn/v) yordamida yog'sizlantirildi. Yog'sizlangan yashil qahva kukuni suv, 25% metanol, 50% metanol, 75% metanol va 100% metanol kabi turli xil erituvchilar bilan sokslet tizimidan foydalangan holda 2 soat davomida ekstraksiya qilindi. Olingan ekstraktlar erituvchini olib tashlash uchun chinni idishda 80 daraja elektr suv hammomida konsentratsiyalangan. Tayyorlangan ekstraktlar sifat va miqdoriy tahlil uchun ishlatilgan.

Jami fenolik tarkib

Jami fenolik tarkib standart protsedura yordamida Folin-Ciocalteu reagent usuli bilan aniqlandi. Gallik kislota standart sifatida ishlatilgan va umumiy polifenol miqdori gallik kislotaning kalibrlash egri chizig'idan mg/g gallik kislota ekvivalenti (GAE) sifatida ifodalangan.16

Spektral qatlam

Ekstraktda xlorogen kislota mavjudligini aniqlash uchun UV spektrometrik usuli qo'llanildi. Standart eritmalarni tayyorlash uchun Img/ml standart xlorogen kislota fosfat tamponida eritildi va 10 ug/ml standart eritma olish uchun keyingi suyultirish tayyorlandi. Namuna eritmasi uchun 1 mg/ml metanolik ekstraktning 25 foizi fosfat tamponida eritildi va 10 ug/ml standart eritma olish uchun keyingi suyultirish tayyorlandi. UV-Vis spektrofotometriyasi yordamida ikkala eritmaning qatlamli spektri olingan.

Har bir ekstraktda xlorogen kislota miqdorini aniqlash Standart eritma tayyorlash

Standart xlorogen kislota suv, 25 foiz metanol, 50 foiz metanol, 75 foiz metanol va 100 foiz metanol kabi erituvchilarda eritildi. Tayyorlash jarayonidagi xatolikni kamaytirish uchun yuqoridagi har bir erituvchida xlorogen kislotaning 10 ppm eritmasi tayyorlandi, so'ngra konsentratsiyasi 2 dan 10 ppm gacha bo'lgan mos keladigan suyultirish tayyorlandi. Chiziqlilik grafigi UV-Vis spektrofotometri yordamida 324 nm da absorbansni qayd etish orqali tuzilgan.

Namuna eritma tayyorlash

Namuna eritmasini tayyorlash uchun ekstraktlar tegishli erituvchilarda eritildi va 10 ppm eritma tayyorlandi. Namuna eritmasi uchun absorbans UV-Vis spektrofotometri yordamida 324 nm da qayd etilgan. Olingan absorbans har bir ekstraktdagi xlorogen kislota konsentratsiyasini topish uchun chiziqlilik grafigida ekstrapolyatsiya qilindi.

Antioksidant faollikni aniqlash

PDF (2,2-difenil -1-pikrilhidrazil) antioksidant tahlili. DPPH radikallaridagi ekstraktlarning radikal tozalash faolligi quyidagi standart usul bilan tekshirildi." Standart sifatida askorbin kislota ishlatilgan. Tajriba uch nusxada o'tkazildi. DPPH radikalini tozalash faolligi foizi har bir ekstrakt konsentratsiyasiga nisbatan chizilgan va IC aniqlangan.Azot oksidi antioksidant tahlili

Azot oksidi radikalini tozalash faolligi Griess Illosvoy reaktsiyasidan foydalangan holda tekshirildi.yo'qolgan imperiya cistanchel8 Askorbin kislota standart sifatida ishlatilgan. Tajriba uch nusxada amalga oshirildi. Azot oksidi radikalini tozalash faolligi ulushi har bir ekstrakt konsentratsiyasiga nisbatan chizilgan va ikkala antioksidant tadqiqotlari uchun IC ulushi inhibisyonu quyida ko'rsatilgan formuladan foydalangan holda hisoblab chiqilgan.

MTT tahlili yordamida hujayra hayotiyligini aniqlash Yashil qahva loviya ekstrakti, ya'ni 25 foiz metanolik ekstrakti L929 hujayra chizig'iga nisbatan sitotoksiklikni o'rganish uchun tekshirildi. 200 ul hujayra suspenziyasi 96-quduq plastinkasiga ekildi. hujayra zichligi (har bir quduq uchun 20,000 hujayra), sinov agentisiz. Hujayralar taxminan 24 soat davomida o'sishiga ruxsat berildi. Sinov agentining tegishli konsentratsiyasi (25 foiz metanolik ekstrakt) qo'shildi, plastinka 24 soat davomida 37 daraja 5 foiz CO, atmosferada inkubatsiya qilindi va sarflangan muhit olib tashlandi. MTT reagenti umumiy hajmning yakuniy konsentratsiyasiga (0,5 mg/ml) qo'shildi va plitalar qorong'i sharoitda 2-3 soat davomida inkubatsiya qilindi. MIT reaktivi chiqarilgandan keyin 100 ul DMSO qo'shildi va muloyimlik bilan chayqatildi. Absorbans ELISA o'quvchida spektrofotometr yordamida 570nm va 630nm da o'lchandi. IC.o qiymati chiziqli regressiya tenglamasi yordamida aniqlandi. Tadqiqot uchun ishlatiladigan formulalar:

Antielastaz faolligini aniqlash

Hujayralar 3×105 hujayra/2 ml zichlikda yetishtirildi va CO inkubatorida 24 soat davomida 37 daraja haroratda inkubatsiya qilindi. 1 Antielastaz tadqiqoti uchun 25{18}umM epigallokatexin gallat (EGCG) bilan ishlov berilgan hujayralar musbat nazorat sifatida, 200ug/ml bilan ishlov berilgan hujayralar ishlatilgan. Sinov namunasi sifatida metanol ekstraktining 25 foizi ishlatilgan (6-jadval) va faqat madaniyat muhiti bo'lgan hujayralar salbiy nazorat sifatida ishlatilgan va 2 ml madaniyat muhitida 24 soat davomida inkubatsiya qilingan. Naychalar besh daqiqa davomida 300x g da 25 daraja santrifüj qilindi va hujayralar PBS bilan yuvildi. PBS olib tashlanganidan keyin 0,5 ml BD Cytofix/Cytoperm eritmasi qo'shildi va naychalar 10 daqiqa davomida buzilmagan holda saqlangan. SEd 20 mL Sichqoncha anti-inson neytrofil elastaz/ELA2 Alexa Fluor® 647-konjugatsiyalangan monoklonal antikor qo'shildi, aralashtirildi va qorong'i sharoitda xona haroratida 30 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi. Hujayralar 0,1% natriy azid va 0,5 ml PBS bilan ishlov berildi va mos ravishda 650nm va 668nm qo'zg'alish va emissiya bilan Flow Cytometry tomonidan tahlil qilindi. Ushbu tadqiqotda L929 hujayrasida ELA-2 (konjugatsiyalangan sichqonchaning anti-inson elastaz antikori) ifodasiga ta'sirini baholash uchun test birikmalari, ya'ni Yashil qahva loviya ekstrakti (25 foiz metanolik ekstrakt) va standart Epigallokatexin gallat (EGCG) ishlatilgan. chiziqlar.

Yashil qahva loviya ekstrakti yuklangan lipozomalarni tayyorlash

Liposomalarni shakllantirish uchun Bangham va boshqalar tomonidan ta'riflangan 1 daraja yupqa plyonkali hidratsiya usuli ishlatilgan. Lipid aralashmasi fosfatidilxolin va xolesterinni xloroform va metanolda (2:1) eritib, dumaloq pastki kolbada (RBF) tayyorlangan va bir hil plyonka hosil qilish uchun shisha boncuklar qo'shilgan. RBF aylanadigan fleshli evaporatatorga (Roteva, tenglama) biriktirildi va termostatli suv hammomida 40 daraja haroratda 80 rpm / min tezlikda aylanishga ruxsat berildi. Organik erituvchilar vakuumni sekin qo'llash orqali olib tashlandi, bu kolba devorlarida 100 foiz bir hil lipid plyonka hosil bo'lishiga olib keldi. Organik erituvchilarni to'liq olib tashlash uchun plyonka LH uchun quritilishiga ruxsat berildi. Quritilgan lipid plyonkasi erigan ekstrakt (25 foiz metanolik ekstrakt) o'z ichiga olgan fosfat tampon (pH: 5,4) bilan hidratlangan va keyin RBF o'tish haroratidan yuqori bo'lgan 46 darajadan yuqori bo'lgan termostatli suv hammomida 150 rpm / min tezlikda aylantirilgan. lipidlardan. Aylanish bir hil suspenziya olinmaguncha 60 daqiqa davom ettirildi. Ushbu usul yordamida ishlab chiqarilgan lipozomalar katta va heterojendir, shuning uchun lipozomalarni kamaytirish uchun 30 daqiqa davomida vannaning sonikatsiyasi usuli ishlatilgan. Yashil qahva loviya ekstrakti asosidagi liposoma suspenziyasi to'liq hidratsiyani ta'minlash uchun xona haroratida 2 soat turishiga ruxsat berildi. Liposoma suspenziyasi muzlatgichda kehribar rangli shisha idishda keyingi foydalanishgacha saqlangan.

Liposomalarning xarakteristikasi

Quyida tayyorlangan lipozomalar tavsiflangan parametrlar keltirilgan

Kapsülleme samaradorligini aniqlash UV-Vis spektrofotometri yashil qahva loviya ekstrakti yuklangan lipozomalarda xlorogen kislotaning inkapsulyatsiya samaradorligini baholash uchun ishlatilgan. Santrifüjdan keyin supernatantda qolgan xlorogen kislotaning absorbsiyasi UV-Vis spektrofotometri yordamida 324 nm da o'lchandi.mikronlashtirilgan tozalangan flavonoid fraktsiyasi 1000 mg qo'llaniladiKeyin, konsentratsiya standart xlorogen kislota uchun olingan kalibrlash sxemasidan hisoblab chiqildi.

Optik mikroskopga qo'shilgan preparatning umumiy miqdori

Bir tomchi liposoma suspenziyasi toza shisha slaydga joylashtirildi va optik mikroskopning (Motik mikroskop) 45X va 100X kuchi ostida kuzatildi. Vesikula hajmini, polidispersibilite indeksini (PDI) va Zeta potentsialini aniqlash

Vesikula o'lchami va Polidispersibilite indeksi kompyuterlashtirilgan tekshirish tizimi (Malvern zarracha o'lchami analizatori) bilan dinamik yorug'lik tarqatuvchi asbob yordamida tahlil qilindi. Yangi tayyorlangan liposomal partiyalar 1:100 nisbatda deionizatsiyalangan suv bilan suyultirildi. Barcha o'lchovlar 25 ± 0,5 gradusda uch nusxada amalga oshirildi. Liposomal suspenziya deionizatsiyalangan suv bilan suyultirildi va Malvern Zetasizer yordamida zeta potentsiali aniqlandi.

Transmissiya elektron mikroskopiyasi (TEM) TEM tahlili transmissiya elektron mikroskopi (Tecnai T20,200Kev, FEI) orqali optimallashtirilgan dori yuklangan suspenziya uchun o'tkazildi. Mikropipet yordamida to'rga bir tomchi suspenziya qo'yildi. To'r yaxshi quritilgan. Namunani o'z ichiga olgan quritilgan panjara 200 VK da tezlashtirilgan elektronlar bilan bombardimon qilindi. Keyin vesikula o'lchami va liposoma morfologiyasi vakuum ostida TEM tomonidan tasvirlangan (1-rasm). Liposomal gelni tayyorlash

Yashil qahva loviya ekstrakti yuklangan liposomal jel karbopol@974P jel bazasi yordamida tayyorlangan. Aniqlik bilan 0,5 foiz karbopol@974P tortildi va gidratatsiya uchun konservantlar qo‘shilgan ikki marta distillangan suvda tun davomida saqlangan. Santrifüjdan so'ng olingan lipozomal granulalar sonikatsiya yo'li bilan distillangan suvda tarqaldi va aralashtirish bilan gidratlangan karbopol eritmasiga qo'shildi. Jellanish trietanolamin (TEA) yordamida neytrallash orqali qo'zg'atildi. Jel rangi, tuzilishi (silliqligi va yog'liligi), pH, yopishqoqlik, dori tarkibi, tarqalish qobiliyati va dori-darmonlarni chiqarish uchun baholandi.

In vitro dori chiqarishni o'rganish

Retseptorlar bo'linmasining sig'imi 22 ml va sirt maydoni 3,91 sm2 bo'lgan Frants diffuziya hujayralari apparati in vitro dori chiqarish dializ membranasini (molekulyar og'irlik chegarasi 12,000-14,000) baholash uchun ishlatilgan. kechada buferda namlash orqali oldindan gidratlangan bo'lib, hujayralarga o'rnatildi. Retseptor suyuqligi sifatida fosfat buferi pH 5,4 (37 daraja ±0,5 daraja) ishlatilgan. Rezervuar eritmasi magnit boncuk yordamida 100 rpm/min tezlikda aralashtirildi. Membranada donor bo'linmasiga 0,5 g jel qo'yildi. Alikvotlar 1,2, 3, 4, 5,6,7,8,12 va 24 soat oralig'ida yig'ildi va 324nm da UV-Vis spektrofotometrida tahlil qilindi.

NATIJALAR VA MUHOKAZA Ekstraksiya metodologiyasi

Yashil kofe arabica L. loviya ekstraktining foiz hosildorligi 3-jadvalda keltirilgan. Barcha ekstraktlarning jismoniy ko'rinishi quyuq sariq va to'q jigarrang rangga ega edi. Metanol ekstraktining 25 foizi boshqa barcha ekstraktlarga nisbatan 26,54±0,13 da eng yuqori foizli hosilni ko'rsatdi.

Jami fenolik tarkib

Barcha ekstraktlarning umumiy fenolik tarkibini baholash uchun Folin-Ciocalteu usuli ishlatilgan. Barcha ekstraktlarning TPC 1-jadvalda keltirilgan gallik kislota ekvivalenti (standart egri tenglama: y= 0.0031 plyus 0,3477,r2=0.9953) bilan ifodalanadi. Barcha ekstraktlar orasida asosiy fenolik tarkib metanolik ekstraktning 25 foizida baholanadi. Spektral qatlam Har bir ekstraktdagi xlorogen kislota miqdorini aniqlash Har bir ekstraktda mavjud bo'lgan xlorogen kislota miqdori 3-jadval va 2-rasmda keltirilgan.oteflavonoidNatijalarga ko'ra, xlorogen kislotaning eng yuqori miqdori metanolik ekstraktning 25 foizida mavjudligi aniqlandi.

Umumiy fenolik tarkib, xlorogen kislota miqdorini aniqlash va antioksidant tahlildan olingan natijalarga ko'ra, 25 foizli metanolik ekstrakt boshqa ekstraktlarga nisbatan eng yuqori fenolik tarkibga ega, xlorogen kislotaning ko'p miqdori va maksimal radikallarni tozalash faolligini o'z ichiga oladi.

MTT tahlili orqali hujayra hayotiyligini aniqlash Yashash qobiliyatini tahlil qilish - bu to'qimalar, hujayralar yoki organlarning omon qolish holatini saqlab qolish yoki tiklash qobiliyatini aniqlaydigan tahlil. ELISA o'quvchisi tomonidan hujayra sitotoksisitesini o'rganish bo'yicha statistik ma'lumotlarda sinov birikmasi, yashil qahva loviya ekstrakti L929 hujayra chiziqlariga qarshi sitotoksisite o'rganish yashil qahva loviya ekstrakti standartga nisbatan 306,38 ug/ml inhibitiv kontsentratsiya (IC) bilan o'rtacha sitotoksisite potentsial xususiyatlarini ko'rsatdi. Kamptotesin preparati 23ug/ml. 5-jadval. Kuzatish shuni ko'rsatadiki, yashil qahva loviya ekstrakti 37 daraja haroratda 24 soat inkubatsiya davri bilan mos ravishda 12,{6}} ug/ml konsentratsiyasi bilan sezilarli sitotoksiklik potentsialiga ega emas. (1-chizma).

Antielastaz faolligini aniqlash

Elastaz fermenti kollagen bilan birgalikda biriktiruvchi to'qimalarning mexanik mustahkamligiga hissa qo'shadigan erimaydigan elastik tolali oqsil bo'lgan elastinni parchalashga qodir. Bir qator tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, terining qarishi va ajinlarga qarshi ta'siri elastaz faolligining pasayishiga sezilarli darajada mos keladi. Shunday qilib, yashil qahva loviya ekstraktining qarishga qarshi vosita sifatida foydaliligini tasdiqlash uchun antielastaz tadqiqotlari o'tkazildi. Ushbu tadqiqotda test birikmasi, ya'ni Yashil qahva loviya ekstrakti va Std, EGCG ularning L929 hujayra chizig'idagi ELA-2 (konjugatsiyalangan sichqoncha anti-inson Elastaz antikori) ifodasiga ta'sirini baholash uchun ishlatilgan. Tajribada ishlatiladigan birikmalarning kontsentratsiyasi quyidagicha edi:

Berilgan sinov birikmasi GC loviya ekstrakti L929 hujayra qatoridagi ELA-2 ifodasini bostirdi. ELA-2 ning nisbiy o'rtacha floresans intensivligi qiymatlari std, Epigallocatechin gallate va sinov aralashmasi yashil qahva loviya ekstraktida deyarli bir xil darajada kamaydi. (7-jadval; 3-rasm va gistogramma 1). Shunday qilib, GC loviya yaxshi anti-elastaz agenti hisoblanadi. Yashil qahva loviya ekstrakti yuklangan lipozomalarni tayyorlash

Ushbu tadqiqotda lipozomalarni shakllantirish uchun yupqa plyonkali hidratsiya usuli ishlatilgan.puritans vitamin CBuni tanlash sababi

Usul ko'p qatlamli pufakchalarni tayyorlashning eng oddiy usuli bo'lib, bir qavatli pufakchalarga nisbatan xlorogen kislota kabi hidrofilik molekulalarning yuqori massasini yuklashga qodir. Yupqa plyonkali hidratsiya usuli 2-jadvaldagi ekstraktda mavjud bo'lgan xlorogen kislota uchun inkapsulyatsiya samaradorligining 75 foizini berishi aniqlandi. Shunday qilib, bu usul lipozomalarni tayyorlash uchun ishlatilgan.

Liposomalarning xarakteristikasi Optik mikroskopiya

Ko'p qatlamli pufakcha aniq kuzatilgan (4-rasm). Mikroskopik kuzatuvlar barcha tayyorlangan partiyalar uchun qayd etilgan vesikulalarning shakli va hajmini baholash uchun ishlatilgan.

Polidispersibillik indeksini (PDI), Zeta potentsialini va vesikula hajmini aniqlash

PDI asosan ma'lum bir namunadagi vesikulalarning o'lchamlarini taqsimlash uchun paydo bo'ladi.sistanchePDI ning raqamli qiymati {0}} dan boshlanadi.0 (zarrachalarning mukammal bir xil o'lchami) dan 1,1 gacha (yuqori polidispers zarracha o'lchami). Liposoma va lipozomlar kabi lipidga asoslangan tashuvchi tizimlar uchun 0,3 va undan past o'lchamdagi nanoliposomalar qabul qilinadi, chunki bu fosfolipid pufakchalarining bir jinsli populyatsiyasini ko'rsatadi.21 Zeta potentsiali zarrachalarning fizik barqarorligini tushunish uchun qo'llaniladigan muhim xarakterlash usuli hisoblanadi. -30 mV dan plyus 30 mV gacha bo'lgan qiymat odatda yaxshiroq jismoniy kolloid barqarorlikka erishish uchun etarli itaruvchi kuchga ega deb hisoblanadi.

Yupqa plyonkali hidratsiya usuli katta va heterojen ko'p qatlamli pufakchalarni beradi. Ishlab chiqarilgan lipozomalarning o'lchamini tahlil qilish natijasida z-o'rtacha (d.nm) o'lchami 864.2 nm, PDI 0.375 va Zeta potentsial -12.4 yaxshi bilan aniqlandi. tutilish samaradorligi.

Transmissiya elektron mikroskopi (TEM) TEM yordamida ushbu lipozomalarning morfologik tahlili sharsimon lipozomalarni ko'rsatdi. Liposomal gelni tayyorlash

Liposoma dispersiyasi polimer bilan oddiygina aralashtirilib, mos keladigan jellar hosil bo'ldi. Liposomal gel formulasi foydalidir, chunki vesikulalarning birlashishini samarali oldini olish yoki minimallashtirish mumkin, chunki polimer lipozomalar orasidagi bo'shliq bo'lib xizmat qiladi. Shunday qilib, vesikula o'lchamiga ta'sir qilmaydi, chunki u boshqariladigan polimer / lipozoma o'zaro ta'sir jarayonidir. Liposomal asosli krem ​​formulasi tanlanmagan, chunki emulsiya asosidagi mahsulotlarda barqarorlik muammosi qayd etilgan, chunki bu usul ko'p qatlamli pufakchalarni tayyorlashning eng oddiy usuli va xlorogen kislota kabi gidrofil molekulalarning yuqori massasini yuklashga qodir. bir qavatli pufakchalar. Yupqa plyonkali hidratsiya usuli 2-jadvaldagi ekstraktda mavjud bo'lgan xlorogen kislota uchun inkapsulyatsiya samaradorligining 75 foizini berishi aniqlandi. Shunday qilib, bu usul lipozomalarni tayyorlash uchun ishlatilgan.

Liposomalarning xarakteristikasi Optik mikroskopiya

Ko'p qatlamli pufakcha aniq kuzatilgan (4-rasm). Mikroskopik kuzatuvlar barcha tayyorlangan partiyalar uchun qayd etilgan vesikulalarning shakli va hajmini baholash uchun ishlatilgan.

Polidispersibillik indeksini (PDI), Zeta potentsialini va vesikula hajmini aniqlash

PDI asosan ma'lum bir namunadagi vesikulalarning o'lchamlarini taqsimlash uchun paydo bo'ladi. PDI ning raqamli qiymati {0}} dan boshlanadi.0 (zarrachalarning mukammal bir xil o'lchami) dan 1,1 gacha (yuqori polidispers zarracha o'lchami). Liposoma va lipozomlar kabi lipidga asoslangan tashuvchi tizimlar uchun 0,3 va undan past o'lchamdagi nanoliposomalar qabul qilinadi, chunki bu fosfolipid pufakchalarining bir jinsli populyatsiyasini ko'rsatadi.21 Zeta potentsiali zarrachalarning fizik barqarorligini tushunish uchun qo'llaniladigan muhim xarakterlash usuli hisoblanadi. -30 mV dan plyus 30 mV gacha bo'lgan qiymat odatda yaxshiroq jismoniy kolloid barqarorlikka erishish uchun etarli itaruvchi kuchga ega deb hisoblanadi. 2

Yupqa plyonkali hidratsiya usuli katta va heterojen ko'p qatlamli pufakchalarni beradi. Ishlab chiqarilgan lipozomalarning o'lchamini tahlil qilish natijasida z-o'rtacha (d.nm) o'lchami 864.2 nm, PDI 0.375 va Zeta potentsial -12.4 yaxshi bilan aniqlandi. tutilish samaradorligi.

Transmissiya elektron mikroskopi (TEM) TEM yordamida ushbu lipozomalarning morfologik tahlili sharsimon lipozomalarni ko'rsatdi.

Liposomal gelni tayyorlash

Liposoma dispersiyasi polimer bilan oddiygina aralashtirilib, mos keladigan jellar hosil bo'ldi. Liposomal gel formulasi foydalidir, chunki vesikulalarning birlashishini samarali oldini olish yoki minimallashtirish mumkin, chunki polimer lipozomalar orasidagi bo'shliq bo'lib xizmat qiladi. Shunday qilib, vesikula o'lchamiga ta'sir qilmaydi, chunki u boshqariladigan polimer / lipozoma o'zaro ta'sir jarayonidir. Liposomaga asoslangan krem ​​formulasi tanlanmagan, chunki emulsiyaga asoslangan mahsulotlarda barqarorlik muammolari qayd etilgan:

vazikullar bilan o'zaro ta'sir qilishi mumkin bo'lgan sirt faol moddasi va ortiqcha yog'ning mavjudligi. Yopishqoqlik kabi turli xususiyatlar polimer konsentratsiyasini o'zgartirish yoki polimer turini o'zgartirish orqali osongina nazorat qilinishi mumkin. Shunday qilib, liposomal jellar barqarorlik muammosini chetlab o'tganligi, nazorat ostida chiqarilishini ta'minlaydigan, tayyorlash oson va terini parvarish qiluvchi kosmetika sifatida estetik jozibador bo'lganligi sababli tayyorlangan.23 Tayyorlangan lipogellar och sariq rangda va shaffof emas edi. 0.5% w/w karbopol@974P yaxshi konsistensiyaga ega va hech qanday yig'ilishdan xoli silliq ko'rinishga ega ekanligi aniqlandi. Liposomal gel uchun preparat tarkibi 94,16±1,3 bo'lib, jelning yopishqoqligi 13500 tsps dan 16500 cps oralig'ida va tarqalish qobiliyati taxminan 7-8 g.sm/s ekanligi aniqlandi.

In vitro dori chiqarish profili

Terining eng tashqi qatlami shox parda bo'lib, asosan oqsil keratin va lipidlardan iborat. Hujayralararo lipidlar teri orqali so'rilishini nazorat qilishda muhim rol o'ynaydi. Hujayralararo lipidlar lipozomalarda mavjud bo'lgan fosfolipidlar bilan o'zaro ta'sir qilishi va shu bilan shox pardaning ko'p ikki qatlamli tuzilishini o'zgartirmasdan lipidlarning shishishiga olib kelishi mumkin. Bu shishgan lipidlar preparatning to'planishiga olib keladi va intrakutan deponi hosil qiladi. Mahalliy ravishda qo'llaniladigan lipozomalarning mexanizmi to'liq tushunilmagan bo'lsa-da, lekin lipid tarkibi, sirt zaryadi va liposoma qatlamlari birinchi navbatda dorivor moddalarni joylashtirishda muhim rol o'ynaydi. Tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, topikal yuborish ham lipozomalar hajmiga ta'sir qiladi.24 In vitro preparatni chiqarish dializ membranasi yordamida amalga oshirildi. In vitro =liposomal gelning chiqarilishini oʻrganish anʼanaviy gelning 7-8 soatiga nisbatan 12 soatgacha barqaror ajralib chiqish taʼsirini koʻrsatdi.

XULOSA

Green Coffee Arabica loviya ekstrakti umumiy fenolik tarkibi, xlorogen kislota miqdori va antioksidant tahlili uchun tekshirildi. Ushbu tadqiqotlar natijasida olingan natijalarga asoslanib, metanolik ekstraktning 25 foizi lipozomalarga qo'shilishi uchun tanlandi, chunki u eng yuqori fenolik tarkibga ega, ko'proq miqdorda xlorogen kislota va yaxshi antioksidant faollikni ko'rsatdi. Ekstraktni lipozomalarga kiritishdan oldin u MTT va antielastaz tahlili uchun tekshirildi. MT tahliliga asoslanib, ekstrakt hujayra sitotoksiklik potentsialiga ega emas edi va antielastaz tahliliga ko'ra, ekstrakt antielastaz faolligiga ega edi. Shunday qilib, ekstrakt qarishga qarshi lipozomalarni shakllantirish uchun ishlatilishi mumkin. Ko'p qatlamli pufakchalar nozik plyonkali hidratsiya usuli yordamida tayyorlangan. Tayyorlangan lipozomalar yaxshi inkapsulyatsiya samaradorligi va yaxshi jismoniy barqarorlikka ega edi. Ekstrakt asosidagi liposomal suspenziya liposomal jelga aylantirildi. In vitro dori-darmonlarni chiqarish bo'yicha tadqiqotga ko'ra, liposomal jel an'anaviy jelga nisbatan 12 soatgacha uzoq muddatli ta'sir ko'rsatdi. Shunday qilib, yashil qahva loviya ekstrakti yuklangan lipozomalarni qarishga qarshi potentsialga ega bo'lgan topikal etkazib berish uchun samarali tashuvchi deb hisoblash mumkin.

MAQDOR

Mualliflar Stellixir Biotechnology, Bengaluru va Karnatakaga MTT assay va Anti-elastase assay tadqiqotlarini yakunlashda yordam berganlari uchun minnatdorchilik bildiradilar, shuningdek, Sprint sinov yechimlariga, TEM tasviri uchun Mumbayga va kollejimiz SVKMning Dr.Bhanuben Nanavati farmatsevtika kollejiga minnatdorchilik bildiramiz. ushbu tadqiqotni o'tkazish uchun eng yaxshi sharoitlarni ta'minlash.

MANFATLAR to'qnashuvi

Mualliflar manfaatlar to'qnashuvi yo'qligini e'lon qilmaydi.

KISOTISHLAR:

TPC: Jami fenolik tarkib; DPPH:2,2-difenil -1-pikrilgidrazil; GAE: Gallik kislota ekvivalenti; GC: Green Coffee; GCB: yashil qahva loviyalari; ELA-2 (Konjugatsiyalangan sichqoncha anti-inson elastaz antikori): neytrofil elastaz; EGCG: epigallokatexin gallat; PC: fosfatidilxolin; CH: xolesterin; RBF: dumaloq pastki kolba; TEM: Transmissiya elektron mikroskopiyasi; MTT: 3-(4,5-diemtiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromid; PDI: Polidispersibilite indeksi; IC": Yarim maksimal inhibitiv kontsentratsiya.

Ushbu maqola Desai va Mallyadan olingan.: Yashil qahva loviya ekstrakti yuklangan anti-aging liposomal gel ishlab chiqish