Cistanche Deserticolaning umumiy glikozidlari va polisaxaridlari osteoporozning oldini oladi
Mar 28, 2022
Aloqa:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Fujiang Vang 1, Pengfey Tu, Kevu Zeng *, Yong Jiang **
ANTRACT
Etnofarmakologik ahamiyatga ega:An'anaviy xitoy tibbiyoti Cistanche deserticola YC Ma "buyrakni tonlash va suyaklarni mustahkamlash" ta'siriga ega. Biroq, C. deserticolaning o'ziga xos faol ekstraktlari va osteoporozni davolash mexanizmlari aniq emas.
Tadqiqot maqsadi:Biz osteoporoz va potentsial mexanizmlarni davolash uchun C. deserticolaning samarali komponentli ekstraktlarini aniqlamoqchi edik.
Materiallar va uslublar:Bizning guruhimiz anti-osteoporotik faollikka ega C. deserticola ekstraktlarini, jumladan qarilik tezlashtirilgan sichqonchaga moyil 6 (SAMP6) sichqonlarida umumiy glikozidlar (TG), polisakkaridlar (PS) va oligosakkaridlarni (OS) o'rgandi. Suyak strukturasi shakllanishi va kaltsiy konlarini tekshirish uchun Goldner trixrom, Van Gieson (VG), Safranin O-Fast Green va fon Kossa bo'yashlari o'tkazildi. Biokimyoviy belgilarni aniqlash uchun sarum to'plangan. Suyak mikro-arxitekturasi mikro-KT yordamida aniqlandi. Suyak morfogenetik oqsili-2 (BMP-2), osteokalsin (OCN), osteoprotegerin (OPG), yadro omili-k B ligand (RANKL) retseptorlari faollashtiruvchisi, p-glikogen sintetaza kinazasi{{11} ifodalari }} (p-GSK-3 ) va p{14}}katenin western blot va immunohistokimyo yordamida tahlil qilindi.
Natijalar:TG va PS suyaklarning gistopatologik shikastlanishini yaxshilaydi, yangi suyak, kollagen tolalar va xondrositlar shakllanishiga yordam berdi va kaltsiy konlarini tezlashtirdi. Bundan tashqari, ular suyak almashinuvining biomarkerlarini sezilarli darajada o'zgartirdi va suyak mikroarxitekturasini samarali ravishda yaxshiladi. Keyingi mexanizmlarni o'rganish shuni ko'rsatdiki, TG va PSlar RANKL, p- -katenin ifodalarini sezilarli darajada kamaytirdi, shuningdek, BMP-2, OCN, OPG va p-GSK{{ ifodalarini oshirdi. 4}} (Ser9).
Xulosa:Ushbu tadqiqot natijalari shuni ko'rsatadiki, TG va PS lar osteoklastogen suyak shakllanishiga yordam beradi va SAMP6 sichqonlarida suyak mikro strukturasining shikastlanishini yaxshilaydi va ularning osteoporozga terapevtik ta'siri Wnt / -katenin signalizatsiya yo'lini faollashtirish orqali amalga oshiriladi.
Cistanche mumkinosteoklastogen suyakni rag'batlantirishshakllantirish va takomillashtirishsuyak mikrotuzilmasining shikastlanishi.
1.Kirish
Osteoporoz keksa odamlarda keng tarqalgan kasallik bo'lib, insoniyat salomatligiga jiddiy xavf tug'diradi (Ye va boshqalar, 2020). Osteoporoz bilan og'rigan bemorlar sinishdan oldin butunlay asemptomatik bo'lishi mumkin, shuning uchun osteoporozning samarali oldini olish va davolash muhim ahamiyatga ega (Tella va Gallagher, 2014).
Tadqiqotlar shuni ko'rsatadiki, suyak rezorbsiyasining kuchayishi va suyak shakllanishining kamayishi suyaklarni qayta qurishda nomutanosiblikni keltirib chiqaradi, bu esa osteoporozga olib keladi (Sims va Gooi, 2008). Osteoblastlar va osteoklastlar suyak shakllanishi va rezorbsiyasi uchun muhim bo'lgan ikkita hujayra turidir. Wnt/-katenin yo'li suyak to'qimalarining o'sishi, rivojlanishi va saqlanishi uchun zarurdir (Cadigan va Nusse, 1997), shuningdek, beagle itning suyak iligi stromal hujayralari (BMSC) differentsiatsiyasini tartibga solishda muhim rol o'ynaydi (Jing va boshq. , 2018). GSK-3 -kateninning parchalanishini oldini oladi. -Katenin keyinchalik yadroga kiradi va keyin u T-hujayra omili / limfoidni kuchaytiruvchi bog'lovchi omil bilan bog'lanishi mumkin va Wnt maqsadli genlarning ifodasini tartibga soladi. Shu bilan birga, Wnt / -katenin signalizatsiyasi RANKL ning tabiiy antagonisti bo'lgan OPG (Glass va boshq., 2005) ishlab chiqarish va sekretsiyasini rag'batlantirish orqali osteoklastlarning differentsiatsiyasini kamaytiradi (Lacey va boshq., 1998). OPG suyak shakllanishi va suyak rezorbsiyasida muhim tartibga soluvchi rol o'ynaydi. Qanday bo'lmasin, osteoklastlarda -kateninning yo'q qilinishi osteoklastlar sonini va suyak rezorbsiyasini oshiradi va suyak massasini kamaytiradi (Wei va boshq., 2011). Suyak rezorbsiyasi inhibitörleri va suyak hosil bo'lishining promotorlari asosan osteoporozni davolashda qo'llaniladi. Hozirgi vaqtda qo'llaniladigan dori-darmonlarning klinik ko'rinishdagi nojo'ya ta'sirlari ham aniq ekanligini hisobga olsak, nojo'ya ta'siri kamroq bo'lgan dori-darmonlarni izlash zarur.
Cistanche deserticola YC Ma (C. deserticola) buyrak yetishmovchiligi, ayollarning bepushtligi va qarilik ich qotishi kabi bir qancha kasalliklarni davolashda keng qo‘llaniladigan an’anaviy xitoy dorivor o‘tlari Cistanches Herba, xitoycha Roucongrongning manba o‘simliklaridan biridir. Xitoyda 1000 yildan ortiq (Milliy farmakopeya qo'mitasi, 2020). An'anaviy xitoy tabobati (TCM), "buyrak ustunlik qiladigan suyaklar" va "buyrakni mustahkamlovchi suyak" nazariyalariga ko'ra, C. deserticola osteoporozni davolash uchun ishlatilgan. Tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, C. deserticola zardobdagi gidroksidi fosfataza (ALP), osteokalsin va kaltsiy ionlari darajasini yaxshilashi, kalamushlarning osteoblastlarida BMP-2 ifodasini oshirishi mumkin (Gang va boshq., 2018). Bundan tashqari, tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, C. deserticola RANKL tomonidan qo'zg'atilgan osteoklastogenezga qarshi himoya ta'sirini ko'rsatdi (Zhang va boshq., 2019). C. deserticola osteoporozda terapevtik ta'sirga ega bo'lsa-da, uning o'ziga xos faol komponentlari juda aniq emas. Osteoporoz va tegishli mexanizmlarni davolash uchun C. desertikolaning samarali komponent turlarini o'rganish katta ahamiyatga ega.
Shuning uchun biz ushbu tadqiqotni SAMP6 sichqonlariga C. deserticola dan turli xil kimyoviy tarkibiy qismlarni o'z ichiga olgan ekstraktlarning foydali ta'siri bor yoki yo'qligini aniqlash uchun o'tkazdik. Topilma natijalari C. deserticola ni klinik qo'llash bo'yicha aniq qo'llanmalar berishi mumkin, shuningdek, osteoporozni davolash uchun C. deserticola ning moddiy asoslarini ochib beradi.
2. Materiallar va usullar
2.1. Kimyoviy moddalar va reagentlar
Cistanche deserticola YC Ma Mandela Biotechnology Co., Ltd (Alashan, Ichki Mo'g'uliston, Xitoy) dan sotib olindi va keyin mualliflardan bir kishi ularni aniqladi (PF Tu). TG'lar, PS'lar va operatsion tizimlar ilgari aytib o'tilgan usul sifatida tayyorlangan (Gao va boshq., 2015). Hisobotga ko'ra, har bir ekstraktning tarkibiy tahlili HPLC yordamida amalga oshirildi. (Li va boshq., 2019; Vang va boshq., 2020). H&E, Goldnerning trikromli bo'yalishi, Van Giesonning (VG) bo'yalishi va Safranin O-Fast Green to'plamlari Bosterdan (Xubey, Xitoy) sotib olingan. Quyon sichqonchaga qarshi BMP-2 (ab14933), OCN (ab93876), OPG (ab183910) va RANKL (ab216484) Abcamdan (Kembrij, Buyuk Britaniya) xarid qilingan. Hujayra signalizatsiya texnologiyasi quyon sichqonchaga qarshi p-GSK-3 (Ser9) (#5558), GSK3 (#12456), -katenin (#13727) va p- -katenin (#) manbalari edi. 4176). Ikkilamchi antikorlar Zhongshan Golden Bridge Biotechnology kompaniyasidan (Pekin, Xitoy) sotib olindi.
Yuqori sifatli sistanche ekstraktidanChengdu Wecistanche Bio-Tech Co., Ltd
2.2. Hayvonlar
5-oylik urgʻochi qarilik tezlashtirilgan/bardoshli 1 (SAMR1) va SAMP6 sichqonlari Vital River Laboratory Animal Technology (Pekin, Xitoy) dan olingan. Hayvonlarning barcha manipulyatsiyalari Pekin universiteti sog'liqni saqlash fanlari markazining hayvonlarni parvarish qilish va ulardan foydalanish institutsional qo'mitasi tomonidan chiqarilgan ko'rsatmalarga muvofiq amalga oshirildi.
2.3. Dori vositalarini boshqarish
Sichqonlar tasodifiy ravishda quyidagi besh guruhga ajratildi: SAMR1 guruhi (oddiy tuz, n=10); SAMP6 guruhi (oddiy tuz, n =10); TGs guruhi (400 mg/kg, n=10); PSs guruhi (400 mg/kg, n=10) va OSs guruhi (400 mg/kg, n=10) (Gao va boshq., 2015). Barcha dorilar 12 hafta davomida har kuni buyuriladi.
2.4. Goldner trikromli bo'yash, H&E bo'yash, SafraninO-Fast Green bo'yash va Van Gison (VG) bo'yash
12 hafta o'tgach, femurlar tezda olib tashlandi va 10% etilen diamin tetraasetik kislota (EDTA) yordamida 7 kun davomida 4 ° C da mahkamlandi. Keyinchalik, femurlar tilimga (5 mkm) bo'linib, ishlab chiqaruvchining ko'rsatmalariga binoan Goldner Trichrome, Van Gieson (VG), SafraninO-Fast Green va H&E bo'yoqlari bilan bo'yalgan. Tasvirlar yorug'lik mikroskopi (Leica, Solms, Germaniya) bilan kuzatilgan.
2.5. BGP, BALP, P1NP, PICP, ALP, S-CTX, TRACP, U-CTX, U-NTX, D-Pyr va Pyr darajalarini o'lchash
Suyak gla oqsili (BGP), suyakka xos ishqoriy fosfataza (BALP), prokollagen turi 1 N-terminal propeptid (P1NP), prokollagen I tipi C-terminal propeptid (PICP), gidroksidi fosfataza (ALP), S-C kontsentratsiyasi -I-kollagenning telopeptidlari (S-CTX), tatratga chidamli kislota fosfatazasi (TRACP), I-toifadagi U-C-telopeptid (U-CTX), I-turdagi U-N-telopeptid. kollagen (U-NTX), D-piridinolin (D-Pyr) va piridinolin (Pyr) ferment bilan bog'liq immunosorbent tahlili (Jiangsu Meimian Industrial Co., Ltd, Jiangsu, Xitoy) bilan aniqlangan.
2.6. Von Kossaning bo'yalishi
Femur bo'laklari kuchli quyosh nuri ostida 30 daqiqa davomida 1% kumush nitratga botirildi va keyin uch marta deionizatsiyalangan suv bilan yuvildi. Keyinchalik, reaksiyaga kirishmagan kumushni olib tashlash uchun 5 daqiqa davomida 5% natriy tiosulfat qo'shildi. Kaltsiy fosfat tuzlari qora rang sifatida ko'rsatilgan. Femur kaltsiy tarkibini miqdoriy tahlil qilish uchun Image-Pro Plus dasturiy ta'minotining 6.0 versiyasi va Adobe Photoshop qo'llanildi.
2.7. Mikrokompyuterli tomografiya tahlili
Barcha femur namunalari mikro-KT skaneri (PerkinElmer, MA, AQSh) tomonidan 9 mkm ruxsatda skanerdan o'tkazildi. Keyingi tahlillar Analyze12.0 dasturi yordamida suyak mineral zichligi (BMD), suyak hajmi/umumiy hajmi (BV/TV), trabekulyar son (Tb. N), trabekulyar ajralish (Tb. Sp), trabekulyar qalinligi (Tb. Th) va to'qimalarning mineral zichligi (TMD). CTVox dasturiy ta'minoti (PerkinElmer, MA, AQSh) yordamida uch o'lchovli tasvirlar qayta tiklandi.
2.8. Tetratsiklin va kaltsinning to'planishi
Har bir hayvonga evtanaziyadan oldin 13-kun va 3-kuni mos ravishda 25 mg/kg tetratsiklin va 5 mg/kg kaltsein intraperitoneal berildi. Tetratsiklin va kalsein to'planishi Vectra® Polaris™ avtomatlashtirilgan miqdoriy patologiyani ko'rish tizimi (PerkinElmer, MA, AQSh) yordamida tekshirildi. Tetratsiklin va kalsein o'rtasidagi masofa Image-Pro Plus dasturiy ta'minotining 6-versiyasida kuzatilishi mumkin.0.
2.9. Western bloting tahlili
Femur to'qimalari homogenlashtirildi va RIPA lizis buferida lizing qilindi. Protein konsentratsiyasi bitsinxonin kislotasi (BCA) Protein tahlil reaktivi to'plami (Beijing TransGen Biotech, Pekin, Xitoy) yordamida aniqlandi. Jami oqsillar 10 foiz yoki 12 foiz SDS-PAGE jellariga yuklangan va keyin nitroselüloz membranasiga o'tkazilgan. Membrana bloklangan va keyin bir kechada birlamchi antikorlar va GAPDH (Los-Anjeles, AQSh) bilan 4 ◦C da inkubatsiya qilingan, so'ngra ikkilamchi antikor bilan inkubatsiya qilingan. Proteinlarni tahlil qilish guruhlari Tanon 5200 Multi (Shanxay, Xitoy) yordamida tahlil qilindi.
2.10. Immunogistokimyoviy tahlil
Femur to'qimalarining bo'limlari birlamchi antikorlar bilan 4 ◦C da inkubatsiya qilindi. BMP-2, OCN, OPG va RANKL ga qarshi poliklonal antikorlar mos ravishda 1:200 va 1:100 nisbatda suyultirildi. Ikkilamchi antikor sichqonchasi quyonga qarshi IgG (1:200) 37 ◦C da 1 soat davomida. Vectra® Polaris™ avtomatlashtirilgan miqdoriy patologiyani tasvirlash tizimidan foydalanish (PerkinElmer, MA, AQSh). Protein ifodasini miqdoriy tahlil qilish uchun Image-Pro Plus dasturiy ta'minotining 6.0 versiyasi va Adobe Photoshop qo'llanildi.
2.11. Statistik tahlil
Natijalar o'rtacha ± standart og'ish sifatida ifodalanadi. Turli guruhlarni solishtirganda bir tomonlama ANOVA bajarildi. Statistik tahlil uchun SPSS dasturining 22.0 versiyasi ishlatilgan va P < 0.05="" statistik="" ahamiyatga="" ega="" deb="">
cistanche reddit
3. Natijalar
3.1. TG va PS suyaklarning gistopatologik shikastlanishlarini yaxshilaydi va SAMP6 sichqonlarida kollagen tolalar va xondrositlar shakllanishiga yordam beradi.
Femur patologik shikastlanishi H&E binoni bilan kuzatilishi mumkin. SAMR1 guruhidagi suyakning histomorfologik tuzilmalari muntazam ravishda tartibga solinadi. Biroq, yuqorida aytib o'tilgan suyak tuzilmalari SAMP6 guruhida shikastlangan. TG va PS guruhlaridagi morfologik o'zgarishlar SAMP6 guruhidagiga qaraganda kamroq edi. Biroq, OS davolash guruhi morfologik o'zgarishlar uchun sezilarli yaxshilanishni ko'rsatmadi (1A-rasm). Suyak strukturasi shakllanishini aniqlash uchun Goldner trichrome, Van Gieson (VG) va Safranin O Fast Green bo'yoqlari o'tkazildi. Natijalar TG va PSs guruhlaridagi yangi suyak, kollagen tola va xondrositlar SAMP6 guruhiga nisbatan yaxshilanganligini ko'rsatdi. Biroq, OS davolash guruhi suyak tuzilishi o'zgarishlari uchun sezilarli yaxshilanishni ko'rsatmadi (1B-D-rasm).
1-rasm. TG va PS lar SAMP6 sichqonlarida gistopatologik zararni yaxshilaydi.
3.2. TG va PS lar SAMP6 sichqonlarida suyak almashinuvining biomarkerlarini o'zgartiradi
Osteoporoz yuzaga kelganda, qon zardobidagi BGP va PICP kabi suyak shakllanishi biomarkerlari darajasi sezilarli darajada kamayadi. Aksincha, suyak rezorbsiyasi bilan bog'liq biomarkerlar darajasi sezilarli darajada oshdi, shu jumladan sarum TRACP va S-CTX (2-rasm). Quvonarlisi, TG va PS guruhlari BGP, BALP, P1NP, PICP, ALP, S-CTX, TRACP, U-CTX, U-NTX, D-Pyr va Pyr darajalarini o'zgartirishi mumkin edi, ammo OSlar buni qila olmadilar.
2-rasm. TG va PS ning SAMP6 sichqonlarida suyak almashinuvining biomarkerlariga ta'siri.
3.3. TG'lar va PS'lar SAMP6 sichqonlarida yangi suyak shakllanishiga va kaltsiy birikmasiga yordam beradi
Suyak shakllanishi va fosfat minerallarining cho'kishi TG, PS va OS bilan davolash, tetratsiklin kaltsenini belgilash va Von Kossa bo'yash orqali rag'batlantirilishi mumkinligini tekshirish uchun. Natijalar shuni ko'rsatdiki, SAMP6 sichqonlarida yangi suyak shakllanishi SAMR1 sichqonlariga qaraganda ancha past bo'lgan, TG va PS esa yangi suyak shakllanishiga sezilarli yordam bergan (3A-rasm). Von Kossa binoni TG va PSs davolash guruhlarida juda ko'p kaltsiy to'planganligini aniqladi (3B-rasm).
3-rasm. TG va PS lar SAMP6 sichqonlarida yangi suyak hosil bo'lishiga va minerallar cho'kishiga yordam beradi.
3.4. TG va PS SAMP6 sichqonlarida suyak mikroarxitekturasini yaxshilaydi
Suyak mikro-arxitekturasi mikro-KT yordamida aniqlandi. SAMR1 sichqonlari bilan solishtirganda, SAMP6 sichqonlarining mikro-arxitekturasi ko'proq yomonlashgan, 12 hafta davomida TG va PS bilan davolangan sichqonlarda suyak holati yaxshilangan (4-rasm). Shuningdek, biz BMD, BV/TV, Tb.N va Tb indekslarini aniqladik. Th kamaydi va Tb indekslari. SAMR1 sichqonlari bilan solishtirganda SAMP6 sichqonlarida Sp va TMD ortdi. TG va PSlar BMD, BV / TV, Tb sezilarli darajada oshdi. N, Tb. Th va kamaygan Tb. Sp va TMD SAMP6 sichqonlari bilan solishtirganda. Biroq, operatsion tizimlar guruhida sezilarli o'zgarishlar kuzatilmadi.
3.5. TG va PS lar SAMP6 sichqonlarida BMP-2, OCN, OPG va RANKL ifodalarini oʻzgartiradi.
Biz BMP-2, OCN, OPG va RANKL ning protein ifodalarini ko'rib chiqdik. TG va PS lar BMP -2, OCN va OPG ning sezilarli darajada yuqori regulyatsiyasini keltirib chiqardi, RANKL ifodasi esa pastga qarab tartibga solingan (5-rasm). Biroq, OS terapiyasi guruhida sezilarli farq yo'q edi.
4-rasm. TG va PS ning suyak mineral zichligi va suyak mikroarxitekturasiga ta'siri.
3.6. TG va PS lar SAMP6 sichqonlarida p-GSK-3 (Ser9) va p- -katenin ifodalarini o‘zgartiradi.
Osteoblastogenezni rag'batlantiradigan TG va PS mexanizmlarini tushunish uchun SAMP6 sichqonlarining suyak to'qimalarida p-GSK-3 (Ser9) va p- -katenin ifodalari Western blotting yordamida o'lchandi (6-rasm). Natijalar shuni ko'rsatdiki, TG va PSs bilan davolash p-GSK-3 (Ser9) ifodasini sezilarli darajada yaxshilagan va SAMP6 guruhi bilan solishtirganda femurda p- -katenin ifodasini kamaytirgan. Biroq, OS davolash guruhi sezilarli o'zgarishlarni ko'rsatmadi.
4. Munozara
Hozirgi ishda SAMP6 va SAMR1 sichqonlari yordamida osteoporozga qarshi C. deserticola dan samarali komponentlarni topish. Terapevtik ta'sirlarni, shuningdek, mumkin bo'lgan mexanizmlarni baholash uchun C. deserticola dan uchta ekstrakt ishlatilgan. Bundan tashqari, RANKL, OPG, OCN va BMP-2 ifodalari hamda boshqa suyak rezorbsiyasi regulyatorlari ham tahlil qilindi. SAMP6 guruhi bilan taqqoslaganda, TG va PS suyakning gistopatologik shikastlanishini yaxshilashi mumkin, shuningdek, yangi suyak, kollagen tolasi, xondrosit va kaltsiy cho'kmasining shakllanishiga yordam beradi. Shu bilan birga, ikkalasi ham suyak almashinuvining biomarkerlarini o'zgartirishi va suyak mikro tuzilishini samarali ravishda yaxshilashi mumkin. Biroq, OSni davolash uchun hech qanday himoya ta'siri kuzatilmadi.
5-rasm. TG va PSlar BMP-2, OCN va OPG ifodalarini targ'ib qiladi va RANKL ifodasini kamaytiradi.
TCMlar osteoporoz kabi ko'plab kasalliklarning alomatlarini engillashtirish uchun keng qo'llanilgan. turli kasalliklarning, shu jumladan osteoporozning alomatlarini engillashtiradi. O'nlab tabiiy xitoy dorivor o'tlaridan ko'plab anti-osteoporotik bioaktiv birikmalar aniqlangan, ular odatda buyraklarni tonlash va buyrak mohiyatini saqlab qolish uchun ishlatiladi (Xu va boshq., 2017; Liu va boshq., 2018). C. deserticola buyrak etishmovchiligini davolash uchun nisbatan yuqori xavfsizlik va keng terapevtik funktsiyalarga ega. Ko'pgina tadqiqot tadqiqotlari C. deserticola ekstraktining osteoporozga terapevtik ta'sirini aniqladi (Li va boshq., 2012; Liang va boshq., 2013; Song va boshq., 2018).
Ko'p potentsial mezenximal ildiz hujayralarining (MSC) differentsiatsiyasidan kelib chiqqan suyak hosil qiluvchi osteoblastlar va suyak rezorbsiyasi osteoklastlar qisqa umrga ega bo'lgan terminalda farqlangan hujayralardir (Teitelbaum va Ross, 2003). Ularning ikkalasi ham doimiy ravishda ildiz hujayralaridan kelib chiqqan yangilari bilan almashtirilishi kerak (Long, 2011). Suyak to'qimalarining differentsiatsiyasida muhim rol o'ynaydigan Wnt / -katenin signalizatsiya yo'li ko'p potentsial MSClarni osteoblastlarga yo'naltirish va farqlashni rag'batlantirish orqali osteoblast ishlab chiqarishni rag'batlantiradi (Rodda va McMahon, 2006). Bundan tashqari, Wnts etuk osteoblastlarning apoptozini oldini oladi va shu bilan ularning umrini kateninga bog'liq va mustaqil yo'llar bilan uzaytiradi (Almeida va boshq., 2005). Shuning uchun Wnt/ -katenin signalizatsiya yo'li osteoporozning patogenezini aniqlashda muhim rol o'ynaydi. Ushbu tajribada SAMP6 sichqonlari turli xil C. deserticola ekstraktlaridan anti-osteoporotik samaradorligini tekshirish uchun ishlatilgan. TG va PS'lar RANKL va p- -katenin darajasini sezilarli darajada pasaytirdi va BMP-2, OCN, OPG va p-GSK-3 ifodalarini oshirdi. Xulosa qilib aytganda, TG va PS ning SAMP6 sichqonlariga terapevtik ta'siri asosan Wnt / -katenin signalizatsiya yo'lini faollashtirish orqali edi.
Osteoklastlarning haddan tashqari so'rilishi osteoporozning muhim sababi bo'lganligi sababli, osteoklastlarning faollashishi va farqlanishi bilan bog'liq bo'lgan omillar suyak yo'qotilishining oldini olishning muhim maqsadlari sifatida qaralishi mumkin (Takatsuna va boshq., 2005). Bizning tadqiqotimizda RANKL ifodasi sezilarli darajada pastga qarab tartibga solingan, shu bilan birga OPG darajasi TG va PS tomonidan yuqori tartibga solinishi mumkin edi. Suyak shakllanishi va osteoblast hujayralarining differentsiatsiyasini qayta qurish jarayoni asosan BMP-2 va OPNning ko'payishi bilan tavsiflanadi (Canalis, 2009). Ushbu tadqiqotda biz C. deserticola ning TG va PS lari BMP-2 va OPG ifodalarini oshirib, suyak minerallashuvini kuchaytirganini aniqladik. Shuning uchun, TG va PS'lar BMP-2 va OPNni ko'tarib, RANKLni pasaytirib, suyak shakllanishiga vositachilik qiladi.
Suyak hosil bo'lish belgilari suyak hosil qiluvchi hujayralarning faolligini aks ettiradi, xuddi shu suyak rezorbsiyasi belgilari osteoklastlarning faolligini aks ettiradi. Suyak aylanish belgilarining o'zgarishi natijasida mikroarxitektura yomonlashadi. Bizning tadqiqotimizda suyak rezorbsiyasi belgilari (S-CTX, TRACP, U-CTX, D-Pyr, U-NTX, Pyr) TGs va PSs guruhlarida sezilarli darajada kamaydi, aksincha, suyak shakllanishi belgilari (BGP, BALP) , P1NP, PICP, ALP) sezilarli darajada oshadi. Demak, C. deserticola ning TG va PSlari osteoporoz suyakning tiklanishiga yordam berishini ko'rish mumkin.
Wnt/-katenin yo'li osteoblast differensiallashuv belgilarini va mineralizatsiyani ifodalashni rag'batlantiradi, shu bilan birga osteoblastlarda asosiy osteogenik omil BMP-2 ifodasini faollashtiradi (Zhang va boshq., 2013). Bundan tashqari, -katenin suyak rezorbsiyasini inhibe qilish orqali bilvosita osteoklast differentsiatsiyasini bostiruvchi osteoblastdagi OPG ifodasini oshiradi (Baron va Kneissel, 2013). Bizning hozirgi tadqiqotimiz shuni ko'rsatadiki, TG va PS p-GSK-3 ni sezilarli darajada oshiradi va p- -katenin darajasini pasaytiradi. Ushbu natijalar TG va PS larning osteoporozga qarshi funktsiyasi Wnt / -katenin signalizatsiya yo'lini faollashtirish orqali tartibga solinadi degan xulosani qo'llab-quvvatlaydi.
Bizning oldingi HPLC tahlilimiz shuni ko'rsatdiki, beshta feniletanoid glikozid, shu jumladan echinacoside, cistanoside A, acteosid, isoacteosid va 2'-acetylakteosid TG ning asosiy komponentlari edi (Li va boshq., 2019; Shi va boshq., 2019). Yuqoridagi beshta feniletanoid glikozidning tuzilmalari C. desertikolaning antioksidant xususiyati uchun mas'ul bo'lgan fenolik gidroksil guruhlarga boy edi (Chen va boshq., 2016). Antioksidant tizimni takomillashtirish suyaklarning yo'qolishini oldini olishi mumkinligi xabar qilingan, shuning uchun bu feniletanoid glikozidlar C. desertikolaning anti-osteoporotik faollik uchun mas'ul bo'lgan faol komponentlari bo'lishi mumkin. Ekinakozid va akteozid osteoporozning tipik patologik xususiyatlarini yaxshilashi mumkinligi haqida xabarlar mavjud, masalan, suyak sifatini va femurning umumiy BMDsini yaxshilash, suyak shakllanishini rag'batlantirish va suyak rezorbsiyasini inhibe qilish (Chen va boshq., 2020). Bundan tashqari, echinacoside ajoyib anti-osteoporotik ta'sirga ega (Li va boshq., 2013). Oldingi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, sistanozid A suyak shakllanishiga yordam berishi va NF-kB ni inhibe qilish va PI3K / Akt yo'llarini faollashtirish orqali suyak rezorbsiyasini oldini olishi mumkin (Xu va boshq., 2017). C. deserticola polisaxaridlarining osteoporozga qarshi ta'siri haqida xabar berilmagan. Biroq, boshqa tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, astragalus polisaxaridlari RANKL ifodasini bostirishi, sarum OPG darajasini oshirishi va nihoyat osteoklastlarning differentsiatsiyasini bloklashi mumkin (Huo va Sun, 2016; Hwang va boshq., 2018). C. deserticola OS asosan mannitol, betain, fruktoza, glyukoza va saxarozadan iborat (Shi va boshq., 2019), ular osteoporozga qarshi faollik haqida hisobot bermaydi, shuning uchun OS osteoporozga terapevtik ta'sir ko'rsatmaydi. Xulosa qilib aytganda, TG va PSlar osteoporozga qarshi ta'siri uchun C. deserticolada faol komponentlardir.
Cistanche herba qo'shimchalari kukuniborosteoporozga qarshi ta'sir.
Qo'shimcha ma'lumot olish uchun bu yerni bosing.
5. Xulosalar
Xulosa qilib aytish mumkinki, C. deserticolaning TG va PSlari SAMP6 sichqonlarida Wnt/ -katenin signalizatsiya yo'lini tartibga solish orqali suyak shakllanishini kuchaytirishi mumkin, ammo OS emas. Kelajakda TG va PS osteoporoz uchun istiqbolli suyakni himoya qiluvchi terapevtik vositalarga aylanishi mumkin.
