srcyrlTil
Bosh sahifa / Bilim / Kontent

Bilim

Neytrofil-limfotsitlar nisbati yuqori bo'lgan qon tomir jarrohligi bilan og'rigan bemorlarda neytrofil komplement RNK ifodasi pasaygan

Nov 24, 2023

Elektiv qon tomir jarrohligi (EVS) o'tkazgan bemorlarda neytrofil-limfotsitlar nisbati (NLR) ortishi operatsiyadan keyingi jarrohlik natijalaridan qat'iy nazar o'limni oshirdi. Nima uchun yuqori NLR yuqori o'lim bilan bog'liqligini tushunish uchun biz EVS bilan og'rigan bemorlarda neytrofil va limfotsit transkriptomi ifodasini tekshirdik. Qon namunalari NLR hisoblash uchun EVS va sog'lom donorlardan o'tgan bemorlardan olingan. RNK namunalari bemorlarning neytrofillari va limfotsitlaridan ajratildi va NLR_Past (<3) and NLR_High (≥3) groups (n = 6 each). Paired samples with the highest RNA integrity number (mean = 9.8 ± 0.4) were sequenced and analyzed for differential expression. Normalized data were inputted for downstream analysis using iPathwayGuide (AdvaitaBio) and gene set enrichment analysis using GenePattern and MSigDB (Broad Institute). There was no clinical difference between the patient groups about clinical diagnosis, age, sex, history of hypertension, lipid abnormalities, diabetes mellitus, smoking, or statin use. The mean NLR was 4.37 ± 0.27 SEM in the NLR_High and 1.88 ± 0.16 for the NLR_Low groups. Significantly differentially expressed gene sets identified in the RNA sequence data were enriched highly (P = 1E-24) in the humoral immunity and complement systems. Neutrophils from NLR_High patients downregulated complement genes (C1QA, C1QB, C1QC, C1S, C2, CR2, C3AR1, C3, C8G, and C9 and complement regulatory genes CD59, SERPING1, C4BPA, CFH, and CFI). Downregulation of gene expressions of humoral immunity and complement within the neutrophils are associated with elevated NLR. It remains to be determined whether and how these changes contribute to increased late mortality previously observed in patients undergoing EVS.


Desert ginseng—Improve immunity (21)

Cistanche erkaklar uchun foydalari-immun tizimini mustahkamlaydi

Kirish

Yurak-qon tomir kasalliklari (KVH) butun dunyo bo'ylab o'limning asosiy sababidir. Bu, asosan, aterogenez va ateroskleroz bilan bog'liq bo'lib, individual genetika va ovqatlanishdan tashqari, yallig'lanish va immun mexanizmlar vositachilik qiladi.1-3 Yaqinda leykotsitlarning differentsial soni (neytrofillar va limfotsitlar) diqqat markazida bo'ldi. yurak-qon tomir (CV) natijalarini bashorat qilish. Mutlaq neytrofil-limfotsitlar sonining (NLR) nisbati o'tkir koronar aralashuvlar, 4-6 gipertoniya, 7,8 va yurak etishmovchiligi bo'yicha ko'plab kichik tadqiqotlarda umumiy o'limning bashoratchisi sifatida tan olingan.

Jadval 1. RNK-seq tomonidan tekshirilgan qon tomir jarrohligi bo'lgan bemorlarning klinik xususiyatlari

Table 1. Clinical characteristics of elective vascular surgery patients examined by RNA-seq


Oldingi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, NLR periferik qon tomir kasalliklari bo'lgan bemorlarda uzoq muddatli natijalarni bashorat qiluvchi omil hisoblanadi.10-13 Qon tomir jarrohligi bilan og'rigan bemorlar populyatsiyasi bo'yicha bizning retrospektiv tadqiqotlarimiz bu xulosani tasdiqlaydi. Qorin aortasi anevrizmasining endovaskulyar rekonstruktsiyasi bo'lgan 108 nafar bemorning 1 ta tadqiqotida operatsiyadan keyingi 30-kunlik o'lim darajasida NLR o'rtasida farq yo'q edi.<4 and an NLR of >4 (P = .507). However, the 1-year, 3-year, and 5-year mortality between the groups were 4.2% vs 28.1%, 15.1% vs 64.9%, and 24% vs 90%, respectively.14 In a second study of 290 asymptomatic patients undergoing prophylactic carotid endarterectomy, the risk for stroke was noted to be significantly higher (P < .0001) in patients with an NLR of >3 (n=116 bemor, 42,6% insult xavfi) NLR bo'lganlarga qaraganda<3 (n = 174 patients, 9.3% stroke risk).15 In a third study with 488 patients who underwent percutaneous interventions of femoropopliteal arteries, the 30-day mortality rates increased significantly (P = .005) with increasing NLR (1.4%, 4.3%, and 7.0% for low [<3], mid [3-4], and high [>4] NLR guruhlari, navbati bilan). % [P < .0001]).16

Ushbu tadqiqotda biz NLR ko'tarilishining potentsial mexanizmlarini aniqlash uchun qon tomir jarrohligi (EVS) tuzatish uchun malakali bemorlardan neytrofillar va limfotsitlarning RNK ketma-ketligini (RNK-seq) o'tkazdik. Tadqiqotlar yuqori NLR uchun molekulyar asos mavjudligini o'rganib chiqdi. Tadqiqotlarimiz shuni ko'rsatdiki, EVS tuzatilgan NLR ko'tarilgan bemorlar neytrofillarda immunoglobulin va komplement genlarining sezilarli darajada pasayishi bilan ajralib turadi.

Desert ginseng—Improve immunity (10)

cistanche foydalari - immunitetni mustahkamlaydi

Usullari

Bemorlar

Blood samples were collected from candidate patients for EVS procedures and healthy volunteers for NLR calculation and RNA sequence studies of neutrophils and lymphocytes. In screening patients for participation, any individual with an active local or systemic infection or obvious inflammatory disease was excluded from participation. Peripheral blood collection was approved by the institutional review board of University Hospitals Cleveland Medical Center (#01-06-02). Informed consent was obtained from each patient and healthy volunteer. All patients for EVS seen in the outpatient department were eligible. Patients in the study were characterized for the type of vascular surgery, age, sex, hypertension (blood pressure >130/80 mm Hg), diabetes mellitus (fasting blood glucose >100 mg/dL), chekish holati, statin bilan davolash, surunkali obstruktiv o'pka kasalligi, saraton, surunkali buyrak kasalligi, koronar arteriya kasalligi (SAPR), periferik arterial kasalliklar, serebrovaskulyar kasalliklar va surunkali yurak etishmovchiligining tibbiy tarixi. Barcha bemorlarda oq qon hujayralarining differentsial soni bilan to'liq qon ro'yxati o'tkazildi. Bemorlar past NLR (NLR_past [<3]) and high NLR (NLR_High [≥3]) groups (n = 6 each) and healthy volunteers aged 18 to 71 years (n = 6). Eleven of 12 patients' blood was drawn before surgery. One patient had blood drawn 4 months after surgery. 

Qon ajratish

To'liq qon (har bir bemor uchun 20 ml) EDTA bilan antikoagulyatsion bo'lgan 10 ml vakutainer naychalarida to'plangan va qon yig'ilgandan keyin bir soat ichida ajratilgan. Neytrofil va limfotsit hujayralari populyatsiyasi ishlab chiqaruvchining protokoliga muvofiq EasySep to'g'ridan-to'g'ri inson hujayralarini izolyatsiyalash to'plamlari (STEMCELL Technologies, Vankuver, Kanada) va Big Easy EasySep magnit (STEMCELL Technologies, Vankuver, Kanada) yordamida har biri 8 ml qondan ajratilgan. Magnit avval muz ustida sovutilgan va qon hujayralari va reagentlar pipetkadan farqli ravishda trubkani teskari aylantirish orqali muloyimlik bilan aralashtiriladi. Qayta tiklashni optimallashtirish uchun reagent nisbati ham quyidagi tarzda o'zgartirildi: birinchi ajratishdan oldin qonga 400 ml antikor aralashmasi, 400 ml magnit boncuk va 4 ml fosfat-buferli tuz qo'shildi, keyin esa 200 ml antikor qo'shildi. aralashmasi va ikkinchi ajratishdan oldin 400 ml boncuklar va uchinchi va oxirgi ajratishdan oldin 200 ml boncuklar. Hujayralarni hisoblash va slaydni tayyorlash uchun oxirgi qayta tiklash hajmlaridan 200 ml kichik alikvot olindi. Qayta tiklash hajmining qolgan qismi hujayralarni pellet qilish uchun daqiqada 1000 aylanishda 7 daqiqa davomida santrifüj qilindi.

Figure 1. Whole transcriptome of RNA from neutrophils and lymphocytes collected from patients with NLR, high (NLR_High), low (NLR_Low), or control (NLR_Control). The


1-rasm. NLR, yuqori (NLR_Yuqori), past (NLR_Past) yoki nazorat (NLR_Nazorat) bo'lgan bemorlardan to'plangan neytrofillar va limfotsitlardan olingan RNKning butun transkriptomasi. . Namuna nomidagi "N" yoki "L" harf kodi neytrofillar yoki limfotsitlar RNK manbai ekanligini anglatadi. Har bir toifada 6 nafar bemor bor edi. Moviy=ifoda darajasi qisqartirildi; qizil=ifodaning yuqori darajasi.

Hujayralarni hisoblash va slaydni tayyorlash

Fosfat-buferli sho'r suvda qayta suspenziyalangan hujayralar qo'shimcha ravishda ajratildi, tripan ko'k bilan aralashtirildi va gemositometr yordamida qo'lda hisoblandi. Odatda, har bir namunada 9 × 106 dan 15 × 106 gacha neytrofillar va 3 × 106 dan 10 × 106 gacha limfotsitlar ajratilgan. Izolyatsiya qilingan hujayralarning slaydlari sitotsentrifuga yordamida tayyorlandi, daqiqada 600 aylanish tezligida 3 daqiqa davomida aylantirildi va keyin Rayt-Giemsa bo'yog'i bilan bo'yaldi. Har bir hujayra populyatsiyasining tozaligi qo'lda hisoblash yo'li bilan aniqlandi, unda har bir slaydda kamida 1000 hujayra ajratilgan. Neytrofillar va limfotsitlar ajralishlarining hujayralarni hisoblash bo'yicha o'rtacha tozaligi mos ravishda 98,3% va 96,2% ni tashkil etdi. Oqim sitometriyasi neytrofillar va limfotsitlarning 1 juft namunasida o'tkazildi va mos ravishda 90,6% va 92,2% tozaligini ko'rsatdi. Neytrofil preparatidagi boshqa hujayralar limfotsitlarga (4%), monositlarga (2%), eozinofillarga (2,3%) va bazofillarga (0,3%) bo'lingan. Limfotsitlar preparatida boshqa hujayralar neytrofillar (1,2%), monositlar (1,4%), eozinofiller (1,2%) va bazofillar (1,8%) edi. NLR_Yuqori yoki NLR_Past namunalardagi neytrofillar yoki limfotsitlar CD14 ni sezilarli darajada oshirganligini aniqlash orqali hujayra preparatlaridagi monotsitlar bilan ifloslanish darajasini aniqlash uchun barcha alohida namunalardagi ommaviy RNK-seq ma'lumotlari ham ishlatilgan. , CD68, CD83 yoki CD163. Mustaqil ravishda, RNK-seq ma'lumotlari immun va saraton hujayralari (EPIC) ulushini baholashga kiritildi, bu dastur gen ekspresyonining ommaviy ma'lumotlaridagi immun va saraton hujayralarining ulushini baholash uchun mo'ljallangan.17 Foydalanilgan mos yozuvlar profili EPIC tomonidan taqdim etilgan. qon aylanib yuruvchi immun hujayralari va B hujayralari, CD4 va CD8 T hujayralari, monositlar, neytrofillar va tabiiy qotil hujayralar uchun profilni o'z ichiga oladi. Hisobot qilingan chiqish namunadagi hujayra fraktsiyalari sifatida berilgan.

Figure 2. Significantly differentially expressed genes from neutrophils and lymphocytes. (A) The number of significantly differentially expressed genes in neutrophils (blue) and lymphocytes (orange). (B) The principal component analysis plot of significantly differentially expressed genes in neutrophils (green and purple) and lymphocytes (red and blue) in NLR_High (circles) and NLR_Low (squares). (C) A heat map of significantly differentially expressed genes from NLR_High vs NLR_Low neutrophil RNA. (D) A heat map of significantly differentially expressed genes from NLR_High vs NLR_Low lymphocyte RNA.


Shakl 2. Neytrofillar va limfotsitlardan sezilarli darajada farqlangan genlar. (A) Neytrofillar (ko'k) va limfotsitlarda (to'q sariq) sezilarli darajada farqlangan genlar soni. (B) NLR_Yuqori (doiralar) va NLR_Past (kvadratlar) da neytrofillar (yashil va binafsha) va limfotsitlarda (qizil va ko'k) sezilarli darajada farqlangan genlarning asosiy komponent tahlil grafigi. (C) NLR_Yuqori va NLR_Past neytrofil RNK dan sezilarli darajada farqlangan genlarning issiqlik xaritasi. (D) NLR_Yuqori va NLR_Past limfotsitlar RNK dan sezilarli darajada farqlangan genlarning issiqlik xaritasi.

RNK-seq va statistik tahlil

RNK ekstraktsiyasi va ketma-ketligi uchun batafsil usullar qo'shimcha usullarda keltirilgan. O'qishlar ketma-ketligi sifat jihatidan baholandi va adapter TrimGalore yordamida kesildi! (Babraham instituti), FastQC va CutAdapt uchun o'rash skripti. Sifat nazoratidan o'tgan o'qishlar STAR aligner dasturi yordamida insonning GRCh38 genomiga moslashtirildi. Tegishli o'qishlar GRCh38 uchun GENCODE gen annotatsiyasidan foydalangan holda differentsial ifoda tahlili uchun Cufflinks 2.2.1 versiyasi yordamida qayta ishlandi va gen darajasidagi ifoda ma'lumotlari har bir million o'qish uchun har bir kilobaza transkripti bo'laklarida xabar qilindi.18 Muhim darajada differentsial ifodalangan genlar noto'g'ri yordamida aniqlandi. kashfiyot darajasi chegarasi P qiymati<.05, after the Benjamini-Hochberg correction for multiple testing. Normalized fold-change and P values for all expressed genes were then used as input for downstream analysis using iPathwayGuide (AdvaitaBio) and gene set enrichment analysis (GSEA) using GenePattern and MSigDB (Broad Institute). Additional figures including heat maps and scatterplots were generated in R and ClustVis.

Natijalar

Bemorning xususiyatlari

Oltita juft bemor namunalari 7 ta NLR_Yuqori va 9 NLR_past orasidan RNK yaxlitlik raqami (RIN) boʻyicha baholangan juftlikdagi RNKning eng yuqori sifati asosida tanlandi (1-jadval. ). 8 ta sog'lom donordan oltita nazorat ham tekshirildi. Tadqiqotga kiritilgan bemorlarda NLR_Yuqori uchun o'rtacha ± standart og'ish NLR_Past uchun 4,37 ± 0,66 ni tashkil etdi, 1,87 ± 0. 39 (P < .0001). Bemorlarning yoshining o'rtacha ± standart og'ishi NLR_Yuqori uchun 61,0 ± 17,0 yil va NLR_Past (P= ,68) uchun 64,5 ± 7,5 yil edi. 1 bemordan tashqari hamma aorta anevrizmasi kasalligiga ega, 9 nafari torakal/torakoabdominal va 2 nafari qorin bo'shlig'i edi. Qorin aortasi anevrizmasi bo'lgan ikkala bemor ham NLR_past guruhga kirdi. 12 bemordan 11 nafarida gipertoniya tarixi bor edi. Ikkala NLR_Yuqori yoki NLR_Past guruhlardagi 6 nafar bemordan to‘rttasida lipid anormalliklarining tibbiy tarixi bo‘lgan. NLR_Yuqori toifadagi to'rt nafar bemor va past darajadagi NLR_guruhidagi 3 nafar bemor ilgari chekuvchilar edi. NLR_Past guruhidagi bir bemor faol chekuvchi edi. NLR_Yuqori va 4NLR_past guruhlardagi beshta bemor statinlarni qabul qilgan. Ikkala guruhdagi faqat 3 nafar bemor diabetga chalingan. Har bir guruhdagi bitta bemorda SAPR tarixi va NLR_Past guruhdagi 2 bemorda periferik arteriya kasalligi bor edi.

Figure 3. The RNA-seq data in this investigation were used as an independent means to determine other cell contamination in the neutrophil and lymphocyte preparations. Only data from the neutrophils are shown. An EPIC analysis was performed to estimate the proportion of immune and cancer cells in bulk gene expression data. This analysis yielded the percentage of neutrophils, monocytes, B cells, CD4 T cells, CD8 T cells, natural killer (NK) cells, and other cells in the neutrophil preparation.


Shakl 3. Ushbu tadqiqotda RNK-seq ma'lumotlari neytrofil va limfotsit preparatlarida boshqa hujayra ifloslanishini aniqlash uchun mustaqil vosita sifatida ishlatilgan. Faqat neytrofillardan olingan ma'lumotlar ko'rsatilgan. Immunitet va saraton hujayralarining ommaviy gen ifodasi ma'lumotlaridagi ulushini baholash uchun EPIC tahlili o'tkazildi. Ushbu tahlil neytrofillar, monositlar, B hujayralari, CD4 T hujayralari, CD8 T hujayralari, tabiiy qotil (NK) hujayralari va neytrofil preparatidagi boshqa hujayralar foizini berdi.

Butun transkriptoma

Neytrofillar va limfotsitlar o'rtasidagi gen ekspression profillarini solishtirganda biz butun transkriptomda global farqlarni kuzatdik (1-rasm). Bu topilma ajablanarli emas edi, chunki avval hujayra turiga xos gen ifodasi boshqacha tarzda tavsiflangan.19 Neytrofillar bo'limida NLR_Yuqori, NLR_Past va NLR{{ bo'lgan bemorlarda 4}}Nazorat guruhlari, limfotsitlar bo'limida yuqori tartibga solinmagan ko'plab genlar bor edi va aksincha. Butun transkriptoma darajasida neytrofillar va limfotsitlar o'rtasidagi hujayraga xos farqlar NLR yoki bemor yoki nazoratdan qat'i nazar, aniq va dominant edi. Biroq, yaqinroq tekshirilganda, farqlar paydo bo'la boshladi. Asosiy komponentlarni tahlil qilish sxemasi shuni ko'rsatdiki, NLR_Neytrofillar yoki limfotsitlar nazorati ikkala hujayrada ham NLR_Yuqori va NLR_past bilan bir-biriga mos keladi (1-qo'shimcha rasm). Keyinchalik tekshiruvlar NLR_Yuqori va NLR_Yuqori va past guruhlar o'rtasidagi sezilarli darajada farqlangan genlarda qo'shimcha farqlarni topishga harakat qildi. NLR_Yuqori va NLR_Past guruhlarida neytrofillarda 900 (74,5%) sezilarli darajada farqlangan genlar kuzatilganligi kuzatildi (2A-rasm). Taqqoslash uchun, limfotsitlarda atigi 190 ta (15,7%) sezilarli darajada farqlangan genlar mavjud edi. NLR_Yuqori genlar va NLR_Neytrofillar va limfotsitlardagi past genlarning asosiy komponentli tahlil syujeti shuni ko'rsatdiki, NLR guruhi_Yuqori va NLR_NLRdagi past genlar neytrofillar 2 ta alohida sohaga ajratilgan, NLR_Yuqori va NLR_Past limfotsitlar genlari bir-biriga yopishgan (2B-rasm). Yana, butun transkriptoma ma'lumotlarida bo'lgani kabi, NLR{29}}Nazorat NRL_Yuqori va NLR_ham neytrofillar va limfotsitlarda sezilarli darajada farqlanuvchi genlar bilan bir-biriga mos keladi (2-rasm). NLR_Yuqori neytrofillar darajasida sezilarli darajada farqlangan genlarning aksariyati NLR_Pastdan pastga qarab tartibga solingan (2C-rasm). Neytrofillarnikiga qaraganda limfotsitlar koʻp boʻlgan NLR_da shunga oʻxshash, ammo ancha kam miqdordagi genlar regulyatsiya qilingan (2D-rasm). Ushbu ma'lumotlar NLR darajalari asosan neytrofillarda o'zgartirilgan gen ifodasi bilan bog'liqligini ko'rsatdi. Bundan tashqari, uni NLR kasalliklari guruhidagi bemorlar bilan solishtirish kerak edi_NLR-nazorati emas, balki past, chunki avvalgi guruh NLRdan aniq ajratilgan_Yuqori, ammo NLR_Nazorat emas ( 2B-rasm; qo'shimcha 2-rasm).

Desert ginseng—Improve immunity (2)

cistanche tubulosa - immunitet tizimini yaxshilaydi

Genlarning differentsial ifodasini va genlar to'plamini boyitishni o'rganishdan oldin, qo'shimcha tadqiqotlar neytrofil preparatida monositlar bilan ifloslanish darajasini tavsifladi. RNK-seq ma'lumotlaridan foydalanib, biz NLR_Yuqori va NLR_Past neytrofillar yoki limfotsit preparatlarida CD14, CD68, CD83 va CD163 monotsit belgilarining ifodasi sezilarli darajada farq qilmasligini kuzatdik. Neytrofil RNK-seq ma'lumotlarining EPIC tahlili shuni ko'rsatdiki, immun bo'lmagan hujayralar ("boshqa hujayralar") va CD4 T hujayralari neytrofil preparatlaridagi asosiy ifloslantiruvchi moddalardir (3-rasm). NLR{{10}}Kam CD4 T hujayralari va B hujayralaridan tashqari, boshqa ifloslantiruvchi hujayralarning hech biri NLR_Past neytrofillar va NLR_Yuqori neytrofillar orasida sezilarli darajada farq qilmagan. . Neytrofil preparatida EPIC tahlilida monotsitlarning ifloslanishi atigi 0,17% ± 0 edi.0NLR uchun 5%_Past va 0,1% ± 0,033%. NLR_Yuqori tayyorgarlik (P=.12). Bu qiymat RNK-seq ma'lumotlar tahlili va oqim sitometriyasi bilan aniqlanganda monotsitlar bilan ifloslanish darajasi pastroq bo'lganligini ko'rsatadi.

Figure 4. Scatter bubble plot of significantly expressed GO gene set categories for biologic processes between NLR_High and NLR_Low. The ratio of k: K on the abscissa is the number of genes that are significantly differentially expressed (k) compared with the total number of genes in the category (K). The ordinate is the significance of the enrichment expressed as the log (P value). (A) GO gene sets derived from neutrophil RNA-seq comparing NLR_High to NLR_Low. (B) GO gene sets derived from lymphocyte RNA-seq. Gene sets in the lower left corner of both plots are the least significant. Gene sets in the upper right corner of both plots are the most significant.

4-rasm. NLR_Yuqori va NLR_Past o'rtasidagi biologik jarayonlar uchun sezilarli darajada ifodalangan GO gen to'plami toifalarining tarqalish pufakchali sxemasi. Abscissa bo'yicha k: K nisbati - bu toifadagi (K) genlarning umumiy soniga nisbatan sezilarli darajada farqlanadigan (k) genlar soni. Ordinat - log (P qiymati) sifatida ifodalangan boyitishning ahamiyati. (A) NLR_Yuqori va NLR_Past bilan solishtiradigan neytrofil RNK-seqdan olingan GO gen to'plamlari. (B) limfotsitlar RNK-seqdan olingan GO gen to'plamlari. Ikkala uchastkaning pastki chap burchagidagi genlar to'plami eng kam ahamiyatga ega. Ikkala uchastkaning yuqori o'ng burchagidagi gen to'plamlari eng muhim hisoblanadi.

Figure 4 (continued)


4-rasm (davomi)

Differensial ravishda ifodalangan genlarning tabiatini o'rganish uchun biz NLR_Yuqori va NLR_Past o'rtasidagi sezilarli darajada farqlangan genlar to'plamidan foydalangan holda biologik jarayonlar uchun Gen Ontologiyasi (GO) toifalari bilan GSEA o'tkazdik. Natijalar tarqalish pufakchalari chizmalarida ko'rsatilgan (4-rasm). Gen to'plamlarini uchastkalarning har birining yuqori o'ng tomoniga ajratish (1) sezilarli darajada o'zgargan genlar to'plamidagi genlarning yuqori foizini va (2) genlar to'plamini boyitish uchun yuqori ahamiyatga ega ekanligini ko'rsatadi. Bizning namunamizda tarqaladigan pufakchalar neytrofillar va limfotsitlar uchun ham komplement, ham gumoral javob GO toifalarining boyitilganligini ko'rsatdi. Neytrofillarda komplement faollashuvining klassik yo'li uchun gen to'plamlari, oqsillarni faollashtirish kaskadini tartibga solish va aylanib yuruvchi immunoglobulin vositachiligida gumoral immunitet reaktsiyasi eng muhim bo'lib, genlar to'plami a'zolarining eng yuqori foizi sezilarli darajada o'zgargan (4A-rasm). Mustaqil ravishda, limfotsitlardagi bir xil gen to'plamlari ham sezilarli darajada o'zgargan genlarning yuqori nisbati va neytrofil tadqiqotlaridagi kabi muhimlik darajasiga ega ekanligi kuzatildi (4B-rasm).

Jadval 2. Neytrofillar va limfotsitlardagi immunologik gen to'plamlari

Table 2 lists the most significantly changed immunology gene sets in neutrophils (Table 2, Panel A) and lymphocytes (Table 2, Panel B). This study compared gene expression in neutrophils or lymphocytes between NLR_High samples and NLR_Low samples. Healthy NLR_Control samples were not compared as their expression levels overlapped with NLR_High and NLR_Low patient samples in both the whole transcriptome and significantly differentially expressed gene sets. In addition, the healthy NLR_Control samples were not matched in age, disease, and surgical condition (supplemental Figures 1 and 2). In both neutrophils (Table 2) and lymphocytes (Table 2), the data indicated that the expression of gene sets related to the immune system was highly significantly different when NLR_High was compared with NLR_Low. On RNA seq, each cell type has the same findings as the other cell type. In both panels, significance levels of the major gene sets maximized at P < 1E-24. These data were highly significant regardless of whether the neutrophil or lymphocyte was examined. To focus on the highly significant content area of this RNA-seq investigation, significantly differentially expressed immunoglobulin gene expression was examined. First, a principal component analysis plot of the neutrophil genes showed that for NLR_High vs NLR_Low, the significantly differentially expressed immunoglobulin genes were segregated into 2 groups (supplemental Figure 3A). Alternatively, the lymphocytes genes of NLR_High vs NLR_Low over lapped (supplemental Figure 3A). Next, a combined heat map of immune-related gene expression between NLR_High with NLR_Low was compared in neutrophils and lymphocytes (Figure 5). Overall, when the entire heat map is examined, there is obvious downregulation of the entire gene family of immunoglobulin genes in the neutrophil NLR_High group compared with that of NLR_Low. Most genes (69/156, 44%) were immunoglobulin related. Only 12 of 156 (7.7%) genes were complement-related: C1QA, C1QB, Serping1, C2, C2R, C4BPA, C3AR1, CR1, CR1L, CFH, CFD, and CD59. In the lymphocytes group, there was also downregulation of mostly immunoglobulin genes in the NLR_High category.


2-jadvalda neytrofillar (2-jadval, Panel A) va limfotsitlardagi (2-jadval, B paneli) eng sezilarli darajada o'zgargan immunologik gen to'plamlari keltirilgan. Ushbu tadqiqot NLR_Yuqori namunalar va NLR_Past namunalar o'rtasida neytrofillar yoki limfotsitlardagi gen ekspressiyasini taqqosladi. Sog'lom NLR_Nazorat namunalari solishtirilmadi, chunki ularning ifoda darajalari NLR_Yuqori va NLR_to'liq transkriptomda va sezilarli darajada farqlangan genlar to'plamidagi past bemor namunalari bilan bir-biriga mos tushdi. Bundan tashqari, sog'lom NLR_nazorat namunalari yosh, kasallik va jarrohlik holati bo'yicha mos kelmadi (qo'shimcha 1 va 2-rasmlar). Neytrofillar (2-jadval) va limfotsitlar (2-jadval) maʼlumotlari shuni koʻrsatdiki, NLR_Yuqori, NLR_Past bilan solishtirilganda, immun tizimi bilan bogʻliq genlar toʻplamining ifodasi sezilarli darajada farq qiladi. . RNK ketma-ketligida har bir hujayra turi boshqa hujayra turi bilan bir xil topilmalarga ega. Ikkala panelda ham asosiy genlar to‘plamining ahamiyatlilik darajasi P < 1E-24 da maksimal darajaga ko‘tarildi. Ushbu ma'lumotlar neytrofil yoki limfotsit tekshirilganidan qat'i nazar, juda muhim edi. Ushbu RNK-seq tadqiqotining juda muhim tarkib maydoniga e'tibor qaratish uchun sezilarli darajada farqlangan immunoglobulin gen ifodasi tekshirildi. Birinchidan, neytrofil genlarini tahlil qilishning asosiy syujeti shuni ko'rsatdiki, NLR_Yuqori va NLR_Past uchun sezilarli darajada farqlangan immunoglobulin genlari 2 guruhga ajratilgan (qo'shimcha 3A-rasm). Shu bilan bir qatorda, NLR_Yuqori va NLR_Yuqori limfotsitlar genlari oʻraladi (qoʻshimcha 3A-rasm). Keyinchalik, neytrofillar va limfotsitlarda NLR_Yuqori va NLR_Past o'rtasidagi immun bilan bog'liq gen ifodasining kombinatsiyalangan issiqlik xaritasi solishtirildi (5-rasm). Umuman olganda, butun issiqlik xaritasi tekshirilganda, neytrofil NLR_Yuqori guruhda NLR_Past bilan solishtirganda immunoglobulin genlarining butun gen oilasining pastga regulyatsiyasi aniq. Ko'pgina genlar (69/156, 44%) immunoglobulin bilan bog'liq edi. 156 gendan faqat 12 tasi (7,7%) komplement bilan bog'liq edi: C1QA, C1QB, Serping1, C2, C2R, C4BPA, C3AR1, CR1, CR1L, CFH, CFD va CD59. Limfotsitlar guruhida NLR_Yuqori toifadagi asosan immunoglobulin genlarining regulyatsiyasi ham kuzatildi.

Neytrofillar va limfotsitlardagi komplement gen to'plamlari 3-jadvalda batafsil ko'rsatilgan. Neytrofillar (3-jadval) va limfotsitlar (3-jadval)da komplement tizimi bilan bog'liq bo'lgan 3 ta gen to'plamidagi genlarning ifodasi sezilarli darajada farq qilgan (P < 1E{{). 5}}) NLR_Yuqori namunalar NLR_Past namunalar bilan solishtirilganda. Taqqoslash neytrofillar yoki limfotsitlardan olingan RNK o'rtasida bo'ladimi, bu kuzatuv bir xil edi. 3 ta gen to'plami komplement faollashuvi, komplement faollashuvining klassik yo'li va komplement faollashuvini tartibga solishni o'z ichiga oladi. Neytrofil genlarining asosiy komponentli tahlil syujeti yana NLR_Yuqori va NLR_Past uchun sezilarli darajada farqlangan komplement genlari 2 guruhga ajratilganligini ko'rsatdi (qo'shimcha 3B-rasm). Shu bilan bir qatorda, NLR ning limfotsit genlari_Yuqori va NLR_past bir-biriga mos kelishi (qo‘shimcha 3B-rasm).

Figure 5. Heat map of significantly differentially expressed genes in the immunoglobulin gene set in neutrophils (left) and lymphocytes (right). The genes listed on the right of each heat map are the members of the immunoglobulin


Shakl 5. Neytrofillarda (chapda) va limfotsitlarda (o'ngda) o'rnatilgan immunoglobulin genidagi sezilarli darajada farqlangan genlarning issiqlik xaritasi. Har bir issiqlik xaritasining o'ng tomonida sanab o'tilgan genlar immunoglobulinning a'zolaridir

NLR_Yuqori bilan NLR_Past bilan solishtiruvchi komplement bilan bog'liq genlar to'plamining neytrofillar va limfotsitlar ifodasining issiqlik xaritasi 6-rasmda ko'rsatilgan. Neytrofillarda juda ko'p sonli genlar regulyatsiya qilingan NLR_Aholisi koʻp. Ushbu genlar to'plamida, xuddi immunoglobulinlar to'plamiga o'xshash, ko'pchilik genlar (69/ 86, 80%) immunoglobulin bilan bog'liq edi. 86 dan faqat 12 tasi (14%) komplement komponenti va tartibga soluvchi genlar edi (C1QA, C1QB, SERPING1, C2, CR2, C4BPA, C3AR1, CR1, CR1L, CD59, CFH va CFD). Umuman olganda, limfotsitlar guruhida komplement genlarining ekspressiyasi kamroq bo'lgan va NLR_Yuqori guruhda immunoglobulin genlari biroz pasaygan. Immunoglobulin tizimlarining genlari bilan solishtirganda komplement tizimining genlari haqida ko'proq tushuncha mavjud bo'lganligi sababli, yuqori va past NLR bilan bog'liq maqsadli genlar uchun potentsial nomzod sifatida komplement tizimiga e'tibor qaratildi. NLR_Yuqori va NLR_Past bilan solishtiruvchi kompozit issiqlik xaritasi tayyorlandi, unda neytrofil va limfotsit namunalarida komplement tizimi va tegishli genlar ifodasi ko‘rsatilgan (7-rasm). Aksariyat hollarda limfotsit komplement tizimi uchun rezervuar hujayra tizimi emas. Aksariyat komplement genlari limfotsitlarda yuqori tartibga solinmaydi. Faqat C1S, CR2, C5, C8G, C5 va CFB NLR_Yuqori va NLR_Past limfotsitlar o'rtasidagi ifodadagi farq bilan mavjud edi (7-rasm). Limfotsitlardagi CD81 B hujayrali tetraspanindir. C1S va C8G ifodalari limfotsitlar NLR_Limfotsitlar NLRnikidan ancha yuqori_Past, plazma prekallikrein geni KLKB1ga o'xshaydi.

Aksincha, neytrofillarda NLR{0}}C1QA, C1QB, C1QC, SERPING1, C1R, C4BPA, C3 va C3AR1 komplement komponenti genlari hamda ularning CD59, CFB va CFI komplementini tartibga soluvchi (ingibitor) genlarining yuqori regulyatsiyasini ko‘rsatdi. . NLR_Yuqori_N bemorlarda faqat C2 va CFD genlari yuqori tartibga solingan. CD59 va C9 NLR_Yuqori_N bilan solishtirganda NLR_Past_N neytrofilida nisbatan yuqori tartibga solinadi. FGFR4 - o'sish omili retseptorlari. CFH bor edi, lekin neytrofil NLR_Yuqori yoki NLR_Past tomonidan ta'sirlanmagan ko'rinadi. U limfotsitlarda ko'proq ifodalanadi.

Desert ginseng—Improve immunity (12)

Cistanche erkaklar uchun foydalari-immun tizimini mustahkamlaydi

Cistanche Enhance Immunity mahsulotlarini ko'rish uchun shu yerni bosing

【Batafsil ma'lumot so'rang】 Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Munozara

Differensial leykotsitlar soni bo'yicha NLR keng tarqalgan bo'lib qo'llaniladigan oddiy marker bo'lib, keng ko'lamli kasalliklarda, jumladan, yurak-qon tomir kasalliklari, qattiq o'smalar va tizimli qizil yuguruk va tizimli skleroz kabi yallig'lanish kasalliklarida potentsial zararli natijalarni aniqlash uchun keng qo'llaniladi. Aterosklerotik CVD bilan og'rigan bemorlarda o'tkazgan retrospektiv tekshiruvlarimizda biz yuqori NLR bo'lgan bemorlarda aorta anevrizmasini elektiv ta'mirlashdan keyin kech o'lim darajasi yuqori ekanligini, profilaktik karotid endarterektomiyadan so'ng kech insult/o'lim darajasi yuqori ekanligini va amputatsiyadan keyin omon qolishning kamayganini kuzatdik. agar ularning NLR ko'tarilgan bo'lsa, femoral-popliteal revaskulyarizatsiya.14-16 Hozirgi tekshiruvlar yuqori NLR uchun mexanik asosni topish uchun boshlangan. limfoma, bir nechta qattiq o'smalar va tizimli qizil yuguruk va tizimli skleroz kabi yallig'lanish kasalliklari. Aterosklerotik CVD bilan og'rigan bemorlarda o'tkazilgan retrospektiv tekshiruvlarimizda biz yuqori NLR bo'lgan bemorlarda aorta anevrizmasini elektiv ta'mirlashdan keyin kechroq o'lim darajasi yuqori ekanligini, profilaktik karotid endarterektomiyadan so'ng kech insult/o'lim darajasi yuqori ekanligini va amputatsiyadan keyin omon qolishning pasayishini kuzatdik. Agar ularning NLR ko'tarilgan bo'lsa, femoral-popliteal revaskulyarizatsiya.14-16 Hozirgi tekshiruvlar yuqori NLR uchun mexanik asosni topish uchun boshlangan.

Jadval 3. Neytrofillar va limfotsitlardagi komplement gen to'plamlari

Table 3. Complement gene sets in neutrophils and lymphocytes


NLR ning CV natijalariga differensial ta'sir mexanizmi (mexanizmlari) bo'yicha xolis yondashuvni ishlab chiqish uchun biz bir xil bemorlarning ikkala neytrofillari va limfotsitlarida RNK-seqni o'tkazdik. Ushbu tadqiqot uchun aorta kasalligi bo'lgan barcha bemorlar istiqbolli ravishda to'plangan va natijalari bo'yicha NLR toifalariga guruhlangan. 2 ta hujayra turining har biridagi yakuniy 6 ta namuna jinsi, yoshi yoki oldingi tibbiy holatidan qat'i nazar, juftlashgan neytrofil va limfotsit namunalarining tayyorlangan RNKidagi RIN ning eng yuqori darajasi bo'yicha tanlangan. 1-jadvaldan ko'rinib turibdiki, NLR_Yuqori va NLR_past guruhlardagi bemorlar juda o'xshash va faqat NLR bilan ajralib turardi.

Ushbu tadqiqotda ishlatiladigan RNKning sifati RIN va to'plangan barcha bemor guruhlarida (yuqori NLR, past NLR va nazorat) neytrofillar va limfotsitlar o'rtasida gen ekspresyonining naqshini to'liq ajratish bilan ko'rsatilgan (1-rasm). Asosiy komponentlarni tahlil qilish sxemasi shuni ko'rsatadiki, NLR_Nazorat ma'lumotlari ushbu tadqiqotda ahamiyatsiz edi, chunki bemorlarning NLR ko'rsatkichlari NLR_Yuqori va NLR_Bemorlarning neytrofil va limfotsitlar populyatsiyasida past bo'lgan. . GSEA tahlili biologik jarayonlarning GO gen to'plamida qaysi genlar to'plami boyitilganligi haqida katta ma'lumot berdi va tarqalish qabariq grafigi buni log ahamiyatini genlarning umumiy soniga o'zgartirilgan genlar sonining nisbati bilan aniq ko'rsatib berdi. gen to'plamlarida. Ko'rib chiqilganda, o'zlarini butun ro'yxatdan ajratib turadigan genlar to'plami gumoral (immunoglobulin) immuniteti va komplement tizimidagilar edi (2 va 3-jadvallar) xolis kashfiyot yondashuvida nisbat va statistik ahamiyatga asoslangan.

Ko'p sonli gumoral immunitet immunoglobulin genlari bilan ishlash qiyin, chunki bu genlar orasidagi muhim farqlar yaxshi ma'lum emas. Shu bilan bir qatorda, komplement tizimi haqida ko'proq narsa ma'lum va immunoglobulin tomonidan faollashtirilgan klassik komplement tizimiga e'tibor immunoglobulinlar bilan bog'liq yallig'lanish va kasalliklar uchun taniqli maqsaddir. Bizning ma'lumotlarimiz shuni ko'rsatadiki, C1QA, C1QB, C1R, CR1, C1S, SERPING1, C2, C4BPA, C3 C3AR1, C8G, C9 va bir nechta tartibga soluvchi genlar (CD59, CFB CFI va CFH) neytrofillar bilan og'rigan bemorlarda klassik komplement komponenti genlari pasaytirilgan. yuqori NLR bilan (7-rasm). Ushbu topilmalar 3 sababga ko'ra hayratlanarli. Birinchidan, ishtirok etgan genlar asosan klassik komplement yo'lidan iborat. Ikkinchidan, yuqori NLR bilan og'rigan bemorlarda bu komplement genlari, ko'pincha, past NLR bemorlarga nisbatan pastga qarab tartibga solinadi. Nihoyat, NLR neytrofillarida koʻproq F12 ifodalanadi_NLRdagidan yuqori_Past namunalar. F12 protein mahsulotining fermentativ shakllari (XII [FXII] omili) komplement va neytrofillarning klassik yo'lini faollashtiradi.20 Aksincha, plazminogen geni va FXII faollashtiruvchisi bo'lgan PLG NLR doirasidagi bemorlardagi limfotsitlar va neytrofillarda pastga tushiriladi{ {21}}Yuqori, bu FXII faollashuvining o‘zi komplement faollashuvining regulyatori bo‘lishi mumkinligini ko‘rsatadi.

Bundan tashqari, klassik komplement tizimining tezlashtirilgan CVDda ishtirok etishi ko'rsatilgan. Komplement komponent 1q (C1q) komplement yo‘lining boshlang‘ich omili bo‘lib, u ham tug‘ma, ham orttirilgan immun tizimida muhim rol o‘ynaydi.21 C1q aterosklerozga ijobiy va salbiy ta’sir ko‘rsatadigan ikki tomonlama rolga ega ekanligi ko‘rsatilgan.22 Klassik komplement yo'li, C1q komplementdan mustaqil yo'l orqali makrofag molekulyar signalini tartibga solish, aterogen lipoproteinni qabul qilishni modulyatsiya qilish, apoptotik hujayralar vositachiligi va hujayra qoldiqlarini yo'q qilish orqali erta bosqichdagi aterosklerozda himoya roliga ega.23,24 Jia tomonidan yaqinda o'tkazilgan tadqiqot. va boshqalar23 zardobdagi C1q ning kamayishi SAPR bilan bog'liqligini ko'rsatadi. Guo va boshq24 tomonidan olib borilgan yana bir tadqiqot shuni ko'rsatadiki, C1q faolligi oshishi SAPR bilan bog'liq. Nihoyat, so'nggi tadqiqotlar shuni ko'rsatadiki, C1q pasaygan qandli diabet bilan og'rigan bemorlarning omon qolish muddati qisqargan.25 Bu ma'lumotlar shuni ko'rsatadiki, komplement tizimini tekshirish KVHning yallig'lanish vositachiligi patogenezini tushunishda muhim bo'lishi mumkin.

Figure 6. Heat map of significantly differentially expressed genes in the complement gene set in neutrophils (left) and lymphocytes (right). The genes listed on the right of each heat map are the members of the complement gene set. The RNA is from neutrophils or lymphocytes collected from patients with high (NLR_High) or low (NLR_Low) NLR. Six individual samples from NLR_High are compared with 6 individual samples from NLR_Low from both neutrophils and lymphocytes.

Shakl 6. Neytrofillarda (chapda) va limfotsitlarda (o'ngda) o'rnatilgan komplement genidagi sezilarli darajada farqlangan genlarning issiqlik xaritasi. Har bir issiqlik xaritasining o'ng tomonida sanab o'tilgan genlar komplement genlari to'plamining a'zolaridir. RNK yuqori (NLR_Yuqori) yoki past (NLR_Past) NLR bo'lgan bemorlardan to'plangan neytrofillar yoki limfotsitlardan olingan. NLR_Yuqori dan oltita alohida namunalar NLR dan 6 ta alohida namunalar bilan taqqoslanadi_Neytrofillar va limfotsitlardan past.

Figure 7. Composite heat map of complement and related genes from neutrophil or lymphocyte NLR_High or NLR_Low. In each category, the composite heat map was prepared from 6 individual RNA-seq samples from each cell type.


Shakl 7. Neytrofil yoki limfotsitdan olingan komplement va tegishli genlarning kompozit issiqlik xaritasi NLR_Yuqori yoki NLR_Past. Har bir toifada har bir hujayra turidan 6 ta individual RNK-seq namunalaridan kompozit issiqlik xaritasi tayyorlandi.

Recently, a retrospective investigation of the data from the CANTOS, JUPITER, SPIRE-1, SPIRE-2, and CIRT trials on 60 087 patients was conducted to determine whether NLR predicts major adverse CV events and is modified by anti-inflammatory therapy.26 NLR modestly correlated (ie, r 2 ≤ 0.26) with interleukin 6, C-reactive protein, and fibrinogen levels but minimally with lipids.25 In all 5 trials, NLR predicted incident CV events and death in patients with NLR >3.08.26 Lipidlarni pasaytirish NLRga ta'sir qilmagan bo'lsa-da, kanakinumab bilan yallig'lanishga qarshi terapiya, interleykin 1 inhibitori NLRni pasaytirdi (P <.0001).26 Bu ma'lumotlar NLR lipidlar va yurak xurujidan mustaqil ravishda yurak xuruji uchun marker bo'lishi mumkinligini ko'rsatadi. statinlarning ta'siri. Ko'p istiqbolli randomizatsiyalangan sinovlarning ushbu maxsus tahlili NLR KVHda o'lim uchun mustaqil xavf omili bo'lishi mumkinligini ko'rsatadi.

Ushbu tadqiqotda ba'zi cheklovlar mavjud. Bizning neytrofil preparatlarimiz oqim sitometriyasi orqali 4% limfotsit va 2% monosit bilan ifloslangan. Neytrofillar immunoglobulinni sintez qila olmaganligi sababli, neytrofil immunoglobin genidagi o'zgarishlar B hujayralarining ifloslanishidan kelib chiqishi mumkin. EPIC tahlilida NLR-Low namunalarining B-hujayra bilan ifloslanishi sezilarli darajada oshdi. Bu kuzatish shuni ko'rsatadiki, NLR_Past neytrofil namunalarida immunoglobulin genlari darajasining oshishi B-hujayralarining ifloslanishidan kelib chiqishi mumkin. Shunday qilib, NLR_Yuqori namunalardagi immunoglobulin genlarining kamayishi NLR_Yuqori namunalardagi B hujayralarining ko'payishi bilan bog'liq bo'lishi mumkin_NLR_Yuqori namunalardagi immunoglobulin genlari darajasining kamayishi shart emas. Xuddi shunday, neytrofillar komplement ishlab chiqaruvchi hujayralar ekanligi ma'lum emas. Monotsitlar bilan ikki foizli ifloslanish komplement genlarining manbai bo'lishi mumkin. Biroq, RNK ketma-ketligi ma'lumotlaridan foydalangan holda, biz NLR_Past va NLR_Yuqori o'rtasida neytrofil preparatlarining monositlar bilan ifloslanishida sezilarli farq yo'qligini kuzatdik. Bundan tashqari, RNK-seq ma'lumotlarining EPIC tahlilini o'tkazish monositlarning ifloslanishini ko'rsatadi.<0.1% (<1:1000) of the neutrophil preparations, indicating that the RNA-seq was unlikely influenced by contaminating monocytes (Figure 3). The contaminating B cells in the NLR_Low samples do not influence the complement data observed. Finally, even now, it is not known that the changes we observed in complement and immunoglobulin genes are specific to vascular surgery patients with high NLR or older patients in general. NLR and genetic studies need to be performed on healthy age- and sex-matched patients without CVD.

cistanche benefits for men-strengthen immune system

Cistanche erkaklar uchun foydalari-immun tizimini mustahkamlaydi

Xulosa qilib aytganda, ushbu tadqiqotning asosiy xulosasi shundaki, yuqori NLR holatlarida ko'plab komplement komponentlar genlari va ularning ba'zi regulyatorlari neytrofillarda pastga regulyatsiya qilingan. Aniqlangan pastga regulyatsiya qilingan komplement genlarining umumiy ma'nosi va faollashuv holati aniq emas. Komplement genlari to'plami sezilarli darajada kamayganligi sababli, biz NLR_Jarrohlikdan keyingi omon qolish darajasi yuqori va qisqargan shaxslar komplement tizimlari tomonidan ta'minlangan asosiy CV himoya mexanizmlarini yo'qotishini taxmin qilamiz. Ushbu baholash ushbu natija uchun asosiy mexanizm(lar) uchun klinik tekshiruvlarda istiqbolli ravishda tekshirilishi kerak.

Ma'lumotnomalar

1. Ross R. Ateroskleroz – yallig'lanish kasalligi. N Engl J Med. 1999;340(2):115-126.

2. Getz GS. Tematik tahlil seriyasi: immun tizimi va aterogenez. Aterogenezda immun funktsiyasi. J Lipid Res. 2005;46(1):1-10.

3. Hansson GK, Hermansson A. Aterosklerozdagi immunitet tizimi. Nat immunol. 2011;12(3):204-212.

4. Daffy BK, Gurm HS, Rajagopal V, Gupta R, Ellis SG, Bhatt DL. Teri orqali koronar aralashuvdan keyin uzoq muddatli o'limni bashorat qilishda ko'tarilgan neytrofil va limfotsitlar nisbatining foydaliligi. Men J Cardiol. 2006;97(7):993-996.

5. Tamhane UU, Aneja S, Montgomery D, Rogers EK, Eagle KA, Gurm HS. O'tkir koronar sindromli bemorlarda neytrofil va limfotsitlar nisbati va natijalari o'rtasidagi bog'liqlik. Men J Cardiol. 2008;102(6):653-657.

6. Gibson PH, Croal BL, Cuthbertson BH va boshqalar. Operatsiyadan oldingi neytrofil-limfotsitlar nisbati va koronar arteriya bypass payvandlash natijasi. Am Heart J. 2007;154(5):995-1002.

7. Fici F, Celik T, Balta S va boshqalar. Yangi tashxis qo'yilgan asosiy gipertenziya bilan og'rigan bemorlarda nebivolol va metoprololning qizil qon hujayralarining tarqalish kengligi va neytrofil / limfotsitlar nisbatiga qiyosiy ta'siri. J Cardiovasc Pharmacol. 2013;62(4):388-393.

8. Karaman M, Balta S, Ay SA va boshqalar. Yangi tashxis qo'yilgan gipertenziya bilan og'rigan bemorlarda valsartan va amlodipinning vWf darajasiga va N / L nisbatiga qiyosiy ta'siri. Clin Exp Gipertenziya. 2013;35(7):516-522.

9. Uthamalingam S, Patvardhan EA, Subramanian S va boshqalar. O'tkir dekompensatsiyalangan yurak etishmovchiligida uzoq muddatli natijalarni bashorat qilishda neytrofil va limfotsitlar nisbatining foydasi. Men J Cardiol. 2011;107(3):433-438.

10. Bhat TM, Afari ME, Garsiya LA. Periferik qon tomir kasalliklarida neytrofil limfotsitlar nisbati: sharh. Mutaxassis Rev Cardiovasc Ther. 2016;14(7):871-875.

11. Bhutta H, Agha R, Vong J, Tang TY, Uilson YG, Uolsh SR. Neytrofil-limfotsitlar nisbati katta qon tomir jarrohlik operatsiyasidan keyin o'rta muddatli omon qolishni bashorat qiladi: kesma tadqiqot. Vasc Endovasc Surg. 2011;45(3):227-231.

12. Appleton ND, Bailey DM, Morris-Stiff G, Lyuis MH. Neytrofillar va limfotsitlar nisbati qorin bo'shlig'i aortasi anevrizmalarini ochiq ixtiyoriy tuzatishdan keyin operatsiyadan keyingi o'limni taxmin qiladi. Vasc Endovasc Surg. 2014;48(4):311-316.

13. Vanna J, Smit JB, Kruse RL, Vogel TR. Neytrofil-limfotsitlar nisbati kasallikning og'irligini va pastki ekstremal jarayonlardan keyin oqibatlarini taxmin qiladi. J Vask Surg. 2020;72(2):622-631.

14. King AH, Schmaier AH, Harth KC va boshqalar. Neytrofil-limfotsitlar nisbati ortishi endovaskulyar anevrizmani ixtiyoriy tiklashdan keyin o'limni bashorat qiladi. J Vask Surg. 2020;72(1):129-137.

15. King AH, Kim AH, Kvan S va boshqalar. Neytrofil-limfotsitlar nisbatining oshishi asemptomatik bemorlarda karotid endarterektomiyadan keyin yomon natijalar bilan bog'liq. J Stroke Cerebrovasc Dis. 2021;30(12):106120.

16. King AH, Kwan S, Schmaier AH va boshqalar. Neytrofil-limfotsitlar nisbatining oshishi femoropopliteal perkutan revaskulyarizatsiyadan keyin amputatsiyasiz omon qolishning pasayishi bilan bog'liq. Int Angiol. 2021;40(5):442-449.

17. Racle J, de Jonge K, Baumgaertner P, Speiser DE, Gfeller D. Bir vaqtning o'zida saraton va immun hujayra turlarini ommaviy o'simta genini ifodalash ma'lumotlaridan sanab o'tish. Elife. 2017;6:e26476.

18. Trapnell C, Roberts A, Goff L va boshqalar. TopHat va Cufflinks bilan RNK-seq tajribalarining differensial gen va transkript ifodasi tahlili. Nat Protoc. 2012;7(3):562-578.

19. Palmer C, Diehn M, Alizadeh AA, Brown PO. Inson periferik qonidagi leykotsitlarning hujayra tipidagi o'ziga xos gen ekspresyon profili. BMC genomikasi. 2006;7:115.

20. Stavrou EX, Fang C, Bane KL va boshqalar. XII omil va uPAR yaraning bitishiga ta'sir qilish uchun neytrofil funktsiyalarini kuchaytiradi. J Clin Invest. 2018;128(3): 944-959.

21. Dunkelberger JR, Song WC. Komplement va uning tug'ma va adaptiv immun javoblardagi roli. Hujayra Res. 2010;20(1):34-50.

22. Speidl WS, Kastl SP, Huber K, Wojta J. Aterosklerozda komplement: do'st yoki dushman? J Thromb Haemost. 2011;9(3):428-440.

23. Jia Y, Ven V, Yang Y va boshqalar. Koroner arter kasalligini bashorat qilishda C1q va hsCRP kombinatsiyalangan zardobining klinik roli. Clin Biochem. 2021;93:50-58.

24. Guo S, Mao X, Li X, Ouyang H, Gao Y, Ming L. Sarum to'ldiruvchisi C1q faoliyati obstruktiv koronar arteriya kasalligi bilan bog'liq. Front Cardiovasc Med. 2021;8:618173.

25. Chavusho'g'li E, Kassotis JT, Anvar A va boshqalar. Koronar angiografiyaga yuborilgan qandli diabet bilan og'rigan erkaklarda 10-yillik o'limni bashorat qilish uchun C1q komplementining foydaliligi. Men J Cardiol. 2018;122(1):33-38.

26. Adamstein NH, MacFadyen JG, Rose LM va boshqalar. Neytrofil-limfotsitlar nisbati va sodir bo'lgan aterosklerotik hodisalar: beshta zamonaviy randomizatsiyalangan sinovdan olingan tahlillar. Eur Heart J. 2021;42(9):896-903.

Sizga ham yoqishi mumkin