Clostridioides Difficile ning S-qatlam oqsillari (SLP) yuzasiga xos immun javoblari

Annotatsiya:

Clostridioides difficile, nozokomial patogen, antibiotiklar bilan bog'liq diareyani keltirib chiqaradigan yangi paydo bo'lgan ichak patobionidir. C. difficile infektsiyasi ichakning kolonizatsiyasi va ichak epitelial to'sig'ining buzilishini o'z ichiga oladi, bu yallig'lanish / immunitet reaktsiyalarining paydo bo'lishiga olib keladi. Ikki asosiy ekzotoksin, TcdA va TcdB ifodasi C. difficile patogenligining asosiy sababidir. Bakterial hujayra devori oqsillari yoki SlpA kabi sirt S-qatlam oqsillarining (SLP) xost epitelial hujayralari bilan biriktirilishi virulentlik uchun juda muhimdir. Toksinlar bo'lishdan tashqari, bu sirt komponentlari yuqori immunogen xususiyatga ega ekanligi ko'rsatilgan. Oxirgi tadqiqotlar shuni ko'rsatadiki, C. difficile SLP bakteriyalarning ichak epiteliya hujayralariga yopishishida, qattiq birikmalarning buzilishida va xost hujayralarining immun reaktsiyasini modulyatsiya qilishda muhim rol o'ynaydi. Bu oqsillar vaktsinalar va yangi terapevtik vositalar uchun yangi maqsad bo'lib xizmat qilishi mumkin. Ushbu sharhda SLPlarning xost immunitetini qo'zg'atishdagi immunologik roli va ulardan C. difficile infektsiyasiga qarshi kurashish uchun vaktsinalar va yangi terapevtik vositalarni ishlab chiqishda foydalanish haqidagi hozirgi tushunchamiz umumlashtiriladi.

cistanche tubulosa - immunitet tizimini yaxshilaydi

Cistanche Enhance Immunity mahsulotlarini ko'rish uchun shu yerni bosing

【Batafsil ma'lumot so'rang】 Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Kalit so‘zlar:

antibiotik bilan bog'liq diareya; hujayra devori oqsillari; terapevtik vositalar; S-qatlam oqsillari; vaktsina

1.Kirish

Clostridioides difficile, toksin ishlab chiqaruvchi anaerob bakteriya, ko'plab omillar, jumladan, antibiotiklardan foydalanish, genetik, ekspozitsiya, mikrobial, sog'lom mikrobiomada buzilishlar natijasida kasallik belgilarini keltirib chiqaradigan ichakdagi muhim opportunistik va nozokomial patogen. va boshqa xost omillari [1]. C. difficile ning tanlanishi va tarqalishi psevdomembranoz kolitning hayot uchun xavfli holatini keltirib chiqaradi [2,3]. Kasalliklarni nazorat qilish va oldini olish markazlarining 2019 yilgi hisobotidagi so‘nggi hisob-kitoblarga ko‘ra, C. difficile 2017 yilda 223 900 ta infektsiyaga va 12 800 kishining o‘limiga sabab bo‘lgan, faqatgina AQShda 1 milliard dollar zarar ko‘rgan [4]. C. difficile infektsiyasining (CDI) birinchi epizodini davolash antibiotiklar bilan amalga oshiriladi. Biroq, kasallikning qaytalanish darajasi yuqori bo'ladi - dastlabki CDIni birinchi davolashdan keyin 20-30% va birinchi takrorlanishdan keyin 50% dan ko'proq. Shuning uchun butun dunyo bo'ylab CDI bilan kurashish uchun shoshilinch terapevtik aralashuv zarur. C. difficile patogenezining asosiy molekulyar omillaridan biri C. difficile 19.6-kb patogenlik lokusu (PaLoc) ichida joylashgan genlar tomonidan kodlangan ikkita asosiy toksin, TcdA va TcdB ning ifodalanishi va sekretsiyasidir. genom [6]. Toksin ishlab chiqarishni tartibga solish va toksin ishlab chiqarishda ishtirok etadigan turli transkripsiya omillari Chandra va boshqalar tomonidan keng ko'rib chiqilgan. boshqa joyda [6].

CDI patogenezi vegetativ hujayralarga C. difficile sporasini yutish/o'stirish bilan boshlanadi, ular ichakda o'sadi va u erda ular ko'payadi va ichak shilliq qavatini kolonizatsiya qiladi [1,6]. Ichak shilliq qavati to'sig'i (IMB) patobiontlarga qarshi tug'ma himoyaning birinchi qatoridir. Xost IMB har xil turdagi epiteliya hujayralaridan iborat bo'lib, ular bir-biri bilan qattiq birikmalar bilan mustahkam bog'langan va goblet hujayralari tomonidan chiqariladigan qalin himoya shilliq qavati bilan qoplangan [1]. IMBning buzilishi C. difficile ning epiteliya hujayralari yuzasiga yopishishiga imkon beradi, bu erda uning virulentlik omillarini ishlab chiqish C difficile patogenligining shikastlanishiga va namoyon bo'lishiga olib keladi [1,6]. Ko'pgina gramm-musbat va manfiy turlardagi bakterial hujayra devori, jumladan C. difficile, asosan, ko'p miqdordagi molekulalardan tashkil topgan sirt-qatlam oqsillari (S-qatlam oqsillari yoki SLP) deb ataladigan ko'p miqdorda oqsil molekulalarining yuzasiga ta'sir qiladigan qatlam bilan bog'liq. SlpA oqsili past va yuqori molekulyar og'irlikdagi domendan iborat bo'lib, ular elektron mikroskopda ko'rinib turganidek, parakristalin muntazam ikki o'lchovli massiv sifatida joylashtirilgan [7]. SLP qatlamining boshqa hujayra devori oqsili (Cwp) komponentlari kamroq ko'p va yomon xarakterlanadi, ammo CD patogenligida muhim rol o'ynaydi. So'nggi yillarda SLP bo'yicha tadqiqotlar tobora ko'proq e'tiborga sazovor bo'ldi, chunki bu oqsillar sirtga yopishishda, Tollga o'xshash retseptorlarni faollashtirishda, sitokin ishlab chiqarishni induktsiya qilishda va yallig'lanish faollashuvida asosiy rol o'ynashi ko'rsatilgan. bakteriyaning o'sishi va omon qolishidagi roli [7-9].

Ushbu sharhda biz C. difficile SLP haqida so'nggi ma'lumotlar asosida asosiy SlpA komponentlari va boshqa kamroq tarqalgan Cwps uchun xostning immun javobini muhokama qilamiz va ularning CDI patogenezida yangi vaktsina va terapevtik maqsad sifatida foydalanish potentsialini ta'kidlaymiz.

cistanche tubulosa - immunitet tizimini yaxshilaydi

2. CDI ga qarshi tug'ma immun javoblar

Hayvon modellarida kolonizatsiya qilinganda toksik bo'lmagan C. difficile (NTCD) shtammlari C. difficile ning patogen shtammlaridan himoya qilishini ko'rsatdi. 1980-yillarning boshida Uilson va Sheagren antibiotik sefoksitin bilan sterilizatsiya qilingandan so'ng NTCD shtammi bilan kolonizatsiyalangan hamsterlar toksikogen C. difficile (TCD) shtammi bilan kurashganda himoyalanganligini xabar qilishdi [10]. Biroq, C. perfringens, C. bifermentans, C. beijerincki, C. sporogenes va issiqlik bilan o'ldirilgan toksik bo'lmagan C. difficile NTCD shtammi kabi boshqa turlar bilan davolash CDI dan himoya qila olmadi. Bundan tashqari, kolonizatsiya qiluvchi NTCD sinovdan oldin vankomitsin bilan davolash yordamida sterilizatsiya qilinganida himoya yo'qolgan edi [11]. Ushbu topilmalar rag'batlantirgan holda, NTCD-M1 shtammi sporalari takroriy CDI (rCDI) bilan og'rigan cheklangan miqdordagi klinik bemorlarda sezilarli muvaffaqiyatga erishgan (taxminan 50%) [12]. Hozirgi vaqtda CDI davolash imkoniyatlari cheklangan va asosan vankomitsin, fidaksomisin va metronidazol kabi antibiotiklardan foydalanishga bog'liq [13,14]. Antibiotiklarni haddan tashqari iste'mol qilish sog'lom mikrobiomaning disbiyoziga olib keladi va keyinchalik qaytalanishi mumkin bo'lgan C. difficile kabi patobiontlarni tanlashga yordam beradi [1,15]. Ushbu qiyinchiliklarni samarali tarzda chetlab o'tish uchun muqobil davolash usullariga zudlik bilan e'tibor berish kerak. Ushbu davolash usullaridan ba'zilari TcdB ga qarshi monoklonal antikorlar yordamida C. difficile toksinlarini zararsizlantirishni o'z ichiga oladi, masalan, bezlotoksumab infuzioni ichak epiteliysining toksin vositachiligida zararlanishini oldini oladi [16]. Yana bir qiziqarli usul - bu yaqin oila a'zolari orasida sog'lom donordan najas mikrobiota transplantatsiyasi (FMT) yordamida sog'lom mikrobiomani tiklash. FMT, 90% gacha muvaffaqiyat ko'rsatkichlari bilan takroriy CDIga qarshi istiqbolli natijalarni ko'rsatdi [17,18]. Afsuski, ushbu tadqiqotlar ushbu bemorlarni himoya qilishda xost immun javobining rolini ko'rib chiqmadi. Shu sababli, jonli NTCD toksigenik TCDga qarshi kuchli immunitet reaktsiyasini keltirib chiqaradigan ba'zi antijenler/hujayra devori komponentlarini chiqaradi, deb bahslashish mumkin. Xuddi shunday, FMT himoyasi ham yomon belgilangan. Shuning uchun, FMT kiritilishi xost reaktsiyalarini qanday keltirib chiqarishini tushunish asosiy antijenlarni aniqlashda yordam berishi mumkin, bu esa o'z navbatida immun javobni yaxshiroq tushunishga va CDI ga qarshi yangi vaktsinalarni ishlab chiqishga yordam beradi.

Ichakda xostning tug'ma immun tizimi bosqinchi patogenga qarshi birinchi himoya chizig'i bo'lib, u kuchli adaptiv immun javobini shakllantirish va o'rnatishda hal qiluvchi rol o'ynaydi [1]. Tug'ma javob asosan uch qismdan iborat: (i) ichak epiteliysi va shilliq qavati (jismoniy to'siq), (ii) epiteliya hujayralarining, Panet hujayralarining va ichak mikrobiotasining ayrim a'zolarining (kimyoviy) chiqarish mahsuloti bo'lgan mikroblarga qarshi peptidlar. to'siq) va (iii) neytrofillar, eozinofillar, makrofaglar, tug'ma limfoid hujayralar (ILC) va dendritik hujayralar (DC) kabi tug'ma immunitet hujayralarini jalb qilish orqali hujayrali javoblar, ular bosqinchi yo'l bilan kurashish uchun bir nechta tug'ma signalizatsiya yo'llari tomonidan boshqariladi. 1]. Xost hujayralar o'z yuzasida patogen bilan bog'liq molekulyar naqshlar (PAMPs) deb ataladigan mikroblarda saqlangan ma'lum bakterial belgilarni taniydigan TLRlar kabi naqshni aniqlash retseptorlarini (PRR) egallaydi. Ushbu PRRlar, shuningdek, Toll-like retseptorlari (TLR) sifatida ham tanilgan. Ushbu xavfli signallarni (PAMP) TLRlar tan olgandan so'ng, mezbon hujayra immun javobini ishga tushiradi. Shu munosabat bilan, Toll-like Receptor 4 (TLR4) C. difficile xavfli signallarini tan olishi ko'rsatilgan, bu mezbonning yallig'lanish reaktsiyasini boshlashda ishtirok etadi. Shu nuqtai nazardan, C. difficile ning SLPlari xostning TLR-4 bilan, C. difficile flagella esa TLR5 orqali oʻzaro taʼsir qilishi koʻrsatilgan [19,20].

Cistanche erkaklar uchun foydalari-immun tizimini mustahkamlaydi

3. C. difficiledagi S qatlamli oqsillar (SLP).

Soʻnggi oʻn yillikda C. difficile ning sirt qatlami (S-qatlam) oqsillariga katta eʼtibor berildi. SLPlar birinchi marta Kawata va boshqalar tomonidan aniqlangan. 1984 yilda va umumiy hujayra massasining taxminan 15% ni tashkil qiladi [21,22]. SLP ko'p turli xil prokaryotik turlarda uchraydi. SLP larning ko'pchiligi hujayralarning eng tashqi yuzasida ikki o'lchovli parakristal massivda bitta oqsil sifatida joylashgan. C. difficile da S-qatlami asosan geterodimerik SlpA oqsillaridan iborat. SlpA - bitta slpA geni bilan kodlangan yuqori molekulyar og'irlikdagi (HMW) oqsil va past molekulyar og'irlikdagi (LMW) oqsildan tashkil topgan heterodimer; LMW SLP ochiq yuqori qatlamni, HMW SLP esa pastki qatlamni hosil qiladi. LMW SLP C. difficileda noyobdir. C. difficile 630 shtammida slpA lokusu 36,6 kb mintaqa bo'lib, 11 slpA paralogni o'z ichiga oladi. Bundan tashqari, genom bo'ylab tarqalgan qo'shimcha 17 paralog mavjud [23,24]. Ushbu paralog genlari endi klostridial hujayra devori oqsillari (CwpX) deb nomlanadi, bu erda X aniqlangan paralog raqamini bildiradi (X=1–29) va 1-jadvalda tasvirlangan. Biroq, SlpA, Cwp66, Cwp84 va CwpV nomlari ushbu yangi nomlash konventsiyasi qabul qilinishidan oldin berilgan [23]. Barcha Cwps N-terminal signal peptidini va HMW SLP ga sezilarli o'xshashliklarga ega bo'lgan uchta taxminiy hujayra devori bog'lovchi domenini o'z ichiga olgan tipik oqsillardir [25,26]. Turli C. difficile shtammlari slpA lokusuda o'zgaruvchanlikni ko'rsatdi va taxminan 12 xil S-qatlamli kassetalar turi hujjatlashtirilgan. Qolgan 28 Cwps S-qatlamining ~5-20% ni tashkil etuvchi polimerlashtirilgan parakristal qatlamga biriktirilgan qo'shimcha komponentlar sifatida ishlaydi [7].

Jadval 1. Clostridium difficile 630 genomida topilgan 29 kubok genlarining taxminiy funktsiyalari.

1-jadval. Davomi.

4. Hujayra devori oqsillarining ekspressiyasi va deformatsiyalari

C. difficile 630 shtammida taxminan to'qqizta Cwps kodlovchi genlar ifodalanganligi xabar qilingan [25]. Cwp2, cwp84, cwp6, cwp12, cwpV, cwp24 va cwp25 genlari normal o'sish sharoitida [44] hujayra yuzasida ifodalangan bo'lsa-da, cwp66 va cwp5 genlari ifodalangan, ammo hujayra yuzasi ekstraktlarida topilmagan. Alohida tadqiqotda Biazzo va boshqalar. C. difficile genomi bo'ylab tarqalgan chashkalarni tahlil qildi. Ular cwp13, cwpV, cwp16, cwp18, cwp19, cwp20, cwp22, cwp24 va cwp25 genlari ifodalanganligini va yaxshi saqlangan ketma-ketlikka ega ekanligini, cwp17, cwp26, cwp27 va cwp29 genlari orasida sezilarli o'zgarishlarga ega ekanligini kuzatdilar. ribotiplar va kamroq saqlanib qolgan [45]. Ko'pgina slpA lokusu genlari shtammlar, ayniqsa sirt ta'sirlangan hududlar o'rtasida sezilarli o'zgarishlarni ko'rsatadi. Masalan, slpA, cwp66, secA2 va cwp2 slpA lokusuda yuqori o'zgarishlarga ega ekanligi ko'rsatilgan (bu 10-kb kassetani tashkil qiladi); Hozirgacha turli genotiplar orasidagi homolog rekombinatsiya natijasida ushbu kassetaning 12 ta divergent varianti topilgan [46]. Karjalainen va boshqalarga ko'ra, cwp66 shtammlar orasida atigi 33% identifikatsiyani ko'rsatadi [26]. cwp2 varianti slpA lokusuda 23,8 kb prognoz qilingan S-qatlam glikozillanish gen klasteri bilan almashtirildi [46]. SlpA C. difficile hujayra sirt ekstraktlarida topilgan eng ko'p SLP bo'lib, C. difficile SLP ning asosiy tarkibiy qismidir. Yetuk oqsil sekretsiyasidan keyin HMW va LMW oqsili shakllariga Cwp84 proteazasi ta'sirida parchalanib, heterodimerik kompleks H/L kompleksini hosil qiladi, u S-qatlamini hosil qilish uchun polimerlanadi [47] (1-rasm). C. difficile 630∆ermdagi cwp84 genining inaktivatsiyasi natijasida koloniya morfologiyasi o'zgargan, faqat pishmagan bir zanjirli SlpA dan iborat S-qatlami paydo bo'ldi, bu esa Cwp84 ning etuk S-qatlamining shakllanishidagi muhim rolidan dalolat beradi [32]. slpA lokusuda secA2 genining mavjudligi SlpA va boshqa Cwps ni sitoplazmatik membrana orqali tashish uchun muhimdir [48].

Shakl 1. C. difficile ning SLPlari immunitet hujayralarining yopishishi va faollashishiga vositachilik qiladi. Nascent SlpA peptidi Cwp84 proteazasi tomonidan hujayra devorining SLP qatlamining etuk SlpA kompleksini tashkil etuvchi LMW va HMW subunitiga ajraladi [31-33]. SLPlar TLR4 orqali yopishqoqlikka vositachilik qiladi, ichak epiteliya hujayralarining qattiq birikmasini buzadi va dendritik hujayralar/makrofaglarni yanada faollashtiradi, bu esa o'z navbatida Th1/Th2 induksiyasiga va gumoral javobga olib keladigan turli sitokinlar va kimokinlarni ishlab chiqaradi [9,27]. Interleykin (IL), Dendritik hujayralar (DC), Past molekulyar og'irlik (LMW), Yuqori molekulyar og'irlik (HMW), Toll-o'xshash retseptor 4 (TLR4).

5. S-qatlam oqsillarining vazifalari

SLPlar C. difficile biologiyasida turli funktsiyalarda ishtirok etadi (1-jadvalga qarang), masalan, hujayra yaxlitligi, tashish, teshiklar va langarlarni shakllantirish, degradatsiya, xost hujayralarining yopishishi/invaziyasi, immun tizimidan qochish va raqobatdosh mikroorganizmlardan himoya qilish [22] . Pechineet boshq. Clostridium difficile bilan bog'liq kasallik (CDAD) bilan kasallangan bemorlarning zardobida Cwp66 antijenining N-terminal va C-terminal domenlariga qarshi antikorlar aniqlangan [49]. Boshqa bir tadqiqotda, Rayt va boshqalar. 2D-PAGE yordamida Cwps ni ajratdi va C. difficile ribotype 017 shtammi bilan kasallangan bemorlarning sarumlari bilan reaksiyaga kirishgan bir nechta Cwps (SlpA, Cwp2, Cwp5, Cwp19) aniqladi [50] LP ning kuchli immun javobini keltirib chiqaradi. Yaqinda Kirk va boshqalar. S-qatlami yo'q va bakteriotsinga sezgir bo'lmagan ikkita C. difficile shtammlarini aniqladilar, ular teshiklarni hosil qiladi va raqobatdosh bakteriya hujayralarini depolarizatsiya qiladi. Biroq, bu C. difficile shtammlari lizozim va mikroblarga qarshi peptid LL-37 ga sezilarli darajada yuqori sezuvchanlikni ko'rsatdi va infektsiyaning hamster modelida CDI kasallik belgilarini keltirib chiqarmadi [51]. Yaqinda o'tkazilgan tadqiqot uchta toksikogen shtammdan (RT126, RT001, RT084) ajratilgan SlpA ning zich birikma (TJ) oqsillari ekspressiyasiga va odamning yo'g'on ichak karsinomasi hujayra chizig'ida yallig'lanishga qarshi sitokinlarning induksiyasiga ta'sirini o'rgandi-29 . SlpA bilan davolash klaudinlar oilasi va JAM-A qattiq birikma oqsillarining ifoda darajasini sezilarli darajada kamaytirdi (1-rasm) [9]. Bundan tashqari, SlpA proteini TLR-4 ifoda darajasini oshirdi va TNF-, IL-1 va IL-8 sekretsiyasini qo'zg'atdi. Ushbu natijalar SlpA oqsili bilan bog'liq patogenez va ichakdagi yallig'lanish reaktsiyalarini ko'rsatadi [9]. Shu sababli, SLP larning C. difficile patogenligi va immun javoblari uchun zarur ekanligini ta'kidlash o'rinli.

cistanche tubulosa - immunitet tizimini yaxshilaydi

6. SLPlarga immun javobi

So'nggi tadqiqotlar SlpA ning nafaqat bakteriyalarning omon qolishi va o'sishida, balki xostning immun reaktsiyasini shakllantirishdagi muhim rolini ko'rsatdi. Immunoproteomikaga asoslangan yondashuvlar C. difficile 017 ribotipi bilan kasallangan olti bemorning zardobida anti-SLP antikorlari mavjudligini ko'rsatdi, bu SLP oqsillarining immunodominant ekanligini va infektsiya paytida ifodalanganligini ko'rsatadi [50]. Bruxelles va boshqalar tomonidan olib borilgan tadqiqot. CDI bemorlarida sog'lom bemorlarga nisbatan anti-SlpA antikorlarining yuqori darajasini ko'rsatdi [52]. Boshqa bir tadqiqotda Negm va boshqalar. turli C. difficile shtammlaridan SLP ekstraktlariga qarshi CDI bo'lgan jami 327 kishining sarumlarida IgG antikorlarini aniqladi [53]. SlpA ga qo'shimcha ravishda, ikkinchi eng ko'p tarqalgan protein Cwp66 ning ochiq C-terminal domeni juda o'zgaruvchan, N-terminal domeni esa yaxshi saqlanadi. Cwp66 va Cwp84 ning o'zgaruvchan C-terminal domenlari odamlarda immunogen ekanligi ko'rsatilgan [49,54]. Bundan tashqari, CDI bemorlarida o'rtacha umumiy anti-Cwp66 va anti-Cwp84 darajalari sog'lom nazorat guruhidan past bo'lgan, bu antikorlarning himoya xususiyatini ko'rsatadi. Shuning uchun, SLPlar, xususan, SlpA va boshqa komponentlar immunitetni himoya qilishda muhim rol o'ynaydi va keyingi bo'limlarda tavsiflanganidek, immunoterapevtik va vaktsinalarni ishlab chiqish uchun potentsial maqsadlardir.

7. SLPlar vositachilik qiladi C. difficile Adezyon

C. difficile kolonizatsiyaga olib keladigan ichak epiteliya hujayralariga yopishib infektsiyani boshlaydi. Shu nuqtai nazardan, SlpA va Cwp66 kabi bakterial SLPlar yopishishda muhim rol o'ynaydi. Izolyatsiya qilingan C. difficile shtammlarida SLP larning, xususan, SlpA ning o'zgarishi aderensiyada o'zgarishlarni ko'rsatganligi xabar qilingan [55]. SLPlar turli xil hujayra chiziqlarini, masalan, Hep-2 va Vero hujayralarining inson gastrointestinal hujayra chiziqlari va hujayradan tashqari matritsaning ko'plab oqsillarini bog'lashi ko'rsatilgan. Bundan tashqari, anti-HMW-SLP antikorlari bilan davolash C. difficile amalini inhibe qildi. Bundan tashqari, mezbon hujayralarni tozalangan SlpA subunitlari yoki anti-SlpA antikorlari bilan oldindan davolash ham C. difficile [55] yopishishini oldini oldi. SlpA oqsillar oilasining eng katta a'zosi homologi CwpV oqsili bo'lib, u faza o'zgaruvchan tarzda ifodalanadi. Alohida tadqiqotda, CwpV oqsilining C-terminali takrorlanuvchi domeni C. difficile agregatsiyasiga vositachilik qilishi ko'rsatilgan. Bundan tashqari, bu domen shtammlar orasida o'zgarib turadi va beshta antigenik jihatdan aniq takrorlanadigan turlar aniqlangan [40].

Cwp66 nomli boshqa immunogen oqsilning adezyon xususiyati borligi ko'rsatilgan. Tozalangan Cwp66 va N-terminal va C-terminal domenlariga qarshi antikorlar C. difficile ning madaniyatli Vero hujayralariga yopishishini inhibe qildi, bu Cwp66 ning yopishish xususiyatlarini ko'rsatmoqda [29].

8. Yallig'lanish reaktsiyalarining paydo bo'lishi

Bianco va boshqalar. yallig'lanish jarayonida SLPlarning rolini ko'rsatdi. Ushbu tadqiqotda gipervirulent va epidemik (H/E) yoki H/E C. difficile bo'lmagan shtammlardan olingan SLPlar tozalandi va immunomodulator sitokinlarni [interleykin] induktsiyasi nuqtai nazaridan inson monotsitlari va monotsitlardan olingan dendritik hujayralarda (MDDC) o'rganildi. (IL)-1 , IL-6 va IL- 10] [56]. Tadqiqot shuni ko'rsatdiki, SLPlar nafaqat antigen taqdim etuvchi faollik bilan MDDClarning kamolotini keltirib chiqardi, balki yuqori darajadagi IL-10 sekretsiyasini ham qo'zg'atdi. Biroq, H / E va H / E bo'lmagan shtammlardan SLP preparatlari tomonidan monositlar va MDDClarning faollashuvida sezilarli farqlar topilmadi, bu SLPlar kasallikning kuchayishiga hissa qo'shmaydi [56]. Boshqa bir tadqiqotda Ausiello va boshqalar. C253 klinik izolatidan SLPlarni ajratib olishdi va SLPlar dam olish monotsitlarida IL{11}} va IL-6 yallig'lanishga qarshi sitokinlarning yuqori darajadagi sekretsiyasini va inson MDDClarining kamolotini va T ning ko'payishini kuchaytirganligini ko'rsatdi. hujayralar [57]. Bundan tashqari, ushbu davolash qilingan MDDClar yuqori miqdorda IL-10 va IL-12p70 ni chiqardi va aralash Th1/Th2 immun javobini keltirib chiqardi. TLR-4 DClarni SLP vositachiligida faollashtirishda muhim rol o'ynadi. SLPlar TLR4-mutant C3H/HeJ sichqonlaridan ajratilgan DClarni faollashtira olmasligi va SLPlar TLR4 retseptorlari vositachiligida tug'ma va adaptiv immunitetni faollashtirishini ko'rsatadigan keyingi Th immun javobini keltirib chiqara olmasligi ko'rsatilgan [19]. Boshqa bir tadqiqotda makrofaglarda C. difficile dan olingan SLPlar makrofaglar migratsiyasi va fagotsitoz faolligi oshishi bilan yallig'lanishga qarshi sitokinlar va kimyokinlar sekretsiyasi nuqtai nazaridan klirens reaktsiyasini keltirib chiqarishi ko'rsatildi [58]. P38 inhibitori bilan davolash SLP vositachiligidagi javoblarda signalizatsiya molekulalarining rolini ko'rsatuvchi bu javoblarni bekor qildi [58]. Yaqinda o'tkazilgan tadqiqotda C. difficile SLPlar tomonidan dozaga bog'liq holda yallig'lanish faollashuvi qayd etilgan. Bundan tashqari, hujayra membranalarida xolesteringa boy mikrodomenlar (lipidli raftlar) SLPlarni hujayra membranasiga bog'lashda yordam berishi ko'rsatildi. Bu lyuminestsent mikroskopga asoslangan bo'lib, unda membranadagi xolesterinni tushiruvchi metil siklodekstrin (M CD) bilan davolash SLP bilan bog'lanishni kamaytirishi ko'rsatildi, bu SLP C. difficile kolonizatsiyasi va yallig'lanish faollashuvi uchun muhim bo'lgan lipid to'plarini jalb qilishini ko'rsatadi [59] ]. Ushbu tadqiqotlar C. difficile SLP'lari qisman TLR4 vositachiligida bo'lgan tug'ma va adaptiv immun javoblarni faollashtirishi mumkinligini ta'kidlaydi, bu esa immun javobni qo'zg'atishda SLPlarning muhim rolini ko'rsatadi. Shu sababli, bu natijalar SLPlarning CDI ga qarshi vaktsina nomzodlari sifatidagi potentsialini ham ko'rsatadi.

9. CDIga qarshi antikorlar javoblari

Bir nechta immunologik tadqiqotlar shuni ko'rsatadiki, C. difficile infektsiyasi va natijasi CDI patogenligining asosiy omili bo'lgan xost immun javobining intensivligiga bog'liq. Shunday qilib, mustahkam antikor javobini rivojlantira olmaslik kasallikning og'irligi va takrorlanishi uchun prognoz bo'lishi mumkin [60]. Shu munosabat bilan, asosiy toksinlarga qarshi antikorlar darajasi kasallikning qaytalanishi va og'irligi bilan bog'liq edi [61,62]. Oldingi tadqiqotlarda ham C. difficile sirt komponentlariga qarshi antikorlar CDI bilan kasallangan bemorlarning zardobida qayd etilgan [63]. Drudy va boshqalar. C. difficile bilan bog'liq diareya (CDAD) bo'lgan 55 bemorni, asemptomatik tashuvchisi bo'lgan 34 bemorni va 57 nazorat sub'ektini o'z ichiga olgan 146 bemordan iborat kohortda C. difficile SLP ekstraktlariga gumoral immun javoblarni baholadi [64]. Tadqiqot asosan ko'p miqdorda SlpA oqsilini o'z ichiga olgan SLPlarning yuqori va past MVt fraktsiyalarini ajratib olish imkonini berdi. Ular ushbu kohortda ferment bilan bog'langan immunosorbent tahlili (ELISA) yordamida sarum antikorlarini o'lchadilar va sarum IgM, IgA yoki IgG antikorlari darajasida sezilarli farqlar topmadilar. Qizig'i shundaki, CDADning takroriy epizodlari bo'lgan bemorlarda IgM-anti-SLP darajalari bitta epizodli bemorlarga qaraganda ancha past edi. Tadqiqot C. difficile SLPs [64] yordamida maxsus anti-SLP antikor javoblarini va himoya tadqiqotlarini aniqlash uchun keyingi tadqiqotlar o'tkazilishi kerak degan xulosaga keldi.

Izolyatsiya qilingan HMW va LMW SLP ekstraktlaridan foydalangan holda passiv va faol immunizatsiya o'ldiradigan hamster modellarida omon qolish ko'rsatkichlarini oshirgan holda dalda beruvchi natijalarni ko'rsatdi. O'Brien va boshqalar. hamsterlarda C. difficile infektsiyasiga qarshi anti-SLP antikorlarining himoya javobini ko'rsatdi, bu erda nazorat guruhlari bilan solishtirganda anti-SLP bilan davolash qilingan guruhlarda omon qolish sezilarli darajada uzaytirildi [65]. Antiserumning himoya ta'siri C. difficile fagotsitozini kuchaytirish orqali ko'rsatildi [65]. Eidhin va boshqalar faol immunizatsiyadan foydalangan holda, oltin Suriya hamsterlari va BALB / c sichqoncha modellarida turli xil tizimli va shilliq qavat adjuvantlari bilan vaktsina sifatida SlpA ning LMW va HMW peptidlarining teng molyar miqdorini o'z ichiga olgan xom SLP ekstraktini sinovdan o'tkazdilar. Tadqiqot turli rejimlarda kamdan kam antikor stimulyatsiyasini qayd etdi va sichqoncha modellari hamsterlarga qaraganda SLPlarga kuchliroq antikor javoblarini ko'rsatdi [66]. Boshqa bir tadqiqotda Brunet al. toksin A (TxA (C314)) va C. difficile shtammi C253 dan SLP{7}} kDa fragmentidan iborat ikkita peptidning fibronektin bog‘lovchi oqsil A (FnbpA) ning retseptorlari bilan bog‘lovchi domenidan iborat in vivo jonli yordamchi faolligini tekshirdi. ), Staphylococcus aureusga qarshi himoya emlash antijeni [67]. Ular javobni intranazal va teri osti yo'llari yordamida baholadilar va ikkala bo'lak ham aylanma anti-FnbpA IgG va IgA ishlab chiqarishni kuchaytirganligini aniqladilar. Ular yordamchi moddalar sifatida ishlatilganda, bu parchalar immun tizimiga differensial ta'sir qiladi va polarizatsiya qiladi, degan xulosaga kelishdi [67]. Boshqa bir tadqiqotda Shirvan va boshqalar. faj displey yordamida C. difficile 630 oqsillaridan Cwp66 va SlpA kabi SLP larga qarshi maxsus rekombinant antikorlarni hosil qildi va ifodaladi va bu rekombinant antikorlar SLP va ularning tarkibiy qismlariga yuqori o'ziga xoslik bilan shtammga xos tarzda reaksiyaga kirishishini ko'rsatdi [68].

Cwp84 proteazini antigen sifatida ishlatadigan hamster modelidagi immun javob va himoya bir necha immunizatsiya yo'llari bilan baholangan [69]. Tadqiqot immunizatsiya yo'nalishlariga asoslangan differentsial antikor titrlarini topdi. Eng yaxshi himoya immunizatsiyaning rektal yo'li orqali kuzatildi. Bundan tashqari, immunizatsiya qilingan hamster guruhlari C. difficile bilan bog'liq muammolardan keyin 26% zaif va sekinroq ichak kolonizatsiyasiga olib keldi va emlanmagan guruhlarga qaraganda ancha yuqori omon qolish darajasi (33% ga ko'p) [69].

cistanche o'simlik - immunitet tizimini oshiradi

10. SLPlarga asoslangan Anti-C. difficile Terapevtiklar

C. difficile ni zararsizlantirish uchun maxsus antikorga asoslangan terapevtiklar samarali strategiya bo'lishi mumkin. Kandalaft va boshqalar. SLPlarni nishonga olish uchun bitta domenli antikorlardan foydalangan [70]. Guruh C. difficile gipervirulent QCD -32 g58 (027 ribotip) shtammidan SLPga xos yagona domenli antikorlar (VHHs) panelini tayyorladi. Ularning natijalari SLP ning LMW subbirligida joylashgan QCD-32g58 epitoplari bilan bog'langan bir qancha VHHlarni yuqori yaqinlik bilan ko'rsatdi. Bundan tashqari, ular ushbu VHHlarning 001 va 027 ribotiplari bilan bog'lanish o'ziga xos xususiyatiga ega ekanligini va bu VHHs antikorlarining bir qismi 012, 017, 023 va 078 ribotiplariga keng ko'lamda o'zaro reaktivligini xabar qilishdi. Ushbu VHHlar C. difficile QCD-32g58 in vitro harakatchanligini inhibe qilishi ham ko'rsatildi [70].

Kirk va boshqalar tomonidan boshqa aniq antibakterial vosita Av-CD291.2 ni ishlab chiqish. C. difficile ni o'ldiradi va sichqonlarda kolonizatsiyani oldini oladi [51]. Av-CD291.2 C. difficile shtammlarida SLP ketma-ketligi mavjudligiga asoslangan turli xil C. difficile izolatlarini o'ldirishi ko'rsatilgan. Mualliflar Av-CD291.2 agentlariga chidamli bo'lgan slpA genida nuqta mutatsiyasini o'z ichiga olgan SLP null mutantlarini aniqladilar. Ushbu mutantlarda sporulyatsiya nuqsonlari ham bor edi, ammo hamster modelida virulentlikning susayganligiga qaramay, ichak traktini kolonizatsiya qila oldi [51]. Bundan tashqari, ular turli xil C. difficile shtammlarini SLP ketma-ketligiga bog'liq holda o'ldiradigan Avidotsin-CD panelini yaratdilar, bu CDI ning oldini olish uchun SLPlarga asoslangan ushbu antibakteriallarning muhim rolini ko'rsatadi [51].

11. Yakunlovchi fikrlar va javobsiz tanqidiy savollar

Uy egasi C. difficile toksinlari va sirt komponentlariga qarshi mustahkam o'ziga xos immunitetni rivojlantiradi. SLPlarning hujayra yopishishida, TLR4 faollashuvi orqali turli sitokinlarning induksiyasida va tug'ma va gumoral immun javoblarning faollashuvida roli borligi ko'rsatilgan. Biroq, CD4 va CD8 hujayralarining rolini yanada chuqurroq o'rganish uchun SLPlar tomonidan T-hujayra javoblarini faollashtirish bo'yicha tadqiqotlar kerak. Gumoral javobning faollashuviga asoslanib, toksinlar va sirt tarkibiy qismlariga qarshi neytrallashtiruvchi antikorlar CDI klinik belgilarini oldini oladi. SLPlarga qarshi faol yoki passiv immunizatsiyadan foydalangan holda olib borilgan tadqiqotlar istiqbolli natijalarni ko'rsatdi, bu strategiyani CDI patogenligiga qarshi yangi terapevtiklarga aylantirish mumkinligini ko'rsatadi. Vaktsina nomzodi sifatida SlpA ga katta e'tibor berildi; ammo, SlpA ning shtammlar orasidagi yuqori ketma-ketlik o'zgaruvchanligi tufayli vaktsina barcha ribotiplarga qarshi samarali bo'lmasligi mumkin. Shuning uchun, bu muammoni chetlab o'tish uchun epitopga asoslangan vaktsinalar kerak bo'lishi mumkin. Shu nuqtai nazardan, SLP ga qarshi yagona domen antikorlari (VHHs) hayotiy variantlar bo'lib, ular C. difficile ning LMW-SLP subbirligini yuqori o'ziga xoslik bilan bog'laydi va C. difficile shtammlarining harakatchanligini inhibe qilishi ko'rsatilgan. Hozirgi vaqtda SLPlarning mexanik roli va ularning CDI patogenezi, adezyon va T-hujayra reaktsiyasidagi paraloglarini tushunish hali ham boshlang'ich bosqichlarida va asosan o'rganilmagan. C. difficile infektsiyalari bilan kurashish uchun yangi vaktsinalar/dorilar maqsadlari va terapevtik vositalarning jadal rivojlanishiga yordam berish uchun SLPlarning molekulyar funktsiyalari va o'ziga xos immun reaktsiyalarini ajratish uchun keyingi tadqiqotlar talab qilinadi.

Ma'lumotnomalar

1. Chandra, X.; Sharma, KK; Tuovinen, OH; Quyosh, X.; Shukla, P. Pathobionts: Clostridioides difficile ga e'tibor qaratgan holda omon qolish, kengayish va uy egasi bilan o'zaro ta'sir qilish mexanizmlari. Ichak mikroblari 2021, 13, 1979882. [CrossRef] [PubMed]

2. Lawson, Pensilvanya; Citron, DM; Tyrrell, KL; Finegold, SM Clostridium difficile ning Clostridioides difficile sifatida qayta tasnifi (Hall va O'Toole 1935) Oldindan 1938 yil. Anaerobe 2016, 40, 95–99. [CrossRef] [PubMed]

3. Oren, A.; Garrity, GM Ilgari IJSEMdan tashqari e'lon qilingan taksonomik fikrdagi o'zgarishlar to'g'risida xabarnoma. Int. J. Sist. Evolyutsiya. Mikrobiol. 2018, 68, 2137–2138. [CrossRef]

4. Kasalliklarni nazorat qilish va oldini olish markazlari. Amerika Qo'shma Shtatlarida antibiotiklarga qarshilik tahdidlari, 2019. 2019. Onlayn: https://www.cdc.gov/drugresistance/pdf/threats-report/2019-ar-threats-report-508.pdf (2022-yil 8-sentabrda foydalanish mumkin).

5. Shilds, K.; Araujo-Kastilo, RV; Theethira, TG; Alonso, CD; Kelli, CP Qaytalanuvchi Clostridium difficile infektsiyasi: mustamlakachilikdan davolanishgacha. Anaerob 2015, 34, 59–73. [CrossRef] [PubMed]

6. Chandra, X.; Sorg, JA; Hassett, DJ; Quyosh, X. Clostridioides difficile patogenezining tartibga soluvchi transkripsiya omillari toksinlarni tartibga solishga qaratilgan. Krit. Rev. Mikrobiol. 2022. [CrossRef]

7. Lanzoni-Mangutchi, P.; Banerji, O.; Uilson, J.; Barvinska-Sendra, A.; Kirk, JA; Vaz, F.; O'Beyrn, S.; Basle, A.; El Omari, K.; Vagner, A.; va boshqalar. C. difficile da S-qatlamning tuzilishi va yigʻilishi. Nat. Kommun. 2022, 13, 970. [CrossRef]

8. Mori, N.; Takahashi, T. Clostridium difficiledagi sirt qatlami oqsillarining xususiyatlari va immunologik rollari. Ann. Laboratoriya. Med. 2018, 38, 189–195. [CrossRef] 9. Nuri, M.; Amirad, M.; Eslami, G.; Looha, MA; Yadegar, A.; Gʻalavand, Z.; Zali, MR Gipervirulent Clostridioides difficile ribotiplaridan olingan A sirt qatlami oqsili inson ichak epitelial hujayralarida qattiq birikmalar va yallig'lanish reaktsiyasining gen ifodasida sezilarli o'zgarishlarni keltirib chiqaradi. BMC mikrobiol. 2022, 22, 259. [CrossRef]

10. Uilson, KH; Sheagren, JN Toxigenik Clostridium difficile ning toksik bo'lmagan C. difficile tomonidan antagonizmi. J. Yuqtirish. Dis. 1983, 147, 733–736. [CrossRef]

11. Borriello, SP; Barclay, FE. Patogen bo'lmagan shtammlar bilan oldindan kolonizatsiya qilish orqali hamsterlarni Clostridium difficile ileokolitdan himoya qilish. J. Med. Mikrobiol. 1985, 19, 339–350. [CrossRef]

12. Muhr, D.; Borriello, SP; Barklay, F.; Welch, A.; Piper, M.; Bonnycastle, M. Toksigen bo'lmagan shtammni yuborish orqali qaytalanuvchi Clostridium difficile diareyasini davolash. Yevro. J. Klin. Mikrobiol. 1987, 6, 51–53. [CrossRef] [PubMed]

13. Jonson, S.; Lavergne, V.; Skinner, AM; Gonsales-Luna, AJ; Garey, KVt; Kelli, CP; Uilkoks, Amerika Yuqumli Kasalliklar Jamiyati (IDSA) va Amerika Sog'liqni saqlash Epidemiologiyasi Jamiyati (SHEA) tomonidan MH Klinik Amaliyot Qo'llanmasi: 2021 Kattalardagi Clostridioides difficile infektsiyasini boshqarish bo'yicha yo'naltirilgan yangilanish ko'rsatmalari. Klin. Yuqtirish. Dis. 2021, 73, e1029–e1044. [CrossRef] [PubMed]

14. van Pren, J.; Reigadas, E.; Vogelzang, EH; Bouza, E.; Xristea, A.; Gueri, B.; Krutova, M.; Noren, T.; Allerberger, F.; Coia, JE; va boshqalar. Evropa Klinik Mikrobiologiya va yuqumli kasalliklar jamiyati: Kattalardagi Clostridioides difficile infektsiyasini davolash bo'yicha qo'llanmaning 2021 yilgi yangilanishi. Klin. Mikrobiol. Yuqtirish. 2021, 27 (2-ilova), S1–S21. [CrossRef] [PubMed]

15. Vardakas, KZ; Polyzos, KA; Patouni, K.; Rafailidis, PI; Samonis, G.; Falagas, ME vankomitsin yoki metronidazol bilan davolashdan keyin Clostridium difficile infektsiyasini davolash muvaffaqiyatsizligi va takrorlanishi: dalillarni tizimli ko'rib chiqish. Int. J. Antimikrob. Agentlar 2012, 40, 1–8. [CrossRef]

16. Navalkele, BD; Chopra, T. Bezlotoxumab: takroriy Clostridium difficile infektsiyasining oldini olish uchun rivojlanayotgan monoklonal antikor terapiyasi. Biologiya 2018, 12, 11–21. [CrossRef]

17. Li, YT; Cai, HF; Vang, ZH; Syu, J.; Fang, JY Meta-tahlil bilan tizimli tahlil: Clostridium difficile infektsiyasi uchun najas mikrobiota transplantatsiyasining uzoq muddatli natijalari. Oziq-ovqat. Farmakol. U erda. 2016, 43, 445–457. [CrossRef]

18. Qurayshi, MN; Vidlak, M.; Bhala, N.; Mur, D.; Narx, M.; Sharma, N.; Iqbal, TH Meta-tahlil bilan tizimli tahlil: takroriy va refrakter Clostridium difficile infektsiyasini davolash uchun najas mikrobiota transplantatsiyasining samaradorligi. Oziq-ovqat. Farmakol. U erda. 2017, 46, 479–493. [CrossRef]

19. Rayan, A.; Linch, M.; Smit, SM; Amu, S.; Nel, HJ; Makkoy, Idoralar; Dowling, JK; Draper, E.; O'Reyli, V.; Makkarti, C.; va boshqalar. Clostridium difficile infektsiyasida TLR4 ning roli va sirt qatlami oqsillarini tanib olish. PLoS patogi. 2011, 7, e1002076. [CrossRef]

20. Batah, J.; Denève-Larrazet, C.; Jolivot, Pensilvanya; Kuehne, S.; Kollinyon, A.; Marvaud, JK; Kansau, I. Clostridium difficile flagella asosan epiteliya hujayralarida TLR5-bog'langan NF-KB yo'lini faollashtiradi. Anaerob 2016, 38, 116–124. [CrossRef]

21. Kavata, T.; Takeoka, A.; Takumi, K.; Masuda, K. Clostridium difficile hujayra devoridagi muntazam massivning namoyishi va dastlabki tavsifi. FEMS mikrobiol. Lett. 1984, 24, 323–328. [CrossRef]

22. Sara, M.; Sleytr, UB S-qatlam oqsillari. J. Bakteriol. 2000, 182, 859–868. [CrossRef] [PubMed]

23. Fagan, RP; Janoir, C.; Kollinyon, A.; Mastrantonio, P.; Pokston, IR; Fairweather, NF Clostridium difficile hujayra devori oqsillari uchun tavsiya etilgan nomenklatura. J. Med. Mikrobiol. 2011, 60, 1225–1228. [CrossRef]

24. Monot, M.; Bourso-Eude, C.; Tibonnier, M.; Vallenet, D.; Moszer, I.; Medigue, C.; Martin-Verstraete, I.; Dupuy, B. Clostridium difficile shtammining genom ketma-ketligining reannotatsiyasi 630. J. Med. Mikrobiol. 2011, 60, 1193–1199. [CrossRef] [PubMed]

25. Kalabi, E.; Uord, S.; Wren, B.; Pakston, T.; Paniko, M.; Morris, H.; Dell, A.; Dugan, G.; Fairweather, N. Clostridium difficile dan sirt qatlami oqsillarining molekulyar tavsifi. Mol. Mikrobiol. 2001, 40, 1187–1199. [CrossRef]

26. Karjalainen, T.; Waligora-Dupriet, AJ; Cerquetti, M.; Spigaglia, P.; Maggioni, A.; Mauri, P.; Mastrantonio, P. Clostridium difficile dan sirt langarli oqsillarni kodlovchi genlarning molekulyar va genomik tahlili. Yuqtirish. Immun. 2001, 69, 3442–3446. [CrossRef]

27. Willing, SE; Kandela, T.; Shou, HA; Seager, Z.; Xabar, S.; Fagan, RP; Fairweather, NF Clostridium difficile sirt oqsillari PSII anion polimerini taniydigan CWB2 motiflari yordamida hujayra devoriga biriktirilgan. Mol. Mikrobiol. 2015, 96, 596–608. [CrossRef]

28. Bredshou, WJ; Kirbi, JM; Roberts, AK; Shone, CC; Acharya, Clostridium difficile dan KR Cwp2 kengaytirilgan uch domen katlamini va in vitro hujayra yopishishini namoyish etadi. FEBS J. 2017, 284, 2886–2898. [CrossRef]

29. Valigora, AJ; Hennequin, C.; Mullani, P.; Bourlioux, P.; Kollinyon, A.; Karjalainen, T. Clostridium difficile ning hujayra yuzasi oqsilining yopishqoq xususiyatlari bilan tavsifi. Yuqtirish. Immun. 2001, 69, 2144–2153. [CrossRef]

30. Chjou, Q.; Rao, F.; Chen, Z.; Cheng, Y.; Chjan Q.; Chjan, J.; Guan, Z.; U, Y.; Yu, V.; Kui, G.; va boshqalar. cwp66 geni Clostridioides difficileda hujayra yopishishi, stressga chidamliligi va antibiotiklarga chidamliligiga ta'sir qiladi. Mikrobiol. Spektr. 2022, 10, e0270421. [CrossRef] [PubMed]

31. Dang, TH; de la Riva, L.; Fagan, RP; Stork, EM; Shifolash, WP; Janoir, C.; Fairweather, NF; Tate, EW Clostridium difficile da sirt qatlami biogenezining kimyoviy problari. ACS Chem. Biol. 2010, 5, 279–285. [CrossRef]

32. Kirbi, JM; Ahern, H.; Roberts, AK; Kumar, V.; Friman, Z.; Acharya, KR; Shone, CC Cwp84, sirt bilan bog'langan sistein proteazasi, Clostridium difficile sirt qatlamining kamolotida rol o'ynaydi. J. Biol. Kimyo. 2009, 284, 34666–34673. [CrossRef] [PubMed]

33. Janoir, C.; Pechine, S.; Grosdidier, C.; Collignon, A. Cwp84, Clostridium difficile ning sirt bilan bog'liq oqsili, hujayradan tashqari matritsa oqsillarida degradatsiya qiluvchi faollikka ega bo'lgan sistein proteazidir. J. Bakteriol. 2007, 189, 7174–7180. [CrossRef] [PubMed]

34. Usenik, A.; Renko, M.; Mihelíc, ​​M.; Lindic, N.; Borishek, J.; Perdih, A.; Pretnar, G.; Myuller, U.; Turk, D. CWB2 hujayra devori ankraj moduli Clostridium difficile hujayra devori oqsillari Cwp8 va Cwp6 ning kristall tuzilmalari tomonidan ochilgan. Struktura 2017, 25, 514–521. [CrossRef]

35. Eddy, SR. Statistik ahamiyatlilikni baholashni soddalashtiradigan mahalliy ketma-ketlikni moslashtirishning ehtimollik modeli. PLoS hisoblash. Biol. 2008, 4, e1000069. [CrossRef] [PubMed]

36. Luo, Y.; Frey, EA; Pfuetzner, RA; Creagh, AL; Knoechel, DG; Haynes, Kaliforniya; Finlay, BB; Strynadka, NC Enteropatogen Escherichia coli intimin-retseptorlar majmuasining kristalli tuzilishi. Tabiat 2000, 405, 1073–1077. [CrossRef] [PubMed]

37. de la Riva, L.; Willing, SE; Tate, EW; Fairweather, NF Clostridium difficile hujayra devorining biogenezida Cwp84 va Cwp13 sistein proteazlarining roli. J. Bakteriol. 2011, 193, 3276–3285. [CrossRef]

38. Mayer, BJ SH3 domenlari: Mo''tadillikdagi murakkablik. J. Hujayra fanlari. 2001, 114, 1253–1263. [CrossRef]

39. Sipeki, S.; Koprivanacz, K.; Takacs, T.; Kurilla, A.; Laslo, L.; Vas, V.; Buday, L. Lipidlarni bog'lashda SH2 va SH3 domenlarining roman rollari. Hujayralar 2021, 10, 1191. [CrossRef]

40. Reynolds, CB; Emerson, J.E.; de la Riva, L.; Fagan, RP; Fairweather, NF Clostridium difficile hujayra devori oqsili CwpV shtammlar orasida antigenik jihatdan o'zgaruvchan, ammo saqlanib qolgan agregatsiyani rag'batlantiruvchi funktsiyani namoyish etadi. PLoS patogi. 2011, 7, e1002024. [CrossRef]

41. Bredshou, WJ; Kirbi, JM; Roberts, AK; Shone, CC; Acharya, KR Clostridium difficile dan Cwp19 ning glikozid gidrolaza domenining molekulyar tuzilishi. FEBS J. 2017, 284, 4343–4357. [CrossRef]

42. Chju, D.; Bullok, J.; U, Y.; Sun, X. Cwp22, yangi peptidoglikan o'zaro bog'lovchi ferment, Clostridioides difficileda pleiotrop rol o'ynaydi. Atrof-muhit. Mikrobiol. 2019, 21, 3076–3090. [CrossRef] [PubMed]

43. Finn, RD; Koggill, P.; Eberhardt, RY; Eddi, SR; Mistri, J.; Mitchell, AL; Potter, SC; Punta, M.; Qureyshi, M.; Sangrador-Vegas, A.; va boshqalar. Pfam protein oilalari ma'lumotlar bazasi: yanada barqaror kelajak sari. Nuklein kislotalari Res. 2016, 44, D279–D285. [CrossRef] [PubMed]

44. Rayt, A.; Kutib turing, R.; Begum, S.; Crossett, B.; Nagi, J.; Braun, K.; Fairweather, N. Clostridium difficile dan hujayra yuzasi oqsillarining proteomik tahlili. Proteomika 2005, 5, 2443–2452. [CrossRef] [PubMed]

45. Biazzo, M.; Cioncada, R.; Fiaschi, L.; Tedde, V.; Spigaglia, P.; Mastrantonio, P.; Pitsa, M.; Barokki, MA; Skarselli, M.; Galeotti, CL Clostridium difficile klinik izolatlarida cwp lokuslarining xilma-xilligi. J. Med. Mikrobiol. 2013, 62, 1444–1452. [CrossRef]

46. ​​Dingle, KE; Didelot, X.; Ansoriy, MA; Eyre, DW; Vogan, A.; Griffits, D.; Ip, CL; Batti, EM; Golubchik, T.; Bouden, R.; va boshqalar. Clostridium difficile S-qatlamining rekombinatsion almashinuvi va keng miqyosli butun genom ketma-ketligi bilan aniqlangan yangi glikozillanish gen klasteri. J. Yuqtirish. Dis. 2013, 207, 675–686. [CrossRef]

47. Fagan, RP; Albesa-Jové, D.; Qozi, O.; Svergun, DI; Brown, KA; Fairweather, NF Clostridium difficile dan S-qatlamining molekulyar tashkil etilishi haqida tizimli tushunchalar. Mol. Mikrobiol. 2009, 71, 1308–1322. [CrossRef]

48. Fagan, RP; Fairweather, NF Clostridium difficile ikkita parallel va muhim Sek sekretsiya tizimiga ega. J. Biol. Kimyo. 2011, 286, 27483–27493. [CrossRef]

49. Pechine, S.; Gleizes, A.; Janoir, C.; Gorges-Kergot, R.; Barc, MC; Delme, M.; Collignon, A. Clostridium difficile sirt oqsillarining immunologik xususiyatlari. J. Med. Mikrobiol. 2005, 54, 193–196. [CrossRef]

50. Rayt, A.; Drudy, D.; Kyne, L.; Braun, K.; Fairweather, NF. Clostridium difficile ning immunoreaktiv hujayra devori oqsillari inson zardobida aniqlangan. J. Med. Mikrobiol. 2008, 57, 750–756. [CrossRef]

51. Kirk, JA; Gebhart, D.; Bakli, AM; Lok, S.; Scholl, D.; Douce, GR; Govoni, GR; Fagan, RP Nozik mikroblarga qarshi vositalarning yangi klassi Clostridium difficile S-qatlamining virulentlik va hayotiylikdagi rolini qayta belgilaydi. Sci. Tarjima. Med. 2017, 9, eaah6813. [CrossRef]

52. Bruxelles, JF; Mizrahi, A.; Xoys, S.; Kollinyon, A.; Janoir, C.; Péchiné, S. Clostridium difficile ning sirt qatlamining prekursorining immunogen xususiyatlari va hayvonlar modellarida emlash tahlillari. Anaerob 2016, 37, 78–84. [CrossRef]

53. Negm, OH; Hamed, MR; Dilnot, EM; Shone, CC; Marszalovska, I.; Linch, M.; Loscher, Idoralar; Edvards, LJ; Tighe, PJ; Wilcox, MH; va boshqalar. Protein mikroarray tahlili orqali Clostridium difficile-ga xos antigenlarga gumoral immun javoblarni aniqlash. Klin. Vaktsina Immunol. 2015, 22, 1033–1039. [CrossRef] [PubMed]

54. Pechine, S.; Janoir, C.; Collignon, A. Clostridium difficile bilan bog'liq kasallik bilan og'rigan bemorlarda Clostridium difficile sirt oqsillarining o'zgaruvchanligi va o'ziga xos sarum antikor javobi. J. Klin. Mikrobiol. 2005, 43, 5018–5025. [CrossRef] [PubMed]

55. Merrigan, MM; Venugopal, A.; Roxas, JL; Anvar, F.; Mallozzi, MJ; Roxas, BA; Gerding, DN; Vishvanatan, VK; Vedantam, G. Yuzaki qatlam oqsili A (SlpA) Clostridium difficile ning xost-hujayra yopishishiga asosiy hissa qo'shadi. PLoS ONE 2013, 8, e78404. [CrossRef]

56. Bianko, M.; Fedele, G.; Quattrini, A.; Spigaglia, P.; Barbanti, F.; Mastrantonio, P.; Ausiello, CM. Epidemik va gipervirulent Clostridium difficile shtammlaridan olingan sirt qatlamli oqsillarning immunomodulyatorlik faoliyati. J. Med. Mikrobiol. 2011, 60, 1162–1167. [CrossRef]

57. Ausiello, CM; Cerquetti, M.; Fedele, G.; Spensieri, F.; Palazzo, R.; Nasso, M.; Frezza, S.; Mastrantonio, P. Clostridium difficile dan sirt qatlami oqsillari inson monositlari va dendritik hujayralardagi yallig'lanish va tartibga soluvchi sitokinlarni keltirib chiqaradi. Mikroblar yuqtiradi. 2006, 8, 2640–2646. [CrossRef]

58. Kollinz, LE; Linch, M.; Marszalovska, I.; Kristek, M.; Rochfort, K.; O'Konnell, M.; Windle, H.; Kelleher, D.; Loscher, Idoralar Clostridium difficile dan ajratilgan sirt qatlami oqsillari makrofaglarda klirens reaktsiyalarini keltirib chiqaradi. Mikroblar yuqtiradi. 2014, 16, 391–400. [CrossRef] [PubMed]

59. Chen, Y.; Xuang, K.; Chen, LK; Vu, HY; Xsu, CY; Tsay, YS; Ko, WC; Tsai, PJ membrana xolesterini Clostridium difficile sirt qatlami oqsillarini bog'lash va yallig'lanishni faollashtirish uchun juda muhimdir. Old. Immunol. 2020, 11, 1675. [CrossRef] [PubMed]

60. Kelly, CP. Biz takroriy Clostridium difficile infektsiyasi xavfi yuqori bo'lgan bemorlarni aniqlay olamizmi? Klin. Mikrobiol. Yuqtirish. 2012, 18 (6-ilova), 21–27. [CrossRef]

61. Wult, M.; Noren, T.; Ljung, A.; Åkerlund, T. Clostridium difficile infektsiyasi bo'lgan bemorlarda A va B toksinlariga IgG antikorining javobi. Klin. Vaktsina Immunol. 2012, 19, 1552–1554. [CrossRef]

62. Leav, BA; Bler, B.; Leney, M.; Knauber, M.; Reilly, C.; Loui, I.; Gerding, DN; Kelli, CP; Katchar, K.; Baxter, R.; va boshqalar. Zardobdagi antitoksin B antikori takroriy Clostridium difficile infektsiyasidan (CDI) himoya bilan bog'liq. Vaktsina 2010, 28, 965–969. [CrossRef] [PubMed]

63. Pantosti, A.; Cerquetti, M.; Viti, F.; Ortisi, G.; Mastrantonio, P. Antibiotik bilan bog'liq diareya bilan og'rigan bemorlarda Clostridium difficile sirt oqsillariga sarum immunoglobulin G javobining immunoblot tahlili. J. Klin. Mikrobiol. 1989, 27, 2594–2597. [CrossRef] [PubMed]

64. Drudiy, D.; Kalabi, E.; Kyne, L.; Sougioultzis, S.; Kelli, E.; Fairweather, N.; Kelly, CP Clostridium difficile infektsiyasida sirt qatlami oqsillariga inson antikorlari javobi. FEMS immunol. Med. Mikrobiol. 2004, 41, 237–242. [CrossRef] [PubMed]

65. O'Brayen, JB; McCabe, MS; Atie-Morales, V.; McDonald, GS; DB, NE; Kelleher, DP Hamsterlarni Clostridium difficile infektsiyasiga qarshi passiv immunizatsiyasi sirt qatlami oqsillariga antikorlar yordamida. FEMS mikrobiol. Lett. 2005, 246, 199–205. [CrossRef]

66. DB, NE; O'Brayen, JB; McCabe, MS; Atie-Morales, V.; Kelleher, DP Hamsterlarni Clostridium difficile infektsiyasiga qarshi faol immunizatsiya sirt-qatlam oqsili yordamida. FEMS immunol. Med. Mikrobiol. 2008, 52, 207–218. [CrossRef]

67. Brun, P.; Scarpa, M.; Grillo, A.; Palù, G.; Mengoli, C.; Zecconi, A.; Spigaglia, P.; Mastrantonio, P.; Castagliuolo, I. Clostridium difficile TxAC314 va SLP-36kDa birgalikda qo'llaniladigan antigenga qarshi immunitetni kuchaytiradi. J. Med. Mikrobiol. 2008, 57, 725–731. [CrossRef]

68. Shirvon, AN; Aitken, R. Clostridium difficile sirt oqsillariga qarshi qaratilgan rekombinant antikorlarning izolyatsiyasi. Braz. J. Mikrobiol. 2016, 47, 394–402. [CrossRef]

69. Pechine, S.; Denev, C.; Le Monnier, A.; Xoys, S.; Janoir, C.; Collignon, A. Cwp84 proteazini antijen sifatida ishlatib, Clostridium difficile infektsiyasiga qarshi hamsterlarni immunizatsiya qilish. FEMS immunol. Med. Mikrobiol. 2011, 63, 73–81. [CrossRef]

70. Kandalaft, X.; Gusak, G.; Aubry, A.; van Faassen, X.; Guan, Y.; Arbobi-Gahrudi, M.; MakKenzi, R.; Logan, SM; Tanha, J. Bir domenli antikorlar bilan sirt qatlamli oqsillarni nishonga olish: Clostridium difficile bilan bog'liq kasallikka qarshi potentsial terapevtik yondashuv. Ilova. Mikrobiol. Biotexnologiya. 2015, 99, 8549–8562. [CrossRef]