Cistanche Tubulosa birlamchi va metastatik inson yo'g'on ichak saratoni hujayralarining reaktiv kislorod turlari vositachiligida apoptozni qo'zg'atadi

ANTRACT

Yo'g'on ichak saratoni dunyoda uchinchi eng keng tarqalgan saraton hisoblanadi. An'anaviy davolash usullari jiddiy nojo'ya ta'sirlar bilan o'rtacha samaradorlikni ko'rsatdi, shuning uchun xavfsizroq alternativalarga shoshilinch ehtiyoj bor. Ushbu tadqiqotda Cistanche tubulosa, mahalliy nomi Thanoon, an'anaviy tibbiyotda ma'lum yuqori terapevtik salohiyati va Yaqin Sharq mintaqasida keng tarqalganligi sababli potentsial fitoterapevtik strategiya sifatida ko'rib chiqildi. Biologik faol birikmalar changlangan Cistanche tubulosadan ekstraksiya qilindi va ularning saratonga qarshi xususiyatlari uchun to'rtta yo'g'on ichak saratoni hujayra chizig'iga qarshi sinovdan o'tkazildi, shu jumladan ikkita asosiy o'simtadan (CaCo2 va HCT116) va ikkita metastatik joydan (LoVo va SW620) olingan.

Cistanche tubulosa ning apoptoz va hujayra redoks gomeostazini induktsiyasiga ta'siri ham o'rganildi. Cistanche tubulosa 1 mg/ml xom ekstrakti bilan 72 soatlik davolashdan so'ng barcha sinovdan o'tgan saraton hujayralari liniyalarining kontsentratsiyasi va vaqtga bog'liq proliferatsiyasini 60 foizdan ko'proq inhibe qildi. Proliferatsiyani inhibe qilish apoptozning induksiyasi, hujayra ichidagi reaktiv kislorod turlarini ishlab chiqarish va mitoxondriyal superoksidlar bilan belgilandi. Ushbu ma'lumotlar Cistanche tubulosa yo'g'on ichak saratoniga qarshi qo'shimcha terapiya uchun istiqbolli nomzod ekanligini ko'rsatadi. Bu Cistanche tubulosa ning yo'g'on ichak saratoni hujayralariga qarshi saratonga qarshi bioaktivligini ko'rsatadigan birinchi tadqiqot.

Cistanche o'simlik ekstrakti mahsulotining dorivor terapiyasini bosing

Qisqartmalar:

7-AAD, 7-Amino-aktinomitsin D; CTE, Cistanche tubulosa ekstrakti; EMEM, Eagle's Minimum Essential Medium; FBS, homila sigir zardobi; DCF, 2,7-diklorofloressein; DCFH-DA, 2, 7- diklorodihidrofluoresein diasetat; DMEM, Dulbecco's Modified Eagle's Media; DMSO, dimetilsulfoksid; MTT, 3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazolium; PE, fikoeritrin; RFU, nisbiy floresan birliklari; ROS, reaktiv kislorod turlari

KIRISH

Kolorektal saraton butun dunyo bo'ylab eng keng tarqalgan saraton turlaridan biridir (Brenner va boshq., 2014) va zamonaviy ovqatlanish va turmush tarzi, shuningdek jismoniy faollikning kamayishi tufayli uning tarqalishi 2035 yilda taxminan 2,4 million holat bilan doimiy ravishda oshib bormoqda. Hozirgi sa'y-harakatlar yo'g'on ichak saratoni epidemiyasiga qarshi kurashish uchun etarli emas va shuning uchun samarali oldini olish va davolash uchun yangi yondashuvlar, shu jumladan Fitoterapiya kabi xavfsizroq muqobil aralashuvlar bilan birgalikda turmush tarzini o'zgartirish kerak (Weidner va boshq., 2015). Kasalliklarni davolashda dorivor o‘simliklardan foydalanish fitoterapiya qadimgi insoniyat tarixining muqarrar qismi bo‘lib kelgan. Dorivor o'simliklar uzoq vaqtdan beri an'anaviy tibbiyotda qo'llaniladigan saratonga qarshi vositalarning oltmish foizdan ortig'ini tashkil etuvchi saraton kasalliklari uchun muqobil davolash manbalari sifatida ishlatilgan (Balunas va Kinghorn, 2005; Saibu va boshq., 2015). Eng mashhur misollardan ba'zilari Catharanthus roseus G. Dondan olingan ekstraktlarni o'z ichiga oladi. (Apocynaceae), Taxus baccata L. (Taxaceae) va Camptotheca acuminate Decne (Nyssaceae) (Cragg va Newman, 2005; da Rocha va boshq., 2001). Bir nechta o'simlik ekstraktlari va fitokimyoviy moddalar kolorektal saratonda o'smaga qarshi ta'sir ko'rsatishi ko'rsatildi, bu Melissa officinalis ekstraktidagi kabi reaktiv kislorod turlarini (ROS) ishlab chiqarish va saraton hujayralarining apoptozi bilan bog'liq (Weidner va boshq., 2015).

Fitoterapevtik nomzodlar orasida Afrika, Osiyo va O'rta er dengizi mintaqasining qurg'oqchil va yarim qurg'oqchil hududlarida keng tarqalgan Orobanchaceae parazit cho'l o'simligi (Jiang va boshqalar, 2009) Cistanche tubulosa qimmatli dorivor xususiyatlarga ega ekanligi isbotlangan. Cistanche tubulosa an'anaviy tibbiyotda keng qo'llaniladi va buyrak etishmovchiligi, morbid leykoreya, metrorragiya, ayollarning bepushtligi va qarilik qabziyatlarida shifobaxsh ta'sir ko'rsatishi tavsiya etiladi (Jiang va boshqalar, 2009). Cistanche Tubulosa ning xususiyatlari so'nggi o'n yil ichida intensiv o'rganildi, shu jumladan vazorelaksan (Yoshikawa va boshq., 2006), gepatoprotektiv (Morikawa va boshq., 2010), anti-giperglisemik va hipolipidemik ta'sir (Xiong va boshq., 2013). Cistanche Tubulosa, shuningdek, immunitet tizimining kuchli kuchaytiruvchisi, suyak shakllanishini rag'batlantiruvchi va qarishga qarshi va charchoqqa qarshi vosita sifatida taklif qilingan (Xu va boshq., 2014). Bundan tashqari, Cistanche tubulosa ekstrakti Altsgeymer kasalligi modelida amiloid to'planishini bloklashi ko'rsatilgan (Wu va boshq., 2015). Turli xil terapevtik foydalanishga qaramay, Cistanche Tubulosa ning potentsial saratonga qarshi vosita sifatida ta'siri hali o'rganilmagan.

Ushbu ishda biz Cistanche Tubulosa ning ikkita asosiy va ikkita metastatik yo'g'on ichak saratoni hujayralariga antikanser ta'sirini va bu ta'sirning potentsial mexanizmlarini o'rganib chiqdik.

MATERIALLAR VA USULLAR

O'simlik ekstraktini yig'ish va tayyorlash, Cistanche tubulosa namunalari 2014-yilda Qatardagi cho'l hududidan yig'ilgan va o'simlikning haqiqiyligi o'simlikshunos tomonidan tasdiqlangan. Voucher namunalari ADLQning Toksikologiya va ko'p maqsadli bo'limida arxivlangan. Quritilgan o'simlik namunalari Retsch Knife Mill Grindomix GM300 bilan mayda kukunga aylantirildi. Yigirma gramm kukun 200 rpm tezlikda aylanadigan shakerda 37 daraja haroratda 200 ml o'ta toza suv bilan kechasi ekstrakti. Xom Cistanche tubulosa ekstraktlari (CTE) 30 daqiqa davomida 8000 rpm tezlikda erimaydigan birikmalarni granulalash uchun santrifüj qilindi, supernatant yig'ildi va Labconco Freezone 6 plus Freeze quritgich yordamida muzlatib quritildi. Quritilgan ekstrakt Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM, SIGMA, Germaniya)da 20 mg/ml konsentratsiyaga qadar qayta tiklandi va 0.2-mikro membranali filtr orqali steril filtrdan o'tkazildi.

Hujayra liniyalari va hujayra parvarishi

Odamning yo'g'on ichak saratoni hujayralari CaCo2, SW620 va LoVo hujayra liniyasi Cell Lines Service (CLS, Eppelheim, Germaniya) dan olingan, HCT 116 hujayra liniyasi Qatar universiteti Biologiya va atrof-muhit fanlari bo'limining yaxshi sovg'asi edi. CaCo2 va HCT11 yo'g'on ichak karsinomasining asosiy joyidan, SW620 va LoVo esa metastatik joydan olingan. SW620, HCT116 va LoVo hujayralari ekilgan va DME muhitida, CaCo2 hujayralari esa Eagle's Minimum Essential Mediumda (EMEM, SIGMA, Germaniya) saqlangan. Hujayralar 10% homila sigir zardobi (FBS, SIGMA, Germaniya) va 1% Penitsillin/Streptomitsin (SIGMA, Germaniya) bilan toʻldirilgan, 5% karbonat angidridni oʻz ichiga olgan namlangan muhitda 37 daraja haroratda bir qatlamli ekilgan holda oʻstirildi.

Hujayra hayotiyligini tahlil qilish

sitotoksik faolligini baholash uchun {0}}[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazolium (MTT) tahlili ishlatilgan. CTE xuddi yuqorida tavsiflanganidek (Jaganjac va boshq., 2010). Quduq plastinkalarida ekilgan CaCo2, HCT116, SW620 va LoVo hujayralarining ekish zichligi 96-quduq uchun 104 hujayradan iborat edi. Hujayralar davolashdan 24 soat oldin 10% FBS bilan to'ldirilgan tegishli muhitga qo'yilgan. 24 soatdan keyin muhit olib tashlandi va hujayralar 0, 0,25, 0,5, 1 va 2 mg / ml CTE bilan 24, 48 va 72 soat davomida 37 daraja haroratda 5 foiz CO2 bo'lgan namlangan atmosferada ishlov berildi. CTE bilan davolashdan so'ng, vosita olib tashlandi va har bir quduqqa 40 mkL MTT eritmasi (0,5 mg/ml) qo'shildi.

3 soatlik inkubatsiyadan so'ng MTT eritmasi olib tashlandi, formazan mahsuloti dimetilsulfoksidda (DMSO, SIGMA, Germaniya) eritildi va absorbans 590 nm da mikroplata o'quvchi bilan o'lchandi (Infinite 200 PRO NanoQuant, Tecan Trading AG, Shveytsariya) .

Apoptoz tahlili

CaCo2, HCT116, SW620 va LoVo hujayralarida apoptoz hayotiy bo'yoq (Becton) sifatida 7-Amino-aktinomitsin D (7-AAD) bilan PE Annexin V apoptozni aniqlash to'plami I yordamida aniqlandi. Dickinson International, Belgiya) ishlab chiqaruvchining ko'rsatmalariga muvofiq. Qisqacha aytganda, hujayralar CTE qo'shilishidan 24 soat oldin 24 soat davomida 10% FBS bilan to'ldirilgan tegishli muhitda 5×104 hujayra/quduq zichligidagi 24-quduq plitalariga ekilgan (0, 0,5) yoki 1 mg/ml). 24 CTE inkubatsiyasidan so'ng hujayralar yig'ib olindi, ikki marta sovuq fosfat-buferli sho'r suv bilan yuvildi va qorong'ida xona haroratida 15 daqiqa davomida Phycoerythrin (PE) Annexin V va 7-AAD bilan bo'yaldi. Bo'yalgan hujayralar FACS yordamida oqim sitometriyasi orqali 1 soat ichida tahlil qilindi. Aria III oqim sitometri va FACSDiva dasturi (Becton Dickinson) kamida 104 hujayradan iborat past oqim tezligida. Tahlil uchun ijobiy nazorat sifatida hujayralarni 6 mkM kamptotesin (SIGMA) bilan 4 soat davomida davolash ishlatilgan.

Hujayra ichidagi ROS ishlab chiqarish

Hujayra ichidagi ROS ishlab chiqarilishi 2,7- diklorodihidrofluoresein diasetat (DCFH-DA, SIGMA, Germaniya) yordamida tekshirildi. DCFH-DA lyuminestsent bo'lmagan prob bo'lib, u hujayra ichidagi ROS bilan floresan birikma 2,7- diklorofloressein (DCF) ga oksidlanadi (Poljak-Blazi va boshq., 2011). DCFHDA tahlili biz ilgari aytib o'tganimizdek amalga oshirildi (Cindric va boshqalar, 2013; Poljak-Blazi va boshq., 2011). Qisqacha aytganda, qora rangli plastinkalarda yetishtirilgan CaCo2, HCT116, SW620 va LoVo hujayralarining 96- urug'lanish zichligi har bir quduq uchun 104 hujayradan iborat edi. Hujayralar 24 soat davomida 10% FBS bilan to'ldirilgan tegishli muhitda qoplangan.

Davolashdan oldin hujayralar 10 mkM DCFH-DA bilan 37 daraja haroratda 30 daqiqa davomida 5 foiz CO2 / 95 foiz havoda inkubatsiya qilindi. Hujayralar keyin yuvilgan vafenol qizil muhitda {0}}, 0,5 va 1 mg/ml CTE bilan ishlov beriladi. Hujayra ichidagi ROS hosil bo'lishi 25 soat davomida 37 daraja va 5 foiz CO2 da yuqori lyuminestsent va gazni boshqarish moduli (Infinite 200 PRO, Tecan Trading AG, Shveytsariya) bilan mikroplata o'quvchi yordamida doimiy ravishda kuzatildi. Floresans intensivligi 500 nm qo'zg'alish to'lqin uzunligi va 529 nm da emissiyani aniqlash bilan o'lchandi. Ixtiyoriy birliklar, nisbiy floresans birliklari (RFU) to'g'ridan-to'g'ri floresans intensivligiga asoslangan edi.

Mitoxondriyal superoksid hosil bo'lishi

CTE ning mitoxondriya tomonidan superoksid hosil bo'lishini qo'zg'atish qobiliyati hujayra o'tkazuvchan, mitoxondriyaga yo'naltirilgan MitoSOX Red zond (Life Technologies) va yadroviy bo'yash uchun Hoechst 33342 (Life Technologies) yordamida baholandi. CaCo2, HCT116, SW620 va LoVo xujayralari 96-quduq plastinkalariga 104 hujayra zichligidagi tegishli muhitda 24 soat davomida 10 foiz FBS qo‘shilgan holda ekilgan. . Keyin hujayralarga 20 daqiqa davomida 4 mkM MitoSOX va 2 mkM Hoechst 33342 yuklandi, ortiqcha bo'yoq yuvildi va quduqlar 24 soat davomida 37 daraja va 5 foiz CO2 da 0, 0,5 va 1 mg/ml CTE bilan ishlov berildi. Floresans intensivligi 510 nm qo'zg'alish to'lqin uzunligi va MitoSOX uchun 580 nm emissiyani aniqlash va 350 nm qo'zg'alish to'lqin uzunligi va Hoechst 33342 uchun 461 nm emissiyani aniqlash bilan o'lchandi. AG, Shveytsariya)

Statistik tahlil

Ta'riflovchi statistika o'rtacha plyus /− SD sifatida ko'rsatilgan. Guruhlar orasidagi farqlarning ahamiyati Student t-testi va Chi-kvadrat testi yordamida baholandi. Ikkitadan ortiq guruhlar solishtirilganda, biz bir tomonlama ANOVA dan tegishli post hoc testi bilan foydalandik. Mircosoft Windows uchun SPSS 11.01 ishlatildi. P 0,05 dan kam bo'lgan farqlar statistik jihatdan ahamiyatli deb hisoblanadi.

NATIJALAR

CTE ning inson yo'g'on ichak saratoni hujayra liniyalarining ko'payishiga ta'siri 1-rasmda ko'rsatilgan. Sinab ko'rilgan barcha CTE kontsentratsiyasi CaCo2 hujayra chizig'ida konsentratsiya va vaqtga bog'liq bo'lgan kuchli inhibitiv ta'sir ko'rsatdi (1A-rasm). Yetmish ikki soatlik CTE bilan davolash CaCo2 hujayralarining o'sishini nazorat bilan solishtirganda 60 foizdan ko'proq inhibe qildi (barcha kontsentratsiyalar uchun p < 0.05). CTE bilan davolashning HCT116 hujayra o'sishiga sezilarli ta'siri, shuningdek, barcha vaqt nuqtalarida ikkita eng yuqori konsentratsiyada (1 mg / ml va 2 mg / ml) aniqlangan va oxirgi konsentratsiyada 70 foizdan ko'proq pasaygan (1B-rasm, p). < 0,05).

Ikki past CTE kontsentratsiyasi ({0}},25 va 0,5 mg/mL) 24 soatdan keyin hujayralarning HCT116 o'sishini sezilarli darajada kamaytirdi (p.<0.05), 72="" they="" had="" no="" significant="" effect="" following="" hours="" of="" treatment="" compared="" to="" the="" control="" p="">{0}}.{{10}}5). CTE bilan proliferatsiyaning vaqt va konsentratsiyaga bog'liq bo'lgan inhibisyonu LoVo hujayralarida eng yuqori konsentratsiyada 60 foizdan ko'proq tasdiqlandi (p < 0.05) (1C-rasm) , va sinovdan o'tgan barcha to'rtta CTE kontsentratsiyasi 48 soatdan keyin SW620 hujayralarining o'sishini kamaytirdi (1D-rasm, hamma uchun p < 0.05). 72 soatlik davolanishdan so'ng, xuddi shunday ta'sir faqat ikkita eng yuqori konsentratsiyada (p <0,05) kuzatildi, 0,25 va 0,5 mg / ml konsentratsiyalar nazorat bilan solishtirganda sezilarli ta'sir ko'rsatmadi (p> 0,05). 0,5 va 1 mg / ml CTE davolashning apoptozning induksiyasiga ta'siri barcha to'rtta hujayra chizig'ida qo'shimcha sinovdan o'tkazildi (2-rasm). HCT116 va LoVo da 0,5 mg/ml (p) bilan 24 soatlik davolashdan keyin erta apoptozda hujayralar sonining ko'payishi aniqlandi.<0.05, Figure 2B and 2C) and in all cell lines at 1 mg/mL (p<0.05). A significant increase in necrotic or late apoptotic cell number was further observed in CaCo2 and SW620 cell lines (p<0.05, Figure 2A and 2D).

CTE ning hujayra ichidagi ROS ishlab chiqarishni rag'batlantirish qobiliyati 3-rasmda ko'rsatilgan. CTE bilan davolashdan keyin uch soat o'tgach, barcha hujayra liniyalarida hujayra ichidagi ROS ishlab chiqarishda kuchli o'sish kuzatildi (p.<0.05). The intracellular ROS production increased progressively throughout the 25 hours of treatment in a time and concentration-dependent manner. Furthermore, the staining of cells with a mitochondria-targeted probe revealed a strong impact of CTE on mitochondrial superoxide production in a concentration-dependent manner (Figure 4). The highest increase in superoxide production by mitochondria was observed in HCT116 (69%, Figure 4B) and LoVo cells (82%, Figure 4C) following 24 hours of treatment with 1 mg/mL of CTE.

1-rasm:

Cistanche tubulosa ning yo'g'on ichak saratoni hujayralarining hayotiyligiga ta'siri. (A) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo va (D) SW620 hujayralarining MTT tahlili bilan o'lchanadigan hujayra hayotiyligi nazorat qilinmagan yo'g'on ichak saratoni hujayra liniyasining foizi sifatida taqdim etiladi. Vakillik eksperimentining 5 ta takrori uchun o'rtacha qiymatlar (±SD) berilgan: (*) ahamiyatlilik p<0.05 in comparison to control untreated respective cells.

2-rasm:

Cistanche tubulosa suv ekstrakti inson yo'g'on ichak saraton hujayralarida apoptozni keltirib chiqaradi. (A) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo va (D) SW620 hujayralarining Annexin-V-FITC oqim sitometriyasi tahlillari nazorat qilinmagan yo'g'on ichak saratoni hujayralari qatorining foizi sifatida taqdim etilgan. Vakolatli eksperimentning 3 ta takrorlanishi uchun o'rtacha qiymatlar (±SD) berilgan: (*) ahamiyatlilik p<0.05 in comparison to control untreated respective cells.

3-rasm:

Cistanche tubulosa suv ekstrakti vaqt va dozaga bog'liq holda hujayra ichidagi ROS ishlab chiqarishni keltirib chiqaradi. (A) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo va (D) SW620 hujayralarida DCFH-DA tahlili bilan o'lchangan ROS ishlab chiqarilishi tegishli 5-takrorlar uchun o'rtacha RFU qiymatlari (±SD) sifatida taqdim etilgan. vakili tajriba. (*) Ahamiyati p<0.05 in comparison to control untreated colon cancer cells.

4-rasm:

Cistanche tubulosa suv ekstrakti odamning yo'g'on ichak saratoni hujayralarida mitoxondriyal superoksid ishlab chiqarishni qo'zg'atadi. A) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo va (D) SW620 hujayralarida mitoxondriyaga mo'ljallangan MitoSOX Red probining floresans intensivligi nazorat qilinmagan yo'g'on ichak saratoni hujayralari qatorining ulushi sifatida taqdim etilgan. Vakillik eksperimentining 5 ta takrori uchun o'rtacha qiymatlar (±SD) berilgan: (*) ahamiyatlilik p<0.05 in comparison to control untreated colon cancer cells.

MUHOKAZA

Oldingi tadqiqotlarda Cistanche tubulosa ning ko'plab dorivor xususiyatlari haqida xabar berilgan bo'lsa-da, bu uning malign hujayralardagi proliferativ ta'siri haqida birinchi hisobotdir. Yuqori qutbli erituvchi bo'lgan suv bilan ekstraksiya qilingan Cistanche tubulosa bioaktiv birikmalari kuchli saratonga qarshi bioaktivlikni ko'rsatdi. Biz ilgari suvda erigan Cistanche tubulosa samaradorligini metanol va etil asetat kabi boshqa erituvchilarga nisbatan solishtirgan edik, ammo suv ekstrakti saratonga qarshi eng istiqbolli faollikni namoyish etdi (ma'lumotlar ko'rsatilmagan).

Biz CTE ning 1 mg/ml va 2 mg/ml dozalarida birlamchi va metastatik yo'g'on ichak saratoni hujayralarining o'sishining 60 foizini inhibe qilish qobiliyatini ko'rsatdik, bu Cistanche tubulosa-ning yo'g'on ichak saratonini davolashda potentsial muhim rolini ochib berdi. Oddiy hujayralar bilan solishtirganda, saraton hujayralari odatda redoks gomeostazining buzilishi bilan tavsiflanadi va hozirgi saratonga qarshi terapiyaning umumiy strategiyasi hujayra oksidlovchi stressini oshirishdir (Yang va boshqalar, 2013). ROS ning fiziologik jihatdan past darajalari signalizatsiya molekulalari sifatida muhim rol o'ynasa-da, haddan tashqari ROS ishlab chiqarilishi saratonning beqarorligi va malignitesiga hissa qo'shishi mumkin (Liou va Storz, 2010). Ajablanarlisi shundaki, hujayrali redoks gomeostazidagi bu nomutanosiblik saraton hujayralarini ROS tomonidan qo'zg'atilgan hujayra o'limiga nisbatan zaifroq qiladi (Jaganjac va boshq., 2008; Nogueira va Hay, 2013). Ushbu tadqiqotda ko'rsatilgan CTE ning antiproliferativ ta'siri apoptozda muhim rol o'ynaydigan bir nechta yo'llarni maqsad qilib olgan ekstrakt ichidagi ma'lum va noma'lum birikmalarning turli xil ekstra- va hujayra ichidagi mexanizmlari orqali amalga oshirilishi mumkin. Hujayra o'limining turli usullarini farqlash uchun biz kuzatilgan CTE tomonidan qo'zg'atilgan sitotoksiklik uchun javobgar bo'lgan potentsial mexanizmni o'rganib chiqdik.

Bizning ma'lumotlarimiz shuni ko'rsatadiki, CTE hujayra ichidagi ROS ishlab chiqarishni oshiradi va natijada ROS tufayli hujayra o'limiga olib keladi. Hujayraning redoks holati apoptozni tartibga solishda ham hal qiluvchi rol o'ynaydi va mitoxondriyal elektron tashish zanjiri hujayrali ROS hosil bo'lishining asosiy joylaridan biridir (Trachootham va boshq., 2008). Bundan tashqari, hujayra ichidagi ROS ham mitoxondriyaga bog'liq, ham mustaqil yo'llar orqali hujayra apoptoziga olib kelishi mumkin (Sinha va boshq., 2013). Haqiqatan ham, bizning ma'lumotlarimiz shuni ko'rsatadiki, CTE tomonidan qo'zg'atilgan fosfatidilserinning tashqi ko'rinishi apoptozda, ham birlamchi, ham metastatik saraton hujayralarida keng tarqalgan ta'sir bo'lib, CTE sabab bo'lgan o'lim mexanizmi nekroz emas, balki apoptoz vositachiligida ekanligini ko'rsatadi. Saraton hujayralarida apoptozni faollashtirish tuzatish strategiyasidir va ko'plab antikanser dorilar saraton hujayralarida apoptotik ta'sir ko'rsatishi mumkin.

Shuning uchun saraton hujayralarida proapoptotik faollikka ega bo'lgan birikmalar yoki ekstraktlar saratonga qarshi dori tadqiqotlarida potentsial foydalidir (Wong, 2011). CTE tomonidan qo'zg'atilgan proapoptotik ta'sir mitoxondriya tomonidan qo'zg'atilgan ROS mexanizmi orqali vositachilik qiladimi yoki yo'qligini aniqlash uchun biz CTE bilan davolash qilingan hujayralardagi mitoxondriyaga mo'ljallangan lyuminestsent zond yordamida superoksid ishlab chiqarishni o'lchadik. Bizning ma'lumotlarimiz aniq ko'rsatadiki, CTE mitoxondriyal superoksid ishlab chiqarishni rag'batlantiradi, bu Cistanche tubulosa saratonga qarshi faolligi hech bo'lmaganda qisman mitoxondriya tomonidan qo'zg'atilgan ROS mexanizmi orqali vositachilik qilishini ko'rsatadi.

XULOSALAR

Xulosa qilib aytganda, bizning ma'lumotlarimiz shuni ko'rsatadiki, Cistanche tubulosa cho'l o'simlikining suv ekstrakti yo'g'on ichak saratonining oldini olish va davolash uchun boshqa an'anaviy davolash usullari bilan birgalikda saratonga qarshi yondashuv uchun istiqbolli nomzod bo'lishi mumkin. Shuningdek, biz o'simlik ekstraktining saraton hujayralariga qarshi toksikligi hujayra ichidagi ROS ishlab chiqarishning ko'payishi va hech bo'lmaganda qisman mitoxondriyaga bog'liq apoptoz bilan bog'liqligini ko'rsatamiz. Saratonga qarshi faollik uchun mas'ul bo'lgan individual biologik faol tarkibiy qismlarni ajratish va tavsiflash bo'yicha keyingi tadqiqotlar davom etmoqda.

Ushbu ekstraktdan samarali kimyopreventiv vosita sifatida potentsial foydalanishni baholash va molekulyar darajada yo'g'on ichak saratoni hujayralariga ta'sir qilish mexanizmlarini tushunish uchun ko'proq tadqiqotlar talab etiladi. Cistanche tubulosa ning saraton kasalligining oldini olish uchun kuzatilgan foydali ta'sirini tasdiqlash uchun keyingi klinik va klinik tadqiqotlar ham talab qilinadi.

MAQDAT

Moliyaviy yordam va homiylik: Ushbu tadqiqot Qatar antidoping laboratoriyasi tomonidan qo'llab-quvvatlandi.

Manfaatlar to'qnashuvi: Mualliflar manfaatlar to'qnashuvi yo'qligini e'lon qilmaydi.

ADABIYOTLAR

Balunas MJ, Kinghorn, AD. Dorivor o'simliklardan dori kashfiyoti. Hayot fanlari. 2005;78:431-41.

Brenner H, Kloor M, Pox CP. Kolorektal saraton. Lancet 2014;383,1490-502.

Cindric M, Cipak A, Zapletal E, Jaganjac M, Milkovic L, Waeg G, Stolc S, Zarkovic N, Suzana Borovic S. Stobadine 4-gidroksinonenal sabab bo'lgan ichak to'sig'i modelining buzilishini susaytiradi. Toxicol In Vitro. 2013;27:426-32.

Cragg GM, Nyuman DJ. O'simliklar saratonga qarshi vositalar manbai sifatida.JEthnofarmakol. 2005;100:72-9.

da Rocha AB, Lopes RM, Schwartsmann G. Antikanser terapiyasida tabiiy mahsulotlar. CurrOpinPharmakol. 2001;1:364-9. Jaganjac M, Matijevic T, Cindric M, Cipak A, Mrakovcic L, Gubisch W, Zarkovic N. Inson embrion buyrak hujayralarida 4-gidroksi-2- nominal bilan CMV-1 promouterining induktsiyasi. Acta Biochim Pol. 2010;57:179-83.

Jaganjac M, Poljak-Blazi M, Zarkovic K, Schaur RJ, Zarkovic N. Walker 256 karsinomasining spontan regressiyasida granulotsitlarning ishtiroki. Saraton Lett. 2008;260:180-6

Jiang Y, Tu PF. Cistanche turlarida kimyoviy tarkibiy qismlarni tahlil qilish. J Chromatogr A. 2009;1216:1970-9.

Liou GY, Storz P. Saratondagi reaktiv kislorod turlari. Erkin Radic Res. 2010;44:479-96.

Morikava T, Pan Y, Ninomiya K, Imura K, Matsuda H, Yoshikawa M, Yuan D, Muraoka O. Cistanche tubulosa cho'l o'simligidan gepatoprotektiv faollikka ega asillangan feniletanoid aminoglikozidlar. Bioorg Med Chem. 2010;18:1882-90.

Nogueira V, Hay N. Molekulyar yo'llar: saraton hujayralarida reaktiv kislorod turlarining gomeostazasi va saraton terapiyasiga ta'siri. Clin Cancer Res. 2013;19:4309-14.

Poljak-Blazi M, Jaganjac M, Sabol I, Mihaljevic B, Matovina M, Grce M. Temir ionlarining reaktiv kislorod turlarini shakllantirishga ta'siri, bachadon bo'yni saratoni hujayralarining o'sishi va E6 / E7 onkogen ifodasi. Toxicol Vitro. 2011;25:160-6.

Saibu GM, Katerere DR, Rees DJG, Meyer M. Tulbaghia violacea barglari va lampalarining suv ekstraktining in vitro sitotoksik va pro-apoptotik ta'siri. J Etnofarmakol. 2015;164:203-9.

Sinha K, Das J, Pal PB, Sil PC. Oksidlanish stressi: apoptozning mitoxondriyaga bog'liq va mitoxondriyadan mustaqil yo'llari. Arch Toxicol.2013; 87:1157-80. Trachootham D, Lu W, Ogasawara MA, Nilsa RD, Huang P. Hujayra omon qolishini redoks tartibga solish. Antioksid redoks signali. 2008;10:1343- 74.

Weidner C, Rousseau M, Plauth A, Wowro SJ, Fischer C, Abdel-Aziz H, Sauer S. Melissa officinalis ekstrakti apoptozni keltirib chiqaradi va reaktiv kislorod turlarini shakllantirish orqali yo'g'on ichak saratoni hujayralarida proliferatsiyani inhibe qiladi. Fitomeditsina. 2015;22:262-70.

Vong RS. Saraton kasalligida apoptoz: patogenezdan davolashgacha. J ExpClin Saraton Res. 2011;30:87.

Vu SH, Chou FP, Chyau CC, Chen JH, Tu SF, Lin HH. Wasabia japoca ekstraktining Hep3B jigar saratoni hujayralarida ROS to'planishi, DNK shikastlanishi va p73-vositachi apoptoz orqali saratonga qarshi ta'siri. J Funktsional ovqatlar. 2015;14:445-55.

Xiong WT, Gu L, Vang C, Sun HX, Liu X. 2-toifa diabetik db / db sichqonlarida Cistanche tubulosa ning antihiperglisemik va hipolipidemik ta'siri. J Etnofarmakol. 2013;150:935-45.

Xu R, Sun S, Zhu W, Xu C, Liu Y, Shen L, Shi Y, Chen J. HPLC barmoq izi bilan birlashtirilgan Xitoyda turli Cistanche turlaridan etanol ekstraktlarining ko'p bosqichli infraqizil so'l barmoq izlari xususiyatlari. J Mol tuzilishi. 2014;1069:236-244.

Yang Y, Karaxanova S, Verner J, Bazhin AV. Saraton biologiyasi va antikanser terapiyasida reaktiv kislorod turlari. Curr Med Chem. 2013;20:3677-92.

Yoshikawa M, Matsuda H, Morikawa T, Xie H, Nakamura S, Muraoka O. Feniletanoid aminoglikozidlar va Cistanche tubulosa dan vazorelaksant faolligi bilan asillangan oligo shakarlari. Bioorg Med Chem. 2006;14:7468-75.

For more information:1950477648nn@gmail.com