Cistanches Herba mitoxondrial ajralish orqali yuqori yog'li dietadan kelib chiqqan semirib ketgan sichqonlarning vazn ortishini kamaytiradi
Mar 24, 2022
Aloqa: Audrey Xu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com
Xoy Shan Vong, Jixan Chen, Pou Kuan Leong, Xoy Yan Leung, Wing Man Chan, Kam Ming Ko
* Gonkong Fan va Texnologiya Universitetining Hayotiy fanlar bo'limi, Gonkong, Xitoy.
Annotatsiya:
dan ajratilgan yarim tozalangan fraksiyaCistanchesHerba(HCF1) ilgari H9c2 hujayralarida va kalamush yuraklarida mitoxondrial ajralishni keltirib chiqarishi aniqlangan. Shuning uchun biz HCF1 yuqori yog'li dietaga (HFD) kelib chiqqan semirishga qarshi vazn yo'qotish ta'sirini keltirib chiqarishi haqida faraz qildik. Ushbu gipotezani sinab ko'rish uchun HFD bilan bog'liq semirishning sichqoncha modeli yaratildi va HCF1 ning normal ovqatlanish (ND) va HFD bilan oziqlangan sichqonlarga ta'siri tekshirildi. Tadqiqotda uzoq muddatli HCF1 davolash erkak va urg'ochi sichqonlarda HFD sabab bo'lgan semirishga qarshi vaznni kamaytirish ta'sirini keltirib chiqardi. HCF{13}}qo'zg'atuvchi vazn yo'qotishi HFD bilan oziqlangan hayvonlarda insulin sezgirligining oshishi bilan bog'liq edi. HCF1 tomonidan taqdim etilgan vaznni kamaytirish ta'siri ostida yotgan ta'sir mexanizmini tushunish uchun uning mitoxondrial ajralishga ta'siri ko'rib chiqildi. Shuningdek, safro kislotasi sekvestri bo'lgan xolestiramin (KT) bilan qiyosiy tadqiqot o'tkazildi. Topilmalar shuni ko'rsatdiki, HCF{16}}qo'zg'atilgan vazn yo'qotish energiya iste'molining ortishi, ehtimol sichqon skelet mushaklaridagi mitoxondrial ajralish induksiyasi orqali sodir bo'lgan. Shunday qilib, bizning topilmalarimiz semizlik va diabet, yurak-qon tomir kasalliklari va metabolik sindrom kabi salomatlik oqibatlarini oldini olish uchun HCF1 dan potentsial foydalanishni taklif qiladi.
Kalit so‘zlar: Cistanches Herba, Og'irlikni nazorat qilish,Mitoxondrial ajralish,Mitoxondrial ajratuvchi oqsil 3
cistanche tubolosa sog'liq uchun foydalari
Chengdu Wecistanche asosan sog'lom hayot uchun Cistanche mahsulotlarini ishlab chiqaradi.
Kirish
Semirib ketish sog'likka salbiy ta'sir ko'rsatadigan yog' to'qimalarida va boshqa organlarda g'ayritabiiy to'planishi bilan tavsiflanadi. Mavjud topilmalar shuni ko'rsatdiki, badavlat jamiyatlarda harakatsiz turmush tarzi va ovqatlanish tarkibidagi o'zgarishlar semizlik epidemiyasini keltirib chiqardi va shu bilan birga metabolik sindrom kabi turli yuqumli bo'lmagan semirish bilan bog'liq surunkali kasalliklarning ko'payishi kuzatildi (Shi va boshq., 2012). . 2007 yilda o'tkazilgan Milliy salomatlik va ovqatlanish ekspertizasi so'rovi (NHANES) global semirishning tarqalishi 30 foizdan ortiq ekanligini ko'rsatdi va keyingi yigirma yil ichida uning yana 33 foizga oshishi kutilmoqda (Finkelshteyn va boshq., 2012). Semirib ketishning boshlanishi yosh populyatsiyalarga ham o'tadi, bu bolalar va o'smirlardagi ortiqcha vazn va semirish tendentsiyalarida aks etadi (McTigue, Garrett, & Popkin, 2002). Ushbu topilmalar semizlik uchun tibbiy yordamning mumkin bo'lgan yukini va u bilan bog'liq sog'liq uchun oqibatlarini bashorat qiladi, bu esa semirib ketgan aholi sonini zudlik bilan nazorat qilish zarurligini anglatadi.
Semirib ketishni boshqarish uzoq muddatli aralashuvni va ko'p intizomli yondashuvni talab qiladi. Semirib ketish epidemiyasini hisobga olgan holda, mumkin bo'lgan terapevtik va/yoki terapevtik aralashuvlarni izlash intensiv tadqiqot sohasi bo'ldi. Strategiya asosan energiya sarfini oshirish yoki energiya iste'molini kamaytirish orqali energiya balansini o'rnatishga qaratilgan. Turli xil yondashuvlar orasida dietani almashtirish, jismoniy mashqlar qilish, ichakning so'rilishini inhibe qilish va simpatik asab tizimini faollashtirish, kimyoviy ajratgichni qo'llash yoki mitoxondriyal ajratuvchi oqsillarni induktsiya qilish orqali mitoxondrial ajralishni induktsiya qilish (Cerqueira, Laurindo, & Laurindo). Kowaltowski, 2011; Clapham va boshq., 2000) vazn yo'qotish uchun samarali vosita ekanligi isbotlangan (Clapham va boshq., 2000; Diehl & Hoek, 1999; Harper, Dickinson, & Brand, 2001; Li va boshqalar, 2000). Mitoxondriyal ajralish deganda energiya hosil qiluvchi elektron tashish jarayonlari va mitoxondriyadagi ADP fosforillanishi o'rtasidagi uzilishga olib keladigan jarayon tushuniladi. Muqobil proton o'tkazuvchanlik yo'lini taklif qilish orqali mitoxondrial ajralish proton gradientining tarqalishiga va kislorod iste'molining tezroq tezligiga olib keladi (Brand va boshq., 2005). Ajralish holatida ATP sintezining pasayishi mitoxondriyal membrana potentsialining pasayishi bilan bog'liq bo'lib, proton gradientida saqlanadigan potentsial energiya issiqlik sifatida tarqaladi. Proton tashishning bu befoyda aylanishi turli to'qimalarda, ayniqsa metabolizmda hosil bo'ladigan umumiy energiyaning taxminan 20 foizini iste'mol qiladigan skelet mushaklarida metabolik energiyaning yuqori qismini iste'mol qiladi (Chan, Wei, Chigurupati, & Tu, 2010; Korshunov, Skulachev va Starkoc). , 1997). Mitoxondriyal proton qochqinning modulyatsiyasi bazal metabolizm tezligini oshiradi, bu esa kunlik energiya sarfining muhim qismini tashkil qiladi, keyinchalik yoqilg'i molekulalarini (yog 'kislotalari kabi) foydalanishni oshiradi va shuning uchun kilogramm halok bo'lishiga olib keladi (Ricquier & Bouillaud, 2000). ).
Cistanches Herba, Cistanche deserticola YC Ma oʻsimligining quritilgan butun oʻsimligi, anʼanaviy xitoy tibbiyotida “Yangni tetiklantiruvchi” tonik oʻsimlik hisoblanadi. Xitoyda yuzlab yillar davomida o't buyrak etishmovchiligini davolash uchun sog'lom oziq-ovqat sifatida ishlatilgan. Bizning so'nggi topilmalarimiz shuni ko'rsatdiki, Cistanches Herba (HCF1) ning yarim tozalangan qismi H9c2 hujayralarida va kalamush yuraklarida mitoxondrial ajralishni keltirib chiqardi (Wong & Ko, 2013). Shuningdek, HCF1 bilan uzoq muddatli davolash (1,14 va 11,4 mg/kg sutkalik dozalarda; 14 kun ketma-ket) kalamushlarda buyrak va jigardan ajratilgan mitoxondriyalarga ajratuvchi ta'sir ko'rsatishi ko'rsatildi, buni bilvosita bularda ATP darajasining pasayishi tasdiqlaydi. to'qimalar (nashr qilinmagan ma'lumotlar). Mitoxondriyal ajralish induksiyasi vazn yo'qotish uchun samarali vosita ekanligini hisobga olsak (Clapham va boshq., 2000; Diehl & Hoek, 1999; Harper va boshq., 2001; Li va boshq., 2000), biz HCF1 ham ishlab chiqarishini taxmin qildik. skelet mushaklaridagi mitoxondriyalarning ajralishi, natijada vaznning pasayishi. Gipotezani sinab ko'rish uchun yuqori yog'li dietani (HFD) keltirib chiqaradigan semirishning sichqoncha modeli yaratildi va HCF1 ning normal ovqatlanish (ND) va HFD bilan oziqlangan sichqonlarga ta'siri o'rganildi. Bundan tashqari, HCF1 va safro kislotasi sekvestr xolestiramin (CT) ta'siri o'rtasidagi qiyosiy tadqiqot (Chen va boshq., 2010; Yamato va boshq., 2012) HCF1 tomonidan taqdim etilgan vaznni kamaytirish ta'sirini tavsiflash uchun ham o'tkazildi.
cistanche poyasi
2. Materiallar va usullar
2.1. O'simlik ekstrakti
Cistanches Herba, Cistanches deserticola YC Ma (Orobanchaceae) ning quritilgan butun o'simligi mahalliy o'simliklar sotuvchisidan (Li Hoong Ki) sotib olingan. O't yetkazib beruvchi tomonidan tasdiqlangan va vaucher namunasi (HKUST00301) Gonkong Fan va Texnologiya Universiteti (HKUST) Hayotiy fanlar bo'limiga saqlangan. Cistanches Herba etanol ekstrakti yuqorida tavsiflanganidek (Leung & Ko, 2008) 14 foiz (w/w) hosildorlik bilan 2 soat davomida qayta oqim ostida 78 daraja qizdirish yo'li bilan maydalangan o'simlik materialidan etanol ekstraksiyasi orqali olingan. Ekstrakt silika jeli xromatografiyasi yordamida qo'shimcha fraktsiyalangan (Wong & Ko, 2013). Ekstraksiya hosildorligi 1,14 foiz bo'lgan HCF1 olindi. Ekstrakt erituvchini 50 daraja past bosim ostida bug'lash orqali quritilgan va quritilgan ekstrakt ishlatilgunga qadar -20 darajada saqlanadi.
2.2. Kimyoviy moddalar
Bio-Rad tahlil reaktivi Bio-Rad Laboratories (Richmond, CA, AQSh) dan sotib olingan. LabAssay™ Triglitserid (290-63701), LabAssay™ Xolesterin (294-65801) va HDL-Xolesterol E test to'plami (431-52501) Wako'dan (Osaka, Yaponiya) xarid qilingan. Anti UCP3 (E-18) antikori (katalog # sc-31387) Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, AQSH) dan xarid qilingan. Boshqa barcha kimyoviy moddalar Sigma kompaniyasidan (Sent-Luis, MO, AQSh) sotib olingan.
2.3. Hayvonlarga g'amxo'rlik qilish
ICR sichqonlari (8 hafta; erkaklar uchun 30-35 g va urg'ochilar uchun 25-30 g) taxminan 22 daraja havo/namlik bilan boshqariladigan xonada 12- soat qorong'i/yorug'lik aylanishi ostida saqlangan va oziq-ovqat va ruxsat etilgan. HKUST da Hayvonlar va o'simliklarni parvarish qilish muassasalarida (APCF) ad libitum suv. Barcha eksperimental protseduralar Tadqiqot Amaliyoti Qo'mitasi (HKUST) tomonidan tasdiqlangan (Hayvonlar protokolini tasdiqlash № 2013049; tasdiqlangan sana: 2013 yil 25 sentyabr; tajriba muddati: 3 yil).
cistanche umrini uzaytirish
2.4. Davolash protokoli
HCF1 ning HFD sabab bo'lgan semirishga ta'sirini o'rganish uchun erkak yoki urg'ochi ICR sichqonlari tasodifiy sakkizta guruhga ajratildi, har birida 10-15 sichqon: (1) Oddiy ovqatlanish (ND, yog'dan olingan 13 foiz energiya) nazorati; (2) ND plus HCF1 ning past dozasi (HCF1 L) (kunlik dozasi 1,5 mg/kg); (3) ND plus HCF1 ning o'rta dozasi (HCF1 M) (kunlik dozasi 15 mg/kg); (4) ND plus HCF1 ning yuqori dozasi (HCF1 H) (kunlik dozasi 45 mg/kg); (5) HFD (yog'dan olingan energiyaning 60 foizi; Research Diet Inc.dan sotib olingan, mahsulot № D12492) nazorati; (6) HFD va HCF1 L; (7) HFD va HCF1 M; va (8) HFD plyus HCF1 H. Ratsionga nisbatan sezgirlikdagi gender farqlari tufayli kalamushlar va odamlarda tana vaznining o'zgarishi va vaznni kamaytirish choralari qayd etilgan (Rodriguez va Palou, 2004; Rodriguez, Quevedo-Coli, Roca va Palou, 2001), biz HCF1 ning erkak va urg'ochi sichqonlarga ta'sirini o'rganishga qiziqdik. HCF1 dozalari kalamush yuraklarini mitoxondrial ajratishni qo'zg'atish uchun uning samarali dozalaridan olingan (Wong & Ko, 2013). HCF1 bilan birgalikda davolash guruhlarida sichqonlar 8 hafta davomida haftasiga 5 kun (ya'ni, 40 doza) HCF1 bilan intragastrik tarzda yuborildi. Nazorat qiluvchi sichqonlar faqat transport vositasini (zaytun moyi) oldi. Tajriba davomida sichqonlarning tana vazni va oziq-ovqat iste'moli har hafta kuzatildi. Tana vaznidagi o'zgarishlar vaqtga (1-8 hafta) nisbatan boshlang'ich tana og'irligi foizini ko'rsatadigan grafikning egri chizig'i ostidagi maydonni (AUC) hisoblash yo'li bilan aniqlangan va ixtiyoriy birliklarda ifodalangan. Qon namunalari HCF1 ning oxirgi dozasidan 24 soat o'tgach, tunda och qolgan, fenobarbital-anesteziyalangan sichqonlardan yurak ponksiyoni bilan olingan. Keyin sichqonlar bachadon bo'yni dislokatsiyasi bilan qurbon qilindi. Qo'shimcha biokimyoviy tahlil qilish uchun gastroknemius mushaklarining namunalari kesildi. Yog 'yostiqchalari (gonadal, retroperitoneal va tutqich yog'i) ajratildi va tortildi. Muayyan yog 'yostig'i vaznining tana vazniga nisbati hisoblab chiqilgan va yog' yostig'i indeksi sifatida ifodalangan. KT ning HFD bilan oziqlangan semiz erkak sichqonlarga ta'sirini o'rganish uchun erkak sichqonlar 300 mg / kg sutkalik dozada CT (suvda to'xtatilgan) bilan intragastral tarzda qo'llanildi.
2.5. Tayyorgarlik namunalari
Plazma namunalari, skelet mushaklari homogenatlari (yadrosiz fraksiya) va skelet mushaklari mitoxondriyalari ilgari tasvirlanganidek olingan (Leong va boshq., 2013).
2.6. Biokimyoviy tahlil
2.6.1. Plazma glyukoza va lipid tarkibi
Plazmadagi glyukoza darajasi glyukoza (geksokinaza) tahlil to'plami (Sigma, Sent-Luis, MO, AQSh) bilan o'lchandi. Glyukoza miqdori 1,5 mM NAD, 1.{3}} mM ATP, 1.0 birlik/ml geksokinaza va 1.0 birlik/ boʻlgan reaksiya aralashmasi qoʻshilishi bilan baholandi. ml glyukoza{8}}fosfatdehidrogenaza. 340 nm da yutilish o'zgarishlari Victor V3 Multi-Label Counter (Perkin Elmer, Santa Clara, CA, AQSH) tomonidan spektrofotometrik tarzda kuzatildi.
Plazma triglitseridlari (TG), umumiy xolesterin (TC) va yuqori zichlikdagi lipoprotein-xolesterin (HDL) darajalari tahlil to'plamlari yordamida o'lchandi: TG: LabAssayTM Triglitserid, TC: LabAssayTM Xolesterin; HDL-C: HDL-xolesterol E test to'plami. TG, TC va HDL tarkibi tegishli tahlil to'plamlari tomonidan taqdim etilgan xromogen reagentlarni qo'shish orqali baholandi. 600 nm da yutilish o'zgarishlari kuzatildi (Siddiqua, Hamid, Ar-Rashid, Akther, & Choudhuri, 2010). Past zichlikdagi lipoprotein-xolesterin (LDL) darajasi Fridevald formulasi bo'yicha baholandi:
LDL= TC-( HDL plus TG/5 )
2.6.2. Skelet mushaklarida fosfofruktokinaz (PFK) faoliyati
PFK faolligi 1 mM fruktoza{1}}fosfat, 1 mM ATP, 0, 5 mM NADH, 2 mU/ml aldolaza, 2 mU/ml triosefosfat izomeraza, 2 mU o'z ichiga olgan reaksiya aralashmasini aralashtirish orqali baholandi. Tahlil tamponidagi /ml glitserofosfat dehidrogenaza (50 mM Tris-HCl, 5 mM MgCl2, 5 mM (NH4) 2SO4, pH 7.4) beshinchi hajmdagi skelet mushaklarining yadrosiz fraktsiyasi (50 ug protein / ml) bilan 200 mkl. Keyin NADH oksidlanishi 340 nm da absorbans o'zgarishlarini kuzatish orqali o'lchandi (Coelho, Costa, & Sola-Penna, 2007).
2.6.3. Sitrat sintaza (CS) faoliyati
CS faolligini o'lchash uchun reaksiya aralashmasi {0}}.1 M Tris buferi (pH 8.0), 0.058 mM atsetilni aralashtirish orqali tayyorlandi. -CoA va 0,1 mM 5,5'-ditiobis-(2-nitrobenzoy kislotasi) (DTNB). Reaksiya oksaloatsetat qo'shilishi bilan boshlandi (yakuniy konsentratsiya: 0,5 mM). 412 nm chastotada yutilish har 30 soniyada 30 daraja haroratda 3 minut davomida qayd etilgan (Karter, Renni, Hamilton va Tarnopolskiy, 2001; Holloway, Bonen va Spriet, 2009).
cistanche tubolosa sog'liq uchun foydalari
2.6.4. -gidroksi asil-koenzim A dehidrogenaza (-HAD) faolligi
-HAD faolligi 100 mkM asetoatsetil-KoA va 100 mkM -NADH o'z ichiga olgan reaksiya aralashmasini tahlil tamponida (100 mM kaliy fosfat buferi, 2 mM etilendiamintetraasetik kislota (EDTA), pH 7,3) aralashtirish orqali o'lchandi. 340 nmdagi absorbans o'zgarishlari 30 darajada 2 daqiqa davomida kuzatildi (Holloway va boshq., 2006).
2.6.5. Karnitin palmitoiltransferaza (CPT) faoliyati
CPT faolligini baholash palmitil-KoA dan CoA-SH ni CPT-katalizlangan ishlab chiqarishga asoslangan. Reaksiya L-karnitinni (yakuniy konsentratsiya 6 mkM) reaksiya aralashmasiga (16 mM Tris, 2,5 mM EDTA, 2 mM DTNB va 5 0 mkM palmitoil-CoA, pH 8,0) qo‘shish orqali boshlandi. 412 nm da absorbans 180 s davomida 30 gradusda kuzatildi. Ferment faolligini baholash uchun 5'-tio{22}}nitrobenzoat (yakuniy mahsulot) uchun millimolyar so'nish koeffitsienti 13,6 mM−1 sm−1 ishlatilgan. CPT faolligining bir birligi 1 daqiqada 1 nmol CoA-SH ning chiqarilishini katalizlovchi ferment miqdori sifatida aniqlanadi (Karlic, Lohninger, Koeck va Lohninger, 2002).
2.6.6. Mitoxondrial nafas olish
Sichqoncha skelet mushaklaridan ajratilgan mitoxondriyadagi nafas olish tezligi Vong va Ko (2013) tomonidan tavsiflanganidek aniqlangan. Qisqacha aytganda, mitoxondriyal nafas olish polarografik tarzda Klark tipidagi elektrod (Hansatech Instruments, Norfolk) tomonidan 30 darajada o'lchandi. Mitoxondriyal fraktsiya (1 mg protein/ml) nafas olish tamponida (30 mM KCl, 6 mM MgCl2, 75 mM saxaroza, 1 mM EDTA, 20 mM KH2PO4, pH 7.0) inkubatsiya qilindi. 15 mM natriy piruvat va 5 mM natriy malatni o'z ichiga olgan substrat eritmasi qo'shildi. Muvozanatdan so'ng, 3-holat nafas olish ADP qo'shilishi bilan boshlandi (yakuniy konsentratsiya 0,6 mM). Barcha qo'shilgan ADP ATP hosil bo'lishi uchun sarflanganda, oligomisin 4-davlat nafasini qo'zg'atish uchun qo'shildi. Nafas olishni nazorat qilish nisbati (RCR) 3-davlatning 4-davlat nafas olish tezligining nisbatini hisoblash yo'li bilan hisoblangan (Jiang va boshq., 2009).
2.6.7. UCP3 ifodasi
UCP3 darajasi anti-UCP3 (E-18) antikoridan foydalangan holda Western blot tahlili orqali mitoxondriyal fraktsiyaning SDS-PAGE tahlilidan so'ng, 10 foizli akrilamiddan iborat ajratuvchi jel yordamida baholandi. Sichqoncha skelet mushaklaridan (100 g) ajratilgan mitoxondriyal fraktsiyalar yuklangan va sitoxrom c oksidaza (COX) mos yozuvlar uchun marker sifatida ishlatilgan. Immunitet bilan bo'yalgan oqsil guruhlari densitometriya (Quantiscan, Biosoft, Cam bridge, GB, Buyuk Britaniya) bilan tahlil qilindi va UCP3 miqdori (ixtiyoriy birliklar) namunadagi COX darajasiga (ixtiyoriy birliklar) mos ravishda normallashtirildi.
2.7. Protein tahlili
Protein kontsentratsiyasi Bio-Rad protein tahlili to'plami yordamida aniqlandi. Protein kontsentratsiyasi standart sifatida sigir zardobidagi albumin (BSA) yordamida kalibrlash egri chizig'idan aniqlandi.
2.8. Statistik tahlil
Barcha ma'lumotlar, agar boshqacha ko'rsatilmagan bo'lsa, o'rtacha ± standart xato (SEM) sifatida ifodalangan. Ma'lumotlar dispersiyaning bir tomonlama tahlili (bir tomonlama ANOVA) orqali tahlil qilindi va guruhlararo farq p < 0.05="" bo'lganda="" tukey="" diapazoni="" testi="" bilan="">
Cistanche o't
3. Natijalar
3.1. HCF1 ning ND bilan oziqlangan va HFD bilan oziqlangan sichqonlarda tana vazniga ta'siri
ND dietasi bilan oziqlantirish 8-haftalik tajriba davomida erkak va urg'ochi sichqonlarda tana vaznining biroz oshishiga (mos ravishda 13 va 10 foizga) sabab bo'ldi (1a-rasm). HFD tana vaznining o'sishini tezlashtirdi, stimulyatsiya darajasi tegishli ND hayvonlari bilan solishtirganda, erkak va urg'ochi sichqonlarda mos ravishda 269 foiz va 320 foizni tashkil etdi (1a-rasm). Tajriba davomida 8-hafta davomida tana vaznidagi oʻzgarishlar miqdoriy aniqlandi va ixtiyoriy birliklarda ifodalandi. HCF1 bilan davolash ND bilan oziqlangan erkak sichqonlarda tana vaznining o'sishini butunlay bostirdi (1b-rasm). HCF1 bilan davolash, shuningdek, HFD bilan oziqlangan sichqonlarda tana vaznining oshishini dozaga bog'liq holda bostirdi, bunda inhibisyon darajasi mos ravishda 100 foiz va 61 foizni tashkil etdi, erkak va urg'ochi sichqonlarda 45 mg/kg (1b-rasm). Davolanmagan ND bilan oziqlangan sichqonlar bilan solishtirganda, HFD bilan oziqlantirish va/yoki HCF1 bilan birgalikda davolashda oziq-ovqat iste'molida sezilarli o'zgarishlar kuzatilmadi (ma'lumotlar ko'rsatilmagan).
1-rasm - HCF1 ning ND-oziqlangan va HFD-oziqlangan sichqonlarda tana vaznining o'zgarishiga ta'siri. Tana vazni 8-haftalik tajriba davomida har hafta kuzatildi. (a) Tana vaznining o'zgarishi vaqt kursi aralash dizayn ANOVA tomonidan tahlil qilindi va guruhlararo farq Tukey diapazoni testi bilan aniqlandi. Ma'lumotlar tegishli boshlang'ich tana vazniga nisbatan foiz nazoratida ifodalangan. (b) Tana vaznidagi o'zgarishlar Materiallar va usullarda tavsiflanganidek hisoblangan. Ma'lumotlar ND nazorati [nazorat AUC qiymati (ixtiyoriy birlik): erkak=777.6 ± 10.4; ayol {{10}}.0 ± 8,0]. Berilgan qiymatlar oʻrtacha ± SEM, n=15 bilan. * ND nazoratidan sezilarli darajada farq qiladi; # HFD boshqaruvidan sezilarli darajada farq qiladi (p <>
3.2. HCF1 ning ND-oziqlangan va HFD-oziqlangan sichqonlarda yog 'yostig'i indekslariga ta'siri
HCF1 ning yog 'to'planishiga ta'siri ham tekshirildi. HFD erkaklar (mos ravishda 346 foiz va 325 foiz) va urg'ochi (mos ravishda 248 foiz va 257 foiz) sichqonlarda teri osti va visseral yog' indekslarining sezilarli o'sishiga olib keldi (2-rasm). HCF1 bilan davolash ND bilan oziqlangan sichqonlarda teri osti va visseral yog'larga hech qanday ta'sir ko'rsatmagan bo'lsa-da, HCF1 ning HFD tufayli tana vaznining ortishini inhibe qilish qobiliyati tanadagi yog 'massasining pasayishi bilan bog'liq edi, bu ikkalasining ham kamayishi bilan ko'rsatilgan. HFD bilan oziqlangan erkaklarda teri osti va visseral yog '(45 mg/kg da mos ravishda 42 va 49 foizga) va HFD bilan oziqlangan urg'ochi sichqonlarda visseral yog'da (53 foizga, 45 mg/kg) (2-rasm) .
2-rasm - HCF1 ning ND-oziqlangan va HFD-oziqlangan sichqonlarda yog 'yostig'i indekslariga ta'siri. Teri osti yog 'va visseral yog'ning massasi Materiallar va usullarda tavsiflanganidek o'lchandi. Ma'lumotlar ND nazoratiga nisbatan foiz nazoratida ifodalangan. Berilgan qiymatlar o'rtacha ± SEM, n=15 bilan. * ND nazoratidan sezilarli darajada farq qiladi; # HFD boshqaruvidan sezilarli darajada farq qiladi (p <>
3.3. HCF1 ning ND va HFD bilan oziqlangan sichqonlarda plazma glyukoza va lipid tarkibiga ta'siri
HCF1 bilan davolash ND bilan oziqlangan erkak va urg'ochi sichqonlarda plazma glyukoza va lipid tarkibini o'zgartirmadi (3-rasm). HFD bilan oziqlantirish, tegishli ND nazorati bilan solishtirganda, erkak va urg'ochi sichqonlarda plazma glyukoza darajasining sezilarli darajada oshishiga olib keldi (mos ravishda 39 foiz va 29 foiz). HCF1 H erkak va urg'ochi sichqonlarda plazma glyukoza darajasida HFD sabab bo'lgan ko'tarilishni (mos ravishda 41 va 64 foizga) o'zgartirdi (3a-rasm). HFD, shuningdek, tegishli ND nazorati bilan solishtirganda, erkak va urg'ochi sichqonlarda plazma TG darajasini (mos ravishda 38 va 53 foizga) sezilarli darajada oshirdi (3b-rasm). HCF1 L va HCF1 M sichqonlarda HFD bilan oziqlangan erkak (mos ravishda 135 va 192 foiz) va urg'ochi (mos ravishda 103 va 146 foiz) sichqonlarda plazma TG darajasining HFD tufayli kelib chiqqan ko'tarilishini sezilarli darajada inhibe qildi (3b-rasm). HCF1 H davolash qilinmagan HFD nazorati bilan solishtirganda, HFD bilan oziqlangan urg'ochi sichqonlarda plazma TG darajasining sezilarli darajada oshishiga (21 foizga) sabab bo'ldi (3b-rasm). Plazma TG ga qo'shimcha ravishda, HFD bilan oziqlantirishdan keyin plazma TC darajasining sezilarli o'sishi ham kuzatildi, o'sish darajasi erkak va urg'ochi sichqonlarda mos ravishda 73 va 100 foizni tashkil etdi (3c-rasm). Plazmadagi TC darajasining oshishi HFD bilan oziqlangan erkak (29 foiz) va urg'ochi (49 foiz) sichqonlarda plazma HDL/LDL nisbatining sezilarli pasayishi bilan bog'liq edi (3d-rasm). HCF1 M va HCF1 H HFD bilan oziqlangan erkak sichqonlarda plazmadagi TC darajasining HFD sabab bo'lgan o'sishini, davolanmagan HFD bilan solishtirganda plazma HDL / LDL nisbati (mos ravishda 255 foiz va 212 foiz) oshishi bilan kamaytirdi. nazorat qilish (3c va 3d-rasm). HCF1 L va HCF1 M urg'ochi sichqonlarda plazma TC darajasida HFD sabab bo'lgan ko'tarilishni (mos ravishda 22 va 32 foizga) bostirdi, plazma HDL/LDL nisbatida hech qanday o'zgarish kuzatilmadi (3c va 3d-rasm).
3-rasm - HCF1 ning ND-oziqlangan va HFD-oziqlangan sichqonlarda plazma glyukoza va lipid tarkibiga ta'siri. Plazma glyukoza, TG va TC darajasi Materiallar va usullarda tavsiflanganidek o'lchandi. Ma'lumotlar ND nazorati [nazorat plazma glyukoza darajasi (mg/dL) ga nisbatan foiz nazoratida ifodalangan: erkak=91,1 ± 3,3, ayol=86.0 ± 2,3; plazmadagi TG darajasini nazorat qilish (mg/dL): erkak=52.0 ± 1,7, ayol=95,8 ± 4,1; plazmadagi TC darajasini nazorat qilish (mg/dL): erkak {{2{29}}}},8 ± 4,3, ayol=118,6 ± 5,4]. Berilgan qiymatlar oʻrtacha ± SEM, n=15 bilan. * ND nazoratidan sezilarli darajada farq qiladi; # HFD boshqaruvidan sezilarli darajada farq qiladi (p <>
3.4. HCF1 ning ND va HFD bilan oziqlangan sichqonlarda jigar lipidlari tarkibiga ta'siri
HCF1 bilan davolash ND bilan oziqlangan sichqonlarda jigar TG va TC darajasini o'zgartirmadi (4-rasm). HFDni iste'mol qilish, tegishli ND nazorati bilan solishtirganda, erkak va urg'ochi sichqonlarda jigar TG darajasini sezilarli darajada oshirdi (mos ravishda 108 foizga va 135 foizga) (4a-rasm). HCF1 H, bir tomondan, davolanmagan HFD nazorati bilan solishtirganda, erkak sichqonlarda jigar TG darajasida HFD sabab bo'lgan ko'tarilishni (54 foizga) bostirdi (4a-rasm). Boshqa tomondan, HCF1 H tegishli davolanmagan HFD nazorati bilan solishtirganda, HFD bilan oziqlangan urg'ochi sichqonlarda jigar TG darajasini (14 foizga) oshirdi (4a-rasm). HFD shuningdek, erkak va urg'ochi sichqonlarda jigar TC darajasining sezilarli o'sishiga olib keldi (mos ravishda 48 va 26 foizga) (4b-rasm). HCF1 L va HCF1 H HFD bilan oziqlangan erkak sichqonlarda jigar TC darajasini sezilarli darajada (mos ravishda 42 va 44 foizga) bostirgan bo'lsa-da, faqat HCF1 H HFD bilan oziqlangan urg'ochi sichqonlarga xuddi shunday ta'sir ko'rsatishi mumkin edi. inhibisyon darajasi 62 foizni tashkil etadi (4b-rasm).
4-rasm - HCF1 ning ND-oziqlangan va HFD-oziqlangan sichqonlarda jigar lipidlari tarkibiga ta'siri. Jigar TG va TC darajalari Materiallar va usullarda tavsiflanganidek o'lchandi. Ma'lumotlar ND nazoratiga nisbatan foiz nazoratida ifodalangan [jigar TG darajasini nazorat qilish (g/mg protein): erkak=31,7 ± 1,6, ayol=38,5 ± 1,7; jigarda TC darajasini nazorat qilish (g/mg protein): erkak=12.8 ± 0.4, ayol=17.9 ± 1.2]. Berilgan qiymatlar oʻrtacha ± SEM, n {{20}} bilan. * ND nazoratidan sezilarli darajada farq qiladi; # HFD boshqaruvidan sezilarli darajada farq qiladi (p <>
3.5. HCF1 ning ND va HFD bilan oziqlangan sichqonlardan ajratilgan skelet mushaklaridagi metabolik ferment faolligiga ta'siri
HCF1 bilan davolash ND bilan oziqlangan erkak yoki urg'ochi sichqonlarning skelet mushaklarida PFK faolligini rag'batlantirdi, buning natijasida erkak sichqonlarga ta'siri sezilarli bo'ldi (45 mg / kg da 55 foizga 20 foizga o'sish) (5a-rasm). HFDni iste'mol qilish erkak va urg'ochi sichqonlarda PFK faolligini sezilarli darajada bostirishga olib keldi (mos ravishda 16 va 17 foizga) (5a-rasm). HCF1 H HFD bilan oziqlangan erkak va urg'ochi sichqonlarda PFK faolligining HFD tomonidan induktsiyalangan bostirilishini (mos ravishda 153 foizga va 100 foizga) o'zgartirdi (5a-rasm). Ham HFD, ham HCF1 bilan davolash, tegishli davolanmagan ND nazorati bilan solishtirganda, erkak yoki urg'ochi sichqonlarning skelet mushaklaridagi CS faolligiga aniq ta'sir ko'rsatmadi (5b-rasm). HCF1 ND bilan oziqlangan erkak yoki urg'ochi sichqonlarning skelet mushaklarining -HAD faolligiga hech qanday ta'sir ko'rsatmadi (5c-rasm). HFD bilan oziqlantirish davolash qilinmagan ND nazorati bilan solishtirganda erkak va urg'ochi sichqonlarda -HAD faolligini (mos ravishda 47 va 21 foizga) rag'batlantirdi (5c-rasm). HCF1, barcha sinovdan o'tgan dozalarda, davolash qilinmagan HFD nazorati bilan solishtirganda, erkak sichqonlarda -HAD faolligida HFD tomonidan qo'zg'atilgan stimulyatsiyani sezilarli darajada inhibe qildi, inhibisyon darajasi 62 foizni tashkil etdi (5c-rasm). HCF1 bilan davolash ND bilan oziqlangan va HFD bilan oziqlangan urg'ochi sichqonlarda -HAD faolligida sezilarli o'zgarishlarga olib kelmadi (5c-rasm). HCF1 H ND bilan oziqlangan erkak sichqonlarda skelet mushaklarining CPT faolligini (16 foizga) sezilarli darajada pasayishiga olib kelgan bo'lsa (5d-rasm), HCF1 L va HCF1 M ND bilan oziqlanganlarda CPT faolligini 24 foizga va 22 foizga sezilarli darajada oshirdi. SH nazorati bilan solishtirganda urg'ochi sichqonlar (5d-rasm). HFD bilan oziqlantirish, shuningdek, erkak va urg'ochi sichqonlarda CPT faolligini oshirdi (mos ravishda 13 foizga va 18 foizga). HCF1 HFD tomonidan CPT faolligining o'sishini bekor qildi, bostirish darajasi erkak sichqonlarda (barcha sinovdan o'tgan dozalarda) 72 foizni va urg'ochi sichqonlarda (HCF1 L) 100 foizni tashkil etdi (5d-rasm).
5-rasm - HCF1 ning ND-oziqlangan va HFD-oziqlangan sichqonlardan ajratilgan skelet mushaklaridagi metabolik ferment faolligiga ta'siri. Skelet mushaklari PFK, CS, -HAD va CPT faoliyati Materiallar va usullarda tavsiflanganidek o'lchandi. Ma'lumotlar ND nazorati [PFK faolligini nazorat qilish (mU/mg protein): erkak=19,5 ± 1,1, ayol=14,1 ± 0,7 bo'yicha ma'lumotlar foiz nazoratida ifodalangan. ; CS faolligini nazorat qilish (mU/mg protein): erkak=30.6 ± 1.3, ayol=36.8 ± 3.6; nazorat qilish -HAD faolligi (mU/mg protein): erkak=13.5 ± 0.6, ayol=16.8 ± 0.6; CPT faolligini nazorat qilish (mU/mg protein): erkak {{30}}.0 ± 0.3, ayol=3.0 ± { {39}}.1]. Berilgan qiymatlar oʻrtacha ± SEM, n=15 bilan. * ND nazoratidan sezilarli darajada farq qiladi; # HFD boshqaruvidan sezilarli darajada farq qiladi (p <>
3.6. Sichqoncha skelet mushaklarida HCF1 ning mitoxondrial RCRga ta'siri
HFD sichqonchaning skelet mushaklaridagi mitoxondriyal RCRga aniq ta'sir ko'rsatmadi (6-rasm). Sichqoncha skelet mushaklarida HCF1 bilan davolash natijasida mitoxondriyal ajralish, bu ND bilan oziqlangan (erkaklarda 61-69 foiz; ayollarda 66 foiz) va HFD bilan oziqlanadigan (erkaklarda 73-78 foiz; 67) mitoxondriyal RCRning sezilarli darajada pasayishi bilan tasdiqlanadi. -70% urg'ochilarda) sichqonlar, tegishli davolanmagan hayvonlar bilan solishtirganda (6-rasm).
6-rasm - HCF1 ning ND-oziqlangan va HFD-oziqlangan erkak va urg'ochi sichqonlarning skelet mushaklaridagi mitoxondrial RCRga ta'siri. Mitoxondriyal RCR Materiallar va usullarda tavsiflanganidek o'lchandi. Ma'lumotlar ND nazoratiga nisbatan foiz nazoratida ifodalangan. Berilgan qiymatlar o'rtacha ± SEM, n=15 bilan. * ND nazoratidan sezilarli darajada farq qiladi; # HFD boshqaruvidan sezilarli darajada farq qiladi (p <>
3.7. Sichqoncha skelet mushaklaridan ajratilgan mitoxondriyalarda HCF1 ning UCP3 ifodasiga ta'siri
HCF1 ning UCP3 ekspressiyasiga ta'siri, shuningdek, HCF{2}} sabab bo'lgan vazn yo'qotishida mitoxondriyal bo'linishning mumkin bo'lgan ishtirokini o'rganish uchun tekshirildi. HCF1 H ni bir 2-haftalik davolash erkak sichqonlarda sichqon skelet mushaklaridan ajratilgan mitoxondriyalarda UCP3 darajasini sezilarli darajada oshirdi, davolanmagan nazorat bilan solishtirganda stimulyatsiya darajasi 67 foizni tashkil etdi (7-rasm).
7-rasm - Sichqoncha skelet mushaklaridan ajratilgan mitoxondriyalarda HCF1 ning UCP3 ifodasiga ta'siri. Erkak sichqonlar 14 kun ketma-ket HCF1 H bilan intragastral tarzda qo'llanilgan. Materiallar va usullarda tavsiflanganidek, mitoxondriya ajratildi va UCP3 ifodasi Western blot tahlili bilan o'lchandi. Ma'lumotlar miqdori aniqlandi va ishlov berilmagan nazoratga nisbatan foiz nazoratida ifodalandi. Berilgan qiymatlar o'rtacha ± SEM, n=4 bilan. * Ishlov berilmagan nazoratdan sezilarli darajada farq qiladi.
3.8. HCF1 va CT o'rtasidagi ND-oziqlangan va HFD-oziqlangan sichqonlarga ta'siri bo'yicha taqqoslash
HCF1 tomonidan taqdim etilgan vaznni kamaytirish ta'siri ostida yotgan mexanizmni yaxshiroq tushunish uchun safro kislotasi sekestranti bo'lgan KT ning ND bilan oziqlangan va HFD bilan oziqlangan erkak sichqonlarga ta'siri ham o'rganildi. CT ham, HCF1 ham tajribaning 8-haftalik kursi davomida ND sabab bo'lgan vazn ortishini butunlay inhibe qildi. Ikkala muolaja ham HFD sabab bo'lgan tana vaznining o'sishiga, visseral yog' indeksiga, plazma glyukoza / TG / TC va jigar TG / TC darajasiga bostiruvchi ta'sir ko'rsatdi, bunda KT ta'siri yanada sezilarli (1-jadval). Faqat HFD bilan oziqlangan sichqonlarda plazma HDL / LDL nisbatini oshirgan HCF1 dan farqli o'laroq, KT ND bilan oziqlangan sichqonlarda ham, HFD bilan oziqlangan sichqonlarda ham plazma HDL / LDL nisbatini sezilarli darajada oshirdi (mos ravishda 58 foizga va 17 foizga). tegishli ishlov berilmagan ND nazorati (1-jadval). Bundan tashqari, HCF1 ND bilan oziqlangan (54 foiz) va HFD bilan oziqlangan (14 foiz) erkak sichqonlarning skelet mushaklarida PFK faolligini davolanmagan ND nazorati bilan solishtirganda oshirgan bo'lsa-da, KT ND bilan oziqlangan sichqonlarda aniq ta'sir ko'rsatmadi va faqat PFK faolligining HFD tufayli kelib chiqqan pasayishini ND bilan oziqlangan sichqonlarning nazorat qiymatiga qaytarishi mumkin edi (1-jadval). Ikkala KT va HCF1 bilan davolash erkaklar sichqonlarida HFD bilan bog'liq bo'lgan -HAD (mos ravishda 61 foiz va 60 foiz) va CPT (mos ravishda 122 foiz va 72 foiz) faolligini o'zgartirdi (1-jadval). ND va HFD bilan oziqlangan erkak sichqonlarda mitoxondriyal RCR qiymatining sezilarli pasayishi bilan isbotlanganidek, HCF1 mitoxondrial ajralishni keltirib chiqargan bo'lsa-da, KT mitoxondrial ajralishda aniq ta'sir ko'rsatmadi (1-jadval).
Qo'shimcha ma'lumot olish uchun II qismni olish uchun shu yerni bosing
Kimdan: "Cistanches Herba, ehtimol mitoxondrial ajralish orqali yuqori yog'li dietadan kelib chiqqan semiz sichqonlarda kilogramm ortishini kamaytiradi"Xoy Shan Vong va boshqalar.
---Funktsional oziq-ovqatlar jurnali 10 (2014) 292–304
