Cistanche deserticola sifatini nazorat qilish usullari

qo'shimcha ma'lumot uchun:ali.ma@wecistanche.com

Shi Ziyi, Vu Yun, Zhu Yuemei va boshqalar.

Xitoyning an'anaviy tibbiyotiCistanchening shirali poyasi hisoblanadiCistanche deserticolaYC Ma yoki Cisanche tubulosa (Schenk) Quruq chig'anoq barglari bilan Wight. Buyrak yangini tonish, mohiyat va qonni oziqlantirish, ichaklarni namlash va laksatiflar va hokazo funksiyalarga ega. U asosan buyrak yangining yetishmovchiligi, mohiyati va qon yetishmasligi, ojizlik va bepushtlik, bel va tizzaning og‘rig‘i va kuchsizligi, zaiflik uchun qo‘llaniladi. mushaklar va suyaklarning, ichakning quruqligi va ich qotishi. Zamonaviy farmakologik tadqiqotlar shuni ko'rsatadiCistanchejinsiy funktsiyani yaxshilash, Altsgeymer va Parkinson kasalligiga qarshi turish, o'rganish va xotira qobiliyatini yaxshilash, qarishga qarshi, charchoqqa qarshi, jigarni himoya qilish va laksatif kabi ko'plab funktsiyalarga ega [4]. Ko'p sonli tadqiqotlar feniletanoid glikozidlar mavjudligini tasdiqladiCistanche deserticolao'rganish va xotira qobiliyatini yaxshilash, Altsgeymer kasalligi va Parkinson kasalligiga qarshi turishda aniq ta'sir ko'rsatadi (4, oligosakaridlar va poliollar laksatif va laksatif ta'sirga ega 64). "Xitoy Xalq Respublikasi farmakopeyasi" faqat feniletanoid glikozidlar echinacoside va verbascoside tarkibini o'lchaydi.Cistanchedesertikola, lekin uning laksatif ta'sirining faol komponentlarini o'lchamaydi, shuning uchun preparatning dorivor materiallarini har tomonlama tahlil qilishga erishish qiyin.Cistanchedesertikola. Sifat nazorati. Ushbu cheklovni bartaraf etish va asosiy funktsiyalar va ko'rsatkichlar bilan bog'liq bo'lgan ko'p indeksli sifatni baholash tizimini yaratish uchunCistanchedesertikola, ushbu tadqiqot HPLCELSDP4 dan dorivor materiallarda betain, mannitol, fruktoza, glyukoza va saxaroza miqdorini tahlil qilish usulini yaratish uchun foydalanilgan.Cistanchedesertikola. Bundan tashqari, 58 ta partiyaCistanchedesertikolaning turli xil kelib chiqishi bo'lgan dorivor materiallar va 10 ta dorivor materiallar partiyasiCistancheShinjonning Xo'tan hududida sinovdan o'tkazildi, bu dorivor materiallarning har tomonlama sifatini nazorat qilish va baholash uchun ma'lumotnoma berishi mumkin.Cistanchedesertikolakelajakda.

Cistanche ekstrakti foydali mahsulotlar uchun bosing

1 Asbob va reaktivlar

1.1 Asboblar

Sartorius elektron balansi BT25 S, BS 124 S (Beijing Sartorius Balance Co., Ltd.); Agilent 1100 yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi; ALLTECH 2000ES bug'lanish nurining tarqalishi detektori (EISD); Ultrasonik tozalovchi KQ 250 (Kunshan Ultrasonic Instrument Ltd). 1.2 Reaktivlar

Nazorat moddasi: betain (partiya: {0}}, tozaligi: 99,2 foiz), mannitol (partiya: 10053-201304, tozaligi: 99,0 foiz), D-fruktoza (partiya: 111504-201703 , tozaligi: 99,8 foiz ), D - suvsiz glyukoza (partiya raqami: 110833-201506, tozaligi: 99,9 foiz), saxaroza (partiya raqami: 111507-201303, tozaligi: 99,8 foiz), barchasi Xitoy Milliy institutidan xarid qilingan Oziq-ovqat va giyohvand moddalarni nazorat qilish uchun.

ning dorivor materiallariCistanchedesertikolaIchki Mo'g'uliston, Shinjon, Gansu va boshqa joylarda jami 58 ta partiya to'plangan. Ularni Pekin universiteti farmatsevtika fakulteti professori Tu Pengfey aniqlagan.CistanchedesertikolaLidangaceae o'simligining YCMa, 3-jadvalda ko'rsatilganidek.

ning dorivor materiallariCistanchedesertikolaShinjonning Xotan hududidan jami 10 ta partiyada yig‘ilgan. Ularni Pekin universiteti farmatsiya fakulteti professori Tu Pengfey 4-jadvalda ko‘rsatilganidek, Liedangaceae o‘simligining Cistanche tubulosa (Schenk) Wight po‘stlog‘ining po‘stloq barglari bilan quritilgan go‘shtli poyalari sifatida aniqlagan.

1.3 Reaktivlar

Asetonitril xromatografik toza (Tianjin Boshiqi Technology Development Co., Ltd.), metanol xromatografik (Tianjin Saifu Century Technology Development Co., Ltd.) va suv o'ta toza suvdir.

2 Usullar va natijalar

2.1 Xromatografik sharoitlar

Xromatografik ustun ShodexAshaipak NH2P-50 4E polimer jel ustuni (250 mm × 4,6 mm, 5 mkm); harakatlanuvchi faza asetonitril-suv (77∶23) edi; oqim tezligi 0,7 ml·min-1; ustun harorati 25 daraja edi; Nurning tarqalishi detektori (ELSD): Drift trubkasi harorati 100 daraja va tashuvchi gaz oqimi tezligi 3 L·min-1 edi.

2.2 etalon eritma tayyorlash

Tegishli miqdorda betain, mannitol, fruktoza, glyukoza va saxaroza mos yozuvlar moddasini oling, uni aniq torting, suv qo'shing, unda 0, 25 mg betain, mannitol, fruktoza, glyukoza va saxaroza bo'lgan aralash eritma hosil qiling. 1 ml, yaxshilab silkiting va oling.

2.3 Tekshiriluvchi eritmani tayyorlash

Taxminan 1.0 g olingCistanchedorivor kukun (№ 4 elakdan o'tkazilgan), uni aniq torting, 100 ml jigarrang o'lchov kolbasiga soling, 50 ml 50% metanolni aniq qo'shing, mahkam tiqing, silkiting, torting. uni 30 daqiqa davomida namlang, so'ngra ultratovush yordamida (quvvati 250 Vt, chastotasi 35 kHz) 40 daqiqa davomida olib tashlang, sovib turing, yana torting, massani kamaytirish uchun 50 foiz metanol qo'shing, yaxshilab silkiting va qoldiring. turadi. 5 ml supernatantni aniq aspiratsiya qiling, uni 25 ml hajmli o'lchov kolbasiga soling, 50% metanol bilan belgigacha suyultiring, yaxshilab silkiting va 0,2 mkm mikrog'ovakli membranadan filtrlang.

2.4 Aniqlash usuli

5 va 10 mkL etalon eritmadan va 5 mkl tekshiriluvchi eritmadan aniq torting, ularni suyuqlik xromatografiga kiriting, tepalik maydonini yozib oling va tashqi standart ikki nuqtali usulning logarifmik tenglamasiga muvofiq hisoblang.

2.5 Tizimning yaroqliligi testi

2.1-bandda ko'rsatilgan xromatografik sharoitga ko'ra, mos ravishda 5 m etalon eritma va tekshiriluvchi eritmani aniq torting va ularni yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasiga kiriting, 1-rasmda ko'rsatilganidek, xromatogrammani o'lchang va yozib oling. Xromatografik cho'qqilar sinov namunasi mos yozuvlar moddasining xromatografik cho'qqilari bilan bir xil saqlash vaqtini ko'rsatdi, piksellar sonini yaxshi edi va xromatografik sharoitlar amalga oshirilishi mumkin edi.

Eslatma: A. Nazorat moddasi; B.Cistanche№ 49 namunasi; 1. betaim; 2. fnuckese ; 3. mannibol; 4. glyukoza; 5. sucreve

1-rasm Yo'naltiruvchi moddaning HPLC profillari va Cistanche № 49 namunasi

2.6 Chiziqli munosabatlarni tekshirish

Tegishli miqdorda betain, mannitol, fruktoza, glyukoza va sukrozni mos yozuvlar sifatida oling, ularni aniq torting va har 1 ml betainni 0 o'z ichiga olgan suv qo'shing.496 0 mg, mannitol {{3} }.994 0 mg, meva 1.0126 mg, glyukoza 1.0882 mg va saxaroza 0,9922 mg. 0.0992, 0.2480, 0.4960, 0.9920, 1.9840, 2.9760 mk, mannitol 0.1988, 0.4970 , 0,9940, 1,9880, 3,9760, 5,9640 m, fruktoza 0,5063, 1.012 6. 2.025 2. 4.050 4. 5.063 0. Xromatografik sharoitlar AOK qilingan va aniqlangan va tepalik maydoni qayd etilgan; keyin har bir mos yozuvlar in'ektsiya miqdorining X (ug) logarifm qiymati abscissa sifatida ishlatilgan va tepalik maydonining logarifm qiymati Y ordinata bo'lib, standart egri chizilgan. Natijalar 1-jadvalda keltirilgan.

1-jadval Chiziqli munosabatlarni tekshirish natijalari

2.7 Aniqlik sinovi

Tekshiriluvchi eritmani (namuna No 49) aniq chizib, yuqoridagi xromatografik sharoitda 6 marta uzluksiz in'ektsiya qiling, har bir xromatografik cho'qqining tepalik maydonini o'lchab, uning RSD qiymatini hisoblang. Natijalar Betain, mannitol, fruktoza, glyukoza va saxarozaning eng yuqori joylarining RSD ko'rsatkichlari mos ravishda 0,84 foiz, 2,56 foiz, 1,27 foiz, 2,62 foiz va 1,52 foizni tashkil etdi, bu esa ishlatiladigan asbobning aniqligini ko'rsatadi. bu tadqiqot yaxshi bo'ldi. 2.8 Takroriylik testi

6 ta namuna olingCistanchedesertikola(namuna No 49), sinov eritmasini 2.3-bandda ko'rsatilgan usul bo'yicha tayyorlang, har bir xromatografik cho'qqining tepalik maydonini o'lchang va mos keladigan tarkibni hisoblang. Natijalar Betain, mannitol, fruktoza, glyukoza va saxaroza (n=6) ning o'rtacha miqdori 7,93 foiz, 7,27 foiz, 8,74 foiz, 2,75 foiz va 4,81 foiz, RSD esa 2,83 foiz, =6 foizni tashkil etdi. 18}}.97 foiz va 2,60. foiz, 1,40 foiz, bu usulning yaxshi takrorlanishini ko'rsatadi. 2.9 Barqarorlik testi

Tekshiriluvchi eritmani (namuna № 49) oling, uni o'lchashga tayyorgarlikdan so'ng 0, 4, 8, 12, 16 va 24 soatdan keyin kiriting va har bir xromatografik cho'qqining RSD qiymatini hisoblang. Natijalar Betain, mannitol, fruktoza, glyukoza va saxarozaning RSD ko'rsatkichlari mos ravishda 0,61 foiz, 1,92 foiz, 1,34 foiz, 2,83 foiz va 0,69 foiz bo'lib, bu sinov eritmasining yaxshi ekanligini ko'rsatdi. 24 soat ichida barqarorlik. 2.10 Qayta tiklash testi

6 ta namuna olingCistanchedesertikolatarkibi ma'lum bo'lgan (namuna № 49), aniqlik bilan 0,25 g torting, ularni 50ml jigarrang o'lchov kolbasiga soling va 1 konsentratsiyada 25 ml aralash etalon eritmasidan aniq torting: 1 (tarkibida {{10}},7900 mg betain mavjud). mL-, fruktoza 0,7236 mg"mL-1, mannitol 0,8812 mg·mL-1, glyukoza 0,2708 mg·mL-1, saxaroza 0,4883 mg'mL-') namunaga qo'shildi, va sinov eritmasi 2.3 ga ko'ra usul bo'yicha tayyorlangan yuqorida ko'rsatilgan xromatografik sharoitlarga ko'ra aniqlangan, uning tiklanishi hisoblangan, natijalar 2-jadvalda ko'rsatilgan, bu usul yaxshi aniqlikka ega ekanligini ko'rsatadi.

2-jadval: Sinov qilinadigan 5 ta komponentning namuna olish tezligini oʻlchash natijalari (n=6)

3 Munozara

3.1 Indeks komponentlarini tanlash

Jami oligosakkaridlarCistanchening samarali qismlari hisoblanadiCistanchelaksatiflar uchun. Muallif ushbu qismning kimyoviy tarkibini LC-MS va etalon moddasi bo'yicha tahlil qildi va bu qism asosan betain, mannitol, fruktoza, glyukoza va saxarozadan iborat ekanligini aniqladi. Shuning uchun ushbu 5 komponent indeks komponentlari sifatida tanlanganCistanchedesertikola, va tarkibni aniqlash usuli o'rnatildi.

3.2 Xromatografik ustunlarni tanlash

Sinov qilinadigan besh komponent, betain, mannitol, fruktoza, glyukoza va saxaroza nisbatan qutbli bo'lib, ularni teskari fazali Cn ustunida saqlab bo'lmaydi. Odatda cho'qqilar 1-2 daqiqa ichida paydo bo'ladi va komponentlarni ajratib bo'lmaydi. Amino ustunlari Waters Bonoapar NH, (300 mm × 4,6 mm, 10 mkm) va Phenomenex Bondclone 10 NH, (300 mm × 3,9 mm, 10 mkm) shakar va poliolni ajratish uchun va polimer asosidagi amino ustunlar Uglevod ES ( 250 mm) ustunlik qiladi. ×4,6 mm, 5 mkm), ShodexAshaipak NH2P-50 4E (250 mm×4,6 mm, 5 mkm). Natijalar shuni ko'rsatadiki, polimer matritsasi amino ustuni ushbu besh komponentni samarali ravishda ajratishi mumkin.

3.3 Detektorni tanlash

Sinov qilinadigan besh komponentda aniq UV yutilishi yo'q va UV detektorining tarkibini bevosita aniqlash mumkin emas. Shu sababli, ushbu maqolada shakar spirtining tarkibiy qismlarini miqdoriy tahlil qilish usuli yaratilganCistanchedesertikolaHPLC-EISD yordamida. Natijalar shuni ko'rsatadiki, usul yuqori sezuvchanlik, yaxshi takrorlanuvchanlik va yuqori aniqlikka ega va sifatni nazorat qilish uchun ishlatilishi mumkin.Cistanchedesertikolava tarkibida betain va shakar spirtlari bo'lgan boshqa dorivor materiallar.

3.4 Tekshiriluvchi eritmani tayyorlash usulini tekshirish

Turli xil ekstraksiya erituvchilar, jumladan suv, 30 foiz metanol, 50 foiz metanol, 70 foiz metanol, metanol va boshqalar mos ravishda solishtirildi. Natijalar shuni ko'rsatdiki, 70 foizli metanol va metanol erituvchining biroz pastroq ekstraktsiya tezligi bundan mustasno, boshqa erituvchilarda sezilarli farq yo'q edi, shuning uchun to'g'ridan-to'g'ri tanlov amalga oshirildi. "Tarkibni aniqlash" moddasi bo'yicha erituvchi sifatida 50 foiz metanol ishlatilgan.CistancheXitoy Xalq Respublikasi Farmakopeyasida va u tegishli sinov eritmasini tayyorlash usuli bo'yicha tayyorlangan va keyin shakar spirti tarkibiy qismlarini aniqlash uchun 5 marta suyultirilgan.

3.5 Turli asosli namunalarni aniqlash va tahlil qilish

Ushbu tadqiqotda 58 ta partiyadagi 5 ta komponentning tarkibiCistanchedesertikolava 10 ta partiyaCistanchedesertikoladorivor moddalar aniqlandi. 58 partiyadagi betain, mannitol, fruktoza, glyukoza va saxarozaning massa ulushlariCistanchedesertikolanamunalar 2,73 foiz -17,65 foiz, 2,46 foiz -16,34 foiz, 2,52 foiz {{1{12}}}},74 foiz, 0,97 foiz -14,06 foiz. , 3,15 foiz -27,16 foiz; 10 partiyada mannitol, fruktoza va glyukoza 1.00 foiz -13.04 foiz, 2.98 foiz -8.85 foiz, 1.09 foiz -5.33 foiz edi.Cistanchenamunalar, o'z navbatida, va betain va saxaroza aniqlanmagan. Dorivor materiallarning tarkibi partiyalar orasida katta farq qiladi va ularga rioya qilish kerak bo'lgan qoida yo'q, bu dorivor materiallar sifatini nazorat qilish uchun tarkibni aniqlash standartini o'rnatish zarurligini ko'rsatadi. Bundan tashqari, bu usul ikkita turni samarali ravishda ajratishi mumkinCistancheasosiy o'simliklar, xususan,Cistanchetarkibida betain va saxaroza mavjud emas, shu bilan birga bu ikki komponentning tarkibi ko'proqCistanche deserticola. Bu, shuningdek, ikkita dorivor materialning tuzilishi va yashash joylaridagi farqlarni tahlil qilish uchun asos bo'lib xizmat qiladi.Cistanche deserticola. ning dorivor materiali bilan solishtirgandaCistanche deserticola, to'qimalari yumshoqroq bo'lib, u mahalliy "Yumshoq Dayun" deb nomlanadi, esaCistanche"Chay Dayun" deb ataladi, chunki u saxaroza (3,15% ~ 27,16%) o'z ichiga oladi. ).Cistanche deserticolaasosan Ichki Mo'g'ulistondagi Alxada tarqalgan, esaCistancheasosan Shinjonning Xotan hududida tarqalgan, bu erda harorat Alxa hududiga qaraganda yuqori bo'lib, mahalliy joylarda tomchilatib sug'orish ko'pincha qo'llaniladi, lekin harorat pasayganda,Cistanchejiddiy zarar ko'radi. Muzlatishning shikastlanishi, bir tomondan, uning yuqori suv miqdori bilan ma'lum bir munosabatga ega bo'lsa, boshqa tomondan, uning tarkibidagi ingredientlar bilan bog'liq. Betain 243 o'simliklarning sho'rlanishga, qurg'oqchilikka, past haroratga va kuchli yorug'likka chidamliligi kabi stressga chidamliligini oshirishda muhim rol o'ynaydigan muhim osmotik sozlash moddasidir. Buning sababi, tarkibidagi betainning yuqori miqdoriCistanche deserticolako'ra tuz-ishqor, qurg'oqchilik va muzlashdan zararga chidamliligi yaxshiroqCistanche, va nisbatan keng tarqalgan.

3.6 ning tahliliCistanchedesertikolaturli kelib chiqishi namunalari

Cho'lning 58 partiyasi orasidacistanchedorivor material namunalari, 45 partiya Alxa League, Ichki Mo'g'uliston, 3 partiya Vangyedi (Dengkou tumani), Ichki Mo'g'ulistondan ishlab chiqarilgan va 1 partiya noma'lum. Dori vositalarining barcha 49 partiyasi 5 ta komponentdan iborat turlicha tarkibga ega edi. Biroq, sezilarli farq yo'q. Tahlil qilish sababi shundaki, dorivor materiallar hammasi bir xil cho'l hududida ishlab chiqariladi, ekologiya va geografik muhit o'xshash, mahsulot sifati nisbatan bir xil va barqaror. Gansu Minqin tumanida 3 ta partiya, Shinjondan 6 ta partiya ishlab chiqariladi. 2-rasmdagi tahlilga ko'ra, Ichki Mo'g'ulistonda ishlab chiqarilgan dorivor materiallar bilan solishtirganda, asosiy farq fruktoza va saxaroza tarkibida namoyon bo'ladi. Dorivor materiallarning saxaroza miqdori nisbatan yuqori edi, lekin ikkita kelib chiqishidan olingan namunalarning kam miqdorini hisobga olgan holda, bu xulosani ko'proq namunalar to'plash orqali tekshirish kerak. 3.7 Xulosa

Ushbu tadqiqotda HPLC Wang ISD bir vaqtning o'zida laksatiflarning 5 ta faol moddasini aniqlash uchun yaratilgan bo'lib, u sifatni nazorat qilish uchun yanada qulay, samarali va aniq usulni ta'minladi.Cistanche deserticola, va sifat standartini yaxshilash va yanada rivojlantirish uchun asos bo'ldiCistanchedesertikola. mazmunli havola.

Ma'lumotnomalar

【1】 Davlat farmakopeya komissiyasi. Xitoy Xalq Respublikasi farmakopeyasi: A 【M】. Pekin: Xitoy farmatsevtika fanlari va texnologiyasi matbuoti, 2015; 135.

【2】 Song Zhihong, Lei Li, Tu Pengfei. ning farmakologik faolligi bo'yicha tadqiqot ishlariCistancheKo'rgazma. Xitoy o'simlik tibbiyoti, 2003, 34 (9); 113415.

【3】 Syue Xayan. Jiao Danyuan, Yao Jun. Cilantrodagi umumiy glyukozidlarning farmakologik ta'sirining tadqiqot holati [J]. Xitoy klinik farmakologiya jurnali, 2018, 34(4): 486-488.

【4】 An Chunna, Chjan Xongning, Pu Syaopin. Neyrofarmakologiyaning ilmiy-tadqiqot ishlariCistanche deserticolaKo'rgazma [J]. Xitoy farmatsiya jurnali, 2011, 46(12): 887-890.

【5】 Gao Yuhong, Ke Zunji. ning farmakologik ta'siri bo'yicha tadqiqotlarning rivojlanishiCistanche deserticolaAltsgeymer kasalligini davolashda []. Shanxay an'anaviy xitoy tabobati jurnali, 2018, 52(1): 109-112.

【6】 Chjan Baishun, Chjao Xuewen, Chen Shuanghou va boshqalar. ning ajratilgan qismlarining laksatif ta'siriCistanche deserticolaEksperimental tadqiqotlar □. Xitoy an'anaviy xitoy tibbiyoti jurnali, 2003, 10(1I1): 31-32.

【7】 Chjan Baishun, Chen Shuanghou, Chjao Xuewen va boshqalar.Cistanche deserticolaekstrakti galaktitol Najasning ta'siri bo'yicha dozaga javob o'rganish [J]. Xitoy an'anaviy xitoy tibbiyoti jurnali, 2003, 10 (12): 28-29.

【8】 Gao Yunjia, Jiang Yong, Dai Fang va boshqalar. ning dorivor moddalari bo'yicha tadqiqotlarCistanche deserticolalaksatiflar uchun tadqiqot [J]. Xitoyda zamonaviy xitoy tibbiyoti, 2015, 17(4): 307-311.

【9】 Bao Zhong, Cai Hong, Jiang Yong va boshqalar. ning uchta faoliyatiCistanche deserticolaturli ta'sir etuvchi omillar ostida Komponentlarning miqdoriy tahlili J. Xitoy o'simlik tibbiyoti, 2013, 44 (22): 32233230.

【10】 Bao Zhong, Cai Hong, Jiang Yong va boshqalar. ni aniqlashCistanche deserticolaHPLCEISD tomonidan Galactitol tarkibi. Journal of Pharmaceutical Analysis, 2007, 27(7): 1004-1006.

【11】 Chjao Kuijun, Liang Lijuan, Bi Dan va boshqalar. HPLCELSD ni aniqlashCistancheva kolba ichidagi galaktitol tarkibiCistanche[J]. Xitoy an'anaviy xitoy tibbiyoti jurnali, 2012, 19(8): 52-54.

【12】 Vang Guiping, Xue Xiaomin, Lu Chao va boshqalar. Betainning o'simliklarning stressga chidamliligini yaxshilashga ta'siri va uning ta'sir qilish mexanizmi. Jiangxi qishloq xo'jaligi jurnali, 2014 yil, 26 (8): 2226.

【13】 Vang Qingjie, Vang Li. O'simliklarning sovuqqa chidamliligi genlari bo'yicha tadqiqotlarni ko'rib chiqish. Qishloq iqtisodiyoti va texnologiyasi, 2018, 29(8): 23-25.