Buyrak fibrozining turli shakllari buyrak bo'linmalarining shikastlanishidan dalolat beradi.
Mar 20, 2022
Annotatsiya:Buyrak fifibrozi surunkali kasalliklarning keng tarqalgan ko'rinishi va o'ziga xos belgisidirbuyrak kasalligi(CKD) turli xil morfologik shakllarda namoyon bo'ladi, bu aniq patogen sabablarni ko'rsatadi. Keng makroskopik ko'rinadigan chandiqlar og'ir o'choqli shikastlanish va parenximalarning to'liq yo'q qilinishi oqibatlari bo'lib, infarkt natijasida yarani davolash reaktsiyasini aks ettiradi. Inbuyrak,surunkali glomerulyar shikastlanish mos keladigan tubulaning atrofiyasiga, ushbu o'ziga xos nefronning degeneratsiyasiga va nihoyat interstitsial fifibroz/naycha atrofiyasiga (IF/TA) olib keladi. Bu glomerulus tomonidan qo'zg'atilgan fokal almashtirish chandig'i bilan solishtirganda, quvur atrofiyasidan mustaqil diffuz fifibroz boshqa patogen jarayon bo'lib ko'rinadi.Buyrakfifibroz kompartmentga xos tarzda rivojlanadi, ammo fokal va diffuz fibrozning boshqa glomerulyar yoki tubulointerstitsial lezyonlar bilan bog'liq bo'lgan o'ziga xos xususiyatlarga egami yoki yo'qligini aniqlash qiyin. Ushbu tadqiqotda biz buyrak fibrogeneziga bevosita hissa qo'shadigan buyrak shikastlanishlari bilan bog'liq buyrak fibrotik naqshlarini tahlil qilish, turli buyrak bo'linmalari shikastlanishida fibrotik naqsh va ko'rinishlarni aniqlashni maqsad qilgan. ning naqshlaribuyrakfifibroz KKD va turli buyrak patologiyalarining eksperimental modellarida gistopatologik va ultrastruktura topilmalari bilan bog'liq holda tahlil qilindi. Nefrotoksik zardob-nefritda (NTN) izolyatsiya qilingan yarim oylik glomerulonefrit (GN) paydo bo'lganidan so'ng, surunkali glomerulyar shikastlanish atrofik kanalchalar yonida asosan fokal fifibrozga olib keldi. Aksincha, bir tomonlama ureteral obstruktsiyadan (UUO) tubulointerstitial bo'linmaning birlamchi shikastlanish modeli sifatida foydalanish surunkali lezyonlarning asosiy shakli sifatida diffuz fifibrozni aniqladi. Nihoyat, foliy kislotasi ta'siridan kelib chiqqan nefropatiya (FAN) surunkali glomerulyar shikastlanishga bog'liq bo'lmagan ketma-ket quvurli atrofiya bilan birlamchi quvurli shikastlanish modeli sifatida bir xil darajada asosiy fokal IF / TA ni keltirib chiqaradi. Bir nechta buyrak patologiyalarini tahlil qilib, bizning ma'lumotlarimiz shuni ko'rsatadiki, fokal va diffuz fibroz inson buyrak kasalliklarining ko'pchiligida surunkali lezyonlar sifatida namoyon bo'ladi, asosan antineytrofil sitoplazmatik antikorlar (ANCA) bilan bog'liq GN, qizil yuguruk va IgA nefropatiyasida mavjud. IgAN). Fokal IF/TA glomerulyar shikastlanish va nefronlarning qaytarilmas shikastlanishi bilan bog'liq edi, ANCA GN da diffuz fibroz esa glomerulyar shikastlanish va nefron yo'qolishidan qat'iy nazar interstitsial yallig'lanish bilan aniq bog'liq edi. Fokal IF/TA ning diffuz fibrozga qarshi ultrastrukturaviy tahlili transkriptom ma'lumotlar to'plamidagi turli kollagen imzolari bilan qo'llab-quvvatlanadigan aniq matritsa kompozitsiyalarini aniqladi. Uzoq muddatli buyrak natijalariga kelsak, faqat fokal IF/TA darajasi oxirgi bosqichning rivojlanishi bilan bog'liq.buyrak kasalligi(ESKD) ANCA GN da. Aksincha, tarqoqbuyrakfifibroz uzoq muddatli buyrak natijasi bilan bog'liq emas. Xulosa qilib aytganda, biz bu erda fokus naqshini isbotlaymizbuyrakfifibroz nefron yo'qolishi va o'rnini bosuvchi chandiq bilan bog'liq ko'rinadi. Bundan farqli o'laroq, diffuz naqshbuyrakfifibroz birlamchi interstitsial yallig'lanish va shikastlanish natijasida paydo bo'ladi.
Kalit so‘zlar:fibroz shakli; buyrak fibrozi; buyrak shikastlanishi; quvurli atrofiya; yallig'lanish; tizimli vaskulit
CISTANCHE BUYRAK/BUYRAK INFEKTSIONINI YAXSHILADI
Kirish
Buyrak fifibrozi keng tarqalgan ko'rinish va surunkali surunkali kasalliklarning o'ziga xos belgisidirbuyrak kasalliklari(CKD) yakuniy bosqichga olib keladibuyrak kasalligi(ESKD), asosiy etiologiyadan qat'i nazar [1]. Odatda, buyrak fifibrozi (yoki tubulointerstitial fibroz) CKDning barcha bosqichlarida hujayradan tashqari matritsa (ECM) cho'kishining gistomorfologiyasini ifodalaydi.Buyrakfifibroz turli xil morfologik shakllarda paydo bo'lishi mumkin, bu boshqa patogen sabablarni ko'rsatadi [2]. Keng makroskopik ko'rinadigan chandiqlar og'ir o'choqli shikastlanish va parenximalarning to'liq yo'q qilinishi oqibatlari bo'lib, infarkt natijasida yarani davolash reaktsiyasini aks ettiradi [3]. Inbuyrak, surunkali glomerulyar shikastlanish mos keladigan tubulaning atrofiyasiga, ushbu o'ziga xos nefronning degeneratsiyasiga va nihoyat interstitsial fifibroz/naycha atrofiyasiga (IF/TA) olib keladi [4,5]. Bu glomerulus tomonidan qo'zg'atilgan fokal almashtirish chandig'i bilan solishtirganda, quvur atrofiyasidan mustaqil fifibroz (quyida diffuz fibroz deb ataladi) boshqa patogen jarayon bo'lib ko'rinadi [6,7]. Naychali atrofiya maxsus transport va metabolik imkoniyatlarning yo'qolishi sifatida tavsiflanadi va odatda kichik tubulalar, rangpar sitoplazmali epitelial hujayralar yoki kengaygan juda nozik kanalchalar bilan tavsiflanadi. Fifibrozni buyrakni to'liq bo'lmagan tiklanish jarayonini ifodalovchi chandiq to'qimasi sifatida tushunishimizdan farqli o'laroq, diffuz fibroz CKD rivojlanishining faol ishtirokchisi sifatida qaraladi, bu asosan buyrak funktsiyasining pasayishi tubulointerstitial fibroz bilan ko'proq bog'liqligini kuzatishga asoslangan. glomerulyar zarar bilan [8-11]. Yuqoridagi tushunchalarga asoslanib,buyrakfifibroz yoki to'liq bo'lmagan mexanizm sifatida muhokama qilinadibuyraktuzatish yoki CKD rivojlanishiga faol hissa qo'shuvchi [12,13].Buyrakfifibroz kompartmentga xos tarzda rivojlanadi, ammo fokal IF/TA yoki diffuz fibroz boshqa glomerulyar yoki tubulointerstitsial lezyonlar bilan bog'liq bo'lgan o'ziga xos xususiyatlarga egami, aniq emas. Ushbu tadqiqotda biz buyrak fibrogeneziga bevosita hissa qo'shadigan yuqorida aytib o'tilgan buyrak lezyonlari (masalan, glomerulyar, quvurli va interstitsial lezyonlar) bilan bog'liq buyrak fibrotik naqshlarini tahlil qilishni maqsad qildik.
Materiallar va uslublar
2.1. HayvonlarHayvonlarning barcha eksperimental tadqiqotlari Beth Israel Deaconess Medical Center (BIDMC) va Göttingen universiteti tibbiyot markazining Hayvonlarni parvarish qilish va ulardan foydalanish institutsional qo'mitasining roziligi bilan ARRIVE ko'rsatmalariga muvofiq amalga oshirildi [14]. Eksperimental protokollar quyida batafsil tavsiflangan. Har bir guruhdagi n ta=5 sichqonning namunaviy oʻlchami rasmiy ravishda quvvatlanmagan yoki oldindan belgilanmagan. 2.2. Nefrotoksik zardob-nefrit (NTN) Har bir sichqonchani dastlab 200 mkg qo'y IgG (Kapralogics, Gilbertville, IA, AQSh) bilan 200 mkl to'liq Freund yordamchisi (Sigma, Sent-Luis, MO, AQSh) vena ichiga 40 mkL AOK qilingan. nefrotoksik sarum oldindan emlashdan keyin 5, 6 va 7 kunlarda. Tajribalar emlashdan 63 kun o'tgach tugadi [15,16]. 2.3. Bir tomonlama siydik yo'li obstruktsiyasi (UUO) Sakkizdan o'n ikki haftagacha bo'lgan C57BL/6 sichqonlari izofluran inhalatsiyasi bilan behushlik qilindi va analjeziya teri ostiga buprenorfin in'ektsiyasi bilan amalga oshirildi. Siydik chiqarish kanali atrofdagi to'qimalardan ajratildi va ishonchli obstruktsiyani olish uchun chap buyrak siydik yo'lining yuqori uchdan ikki qismiga bir-biridan taxminan 5 mm masofada ikkita ligature qo'yildi. Tajribalar ilgari ta'riflanganidek, siydik yo'llari bog'langanidan o'n kun o'tgach tugadi [17].
CISTANCHE BUYRAK/BUYRAK KASALLIKLARINI SOZLADI
2.4. Foliy kislotasi bilan bog'liq nefropatiya (FAN)Buyrak shikastlanishi CD1 sichqonlarida foliy kislotasining qorin bo'shlig'iga bir marta yuborilishi (PBSda 250 mg / kg tana vazni) bilan qo'zg'atilgan. Tajribalar in'ektsiyadan 96 kun o'tgach yakunlandi.
2.5. O'rganish populyatsiyasi Turli xil buyrak patologiyalarining jami 112 holati, shu jumladan o'tkir interstitsial nefrit (AIN), antineytrofil sitoplazmatik antikorlar bilan bog'liq bo'lgan glomerulonefrit (ANCA GN), membranoz GN, qizil yuguruk, gipertenziv nefropatiya, IgA nefropatiya (IgA nefropatiya), glomeruloskleroz (FSGS) va diabetikbuyrak kasalligi(DKD) kiritilgan. Muntazam klinik ma'lumotlardan foydalanish uchun rasmiy ruxsat talab etilmagan bo'lsa-da, Göttingen universiteti tibbiyot markazining axloqiy qo'mitasi tomonidan ijobiy fikr berildi (22/2/14 va 28/9/17). Bundan tashqari, barcha bemorlar muntazam tibbiy yordamning bir qismi sifatida ma'lumot to'plashga rozi bo'lishdi. 2.6. Ta'riflar Hisoblangan glomerulyar filtratsiya tezligi (GFR) Chronic yordamida hisoblab chiqilganBuyrak kasalligiEpidemiologiya bo'yicha hamkorlik (CKD-EPI) tenglamasi [18]. ANCA GN holatlari uchun Birmingem vaskulit faolligi ko'rsatkichi (BVAS) 3-versiyasi ilgari tavsiflanganidek hisoblab chiqilgan [19]. BVAS 0 dan 63 gacha bo'lgan shkala bo'yicha baholanadi, 0 kasallik faolligi yo'qligini va yuqori ball faol kasallikni ko'rsatadi. 2.7. Massonning Trichrome Stain Formalin bilan mahkamlangan, kerosin bilan o'rnatilgan buyraklar 3 mkm diametrda bo'lingan va binoni BIDMC Histopatologiya yadrosi va Göttingen universiteti tibbiyot markazida amalga oshirilgan. 2.8. Buyrak gistopatologiyasi Buyrak patologlari (LS, SH va PS) barcha biopsiyalarni baholadilar va klinik ma'lumotlarni to'plash va tahlil qilish uchun ko'r edilar. Banff skoring tizimiga o'xshash tarzda, jami ta'sirlangan kortikal maydonlarning ulushibuyrakTubulyar atrofiya (IF/TA) sohasidagi fibroz va fokal interstitsial fibroz butun namunada baholandi. Naychali atrofiya bilan bog'liq bo'lmagan diffuz fibroz ayirish yo'li bilan hisoblangan [20]. Bundan tashqari, har bir glomerulus nekroz, yarim oy va global skleroz mavjudligi uchun alohida baholandi. Shunday qilib, ushbu xususiyatlardan birortasiga ega bo'lgan glomeruliya foizi har bir buyrak biopsiyasida glomeruliya umumiy sonining bir qismi sifatida hisoblab chiqilgan. Ushbu ballarga asoslanib, Berden va boshqalarga ko'ra gistopatologik kichik guruhlash. (fokal, yarim oy, aralash yoki sklerotik sinf) va Brix va boshqalarga ko'ra ARRS. (past, o'rta yoki yuqori xavf) amalga oshirildi [21,22].
2.9. Remissiya induksion terapiyasiGlyukokortikoidlar (GC) tomir ichiga puls terapiyasi sifatida yoki og'iz orqali toraytirilgan jadval bilan kiritildi. Plazma almashinuvi (PEX) davolovchi shifokorlarning ixtiyoriga ko'ra indüksiyon davrida amalga oshirildi. Rituximab (RTX) har hafta 375 mg/m2 dan to'rtta vena ichiga yuborilgan; RTX PEX davolashdan oldin 48 soat ichida kiritilmagan. Siklofosfamid (CYC) har ikki haftada va undan keyin har uch haftada bir marta 15 mg / kg gacha bo'lgan vena ichiga uch dozada, yosh va buyrak funktsiyasiga qarab kiritildi. Kombinatsiyalangan terapiya har haftada 375 mg / m2 RTX da to'rtta vena ichiga yuborilgan va har ikki haftada 15 mg / kg CYC da ikkita tomir ichiga yuborilgan. Davolovchi shifokorlarning ixtiyoriga ko'ra, remissiya indüksiyon terapiyasi oldingi rejimlarga va bemorning individual omillariga bog'liq edi. RTX yosh bemorlarda afzal qilingan, bu tanlovning asosiy sababi toksiklikdir [23]. Pneumocystis jiroveci infektsiyasining oldini olish uchun profilaktika mahalliy amaliyotga muvofiq o'tkazildi.
CISTANCHE BUYRAK/BUYRAK EKSIZLIGINI YAXSHILADI
2.10. Hammaga ochiq massiv ma'lumotlar to'plamini tahlil qilishOmmaga ochiq ma'lumotlar to'plami umumiy tavsiyalarga muvofiq tahlil qilindi [24]. Inson transkriptom massivi ma'lumotlari Nephroseq ma'lumotlar bazasidan olingan log2 o'rtacha markazlashtirilgan intensivliklari sifatida ko'rsatilgan, shu jumladan 170 CKD bemorlari va 31 sog'lom tirik donorlardan olingan Evropa Buyrak cDNA Biobanki (ERCB) (kirish raqami GSE69438) [25].
2.11. Statistik usullarO'zgaruvchilar Shapiro-Wilk testi yordamida normal taqsimot uchun sinovdan o'tkazildi. Oddiy taqsimlanmagan uzluksiz o'zgaruvchilar median va interquartile diapazon (IQR), kategorik o'zgaruvchilar chastota va foiz sifatida ifodalanadi. Statistik taqqoslashlar rasmiy ravishda tasdiqlanmagan yoki oldindan belgilanmagan. Guruhlar o'rtasida taqqoslash uchun Kruskal-Uollis testi qo'llanildi. Guruhlarni taqqoslash uchun medianlardagi farqlarni aniqlash uchun Mann-Whitney U-testidan foydalanilgan. Parametrik bo'lmagan guruhlar o'rtasidagi taqqoslashlar Pearsonning chi-kvadrat testi bilan amalga oshirildi. Korrelyatsiyalar Spear man's rank korrelyatsiya koeffitsienti (Spearman's r) yordamida tahlil qilindi va ma'lumotlar tahlillari GraphPad Prism (macOS uchun 8.4.3 versiyasi, GraphPad Software, San-Diego, CA, AQSh) yordamida amalga oshirildi.
3. Natijalar
3.1. Buyrak fibrozining turli shakllarida turli xil buyrak bo'linmalarining shikastlanishiGlomerulyar yoki quvurli shikastlanish natijasida fokal IF/TA va diffuz fibroz rivojlanishida potentsial asosiy kasallik mexanizmlarini aniqlash uchun biz birinchi navbatda sichqonlarni nefrotoksik sarum-nefrit (NTN) tomonidan qo'zg'atilgan glomerulyar sklerozga olib keladigan asosiy glomerulyar shikastlanishning eksperimental modellari bilan sinovdan o'tkazdik. , bir tomonlama ureteral obstruktsiya (UUO) natijasida kelib chiqqan buyrak gemodinamik va metabolik o'zgarishlar bilan postrenal etishmovchilik tufayli diffuz tubulointerstitial shikastlanish va foliy kislotasi keltirib chiqaradigan nefropatiya tufayli quvurli atrofiyaga olib keladigan quvurli shikastlanishning o'ziga xos modeli (FAN, 1A-rasm) [26-28] ]. Ushbu eksperimental modellarda buyraklarbuyrak shikastlanishiNTNdagi surunkali glomerulyar shikastlanish asosan atrofik kanalchalarga tutashgan fokal IF/TAga olib kelganligini Masson trixromli bo'yash orqali baholadilar (1B,C-rasm va 1-jadval). Aksincha, UUO dan yallig'lanishli lezyonlar bilan tubulointerstitsial bo'linmaning birlamchi shikastlanish modeli sifatida foydalanish surunkali lezyonlarning etakchi shakli sifatida diffuz fibrozni aniqladi (1B, C-rasm va 1-jadval). Qizig'i shundaki, FAN surunkali glomerulyar shikastlanishga bog'liq bo'lmagan ketma-ket quvurli atrofiya bilan birlamchi quvur shikastlanishining modeli sifatida bir xil darajada ustun fokal IF / TA ni keltirib chiqardi (1B, C-rasm va 1-jadval), shu bilan quvurli shikastlanish va quvur atrofiyasining rivojlanishidagi rolini ta'kidladi. Ushbu fokal fifibrozning namunasi.
3.2. Odam patologiyalarida fokal IF/TA va diffuz fibrozning tarqalishiBuyrak fifibrozining alohida shakllari surunkali shikastlanishga javoban va buyrak patologiyalarida kuzatilgan kasallikning umumiy rivojlanish mexanizmlari ekanligini tekshirish uchun biz keyingi odamlarda fokal IF/TA va diffuz fibrozning paydo bo'lishi va tarqalishini tahlil qildik.buyrak kasalliklari.Turli xil buyrak patologiyalari bo'lgan 67 ta buyrak biopsiyasida, jumladan, antineytrofil sitoplazmatik antikorlar bilan bog'liq glomerulonefrit (ANCA GN), o'tkir interstitsial nefrit (AIN), membranoz GN, qizil yuguruk, gipertenziv nefropatiya, IgA nefropatiyasi (IgA nefropatiya), glomeruloskleroz (FSGS) va diabetikbuyrak kasalligi(DKD), fokal IF/TA va diffuz fibroz o'zgaruvchan darajada kuzatilishi mumkin (2A-C-rasm va 2-jadval). Qizig'i shundaki, diffuz fifibroz asosan ANCA GN, lupus nefrit va IgAN holatlarida mavjud edi.buyrak kasalliklariglomerulyar va interstitsial shikastlanish bilan (2C-rasm). Ushbu topilmalar buyrak fifibrozining turli shakllari, shu jumladan ANCA GNda mavjud ekanligini va ANCA GN turli xil buyrak bo'linmalarining yallig'lanish va degenerativ shikastlanish mexanizmlarini o'rganish uchun namunali kasallik bo'lib xizmat qilishi mumkinligini ko'rsatadi [29].
3.3. Fokal IF/TA va diffuz fibroz ANCA GN da turli buyrak bo'limlari shikastlanishidan dalolat beradi.Turli xil buyrak patologiyalarida, shu jumladan, ANCA GN buyrak kasalligida, fokal IF/TA va diffuz fibrozning teng taqsimlanishi bilan glomerulyar va yallig'lanishli interstitsial shikastlanishda mavjudligini aniqlaganimiz sababli, biz buyrak fibrozining turli shakllarini assotsiatsiyada tahlil qildik. tasdiqlangan ANCA GN bilan umumiy soni 49 buyrak biopsiyalari ichida klinik, laboratoriya va gistopatologik topilmalar bilan (3-jadval) [30-36]. Umumiy fifibrozning darajasi buyrak funktsiyasining jiddiy yomonlashishi bilan bog'liq bo'lib, bu qon zardobida kreatininning ko'tarilishi va glomerulyar filtratsiya tezligining yo'qolishi bilan aks ettirilgan (GFR, 3B-rasm). ANCA GN ni muntazam ravishda baholash orqali umumiy fifibroz tezlashtirilgan yarim oylar va global glomerulyar skleroz bilan bog'liq bo'lgan oddiy glomeruliyalarning kamayishi bilan bog'liq (3C-rasm). Yallig'lanishli lezyonlar orasida umumiy fifibroz ANCA GNdagi umumiy yallig'lanish bilan bog'liq bo'lib, IF / TA hududlaridan tashqaridagi interstitsial yallig'lanish yoki interstitsial fibroz va quvurli atrofiya sohalarida yallig'lanish bilan bog'liq emas (i-IF / TA, 3C-rasm). Keyinchalik, alohida tahlil qilish uchun buyrak fifibrozini fokal IF/TA va diffuz fifibrozni alohida tahlil qilish uchun quvurli atrofiya belgilarisiz buzilmagan kanalchalar atrofida ajratdik (3D-rasm). Qizig'i shundaki, biz fokal IF / TA va diffuz fibroz o'rtasida to'g'ridan-to'g'ri korrelyatsiyani kuzatmadik (3E-rasm), bu ANCA GNdagi har bir lezyonning o'ziga xos xususiyatlarini nazarda tutadi. Biz ilgari jami fifibrozni kuzatganimizdek, IF/TA asosan global glomerulyar skleroz bilan bog'liq bo'lgan oddiy glomeruliyalar ulushining kamayishi bilan bog'liq bo'lib, surunkali glomerulyar shikastlanishlar quvurli atrofiya bilan mos keladigan tubulalarning nasli va degeneratsiyasiga olib kelishining o'rnatilgan mexanizmni tasdiqlaydi. fokal fibrotik chandiqlar [4]. Aksincha, diffuz fifibroz surunkali glomerulyar shikastlanish bilan emas, balki yarim oy shaklidagi glomeruliya bilan bog'liq edi (3E-rasm), bu diffuz fifibroz (naycha atrofiyasi bilan bog'liq bo'lmagan) surunkali glomerulyar shikastlanish va nefron yo'qolishidan mustaqil bo'lgan hali noma'lum mexanizmlar asosida ekanligini anglatadi. Buyrak yallig'lanishini tizimli baholash shuni ko'rsatdiki, diffuz fibroz ayniqsa fibrotik bo'lmagan joylarda interstitsial yallig'lanish bilan bog'liq (3E-rasm), fokal IF/TA esa interstitsial yallig'lanish yoki i-IFTA (i-IFTA) bilan bog'liq bo'lmagan umumiy kortikal yallig'lanish bilan bog'liq. 3E-rasm). Shunisi e'tiborga loyiqki, ikkala lezyon ham buyrak funktsiyasining yanada jiddiy yomonlashishi bilan bog'liq edi (3F-rasm), bu har bir lezyon buyrak shikastlanishi va natijalariga muhim hissa qo'shishi haqidagi kuzatishni qo'llab-quvvatlaydi.
Shakl 3. Fokal IF/TA va diffuz fibroz ANCA GNda alohida buyrak bo'linmalarining shikastlanishidan dalolat beradi. (A) ANCA GN da Massonning trikrom bilan bo'yalgan buyrak qismining reprezentativ fotomikrografi (shkala chizig'i: 200 mkm). (B) Umumiy buyrak fibrozisi, ANCA GNdagi klinik va laboratoriya maʼlumotlari oʻrtasidagi bogʻliqlik Spearman r ning oʻrtacha qiymatlarini aks ettiruvchi issiqlik xaritasida koʻrsatilgan, yulduzchalar p < 0.05.="" (c)="" anca="" gn="" da="" umumiy="" buyrak="" fibrozisi,="" glomerulyar="" va="" yallig'lanish="" belgilari="" o'rtasidagi="" bog'liqlik="" spearman="" r="" ning="" o'rtacha="" qiymatlarini="" aks="" ettiruvchi="" issiqlik="" xaritasida="" ko'rsatilgan,="" yulduzchalar="" p=""><0,05 ni="" bildiradi.="" (d)="" fokal="" if/ta="" (yuqori="" panel)="" va="" diffuz="" fibroz="" (pastki="" panel)="" bilan="" anca="" gn="" da="" trikrom="" bilan="" bo'yalgan="" masson="" buyragi="" bo'limining="" reprezentativ="" fotomikrografi="" ko'rsatilgan="" (shkala="" chiziqlari:="" 40="" mkm).="" (e)="" fokal="" if/ta="" va="" diffuz="" fibroz="" o'rtasidagi="" bog'liqlik="" glomerulyar="" va="" yallig'lanish="" topilmalari="" bilan="" spearman's="" r="" ning="" o'rtacha="" qiymatlarini="" aks="" ettiruvchi="" issiqlik="" xaritasi="" bilan="" tasvirlangan,="" yulduzchalar="" p=""><0,05 ni="" ko'rsatadi.="" (f)="" fokal="" if/ta="" va="" diffuz="" fibroz="" o'rtasidagi="" bog'liqlik="" anca="" gn="" da="" klinik="" va="" laboratoriya="" ma'lumotlari="" bilan="" spearman's="" r="" ning="" o'rtacha="" qiymatlarini="" aks="" ettiruvchi="" issiqlik="" xaritasi="" bilan="" ko'rsatilgan,="" yulduzchalar="" p=""><0,05 ni="" bildiradi.="" qisqartmalar:="" anca="" gn—antineutrofil="" sitoplazmatik="" antikor="" glomerulonefrit;="" bvas="" -="" birmingem="" vaskulit="" faolligi="" reytingi;="" crp-c="" reaktiv="" oqsil;="" gfr="" -="" glomerulyar="" filtratsiya="" tezligi;="" if/ta="" —="" interstitsial="" fifibroz/naycha="" atrofiyasi;="" iqr="" —="" kvartillararo="" diapazon;="" mpo="" -="" miyeloperoksidaza;="" acr="" -="" siydik="" albumin/kreatinin="" ratsioni;="" upcr="" -="" siydik="" oqsili="" kreatinin="">
3.4. Fokal IF/TA ning diffuz fibrozga qarshi tahlili turli matritsa kompozitsiyalarini aniqlaydiKeyinchalik, biz ANCA GN da fokal IF / TA va diffuz fibrozning morfologik xususiyatlarini batafsilroq tahlil qildik. Semitin kesmalari atrofik kanalchalarni o'rab turgan fokal IF/TA ning saqlanib qolgan buzilmagan tubulalarni o'rab turgan bo'shashgan fibrotik to'qimalarga qaraganda ko'proq kondensatsiyalanganligini aniqladi (4A-rasm). Transmissiya elektron mikroskopi (TEM) zich o'ralgan stromal matritsaga joylashtirilgan kollagen to'plamlarini aniqladi (4B-rasm). Aksincha, diffuz fifibrozning ultrastrukturaviy tahlili to'liq bo'lmagan fibrotik to'qimalarni ko'rsatadigan kengaygan shishli ichki qism bilan o'ralgan deyarli butun tubulalarni ko'rsatdi (4B-rasm). Ushbu kuzatishlar fokal IF/TA va diffuz buyrak fibrozisi ECM tarkibi va tashkiliy jihatdan farq qilishi mumkinligini ko'rsatdi.
3.5. Tubulyar atrofiya bilan bog'langan tubulointerstitial transkriptoma buyrak fibrozida aniq kollagen belgilarini ochib beradi.Keyinchalik, biz 170 ta KKD bilan kasallangan bemorlarda va 31 sog'lom tirik donorlarda (Nephroseq ma'lumotlar bazasi) mikrodisseksiyalangan tubulointerstitial bo'linmalardan olingan transkriptom ma'lumotlar to'plamida kollagen imzolari bilan aks ettirilgan ECM tarkibini, shu jumladan sitokeratin (tsitokeratin{2} tomonidan) bilan bog'liqligini tahlil qildik. KRT7), -18 (KRT18) va -19 (KRT19) [25,37]. Naychali shikastlanish belgilarining yuqori ifodasi bo'lgan tubulointerstitial bo'limlarda kollagenlar COL1A1, COL1A2, COL3A1, COL4A1, COL4A2, COL5A2, COL6A3, COL16A1 va COL18A1 asosan ifodalangan (5-rasm). Aksincha, COL2A1, COL5A3, COL6A1, COL8A2, COL11A1, COL11A2, COL17A1 va COL19A1 uchun teskari korrelyatsiya kuzatildi (5-rasm). Ushbu natijalar buyrak fifibrozining tubula shikastlanish belgilarida aniq kollagen belgilariga ega bo'lishi mumkinligini ko'rsatadi.
3.6. Fokal IF/TA ANCA GNda uzoq muddatli yomon natijalar bilan bog'liqBuyrak fifibrozining turli shakllari uzoq muddatli buyrak natijalari bilan bog'liqmi yoki yo'qligini tushunish uchun biz ANCA GNda umumiy, fokal IF / TA va diffuz buyrak fibrozini ESKD rivojlanishi bilan taqqosladik. ANCA GN da umumiy buyrak fifibrozi uzoq muddatli buyrak faoliyatining yomonroq natijalari bilan bog'liq (4-jadval). Qizig'i shundaki, faqat fokal buyrak fifibrozining darajasi buyrak natijalari bilan bog'liq (4-jadval). Bundan farqli o'laroq, diffuz buyrak fifibrozi uzoq muddatli buyrak natijalari bilan bog'liq emas (4-jadval), bu fifibrozning aniq shakllari kasallikning rivojlanishiga va mumkin bo'lgan davolanishga ta'sir qilishi mumkinligini anglatadi.
Munozara
Bugungi kunga kelib, buyrak fifibrozining rivojlanishini ikkita tushunchaga bo'lish mumkin: bir tomondan, adabiyotlarda buyrak fifibrozi surunkali glomerulyar yoki quvurli shikastlanish tufayli nefronning qaytarilmas shikastlanishining oddiy natijasi ekanligi haqida ishonchli dalillar mavjud. quvurli atrofiya va shikastlangan nefronlarni o'rab turgan fokal interstitsial fibrozda [12,13]. Shunday qilib, quvurli atrofiya bilan bog'liq bo'lgan fokal IF / TA chandiq to'qimasi sifatida xizmat qilib, buyrakni tiklashga yordam beradi va shu bilan allaqachon yo'qolgan nefronlarni almashtiradi [12]. Boshqa tomondan, buyrak fifibrozi buyrak interstitiumining faol, progressiv va zarar etkazuvchi qayta modellash jarayoni sifatida qaralishi mumkin. Ushbu jarayonda fibroblastlar epiteliya shikastlanishiga bevosita hissa qo'shadi, bu esa CKD rivojlanishining haqiqiy interstitsial mexanizmini ko'rsatadi [13]. Bizning ma'lumotlarimizga ko'ra, bu buyrak fifibrozini fokal yoki diffuz gistomorfologik naqshlarga ega bo'lgan ikkita alohida va mustaqil ko'rinishga tizimli ravishda ajratadigan va shu bilan ushbu lezyonlarning ikki xil patogen yo'lini aniqlaydigan birinchi tadqiqotdir. Buyrak fibrogenezi, buyrak fibrozisining rivojlanishi va taqdiri haqida yangi tushunchalar berish uchun biz buyrak fibrozisining ma'lum bo'lgan ob'ektlari bo'lgan uchta turli xil sichqoncha modellarini ko'rib chiqdik, bu fibrotik naqshlarni va turli buyrak bo'linmalari shikastlanishida namoyon bo'lishini aniqlash uchun. NTNda izolyatsiyalangan yarim oylik GN induksiyasi va surunkali glomerulyar shikastlanish atrofik tubulalar yonidagi asosan fokal fifibrozga olib keldi [26]. Ushbu kuzatishlar nefronning qaytarilmas shikastlanishi kontseptsiyasini qo'llab-quvvatlaydi, bu esa shikastlangan nefronlarni o'rab turgan fokal IF/TAga olib keladi [12,13]. Aksincha, UUO dan yallig'lanishli lezyonlar bilan tubulointerstitial bo'linmaning birlamchi shikastlanish modeli sifatida foydalanish surunkali lezyonlarning etakchi shakli sifatida diffuz fifibrozni aniqladi [27]. UUO sichqonlarida buyrak fifibrozi deyarli buzilmagan tubulalarni o'rab turgan nozik kollagen tolalari bilan tavsiflangan.
Qizig'i shundaki, UUO sichqonlarining interstitiumi nafaqat diffuz fifibrozni, balki mo'l-ko'l yallig'lanish hujayralarini ham ko'rsatdi. Yallig'lanish shikastlanishga javob bo'lganligi sababli, interstitsial yallig'lanish qo'shni nefronga bog'liq bo'lmagan interstitsial bo'linmaning bevosita shikastlanishidan kelib chiqadimi yoki yo'qligini muhokama qilish muhimdir. Binobarin, diffuz fifibroz buyrak epiteliy parenximasining birlamchi shikastlanishisiz izolyatsiyalangan interstitsial nefritdan kelib chiqadi, bu kasallikning rivojlanishining keyingi bosqichlarida tubulointerstitial nefrit sifatida yuzaga kelishi mumkin va, ehtimol, atrofik nefronlarga olib keladi. Naychali epiteliya tizimidagi siydik tiqilishi UUO modelida asosiy aybdor bo'lib, diffuz fifibroz, buyrak gemodinamikasi va metabolik o'zgarishlarga olib keladi [27]. Parenximaning har bir tiqilishi atrofdagi interstitiumning shishishiga olib kelganligi sababli, buyrak interstitiumining diffuz shishishi shikastlanishi UUO sichqonlarida yallig'lanish va diffuz fibroz darajasini tushuntirishi mumkin. Nihoyat, surunkali glomerulyar shikastlanishga bog'liq bo'lmagan ketma-ket quvurli atrofiya bilan birlamchi quvurli shikastlanish modeli sifatida FAN bir xil darajada ustun fokal IF / TA ni keltirib chiqardi va shu bilan fokal IF / TA rivojlanishi uchun quvurli shikastlanish va quvur atrofiyasi rolini ta'kidladi [28]. Ushbu modelda ko'plab qo'shni nefronlar to'g'ridan-to'g'ri quvurli toksik ta'sir bilan shikastlangan, bu esa glomerulyar zararsiz kengaytirilgan quvur atrofiyasiga olib keldi.
Bir nechta buyrak patologiyalarini tahlil qilgandan so'ng, bizning ma'lumotlarimiz shuni ko'rsatadiki, fokal IF / TA va diffuz fibroz inson buyrak kasalliklarining aksariyatida surunkali lezyonlar sifatida namoyon bo'ladi. Fokal IF / TA va diffuz fibroz asosan ANCA GNda mavjud va diffuz fibrozning sababi sifatida to'g'ridan-to'g'ri interstitsial shikastlanishning taxminiy mexanizmini ta'kidlaydi. ANCA GNda glomerulyar shikastlanish (hilol shakllanishi, glomerulyar skleroz va nefron yo'qolishi) va interstitsial shikastlanish (yallig'lanish tufayli) bilan kechadigan buyrak kasalligi sifatida biz bu erda tubulointerstitial fifibrozning nefron shikastlanishi (glomerulyar chandiqlarga bog'liq yoki mustaqil) bilan bog'liqligini isbotlaymiz. yoki birlamchi interstitsial shikastlanish (diffuz fibrotik interstitsial qayta qurishga olib keladi) [22,38-41]. Bundan tashqari, bizning ma'lumotlarimiz shuni ko'rsatadiki, ANCA GNdagi fokal IF / TA global glomerulyar skleroz bilan bog'liq bo'lib, glomerulyar skleroz va nefron yo'qolishiga olib keladi [26]. Bu erda, shuningdek, fokal buyrak chandig'i buyrak fifibrozining markaziy naqshini ifodalashini aniqlashimiz mumkin, bu surunkali glomerulyar shikastlanish quvurli atrofiya bilan mos keladigan kanalchaning degeneratsiyasiga, bu o'ziga xos nefronning yo'qolishiga va buyrakning to'liq ta'mirlanmaganligiga olib kelishini tavsiflovchi juda ko'p adabiyotlarni tasdiqlaydi. fokal almashtirish chandig'i bilan [12]. Shunday qilib, bizning ma'lumotlarimiz fokal IF / TA glomerulyar shikastlanishga bog'liq yoki mustaqil ravishda nefronlarning qaytarilmas shikastlanishi bilan bog'liqligini tasdiqlaydi. Inson biopsiyalaridagi fokal IF/TA naqshlari xuddi shunday kelib chiqishiga o'xshab ko'rinadi, bu esa buyraklarning tiklanishini aks ettiradi. Aksincha, ANCA GN da diffuz fifibroz ayniqsa interstitsial yallig'lanish bilan bog'liq edi. Semitin kesmalarida haqiqiy atrofiya belgilari bo'lmagan deyarli butunlay buzilmagan tubulalarni o'rab turgan bo'shashgan kollagen tolalari bo'lgan fibrotik to'qimalar aniqlangan. Shunisi e'tiborga loyiqki, TEM tahlillari juda erkin tashkil etilgan interstitium ichida juda kam joylangan kollagen to'plamlarini ko'rsatdi, bu esa shishli interstitsial o'zgarishlarni ko'rsatdi. ANCA GN kichik tomirlarga ta'sir qiluvchi vaskulyit bo'lganligi sababli, interstitsial yallig'lanish va diffuz fibrozni kapillyar oqish bilan birga bo'lgan interstitsial vaskulit tufayli tushuntirish mumkin; Shunday qilib, shish va interstitsial yallig'lanish diffuz interstitsial fibrozni kuchaytiradi [42].
CISTANCHE BUYRAK/BUYRAK DIALIZINI YANGILAYDI
Mikrodisseksiyalangan tubulointerstitsial bo'linmalardan olingan transkriptom ma'lumotlar to'plami tubulali atrofiya bilan bog'liq fokal IF / TA va quvur atrofiyasi bilan bog'liq bo'lmagan diffuz fibroz bilan bog'liq bo'lgan aniq kollagen belgilarini aniqladi, bu fokal IF / TA va diffuz buyrak fibrozisi ECM tarkibida farq qilishi mumkinligini anglatadi. Kollagen hujayradan tashqari matritsadagi asosiy ko'p tolali oqsildir. Kollagenlar ECM ning asosiy strukturaviy elementini tashkil qiladi va kuchlanish kuchini ta'minlaydi, hujayra yopishishini tartibga soladi, kimyotaksis va migratsiyani qo'llab-quvvatlaydi va to'qimalarning rivojlanishini bevosita ta'minlaydi [43]. Bugungi kunga qadar kollagenning 28 turi tasvirlangan. Birlashtiruvchi to'qimalarda joylashgan kollagenning asosiy turlari I, II, III, V va XI turlaridir. Mikrodisseksiyalangan tubulointerstitsial bo'linmalarda tubulyar atrofiya belgilari bilan bog'liq fokal fifibroz asosan I, III, IV va V kollagen turlarini o'z ichiga oladi. Aksincha, biz kollagen II va XI turlari bilan teskari korrelyatsiyani aniqladik, bu fokal IF / TA va diffuz buyrakni nazarda tutadi. fifibroz aniq kollagen belgilarida farq qilishi mumkin. Nihoyat, biz bu erda ANCA GN da umumiy buyrak fifibrozi yuqorida tavsiflanganidek, uzoq muddatli buyrak faoliyatining yomonroq natijalari bilan bog'liqligini ko'rsatamiz [22]. Qizig'i shundaki, faqat fokal buyrak fifibrozining darajasi buyrak natijasi bilan bog'liq. Aksincha, diffuz buyrak fifibrozi uzoq muddatli buyrak natijasi bilan bog'liq emas. Ushbu kuzatishlar shuni ko'rsatadiki, turli xil fifibroz naqshlari kasallikning rivojlanishiga va potentsial davolanishga ta'sir qilishi mumkin.
Birgalikda, biz bu erda buyrak fifibrozining ko'pchiligi nefron yo'qolishi va o'rnini bosuvchi chandiqlar bilan bog'liq ekanligi to'g'risida dalillar keltiramiz, bu to'qimalarning to'liq tiklanmaganligini anglatadi. Aksincha, diffuz fifibroz birlamchi interstitsial yallig'lanish va buyrakning epiteliya bo'limiga zarar etkazmasdan shikastlanish natijasidir. Qizig'i shundaki, fifibrozning ikkala shakli ham buyrak funktsiyasining yanada jiddiy yomonlashishi bilan bog'liq bo'lib, har bir interstitsial fibrotik lezyon natijaga muhim hissa qo'shishini anglatadi. Shu bilan birga, buyrakda muqobil mexanizmlar asosida joylashgan fokal almashtirish fifibroz va diffuz fibrozga olib keladigan funktsional parenximaning yo'qolishi tushunchasi hali tizimli ravishda tavsiflanmagan. Bunday mexanizmlar yurak fifibrozida qayd etilgan. O'rnini bosuvchi fifibroz (chandiqli fibroz) fokusli bo'lib, kardiomiotsit nekrozidan keyin, masalan, miyokard infarktidan keyin paydo bo'ladi va infarktdan keyin yurak mushaklari yorilishining oldini olish uchun qaytarilmas hisoblanadi [44]. Boshqa tomondan, diffuz fifibroz hujayradan tashqari kollagenning kardiomiotsit nekrozisiz diffuz tarqalishi bilan bog'liq bo'lib, printsipial jihatdan qaytarilishi mumkin [45-48].
Tadqiqotimizning asosiy cheklovlari - ayrim buyrak patologiyalarida buyrak biopsiyalarining cheklangan soni, uning retrospektiv dizayni va buyrak shikastlanishining eksperimental modellarini odamlarga o'tkazishning cheklanganligi. Shunga qaramay, fokal IF/TA va diffuz fibrozning ANCA GN (va boshqa surunkali buyrak kasalliklari) da buyrak fifibrozining mustaqil naqshlari ekanligi haqidagi asosiy topilmamiz har bir lezyonning o'ziga xos xususiyatlari va, ehtimol, ANCA GN da mexanizmlari borligini anglatadi. Bundan tashqari, ushbu kuzatishlar yallig'lanish, buyrak shikastlanishi va fifibroz o'rtasidagi o'zaro bog'liqlik haqidagi hozirgi bilimlarimizni yanada kengaytiradi, bu esa yallig'lanish reaktsiyalari va buyrak fifibrozining alohida ko'rinishlarini modulyatsiya qilish uchun potentsial yangi terapevtik strategiyalarni aniqroq tushunishga yordam beradi.
Xulosa
Xulosa qilib aytadigan bo'lsak, biz bu erda buyrak fifibrozining fokal shakli nefron yo'qolishi va o'rnini bosuvchi chandiqlar bilan bog'liq ekanligi haqida dalillar keltiramiz. Bundan farqli o'laroq, buyrakning diffuz shakli, fifibroz birlamchi interstitsial yallig'lanish va shikastlanish natijasida paydo bo'ladi.
