Perimenopozal sindromda feniletil alkogol glikozidlarini aralashuv tadqiqoti hayvon modeli Ⅱ

Tajriba 1 Cistanche feniletanoid glikozidini tayyorlash 1 Dorivor materiallar manbai

Cistanche tubulosa, Chengdu Wecistanche biotech Ltd.d, partiya raqami: 20130501.

2 ta reaktiv

95% etanol (tibbiy daraja); AB-8 makroporous adsorbsion qatron, Tianjin Guangfu nozik kimyoviy tadqiqot instituti, partiya raqami: 20130618.

Xitoy farmatsevtika va biologik mahsulotlarni nazorat qilish instituti tomonidan taqdim etilgan echinakozid mos yozuvlar moddasi, partiya raqami: 111670-200503.3

CISTANCHE QANCHA VA QANCHA KETADI?

Tayyorlash usuli

Adabiyot usuliga havola qilingan [19] va Henan an'anaviy xitoy tibbiyot kolleji dori-darmonlarni tahlil qilish bo'limi professori Feng Suxiang rahbarligida o'tkazildi.Cistancheni maydalangqo'pol kukunga aylantiring, 10 barobar miqdorda 70% etanolni qayta oqimga qo'shing va ikki marta, har safar 1,5 soat ekstrakti oling, ikkita spirt ekstraktini birlashtiring, alkogol hidi yo'qolguncha past bosim ostida konsentratsiya qiling va tarqating. namuna eritmasi sifatida distillangan suv bilan (kontsentratsiyasi 0,5 g dorivor material/ml). AB-8 qatronidan (ustunli preparat: qatron 1:10) o‘tkazing, namunani oqimga soling va u to‘liq adsorbsiyalanmaguncha 5 soat tursin. Birinchidan, distillangan suvning 10 baravar kolonnasi hajmi bilan yuvib tashlang, suvni to'kib tashlang va keyin 10 marta ustun hajmidan foydalaning. Nopoklarni olib tashlash uchun 10% etanoldan foydalaning va nihoyat, 60% etanolning 7 baravar ko'p miqdori bilan elute qiling. Eluatni to'plang va kukunni olish uchun quruq bo'lguncha bug'lang. 4 To'lqin uzunligini o'lchashni tanlash

{0}}.5 ml etalon eritmani aniq oʻlchab oling, 1 ml 5% li natriy nitrit eritmasidan qoʻshing, yaxshilab chayqating va 6 daqiqaga qoldiring; 1 ml 10% alyuminiy nitrat eritmasi qo'shing, yaxshilab silkiting va 6 daqiqaga qoldiring; 10% li natriy gidroksid eritmasiga 10 ml qo‘shing, 25 ml suv bilan suyultiring, yaxshilab chayqatiladi va etalon eritma sifatida xizmat qilish uchun 18 daqiqaga qoldiring. 0,5 mlCistanche feniletanol glikozidieritma sinov eritmasi bilan bir xil tarzda tayyorlangan. Parallel namunadan mos yozuvlar qo'shmasdan foydalaning va eritmani bo'sh sifatida sinab ko'ring va bo'sh eritmani xuddi shu tarzda tayyorlang. UV spektrofotometrida yuqoridagi uchta eritmada toʻlqin uzunligi 200-800nm diapazonida toʻliq toʻlqin uzunligini skanerlang. Malumot moddasi va sinov eritmasi 507 nm da maksimal yutilish cho'qqilariga ega, shuning uchun 507 nm yutilish to'lqin uzunligi sifatida aniqlanadi.

Cistanche feniletanol glikozid namunasining rangi ishlab chiqilgandan so'ng + Echinacea mandarin mos yozuvlar moddasining rangi rivojlanishidan so'ng (ustiga qo'yilgan taqqoslash), 1-rasmga qarang.

1-rasm Cistanche feniletanoid glikozid namunasining rangi ishlab chiqilgandan so'ng + Echinacea mandarin apelsin mos yozuvlar moddasining rangi ishlab chiqilganidan keyin 5-rasm Tarkibni aniqlash usuli

Tekshirish uchun 1 ml eritmani aniq o'lchab, 1 ml 5% natriy nitrit eritmasini qo'shing, yaxshilab silkiting va 6 daqiqa turing; 1 ml 10% alyuminiy nitrat eritmasidan qo'shing, yaxshilab silkiting va 6 daqiqaga qoldiring; 10% natriy gidroksid qo'shing, eritma 10 ml, suv bilan 25 ml ga suyultiriladi, yaxshilab chayqatiladi va 18 daqiqaga qoldiring. Blanka sifatida namuna eritmasini qo'shmasdan parallel namunadan foydalaning va xuddi shu tarzda bo'sh eritma tayyorlang. 507nm da UV spektrofotometr yordamida o'lchandi. 6 Uslubiy tahlil

6.1 Etalon eritma va namunali eritma tayyorlash

Etalon eritmani tayyorlash: Doimiy og'irlikda quritilgan 3.06 mg echinacoside etalon standartini aniq torting, uni 25 ml o'lchov kolbasiga soling, eritish uchun 70% eritma qo'shing va belgigacha suyultiring, yaxshilab silkitib, bir chetga qo'ying. Standart konsentratsiya 0,1224 mg/ml ni tashkil qiladi.

Namuna eritmasini tayyorlash: 5 mg ni aniq tortingCistanche feniletanoid glikozid ekstrakti10 ml hajmli o‘lchov kolbasiga solib, 70% li etanol bilan eritiladi va hajmgacha suyultiriladi.

6.2 Standart egri chiziqni tayyorlash

{0}}, 1.0, 2.0, 3.0, 4.{{10}}, 5.0 ni aniq chizish , 6,0 ml mos yozuvlar eritmasidan 4,2 dagi usulga muvofiq rang hosil qiling va hajmgacha suyultiring va absorbans qiymatini 507 nm da o'lchang. Regressiya egri chizig'ini hosil qilish uchun konsentratsiyaga qarshi absorbansdan foydalangan holda regressiya tenglamasi: Y=20.296X-0.0015 (r=0.9994) va chiziqli diapazon 4.{{ 23}}.4ug/ml.

6.3 Aniqlik sinovi

Namuna eritmasini oling va uni "Tarkibni aniqlash usuli" bandiga muvofiq olti marta parallel ravishda o'lchang. Absorbanning nisbiy standart og'ishini hisoblang. Absorbanslar mos ravishda {0}}.299, 0.299, 0.298, 0.297, 0.297, 0.297. O'rtacha absorbans=0.298, RSD=0.330% (n =6).

6.4 Barqarorlik testi

Namuna eritmasidan tegishli miqdorni oling va "Tarkibni aniqlash usuli" bandiga muvofiq, {0}}, 15, 30, 50 da absorbans qiymatlarini o'lchang. , va eritma toʻliq boʻyalgandan keyin 60 minut oʻtgach va nisbiy standart ogʻishni hisoblang. Absorbanslar mos ravishda 0,304, 0,303, 0,300 va 0,296. , 0,295, 0,295, o'rtacha absorbans=0,299, RSD=1,362% (n=5).

6.5 Takroriylik testi

Namuna oling, “Namunali eritma tayyorlash” bandi bo‘yicha 6 ta namunali eritma tayyorlang va “Tarkibni aniqlash usuli” bandi bo‘yicha absorbans qiymatini o‘lchab, tarkibini hisoblang. Tarkiblari mos ravishda 65,2%, 65,6%, 66,7%, 67,2% va 66,5%. , 65,8%, o‘rtacha kontent 66,2%, RSD=1,142% (n=6).

6.6 Namunani tiklash testi

Tarkibi ma'lum bo'lgan, jami 9 qismdan iborat 0,5 ml namuna eritmasidan aniq tortib oling va mos ravishda 200, 250 va 300 ul standart eritma qo'shing. Cistanche feniletanol glikozidining tiklanish tezligi va nisbiy standart og'ishini o'lchang va hisoblang. Qayta tiklash ko'rsatkichlari mos ravishda 101,45% va 99,26% ni tashkil qiladi. , 98,94%, 101,83%, 99,05%, 99,47%, 98,72%, 99,17%, 100,64%, o‘rtacha tiklanish darajasi 99,84%, RSD=1,164% (n=9).

7 Tarkibni aniqlash namunasi

1-jadval. Cistanchedagi feniletanoid glikozid miqdorini aniqlash natijalari