Tovuq suyagi kollagen peptidlarini og'iz orqali qabul qilish Kollagen parchalanishi va sintezini tartibga solish, yallig'lanishni inhibe qilish va lizosomalarni faollashtirish orqali sichqonlarda terining qarishiga qarshi 1-qism

Iltimos, murojaat qilingoscar.xiao@wecistanche.comqo'shimcha ma'lumot uchun

Annotatsiya:Ratsionning terining qarishiga ta'siri qiziqarli tadqiqot mavzusiga aylandi. Oldingi tadqiqotlar asosan dengiz organizmlaridan olingan kollagen peptidlarining og'iz orqali yuborilganda qarigan teriga foydali ta'siriga qaratilgan bo'lsa, parranda go'shtidan olingan kollagen peptidlarining qarigan teriga foydali ta'siri kamdan-kam hollarda qayd etilgan. Ushbu tadqiqotda tovuq suyagidan kollagen peptidlari fermentativ gidroliz orqali tayyorlangan va og'iz orqali yuborilgan kollagen peptidlarining D-galaktoza bilan birgalikda UV ta'sirida terining qarishini yumshatishga ta'siri va ta'sir mexanizmi o'rganilgan. Natijalar shuni ko'rsatdiki, tovuq suyagi kollagen kollagenning tipik xususiyatlariga ega va tovuq suyagi kollagen peptidlari (CPs) asosan molekulyar og'irligi bo'lgan kichik molekulyar peptidlar edi.<3000 da.="">cistanche umrini uzaytirishIn vivo tajribalar shuni ko'rsatdiki, CPs qarigan teriga sezilarli yengillashtiruvchi ta'sir ko'rsatdi, bu qarish terining tarkibi va tuzilishidagi o'zgarishlar, terining antioksidant darajasini yaxshilash va yallig'lanishni inhibe qilish bilan ko'rsatilgan; yengillashtiruvchi ta'sir CPs dozasi bilan ijobiy bog'liq edi. Keyingi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, CPlar birinchi navbatda terining oksidlanish darajasini pasaytiradi, asosiy transkripsiya omili AP-1 (c-Jun va c-Fos) ifodasini inhibe qiladi, so'ngra kollagen sintezini rag'batlantirish uchun TGF-/Smad signalizatsiya yo'lini faollashtiradi. , kollagen degradatsiyasini inhibe qilish uchun MMP-1/3 ifodasini inhibe qiladi va sichqonlarda terining qarishini engillashtirish uchun terining yallig'lanishini inhibe qiladi. Bundan tashqari, teri transkriptomasi CPsni og'iz orqali yuborishdan keyin faollashtirilgan lizosomalar terining qarishiga qarshi kurashda CP uchun muhim yo'l bo'lishi mumkinligini aniqladi va keyingi tadqiqotlarga loyiqdir. Ushbu natijalar CPsning qarishga qarshi funktsional ozuqaviy komponent sifatida ishlatilishi mumkinligini ko'rsatdi.

Iltimos, ko'proq bilish uchun shu yerni bosing

Kalit so‘zlar:kollagen peptidlari; qarishga qarshi; teri transkriptomiyasi; kollagen sintezi; lizosomalar

1.Kirish

Salomatlik davri, sog'lom ovqatlanishga to'g'ri rioya qilish, terining qarishida ovqatlanishning rolini aniqlash, yosh va sog'lom terini saqlab qolish uchun nima ovqatlanishni hal qilish qiyin muammolardir. Teri tananing eng katta organi bo'lib, epidermis, dermis va teri osti qatlamidan iborat. U tanani tashqi omillardan himoya qilish uchun to'siq bo'lib, salomatlik va go'zallikda rol o'ynaydi[1]. Terining qarishi murakkab jarayon bo'lib, u xronologik qarish va foto-qarishga bo'linadi va ichki va tashqi omillar ta'sir qiladi. Asosiy xususiyatlar hujayrada makromolekulyar shikastlanishning to'planishi, ildiz hujayralari funktsiyasining pasayishi (to'qimalarning yangilanishini rag'batlantirish) va terining jismoniy yaxlitligini bosqichma-bosqich yo'qotishdir [2]. Terining qarishiga olib keladigan asosiy molekulyar mexanizmlar asosan oksidlovchi stress, telomerning qisqarishi, DNKning shikastlanishi, genetik mutatsiya, mikro-RNK regulyatsiyasi, glikatsiyaning yakuniy mahsulot to'planishi va yallig'lanishning qarishini o'z ichiga oladi [3]. Foto qarish - bu ultrabinafsha nurlanish ta'sirida terining epidermal giperplaziyasi, qurishi va hujayradan tashqari matritsaning degradatsiyasi.cistanche nzFoto-qarishning asosiy sababi - mitogen bilan faollashtirilgan protein kinaz (MAPK) signalizatsiyasi kabi signal yo'llari orqali matritsali metalloproteinazalar (MMPs) va I turdagi pro-kollagenning ifodalanishiga vositachilik qiluvchi ultrabinafsha nurlanish natijasida hosil bo'lgan reaktiv kislorod turlari (ROS). yo'l, bu teridagi hujayradan tashqari matritsaning (ECM) degradatsiyasiga va fibroblastlarning apoptoziga olib keladi [4]. So'nggi yillarda terining sog'lig'ini saqlash va qarishni kechiktirish mashhur bo'lib, antioksidant va qarishga qarshi funktsiyalarga ega bioaktiv peptidlar va polifenollar kabi tabiiy ingredientlarni topish tadqiqot nuqtasiga aylandi [5].

Biroq, kollagen katta molekulyar og'irlikka ega va to'g'ridan-to'g'ri so'rilishi va ishlatilishi qiyin, holbuki kollagen gidrolizidan keyin kichik molekulyar kollagen peptidlari kuchliroq biologik faollikka va yuqori so'rilish tezligiga ega [6]. Shu bilan birga, kollagenning oziq-ovqat, tibbiyot, to‘qima muhandisligi, kosmetika va boshqa sohalarda keng qo‘llanilishi past molekulyar og‘irlikka ega, yuqori so‘rilish samaradorligi va kuchli biologik faollikka ega kollagen peptidlarini funktsional oziq-ovqat va tibbiy tadqiqotlarda yangi sevimliga aylantirdi[{{1] }}]. Kollagen peptidlari kichik bo'lib, tarkibida kollagen gidrolizi natijasida olingan 2-20 aminokislota qoldiqlari mavjud. Ular potentsial yallig'lanishga qarshi va antioksidant funktsiyalari va immunitetni tartibga solish va antioksidlanish va proliferatsiyaning teri fibroblastlariga ta'siri tufayli terining qarishini davolash uchun parhez qo'shimchasi sifatida ishlatiladi [10].

Cistanche qarishga qarshi bo'lishi mumkin

Og'iz orqali yuborilgandan so'ng, kollagen peptidlari kichik peptidlar shaklida so'riladi va tezda qonga, oxir-oqibat, saqlash va foydalanish uchun buyraklar, teri, bo'g'inlar va boshqa to'qimalarga o'tkaziladi. 14 kundan keyin C14-belgilangan kollagen peptidlari bilan gavalangan sichqonlar terisida radioaktivlik darajasi yuqoriligicha qoldi. Kollagen peptidlari deyarli butunlay so'rilishi va organizm tomonidan ishlatilishi mumkin, holbuki kollagenning so'rilishi va foydalanish darajasi atigi 50-60 foizni tashkil qiladi [6,11-13]. So'nggi yillarda baliq terisi, baliq qobig'i, sigir suyagi, sigir terisi va cho'chqa terisidan olingan kollagen gidrolizatlari terining qarishini yumshatishda foydali ta'sir ko'rsatishi va tadqiqotchilarning katta e'tiboriga sazovor bo'lganligi haqida xabar berilgan. Masalan, kumush sazan terisidan ajratilgan kollagen peptidlari pro-kollagen sintezini kuchaytiradi va TGF-/Smad yo‘lini faollashtirib, AP{6}}, MMP-1 va MMP{8}} oqsil ifodasini inhibe qiladi. kollagen degradatsiyasi va foto-qarigan teri hujayralarini tiklaydi [14]. Qoramol kollagen peptidlarini og'iz orqali yuborish terining bo'shashishini yaxshilashi, kollagen tarkibini va antioksidant ferment faolligini oshirishi, kollagen tolasini tiklashi va qarigan sichqonlarda terining kollagen nisbatini normallashtirishi mumkin [15]. Biroq, turli manbalardan kollagen peptidlari turli xil ta'sirga ega. Kollagen peptidlarini og'iz orqali yuborishdan keyin qondagi yuqori faol peptidlarning miqdori va tuzilishi kollagen manbasiga bog'liq [10]. Tovuq terisidan olingan kollagen peptidning UVA ta'siridan kelib chiqqan fibroblast shikastlanishiga qarshi himoya ta'siri cho'chqa, sigir yoki tilapiya terisidan olingan kollagen peptididan yuqori edi va uning ta'siri kollagendan olingan tripeptidga (Gly-Pro) teng edi. -Hyp)[16]. Diniy e'tiqodlar va kasallik tashvishlari (masalan, jinni sigir kasalligi) odamlarni asta-sekin kollagen va uning mahsulotlarini rivojlanish yo'nalishini quruqlikdagi sutemizuvchilardan parranda va dengiz organizmlariga o'tkazishga olib keldi [17]. Parranda go'shtini qayta ishlashning asosiy qo'shimcha mahsuloti sifatida tovuq suyagi kollagen mahsulotlarining istiqbolli manbai hisoblanadi. Bu nafaqat resurslarni isrof qilish va atrof-muhitning ifloslanishini kamaytiradi, balki qo'shimcha mahsulotlardan samarali foydalanish imkonini beradi. Shuning uchun, ushbu tadqiqotda biz tovuq suyagi kollagen peptidlarini xom ashyo sifatida ishlatdik, yalang'och sichqonlar D-galaktoza va UV bilan ishlov berib, terining qarishini qo'zg'atish uchun, kollagen peptidini og'iz orqali yuborishning terining qarishini engillashtirishga ta'sirini baholash modeli sifatida. sichqonlar va tegishli mexanizmni aniqlang.

2. Materiallar va usullar

2.1. Materiallar, kimyoviy moddalar va hayvonlar

Yunnan qishloq xo'jaligi universiteti (Kunming, Xitoy) tovuq fermalari tovuq suyagi uni olish uchun ajratilgan, quritilgan va maydalangan tovuqlarni etkazib berishdi. Su-peroksid dismutaza (SOD), katalaza (CAT) va glutation peroksidaza (GSH-PX) to'plamlari Soleibao Biotechnology Co., Ltd. (Pekin, Xitoy) dan sotib olingan. Gidroksiprolin (HYP), interleykin-1 (IL{3}}), matritsali metalloproteinaz-1/3 (MMP{6}}/3), I turdagi pro-kollagen va gialuron kislotasi ( HA) ferment bilan bog'langan immunoassay (ELISA) to'plamlari Nankin Jiancheng biomuhandislik institutidan (Nankin, Xitoy) sotib olingan. Sog'lom urg'ochi BALB/C sochsiz sichqonlar (18±2 g, olti haftalik) Nanjing Junke Bioengineering Corporation, Ltd.(Nankin, Xitoy)dan ruxsatnoma raqami bilan sotib olingan: SCXK(SU)2016-0010. Pepsin va papain Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd. (Shanxay, Xitoy) dan sotib olingan va boshqa kimyoviy moddalar analitik darajada edi. Barcha sichqonlar Yunnan provintsiyasining laboratoriya hayvonlarini parvarish qilish qoidalariga muvofiq ishlandi va Yunnan qishloq xo'jaligi universiteti hayvonlarni parvarish qilish va foydalanish qo'mitasi tomonidan tasdiqlangan (tasdiqlash ID: YAUACUC01).

2.2. Kollagen tayyorlash va aminokislota tarkibi

Tovuq suyagi kollagenining ekstraktsiyasi va aminokislota tarkibi Lieut al tomonidan tasvirlangan usulga amal qildi. [18] ozgina oʻzgartirishlar bilan. Tovuq suyagi kukuni aralashtiriladi va 0.05 M NaOH, 10 foiz n-geksan va 0.25 MEDTA eritmasiga (pH 7,5) namlanadi. 1/10 (m/o) nisbati. Har bir bosqichda namuna 36 soat davomida davolandi va har 6 soatda suyak kukuni shishishi va suyak kukunidan kollagen bo'lmagan oqsillar, yog'lar va minerallarni olib tashlash uchun namlash eritmasi o'zgartirildi. Namuna har bir qadamdan so'ng neytral holatga qadar toza suv bilan yuviladi. Oldindan ishlov berilgan tovuq suyagi uni 0,1 foiz (v/v) pepsin o'z ichiga olgan 0,5 M muzli sirka kislotasi bilan qattiq-suyuqlik nisbati 1:10 (v/v) bilan aralashtiriladi va doimiy ravishda aralashtirib, 4 daraja haroratda ekstraksiya qilinadi. 48 soat. Keyin filtrlangan va filtrat 15,000×g haroratda 15 daqiqa, 4 daraja santrifüj qilingan.cistanche jinsiy olatni o'lchamiSupernatant NaOH eritmasi bilan 7.5-7.8 ga sozlandi va NaCl yakuniy konsentratsiyasi 1,5 M ga qo'shildi. Aralashmani tuzlash uchun 4C da 12 soat davomida buzilmagan holda saqlanganidan so'ng, kollagen cho'kmasi santrifüj qilindi. 15,000×g da 15 daqiqa davomida 4 daraja, keyin 0.5 M sirka kislotasi bilan eritiladi, toza suvda dializlanadi, muzlatib quritiladi va tayyor mahsulot tovuq suyagi kollagenidir.

Tovuq suyagi kollagenining aminokislotalar tarkibi Sykam S433D aminokislotalar avtomatik analizatori (Myunxen, Germaniya) tomonidan aniqlangan. Tekshirish uchun ma'lum miqdordagi kollagen namunasi muhrlangan naychada olindi, unga 1{7}}ml6 M HCl qo'shildi va 110 darajada 24 soat davomida gidrolizlandi. Hidrolizat azotni puflash yo'li bilan konsentrlangan va 20 ml limon kislotasi buferida qayta eritilgan. 0,22 mkm mikrog'ovakli membrana bilan mikrofiltratsiyadan so'ng aminokislotalar spektrini tahlil qilish uchun 20 mkL gidrolizat olindi. Namunadagi aminokislotalar miqdori foizlarda ifodalangan.

2.3. Kollagen peptidlarini (CPs) tayyorlash va molekulyar og'irlikni taqsimlash

Oldingi optimallashtirish jarayonimiz natijalariga ko'ra, CPlar papain yordamida ferment-substrat nisbati 1:40(massa nisbati)da tayyorlangan. PH ni 7 ga o'rnatgandan so'ng va fermentativ gidrolizni 63 darajada 5 soat davomida qaynab turgan suv hammomida 15 daqiqa davomida faolsizlantirdi. Ferment gidrolizati tuzsizlantirildi va liofilizatsiya qilindi, 0,1 foizli chumoli kislota eritmasida qayta eritildi va supernatant olish uchun sentrifuga qilindi. Elektrosprey ionizatsiyasi (ESI) bilan jihozlangan AQ Exactive HF Orbitrap yuqori aniqlikdagi massa spektrometri-OE-HF(Thermo Fisher, Waltham, MA, AQSH) 350-1800 toʻliq skanerlash rejimida kollagen gidrolizatini tahlil qilish uchun ishlatilgan. m/z va natijalar Proteome Discoverer yordamida olindi va tahlil qilindi

2.1 dasturiy ta'minot

2.4.Hayvonlar sinovi

Urg‘ochi BALB/Kreslosiz sichqonlar (n {0}}) xonada harorat (24±1 daraja), namlik (60±5 foiz) va 12 daraja nazorat ostida saqlangan. h bir hafta davomida kunduzi-tun aylanishi. Ularga oziq-ovqat va suvdan ad libitum foydalanish imkoniyati berildi. Bir haftalik moslashishdan so'ng, sichqonlar tasodifiy ravishda quyidagi besh guruhga bo'lingan (har bir guruhda n =11):(i). Oddiy guruh (N): UV ta'sir qilmaydi; har kuni 0,4 ml fiziologik eritmani og'iz orqali yuborish. (ii). Model guruhi(M):UV taʼsirlangan va D-galaktoza (0,2 ml); kuniga 0,4 ml fiziologik eritmani og'iz orqali yuborish. (i). Past dozali kollagen peptidlar guruhi (LCPs): UV ta'sirlangan va D-galaktoza (0,2 ml); og'iz orqali

kuniga 0,4 ml CPs (doza: 200 mg kg-1 tana vazniga) yuborish. (iv). O'rta dozali kollagen peptidlar guruhi (MCPs): UV ta'sirida va D-galaktoza; og'zaki

kuniga 0,4 ml CPs (doza: 500 mg:kg-1 tana vazni) yuborish.

(v). Yuqori dozali kollagen peptidlar guruhi (HCPs): UV ta'sirida va D-galaktoza; kuniga 0,4 ml CPs (doza: 1000 mg·kg-1 tana vazni) og'iz orqali yuborish.

D-galaktoza bilan davolash sichqonchaning boʻynining orqa qismiga 0,2 ml 10 foiz D-galaktoza eritmasini teri ostiga yuborish orqali amalga oshirildi (doza: 1.{19}}g/ kg-1tana vazni). UV nurlanishi 40 Vt UVA-340 LAMP (O-panel, Klivlend, AQSh, eng yuqori to'lqin uzunligi: 340 nm) bilan amalga oshirildi, chiroq va sichqonlarning orqa tomoni orasidagi masofa 30 sm (230 m J/) edi. sm-) va nurlanish etti hafta (49 kun) davomida har kuni 30 daqiqa davom etdi. Radiatsiya intensivligi UVA{17}}radiometri (Xinbao Keyi Electronic Technology Co., Ltd., Sian, Xitoy) bilan o'lchandi. D-galaktoza va UV bilan davolashdan bir soat o'tgach, sichqonlarga har kuni og'iz orqali 0,4 ml CP yuborildi. Oxirgi nurlanishdan so'ng, sichqonlar behushlik qilindi, tortildi va keyingi tahlil qilish uchun to'qimalar namunalari olindi.

2.5.Teri namligi, visseral indeks va tana vaznining ortishi

Teri namligi ISO 1442 tomonidan aniqlandi va visseral indeks quyidagi tenglama yordamida hisoblandi: visseral indeks (g/kg)=visseral vazn/tana vazni.

2.6. Terining oksidlanish stressi, HA va HYP tarkibi

Teri namunalari to'qima gomogenizatori (TGrinder OSE-Y30, Tiangen Biochemical Technology Co., Ltd., Pekin, Xitoy) bilan muzli hammomda to'qqiz baravar ko'p miqdordagi sho'r suv bilan bir hil holga keltirildi va keyin 2000 yilda santrifüj qilindi. ×g va 10 daqiqa davomida 4 daraja. Yig'ilgan supernatantdagi superoksid dismutaza (SOD), katalaza (CAT), glutation peroksidaza (GSH-PX) va gialuron kislotasi (HA) va gidroksiprolin (HYP) ning faolligi ko'rsatmalarda tavsiflangan usulga muvofiq aniqlandi. tegishli to'plamlarga mos keladi.

2.7. Teri gistologik

Sichqoncha terisi namunalari 24 soat davomida 4 foizli paraformaldegid eritmasida mahkamlangan, suvsizlangan, kerosinga solingan va dilimlangan. Teri qismlari gematoksilin va eozin (HE) bilan bo'yalgan va ECLIPSE CI-E oldinga floresan mikroskopi (Nikon, Yaponiya) bilan kuzatilgan. Teri epidermisi va dermisining qalinligi Halcon 13.0.1.1 dasturi (MVTec, Myunxen, Germaniya) yordamida baholandi.

2.8.Teri transkriptomining ketma-ketligi

2.8.1. RNK ekstraktsiyasi, kutubxona qurilishi va transkriptoma ketma-ketligi

Jami RNK ishlab chiqaruvchining ko'rsatmalariga muvofiq RNeasy Mini Kit (Tiangen Biochemical Technology Co., Ltd., Pekin, Xitoy) yordamida sichqonlar terisidan olingan. RNKning tozaligi va kontsentratsiyasi kaiaoK5500Spekttrofotometr (Kaiao, Pekin, Xitoy) yordamida tekshirildi; RNK yaxlitligi RNK Nano 6000 Assay Kit va Bioanalyzer 2100 tizimi (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, AQSH) yordamida baholandi. Har bir namunaning transkripsiyaviy ketma-ketligi tahlili Biolinker Technology Company Limited (Kunming, Xitoy) tomonidan amalga oshirildi.cistanche kukuniQisqacha aytganda, indeks bilan kodlangan namunalarni klasterlash ishlab chiqaruvchining ko'rsatmalariga muvofiq HiSeq PE Cluster Kit v4-cBot-HS (Illumina) yordamida cBot klaster yaratish tizimida amalga oshirildi. Klaster ishlab chiqarilgandan so'ng, kutubxonalar Illumina platformasida ketma-ketlashtirildi va 150 bp juftlashtirilgan o'qishlar yaratildi.

2.8.2. Bioinformatika RNK ketma-ketligi ma'lumotlarini tahlil qilish

Gen Ontologiyasi (GO) va Kioto Genlar va Genomlar Entsiklopediyasi (KEGG) differensial ravishda ifodalangan genlarni (DEG) boyitish tahlili R tili klaster analizatori paketi yordamida amalga oshirildi. P-qiymati 0.05 dan kichik bo'lganida, GO va KEGG tomonidan boyitilgan elementlar va yo'llar muhim deb hisoblanadi.

2.8.3. Teskari transkriptaza-polimeraza zanjiri reaktsiyasi (qRT-PCR)

QRT-PCR yuqorida tavsiflanganidek bajarildi [19].

2.9.Wester1 Blot

Park va boshqalar tomonidan tasvirlangan usulga ko'ra. [20], Western blot (WB) tahlili sichqonlarda terining qarishi bilan bog'liq oqsillarning ifodasini aniqlash uchun o'tkazildi. Har bir davolash guruhidagi teri lizatining oqsil kontsentratsiyasi BCA to'plami yordamida aniqlangan, SDS-PAGE (10 foiz akrilamid jeli) bilan ajratilgan, PVDF membranasiga o'tkazilgan, 5 foizli yog'siz sut bilan bloklangan va tegishli miqdorda birlamchi sut bilan inkubatsiya qilingan. antikorlar (TGF-b1, c-Fos, c-Jun, Samd2 / 3 va -aktin) kechada 4 daraja. TBST bilan yuvilgandan so'ng, namunalar ikkilamchi antikorlar bilan aralashtiriladi va xona haroratida 1 soat davomida inkubatsiya qilinadi. Muayyan oqsillarni aniqlash uchun ChemiDoc XRS plus kimilyuminesans gel tasvirlagichi (BioRAD, Hercules, CA, AQSH) ishlatilgan. Image ]dasturiy ta'minot har bir davolash guruhida maqsadli oqsilning ifodasini aniqlash uchun ishlatilgan va natijalar -aktin oqsiliga normallashtirilgan zichlik qiymatlari bilan ifodalangan.

2.10.ELISA

Teri lizis suyuqligidagi MMP-1, MMP-3, I turdagi pro-kollagen va IL-1 ning ifoda darajalari ferment bilan bog'langan immunoassay orqali aniqlandi. Tahlil to'plam bilan birga kelgan ko'rsatmalarga muvofiq o'tkazildi.

2.11. Statistik tahlillar

Barcha natijalar SPSS 21 (IBM Inc., Armonk, NY, AQSh) dasturiy ta'minoti yordamida bir tomonlama dispersiya tahlili (ANOVA) va Dunkanning ko'p diapazonli testi orqali tahlil qilindi, muhimlik darajasi p ga o'rnatildi.<0.05. originpro="" 2017="" (originlab,="" northampton,="" ma,="" usa)was="" used="" to="" plot="" the="" data.="" all="" data="" were="" expressed="" as="" the="" mean="" ±standard="" deviation="">

3. Natijalar va muhokama

3.1.Kollagenning aminokislota tarkibi

Tovuq suyagi kollagenining aminokislotalar tarkibi 1-jadvalda keltirilgan. Gly namunalardagi asosiy aminokislota bo'lib, umumiy aminokislotalarning deyarli uchdan bir qismini (27,86 foiz) tashkil etgan, Hyp esa kollagendagi maxsus aminokislota, 9,83 foizni tashkil qiladi. Kollagen molekulalarining asosiy xarakteristikalari takroriy Gly-XY ketma-ketligi va uchta c zanjirdan tashkil topgan noyob uch spiral strukturasi edi. Gly umumiy aminokislotalarning uchdan bir qismini tashkil etdi, X va Y ko'pincha prolin va gidroksiprolin edi yoki har qanday qoldiq bo'lishi mumkin edi [21]. Namunaning aminokislotalar tarkibi oldingi tadqiqotlarda qayd etilgan tovuq suyagi kollageniga o'xshash edi va kollagenning tipik xususiyatlariga ega edi [22].

3.2. CPlarning molekulyar og'irligi bo'yicha taqsimlanishi

Molecular weight distribution reflects the degree of collagen hydrolysis. The molecular weight of the CPs was mainly below 3000 Da(Figure 1), accounting for about 87.61%of all collagen hydrolysates, indicating that almost all of the CPs were small peptides. Many studies claim that collagen peptides with a lower molecular weight have better biological activity [23]. For example, Song et al. [24]. reported that lower molecular weight (200-1000 Da,65%)silver carp skin collagen peptides repaired UV-induced aging skin in mice more effectively than similar peptides with a higher molecular weight(>1000 Da, 72 foiz). Biroq, Germaniyaning Gelita kompaniyasi bir nechta klinik tadqiqotlar orqali ko'rsatdiki, kollagen peptidlarining ta'siri asosan kollagen peptidlarining molekulyar og'irligi emas, balki inson kollagenining parchalanishidan keyin kollagen peptidlari xususiyatlariga mos keladigan darajada aniqlanadi. Ularning aniqlashicha, o‘rtacha molekulyar og‘irligi 2000 Da bo‘lgan VERISOL⑧ mahsuloti teri fibroblastlariga eng ko‘p ogohlantiruvchi ta’sir ko‘rsatadi, o‘rtacha molekulyar og‘irligi 3000 Da bo‘lgan FortigelTM mahsuloti esa xaftaga tiklanishiga alohida ta’sir ko‘rsatadi [25-27].

3.3. Og'zaki CPlarning terining qarishini yumshatishga ta'siri

3.3.1. Tana vazni va organlar indeksi

Tana vazni indeksi va organlar indeksi muhim va sichqonlarning sog'lig'ini aks ettiradi. Sinov davrida har bir guruhdagi sichqonlarning vazni an'anaviy tarzda oshdi (2-jadval). M guruhining o'rtacha vazn ortishi N guruhiga qaraganda past edi va CP davolash guruhlari M guruhiga qaraganda yuqori bo'lib, CPlarning sichqonlarga nojo'ya ta'siri yo'qligini ko'rsatdi. Avvalgi hisobotlarda kollagen peptidlari bilan ishlov berilgan sichqonlarning dozasi asosan 100-1000 mg/kg.bw·d orasida edi va tilapiya kollagen peptidlarining xavfsiz dozasi 4,07 g/kg.bw·d ga yetdi [{{6} }].cistanche salsa ekstrakti Similarly, the growth of skin-aged mice after gavage with tilapia scale collagen peptides (dose: 500 and 1000 mg/kg.bw·d)was also similar to our results [29]. The spleen plays an important role in humoral and cellular immunity, thus, the spleen index is often used to evaluate immune system function. The liver index was used to evaluate the toxicity of the tested sample. In these tests, the liver and spleen indices in the M group were lower than those in the N group, and both recovered after treatment with CPs, but there was no significant difference across the treatment groups(p>0.05). Natijalar oldingi tadqiqotlar natijalariga o'xshash edi [30], bu CPlar xavfsiz ekanligini va sichqonlarning immunitetini biroz yaxshilashi mumkinligini ko'rsatadi.

3.3.2. Teri tarkibi

UV va D-galaktoza bilan ishlov berish (M guruhi) teridagi namlik, HA va Hyp miqdorini guruhdagilarga nisbatan mos ravishda 13,36 foizga, 24,08 foizga va 15,83 foizga sezilarli darajada kamaytirdi.<0.05)(table 2).the="" contents="" of="" moisture,="" ha,="" and="" hyp="" in="" the="" skin="" were="" significantly="" higher="" in="" mice="" after="" the="" oral="" administration="" of="" cps="" compared="" to="" the="" contents="" of="" those="" in="" the="" mice="" of="" the="" m="" group=""><0.05). among="" the="" dose="" groups,="" the="" contents="" of="" the="" three="" skin="" components="" were="" significantly="" different="" between="" the="" lcp="" and="" hcp="" groups="" and="" were="" dependent="" on="" the="" dose="" of="" intake="" of="" cps.="" the="" hcp="" group="" had="" even="" higher="" contents="" than="" the="" n="" group,="" and="" ha="" and="" hyp="" were="" significantly="" different="" between="" the="" two="" groups="" (p=""><>

Teri namligining o'zgarishi ajinlar va terining sarkmasına olib keladi va teri kollagen va HA [31] kabi matritsa komponentlari ta'sir qiladi. Gidroksiprolin kollagendagi barqaror, boy va maxsus aminokislota bo'lib, uning tarkibi bilvosita teridagi kollagen tarkibini, shuningdek terining qarishini aks ettirishi mumkin. Bundan tashqari, teri ECMida yuqori darajada ifodalangan HA terining suv muvozanatini, osmotik bosimini, namlikni ushlab turishni va terining suvni saqlash tizimi va strukturaviy komponenti sifatida elastikligini nazorat qilishda muhim rol o'ynaydi [32]. Ushbu tadqiqotda teridagi namlik, HYP va HA tarkibi CP qabul qilingandan keyin sezilarli darajada oshdi, bu esa CP tomonidan kollagen va HA sintezini rag'batlantirish bilan bog'liq bo'lishi mumkin. Bundan tashqari, HYP va HA ning ko'payishi namlik miqdorini oshirdi.

3.3.3. Terining gistologik o'zgarishlari

Etti haftalik uzluksiz davolanishdan keyin sichqonlarning orqa terisidagi gistologik o'zgarishlar 2-rasmda ko'rsatilgan. M guruhining qarigan terisi N guruhining terisiga nisbatan qo'pol sirt, qalinlashgan epidermis, yupqalashgan dermis va siyrak hujayralar xususiyatlarini ko'rsatdi. Biroq, sichqonlarda terining qarishi holati N guruhidagi sichqonlardagi kabi silliq, tartibli va to'liq tuzilmani saqlab, CPlarni og'iz orqali yuborishdan keyin yaxshilandi. Shunday qilib, teri dermisi sezilarli darajada yupqaroq edi va epidermis M guruhida N guruhiga qaraganda sezilarli darajada qalinroq edi (p).<0.05). the="" change="" in="" skin="" dermis="" and="" epidermal="" thickness="" was="" significantly="" better="" after="" treatment="" with=""><0.05), and="" the="" effect="" was="" more="" obvious="" with="" the="" increase="" in="" the="" dose="" of="" cps="" (figure="" 2).="" the="" effect="" of="" oral="" cps="" on="" the="" histological="" structure="" of="" aging="" skin="" was="" similar="" to="" that="" reported="" previously[4,28,31].="" the="" increase="" in="" the="" thickness="" of="" the="" epidermis="" might="" be="" an="" adaptive="" change="" to="" protect="" the="" skin="" from="" external="" stimuli,="" loss="" of="" skin="" moisture,="" and="" uv="" damage,="" possibly="" due="" to="" the="" increase="" in="" uv-activated="" epidermal="" growth="" factor="" receptor="" (egfr)="" that="" induces="" keratinocyte="" proliferation="" and="" epidermal="" hyperplasia[4].="" however,="" the="" mechanism="" by="" which="" oral="" cps="" alleviate="" the="" increase="" in="" epidermal="" thickness="" remains="" unclear.="" the="" dermis="" imparts="" elasticity="" and="" strength="" to="" the="" skin,="" and="" the="" degradation="" of="" ecm="" and="" the="" reduction="" in="" the="" ability="" to="" repair="" fibroblasts="" are="" the="" main="" causes="" of="" dermal="" thinning="" in="" aging="" skin.="" dermal="" thickness="" increased="" after="" the="" treatment="" with="" cps,="" which="" might="" be="" due="" to="" the="" removal="" of="" ros="" from="" the="" skin="" and="" inhibition="" of="" the="" increase="" of="" mmps="" by="" cps.="" this,="" in="" turn,="" inhibited="" the="" degradation="" of="" skin="" collagen="" and="" elastin="" (figure="" 3),="" the="" entry="" of="" cps="" into="" the="" skin,="" and="" their="" participation="" in="" the="" synthesis="" of="" collagen="" and="" ha="" [6],="" which="" was="" confirmed="" by="" the="" increase="" in="" the="" content="" of="" hyp="" and="" ha="" in="" the="" skin="" (table="">

3.3.4.Teri antioksidant va yallig'lanish darajalari

Antioksidant fermentlarning faolligini aniqlash tanadagi antioksidant darajasini baholash uchun eng ko'p qo'llaniladigan usuldir [28]. 3-rasmda ko'rsatilganidek, M guruhidagi CAT, SOD, GSH-Px va MDA tarkibining faolligi N guruhidagilarga qaraganda ancha past edi (p).<0.05). administering="" cps="" effectively="" inhibited="" the="" decrease="" of="" cat,="" sod,="" gsh-px="" activities,="" and="" the="" mda="" content="" in="" the="" skin="" of="" mice,="" compared="" to="" those="" in="" the="" mice="" skin="" of="" the="" m="" group,and="" was="" positively="" correlated="" with="" the="" dose="" of="" cps;="" there="" were="" significant="" differences="" among="" the="" different="" dose="" groups=""><0.05). when="" ros,="" accumulated="" by="" skin="" oxidative="" stress,="" exceed="" the="" antioxidant="" defense="" ability="" of="" the="" body,="" they="" destroy="" the="" ecm,="" which="" is="" the="" key="" cause="" of="" skin="" aging.="" ros="" can="" cause="" the="" oxidation="" of="" lipids="" and="" proteins="" in="" the="" skin,="" resulting="" in="" fibroblast="" degeneration="" and="" changes="" in="" the="" skin.="" ros="" activates="" the="" mapk="" signaling="" pathway="" and="" the="" ap-1="" protein="" to="" upregulate="" the="" expression="" of="" mmps="" and="" promote="" the="" degradation="" of="" matrix="" collagen="" [21].="" although="" the="" antioxidant="" enzymes="" and="" antioxidants="" in="" the="" body="" can="" remove="" ros="" to="" protect="" the="" skin="" from="" damage,="" when="" the="" content="" of="" rosexceeds="" the="" defense="" (antioxidant)="" ability="" of="" the="" body="" or="" the="" body's="" defense="" ability="" declines,="" it="" causes="" oxidative="" stress="" and="" skin="">

Bundan tashqari, ROS sabab bo'lgan hujayrali yallig'lanish reaktsiyasi ham terining qarishiga yordam beradi. UV va D-galaktoza bilan davolashdan so'ng (M guruhi) sichqonlar terisidagi IL-1 tarkibi N guruhidagiga nisbatan sezilarli darajada oshdi (3D-rasm), bu terining sezilarli yallig'lanish reaktsiyasini ko'rsatganligini ko'rsatadi. (p<0.05). the="" cps="" significantly="" reduced="" the="" content="" of="" il-1α="" in="" the="" skin="" in="" a="" dose-dependent="" manner,="" compared="" to="" that="" in="" the="" skin="" of="" mice="" in="" the="" m="" group.="" there="" was="" a="" significant="" difference="" between="" hcps="" and="" lcps=""><0.05), indicating="" that="" cps="" alleviated="" skin="" inflammation.="" the="" o2="" produced="" by="" ultraviolet="" irradiation="" stimulated="" the="" expression="" of="" mmp-1="" in="" dermal="" fibroblasts="" through="" the="" secretion="" of="" il-1α="" and="" il-6,="" thereby="" disrupting="" the="" ecm="" [33].="" therefore,="" this="" study="" suggested="" that="" cps="" significantly="" increased="" the="" activity="" of="" skin="" antioxidant="" enzymes="" and="" inhibited="" inflammatory="" responses,="" which="" might="" be="" important="" in="" delaying="" skin="" aging="" in="">

3.4.Teri qarishini yumshatishda xun CPlarining ta'sir qilish mexanizmi

3.4.1.RNK-Seq ma'lumotlarini tahlil qilish va tasdiqlash

Analysis techniques, such as PCA, HCA, gene GO enrichment, and KEGG pathway enrichment were used to analyze the transcriptome data. Based on the PCA analysis (Figure 4A)and hierarchical clustering analysis (heat map)of 4303 differential genes with average channel strength greater than 100, the relative expression levels of total DEGs between the two treatment groups are shown to provide an overview of the changes in gene expression(Figure 4B).The M group and the HCP group were significantly separated, and the expression patterns of most DEGs in the M and HCP groups were opposite, indicating that there were significant differences between the mouse skin after HCP treatment and the M group(Figure 4A,B).Pairwise comparisons showed that after feeding HCPs, 4303 genes were significantly expressed in the mice's skin, including 1790 upregulated genes and 2513 downregulated genes(Foldchange>2,p<0.05)(figure 4c).among="" the="" six="" genes="" associated="" with="" skin="" aging="" quantified="" by="" qrt-pcr,="" five="" genes(including="" fos,="" jun,="" cxcl1,="" and="" egr1)were="" downregulated,="" and="" one="" gene="" was="" upregulated(figure="" 4d),="" which="" was="" consistent="" with="" the="" overall="" trend="" of="" transcriptomic="" data.="" the="" rna="" expression="" levels="" of="" fos,="" jun,="" and="" cxcll="" were="" significantly="" upregulated="" in="" damaged="" skin="" compared="" to="" that="" in="" intact="" skin="" [34],="" and="" inhibition="" of="" egr1="" expression="" alleviated="" skin="" inflammation="" [35].="" these="" results="" reflected="" the="" reliability="" of="" transcriptome="" sequencing="" data,="" and="" oral="" cps="" effectively="" alleviated="" skin="">

boyitish tahlili va KEGG ma'lumotlar bazasini boyitish tahlili DEGlarning biologik funktsiyalarini keyingi tekshirish uchun yordam berdi. GO tahlili shuni ko'rsatdiki, DEGlar DNK replikatsiyasi, gemopoezni tartibga solish, gidrolaza faolligini tartibga solish va sitokin ishlab chiqarish kabi biologik jarayonlarda sezilarli darajada boyitilgan; litik vakuola va lizosomani o'z ichiga olgan hujayra tarkibiy qismlarida kollagen o'z ichiga olgan va boshqa tegishli genlar sezilarli darajada boyitilgan; molekulyar funktsiyasi bo'yicha retseptor-ligand faolligi, sitokin faolligi va boshqa tegishli genlar sezilarli darajada boyitilgan (5-rasm). DEGlar tomonidan sezilarli darajada o'zgartirilgan dastlabki 20 signal yo'lining KEGG boyitish tahlili 5-rasmda ko'rsatilgan. Sitokin-retseptorlar o'zaro ta'siri, lizosoma, neyroaktiv ligand-retseptorlar o'zaro ta'siri, hujayra sikli, tizimli qizil yuguruk va TGF yo'li (p)<0.05)were closely="" related="" to="" aging,="" especially="" cytokine-receptor="" interactions,="" lysosomes,="" and="" tgf-βsignaling.="" an="" important="" feature="" of="" cellular="" senescence="" is="" the="" accumulation="" of="" damaged="" organelles="" and="" protein="" aggregates.="" lysosomes="" play="" an="" important="" role="" in="" degrading="" damaged="" organelles="" and="" protein="" aggregates="" in="" senescent="" cells="" [36].="" cytokine-receptor="" interaction="" is="" the="" main="" pathway="" of="" enrichment="" in="" the="" skin="" after="" being="" affected="" by="" various="" factors="" such="" as="" inflammation="" [37],="" sulfur="" mustard="" exposure="" [38],="" and="" terahertz="" pulse="" [39].="" cytokines,="" as="" small="" molecular="" proteins="" synthesized="" and="" secreted="" by="" various="" tissue="" cells,="" maintain="" skin="" homeostasis="" by="" controlling="" the="" balance="" between="" keratinocyte="" proliferation,="" differentiation,="" and="" apoptosis="" through="" complex="" interactions="" with="" growth="" factors="" [40].="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" is="" also="" important="" for="" regulating="" skin="" aging="" [14].="" gene="" functional="" enrichment="" analysis="" showed="" that="" tgf-β="" was="" highly="" expressed="" during="" cytokine-receptor="" interaction="" and="" in="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway.="" tgf-β="" is="" a="" major="" pro-fibrotic="" cytokine="" that="" regulates="" cell="" differentiation="" and="" proliferation="" while="" inducing="" extracellular="" matrix="" protein="" synthesis="" [41.="" therefore,="" we="" verified="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" and="" some="">

3.4.2. Terining qarishini yumshatishda CPlarning ta'sir qilish mexanizmini tekshirish

TGF-signalizatsiya yo'li va sitokin-retseptorlar o'zaro ta'sirining og'iz orqali CPs tomonidan terining qarishini yumshatishdagi rolini tekshirish uchun TGF-signalizatsiya yo'lida TGF- va Smad2/3 transkripsiya faktorini, shuningdek kalitni tekshirish uchun WB tahlili o'tkazildi. sitokinlarni tartibga soluvchi transkripsiya omili AP-1(c-Fos va c-Jun). MMP-1, MMP-3, I turdagi pro-kollagen va I-1 tarkibi Elishay tomonidan aniqlangan. WB tahlili natijalari shuni ko'rsatdiki, M guruhida TGF-, Smad2 va Smad3 ifodasi N (p) guruhidagiga qaraganda ancha past bo'lgan.<0.05). the="" expression="" levels="" of="" tgf-β="" and="" smad3="" were="" significantly="" higher="" in="" mice="" after="" the="" oral="" administration="" of="" cps="" compared="" to="" their="" levels="" in="" group="" m="" mice;="" additionally,="" smad2="" also="" increased="" significantly=""><0.05), except="" for="" in="" the="" lcps="" in="" a="" dose-dependent="" manner="" (figure="" 6).="" on="" the="" contrary,="" the="" expression="" of="" c-fos="" and="" c-jun="" in="" the="" m="" group="" was="" significantly="" higher="" than="" that="" in="" the="" n="" group.="" the="" expression="" of="" c-fos="" and="" c-jun="" in="" the="" cp="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" m="" group,="" except="" for="" the="" expression="" of="" c-jun="" in="" the="" lcp=""><0.05), and="" the="" change="" was="" dose-dependent.="" these="" results="" indicated="" that="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" was="" activated="" and="" ap-1="" was="" inhibited="" after="" feeding="">

AP{0}} oqsili Jun va Fos oilasi oqsillarining dimerik majmuasi boʻlib, terining yalligʻlanishi va sitokin ekspressiyasining muhim regulyatori hisoblanadi. Umuman olganda, c-Jun va c-Fosdan tashkil topgan kompleks teridagi eng yuqori transkripsiya faolligini ko'rsatadi [41, A42]. Qarish teri hujayralarida hosil bo'lgan ROS dastlab AP{5}} oqsilini faollashtiradi, so'ngra transkripsiya va translatsiya orqali quyi oqim sitokinlarini (masalan, IL-1), MMP'larni va TGF signalizatsiya yo'lini boshqaradi, shu bilan terining qarishini osonlashtiradi [43] ,44]. TGF- / Smad signalizatsiya reaktsiyasi klassik kollagen sintezi yo'lidir va Smad transkripsiya omili bu signal uzatish yo'lining yadrosidir. TGF- retseptorlari bilan bog'lanib, quyi oqimdagi Smad2 va Smad3 ning fosforlanishi va faollashishini qo'zg'atadi va shu bilan COLI [14] sintezini oshiradi.

Bundan tashqari, Elishay natijalari shuni ko'rsatdiki, M guruhi terisida MMP-1, MMP-3 va IL-l tarkibi N guruhidagiga qaraganda ancha yuqori va Tip tarkibi I pro-kollagen sezilarli darajada past edi (p<0.05). however,="" the="" contents="" of="" mmp-1,="" mmp-3,="" and="" il-1α(figure="" 3d)in="" the="" skin="" after="" oral="" administration="" of="" cps="" were="" significantly="" lower="" than="" those="" in="" the="" m="" group="" (p=""><0.05); type="" i="" pro-collagen="" increased="" significantly,="" and="" all="" the="" changes="" were="" dose-dependent="" with="" cps="" (figure="" 7).="" mmps="" are="" involved="" in="" the="" decomposition="" of="" skin="" collagen,="" il-1α="" shows="" the="" level="" of="" inflammation="" of="" the="" skin,="" and="" type="" i="" pro-collagen="" reflects="" the="" synthesis="" of="" skin="" collagen.="" accumulating="" evidence="" suggests="" that="" the="" role="" of="" the="" jun/ap-1="" protein="" pathway="" has="" also="" been="" proposed="" to="" regulate="" skin="" inflammation="" [40].="" the="" elisa="" results="" showed="" that="" the="" combined="" treatment="" of="" uv="" and="" d-galactose="" caused="" skin="" collagen="" degradation,="" decreased="" collagen="" synthesis,="" and="" caused="" skin="" inflammation,="" leading="" to="" skin="" aging.="" however,="" these="" changes="" were="" reversed="" after="" the="" oral="" administration="" of="">

Yuqoridagi yo'llarga qo'shimcha ravishda, ushbu tadqiqotda CP bilan davolashdan so'ng yuqori tartibga solinadigan genlar lizosoma yo'liga sezilarli darajada boyitildi, bu CP bilan davolash teridagi lizosomani faollashtirganligini ko'rsatadi (5-rasm). Oldingi tadqiqotlar shuni ko'rsatadiki, faollashtirilgan lizosomalar agregatlarni tozalaydi va qarish davrida qarigan nerv ildiz hujayralarining faollashuvini oshiradi [45]. Bunga qo'shimcha ravishda, lizosomalarning ortib borayotgan funktsiyasi hujayra ichidagi ROS kontsentratsiyasini hujayra uyqusining oldini olish uchun kamaytirishi mumkin. Xuddi shunday, lizosoma funktsiyasidagi har qanday pasayish hujayra ichidagi ROS kontsentratsiyasini kuchaytirishi mumkin, bu esa oxir-oqibat hujayraning uyqu holatini rag'batlantiradi [46]. Garchi biz buni ushbu maqolada tizimli ravishda tekshirmagan bo'lsak-da, bu natijalar va oldingi hisobotlar lizosomal funktsiyani faollashtirish CP uchun terining qarishini engillashtirishning asosiy usuli bo'lishi mumkinligini anglatadi va biz buni tekshirishni davom ettiramiz.

Shu sababli, ushbu tadqiqot dietali CPlar dozaga bog'liq holda UV va D-galaktoza ta'siridan kelib chiqqan terining qarishini engillashtirishi mumkinligini ko'rsatdi. CPlar terining oksidlanish darajasini pasaytirish, asosiy transkripsiya omillari AP-1(c-Jun va c-Fos) ifodasini inhibe qilish, kollagen sintezini rag'batlantirish uchun TGF-/Smad signalizatsiya yo'lini faollashtirish, kollagen ifodasini inhibe qilish orqali terining qarishini engillashtiradi. MMP-1 va MMP-3(kollagen degradatsiyasini inhibe qiladi) va terining qarishini engillashtirish uchun terining yallig'lanishini inhibe qiladi (8-rasm). Bundan tashqari, bizning topilmalarimiz hozirgi

4. Xulosalar

Xulosa qilib aytganda, ushbu tadqiqot tovuq suyagi kollagen peptidlarining parhez qo'shimchalari ultrabinafsha nurlanishi va D-galaktoza ta'sirida terining qarishini sezilarli darajada engillashtirishi mumkinligini tasdiqladi, bular pro-kollagen sintezini rag'batlantirish, kollagen degradatsiyasini inhibe qilish, terining antioksidant darajasini yaxshilash va inhibe qilishni o'z ichiga oladi. yallig'lanish; engillashtirish CPs bilan dozaga bog'liq edi. Batafsil tekshiruv shuni ko'rsatdiki, CPlar birinchi navbatda terining oksidlanish darajasini pasaytiradi, asosiy transkripsiya omili AP-1(c-Jun va c-Fos) ifodasini inhibe qiladi va keyin TGF-/Smad signalizatsiya yo'lini faollashtiradi. kollagen sintezi, kollagen degradatsiyasini inhibe qilish uchun MMP-1 va MMP-3 ifodasini inhibe qiladi va sichqonlarda terining qarishini engillashtirish uchun terining yallig'lanishini inhibe qiladi. Bundan tashqari, lizosomalarning faollashuvi, shuningdek, keyingi tadqiqot va tekshirishga loyiq bo'lgan terining qarishini yumshatish uchun CPs uchun asosiy yo'l bo'lishi mumkin. Ushbu natijalar terining qarishini yumshatish uchun kollagen peptidlarini amalga oshirish uchun nazariy asos bo'lib xizmat qiladi va hayvonlarning qo'shimcha mahsulotlarini funktsional oziq-ovqatlarda har tomonlama qo'llash ko'lamini kengaytiradi.

Muallif hissalari: CC qo'lyozmani ishlab chiqdi, o'lchadi va yozdi; ZXand HT qo'lyozmani ishlab chiqdi va qayta ko'rib chiqdi; YL ta'minlangan uslubiy rahbarlik; CGand YU qo'lyozmani ko'rib chiqdi. Barcha mualliflar qo'lyozmaning nashr etilgan versiyasini o'qib chiqdilar va rozi bo'ldilar.

Ushbu maqola Nutrients 2022, 14, 1622 dan olingan. https://doi.org/10.3390/nu14081622 https://www.mdpi.com/journal/nutrients