Cistanche ekstraktlari PD (Parkinson kasalligi) ni davolash uchun foydalimi?

Aloqa:joanna.jia@wecistanche.com

Kirish: DJ-1 mutatsiyasi oilaviy mutatsion sababdirParkinson kasalligi(PD). Leucine166Proline (L166P) va C106S ikkita muhim DJ-1 mutatsiyalaridir. Ushbu tadqiqotda biz vodorod periks (H, O,) bilan induktsiyalangan L166P va C106S DJ-1-transfektsion neyroblastoma (SH-SY5Y) PD() hujayrali modellarini yaratdik.Parkinson kasalligi) va ta'sirini o'rganib chiqdiCistanche ekstraktlariva asosiy bioaktiv birikmalar, shu jumladan akteozid, echinacoside, kofein kislotasi va ushbu ikkita modeldagi Cistanche umumiy glikozidlari. Usullari: Ichak tayoqchasida FLAG yorlig'i bo'lgan L166P va C106S DJ-1 plazmidlarini ifodalagandan so'ng, ifodalangan plazmidlar to'plangan, cheklash fermenti bilan ishlov berilgan va DNK elektroforezi yordamida aniqlangan. Tozalashdan keyin L166P DJ-1 va C106S DJ-1 plazmidlari lipozomalar yordamida SH-SY5Y hujayralariga alohida transfektsiya qilindi. Transfektsion SH-SY5Y hujayralari western blot va immunotsitokimyo orqali aniqlandi. Hujayra hayotiyligi MTT tahlili yordamida aniqlandi.

Natijalar: G'arbiy blot va immunotsitokimyo L166P va C106S DJ-1 transfektsiyalangan SH-SY5Y hujayralarida yuqori darajada ifodalanganligini ko'rsatdi. MTT tahlillari shuni ko'rsatdiki, L166P yoki C106S DJ-1 bilan transfeksiya H, O ga ta'sir qilgan SH-SY5Y hujayralarining hayotiyligini, transfektsiyalanmagan SH-SY5Y hujayralariga nisbatan kamaytirdi. Qo'shimcha,Cistanche ekstraktlariva asosiy bioaktiv birikmalar, jumladan, akteozid, echinacoside, kofein kislotasi va Cistanche umumiy glikozidlari H, O, inL166P va C106S DJ-1-transfektsion SH-SY5Y hujayralari tomonidan hujayra hayotiyligining pasayishini sezilarli darajada inhibe qildi. Xulosa: Bu topilmalar biz PD ning sezgir va barqaror H, O, induktsiyalangan L166P DJ-1-va C106S DJ-1-transfektsion SH-SY5Y hujayra modellarini muvaffaqiyatli yaratganimizni ko'rsatadi.(Parkinson kasalligi)vaCistanche ekstraktlarishuning uchun PDni davolash uchun foydali bo'lishi mumkin(Parkinson kasalligi).

Cistancheekstrakti juda ko'p foydali xususiyatlarga ega

1-QISM UCHUN SHU YERGA BOSING

MUHOKAZA

DJ-1 mutatsiyalari otosomal retsessiv erta paydo bo'lgan PD bilan yaqin bog'liqdir.(Parkinson kasalligi)(Bonifati va boshq., 2003; Park va boshq., 2015). Bir italyan oilasida sabab DJ-1 (L166P) ning noto'g'ri mutatsiyasidir (Bonifati va boshq., 2003). Leu-166 C-terminal spiralining o'rtasida joylashgan (Bonifati va boshq., 2003). Kuchli spiral sindiruvchi Pro ning mavjudligi, ehtimol DJ-1 mutantidagi terminal spiralni beqarorlashtiradi (Bonifati va boshq., 2003), bu oqsilning C-terminal qismining ochilishiga olib keladi, bu esa uning gomo-motorini buzadi. oligomerizatsiya (Bonifati va boshq., 2003). Transfektsion hujayralarda L166P DJ-1 haddan tashqari degradatsiya tufayli beqaror (Bonifati va boshq., 2003; Gorner va boshq., 2004; Mur, Zhang, Dawson va Dawson, 2003). Bonifati va boshqalar. (2003) L166P mutatsiyasi DJ-1 ning homodimerizatsiyasi va normal funktsiyasini buzadi va shu sababli PDning erta boshlanishiga olib keladi.(Parkinson kasalligi).

Ushbu tadqiqotda L166P DJ-1 transfektsion SH-SY5Y hujayralarida 70 kDa molekulyar massaga ega polimer/kompleksda mavjudligini aniqladik. DJ-1 tuzilishi proteaza PH1704 (Bonifati va boshq., 2003) bilan bir xil a/sendvich tuzilishini qabul qilishi taxmin qilingan. DJ-1 va PH1704 ning oʻxshash tuzilmalari tufayli biz PH1704 kabi DJ-1 ham yuqori agregatlarni (dimmerlarning trimerlari) hosil qiladi deb taxmin qildik. Gorner va boshqalar. (2004) transfektsion hujayralar va PD limfotsitlari ichida ekanligini ko'rsatdi(Parkinson kasalligi)bemorlarda monomerik L166P DJ-1 transfektsion hujayralar va PD limfotsitlarining yuqori tuzilmalarida mavjud.(Parkinson kasalligi)bemorlar. Bu L166P DJ-1 oqsilining noto'g'ri qatlamlanishi yoki monomerik L166P DJ-1 va boshqa oqsillar o'rtasida komplekslar hosil bo'lishining bevosita natijasi bo'lishi mumkin. Bundan tashqari, oqsilning tuzilishiga qo'shimcha ravishda, L166P DJ{5}} mutatsiyasi DJ-1ning antioksidant funktsiyasini ham o'zgartirdi (Macedo va boshq., 2003; Taira va boshq., 2004). Bu diqqatga sazovordir, chunki oksidlovchi stress PDda muhim omil hisoblanadi(Parkinson kasalligi), va L166P DJ-1 bilan transfektsiyalangan SH-SY5Y hujayralari transfektsiyalanmagan hujayralarga qaraganda H, O ga nisbatan sezgirroq edi. Laboratoriyamizda yovvoyi tipdagi DJ-1 transfektsion SH-SY5Y hujayralari muvaffaqiyatli o'rnatilgani haqidagi oldingi tadqiqotlar bilan birgalikda (Chjan, Vang va Pu, 2007), biz H, O, L166P DJni qo'zg'atganini taklif qilamiz{10 }}transfektsion SH-SY5Y hujayralar PD ning foydali yangi uyali modelidir(Parkinson kasalligi).

Cistancheekstrakti oldini oladiParkinson kasalligi

DJ -1 oksidlovchi stressni kamaytirishi haqida xabar berilgan (Taira va boshqalar, 2004; Zhou va Freed, 2005). Mexanizmlardan biri oqsilning oksidlanishidir (Taira va boshq., 2004). DJ-1 ning uchta Cys qoldig'i orasida Cys-106 oksidlovchi stressga eng sezgir. Bundan tashqari,

DJ-1antioksidlovchi funksiyasi Cys-106 oksidlanishi orqali tartibga solinadi (Frid va Chjou, 2006) va Cys mutatsiyasi-106DJ-1ning antioksidant funktsiyasini yo'qotishiga olib keladi-1 (Blackinton va boshq., 2009; Kinumi, Kimata, Taira, Ariga, & Niki, 2004). Cys{10}} sulfin kislotasiga oksidlanadi (Chjou va Freed, 2005). Bu topilmalar shuni koʻrsatadiki, Cys-106 toʻgʻri DJ-1 funksiyasiga asosiy hissa qoʻshadi. 1-jadvalda ko'rsatilganidek, C106S DJ-1 bilan transfektsiyalangan SH-SY5Y hujayralari transfektsiyalanmagan hujayralarga qaraganda H, O ga nisbatan sezgirroq edi. Oldingi tadqiqotlarga asoslanib (Chjan va boshq., 2007), bu H, O, induktsiyalangan C106S DJ-1-transfektsion SH-SY5Y hujayralari ham PD ning foydali uyali modeli bo'lishi mumkinligini ko'rsatadi.(Parkinson kasalligi).

L166P DJ-1 yoki C106S DJ-1 bilan transfektsiyalangan SH-SY5Y hujayralari yordamida bizCistanche ekstraktlarining ta'siriva asosiy bioaktiv birikmalar, shu jumladan akteozid, echinacoside, kofein kislotasi va H2O dagi Cistanche umumiy glikozidlari hujayra hayotiyligini pasaytirdi. Mavjud natijalar shuni ko'rsatadiki, akteozid, echinacoside, kofein kislotasi va Cistanche umumiy glikozidlari konsentratsiyaga bog'liq holda hujayra hayotiyligini oshiradi, bu L166P DJ-1va C106S DJ-1 darajalari o'rtasida barqaror va chiziqli bog'liqlikni ko'rsatadi. va SH-SY5Y hujayra hayotiyligi.

Xulosa qilib aytganda, biz PD ning sezgir va barqaror H, O2 induktsiyali L166P DJ-1-va C106S DJ-1-transfektsion SH-SY5Y hujayra modellarini muvaffaqiyatli yaratdik.(Parkinson kasalligi)va buni tasdiqladiCistanche ekstraktlariUshbu ikkita modelda H, O tomonidan qo'zg'atilgan neyrotoksiklikni yaxshiladi. Biz ushbu ikkita uyali model PD uchun samarali qo'llanilishini kutamiz(Parkinson kasalligi)tadqiqot vaCistanche ekstraktlarishuning uchun PDni davolash uchun foydali bo'lishi mumkin(Parkinson kasalligi)kelajakda.

Cistanche ekstraktining afzalliklari: anti-Parkinson kasalligi

ADABIYOTLAR

1. Abou-Sleiman, PM, Healy, DG, Quinn, N., Lees, AJ, & Wood, NW (2003). Parkinson kasalligida patogen DJ-1 mutatsiyalarining roli. Nevrologiya yilnomalari, 54, 283-286. https://doi.org/10.1002/ (ISSN)1531-8249

2. Andres-Mateos, E., Perier, C., Chjan, L., Blanchard-Fillion, B., Greko, TM, Tomas, B., ... Dawson, VL (2007). DJ-1 genini yo'q qilish DJ-1 atipik peroksiredoksinga o'xshash peroksidaza ekanligini ko'rsatadi. Amerika Qo'shma Shtatlari Milliy Fanlar Akademiyasi materiallari, 104, 14807–14812. https://doi.org/10.1073/pnas.0703219104

3. Biosa, A., Sandrelli, F., Beltramini, M., Greggio, E., Bubacco, L. va Bisaglia, M. (2017). DJ-1 ning fiziologik funktsiyasi bo'yicha so'nggi topilmalar: BeyondParkinson kasalligi. Kasalliklarning neyrobiologiyasi, 108, 65-72. https://doi.org/10.1016/j.nbd.2017.08.005

4. Blackinton, J., Lakshminarasimhan, M., Tomas, KJ, Ahmad, R., Greggio, E., Raza, AS, Wilson, MA (2009). Stabillashgan sistein sulfin kislotasining hosil bo'lishi parkinsonizm oqsili DJ-1 ning mitoxondrial funktsiyasi uchun juda muhimdir. Biologik kimyo jurnali, 84, 6476–6485. https://doi.org/10.1074/jbc.M806599200

5. Bonifati, V., Rizzu, P., Squitieri, F., Krieger, E., Vanacore, N., van Swieten; JC, … Heutink, P. (2003). DJ-1 (DJ-1), avtosomal retsessiv, erta boshlangan parkinsonizm uchun yangi gendir. Nevrologik fanlar, 24, 159-160. https://doi.org/10.1007/s10072-003-0108-0

6. Bonifati, V., Rizzu, P., van Baren, MJ, Schaap, O., Breedveld, GJ, Krieger, E., … van Swieten, JC va boshqalar. (2003). Avtosomal retsessiv erta boshlangan parkinsonizm bilan bog'liq DJ-1 genidagi mutatsiyalar. Fan, 299, 256–259.

7. Burke, RE, & O'Malley, K. (2013). Parkinson kasalligida akson degeneratsiyasi. Eksperimental Nevrologiya, 246, 72-83. https://doi.org/10.1016/j. expneurol.2012.01.011

8. Dexter, DT, Carter, C., Wells, FR, Javoy-Agid, FJ, Agid, Y., Lees, AJ, Marsden, CD (1989). Qora moddada bazal lipid peroksidatsiyasi kuchayadiParkinson kasalligi. Neyrokimyo jurnali, 52, 381-389. https://doi.org/10.1111/j.1471

9. Dexter, DT, Holley, AE, Flitter, WD, Slater, TF, Wells, FR, Daniel, SE, … Marsden, CD (1994). Parkinson nigradagi lipid gidroperoksid darajasining oshishi: HPLC va ESR tadqiqoti. Harakatning buzilishi, 9, 92-97.

10. Freed, CR, & Zhou, W. (2006). DJ-1 dopamin neyronlarini glutation yoki issiqlik zarbasi oqsilini tanlab faollashtirish orqali himoya qiladi. Eksperimental Nevrologiya, 198, 558-597.

11. Glizer, D. va MacDonald, PA (2016). Kognitiv treningParkinson kasalligikasallik: 2000 yildan 2014 yilgacha bo'lgan tadqiqotlarni ko'rib chiqish.Parkinson kasalligiKasallik, 2016, 9291713. https://doi.org/10.1155/2016/9291713

12. Gorner, K., Xoltorf, E., Odoy, S., Nuscher, B., Yamamoto, A., Regula, JT, Kahle, PJ (2004). ning differentsial ta'siriParkinson kasalligikasallik-DJ-1 ning barqarorligi va katlamasi bilan bog'liq mutatsiyalar. Biologik kimyo jurnali, 279, 6943–6951. https://doi.org/10.1074/jbc.M3092

13. Hague, S., Rogaeva, E., Hernandez, D., Gulick, C., Singleton, A., Hanson, M., … St George-Hyslop, PH, va boshqalar. (2003). Erta boshlanganParkinson kasalligikasallikbirikma heterozigot DJ-1 mutatsiyasidan kelib chiqqan. Nevrologiya yilnomalari, 54, 271-274. https://doi.org/10.1002/(ISSN)1531-8249

14. Kim, RH, Piter, M., Jang, YJ, Shi, V., Pintilie, M., Fletcher, GC, ... Bray, MR, va boshqalar. (2005). DJ-1, o'simta bostiruvchi PTENning yangi regulyatori. Saraton xujayrasi, 7, 263-273. https://doi.org/10.1016/j. cr.2005.02.010

15. Kinumi, T., Kimata, J., Taira, T., Ariga, H. va Niki, E. (2004). DJ-1 ning sistein-106 in vivo jonli ravishda inson kindik venasi endotelial hujayralarida vodorod peroksid vositasida oksidlanishga eng sezgir sistein qoldig'idir. Biokimyoviy va biofizikaviy tadqiqotlar aloqalari, 317, 722–728. https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2004.03.110

16. Kitada, T., Asakawa, S., Xattori, N., Matsumine, X., Yamamura, Y., Minoshima, S., ... Shimizu, N. (1998). Parkin genidagi mutatsiyalar avtosomal retsessiv balog'atga etmagan parkinsonizmni keltirib chiqaradi. Tabiat, 392, 605– 608. https://doi.org/10.1038/33416

17. Macedo, MG, Anar, B., Bronner, IF, Cannella, M., Squitieri, F., Bonifati, V., … Rizzu, P. (2003). DJ-1 L166P mutant oqsili erta boshlanishi bilan bog'liqParkinson kasalligikasallikbeqaror va yuqori tartibli oqsil komplekslarini hosil qiladi. Inson molekulyar genetikasi, 12, 2807-2816.

18. Mur, DJ, Chjan, L., Dawson, TM va Dawson, VL (2003). DJ-1 dagi noto'g'ri mutatsion (L166P) oila bilan bog'liqParkinson kasalligikasallik, oqsil barqarorligini pasaytiradi va gomo-oligomerizatsiyani buzadi. Neyrokimyo jurnali, 87, 1558–1567. https://doi.org/10.1111/ (ISSN)1471-4159

19. Mullard, A. (2017). Qandli diabetga qarshi dori va'da qilmoqdaParkinson kasalligikasallik. Tabiat sharhlari. Giyohvand moddalarni aniqlash, 16, 593.

20. Nagakubo, D., Taika, T., Kitaura, H., Ikeda, M., Tamai, K., Iguchi-Ariga, SMM va Agria, H. (1997). , Ras bilan hamkorlikda sichqonchaning NIH3T3 hujayralarini o'zgartiruvchi yangi onkogen. Biokimyoviy va biofizikaviy tadqiqotlar aloqalari, 231, 509–513. https://doi. org/10.1006/bbrc.1997.6132

21. Nikam, S., Nikam, P., Ahaley, SK, & Sontakke, AV (2009). Oksidlanish stressiParkinson kasalligikasallik. Hindiston klinik biokimyo jurnali, 24, 98–101. https://doi.org/10.1007/s12291-009-0017-y

22. Niki, T., Takahashi-Niki, T., Taira, T., Iguchi-Ariga, SMM, & Agria, H. (2003). DJBP: DJ-1-bog'laydigan yangi protein, histon deasetilaz kompleksini jalb qilish orqali androgen retseptorlarini salbiy tartibga soladi va DJ-1 ushbu kompleksni bekor qilish orqali bu inhibisyonni antagonizatsiya qiladi. Molekulyar saraton tadqiqotlari, 1, 247-261.

ning afzalliklariCistancheekstraktlar: davolashParkinson kasalligikasallik